CS211113B1 - Spdsob přípravy očkovacej látky proti enzootickému potratu oviec - Google Patents

Description

1 211113

Vynález rieši sp5sob přípravy očkovacej látky proti enzootickému potratu oviec použi-teínej vo veterínárskej praxi na ochranu oviec před infekciou pfivodcom nákazy Chlamydiapsittaci. PSvodca enzootičkého potratu oviec Chlamydia psittaci zapříčiňuje infekčně ochorenieprejavujúce sa predovšetkým hromadnými potratmi spravidla v poslednom mesiaci brezivosti.Nákaza je zoonóza vyskytujúca sa v krajinách a vyspělým chovom oviec a jej prevenciu umož-ňuje ochranné očk·'."rentě. Podlá údajov v odbornej literatúre sa při príprave očkovacej látkynevěnovala dostatočná pozornost pSvodu a spracovaniu chlamýdiového kmena používaného napřípravu vakcíny. Dnej je známe, že účinnost ochranného očkovania je zvyšovaná použitímhomologných kmenov na přípravu vakcín, čo má osobitný význam pri núdzovom očkovaní.

Predmetom vynálezu je spdsob ktorým třeba postupovat aby sa zo žltkových vakov kuřácíchzárodkov infikovaných pčvodcom nákazy, homológnym kmenom Chlamydia psittaci, získala účin-ná a neškodná očkovacia látka vhodná na špecifickú prevenciu oviec před infekciou Chlamydiapsittaci a na núdzové očkovanie v čase hromadného zmetania bahníc.

Podstata vynálezu spočívá v tom, že sa suspenzia Sítkových vakov kuřácích zárodkovinfikovaných kmeňom Chlamydia psittaci, spdsobujúcim enzootický potrat oviec, v roztokuchloridu sodného obsahujúceho 0,2 až 0,4 % formaldehydu odstreďuje, usadenina sa resuspendu-je v roztoku chloridu sodného pufrovanom na pH 7,2, přidává sa trypsin a suspenzia sa in-kubuje pri teplote 35 až 38 °C po dobu 15 až 60 minút, po následnom odstředění sa usadeni-na resuspenduje v alkalickom roztoku, v ktorom sa inkubuje pri teplote 25 až 37 °C po do-bu 1 5 až 30 minút, po zneutralizovaní sa suspenzia extrahuje éterom, pričom vodná fáza saodstreňuje, usadenina sa resuspenduje a vystaví sa pSsobeniu ultrazvuku.

Popísaný spOsob zabezpečuje získanie neinfekčnej imunogénnej suspenzie chlamidiís dobrým preventivným ochranným účinkom po dvojrázovom podkožnom podaní vo vhodnej koncen-trácii, a naviac umožňuje podstatné znížiť počty potratov pri jej použití ako núdzovéhoočkovania v priebehu hromadných zmetaní.

Fyzikálně a chemické pčsobenie použité v postupe odstraňuje možnost kontaminácie ko-nečného preparátu živými mikroorganizmami, ktorými mfižu byť spontánně infikované kuraciezárodky. Účinnost očkovacej látky bola experimentálně overená na zvieratách v terénnych poku-sech. V chovoch postihnutých enzootickým potratom oviec sa po vakcinácii znížili počtypotratov u bahníc napr. při preventívnom očkovaní zamořeného chovu (170 oviec) nedošlov ďalšej graviditě k hromadnému zmetaniu. Pri núdzovom očkovaní (395 kusov), z ktorých dočasu vakcinácie zmetalo 61 zvierat, nechádzajúcich sa v 4. a 5.mesiaci brezivosti po pře-vedení vakcinácie došlo iba k ojedinělým zmetaniam nedosahujúcim ani 2 % celkového počtubrezivých zvierat.

Využitie vynálezu je možné v odvetviach zaoberajúcich sa výrobou očkovacích látok predomáce a užitkové zvieratá. Přiklad

Zo žítkových vakov kuřácích zárodkov infikovaných pSvodcom enzootickeho potratu oviecChlamydia psittaci sa připraví 20% suspenzia v molárnom roztoku chloridu sodného obsahujú-ca 0,2 % formaldehydu. Po 72 hodinách státia pri 4 °C sa suspenzia centrifuguje pri 30 000 xg30 minút. Úsadky sa resuspendujú v 1/10 p8vodného objemu 0,05 molárnym fosfátom pufrova-nom 0,15 molárnom roztoku chloridu sodného pH 7,2 a přidá sa trypsin do výslednej koncen-trácie 0,5 % a inkubuje sa 30 minút při 37 °C.

Claims (2)

1. 2111 )3
2. 2 Po skončení inkubácie sa suspenzia centrifuguje při 30 000 xg 20 minút, úsadok sa re-suspenduje v 1/5 pčvodného objemu 0,05 molárneho roztoku hydroxidu sodného, inkubuje sa30 minút při 37 °C. Alkalické pfisobenie sa ukončí prídavkom kyseliny chlorovodíkovéj, abypH suspenzie bolo 7,2 a suspenzia sa v deliacom lieviku pretrepe s rovnakým objemom die-tyléteru. Vodná fáza sa odoberie, odstráni sa prebytočný éter a suspenzia sa centrifuguje20 minút pri 30 000 xg. Úsadky sa resuspendujú v 0,15 molárnom roztoku chloridu sodnéhona koncentráciu 1 mg/ml, vystavia 5 minút účinku ultrazvuku frekvencie 20 kHz na přístrojivýkonu 250 W a konzervujú prídavkom 0,05 % formaldehydu. Získaná suspenzia sa používá naočkovanie oviec. PREDMET VYNÁLEZU SpOsob přípravy očkovacej látky proti enzootickému potratu oviec vyznačujúci sa tým,že sa suspenzia žízkových vakov kuřácích zárodkov infikovaných kraeňom Chlamydia psittacisp8sobujúcim enzootický potrat oviec, v roztoku chloridu sodného obsahujúceho 0,2 až 0,4 %formaldehydu odstreSuje, usadenina sa resuspenduje v roztoku chloridu sodného pufrovanomna pH 7,2, přidává sa trypsin a suspenzia sa inkubuje pri teplote 35 až 38 °C po dobu 15až 60 minút, po následnom odstředění sa usadenina resuspenduje v alkalickom roztoku, v kto-rom sa inkubuje pri teplote 25 až 37 °C po dobu 15 až 30 minút, po zneutralizovaní sasuspenzia extrahuje éterom, pričom vodná fáza sa odstřeluje, usadenina sa resuspenduje avystaví sa pdsobeniu ultrazvuku. Severografia. n, p,. závod 7, Most