CS199547B2 - Process for production mks-virs - Google Patents

Process for production mks-virs Download PDF

Info

Publication number
CS199547B2
CS199547B2 CS731009A CS100973A CS199547B2 CS 199547 B2 CS199547 B2 CS 199547B2 CS 731009 A CS731009 A CS 731009A CS 100973 A CS100973 A CS 100973A CS 199547 B2 CS199547 B2 CS 199547B2
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
virus
mks
tissue
suspension
slurry
Prior art date
Application number
CS731009A
Other languages
English (en)
Inventor
Horst-Ulrich Rahneberg
Original Assignee
Bayer Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bayer Ag filed Critical Bayer Ag
Publication of CS199547B2 publication Critical patent/CS199547B2/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/125—Picornaviridae, e.g. calicivirus
    • A61K39/135—Foot- and mouth-disease virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • A61K2039/552—Veterinary vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/32011—Picornaviridae
    • C12N2770/32111—Aphthovirus, e.g. footandmouth disease virus
    • C12N2770/32134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/32011—Picornaviridae
    • C12N2770/32111—Aphthovirus, e.g. footandmouth disease virus
    • C12N2770/32161—Methods of inactivation or attenuation
    • C12N2770/32164—Methods of inactivation or attenuation by serial passage

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

Vynález se týká způsobu produkce MKS-virů · ve velkém. .
Z literatury jsou již známy tyto způsoby množení MKS-virů:
1) Pěstování viru na sliznici jazyka živého skotu (O. Waldmann, · G. Pyl, K. O. Hobohm a H. Mohlmann Zbl. Bakt. 1. ' Orig. 148, 1, (1941).
2) Pěstování přežívajících izolovaných epiteliálních buněk sliznice jazyka skotu in vitro (H. S. Frenkel, Bull. Off. Int. Epiz. 28, 155, · (1947) a 39, 91, (1953).
3) Množení virů ·na přežívajících enzymaticky rozložených tkáních · izolovaného žaludku přežvýkavců in vitro . (K. O. Hobohm, H. U. Rehneberg, H. S. Fiege, NSR vykládací spis DAS č. 1 937 760.
4) Množení virů v jednovrstevných primárních buněčných· kulturách telecích ledvin (B. Ubertini, B. L. Nardelli, A. Dal Prato, G. Panin a G. Santero, Zbl. Ver. Med. 1963, 93-101).
5) Množení virů ·na jednovrstevné kultuře nebo v suspenzi · BHK (Baby humster kidney] (Macpherson a Stoker, Virology 16,· 147 (1962).
Takto, získaný virus ' · je vhodný k výrobě vakcíny proti MkS (slintavka ' a kulhavka) kopytníků, · jako skotu, prasat, ovcí · a koz.
Svrchu uvedené postupy mají celou řadu nevýhod:
Pěstování virů · na sliznici · jazyka živého skotu (Waldmannův postup) je · ve většině států na světě pro· výrobu vakcíny proti kulhavce zakázán z těch důvodů, že tímto způsobem může · dojít k nežádoucímu · rozšíření choroby.
Pěstování MKS-viru Frenkelovým způsobem naráží vzhledem k nutnosti nepřetržité ·· přípravy dostatečného · množství izolované sliznice jazyka z čerstvě zabitého skotu na celou řadu těžkostí. Mimoto je způsob používající tkáňových kultur, · zejména jednovrstevných tkáňových · kultur, . v případě produkce· velkých množství virů velmi drahý a náročný na čas.
MKS-vakcíny z virů, které byly pěstovány na heterologních buněčných liniích, například na embrionálních ledvinách křečka, nesou v sobě tu nevýhodu, že při opakovaném očkování a někdy·i při prvním očkování může dojít u očkovaných zvířat k výskytu alergických onemocnění.
Pěstuje-li se virus na přežívajících enzymaticky rozložených · tkáních žaludku přežvýkavců in vitro, probíhá syntéza viru po199547 málu (30 ' až 40 hodin) a výtěžek viru je při 10β až 107 . infekčních dávkách v ml velmi malý.
