CS202900B1 - Způsob získávání kmenů Penicillium chrysogenum Thom. - Google Patents
Způsob získávání kmenů Penicillium chrysogenum Thom. Download PDFInfo
- Publication number
- CS202900B1 CS202900B1 CS72579A CS72579A CS202900B1 CS 202900 B1 CS202900 B1 CS 202900B1 CS 72579 A CS72579 A CS 72579A CS 72579 A CS72579 A CS 72579A CS 202900 B1 CS202900 B1 CS 202900B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- thom
- strains
- penicillium
- chrisogenum
- yast
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 15
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 title 1
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 9
- XWHHYOYVRVGJJY-UHFFFAOYSA-N 4-fluorophenylalanine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(F)C=C1 XWHHYOYVRVGJJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 claims description 5
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 claims description 5
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 claims description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 3
- 239000007362 sporulation medium Substances 0.000 claims description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 10
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 10
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 229930195708 Penicillin V Natural products 0.000 description 4
- 241000228150 Penicillium chrysogenum Species 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- 231100000243 mutagenic effect Toxicity 0.000 description 4
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 4
- 229940056367 penicillin v Drugs 0.000 description 4
- LCPDWSOZIOUXRV-UHFFFAOYSA-N phenoxyacetic acid Chemical compound OC(=O)COC1=CC=CC=C1 LCPDWSOZIOUXRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BPLBGHOLXOTWMN-MBNYWOFBSA-N phenoxymethylpenicillin Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)COC1=CC=CC=C1 BPLBGHOLXOTWMN-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 4
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 4
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- 206010028400 Mutagenic effect Diseases 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 101001126435 Arabidopsis thaliana Pyrophosphate-fructose 6-phosphate 1-phosphotransferase subunit alpha 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001126433 Arabidopsis thaliana Pyrophosphate-fructose 6-phosphate 1-phosphotransferase subunit alpha 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000999896 Arabidopsis thaliana Pyrophosphate-fructose 6-phosphate 1-phosphotransferase subunit beta 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000999895 Arabidopsis thaliana Pyrophosphate-fructose 6-phosphate 1-phosphotransferase subunit beta 2 Proteins 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 230000002070 germicidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000028070 sporulation Effects 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
(54) Způsob získávání kmenů Penicillium chrysogenum Thom.
Vynález se týká způsobu získávání kmenů Penicillium chrysogenum Thom. se zvýšenou produkcí penicilinu a se sníženou produkční variabilitou, a to dlouhodobým působením p-fluorfeny1alaninu.
ρ-Fluorfenylalanin /dále jen^PFP/ je látka nejen s mutagenní účinností, ale i látka s účinky haploidizacními při parasexuální hybridizaci . Mutagenní působení analogů aminokyselin a tedy i PFP bylo sledováno jak u prokaryontních, tak u eukaryontních organismů, přičemž byl nalezen významný rozdíl mezi účinkem PFP na obě tyto skupiny. Eukaryontní organismy byly k tomuto mutagennímu působení analogů aminokyselin senzitivní, zatímco účinek na organismy prokaryontní je velmi nízký, a to pouze za určitých podmínek. Mutagenní účinek PFP na eukaryontní organismy je vysvětlován na základě sterické analogie PFP s aminokyselinou fenylalaninem, která je podle této teorie v aktivním miste replikačního enzymu.
Uvedené poznatky využívá způsob získávání kmenů Penicilliutn chrysogenum Thom. se zvýšenou produkcí penicilinu a se sníženou produkční variabilitou, podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že se výchozí ^men Penicillium chrysogenum Thom. nechá Vysporulovat v tuhém x . . - 3 v - 5.
sporulačním mediu obsahujícím p-fluorfenylalanin v koncentraci 1.10 az 1.10 M, s výhodou 1.10-4 až 7,5,1O'AM.
