CS209783B1 - Method of cultivating coprinus sp. strains - Google Patents

Method of cultivating coprinus sp. strains Download PDF

Info

Publication number
CS209783B1
CS209783B1 CS707079A CS707079A CS209783B1 CS 209783 B1 CS209783 B1 CS 209783B1 CS 707079 A CS707079 A CS 707079A CS 707079 A CS707079 A CS 707079A CS 209783 B1 CS209783 B1 CS 209783B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
substrate
coprinus
spore suspension
solution
strain
Prior art date
Application number
CS707079A
Other languages
English (en)
Slovak (sk)
Inventor
Jan Fuska
Rudolf Jilek
Eva Pavlikova
Vladislava Ruzickova
Vlastimil Zezula
Magda Vodickova
Original Assignee
Jan Fuska
Rudolf Jilek
Eva Pavlikova
Vladislava Ruzickova
Vlastimil Zezula
Magda Vodickova
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jan Fuska, Rudolf Jilek, Eva Pavlikova, Vladislava Ruzickova, Vlastimil Zezula, Magda Vodickova filed Critical Jan Fuska
Priority to CS707079A priority Critical patent/CS209783B1/cs
Publication of CS209783B1 publication Critical patent/CS209783B1/cs

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

209783 (11) (BI) ČESKOSLOVENSKÁSOCIALISTICKÁREPUBLIKA(1» )
POPIS VYNÁLEZU
K AUTORSKÉMU OSVĚDČENI U
/22/ Přihlášené 18 10 79/21/ /PV 7070-79/ (51) Jnt. Cl.3C 1 2 N 15/00
ÚŘAD PRO VYNÁLEZY (40) Zverejnené 27 02 81 (45) Vydané 1 5 02 83
A OBJEVY (75) FUŠKA JÁN doc. íng. CSc., BRATISLAVA, JÍLEK RUDOLF ing. CSc.,
Autor vynálezu PAVLÍKOVA EVA RNDr., BRNO, RŮŽIČKOVÁ VLADISLAVA RNDr., VOJKOVICE,
ZEZULA VLASTIMIL RNDr., VELKÁ BÍTES a VODIČKOVÁ MAGDA prou. biol.,BRNO (54) Spósob šlachtenia kmeňov Coprinus sp. i
Vynález sa týká sposobu šlachtenia kmeňov bazidiomycety Coprinus sp., schopných degra-dovač celulózu přítomnu v slamovom substráte, pri súčasnom zvýšení obsahu dusíkatých látok avolnej glukózy v kultivovanom substráte. Póvodný kmen Coprinus sp. izolovaný z jáchymovských bani rástol na slamovom substráte lenvelmi pomaly a po 12 až 14 dňoch povrchnej aktivácie sa zvýšil obsah celkových dusíkatýchlátok, vyjádřený ako celkový dusík x 6,25, z 2 až 3 £ na 12 až 14 %, pričom konečný substrátobsahoval iba stopy monosacharidov. Krmné pokusy s takto získaným substrátom stimulovali rastkrmených zvierat, ak bolí použité ako doplnok dusíkatých látok do tradičných krmív. Pasivnýmvýberom spontánně sa tvoriacich variant Coprinus sp. nie je možné dosiahnuú ekonomicky výhodnýt. j. 18 až 20 % dusíkatých látok obsahujúci slámový substrát, připravený priemyselným postu-porn.
Na aktivně šlachtenie bolo použité, najma pri kmeňoch rodu Penicillium /Μ. P. Backus, J.F. Staufer, Mycologia, 4 7 , 446, 1955 ; J. Fuška, E. Welwardová: BiolÓgia 2 4, 69 1 , 1 969/ a roduCefalosporium /R. P. Elander: Microbiologia s. 517, 1976/ UV žiarenie o vlnovej dlžke 2530 A. Výtrusy kmeňa Coprinus sp. ako iné bazidiomycety bolí na pósobenie UV - žiarenia aj rtg-lú-čov poměrně vysoko odolné /M. Semerdžieva, M. Blumaverová: Studia Biophys, 36/37, 183, 1973/.Lepší efekt v tvorbě mutant sa dosiahol pri námi aplikovaných mutagénoch, ktoré reagujúc s ce-lulárnou desoxyribonukleinovou ako alkylačné činidlá, zabraňujú replikácii desoxyribonuklei-novej kyseliny, ktorá zároveň nemóže slúžiť. ako matrica pre syntézu ribonukleinovej kyseliny.Takto sa aplikoval tris/3-chloretylamín/hydro chlorid a mutagén TS 160, ktorý v spojení s při-dáváním látok, ktoré reagujú s thiolovými skupinami, blokujúcimi SH-enzýmy ako je napříkladjodacetamid zvýšil mutagénny efekt, vyvolaný účinkom žiarenia a alkylačných činidiel /E. J.Grajevskij, A. G. Tarasenko; Radilogija 6, 983, 1972/. Táto skutočnosú je uvedená v tabulke 1. 209783 209783 2 T a b u I k a 1
