CS209783B1 - Spôsob šlachtenia kmeňov Coprinus sp. - Google Patents

Spôsob šlachtenia kmeňov Coprinus sp. Download PDF

Info

Publication number
CS209783B1
CS209783B1 CS707079A CS707079A CS209783B1 CS 209783 B1 CS209783 B1 CS 209783B1 CS 707079 A CS707079 A CS 707079A CS 707079 A CS707079 A CS 707079A CS 209783 B1 CS209783 B1 CS 209783B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
substrate
coprinus
spore suspension
solution
strain
Prior art date
Application number
CS707079A
Other languages
Czech (cs)
English (en)
Inventor
Jan Fuska
Rudolf Jilek
Eva Pavlikova
Vladislava Ruzickova
Vlastimil Zezula
Magda Vodickova
Original Assignee
Jan Fuska
Rudolf Jilek
Eva Pavlikova
Vladislava Ruzickova
Vlastimil Zezula
Magda Vodickova
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jan Fuska, Rudolf Jilek, Eva Pavlikova, Vladislava Ruzickova, Vlastimil Zezula, Magda Vodickova filed Critical Jan Fuska
Priority to CS707079A priority Critical patent/CS209783B1/sk
Publication of CS209783B1 publication Critical patent/CS209783B1/sk

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

Vynález sa týká sposobu šlachtenia kmeňov bazidiomycety Coprinus sp., schopných degradovač celulózu přítomnu v slamovom substráte, pri súčasnom zvýšení obsahu dusíkatých látok a volnej glukózy v kultivovanom substráte.
Póvodný kmeň Coprinus sp. izolovaný z jáchymovských bani rástol na slamovom substráte len velmi pomaly a po 12 až 14 dňoch povrchnej aktivácie sa zvýšil obsah celkových dusíkatých látok, vyjádřený ako celkový dusík x 6,25, z 2 až 3 Z, na 12 až 14 pričom konečný substrát obsahoval iba stopy monosacharidov. Krmné pokusy s takto získaným substrátom stimulovali rast krmených zvierat, ak bolí použité ako doplnok dusíkatých látok do tradičných krmív. Pasivným výberom spontánně sa tvoriacich variant Coprinus sp. nie je možné dosiahnuú ekonomicky výhodný t. j. 18 až 20 % dusíkatých látok obsahujúci slámový substrát, připravený priemyselným postuporn.
Na aktivně šlachtenie bolo použité, najma pri kmeňoch rodu Penicillium /Μ. P. Backus, J. F. Staufer, Mycologia, 4 7 , 446, 1955 ; J. Fuška, E. Welwardová: BiolÓgia 2 4, 69 1 , 1 969/ a rodu Cefalosporium /R. P. Elander: Microbiologia s. 517, 1976/ UV žíarenie o vlnovej dížke 2530 A.
Výtrusy kmeňa Coprinus sp. ako iné bazidiomycety bolí na pósobenie UV - žiarenia aj rtg-lúčov poměrně vysoko odolné /M. Semerdžieva, M. Blumaverová: Studia Biophys, 36/37, 183, 1973/. Lepší efekt v tvorbě mutant sa dosiahol pri námi aplikovaných mutagénoch, ktoré reagujúc s celulárnou desoxyribonukleinovou ako alkylačné činidlá, zabraňujú replikácii desoxyribonukleinovej kyseliny, ktorá zároveň nemóže slúžiť. ako matrica pre syntézu ribonukleinovej kyseliny. Takto sa aplikoval· tris/3-chloretylamín/hydrochlorid a mutagén TS 160, ktorý v spojení s přidáváním látok, ktoré reagujú s thiolovými skupinami, blokujúcimi SH-enzýmy ako je například jodacetamid zvýšil mutagénny efekt, vyvolaný účinkom žiarenia a alkylačných činidiel /E. J. Grajevskij, A. G. Tarasenko; Radilogija 6, 983, 1972/. Táto skutočnosí je uvedená v tabulke 1.
