CS153392A3 - Azole derivatives, process of their preparation and a pharmaceuticalcomposition containing said derivatives - Google Patents

Description

170 674/JT i 1 «- > *= · C r- *--c m CC -< oc ϊ- 5 ř Ϊ i

Azolové deriváty, způsob jejich přípravy a farmaceutická kom-pozice tyto deriváty obsahující

Oblast techniky

Vynález se týká nových azolových derivátů, zejména urči-tých 2-furyl-triazolo/1,5-a//1,3,5/triazinů a pyrazolo/2,3-a/-/1,3,5/triazinů, které mají využitelné farmakologické vlastnos-ti (a obzvláště antagonizují účinky adenosinu jako vasodilatač-ního činidla). Vynález rovněž zahrnuje farmaceutické kompozice,které jako účinnou látku obsahují uvedené nové azolové derivá-ty a které jsou vhodné pro použití při léčení některých onemoc-nění srdečních, periferních a/nebo cerebrálních vaskulárníchsystémů savců. Vynález konečně zahrnuje i způsob přípravy a for-mulování uvedených nových azolových derivátů.

Dosavadní stav techniky . Sloučenina theofyllin (1,3-dimethylxanthin) byla klinic-ky použita (obvykle ve formě její ethylendiaminové soli, kteráje rovněž známa jako aminofyllin) jako respiračně stimulujícíčinidlo, centrálně akční stimulační činidlo, bronchodilatátor,srdeční stimulační činidlo a jako diuretikum. Uvedená rozmani-tost klinického použití demonstruje široké spektrum farmakologic-kých účinků, které je theofyllinu připisováno. Mezi tyto účinkypatří inhibice fosfodiesterázy, antagonismus adenosinových re-ceptorů, mobilizace intracelulárního vápníku a uvolňování kate-cholaminů. V nedávné době bylo rovněž popsáno použití theofylli-nu při léčení myokardiální ischemie (Maséři a kol., The Lancet,1989, 683-686, skeletální svalové ischemie (Picano a kol., Angio-logy, 1989) a cerebrální ischemie (Skinhoj a kol., Acta. Neurol.Scand., 1970, 46, 129-140). Předpokládá se, že blahodárné účinkytheofyllinu lze přičítat omezení nebo zabránění jevu, kterýje znám jako "krádež cévního řečiště" (vascular steal), přičemžk uvedenému omezení nebo zabránění tohoto jevu dochází na zá-kladě schopnosti theofyllinu antagonizovat účinky adenosinu za- 2 blokováním adenosinových receptorů, které mediují metabolis-mem podmíněnou vasodilataci. K uvedené "krádeži cévního řečiště" muže dojít v přípa-dě, kdy je hlavní tepna zásobující určité cévní řečiště částeč-ně ne zcela okludována, což má za následek ischemickou poruchu.V této situaci se ohrožené cévní řečiště rozšíří a krevní prů- tok je udržován bučí zvýšením průtoku krve skrze zúženou cévunebo zvýšením průtoku krve skrze kolaterální cévy. Nicméně, zvý-šená metabolická aktivita v přilehlých cévních řečištích má zanásledek uvolňování mediátorů, jako například adenosinu, kterézpůsobí rozšíření těchto cévních řečišt a omezení průtoku krveohroženým cévním řečištěm, které je takto "okradeno" uvedenýmipřilehlými cévními řečišti. Úbytek krve v ohroženém cévním ře-čišti a její převod do normálně průchozích cévních řečišt v dů-sledku uvedeného jevu "krádež cévního řečiště" ještě dále zhor-šuje průtok krve v ohroženém cévním řečišti.

Uvedená rozmanitost farmakologických účinků theofyllinubrání jeho použití při obvyklém léčení nebo prevenci okluziv-ních onemocnění nebo stavů vztahujících se k cévnímu systému.

Tak například jeden z přidružených účinků theofyllinu spočívají-cí v inhibici fosfodiesterázy má za následek srdeční stimulaci,která je škodlivá pro pacienty s myokardiální ischemií. Navícpoměrně nízká potence theofyllinu má za následek, že dávky, kte-ré jsou žádoucí pro dosažení požadovaného specifického farmakolo-gického účinku, jsou blízké dávkám, při kterých se mohou uplatniti závažné centrální vedlejší účinky. V evropské zveřejněné patentové přihlášce EP A2 383589jsou uvedeny vzorce některých 2-furylpyrazolo/2,3-a//1,3,5/-tria-zinů, aniž by zde byly uvedeny detailnější informace o přípra-vě těchto triazinů. Těmto sloučeninám zde rovněž není připisovánožádné terapeutické použití.

Terapeutické použití je připisováno některým triazolo- /1,5-a//1,3,5/triazinům a pyrazolo/2,3-a//1,3,5/triazinům, kte- ré nemají 2-furylový substituent. V tomto smyslu byly některé 3 triazolo/1,5-a//1,3,5/triaziny popsány jako bronchodilatátory(viz patent US 4734413). Některé pyrazolo/2,3-a//1,3, 5/triazinybyly různě popsány jako inhibitory sekrece žaludeční kyseliny(viz britská zveřejněná patentová přihláška 2134107 a evropskázveřejněná patentová přihláška EP A2 0172608), jako protizáně-tová činidla (viz evropské zveřejněné patentové přihlášky EP A20172608 a EP A2 2077651), jako bronchodilatátory (viz britskázveřejněná patentová přihláška GB 2016002, belgický patent815405 a patent US 3995039) a jako inhibitory fosfodiesterázy(viz patent US 3846423 a J. Med. Chem., 1982, 25(3), 243-9).

Evropská zveřejněná patentová přihláška EP A1 459702 po-pisuje některé 2-heteroaryltriazolo/1,5-a//1,3,5/triaziny apyrazolo/2,3-a//1,3,5/triaziny vykazující antagonizující účinekvůči adenosinu.

