CS196950B1 - Process for the cultivation of yasts producing ergosterole - Google Patents
Process for the cultivation of yasts producing ergosterole Download PDFInfo
- Publication number
- CS196950B1 CS196950B1 CS89678A CS89678A CS196950B1 CS 196950 B1 CS196950 B1 CS 196950B1 CS 89678 A CS89678 A CS 89678A CS 89678 A CS89678 A CS 89678A CS 196950 B1 CS196950 B1 CS 196950B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- ccy
- ergosterol
- yeast
- agar
- quotient
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 8
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N (22E)-cholesta-5,7,22-trien-3beta-ol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N Ergosterol Natural products CC(C)[C@@H](C)C=C[C@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@H]3CC[C@]12C DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N 0.000 claims description 28
- DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H](CC[C@]3([C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N 0.000 claims description 28
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims description 25
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 24
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 14
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 13
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims description 11
- 239000011888 foil Substances 0.000 claims description 10
- 229920000298 Cellophane Polymers 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 claims description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 4
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 3
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 3
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 claims description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 claims description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims 1
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 3
- 241000235649 Kluyveromyces Species 0.000 description 2
- 238000006424 Flood reaction Methods 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 1
- 241001508815 Lodderomyces Species 0.000 description 1
- 241001489223 Saccharomycodes Species 0.000 description 1
- 241000235346 Schizosaccharomyces Species 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000005201 scrubbing Methods 0.000 description 1
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000002623 sporogenic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
ČESKOSLOVENSKÁ SOCIALISTICKÁ REPUBLIKA POPIS VYNÁLEZU K AUTORSKÉMU OSVĚDČENÍ (21) (PV 896-78) (22) Přihlášené 13 02 78 196950 (11) (Bl) (51) Int. Cl.3 C 12 P 33/00 (40) Zveřejněno 31 07 79 □RAD PRO VYNÁLEZY A OBJEVY (45) Vydáno 30 11 81 (75)
Autor vynálezu: KOCKOVÁ-KRATOCHVÍLOVÁ ANNA RNDr. Dr.Sc., HORSKÁ LÝDIAa JURČOVÁ MILENA, BRATISLAVA (54) Sposob pestovania kvasiniek produkujácich váčšie množstvo ergosterolu
Vynález sa týká spůsobu pestovania kvasi-niek produkujúcich vačšie množstvo ergostero-lu.
Povodně sa používali k nahromadeniu ergo-sterolu pivovarské alebo pekárske kvasnice,teda kultury napestované v pivněj mladině ale-bo v melasovej zápare. Neskoršie sa pristúpilok pestovaniu čistých kultúr v tekutých pro-striedkach, prirodzených, ako je sladina alebomelasa, alebo umělo zostavených z minerál-nych solí, cukrov a vitamínov. Pretože pre tvor-bu ergosterolu je důležité, aby kultúra malapočas pestovania dostatočný přístup vzduchu,holi tieto kultury pěstované za vetrania alebona reciprokých alebo rotačných třepačkách.Ergosterol sa hromadí v buňkách kvasiniekhlavně rodu Saccharomyces a jemu příbuznýchrodov, ako napr. Kluyveromyces, v množstve0,1 až 3 %, zatial' čo celkové steroly můžu do-siahnuť 10 až 12 °/o. Celkový prehlad doteraj-ších skúseností s pěstováním a výberom kultúrpodávajú: M. Khanna, O. P. Shukla, Indián J.Exptl. Biol. 14, 729, 1976; a C. S. Penman, J. H.Duffus, Ztschr. Allg. Mikrobiol. 16, 483, 1976.
Podstatou vynálezu je sposob pestovania kva-siniek produkujúcich vačšie množstvo ergoste-rolu, ktorý sa vyznačuje tým, že sporogénnekmene, ktoré majú kvocient povrch/objem bu-niek menší alebo rovný 1 sa pestujú na pev-ných půdách pokrytých polopriepustnou bla-nou s přísadou aminokyselin, ktoré majú síru v molekule a za dostatočného přístupu vzdu-chu.
Zdl'havý postup pestovania biomasy kvasi-niek v tekutých půdách na třepačkách, odstre-dovanie a vypieranie biomasy sa nahradilo pě-stováním na pevných půdách. Sladinový alebomelasový agar alebo iný sa vylieva do Petrihomisiek o priemere 15 až 20 cm a na jeho po-vrch sa položí celofánová folia. Kvasinky saočkujú na povrch tejto fólie a rastů a rozmno-žujú sa z látok difundujúcich z agaru cez foliu.Po napestovaní biomasy sa táto tupou špacht-ličkou z fólie odstraní, suspenduje vo vodě a ly-ofilizuje. Pre stimuláciu tvorby ergosteroluv biomase producentov sa odporúča pridať doagaru aminokyseliny so sírou v množstve asi20 mg na 500 ml půdy.