T a b u I k a 1
Prežívanie spor Mutanty s prod. N-látok nad /Z/ 120 % kontroly /2/
Kontrola 100 -
Jodacetamid /0,1 raM/ 85 -
TS 160 /0,004M/ 70 1,96
Jodacetamid /0, 1 mM/ TS 160 /0.004M/ 55 13,76
Uvedené nedostatky odstraňuje spósob šlachtenie bazidiomycety Coprinus sp . , ktorého podstata spočívá v tom, že na spory kmefta sa pósobí. mutagénnymi látkami, reagujúcimi s jeho desoxyribonukleinovou kyselinou v zmysle alkylačných reakcií, ako sú 0,005 až 0,04 M bis/beta-chloretamín/hydrochlorid alebo 0,005 až 0,04 M N-yperit, a látkami blokujúcimi SH-skupiny ako sú 0,005 až 0,01 mM jodacetami alebo N-etylraaleimid, po dobu 10 až 30 minút, dalej sa alikvótny podiel spórovej suspenzie riedi IZ-ným roztokom glycerínu a vyseje sa na povrch agarovej platné a po vyrastení sa kultivuje na slamovom substráte.
Takto sa získá kmen bazodimycety Coprinus sp. Czq» CCMF-674, so zvýšenou produkciou dusíkatých látok za súčasného obohaťenia kultivovaného slámového substrátu monosacharidmi.
Ďalej sa móže kmen bazidiomycety Coprinus sp, C2Q-CCCF-674 kultivovat v slamovom substráte, upravenom prídavkom látok obsahujúcich dusík, draslík a fosfor, ako sú močovina a draselné soli kyseliny fosforečnej a kultiváciou pri teplote 28 až 36 °C, pri vysokej vlhkosti vzduchu, čím sa získá kmeň s vyšším podielom dusíkatých látok a monosacharidov v slamovom substráte.
Výhodou tohoto postupu je, že sa jednak zvýši variačné rozpátie u získaných mutant /zo 140 až 170 % N-látok oproti kontrole/ a tiež počet mutant schopných zvýšenej produkcie celkového obsahu N-látok nad 120 % vzhladora ku kontrole v kultivačnom substráte, oproti kontrolnému kmenu. Nové kmene získané týmto postupom okrem zvýšenia obsahu celkových N-látok ponechávajú pri kultivačnom procese část biotrans formovanéj celulózy vo formě monosacharidov, prevažne glukózy, tak ako je to uvedené v tabulke 2.
Tabulka 2
Kmeň
Obsah N-látok v substráte £ Z zvýšenia voči póvodnému obaahu
Koncentrácia redukujúcich cukrov v substráte /Z/
Coprinus sp. póvodný Coprinus sp. 12-14 - 2-3
CCMF-674 -21- 64 4-6
Coprinus sp. θ20’ podlá pokusu 3 1 8-19 28 až 35 3-5
Monosacharidy sú pre metabolické procesy zvierač lahko dostupné, čím sa zvyšuje energetický účinok kultivovaného substrátu. Po kultivácii substrátu použitými kmeňmi Coprinus sp. nedochádzalo k produkcii látok s potenciálnymi mutagénnymiprípadne kancerogénnymi úČinkami ako bolo dokázané testami podlá Amesa /B. N. Ames, J. Mc. Cann, E. Yamasakií Mutation Res,,
31, 347, 1975/. V pokusoch in vivo sa neprojavili u pokusných zvierat žiadne negativné příznaky po podávaní obohateného substrátu.
jej vyuzicia scava výrazné