Nyní bylo nově zjištěno (a toto zjištění tvoří základtohoto vynálezu), že skupina nových 2-furyl-triazolo/1,5-a/-/1,3,5/triazinů a pyrazolo/2,3-a//1, 3,5/triazinů dále definova-ného obecného vzorce I je skupinou sloučenin vykazujících účinnýantagonizující účinek vůči adenosinu a zejména vůči jeho dilatačnímu účinku.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu je sloučenina obecného vzorce I NHR1

ve kterém 4 R1 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 6 uhlíko- vými atomy nebo alkanoylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkový-mi atomy, R znamená fenylovou skupinu, přes atom uhlíku připojený aromatický 5- nebo 6-členný heterocyklický kruh obsahují-cí jeden z atomů' z množiny,zahrnující atom kyslíku aatom síry, a/nebo jeden nebo dva atomy dusíku, nebo alky-lovou, alkenylovou nebo alkinylovou skupinu*s 1 až 8 uhlí-kovými atomy, která je nesubstituována a nebo substituo-vána fenylovou skupinou nebo přes atom uhlíku připojenýmaromatickým 5- nebo 6-členným heterocyklickým kruhemobsahujícím jeden z atomů z množiny, zahrnující atom kys-líku a atom síry a/nebo jeden nebo dva atomy dusíku, při-čemž každá z uvedených fenylových skupin je nesubstituo-vána nebo substituována jednou, dvěma nebo třemi alkylo-vými skupinami s 1 až 4 uhlíkovými atomy, alkoxylovými skupinami s 1 až 4 uhlíkovými atomy, trifluormethylovýmiskupinamim hydroxylovými skupinami, benzyloxy-skupinaminebo alkanoyloxy-skupinami s 1 až 5. uhlíkovými atomy nebojedním, dvěma nebo třemi atomy halogenů, přičemž tytosubstituenty mohou být totožné nebo odlišné, a A znamená atom dusíku nebo skupinu CT, ve které T znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovýmiatomy, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

Je třeba uvést, že některé ze sloučenin obecného vzorce I mohou existovat a být izolovány v jedné nebo několika odliš-ných enantiomerních nebo racemických formách (nebo ve formějejich směsí). Je samozřejmé, že vynález zahrnuje všechny ta-kové formy, které mají schopnost antagonizovat účinky adenosi-nu, přičemž příprava individuálních enantiomerních forem jevelmi dobře známa a provádí se například syntézou z příslušnýchchirálních výchozích produktů nebo štěpením racemické formy.Stejně tak mohou být adenosin-antagonizující vlastnosti každétakové specifické formy snadno vyhodnoceny, například použitím 5 jednoho nebo několika ze standardních testů in vitro nebo invivo, které budou detailně popsány dále.

Obecný substituent R1 může například znamenat atom vodí-ku, methylovou skupinu nebo acetylovou skupinu. Výhodně obec-ný substituent R1 znamená atom vodíku. 2 V případě, že obecný substituent R znamena alkylovou,alkenylovou nebo alkinylovou skupinu s 1 až 8 uhlíkovými atomy,potom tato skupina může být nerozvětvená nebo rozvětvená. Sub-stituovaná alkylová, alkenylová nebo alkinylová skupina s 1 až8 uhlíkovými atomy je výhodně koncově substituovanou skupinou. V případě, že obecný substituent R znamená alkenylovou neboalkinylovou skupinu, potom je tato skupina výhodně připojena kpoloze 5 triazinového kruhu přímo přes dvojnou nebo trojnouvazbu. Alkenylová skupina může mít konfiguraci E nebo Z.

Specifickými příklady alkylových, alkenylových nebo alki-nylových skupí s 1 až 8 uhlíkovými atomy jsou: v případě alkylové skupiny: methylová skupina, ethylová skupina,propylová skupina, butylová skupina,pentylová skupina a hexylová skupi-na, v případě alkenylová skupiny: ethenylová skupina, propenylová skupina, butenylová skupina, pen-tenylová skupina a hexenylováskupina, a v případě alkinylová skupiny: ethinylová skupina, propinylová skupina, butinylová skupina, penti-nylová skupina a hexinylová skupina 2

Obecný substituent R výhodně znamená skupinu obecného vzorce R (CHn) X , ve kterém n znamená 0 nebo celé číslo od 12 n m do 6, m znamená 0 nebo 1, X znamená skupinu HC=CH nebo C=C aRJ znamená fenylovou skupinu, která je nesubstituována nebo sub-stituována jedním, dvěma nebo třemi substituenty zvolenými zeskupiny zahrnující alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, 6 alkoxylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, atom halogenu,trifluormethylovou skupinu, hydroxylovou skupinu, benzyloxy-sku-pinu nebo alkanoyloxy-skupinu s 1 až 5 uhlíkovými atomy, nebopřes atom uhlíku připojený aromatický 5- nebo 6-členný heterocyklický kruh obsahující jeden atom zvolený ze skupiny,zahrnující atomkyslíku a atom síry, a/nebo jeden nebo dva atomy dusíku, nebo vpřípadě, kdy n je vyšší než 0, atom vodíku.

Specifickými příklady substituentů, které mohou být pří-tomné na fenylové skupině jsou: v případě alkylové skupiny s 1 až 4 uhlíkovými atomy: methylováskupina nebo ethylová skupina, v případě alkoxylové skupiny s 1 až 4 uhlíkovými atomy: methoxy-lová nebo ethoxylová skupina, v případě atomu halogenu: atom fluoru a atom chloru a v případě alkanoyloxy-skupiny s 1 až 5 uhlíkovými atomy: piva-loyloxy-skupina. Příklady' nesubstituované a substituované fenylové skupi-ny zahrnují fenylovou skupinu, 2-methylfenylovou skupinu, 4-me-thylfenylovou skupinu, 4-methoxyfenylovou skupinu, 3-fluorfeny-lovou skupinu, 3-5-difluorfenylovou skupinu, 3-trifluormethylo-vou skupinu, 4-fluormethylfenylovou skupinu, 4-hydroxyfenylovouskupinu, 4-benzyloxyfenylovou skupinu a 4-pivaloyloxyfenylovouskupinu.

Specifickými příklady přes atom uhlíku připojeného aro-matického 5- nebo 6-členného heterocyklického kruhu obsahují-cího jeden z atomů kyslíku a síry a/nebo jeden nebo dva atomydusíku jsou thiofenylová skupina, furylová skupina, pyridylováskupina a thiazolylová skupina.

Specifickými příklady obecného substituentu n jsou 0 a 2. * X Z 2 Příklady specifických významů obecného substituentu Rjsou fenylová skupina, 3-fluormethylfenylová skupina, 4-methoxy-fenylová skupina, 4-methylfenylová skupina, 3-fluorfenylová 7 skupina, 3,5-difluormethylová skupina, thiofenylová skupina,4-benzyloxybenzylová skupina, 1-hexinylová skupina, 3-butinylováskupina, 2-fenylethinylová skupina, 2-fenylethylová skupina a3-fenylpropylová skupina.