Prežívanie spor Mutanty s prod. N-látok nad /Z/ 120 % kontroly /Z/
Kontrola 100 - Jodacetamid /0,1 raM/ 85 - TS 160 /0,004M/ 70 1,96 Jódacetamid /0, 1 mM/ TS ,60 /0.004M/ 55 13,76
Uvedené nedostatky odstraňuje spósob šlachtenie bazidiomycety Coprinus sp . , ktorého pod-stata spočívá v tom» že na spory kmefta sa pSsobí mutagénnymi látkami, reagujúcimi s jehodesoxyribonukleinovou kyselinou v zmysle alkylačných reakcií, ako sú 0,005 až 0,04 M bis/be-ta-chloretamín/hydrochlorid alebo 0,005 až 0,04 M N-yperit, a látkami blokujúcimi SH-skupinyako sú 0,005 až 0,01 mM jodacetami alebo N-etylraaleimid, po dobu 10 až 30 minút, dalej saalikvótny podiel spórovej suspenzie riedi 1Z-ným roztokora glycerínu a vyseje sa na povrchagarovej platné a po vyrastení sa kultivuje na slamovom substráte.
Takto sa získá kmen bazodimycety Coprinus sp. Czq» CCMF-674, so zvýšenou produkciou du-síkatých látok za súčasného obohaťenia kultivovaného slámového substrátu monosacharidmi. Ďalej sa móže kmen bazidiomycety Coprinus sp, C2Q-CCCF-674 kultivovat v slamovom substráte,upravenom prídavkom látok obsahujúcich dusík, draslík a fosfor, ako sú močovina a draselnésoli kyseliny fosforečnej a kultiváciou pri teplote 28 až 36 °C, pri vysokej vlhkosti vzdu-chu, čím sa získá kmeň s vyšším podielom dusíkatých látok a monosacharidov v slamovom substrá-te. Výhodou tohoto postupu je, že sa jednak zvýši variačné rozpátie u získaných mutant/zo 140 až 170 % N-látok oproti kontrole/ a tiež počet mutant schopných zvýšenej produkciecelkového obsahu N-látok nad 120 % vzhladora ku kontrole v kultivačnom substráte, oproti kon-trolnému kmenu. Nové kmene získané týmto postupom okrem zvýŠenia obsahu celkových N-látokponechávajú pri kultivačnom procese část biotrans formovanéj celulózy vo formě monosacharidov,prevažne glukózy, tak ako je to uvedené v tabulke 2.
Tabulka 2
Kmeň
Obsah N-látok v substráte Z Z zvýšenia voči póvodnému obaahu
Koncentracia reduku-júcich cukrov v sub-stráte /Z/
Coprinus sp.povodný Coprinus sp. 12-14 - 2-3 CCMF-674 -21- 64 4-6 Coprinus sp. θ20’podlá pokusu 3 1 8-19 28 až 35 3-5
Monosacharidy sú pre metabolické procesy zvierač lahko dostupné, čím sa zvyšuje energe-tický účinok kultivovaného substrátu. Po kultivácii substrátu použitými kmeňmi Coprinus sp.nedochádzalo k produkcii látok s potenciálnymi mutagénnymi pr ípadne kancerogénnymi úČinkamiako bolo dokázané testami podlá Amesa /B. N. Ames, J. Mc. Cann, E. Yamasakií Mutation Res,, 31, 347, 1975/. V pokusoch in vivo sa neprojavili u pokusných zvierat žiadne negativné přízna-ky po podávaní obohateného substrátu. jej vyuzicia scava výrazné
Uvedeným spósobom sa celý postup biotransformácie celulózyekonomickéjší a atraktivnější z hladiska využitia. Týmto postupom bolí získané kmene Copri-