Uvedeným spósobom sa celý postup biotransformácie celulózy ekonomickéjší a atraktivnější z hlediska využitia. Týmto postupom bolí získané kmene Copri3 nus sp. C^g» CCCF-674řktoré pri overení v prevádzkovom měřítku vytvárali priemerne 18 až 21 Z N-látok v substráte, čo je 28 až 64 % zvýšenie oproti kontrolnému kmenu.
Příprava kmeňov týmto postupom a overenie ich vlastností sú uvedené v príkladoch.
Přiklad 1
Spory kmeňa Coprinus sp. bolí suspendované vo vodě a fíltráciou cez vrstvu vaty bolí zbavené zhlukov spor a fragmentov vegetatívneho mycélia, pričom počet spor bol 3.10^ ml \
K suspenzii spor bol sterilným spósobom přidaný roztok mutagénu tris/beta-chloretylamin/.
HC1 v takom množstve, aby jeho výsledná koncentrácia v roztoku bola 0,008 M. Připravená spórová suspenzia bola sterilným spósobom zmíešaná v pomere 1:1 s vodným roztokom jodacetamidu o koncentrácií 0,2 mH. Po 20 min. pósobení mutagénu za neustálého miešania bol alikvotný podřel spórovej suspenzie odobratý a přenesený do 1 % roztoku glycínu. Spórová suspenzia bola ďalej riedená a spory vysíate na povrch sladinového agaru, a to 0,1 ml spor na povrch agarovej platné o priemere 10 cm. Po 48 až 72 hod. kultivácii pri 34 °C sa vyrastené monoko1onie ' preniesli na šikmý sladinový agar a postupné bolí hodnotené submerznou i povrchovou kultiváciou na slamovom substráte. Kmeň Coprinus pri hodnotení v prevádzkovom měřítku, po 12 dňoch kultivácie,poskytol produkt, ktorý obsahoval až 21 7, N-látok na gram sušiny.
Příklad 2
Spory kmeňa Coprinus sp. suspendované vo vodě sa zbavili fíltráciou fragmentov mycélia a zraiešali sa s roztokom mutagénu tris/beta-chloretylamin/. HCl v takom pomere, aby výsledná koncentrácia mutagénu bola 0,008 M. Připravená spórová suspenzia sa v pomere 1:1 zmiešala s 0,01 M vodným roztokom N-etylmaleimidu. Po 20 min. pósobení mutagénu sa alikvotný podiel spórovej suspenzie odobral a riedil s 1 % roztokom glycínu. Po tfalšom riedení volenom tak, aby na povrchu agarových platní vyrástali monokolónie,sa 0,1 ml spórovej suspenzie rozotrelo po povrchu sladinového agaru /ako u příkladu 1/. Po 48 až 72 hod. kultivácii pri 34 °C sa vyrastené monokolónie preniesli na šikmý sladinový agar a postupné po vyrastení bolí hodnotené povrchovou kultiváciou na slamovom substráte. Kmeň Coprinus sp. C2Q» získaný podmienkami podlá tohoto pokusu dosiahol v prevádzkových podmienkách produkciu 19,8 % N-látok na gram sušiny.
Příklad 3
K 1 kg slámového substrátu spařenému horúcou - 95 °C - vodou počas 60 min. sa přidá 3,5 litra vodného roztoku, ktorý obsahuje 32 g močoviny a 1,6 g Kl^PO^. Substrát sa naočkuje vegetatívnym inokulom obsahu 7,5 až 10 7, objemových na objem substrátu jedným z kmeňov Coprinus sp. ^20’ získanými podlá příkladu 1 alebo 2. Naočkovaný substrát sa rozostrie vo 5 až 8 cm hruběj vrstvě na kultivačné mísy a nechá sa kultivovat pri teplote 28 až 36 °C a vysokej vlhkosti vzduchu po dobu 10 až 12 dní. Získaný produkt obsahuje 18 až 21 % N-látok na gram sušiny a 3,5 až 4,5 % vodorozpustných redukujúcich cukrov.