Bylo zjištěno, ' že nevýhody svrchu uvedených postupů je možno ' překonat tak, že se virus pěstuje s použitím' jak izolovaného epitelu jazyka skotu, tak při použití přežívajících tkání z žaludku přežvýkavců.
Předmětem vynálezu je tedy způsob produkce MKS-virů ve velkém, vyznačující se tím, že se tkáň bachoru a epitel jazyka skotu zbavený choroboplodných · zárodků uvede v suspenzi v isotonickém roztoku chloridu sodného s obsahem antibiotik a homogenizuje se, takto získaný homogenát se promyje a protřepává se s isotonickým roztokem chloridu sodného s obsahem antibiotik, · pak se roztok chloridu sodného s obsa-. hem antibiotik odstraní a buněčná kaše se infikuje suspenzí MKS-vi.ru, načež se kaše pěstuje ve fermentoru, který je naplněn živným prostředím o pH 7,5 při teplotě 37 °C, přičemž se hodnota pH · udržuje na uvedené hodnotě přidáváním glykolového pufru, po 22 hodinách se pěstování přeruší · a fermentační prostředí se zchladí na teplotu 4 °C, části tkáně se rozdrtí a takto získaná buněčná kaše s obsahem viru · a živného prostředí se hodinu extrahuje při teplotě 4 °C, načež se odstředí · a získaná čirá suspenze viru se smísí s konzervačním prostředkem, s výhodou Thimerosalem nebo chloroformem. ‘
Způsob podle vynálezu je vhodný pro produkci MKS-viru a pro výrobu MKS-očkovací látky ve velkém. Způsob je velmi jednoduchý, je levnější než pěstování čistým Frenkelovým způsobem a má také výhodnější podmínky, než je tomu v · případě pěstování na přežívajících, enzymaticky rozložených tkáních žaludku přežvýkavců, a · to zvláště pokud jde o výtěžky viru. Kombinace tkání snižuje těžkosti, které vznikají při . nutnosti získávat velké množství čerstvého epitelu z jazyka skotu. Přitom je MKS-vírus způsobem · podle vynálezu pěstován na homologní · tkáni, takže při použití takto vyrobené vakcíny · nedochází · k alergickým · reakcím. Vakcína je účinná, · trvanlivá a dobře - se snáší. · Způsob podle vynálezu tedy znamená velký pokrok v oboru · veterinárního lékařství.
Při · provádění způsobu podle vynálezu se vychází z tkáně jazyka skotu a tkáně žaludku přežvýkavců. Užívá se s výhodou žaludku skotu, a to · tkáně papil a sliznice bachoru, jakož i sliznice jazyka, obsahující epiteliální · buňky.
Jazyky skotu ' se zpracovávají způsobem podle Frenkela (H. · S. · Frenkel, · Bull. ·Off. int. Epiz. 28, 155, (1947) a 39, 91, (1953), sliznice jazyka · se izoluje a · uvádí se do ledem chlazeného roztoku solí, který je izotonický a obsahuje antibiotika. Bezprostředně po odběru žaludku z usmrcených zvířat se oddělí koky · i hladká · část sliznice bachoru. Tyto části · se promyjí vlažnou · vodou, zbaví se vrstvy tuku, · na 2 minuty se z ·obou stran ozáří · ultrafialovým · světlem ze vzdálenosti 30 · cm, načež se uloží do ledem chlazeného izotonického · solného roztoku s obsahem antibiotik.
Frenkelovou metodou získaný epitel jazyka skotu a · popsaným způsobem popsané izolované části bachoru se melou v mlýnku na maso o velikosti otvoru 12 · až 20 mm, načež se promyjí · třikrát izotonickým chladným roztokem solí. Pak se umleté tkáně bachoru · a · epitelu jazyka třepou 1 hodinu v izotonickém roztoku solí s obsahem antibiotik.
Jako izotonický solný roztok s obsahem antibiotik se s výhodou užije fyziologický roztok · solí následujícího složení: NaCl — 8 gramů, KC1 — 0,4 g, NaHCO3 —- 0,35 g, penicilín — 0,5 g, chloramfenikol · — ·0,25 g, Nystatin — 0,075 g, destilovaná · voda do 1 000 ml.