Účelně se jako výchozího kmene Penicillium chrysogenum Thom. používá kmene ozářeného subletální dávkou ultrafialového světla.
p-Fluorfenylalanin jako aktivní látka je přidáván do sporulační půdy po jejím vysterilizování. Kultivace jsou prováděny pří 25 °C v termostatu. Po době potřebné k vysporulování /10 až 20 dnů podle použité koncentrace PFP/ je získaná suspenze spor po působení PFP ředěna ředicí řadou s koeficientem 10 a vyseta tak, aby mohly být izolované kolonie přeočkovány do sporové generace. Izoláty jsou pak produkčně hodnoceny dvoustupňovou fermentaci ve varných baňkách objemu 500 ml plněných fermentační půdou s laktózou nebo sacharózou jako zdroji uhlíku a energie nebo na fermentačních tancích. Množství produkovaného penicilinu je stanovo202900 váno hydroxamátovou metodou modifikovanou pro použití autoanalyzátoru. Kmeny pro produkci penicilinu V získané způsobem podle vynálezu vykazují produkci penicilinu V o 10 Z vyšší ve srovnání s izolátem kontrolním. Současné dochází k výraznému zvýšení produkční stability těchto kmenů ve srovnání s kmeny výchozími. Tyto nově získané kvality kmenů jsou stabilní i v následujících generacích.·
Příklady provedení
Přikladl
Sporová suspenze výchozího kmene Penicilli.um chrysogenum /produkce penicilinu V 19.300+1 900 j/ml/ byla bez ředění vyseta v koncentraci 10® až 10? spor/ml na tuhou sporulační půdu obsahující p~fluorfenylalanin v koncentraci 1.10 ^M. Po 10 dnech inkubace při 25 °C byla vysporulovaná kultura smyta sterilní destilovanou vodou a získaná suspenze spor byla naředěna a vyseta na plotny. Izolované a vysporulovaná kolonie byly přeočkovány do sporové generace a takto získané izoláty byly hodnoceny ferraentací v baňkách na rotačních třepacích strojích, přičemž byla sledována nejen vlastní produkce izolátů, ale také jejich produkční variabilita a stabilita.
Příklad 2
Postup stejný jako v příkladu 1, s tím rozdílem, že výchozí sporová suspenze byla ozářena subletální dávkou UV světla. Zdrojem UV světla byla germicidní lampa 40 W s předřazeným stabilizátorem sítového napětí. 5 ml suspenze spor v destilované vodě bylo ozářeno v Petriho misce o průměru 54 mm. Během ozařování byla suspenze míchána na elektromagnetickém míchadle. Vzdálenost misky od zdroje záření byla 20 cm.
Příklad 3
Fermentace ve varných baňkách na rotačních třepacích strojích na médiu obsahujícím sacharózu jako zdroj uhlíku a energie. Produkce penicilinu V u ižolátů získaných podle příkladu 1 <
nebo 2 byly hodnocena na půdě tohoto složení /v Z hmotn./: sójová mouka 6 Z, uhličitan vápenatý 0,9 Z, thiosíran sodný 0,8 Z, sacharosa 0,75 Z, sacharóza dávkovaná v průběhu fermentace 13,75 Z, fenoxyoctová kyselina 0,665 Z, hydroxid sodný /25Z roztok/ 0,2 Z. Sterilizace 20 min. při 120 °C, pH po sterilizaci je 8,0, Fermentace probíhá při teplotě 25 °C 11 dnů. Vzorky jsou odebírány v 9., 10.a 11. dni fermentace. Stanovení penicilínu je prováděno hydroxamátovou metodou modifikovanou pro použití autaanalyzátoru.
Produkční srovnání kmenů:
| Kontrolní | izolát : | 19 | 300 | i 1 890 | j | PNC | V/ral | 100,0 | Z | teorie | |
| izolát po | PFP 1 : | 20 | 950 | + | 680 | j | PNC | V/ml | 108,5 | Z | teorie |
| izolát po | PFP 2 : | 21 | 500 | ·► | 850 | j | PNC | V/ml | 111,5 | Z | teorie |
Příklad 4
Fermentace ve varných baňkách na rotačních třepacích strojích na médiu obsahujícím laktózu jako zdroj uhlíku a energie. Fermentace jsou prováděny jako v příkladu 3, s tim rozdílem, že složení fermentačni půdy je toto /v Z hmot./: sójová mouka 5 Z, uhličitan vápenatý 0,9 Z, thiosíran sodný 0,8 Z, fenoxyoctová kyselina 0,66 Z, dihydťofosforečnan draselný 0,067 Z, laktóza 6 Z, pH po sterilizaci je 7,0.
