CS205577B1 - Spósob produkcie enzýmu ot-amylázy - Google Patents

Spósob produkcie enzýmu ot-amylázy Download PDF

Info

Publication number
CS205577B1
CS205577B1 CS735978A CS735978A CS205577B1 CS 205577 B1 CS205577 B1 CS 205577B1 CS 735978 A CS735978 A CS 735978A CS 735978 A CS735978 A CS 735978A CS 205577 B1 CS205577 B1 CS 205577B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
ccm
oxysporum
amylase
fermentation
hours
Prior art date
Application number
CS735978A
Other languages
English (en)
Slovak (sk)
Inventor
Juraj Zemek
Maria Svabova
Ludovit Kuniak
Jozef Augustin
Ludmila Marvanova
Original Assignee
Juraj Zemek
Maria Svabova
Ludovit Kuniak
Jozef Augustin
Ludmila Marvanova
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Juraj Zemek, Maria Svabova, Ludovit Kuniak, Jozef Augustin, Ludmila Marvanova filed Critical Juraj Zemek
Priority to CS735978A priority Critical patent/CS205577B1/cs
Publication of CS205577B1 publication Critical patent/CS205577B1/cs

Links

Landscapes

  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

POPIS VYNÁLEZU
REPUBLIKA
<la> K AUTORSKÉMU OSVEDČENIU
(61) (23) Výstavná priorita(22) Přihlášené 13.11 78(21) FV 7359-78 205 577 (Bl) (51)IntC1.3 C 12 N 9/26
ÚŘAD PRO VYNÁLEZY
A OBJEVY (40) Zverejnené 29 08 80(45) Vydané Q1 θ9 θ3
Autor vynálezu ZBMEK JURAJ ing. CSc., LEHNICA, SVÁBOVÁ MÁRIA, VRÚTKY, KUNIAK tUDOVÍT ing. CSc.,AUGUSTIN JOZBF PhMr., BRATISLAVA a MARVANOVÁ tUDMILA RNDr. CSc., BRNO (54) Sp&amp;sob produkcie enzýmu <<-amylázy 1
Vynález ea týká spdsobu produkcie fungálnej ot-amylázy. K produkcii ot-amylázy v priemyelovom meradle ea v eúčesnej době využívá predovšetkýmbakteriálny kmen Bacillus subtilis, Streptomycee aureofaciene, resp. Aspergillue oryzae. U rodu Fusarium je produkcia oí-amylázy popíaaná v literatúre u Fusarium moniliforme(Harhaah. A. W., Acta Biol. Med. Ger. 1967/18 (1), etr. 121-4), u Fuaarium Marti (Stacho-wicz J. a Urbánek H., Zesz. Nauk, Univ. Lodž., Ser. 2, (1971) 42 (7), etr. 61-8), u pro-dukSného mutanta Fuaarium ep. (Suzuki M«, Kuno M., Nakao X., Agric. Biol. Chem. (1976) 40 (2), etr. 365-71) a u Fusarium vasinfectum (Sampathnarayanan A., Shanmugaaunderan R. B.,Arch. Biochem. Biophys. (1976) 118 (2), etr. 317-22).
Nevýhodou produkcie «(.-amylázy u uvedených kmenov je nevýhodný poměr oligoeacharidovmaltosového typu a D-glukozy ako reakdných produktov amylolytickej reakcie, reep. ťažkoetipri separácii biomaey z kultivačného média.
Uvedené nevýhody odstraňuje apfiaob produkcie oL-amylázy na tekutej živnej pdde obsa-hu júcej zdroje asimilovatelného uhlíka, komplexně zdroje dueíka a minerálně živné soli,ktorého podstata spočívá v tom, že kmene rodu Fusarium:
Fusarium acuminatum CCM F 357
Fusarium acuminatum CCM F 423
Fusarium aquaeductuum var medium CCM F 212 205 577 2DS S77
Puaarium avenaceum CCM P 22 Puaarium avenaceum CCM F 503 Puaarium culmorum CCM F 163 Pusarium culmorum CCM F 227 Puaarium culmorum CCM F 553 Pusarium decemcellulare CCM F 359 Puaarium inflexum CCM P 574 Puaarium lateritium CCM F 226 Puaarium oxysporum CCM F 20 Pusarium oxyaporum CCM P 45 Fusarium oxysporum var. lycoperaici CCM F 64 Fusarium oxysporum CCM F 485 Pusarium oxysporum CCM F 547 Fusarium oxysporum f.sp. lycoperaici CCM P 546 Puaarium oxysporum f.sp. lycoperaici CCM P 545 Fusarium oxysporum f.sp. pisi race 1 CCM P 65 Puaarium oxysporum f.sp. piai race 1 CCM P 421 Puaarium poae CCM F 584 Puaarium sambucinum CCM P 562 Fusarium aemitectum var. majua CCM F 353 Puaarium soleni CCM F 454 Fusarium solani CCM F 552 Puaarium soleni var. coeruleum CCM P 3 Puaarium sporotrichioides CCM P 554 Puaarium tritinctum CCM P 352 Puaarium culmorum CCM P 21 Puaarium oxysporum f.sp. piai race 2 CCM P 422 ea kultivujú jednotlivo alebo v ich zmeai na Sivnej pĎde obaahujúcej 0,1 až 3 hmot* % Škrobu pri teplota 20 až 40 °C a výhodou 28 °C při pH 4,5 až 6,3 a výhodou 5,2 po dobu60 až 120 hodin, pričom et-amyléza aa zlske zahuštěním produkčného média, připadne zráže-ním aíranom amonným alebo afinitným pročištěním. Výhodou uvedeného postupu je produkcia ot-amylézy aj na velmi jednoduchých médiachneobaahujúcich oC(l-**4) glukény, ako je polhohoapodáraky odpad napr. celulozového typu.Uvedený apOaob umožňuje využit filtračných technik pri izolécii biomaay.
Produkčně schopnost uvedených kmenov Puaarium je až 3,4 U/mg, pričom produkčně schop-nost známých producentov plesnovej ot-amylézy napr. Aapergillus oryzae je 2,2 U/mg. Příklad 1
Puaarium culmorum CCM F 163 aa pomnoží na raatovej pdde obaahujúcej 2 g gélu připrave-ného sietovaním amylózy epichlórhydrínom ponořeného do polovice výéky gélu v Yeaat MitrogenBase raatovej pdde (fa Oxoid), 0,6 g/100 ml a kultivécia prebieha na povrchu gélu po dobu