Po zpracování izotonickým · roztokem · solí s obsahem antibiotik se supernatant slije · a tkáňová kaše se infikuje suspenzí· viru MKS, a to 0,1 celkového objemu tkáňové kaše s obsahem viru.
Jako MKS-vírus, jehož je možno použít k provádění způsobu podle vynálezu, padá·v úvahu jakýkoli známý typ viru, · například evropské typy O, A a C, jihoamerické typy O, A a C, africké · typy sAt 1, 2 a 3 i asijské typy, například Asia 1 a všechny subtypy zmíněných základních typů viru.
Po aborpční době 20 minut se infikovaná tkáň bachoru a epitelu jazyka za · sterilních podmínek uvede do fermentoru, určeného k pěstování viru.
Fermentor již obsahuje množství živného prostředí nutné k pěstování viru. Toto živné prostředí se užívá při pH 7,4 až 7,6 a sestává s · výhodou z · fyziologického živného roztoku následujícího složení:
NaCl 720 g
KC1 18 g
CaCh . 6H2O 18 g
MgClž. 6H2O 9 g
NaHzPO. H2O • 11,1 g
NaHCCb 200 g
Na2HPO4.2H2O 48,06 g
Glukóza 100 g
pepton 240 - g
hydrolyzát kaseinu » 300 g
0,02% roztok heminu 3,6 · 1 ml
DL-Methionin 12,8 g
DL-Tryptophan 8,0 g
DL-Threonin 2,5 g
5,2 g
L-Thyroxin 0,0009 g
D-Ca Pantothenat 0,032 g
Niacin 0,16 g
Insulin 80 (MJ)IU
Chloramfenikol 10 g
Penicilín 32 g
Neomycinsulfát 10 g
Polymixin B 0,5 g
Nystatin 0,75 g
destilovaná voda do 100 1
Do fermentoru · se pak přidá .tkáňová kaše s obsahem viru a celkové množství živného roztoku se po přidání těchto složek upraví glykolovým pufrem na pH 7,4 až 7,6, načež se · obsah fermentoru pěstuje při 37 °C a při 25 otáčkách za minutu.
Užívá se s výhodou glykolového pufru . následujícího složení: Glykokol — 158 . g, NaCl — 1,4 g, NaOH — 51 g, destilovaná voda do 1000 ml.
Současně · se do fermentoru uvádí v množství 2 litry · za minutu . sterilně zfiítrovaný čistý kyslík. . Hodnota pH se stále kontroluje a . v případě nutnosti · se upraví glykolovým pufrem zpět na pH 7,4 až 7,6.
Po 18 až 24 hodinách se podle typu víru pěstování · zastaví a suspenze se ochladí na 4°C. Pak · se tkáně, které · obsahují . virus, tj. tkáň bachoru a epitel jazyka, homogenizují v koloidným mlýně, aby ·se uvolnil · virus obsažený v buňkách. Takto zpracovaná tkáňová kaše sě Extrahuje spolu s živným prostředím 1 hodinu při · 4°C za ·pomalého míchání 25 otáčkami za minutu. · K suspenzi tkáně se přidává Mertoga (Thimerosal) v koncentraci 1 : 40 000 nebo 0,2 až 1 % chloroformu. ·
Po extrakci se suspenze viru odstředí· v průtokové odstředivce · typu Scherples nebo Westfalia. Takto získaný čirý extrakt MKS-viru se po kvantitativním · stanovení obsahu antigenního · MKS-viru užije jako antigen pro výrobu MKS-vakcíny.
Stanovení obsahu viru a tím i obsahu ..infekčního · antigenu a antigenu, který váže kompleme.nt, se provádí kvantitativně.
Obsah · infekčního antigenu se stanoví u myší následujícím způsobem:
Vždy 10 myší, 4 až 7 dní starých obdrží v etherové narkóze intraperitoneální injekcí 0,10 ml viru při ředění 10~4, 10-5, 10~6, 107, 108 a · 10-9. Každý pokus trvá 7 dní. Uhynutí v průběhu ·48 hodin po infekci se nepočítají, protože · inkubační doba je minimálně 48 hodin. Pro , jednotlivá · ředění se stanoví 50% koncové body způsobem podle B. Behrense, Naunyn, — Schmiedeberg‘s Arch, exp. Path. Pharmak. 140, 237, (1920) a · G. Kárber idem. 162, . ' 489, (1931). Obsah infekčního MKS-antigenu (titr viru) · se vyjadřuje v MsLD50'/ml. '
Obsah antigenu, který · váže komplement, se zajišťuje kvantitativně reakcí na vazbu komplementu (KBR) tzv. „50% metodou” (Traub, E. · a Mohlmann H. Zbl. Bakt. i. Orig. 150, 289 (143 a) a Zbl. Bakt. i. Orig. 300 (1943b), Camargo, N. F. Eichhorn · B. A., De vine J. M. a · Telloz Giron, A., Proč. 87th · Ann. Meet Amer. Vet. med. · Assoc. 1950, 207-211) spektrofotometricky.
