CS208595B1 - Dvojitá kultivační komůrka pro histochemické vyšetřování buněčných linií - Google Patents
Dvojitá kultivační komůrka pro histochemické vyšetřování buněčných linií Download PDFInfo
- Publication number
- CS208595B1 CS208595B1 CS725279A CS725279A CS208595B1 CS 208595 B1 CS208595 B1 CS 208595B1 CS 725279 A CS725279 A CS 725279A CS 725279 A CS725279 A CS 725279A CS 208595 B1 CS208595 B1 CS 208595B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- cell lines
- histochemical
- semipermeable membrane
- histochemical examination
- cultivation chamber
- Prior art date
Links
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 title claims description 13
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 14
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 239000004590 silicone sealant Substances 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Description
(54] Dvojitá kultivační komůrka pro histochemické vyšetřování buněčných linií
Vynález se týká dvojité kultivační komůrky pro histochemické vyšetřování buněčných linií.
Histochemické vyšetřování tkání a orgánů se běžně provádí tak, že se tkáňový bloček zmrazí a nakrájí se pomocí kryostatu na tenké řezy. Histochemické reakce se mohou provádět buď na volných řezech nebo na řezech fixovaných na podložních sklíčkách. Další možností je provádění histochemických reakcí na semipermeabilních membránách s použitím gelového hlstochemického média. Touto metodou lze dobře detekovat i difuzibilní enzymy, které jsou u výšepopsaných dvou metod prakticky neprokazatelné.
Histochemické vyšetřování buněčných linií se provádí tak, že buněčná suspenze se kultivuje na krycích sklíčkách v Petriho miskách a pak se provádějí histochemické reakce obdobně jako u kryostatových řezů fixovaných na podložních sklíčkách.
Uvedené nedostatky odstraňuje podle vynálezu dvojitá kultivační komůrka pro histochemické vyšetřování buněčných linií za použití semipermeabilní membrány. Její podstata spočívá v tom, že je tvořena horním válečkem a spodním válečkem, oddělenými navzájem semipermeabilní membránou, přičemž spodní váleček je umístěn v Petriho misce pro fyziologický roztok a horní váleček je přikryt víčkem Petriho misky.
Výhoda dvojité kultivační komůrky spočívá v tom, že umožňuje kultivaci buněk na semipermeabilní membráně a zároveň pro2 vedení histochemické reakce přímo in sítu na kultivovaných buňkách po odsátí média a jejich zaschnutí. Umožňuje vyšetřování buněčných enzymů, jejichž detekce je možná pouze na semipermeabilních membránách a která dříve byla v buněčných liniích prakticky nemožná. Další výhodou je, že buňky nejsou poškozovány ani zmrazením ani krájením a tím je možnost vzniku artefaktů na minimum. V neposlední řadě je výhodou dvojité kultivační komůrky její cenová dostupnost. Pořizovací cena je nízká a navíc je možné skleněné válečky používat opakovaně.
Vynález je dále blíže popsán na příkladu provedení podle připojeného výkresu, na němž je v nárysu z řezu nakreslena dvojitá kultivační komůrka podle vynálezu.
Komůrka sestává ze dvou stejných skleněných válečků 1, 2. Na spodním válečku 2 je upevněna pomocí pryžového kroužku 3 semipermeabilní membrána 4. Horní váleček 1 je přitmelen pomocí silikonového tmelu 5, který je pro tkáňové kultury netoxický, v místě semipermeabilní membrány 4. Tím vznikne válcovitý prostor rozdělený uprostřed semipermeabilní membránou 4. Oba válečky 1, 2 i semipermeabilní membrána 4 musí být před sestavením komůrky tkáňově umyty. Sestavená komůrka se sterilizuje autoklávováním.
Při kultivaci je komůrka ve vertikální poloze. Do prostoru horního válečku 1 se napipetuje buněčná suspenze 6. Tím je komůrka připravena pro kultivaci buněk. Umístí
208 595
208 595 se do sterilní Petriho misky 7 se sterilním fyziologickým roztokem a horní váleček 1 se přikryje víčkem 9 Petriho misky, aby nedocházelo k odpařování média. Buňky se kultivují v hermeticky uzavřeném prostoru nebo v inkubátoru s 5% kysličníku uhličitého v atmosféře při teplotě 37 °C. Po 4 dnech dojde k optimální proliferaci buněk, které hned na počátku kultivace sedimentovaly na semipermeabilní membráně 4, a tím jsou dány podmínky pro jejich histochemické vyšetření.