Obsah ergosterolu sa preveril u 55 zástup-cov rodov kvasiniek, pričom sa zistilo, že naj-lepší producenti ergosterolu sú medzi jedno-bunkovými kvasinkami z rodov Saccharomyces,Kluyveromyces, Lodderomyces, Saccharomyco-des, Schizosaccharomyces, ktorých kvocientpovrch/objem je menší ako 1, alebo rovný 1.
Prednožený vynález má význam v tom, že satýmto postupom vylúči proces odstreďovaniakvasiniek, ich vypieranie vodou a opatovné od-streďovanie. Ergosterol sa stanovuje priamoalebo z lyofilizovaných vzoriek. Spůsob pesto-vania kvasiniek a spůsob výběru kmeňov kva-siniek produkujúcich ergosterol umožňujú
Claims (2)
196950 2 rýchle prešetrenie sérií kmeňov s dobrým pred-pokladom úspěchu. Příklad Kmeň Saccharomyces cerevisiae, napr. CCY21-4-32 alebo CCY 21-4-21 sa zaočkuje do sladi-ny o 7 % hmot. extraktu a pestuje sa za opti-málnej teploty, napr. 28 °C po dobu 72 hodin.Potom sa zmeria 100 buniek na dížku a šířku.Z nameraných hodnot sa stanovia priemerya dížko-šírkový poměr (d:š). Zistí sa, žed qqY 21—4—32 = 6>57 ± °-1014 a§ CCY 21—4—_32 _ 6,09 + 0,0993 μπι, d:š = 1,08, P/O == 0,96, aleboď~CCY 21_4_21 = 7,39 ± 0,1513 a š qcy 24_4_21 — 6,36 i 0,1607 μΐη, d.-s = = 1,16, P/O = 0,90. Kvocient P/O sa zistí z no-mogramu (obr. 1). Morfologické parametre po-skytujú teda dobré předpoklady, že kmene bu-dú dobří producenti ergosterolu. Medzitým sa připraví sladinový (alebo inýagar ) o 7 % hmot. extraktu s přísadou 20 mgL-metionínu na 500 ml a 1,5 % agaru. Sterilnýa roztopený agar sa vyleje do Petriho misieko priemere 15 cm. Na povrch utuhnutého agarusa položí kotúč celofánovej fólie o priemereo 1 cm váčšom, ako je priemer misky, takžeokraje sa zahýbajú hoře a nie je nebezpečie, žesuspenzia podtečie pod fóliou. Celofánové fóliesa vopred pokladů do váčších Petriho misiek(priemer 20 cm), poprekladajú kotúčmi filtrač-ného papiera, aby sa nezlepili, a ponořené vovodě sa sterilizujú v prúdiacej pare. Agarys fóliami sa očkujú připravenou kulturou nasladinovom agare 24 až 48 hodin starou. Kultú-ra sa suspneduje do sterilnej vody a má husto-tu zhruba 107 buniek v 1 ml.
2 ml dobré homo-genizovanej suspenzie buniek sa rozotrú po po-vrchu celofánovej fólie zahnutou sterilnouskleněnou tyčkou, ručně alebo pomocou otáča-cieho stolíka. Přitom sa ešte folia dobré přitla-čí k agaru. Misky sa inkubujú po dobu 3 až 4 dní pri25 až 28 °C. Za týchto podmienok bývá produk- cia ergosterolu najváčšia. Po inkubácii sa na-rastená biomasa opatrné zoškrabe špachtličkous tupou hranou, aby sa folia nepotrhala, a su-spenduje vo vodě pri hustotě asi 101θ buniekv 1 ml a lyofilizuje sa to (může ša však tiežstanovit' ergosterol vo vlhkých kvasinkáchpriamo). Alikvótne množstvo lyofilizovaných alebovlhkých kvasiniek sa zmydelňuje 40% KOH,extrahuje éterom, odpaří a ergosterol sa stano-ví spektrofotometricky po převedení do etano-lu alebo iného rozpúšťadla. Odčítá sa z vrcholupri 282 nm a přepočítává na % ergosteroluv sušině kvasiniek. Tak z dvanástich stanovívzorky CCY 21-4-21 bol zistený obsah ergoste-rolu 3,64 ± 0,42 % v sušině biomasy. Tabulka(viz příloha) ukazuje závislosť medzi obsahomergosterolu v biomase kvasiniek a ích kvocien-tom povrch/objem buniek. Tab. 1. Niekofko ukážok vztahu medzi produk-ciou ergosterolu a kvocientom povrch/objembuniek Kmeň číslo kvasinky % ergosteroluv sušině Kvocient povrch/objem buniek CCY 21-34-1 0,36 1,75 CCY 21-3-1 0,66 2,14 CCY 48-67 0,73 1,32 CCY 21-50-2 0,79 1,26 CCY 48-78 0,90 1,47 CCY 21-4-13 