Obecný substituent A muže například znamenat N nebo CT,kde T znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu. Výhodně obec-ný substituent A znamená N nebo skupinu CH.

Specifické farmaceuticky přijatelné soli sloučenin obec-ného vzorce jsou například soli s kyselinami poskytujícími fysio-logicky přijatelné anionty, například soli se silnými kyselinami,jakými jsou například kyselina chlorovodíková, kyselina bromovo-díková, kyselina sírová, kyselina fosforečná, kyselina methansul-fonová a kyselina trifluoroctová. Kromě toho v případě dostateč-ně bázických sloučenin obecného vzorce I zahrnují vhodné solitaké například soli s organickými kyselinami poskytujícími fysio-logicky přijatelný aniont, jakými jsou například soli s kyseli-nou itavelovou, kyselinou citrónovou nebo kyselinou maleinovou.Některé sloučeniny obecného vzorce I, například sloučeniny, vekterých R zahrnuje fenolovou skupinu, mohou tvořit bázické solis bázemi poskytujícími fysiologickv přijatelné kationty, jakýmijsou soli mající jako kationt alkalický kov nebo kov alkalickýchzemin.

Sloučeniny obecného vzorce I mohou být připraveny za použitípostupů, které jsou analogické s postupy velmi dobře známýmiv oboru chemie heterocyklů a obecně v odvětví organické chemiepro přípravu strukturně analogických sloučenin. Tyto postupyrovněž spadají do rozsahu vynálezu a zahrnují následné výhodnézpůsoby přípravy sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R , Ra A mají některé z výše definovaných významů.

a) Reakce sloučeniny obecného vzorce II

8 ve kterém Z znamená vhodnou odštěpitelnou skupinu, napříkladhydrokarbylsulfonylovou skupinu, jakou je alkylsulfonylováskupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy (například methylsulfonylo-vá skupina nebo ethylsulfonylová skupina) nebo atom halogenu(například atom chloru, atom bromu nebo atom jodu) s přísluš-ným organokovovým činidlem (jakým je Grignardovo činidlo obec- 2 ného vzorce R MgY, ve kterém Y’ znamená atom halogenu (napříkladatom chloru, atom bromu nebo atom jodu).

Tato reakce se vhodně provádí při teplotě v rozmezí na-příklad od 10 do 120 °C, zejména při teplotě v rozmezí od 15do 80 °C a ve vhodném rozpouštědle nebo ředidle, jakým jeether, například diethylether nebo tetrahydrofuran. Tento způ-sob je obzvláště účinný pro přípravu sloučenin obecného vzor- 2 ce I, ve kterém R znamená nesubstituovanou nebo substituova-nou fenylovou skupinu.

Výchozí sloučeniny obecného vzorce II mohou být získányvelmi dobře známými standardními postupy. Tak napříkla slouče-niny obecného vzorce II, ve kterém Z znamená alkylsulfonylo-vou skupinu, mohou být připraveny oxidací odpovídajícího alkyl-thio-derivátu obecného vzorce III NHR1

- 4 ve kterem R znamena alkylthio-skupinu s 1 az 6 uhlíkovými atomy,za použití konvenčního oxidačního činidla, jakým je peroxykyselina,například kyselina peroxyoctová, kyselina peroxybenzoová nebokyselina chlorperoxybenzoová, vhodně při teplotě například 0až 40 °C a ve vhodném rozpouštědle nebo ředidle, jakým je di- 9 chlormethan nebo chloroform. Podobně mohou být sloučeniny obec-ného vzorce II, ve kterém Z znamená atom chloru nebo atom bro-mu, připraveny například reakcí alkylthioderivátu výše uvede- „ , 4 ného obecného vzorce III (zejména v průpade, kdy R znamena me-thylthio-skupinu nebo ethylthio-skupinu) s chlorem nebo bromemv přítomnosti chlorovodíku nebo bromovodíku při teplotě v roz-mezí například od -20 do 15 ° a v inertním polárním rozpouštědle,jakým je ethanol nebo 2-propanol. V případě, že se použije Grignardovo činidlo obecného2 . vzorce R MgY, potom múze byt toto činidlo připraveno m sítu ~ 2reakci sloučeniny obecného vzorce R Y s hořčíkem.

Výchozí alkylthio-sloučenina výše uvedeného obecnéhovzorce III může být zase získána například reakcí sloučeninyobecného vzorce IV

s příslušným dialkyl-N-kyanodithioiminokarbonátem obecného vzor-ve V,

ve kterém R4 má některý z výše uvedených významů, při zvýšené teplotě, například při teplotě 60 až 200 °c, vhodně ve formě 10 taveniny v nepřítomnosti rozpouštědla nebo ředidla za vznikusloučeniny výše uvedeného obecného vzorce III, ve kterém R1 zna-mená atom vodíku. Jestliže je žádoucí připravit sloučeninu obec-ného vzorce I, ve kterém R znamená alkylovou skupinu, potom semůže konvenčním způsobem alkylovat nebo acylovat sloučeninaobecného vzorce III, ve kterém R^ znamená atom vodíku.

Je samozřejmé, že v některých případech, kdy A znamenáatom dusíku, může být v průběhu reakce sloučeniny obecného vzor-ce IV se sloučeninou obecného vzorce V získána rovněž isomerní7-alkyl-5-amino-sloučenina obecného vzorce VI

přičemž získaný směsný produkt může být rozdělen konvenčnímipostupy, například chromatograficky.

Výchozí sloučenina obecného vzorce IV, ve kterém A zna-mená atom dusíku, může být zase získána reakcí příslušného iminietheru obecného vzorce VII

(VII) ve kterém R znamená alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými ato- my, jakou je methylová skupina nebo ethylová skupina (vytvoře- ného z 2-furonitrilu a alkoholu obecného vzorce R.OH v přitom- nosti bezvodé kyseliny, jakou je chlorovodík) s aminoguanidi-novou solí (zejména s nitrátem) v přítomnosti vhodné báze, ja-kou je pyridin nebo 2,6-lutidin, která může být rovněž použitajako reakční rozpouštědlo, při teplotě například 60 až 120 °C.