Médium se odpipetuje a semipermeabilní membrána 4 se dvakrát opláchne fyziologickým roztokem, aby byly odstraněny zbytky média. Tak se horní váleček 1 i se silikonovým tmelem 5 oddělí od spodního válečku 2. Po zaschnutí buněk se provede histochemická reakce stejným způsobem jako u řezů na semipermeabilní membráně 4.
Claims (1)
- PŘEDMĚTDvojitá kultivační komůrka pro histochemické vyšetřování buněčných linií za použití semipermeabilní membrány význačná tím, že je tvořena horním válečkem (1) a spodním válečkem (2), oddělenými navzáVYNÁLEZU jem semipermeabilní membránou (4), přičemž spodní váleček (2) je umístěn v Petriho misce (7j pro fyziologický roztok a horní váleček (lj je přikryt víčkem (9) Petriho misky.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS725279A CS208595B1 (cs) | 1979-10-25 | 1979-10-25 | Dvojitá kultivační komůrka pro histochemické vyšetřování buněčných linií |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS725279A CS208595B1 (cs) | 1979-10-25 | 1979-10-25 | Dvojitá kultivační komůrka pro histochemické vyšetřování buněčných linií |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS208595B1 true CS208595B1 (cs) | 1981-09-15 |
Family
ID=5421344
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS725279A CS208595B1 (cs) | 1979-10-25 | 1979-10-25 | Dvojitá kultivační komůrka pro histochemické vyšetřování buněčných linií |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS208595B1 (cs) |
-
1979
- 1979-10-25 CS CS725279A patent/CS208595B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR101679889B1 (ko) | 세포, 인공세포 구조물 또는 3차원 복합 조직 어셈블리의 냉동보존 방법 | |
| US6255106B1 (en) | Process for simultaneous cultivation of different mammalian cells | |
| WO2004011593A1 (ja) | 生体由来の細胞または組織の自動培養装置 | |
| Slavkin et al. | Epithelial-mesenchymal interactions during odontogenesis: III. A simple method for the isolation of matrix vesicles | |
| CN111334469A (zh) | Pbmc体外3d甲基纤维素琼脂糖水凝胶培养基及其制备方法 | |
| CN114807043A (zh) | 人源前庭神经鞘膜瘤永生化细胞系及其构建方法 | |
| JP2012239444A (ja) | 細胞培養担体、細胞培養担体の製造方法、及び細胞培養方法 | |
| CN101153317B (zh) | 一种连续检测组织工程支架和组织植入物上活细胞量的方法 | |
| Hieb et al. | Aging in the free-living nematode Turbatrix aceti. Techniques for synchronization and aging of large-scale axenic cultures | |
| RU2384618C2 (ru) | Способ получения фибробластоподобных клеток из пупочного канатика новорожденного | |
| CS208595B1 (cs) | Dvojitá kultivační komůrka pro histochemické vyšetřování buněčných linií | |
| US20030077816A1 (en) | Bioreactor and method for using | |
| Fahim | The effect of light and other factors on the sporulation of Alternaria porri | |
| Gea et al. | Study of bacterial cellulose as scaffold on cartilage tissue engineering | |
| Ohtsuki et al. | Difference in saponin sensitivity between myotubes and mononucleated cells from chick breast muscle | |
| JP2004500855A (ja) | 感染モデル | |
| CN113502261B (zh) | 一种能高效分化成脂的规模化3d低氧间充质干细胞培养体系 | |
| CN102206583A (zh) | 一种细胞共培养用芯片及共培养方法 | |
| CN111334472A (zh) | Pbmc体外3d胶原蛋白水凝胶培养基及其制备方法 | |
| CN113174370B (zh) | 一种脐带血干细胞及其扩增培养方法 | |
| Malik et al. | Preservation of immobilized bacterial cell-matrix by drying for direct use in microbial sensors | |
| RU2391398C2 (ru) | Способ выделения гепатоцитов животных с пойкилотермной системой терморегуляции (амфибии, черепахи) | |
| Mikami | Nuclear Differentiation in Exconjugants of Paramecium caudatum: Role of Nuclear Division in Differetiation: (conjugation/nuclear differentiation/nuclear division/nuclear transplantation/Paramecium) | |
| SU658169A1 (ru) | Способ поддержани жизнеспособности микроорганизмов в процессе их хранени | |
| JPH0568230B2 (cs) |