1,01 1,02 CCY 21-4-56 1,27 1,37 CCY 21-4-18 2,03 1,15 CCY 21-4-1 2,05 0,98 CCY 22-3-42 2,21 1,05 CCY 28-75 2,32 0,95 CCY 21-4-32 2,64 0,96 CCY 21-4-21 3,80 0,90 Poznámka k tab. 1: U 32 kmeňov rodu Saccha-romyces bola vypočítaná korelácia medzi ob-sahom ergosterolu a kvocientom P/0. Vypočí-taný korelačný koeficient činil — 0,540 (t.j.54% záporná korelácia, čo znamená, že so zni-žovaním jednej hodnoty sa zvyšuje druhá). P r e d m e t SpůSob pestovania kvasiniek produkujúcichvfičšie množstvoergosterolu, význačújúcis a tým, že kmene kvasiniek, ktoré majúkvocient povrch/objem buniek menší ako jedna y n á 1 e z u : alebo rovnaký jednej sa pestujú na pevných půdách pokrytých polopriepustrtou blánou s přísadou aminokyselin, ktoré majú síru v mo- lekule a za přístupu vzduchu.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS89678A CS196950B1 (en) | 1978-02-13 | 1978-02-13 | Process for the cultivation of yasts producing ergosterole |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS89678A CS196950B1 (en) | 1978-02-13 | 1978-02-13 | Process for the cultivation of yasts producing ergosterole |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS196950B1 true CS196950B1 (en) | 1980-04-30 |
Family
ID=5341989
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS89678A CS196950B1 (en) | 1978-02-13 | 1978-02-13 | Process for the cultivation of yasts producing ergosterole |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS196950B1 (cs) |
-
1978
- 1978-02-13 CS CS89678A patent/CS196950B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| De Pauw et al. | Large-scale Microalgae Production for Nursery Rearing | |
| CN109652347A (zh) | 一种建立在菌种互作基础上的山西老陈醋复合菌剂开发及多阶段强化的方法 | |
| Hong et al. | Effects of inoculum concentration, leaf age and wetness period on the development of dark leaf and pod spot (Alternaria brassicae) on oilseed rape (Brassica napus) | |
| CN115838643B (zh) | 一种茶树内生真菌及在促进铁皮石斛生长的应用 | |
| Blank | On the cell walls of dimorphic fungi causing systemic infections | |
| CN109906877B (zh) | 一种翘鳞香菇新菌种及其驯化栽培方法与应用 | |
| Sreekumar et al. | Production of 2-hydroxy 4-methoxy benzaldehyde using root cultures of Hemidesmus indicus | |
| JPS6070068A (ja) | 改良された酵母およびその製造方法 | |
| CN107432135A (zh) | 利用真菌促进锁阳种子萌发的方法 | |
| CS196950B1 (en) | Process for the cultivation of yasts producing ergosterole | |
| Yamamoto et al. | Factors affecting discharge and germination of lichen ascospores | |
| Thornton | Anti-fungal activity of fatty acids to Pithomyces chartarum (Berk. & Curt.) MB Ellis and other fungi | |
| CN104130947B (zh) | 冬虫夏草的固体发酵方法 | |
| CN102943051B (zh) | 一种生物有机肥发酵菌种s4的制备方法 | |
| JPS6131084A (ja) | 新規微生物 | |
| CN110835619A (zh) | 一株巴氏醋杆菌突变菌株及其诱变和筛选方法 | |
| CN102031233B (zh) | 一种生物有机肥发酵菌种的制备方法 | |
| Adams | Airborne yeasts from horticultural sites | |
| Punja | Mycelial growth and pathogenesis by Rhizoctonia carotae on carrot | |
| Hennessy et al. | Studies on sunflower rust. V. Culture of Puccinia helianthi throughout its complete life cycle on detached leaves of sunflower (Helianthus annuus) | |
| US2817624A (en) | Preparation of ergosterol containing yeast | |
| IMAI | Studies on cerophilic growth of moulds on wax and paraffin | |
| Reed et al. | Surface growth of bacteria on cellophane | |
| Sasa et al. | Seasonal variation of growth rate of various strains of unicellular algae under natural light-and temperature-conditions | |
| CN120025913B (zh) | 蜜环菌、包含蜜环菌的菌剂及其应用 |