P říkla dl kg očištěnér ultrafialovým zářením částečně infekčních zárodků zbavené tkáně bachoru a 15 · . kg očištěného, ultrafialovým zářením částečně, infekčních zárodků zbaveného epitelu jazyka · se · uvede do · izotonického roztoku solí s obsahem antibiotik a umele se na mlýnku na maso.
Takto získaná · tkáňová · kaše se promyje fyziologickým roztokem kuchyňské soli á pak se protřepává · 1 hodinu s izotonickým roztokem solí s obsahem antibiotik. Pak se izotonický roztok solí s obsahem antibiotik odstraní slitím a tkáňová kaše · se infikuje 30 kg suspenze MKS-viru · jihoamerického typu C, jehož filtr · je MsLDso 10'775 · ml.
Po absorbční · době 20 minut · se infikovaná tkáňová kaše za sterilních podmínek uvede do fermentoru s obsahem 240 kg živného prostředí. Živné prostředí se předem zahřeje na 37 °C. Obsah fermentoru se · upraví 250 ml glykolového pufru na pH 7,5 a při teplotě 37 °C se míchá při 25 otáčkách ... za minutu.
V průběhu pěstování se přivádí v množství 2 litry za minutu sterilně filtrovaný čistý kyslík do obsahu fermentoru. Hodnota pH se neustále kontroluje · a · 5 hodin a 8 hodin po infikování obsahu · se upravuje přidáním 300 ml, 14 · hodin po infekci přidáním 400 ml glykolového pufru zpět na pH 7,4.
Od 12 hodin po infekci obsahu · až do 22 hodin po infekci obsahu se v · intervalech 2 hodin odebírají vzorky ke kvantitativnímu · stanovení obsahu · · infekčního · a komplement vážícího · antigenu. Pěstování se po 22 hodinách přeruší ' a směs se zchladí na 4.°C. Části tl^áně · se rozdrtí v koloidním mlýně, aby bylo možno extrahovat virus. Takto zpracovává · tkáňová kaše . se. extrahuje · do živného · prostředí, . ' rovněž · obsahujícího virus, 1 hodinu při 4 °C za pomalého míchání 25 otáček za · minutu.
Po extrakci ' se suspenze viru · odstředí v průtokové odstředivce (typu Westfalia). K takto získané čiré suspenzi viru se přidá (Thiomersal) (Mertogan) v koncentraci · 1 : : 40 000. '
Titr · viru a titr antigenu schopného vázat komplement se Vyvíjí v průběhu 22 · hodin pěstování takto:
Doba v hodinách MsLDso % zábrany hemolýzy při po infekci ředění antigenu
1:5 1:10 1:20
12 10-so 15 0 0
14 10-6.« 22 0 0
16 10-7.25 41 0 0
18 10-7.5 100 38 0
20 10-8.0 100 85 15
22 10-8,5 100 100 68
Příklad 2
Způsobem podle příkladu 1 se připraví z epitelu jazyka skotu a ze tkáně bachoru suspenze, která se infikuje jihoamerickým
MKS-virem typu O, subtypu Oi-Campos (titr viru MsLDso = 10_7,5/ml).
Pěstování viru se přeruší po 20 hodinách. Titr viru a antigenu, který váže komplement, se vyvíjí takto:
Doba v hodinách po infekci MsLDso 1: 5 o/o zábrany hemolýzy při ředění antigenu 1:10 1 : 20
12 10-5.5 0 0 0
14 10-625 21 0 0
16 Ю-7.5 38 0 0
18 10-8.0 100 72 10
20 10-9.’5 100 100 82
Příklad 3 kým MKS-virem typu A, subtyp A25 (titr vi-
rtl MsLDso = 10’7'6/ml).
Způsobem podle příkladu 1 se z tkáně ba- Po 24 hodinách se pěstování přeruší a vi-
choru a epitelu jazyka skotu připraví tká- rus se izoluje. Vývoj titru viru a titru anti-
fová suspenze, která se očkuje jihoameric- genu, který váže komplement, je tento:
Doba v hodinách MsLD.50 o/o zábrany hemolýzy při
po infekci ředění antigenu
1: 5 1: 10 1: 20
12 Ю-45 0 0 0
14 Ю-5.0 10 0 0
16 Ю-6.25 10 0 0
18 Ю-7.5 63 5 0
20 ΙΟ-80 100 10 0
22 10-925 100 75 10
24 Ю-8.75 100 100 87
Suspenze viru získaná způsobem podle příkladů 1, 2 a 3 se užívá jako MKS-virus a antigen v trivalentní MKS-vakcíně.
Tato vakcína chrání skot proti expert mentální infekci třemi typy viru, a to Oi -Campos, A26 a C, které byly užity к její vý robě.