Výchozí sloučenina výše uvedeného vzorce IV, ve kterémA znamená skupinu CT, může být získána například reakcí přísluš-ného esteru obecného vzorce VIII

co2R (VIII) ve kterém R znamená nižší alkylovou skupinu, jakou je methylo-vá nebo ethylová skupina, za bazických podmínek se solí alka-lického kovu obecného vzorce T.CHM.CN, ve kterém M znamenáalkalický kov, jakým je sodík nebo lithium, vhodně připravenouin šitu přidáním nitrilu obecného vzorce T.CHM.CN k roztokualkalického kovu v kapalném amoniaku, za vzniku odpovídající-ho kyanoalkylketonu obecného vzorce IX.

COCH(T)CN (IX)

Posledně uvedená sloučenina se potom cyklizuje s hydrazinem,například zahřátím ve vhodném rozpouštědle nebo ředidle, jakým jeethanol nebo propanol, za vzniku požadovaného pyrazolu výšeuvedeného obecného vzorce IV. b) Sloučenina výše uvedeného obecného vzorce IV se uvede 12

v reakci při zvýšené teplotě se sloučeninou obecného vzorceX

ve kterém Z^ znamená odštěpitelnou skupinu (jakou je alkylthio-skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy, například methylthio-skupina)

Tato reakce se obecné provádí při teplotě například 60až 200 °C a může být provedena v nepřítomnosti rozpouštědlanebo ředidla. Alternativně může být použito libovolné konvenč-ní rozpouštědlo nebo ředidlo, které je obecně inertní a máadekvátní teplotu varu. Je třeba uvést, že za určitých podmí-nek, kdy A znamená atom dusíku, například v případě, kdy sereakce provádí za teploty, která je pouze o málo vyšší nežokolní teplota, je možné získat významné množství termodyna-micky méně stabilního isomerního /1,2,4/triazol/4,3-a//1,3,5/-triazinového derivátu obecného.vzorce XI

a tento směsný isomerní produkt může být rozdělen konvenčními postupy, například chromatograficky.

Sloučeniny obecného vzorce X mohou byt připraveny meto-dou popsanou v Arch. Pharm. (Weinheim), 303(8), 625-33. c) Vynález zahrnuje i další způsob přípravy sloučeninyobecného vzorce I, ve kterém A znamená N, při kterém docházík přesmyku /1,2,4/triazolo/4,3-a//1,3,5/triazinového derivátuvýše uvedeného obecného vzorce·XI.

Tento přesmyk se obecně provádí zahřátím sloučeniny obec-ného vzorce XI ve vhodném rozpouštědle nebo ředidle, napříkladv álkanolu s 1 až 6 uhlíkovými atomy, jakým je ethanol, 2-pro-panol nebo butanol, při teplotě 60 až 140 °C. Uvedený přesmykmůže být případně proveden v přítomnosti kyselého nebo bázické-ho katalyzátoru, kterým je například alkoxid nebo hydroxidalkalického kovu, například hydroxid sodný. Výchozí sloučenina výše uvedeného obecného vzorce XImůže být například získána postupem popsaným v souvislosti sodstavce b). d) Za účelem přípravy sloučenin obecného vzorce I, ve kte-rém R zahrnuje hydroxyfenylový zbytek, se provede odstraněníochranné skupiny z odpovídajícího derivátu obecného vzorce I,ve kterém je hydroxy-skupina chráněna, například benzylovouskupinou.

Je třeba uvést, že sloučeniny obecného vzorce I, ve kte- 2 rém R zahrnuje hydroxyfenylový zbytek zahrnují jak sloučeniny, , 2 ve kterých R znamena hydroxyfenylovou, tak i sloučeniny, vekterých část obecného substituentu tvoří hydroxyfenylová skupinaa obecný substituent R takto například znamená hydroxyfenyl-alkylovou skupinu.

Použitelné ochranné skupiny a podmínky, za kterých setakové ochranné skupiny odstraňují,jsou pro hydroxylové skupinyvelmi dobře známé, přičemž se použijí takové ochranné skupinya podmínky k jejich odstranění, které jsou kompatibilní s ostat-ními přítomnými reakčními skupinami sloučeniny obecného vzorce I. Tak například benzylová skupina může být odstraněna hydroge- 14 nací v přítomnosti vhodného hydrogenačního katalyzátoru, jakýmje například paladium na uhlí, při atmosférickém tlaku vodíku ne-bo při tlaku vodíku, který je blízký atmosférickému tlaku, vevhodném inertním ředidle nebo rozpouštědle, jakým je napříkladmethanol, ethanol nebo terč.butylmethylether, a při okolní te-plotě nebo při teplotě, která je blízká okolní teplotě.

Chráněné deriváty obecného vzorce I mohou být připrave-ny za použití postupů, které jsou analogické s postupy uvedenýmive výše uvedených odstavcích a) až c) a e), přičemž se však vy-chází z příslušně chráněných výchozích sloučenin. e) Za účelem přípravy sloučeniny obecného vzorce I, ve kte-2 rém R znamená nesubstituovanou nebo substituovanou alkinylo-vou skupinu (jakou je na příklad skupina obecného vzorceR^(CH2)nC = C), se sloučenina obecného vzorce II, ve kterém Zznamená atom jodu, uvede v reakci s vhodným alkinem (jakým jenapříklad sloučenina obecného vzorce R^cí^) C = CH) v přítom-nosti paladiového katalyzátoru.

Vhodné paladiové katalyzátory zahrnují katalyzátory obsahující paladnaté soli, například octan paladnatý nebo chlorid pa-ladnatý, fosfin, jakým je například trifenylfosfin, a případněterciární amin, jakým je například triethylamin, a/nebo jodidmědný.

Uvedená reakce se vhodně provádí při teplotě v teplotnímrozmezí od 0 do 100 °C, výhodně při teplotě 10 až 40 °C. Vhodnározpouštědla pro uvedenou reakci zahrnují amidy, například di-methylformamid.

f) Za účelem přípravy sloučenin obecného vzorce I, ve kte-rém A znamená atom dusíku a R1 znamená atom vodíku nebo alkylo-vou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy, se sloučenina obecnéhovzorce XII 15

N, // \ (XII)

-i ve kterém Z^ znamená vhodnou odštěpítelnou skupinu, napříkladaryloxy-skupinu (například fenoxy-skupinu), alkylthio-skupinu(například methylthio-skupinu) nebo atom halogenu (napříkladatom chloru nebo atom bromu), uvede v reakci se sloučeninou obec-ného vzorce R^NH^.