Claims (2)
- PŘEDMĚT VYNALEZU1. Způsob získávání kmenů Pěnícíllium chrysogenum Thom. se zvýšenou produkcí penicilinu a se sníženou produkční variabilitou, vyznačující se tím, že se výchozí kmen Penícillium chrysogenum Thora. nechá v.ysporulovat v tuhém sporulačním mediu obsahujícím p-fluorfenylalanin-3 -5,-4-4 v koncentraci 1.10 až 1.10 M, s výhodou 1.10 až 7,5.10 M.
- 2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se jako výchozího kmene Penícillium chrysogenum Thom. používá kmene ozářeného subletální dávkou ultrafialového světla.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS72579A CS202900B1 (cs) | 1979-02-01 | 1979-02-01 | Způsob získávání kmenů Penicillium chrysogenum Thom. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS72579A CS202900B1 (cs) | 1979-02-01 | 1979-02-01 | Způsob získávání kmenů Penicillium chrysogenum Thom. |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS202900B1 true CS202900B1 (cs) | 1981-02-27 |
Family
ID=5339886
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS72579A CS202900B1 (cs) | 1979-02-01 | 1979-02-01 | Způsob získávání kmenů Penicillium chrysogenum Thom. |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS202900B1 (cs) |
-
1979
- 1979-02-01 CS CS72579A patent/CS202900B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4588584A (en) | Medium for the isolation of Pseudomonas cepacia biotype from soil and the isolated biotype | |
| Spencer et al. | The role of choline sulphate in the sulphur metabolism of fungi | |
| US4518697A (en) | Acid stable protease from mutants of genus Aspergillus | |
| JPS58155086A (ja) | シユ−ドモナス属微生物及び該微生物を使用する水溶液の浄化方法 | |
| US4169761A (en) | Process for the cultivation of viruses | |
| US3764476A (en) | Process for producing microbial cells | |
| CS202900B1 (cs) | Způsob získávání kmenů Penicillium chrysogenum Thom. | |
| NL8004151A (nl) | Werkwijze voor het bereiden van een cefalosporine door fermentatie. | |
| US2917435A (en) | Preparation of 2-keto-1-gulonic acid by pseudomonas aeruginosa | |
| DK149868B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af 2-keto-l-gulonsyre eller salte deraf ved dyrkning af en 2-keto-l-gulonsyre-producerende mikroorganisme | |
| DE2811303C3 (de) | Enzymatische Komplexe, die zur Umwandlung racemischer Hydantoine in optisch aktive Aminosäuren geeignet sind, sowie deren Anwendung | |
| JP3195833B2 (ja) | 新規生理活性物質及びその製造法 | |
| JPH0325157B2 (cs) | ||
| Vinter et al. | Spores of microorganisms: XV. The alteration of heat sensitivity and its relation to radiation resistance of bacterial spores | |
| US2695261A (en) | Production of polymyxins a, b, and e | |
| Loveless et al. | The influence of radiomimetic substances on deoxyribonucleic acid synthesis and function studied in escherichia coli/phage systems-IV. Colony-forming ability and escherichia coli strain B and two of its mutants following alkylation | |
| Loughheed | The effect of nutrition on synnemata formation in Hirsutella gigantea Petch | |
| RU2143494C1 (ru) | Штамм дрожжей saccharomyces cerevisiae вкпм y 1678, продуцент поверхностного антигена вируса гепатита b | |
| US3069329A (en) | Production of griseofulvin | |
| SU1184852A1 (ru) | "шtamm _г_ш-2" | |
| SU1263711A1 (ru) | Питательна среда дл выделени и отбора бактерий-продуцентов протеазы | |
| SU872547A1 (ru) | Способ культивировани клеток | |
| US3483086A (en) | Method for increasing alkaloid production of submerse claviceps cultures | |
| MALLUCCI et al. | Infection of tumour cells by fowl plague virus in the presence of actinomycin D | |
| Medill-Brown et al. | Effect of penicillin, growth phase, ultraviolet light, and ultrasonic vibrations on the ability of Proteus mirabilis to form L type colonies |