Claims (3)

  1. λ * u a 0 7 7 60 hodin pri teplote 28 G (pH 5,6), kedy dochádza k atekuteniu gélu. Nahromaděná biomasa(0,21 g) Fusarium culmorum sa použije k fermentácii na p6de obsahujúcej 10 g kukuřičnéhovýluhu, 2 g síranu amonného, 2 g dihydrogén fosforečnanu draselného a 1 g rozpustného Škro-bu na 1 liter vody (pH 5,6) v 5 Brlenmajerových bankách 1 liter 200 ml produkčnej p8dy. Po96 hodinách fermentácie na reciprokej trepačke pri 25 °C sa biomasa oddělila filtrácioua supernatant sa zrážal síranom amonným v množstve 620 g/liter pri 15 °C. Dialyzovaný surovýénzým (2-krát 24 hodin) oproti destilovanej vodě (2 litre) sa lyofilizoval. Výsledná aktivi-ta 72 IU, Specifická aktivita 0,914 IU/mg. Příklad
  2. 2 Fusarium inflexum CCBí F 574 sa pomnoží na rastovej pOde so sieťoveným gélom amylozy,tak, ako je uvedené v příklade 1, s tým rozdielom, že nahromaděná biomasa F. inflexum(0,19 g) sa použije k fermentácii na pdde obsahujúcej 5 g kvasničného autolyzátu, 2 g síra-nu amonného a 30 g škrobu na liter vody (pH 5,6). Po 120 hodinách fermentačného procesu pri40 °C na reciprokej trepačke sa biomasa F. inflexum odstráni centrifugáciou a ot-amylázasa izolovala z filtrátu afinitnou metodou, prídavkom 20 g sieťovaného Škrobu (počet gluko-zylových jednotiek na 1 priečnu vSzbu 20). Po premieSaní (10 minút) pri 7 °C (pH nastavenéna 4,7) sa tekutý produkt odstránil centrifugáciou (1000 g, 5 minút), sediment sieťovanéhoškrobu s et-emylázou sa. premyl 2-krát 300 ml 0,02 M fosforečňanovým pufrom pH 4,7* Uvolne-nie enzýmu sa previedlo 0,05 M fosforečňanovým pufrom pH 7,2 (120 ml). Po dialýze roztokoL-amylázy možno zahustit lyofilizáciou. Výsledná aktéřita 42 IU, Specifická aktivita68,5 IU/mg proteinu. Příklad
  3. 3 Tak, ako v příklade 2, s tým rozdielom, že ako produkčný kmen sa použije Fusarium ave-naceum CCM F 22. Výsledná aktivita 38 IU, Specifická aktivita 27,5 IU/mg proteinu. Význam vynálezu spočívá v tom, že oi-amyláza získaná podl’a vynálezu má význam v pivo-var nic t ve na přípravu eirupov, štiav a sladidiel a v polnohoepodáratve pri komplexnom zu-žitkovaní polnohospodárskych odpadov v procese saeharifikácie. P B B D Μ B T VYNÁLEZU Spčsob produkcie enzýmu et-amylázy na tekutej živnej p6de obsahujúcej zdroje asimilova-t"el’ného uhlíka, komplexně zdroje dusíka a minerálně živné soli, vyznačujúci sa tým, že kme-ne rodu Fuaarium: Fuaarium acuminatum CCM F 357 acuminatum CCM F 423 M aquaeductuum var medium CCM F 212 » avenaceum CCM F 22 H avenaceum CCM F 503 M culmorum CCM F 163 culmorum CCM F 227 1 808 877 Pusarium oulmorum CCM P 553 deeemoellulare CCM F 359 «· inflexum ©dl p 574 « lateritium CCM P 226 ft oxysporum CCM F '20 « oxysporum CCM P 45 9» oxysporum var. lycoperaiei CCM F 64 * oxysporum CCM F 485 H oxysporum CCM F 547 M oxysporum f.sp. lycopersici CCM F 546 oxysporum f.ap. lycopersici CCM F 545 M oxysporum f.sp. piai race 1 CCM F 65 M oxysporum f.sp. pisi race 1 CCM F 421 M poae CCM F 584 M sambucinum CCM F 562 00 semitectum var. majus CCM F 353 M soleni CCM F 454 M soleni CCM F 552 «8 solani var coeruleum CCM P 3 M sporotrichioidea CCM P 554 N tritinetum CCM F 352 oulmorum CCM F 21 oxysporum f.sp. pisi race 2 CCM F 422 sa kultivuji! jednotlivo alebo v ich zmesi na živnej pdde obeahujúeej 0,1 pri teplota 20 až 40 °C s výhodou 28 °C pri pH 4,5 až 6,3 s výhodou 5,2 j hodin, priSom et-amyláza sa získá zahuštěním produkčného média, připadne zrážanlm siranomamonným alebo afinitným přečištěním. Vytiskly Moravské tiskařské závody,provoz 12, Leninova 21, Olomouc Cena: 2,40 Kčs
CS735978A 1978-11-13 1978-11-13 Spósob produkcie enzýmu ot-amylázy CS205577B1 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS735978A CS205577B1 (cs) 1978-11-13 1978-11-13 Spósob produkcie enzýmu ot-amylázy