Uvedená reakce se výhodně provádí při teplotě například0 až 100 °C. Vhodná rozpouštědla pro tuto reakcí zahrnují alko-holy, například ethanol, a ethery, například tetrahydrofuran. V případě, že R znamená atom vodíku, potom je obzvláště vhodnépoužít roztok amoniaku v alkoholu, jakým je například ethanol,a pracovat při okolní teplotě.'. x 2

Sloučeniny obecného vzorce XII, ve kterém R znamená nesub-stituovanou nebo substituovanou alkinylovou skupinu s 1 až 8uhlíkovými atomy, mohou být získány reakcí sloučeniny obecnéhovzorce XIII N, (XIII) 1 6 s alkinem v přítomnosti paladiového katalyzátoru postupem po-psaným ve výše uvedeném odstavci e).

Sloučeniny obecného vzorce XII, ve kterých R znamenánesubstituovanou nebo substituovanou alkylovou nebo alkenylo-vou skupinu s 1 až 8 uhlíkovými atomy, mohou být připraveny hydrogenací odpovídající sloučeniny obecného vzorce XII, ve kte-rém R znamená nesubstituovanou nebo substituovanou alkinylo-vou skupinu, za použití konvenčního způsobu, například hydro-genací v přítomnosti paladia na uhlí.

Sloučeniny obecného vzorce XIII mohou být připravenyreakcí sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce VI (která mů-že být připravena výše popsaným způsobem), ve kterém A znamenáatom dusíku, s dijodmethanem a amylnitritem. Tato reakce sevhodné provádí při teplotě 50 až 150 °C ve vhodném rozpouštěd-le, jakým je například dichlormethan.

Sloučeniny obecného vzorce XII mohou být alternativněpřipraveny dehydratací sloučeniny obecného vzorce XIV.

Zb

N N

O

Vhodná dehydratační činidla, která jsou použitelná pro uvede-nou' dehydratační reakci, zahrnují například oxid fosforečnýnebo sulfonylchlorid, jakým je například p-toluensulfonylchlo-rid. Uvedená dehydratace se vhodně provádí při teplotě 60 až100 °C. V případě, že se použije oxid fosforečný, potom vhodnározpouštědla zahrnují aromatické uhlovodíky, jakými jsou xylennebo toluen. V případě, že se použije sulfonylchlorid, potomvhodná rozpouštědla zahrnují terciární aminy, jako napříkladpyridin. 17

Sloučeniny výše uvedeného vzorce XIV mohou byt získányreakcí sloučeniny obecného vzorce XV

(XV) s 2-halogenkarbonylfuranem, jakým je například 2-chlorkarbonylfuran. Tato reakce může být vhodně provedena při teplotě -10až 40 °C. Vhodná rozpouštědla pro tuto reakci zahrnují haloge-nované uhlovodíky, například dichlormethan.

Sloučeniny obecného vzorce XV mohou být získány reakcisloučeniny obecného vzorce XVI

N N

ve kterém Zc znamená odštěpitelnou skupinu, s hydrazinem.

Alternativně mohou být sloučeniny obecného vzorce XIIzískány reakcí sloučeniny obecného vzorce XVI se sloučeninouobecného vzorce XVII.

o CONHNH. (XVII) 18

Sloučeniny obecného vzorce XVI mohou být připraveny po-stupy popsanými v Synthesis,(11), 907-8, 1981 a Synthesis (1),40-2,1978.

Je třeba uvést, ze sloučeniny, ve kterých R má jiný vý-znam než atom vodíku, mohou být rovněž získány provedením kon-venční alkylace nebo acylace odpovídající sloučeniny obecnéhovzorce I, ve kterém R znamená atom vodíku, získané některýmz postupů popsaných ve výše uvedených odstavcích a) až f).

Rovněž je třeba uvést, že sloučeniny obecného vzorce I, , 2 ve kterem R obsahuje acyloxy-skupinu, například sloučeniny, 2 . ve kterých R znamená alkanoyloxyfenylovou skupinu, ve kteréalkanoylový zbytek obsahuje 1 až 5 uhlíkových atomů, nebo alka-noyloxyf enylalkylovou skupinu, ve které alkanoylový zbytek obsahuje 1 až 5 uhlíkových atomů a alkylový zbytek obsahuje 1 až 8uhlíkových atomů, mohou být připraveny acylací odpovídajících sloučenin obecného vzorce I, ve kterém R zahrnuje hydroxylovou, 2 skupinu, například sloučenin, ve kterých R znamena hydroxyfe-nylovou skupinu nebo hydroxyfenylalkylovou skupinu, ve kteréalkylový zbytek obsahuje 1 až 8 uhlíkových atomů. Tato acylacemůže být provedena reakcí s libovolným koncenčním acylačnímčinidlem, například s alkanoylhalogenidem, ve kterém alkanoylo-vý zbytek obsahuje 1 až 5 uhlíkových atomů, nebo s anhydridemalkanové kyseliny obsahující 1 až 5 uhlíkových atomů.

Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých R znamená nesubstituovanou nebo substituovanou alkylovou nebo alkenylo- vou skupinu,mohou být vhodně připraveny hydrogenací odpovídá-2 jící sloučeniny, ve které R znamená alkenylovou nebo alkinylo-vou skupinu, provedenou konvenčním způsobem, například za po-užití katalyzátoru na bázi paladia na uhlí. V případě, že je zapotřebí připravit farmaceutickypřijatelnou sůl sloučeniny obecného vzorce I, potom může býttaková sůl připravena například reakcí sloučeniny obecnéhovzorce I s příslušnou kyselinou nebo bází poskytující fysio-logicky přijatelný iont nebo jiným konvenčním postupem.

Podobně,je-li zapotřebí připravit opticky aktivní formu chirální sloučeniny obecného vzorce I, potom může být taková 19 opticky aktivní forma připravena provedením některého z postupůpopsaných ve výše uvedených odstavcích a) až f) za použitípříslušných opticky aktivních výchozích látek nebo alternativněrozštěpením odpovídající racemické formy provedeném konvenčnímpostupem, například za použití opticky aktivní formy vhodnékyseliny. Některé z výchozích látek použitých při způsobech podle vynálezu jsou novými sloučeninami a jako takové spadají rovněž do rozsahu vynálezu. Tak například vynález poskytuje sloučeniny obecného vzorce XI, ve kterém R a R mají výše uvedený význam.

Vynález rovněž poskytuje sloučeniny obecného vzorce XII, ve2 kterém R a Ζ,θ mají výše uvedený význam.