Claims (1)

  1. předmět vynalezu
    Způsob produkce MKS-virů ve velkém, vyznačující se tím, že se tkáň bachoru a epitel jazyka skotu zbavený choroboplodných zárodků uvede v suspenzi v išotonickém roztoku chloridu sodného s obsahem antibiotik a homogenizuje se, takto získaný homogenát se promyje a protřepává s isotonickým roztokem chloridu sodného s obsahem antibiotik, pak se roztok chloridu sodného s obsahem antibiotik odstraní a buněčná kaše se infikuje suspenzí MKS-viru, načež se kaše pěstuje ve fermentoru, který je naplněn živným prostředím o pH
    7,5 při teplotě 37 ÓC, přičemž se hodnota pH udržuje na uvedené hodnotě přidáváním glykokolového pufru, po 22 hodinách se pěstování přeruší a fermentační prostředí se zchladí na teplotu 4°C, části tkáně se rozdrtí a takto získaná buněčná kaše s obsahem viru a živného prostředí se hodinu extrahuje při teplotě 4°C, načež se odstředí a získaná čirá suspenze viru se smísí s konzervačním prostředkem, s výhodou Thlmerosalem nebo chloroformem.
CS731009A 1972-02-12 1973-02-12 Process for production mks-virs CS199547B2 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE2206779A DE2206779A1 (de) 1972-02-12 1972-02-12 Verfahren zur massenzuechtung von mksviren

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS199547B2 true CS199547B2 (en) 1980-07-31

Family

ID=5835863

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS731009A CS199547B2 (en) 1972-02-12 1973-02-12 Process for production mks-virs

Country Status (17)