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS735978A CS205577B1 (cs) 1978-11-13 1978-11-13 Spósob produkcie enzýmu ot-amylázy

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS205577B1 true CS205577B1 (cs) 1981-05-29

Family

ID=5422589

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS735978A CS205577B1 (cs) 1978-11-13 1978-11-13 Spósob produkcie enzýmu ot-amylázy

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS205577B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0140610B1 (en) A process for producing thermostable alpha-amylases by culturing micro-organisms at elevated temperatures
CA1329161C (en) Process for the preparation of difructose dianhydride iii
US3843442A (en) Immobilized glucose isomerase
JP3691875B2 (ja) 耐熱性マルトースホスホリラーゼ、その製造方法、その製造に使用する菌、および該酵素の使用方法
CS205577B1 (cs) Spósob produkcie enzýmu ot-amylázy
JP3761236B2 (ja) 新規なβ−グルコシダーゼ、その製造法および用途
JPH0928375A (ja) トレハロースホスホリラーゼおよびその調製法
JPS62296875A (ja) ノイラミニダ−ゼの製造法
JP2544094B2 (ja) アルカリ性セルラ−ゼの製造法
US5110734A (en) Purified cyclodextrinase
US5238825A (en) Preparation and use of a cyclodextrinase for preparing maltooligosaccharides
JP2801608B2 (ja) 新規ヘパラン硫酸分解酵素並びにそれを生産する微生物及び方法
JP2623507B2 (ja) マルトオリゴ糖の製造法
JPH01144989A (ja) コロミン酸の製造法
JPH06113846A (ja) キチナーゼ
KR0129471B1 (ko) 말토테트라오즈 생산 아밀라제의 제조방법
JP2559400B2 (ja) マルトオリゴ糖生成アミラ−ゼ及びその製造法
JP2623509B2 (ja) 分岐マルトオリゴ糖の製造法
KR890000537B1 (ko) 미생물에 의한 5&#39;-구아닐산의 제조방법
JPH04211369A (ja) 好塩性アルカリアミラーゼおよびその製造方法
KR970002253B1 (ko) 5&#39;-구아닐산을 생산하는 미생물
SU388408A1 (ru) Способ получения декстраназы
JP2003116536A (ja) 新規α−1,2−マンノシダーゼ及び該酵素を用いたα−マンノシル糖化合物の製造法
CS205427B1 (en) Alpfa-amylase manufacturing process
JPH0761264B2 (ja) 新規なシクロマルトデキストリナーゼ及びその製造方法