Jak již bylo uvedeno výše, jsou sloučeniny podle vynále-zu schopné antagonizovat jeden nebo několik fysiologických účinků adenosinu a jsou takto využitelné při léčení onemocnění astavů postihujících srdeční, periferní a/nebocerebrální cévnísystém, například při léčení ischemických srdečních onemocnění,periferních cévních onemocnění (klaudikace) a cerebrální sche-mie. Sloučeniny podle vynálezu mohou být rovněž použity proléčení migrény. Účinky sloučenin obecného vzorce I ve funkci antagonizu-jících činidel adenosinových receptorů mohou být demonstroványjedním nebo několika z následujících standardních testů in vivoa/nebo in vitro. a) Test stanovující afinitu k A2~adenosinovým receptorům

Tento test vyhodnocuje schopnost testovaných adenosin-antagonizujících činidel vytěsnit známé adenosinové mimetickéčinidlo /^H/-N-ethylkarboxamidoadenosin (NECA) z vazných místna membránových preparátech odvozených z krysí feochromocyto-mické buněčné řady PC 12 (dostupná u Beatson Institut,

Glasgow). Základní metodika tohoto testu byla popsána Williams-em a kol. v J. Neurochemistry, 1987, 48(2), 498-502.

Membránový preparát se získá následujícím způsobem. 20

Zmrazené pelety buněk PCI 2 se dvakrát promyjí ledově chladnýmpufrovaným fysiologickým roztokem a buňky se opětovně izolujíodstředěním (1500 G) při teplotě 3°C. Oddělené buňky se potomsuspendují v hypotonickém roztoku (destilovaná voda), suspenzese odstaví na ledu po dobu 30 minut, načež se pečlivě homogeni-zuje za použití standardního vysokootáčkového homogenizéru zaperiodického chlazení ledem, přičemž se získá jemná suspenze.Homogenizát se potom odstředí (48000 G) a získaná peleta seresuspenduje v 50 mM tris-HCl-pufru (pH 7,4) obsahujícím ade-nosin-deaminázu (5 jednotek/ml, typ IV z telecí intestinálnísliznice, dostupný u firmy Sigma Chemical Corporation pod ozna-čením A1280). Získaná směs se potom inkubuje při teplotě 37 °C.

Po 20 minutách se reakce ukončí zředěním ledově chladným pufrema suspenze se umístí na led. Získaný materiál obsahující bu-něčné membrány se izoluje odstředěním, promytím resuspendová-ním v pufru a opětovným odstředěním. Získaná peleta se potomresuspenduje v ledově chladném pufru za použití ručně poháněné-ho homogenizéru. Získaná membránová suspenze se zmrazí a uskladnípod kapalným dusíkem až do okamžiku, kdy se použije za účelemuvedeného testu..

Studium vaznosti k receptorovým místům se provádí zapoužití mikrotitračních ploten, přičemž směsi použité při tes-tu jsou pufrované v 50 mM tris-HCl-pufru (pH 7,4) při okolníteplotě. Testovaná sloučenina se rozpustí v dimethylsulfoxidu(DMSO), načež se zředí pufrem, který se při testu používá, při-čemž se získá testovaný roztok (finální koncentrace dimethyl-sulfoxidu by neměla překročit 1 % objemu, nebot tato koncentra-ce ještě neovlivňuje vazbu radiačně značeného ligandu k membrá-novému receptoru(. Inkubace se provádí při teplotě 30 °C podobu 90 minut v celkovém objemu 150/Ul, obsahujícím testovanýroztok nebo pufr (50/Ul), tritiovaný / H/-N-ethylkarboxamido-adenosin (50/Ul) a membránovou suspenzi (50/Ul). Po inkubacise vzorky rychle zfiltrují přes skleněnou fritu na bázi skleně-ných vláken a skleněná frita se promyje za účelem odstraněníradiačně značeného ligandu, který není vázán k membránovýmreceptorúm. Množství radiačně značeného ligandu zbylé naskleněné fritě (a tedy vázaného k receptorúm membrány) se po- 21 tom stanoví kapalinovou scintilační metodou. Filtrace a promy-tí se provádí za použití konvenčních zařízení pro vakuové odfil-trování buněk. Stanoví se specifická vazba k receptorům (defino-vaná jako rozdíl mezi celkovou vazbou k receptorům a nespecific-kou vazbou) v přítomnosti konkrétní testované sloučeniny a tentovýsledek se srovná s výsledkem získaným při kontrolní zkoušce,kdy se inkubace provádí pouze v přítomnosti pufru. Získané vý-sledky jsou potom vhodně vyjádřeny jako záporný logaritmus kon-centrace nezbytné k dosažení 50% vytěsnění radiačně značenéholigandu z vazných receptorových míst za podmínek kontrolní zkouš-ky (pic50).

Sloučeniny obecného vzorce I vykazující antagonizujícíúčinnost při tomto typu stanovení mají při výše uvedeném testu a) obecně ρΙΟ^θ rovnou 6 nebo ještě vyšší. Tak například slouče-nina z dále uvedeného příkladu 1 má plC^g rovnou asi 7,6. Zapoužití stejného testovacího postupu byla pro známou sloučeninu 1,3-dimethylxanthin stanovena hodnota ρΙΟ^θ asi 5. b) Test stanovující konstrikci aorty (srdečnice) morčete

Tento test byl popsán Collis-em a kol. (British J. Pharma-cology, 1989, 97, 1274-1278) a. vyhodnocuje schopnost testovanésloučeniny antagonizovat zeslabující účinek adenosinu na fenyl-efrinem indukovanou konstrikci preparátu tvořeného kroužkemsrdečnice morčete, přičemž uvedený účinek je mediován prostřednictvím adenosinového receptoru známého jako

Uvedený preparát tvořený kroužkem srdečnice morčetese připraví následujícím způsobem. Sektory (3 až 5 mm) torakál-ní srdečnice morčete (kmen Dunkin Hartley, samečkové s těles-nou hmotností 250 až 400 g) se fixují v orgánových lázních obsa-hujících okysličovaný Krebsův roztok (95 % kyslíku a 5 % oxiduuhličitého) mající teplotu 37 °C (v tomto Krebsově roztoku jepřítomen nukeosidový transportní inhibitor dipyridamol v množství10/UM). Zaznamená se vývoj isometrického napětí, tkáň vystavíklidovému napětí 1 g a ponechá se v klidu po dobu jedné hodinyk dosaž.ení rovnovážného stavu. Kroužek srdečnice se potom sen- 22 sibilizuje 10 fenylefrinu. Ke kroužkovému preparátu srdečnicese potom přidá Erythro-9-(2-hydroxy-3-nonyl)adenin (EHNA) (10/UM)a po 10 minutáh se v tkáni vyvolá konstrikce odpovídající asi50 % maximální hodnoty přidáním 3 x 10 fenylefrinu. Potom sepřidává kumulativně adenosin (10 Maž 10 M) a měří se takto vy-volaná relaxace. Po 20 minutovém vymytí preparátu se přidá 10roztok testované sloučeniny' v dimethylsulfoxidu (maximálně 1 %objemu) zředěný Krebsovým roztokem a preparát se takto ponecháv klidu po dobu 30 minut za účelem dosažení rovnovážného stavu.