Claims (2)

  1. 3 209783 nus sp. C^g» CCCF-674řktoré pri overení v prevádzkovom měřítku vytvárali priemerne 18 až 21 ZN-látok v substráte, čo je 28 až 64 % zvýšeníe oproti kontrolnému kmenu. Příprava kmeňov týmto postupom a overenie ich vlastností sú uvedené v príkladoch. Přiklad 1 Spory kmeňa Coprinus sp. bolí suspendované vo vodě a fíltráciou cez vrstvu vaty bolízbavené zhlukov spor a fragmentov vegetatívneho mycélia, pričom počet spor bol 3.10^ ml \ K suspenzii spor bol sterilným spósobom přidaný roztok mutagénu tris/beta-chloretylamin/. HC1 v takom množstve, aby jeho výsledná koncentrácia v roztoku bola 0,008 M. Připravená spó-rová suspenzia bola sterilným spósobom zmíešaná v pomere 1:1 s vodným roztokom jodacetamiduo koncentrácii 0,2 mH. Po 20 min. pósobení mutagénu za neustálého miešania bol alikvotný po-diel spórovej suspenzie odobratý a přenesený do 1 % roztoku glycínu. Spórová suspenzia bolaďalej riedená a spory vysiate na povrch sladinového agaru, a to 0,1 ml spor na povrch agaro-vej platné o priemere 10 cm. Po 48 až 72 hod. kultivácii pri 34 °C sa vyrastené monoko1onie 'preniesli na šikmý sladinový agar a postupné bolí hodnotené submerznou i povrchovou kultivá-ciou na slamovom substráte. Kmeň Coprinus pri hodnotení v prevádzkovom měřítku, po 12 dňoch kultivácie,poskytol produkt, ktorý obsahoval až 21 X N-látok na gram sušiny. Příklad 2 Spory kmeňa Coprinus sp. suspendované vo vodě sa zbavili fíltráciou fragmentov mycéliaa zraiešali sa s roztokom mutagénu tris/beta-chloretylamin/. HCl v takom pomere, aby výslednákoncentrácia mutagénu bola 0,008 M. Připravená spórová suspenzia sa v pomere 1:1 zmiešalas 0,01 M vodným roztokom N-etylmaleimidu. Po 20 min. pósobení mutagénu sa alikvotný podielspórovej suspenzie odobral a riedil s 1 % roztokom glycínu. Po tfalšom riedení volenom tak,aby na povrchu agarových platní vyrástali monokolónie,sa 0,1 ml spórovej suspenzie rozotrelopo povrchu sladinového agaru /ako u příkladu 1/. Po 48 až 72 hod. kultivácii pri 34 °C sa vy-rastené monokolónie preniesli na šikmý sladinový agar a postupné po vyrastení bolí hodnotenépovrchovou kultiváciou na slamovom substráte. Kmeň Coprinus sp. C2Q» získaný podmienkami podlátohoto pokusu dosiahol v prevádzkových podmienkách produkciu 19,8 % N-látok na gram sušiny. Příklad 3 K 1 kg slámového substrátu spařenému horúcou - 95 °C - vodou počas 60 min. sa přidá3,5 litra vodného roztoku, ktorý obsahuje 32 g močoviny a 1,6 g Kl^PO^. Substrát sa naočkujevegetatívnym inokulom obsahu 7,5 až 10 % objemových na objem substrátu jedným z kmeňov Copri-nus sp. ^20’ získanými podlá příkladu 1 alebo 2. Naočkovaný substrát sa rozostrie vo 5 až 8 cmhruběj vrstvě na kultivačné mísy a nechá sa kultivovat pri teplote 28 až 36 °C a vysokejvlhkosti vzduchu po dobu 10 až 12 dní. Získaný produkt obsahuje 18 až 21 % N-látok na gramsušiny a 3,5 až 4,5 % vodorozpustných redukujúcich cukrov. PREDMET VYNÁLEZU
    1. Spósob šlachtenia kmeňa bazidiomycety Coprinus sp. vyznačujúci sa tým, že na sporykmeňa sa pósobí rautagennými látkami reagujúcimi s jeho celulárnou desoxyríbonukleinovou ky-selinou v zmysle alkylačných reakcií^ako sú 0,005 až 0,04 M tris/beta-chloretylaraín/hydro-chlorid alebo 0,005 až 0,04 M N-yperit a látkami blokujúcirai SH-skupiny, ako sú 0,005 až0.,01 M jodacetamid alebo N-etylmaleimid po dobu 10 až 30 minut, cfalej sa alikvotný podielsporovej suspenzie riedi 1 Z. roztokom glycínu a vyseje sa na povrch agarovej platné a po vy-rastení sa kultivuje na slamovom substráte alebo sa kultivuje pri teplote 28 až 36 °C za vy-sokej vlhkostí vzduchu na upravenom slamovom substráte, a to tak, že sa k slámovému substrátu 209783 4 spařenému 95 °C vodou přidá roztok látok obsahujúcich dusík, draslík a fosfor, s výhodou voformě močoviny a draselných solí kyseliny foefn^ečnej»
  2. 2. Kmeň bazidiomycety Coprinus sp. C^q CCMF-674, degradu j úci celulózu v slamovomsubstráte, získaný sposobom podlá bodu 1. Severopafia. n. p.. eivod 7. Most
CS707079A 1979-10-18 1979-10-18 Method of cultivating coprinus sp. strains CS209783B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS707079A CS209783B1 (en) 1979-10-18 1979-10-18 Method of cultivating coprinus sp. strains