Country Link
JP (1) JPS4891262A (cs)
AR (1) AR193480A1 (cs)
AT (1) AT321464B (cs)
BE (1) BE795293A (cs)
CH (1) CH577031A5 (cs)
CS (1) CS199547B2 (cs)
DD (1) DD105252A5 (cs)
DE (1) DE2206779A1 (cs)
DK (1) DK137766C (cs)
ES (1) ES411484A1 (cs)
FR (1) FR2171425B1 (cs)
GB (1) GB1375154A (cs)
KE (1) KE2550A (cs)
NL (1) NL7301892A (cs)
RO (1) RO62814A (cs)
SU (1) SU519138A3 (cs)
ZA (1) ZA73926B (cs)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109097320A (zh) * 2018-07-23 2018-12-28 南京农业大学 一种绵羊羔羊瘤胃上皮细胞培养方法

Also Published As

Publication number Publication date
KE2550A (en) 1975-08-22
RO62814A (fr) 1977-11-15
GB1375154A (cs) 1974-11-27
NL7301892A (cs) 1973-08-14
FR2171425B1 (cs) 1976-11-05
DK137766B (da) 1978-05-01
DE2206779A1 (de) 1973-08-16
JPS4891262A (cs) 1973-11-28
SU519138A3 (ru) 1976-06-25
DD105252A5 (cs) 1974-04-12
BE795293A (fr) 1973-08-13
AT321464B (de) 1975-04-10
FR2171425A1 (cs) 1973-09-21
ES411484A1 (es) 1976-01-01
ZA73926B (en) 1973-11-28
AR193480A1 (es) 1973-04-23
CH577031A5 (cs) 1976-06-30
DK137766C (da) 1978-10-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4372945A (en) Antigen compounds
US4108983A (en) Viral oncolysate vaccine for stimulating the immune mechanism of mammals to species-specific tumors
FI85222B (fi) Hund parvovirusstam och foerfarande foer framstaellning av ett hund parvovirusvaccin.
HU183765B (en) Process for producing lyophilized vaccine against duck hepatitis
KR930000188B1 (ko) 신규 림포카인(lymphokine), 이 림포카인에 특이적인 모노클로날 항체 및 이들의 제조방법
US4320115A (en) Rabies virus vaccine
US4285930A (en) Antigens comprising immunostimulant adjuvants and their use in immunotherapy
NISHIMURA et al. A trial of vaccination against rainbow trout fry with formalin killed IHN virus
US3479430A (en) Indirect passive immunization against transmissible gastroenteritis virus in nursing piglets at birth by active immunization of sows prior to farrowing with transmissible gastroenteritis vaccine and method of producing the same
CS199547B2 (en) Process for production mks-virs
US3562387A (en) Mink virus enteritis vaccine and method for the production thereof
US3470294A (en) Vaccine for immunization of dogs and foxes against distemper,hepatitis contagiosa and leptospirosis and process for preparing it
EP0038337A1 (en) VACCINES FROM TAXONOMICALLY SIMILAR ORGANISMS.
US3548054A (en) Method for improving weight gains and reducing gross lesions in chickens exposed to marek's disease
SU997599A3 (ru) Способ получени гетеровакцины дл лечени синдрома трихомонада
JPH05508769A (ja) 細胞培養及び治療に有用なβ―アレチン
US3585108A (en) Transmissible gastroenteritis vaccines and methods of producing the same
GB2092596A (en) Process for the production of human parathyroid hormone
RU2070819C1 (ru) Способ получения вакцины против эшерихиоза телят
RU2043773C1 (ru) Способ получения вакцины против некробактериоза рогатого скота
US2017606A (en) Anthrax antigen preparation and product
RU2034565C1 (ru) Биологически активный препарат для кур и способ профилактики и лечения вирусных заболеваний кур
US3843451A (en) Microorganism production
RU2777479C1 (ru) Способ специфической профилактики ринопневмонии и мыта лошадей ассоциированной вакциной в условиях табунного содержания
RU2292916C1 (ru) Способ иммунопрофилактики острых респираторных болезней телят