Po 20 minutách průběhu rovnovážné periody se přidá další množst-ví erythro-9-(2-hydroxy-3-nonyl)adeninu (10/UM) ke kroužkovémupreparátu a po dalších 10 minutách se do prostředí preparátuzavede fenylefrin (3 x 10 θΜ) za účelem vyvolání opětovné kon-strikce. Po vymytí preparátu se provede opakované stanovení křiv-ky dávka-odezva pro adenosin.

Testované sloučeniny se vyhodnotí vynesením do grafupozorované procentické relaxace proti logaritmu koncentrace ade-nosinu, přičemž kompetitivní antagonismus adenosinového účinkuzpůsobí paralelní posuv ve standardní křivce koncentrace adeno-sinu-relaxace (dávková odezva). Dávkový poměr (DR) se vypočtez poměru koncentrace adenosinu nezbytné k vyvolání 50% relaxace(ED^g) v přítomnosti testovaného antagonizujícího činidla kekoncentraci adenosinu ΕΟ^θ v nepřítomnosti uvedeného testované-ho antagonizujícího činidla, přičemž tyto dávkové poměry se vy-počtou pro každý srdečnicový kroužek. Významnou antagonizujícíúčinost vykazuje antagonizující činidlo tehdy, jestliže pro nějbyla při tomto testu stanovena hodnota uvedeného dávkového po-měru vyšší než 2. Za použití standardních výpočtových technikmůže být rovněž vypočtena hodnota pA2 představující odhad kon-centrace antagonizujícího činidla poskytující dávkový poměr 2.

Za použití stejné metodiky byla pro známou sloučeninu 1,3-di-methylxanthin stanovena hodnota pA2 asi 5. c) Atriální bradykardický test s morčetem

Tento test byl rovněž popsán Collis-em a kol. (British J. Pharmacology, 1989, 97, 1274-1278) a vyhodnocuje schopnost 23 testované sloučeniny antagonizovat bradykardický účinek adeno-sinového mimetika (2-chloradenosin) v bijícím atriálním prepa-rátu získaném z morčete, přičemž tento účinek je mediován pro-střednictvím adenosinového receptoru známého jako A^.

Uvedený atriální párový preparát může být získán násle-dujícím způsobem. Atriální páry získané z morčat (kmen DunkinHartley, samečkové s tělesnou hmotností 250 až 400 g) se fixujív orgánových lázních obsahujících okysličovaný Xrebsův pufrovaciroztok (95 % kyslíku a 5 % oxidu uhličitého) mající teplotu37 °C. Na spontánně bijící atria se potom vloží klidové napětí1 g, načež se ponechají při kontinuálním přetoku po dobu 50 mi-nut za účelem dosažení rovnovážného stavu. Přetok se potom za-staví a přidá se adenosin-deamináza (1 jednotka/ml) za účelemzabránění akumelace endogenně produkovaného adenosinu. Po 15 mi-nutové periodě sloužící k dosažení rovnovážného stavu se zaúčelem stanovaní křivky odezvy na kumulativní dávku adenosinc-vého mimetika podává 2-chloradenosin (10 M az 10 Ή) k dosazenimaximálního zpomalení atriálního rytmu. Po 30 minutovém vymývá-ní se do lázně přidá adenosin-deamináza a lázeň se ponechá vklidu po dobu 15 minut za účelem dosažení rovnovážného stavu.

Do lázně se potom přidá 10 roztok testované sloučeniny v di-methylsulfoxidu a lázeň se ponechá inkubovat po dobu 30 minut.Před zopakováním stanovení křivky dávka-odezva pro 2-chlorade-nisin nebyl pozorován žádný účinek testované sloučeniny naatriální rytmus. Sloučeniny, které antagonizují účinek adenosinusnižují odezvu 2-chloradenosinu.

Testované sloučeniny se vyhodnotí srovnáním křivky dáv-ka-odezva pro samotný 2-chloradenosin s křivkou dávka-odezvapro 2-chloradenosin získanou v přítomnosti testované sloučeniny.Kompetitivní adenosin-antagonizující činidla vyvolávají para-lelní posun v křivce dávka-odezva pro adenosin. Dávkový poměr(DR) se vypočte z poměru koncentrace 2-chloradenosinu produkující50% redukci atriálního rytmu (ED^g) v přítomnosti testovanésloučeniny ke koncentraci ED^g 2-chloradenosinu v nepřítomnostitestované sloučeniny, přičemž těnto poměr se stanoví pro každýatriální pár. Způsobem, který je analogický se způsobem uvede- 24 ným ve spojitosti s testem b), se potom získá pA2·. Při tomtotestu byla pro sloučeninu z dále uvedeného příkladu 1 stanovenahodnota pA2 7,4. Stejným způsobem byla pro známou sloučeninu 1,3-dimethylxanthin stanovena hodnota pA2 rovná 5. d) Test na bázi měření krevního tlaku u anestetizovaného kocoura

Tento test vyhodnocuje schopnost testované sloučeninyantagonizovat pokles diastolického krevního tlaku vyvolaný po-dáním adenosinového mimetika (2-chloradenosin).