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS707079A CS209783B1 (en) 1979-10-18 1979-10-18 Method of cultivating coprinus sp. strains

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS209783B1 true CS209783B1 (en) 1981-12-31

Family

ID=5419151

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS707079A CS209783B1 (en) 1979-10-18 1979-10-18 Method of cultivating coprinus sp. strains

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS209783B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Cerezine et al. Soluble phosphate accumulation by Aspergillus niger from fluorapatite
Shrivastava et al. Phosphate-solubilizing microbes: diversity and phosphates solubilization mechanism
Siepel et al. Mites of different feeding guilds affect decomposition of organic matter
Nelson et al. Fumonisins, mycotoxins produced by Fusarium species: biology, chemistry, and significance
Straker Ericoid mycorrhiza: Ecological and host specificity
DE2444849C2 (de) Verfahren zur Herstellung organischer Säuren durch biologische Hydrolyse
Vassilev et al. Rock phosphate solubilization by Aspergillus niger grown on sugar-beet waste medium
Cadisch et al. 15N-based estimation of nitrogen fixation by eight tropical forage-legumes at two levels of P: K supply
Meera et al. Persistence of induced systemic resistance in cucumber in relation to root colonization by plant growth promoting fungal isolates
Gold et al. Conditions for fruit body formation in the white rot basidiomycete Phanerochaete chrysosporium
Lootsma et al. Effects of the springtail Folsomia fimetaria and the nematode Aphelenchus avenae on Rhizoctonia solani stem infection of potato at temperatures of 10 and 15 C
CN114223677A (zh) 一种防治大姜线虫的微生物菌剂及其应用
DE1442230A1 (de) Verfahren zur mikrobiologischen Herstellung von Erzeugnissen mit hohem Proteingehalt
Ayanru et al. Changes in total cyanide content of tissues from cassava plants infested by mites (Mononychellus tanajoa) and mealybugs (Phenacoccus manihoti)
CS209783B1 (en) Method of cultivating coprinus sp. strains
Elkan Taxonomy and metabolism of Rhizobium and its genetic relationships
Black et al. Utilization of ferulic acid by microfungi from litter and soil
Page The effect of ammonia on growth and reproduction of Pilobolus kleinii
Fermor Agaricus macrosporus: an edible fungus with commercial potential
DE3784655T2 (de) Verfahren zur herstellung von ascorbinsaeure-2-phosphat.
JPS5910958B2 (ja) トリコデルマ属菌含有堆肥の製造方法
EP0002695B1 (de) Organisch-chemische Verbindung, Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung, sie enthaltende Mittel sowie Mikroorganismen
Yamanaka et al. Development of basidia and basidiospores from slide-cultured mycelia in Lyophyllum tylicolor (Agaricales)
Bennett et al. Effect of acetone on production of aflatoxins and versicolorin pigments by resting cell cultures of Aspergillus parasiticus
KR100592129B1 (ko) 차가버섯(Inonotus Obliquus)균사체의 대량생산을 위한 액체배양법