Claims (2)

1. Spósob šlachtenia kmeňa bazidiomycety Coprinus sp. vyznačujúci sa tým, že na spory kmeňa sa pósobí rautagennými látkami reagujúcimi s jeho celulárnou desoxyríbonukleinovou kyselinou v zmysle alkylačných reakcií^ako sú 0,005 až 0,04 M tris/beta-chloretylaraín/hydrochlorid alebo 0,005 až 0,04 M N-yperit a látkami blokujúcirai SH-skupiny, ako sú 0,005 až 0.,01 M jodacetamid alebo N-etylmaleimid po dobu 10 až 30 minut, cfalej sa alikvotný podiel sporovej suspenzie riedi 1 Z. roztokom glycínu a vyseje sa na povrch agarovej platné a po vyrastení sa kultivuje na slamovom substráte alebo sa kultivuje pri teplote 28 až 36 °C za vysokej vlhkostí vzduchu na upravenom slamovom substráte, a to tak, že sa k slámovému substrátu spařenému 95 °C vodou přidá roztok látok obsahujúcich dusík, draslík a fosfor, s výhodou vo formě močoviny a draselných solí kyseliny fosfnrp.čnej .
2. Kmeň bazidiomycety Coprinus sp. C^q CCMF-674, degradujúci celulózu v slamovom substráte, získaný spósobom podlá bodu 1.
CS707079A 1979-10-18 1979-10-18 Spôsob šlachtenia kmeňov Coprinus sp. CS209783B1 (sk)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS707079A CS209783B1 (sk) 1979-10-18 1979-10-18 Spôsob šlachtenia kmeňov Coprinus sp.

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS707079A CS209783B1 (sk) 1979-10-18 1979-10-18 Spôsob šlachtenia kmeňov Coprinus sp.

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS209783B1 true CS209783B1 (sk) 1981-12-31

Family

ID=5419151

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS707079A CS209783B1 (sk) 1979-10-18 1979-10-18 Spôsob šlachtenia kmeňov Coprinus sp.

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS209783B1 (sk)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Cerezine et al. Soluble phosphate accumulation by Aspergillus niger from fluorapatite
Shrivastava et al. Phosphate-solubilizing microbes: diversity and phosphates solubilization mechanism
Siepel et al. Mites of different feeding guilds affect decomposition of organic matter
Nelson et al. Fumonisins, mycotoxins produced by Fusarium species: biology, chemistry, and significance
Straker Ericoid mycorrhiza: Ecological and host specificity
DE2444849C2 (de) Verfahren zur Herstellung organischer Säuren durch biologische Hydrolyse
Vassilev et al. Rock phosphate solubilization by Aspergillus niger grown on sugar-beet waste medium
Cadisch et al. 15N-based estimation of nitrogen fixation by eight tropical forage-legumes at two levels of P: K supply
Meera et al. Persistence of induced systemic resistance in cucumber in relation to root colonization by plant growth promoting fungal isolates
Gold et al. Conditions for fruit body formation in the white rot basidiomycete Phanerochaete chrysosporium
Lootsma et al. Effects of the springtail Folsomia fimetaria and the nematode Aphelenchus avenae on Rhizoctonia solani stem infection of potato at temperatures of 10 and 15 C
CN114223677A (zh) 一种防治大姜线虫的微生物菌剂及其应用
DE1442230A1 (de) Verfahren zur mikrobiologischen Herstellung von Erzeugnissen mit hohem Proteingehalt
Ayanru et al. Changes in total cyanide content of tissues from cassava plants infested by mites (Mononychellus tanajoa) and mealybugs (Phenacoccus manihoti)
CS209783B1 (sk) Spôsob šlachtenia kmeňov Coprinus sp.
Elkan Taxonomy and metabolism of Rhizobium and its genetic relationships
Black et al. Utilization of ferulic acid by microfungi from litter and soil
Page The effect of ammonia on growth and reproduction of Pilobolus kleinii
Fermor Agaricus macrosporus: an edible fungus with commercial potential
DE3784655T2 (de) Verfahren zur herstellung von ascorbinsaeure-2-phosphat.
JPS5910958B2 (ja) トリコデルマ属菌含有堆肥の製造方法
EP0002695B1 (de) Organisch-chemische Verbindung, Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung, sie enthaltende Mittel sowie Mikroorganismen
Yamanaka et al. Development of basidia and basidiospores from slide-cultured mycelia in Lyophyllum tylicolor (Agaricales)
Bennett et al. Effect of acetone on production of aflatoxins and versicolorin pigments by resting cell cultures of Aspergillus parasiticus
KR100592129B1 (ko) 차가버섯(Inonotus Obliquus)균사체의 대량생산을 위한 액체배양법