Kocouři (2 až 3 kg) se anestetizují pentobarbitonemsodným (45 mg/kg, intraperitoneálně), načež se katetrizují:pravá hrdelní žíla (pro infuzi anestetika v množství asi 7 mg/kgza hodinu ve formě 3 mg/ml roztoku v isotonickém fvsiologickémroztoku), levá hrdelní žíla (pro podání testované sloučeniny)a pravá společná krční tepna (pro monitorování krevního tlakua pulsu). .Stanoví se hladina plynu v krvi a hodnota pH a tytoveličiny se udržují ve fysiologických mezích před podáním 2-chloradenosinu. Stanoví se kontrolní křivka dávka-odezva pro2-chloradenosin (0,3 až 30/Ug/kg) udávající pokles diastolické-ho krevního tlaku v závislosti na dávce adenosinového mimetika.Potom se intravenózně podá roztok testované sloučeniny ve směsi50 % obj. polyethylenglykolu (PEG) 400 a 50 % obj. 0,1M hydroxidusodného a po 15 minutách se stanoví křivka dávka-odezva pro 2-chloradenosin. Tento proces se opakuje dvakrát, přičemž se me-zi jednotlivými stanoveními křivky dávka-odezva pro 2-chlorade-nosin monitorují hladina plynu v krvi a hodnota pH a tyto veli-činy se udržují ve fysiologických mezích. Potom se vypočtekoncentrace 2-chloradenosinu potřebná k vyvolání 3,99 kPa po-klesu diastolického krevního tlaku pro každou dávku testovanésloučeniny a sestrojí se Schildúv graf pro tyto testované slou-čeniny a uvedené koncentrace, které vyvolávají dávkový poměr(DR) vyšší než 2. Z uvedeného grafu se stanoví hodnota k_.

O Výše uvedený test může být modifikován tak, že umožňuje vyhodnocení účinnosti perorálně podávaných testovaných slouče- nin, kdy se testovaná sloučenina podává kocourům při vědomí 25 za použití dočasně zavedených arteriálních a venálních katerůa měřením účinku inhibujícího adenosinem indukované sníženíkrevního tlaku. e) Test s anestetizovanými psy

Tento test zahrnuje vyhodnocení účinků testované slou-čeniny na antagonismus účinku adenosinu při snižování srdeč-ního rytmu a zvyšování vasodilatace (měřeno poklesem perfuzníhotlaku v zadní končetině).

Malí stavěči psi (Beagle, tělesná hmotnost 12 až 18 kg)se anestetizují pentobarbitanem sodným (50 mg/kg, intravenozně),načež se katetrizují: pravá hrdelní žíla (pro infuzi anestetikav množství asi 112 mg za hodinu ve formě 3 mg/ml roztoku v iso-tonickém fysiologickém roztoku, pravá brachiální žíla (pro podáníléčiv a testovaných látek), pravá brachiální tepna (pro měřenísvstemického krevního tlaku a pulsu) a levá tepna krční (propodání adenosinu do levé srdeční komory. Podváží se a přetnouoba nervy bloudivé, pravý femorální a sciatický nerv. Před per-fuzí pravé zadní končetiny konstantním krevním průtokem krví ztepny kyčelní se podá injekčně 1250 jednotek heparinu. Pravý běhse potom podváže těsně pod kotníkem. Pokusnému zvířeti se potompodá xamoterol (1 mg/kg) za účelem stabilizace srdečního rytmuna vysoké úrovni a nitrobenzylthioinosin (NBTI, 0,5 mg/kg) zaúčelem inhibice stoupnutí hladiny adenosinu. Pokusné zvířese potom sensibilizuje na adenosin během periody sloužící k do-sažení rovnovážného stavu po NBTI stanovením křivky odezva-dáv-ka (DRC). V průběhu této časové periody se korigují veškeré ne-pravidelnosti hladiny krevního plynu a hodnoty pH. Provede sestanovení kontrolní křivky dávka-odezva, načež se provedou ažtři stanovení křivek dávka-odezva po kumulativním podání testo-vané sloučeniny (jak je to popsáno ve výše uvedeném testu d)).Každé stanovení křivky dávka-odezva se provede 15 minut po po-dání testované sloučeniny a potom, co se měřené parametrysrdečního rytmu a perfuzního tlaku v zadní končetině vrátilydo stabilního stavu. Stejně tak se při těchto stanoveníchudržují hladina plynu v krvi a hodnota pH ve fysiologických me- 26 zích .

Pro každou dávku testované sloučeniny se vypočte množstvíadenosinu nezbytné ke způsobení 50% poklesu mařeného parametru(ED5q)' srdečního rytmu a perfuzního tlaku v zadní konče- tině a ze získaných výsledků se sestrojí Schildúv graf. Z tohotografu se potom stanoví hodnota Kg pro antaginismus odezvy vsrdečním rytmu a pro vasodilaťační odezvu na adenosin. f) Hyperémický test s anestetizovanou kočkou

Tento test zahrnuje vyhodnocení účinku testované slou-čeniny při antagonizování vasodilatační odezvy, ke které dojdepři škubavé kontrakci skeletálního svalu. Uvedená je částečněmediována uvolňováním endogenního adenosinu z kontraktujícíhoskeletálního svalu.

Kočky (tělesná hmotnost 2,4 až 3,6 kg) se anestetizujípentobarbitonem sodným (50 mg.kg \ intraperitoneálně), načežse katetrizují: levá hrdelní žíla (pro infuzi anestetika v množ-ství přibližné 0,12 mg min ve formě 6 mg.ml roztoku v iso-tonickém fysiologickém roztoku), pravá vnější hrdelní žíla (propodání léčiva a testované sloučeniny), pravá společná krčnítepna (pro měření systemického arteriálního krevního tlaku apulsu) a pravá brachiální tepna (pro odvádění krve). Měří se přítok krve do levé zadní končetiny za použitíelektromagnetického průtokoměru uspořádaného okolo levé vnějšítepny kyčelní. V celé levé zadní končetině se způsobí kontrakces frekvencí 3 Hz po dobu 20 minut stimulací sciatického a femorálního nervu. Aktivní napětí produkované svaly extensor digitorumlongus a peroneous longus se isometricky měřítlakovým snímačem.Uvedené kontrakce svalů se u stejného pokusného zvířete opaku-jí dvakrát a to v přítomnosti a v nepřítomnosti testovanésloučeniny. U testovaných sloučenin se vyhodnocuje jejichschopnost redukovat vasodilataci v průběhu kontrakce skeletál-ního svalu. Při tomto testu je pro známou sloučeninu 1,3-dimethyl- xanthin stanovena významná inhibice při dávce 10 mg.kg \ 27

Obecně je nejvýhodnější podávat sloučeniny podle vyná-lezu teplokrevným živočichům za terapeutickými nebo profylaktic-kými účely při léčení nebo při prevenci kardiovaskulárníchonemocnění a nežádoucích stavů ve formě farmaceutické kompozi-ce, obsahující uvedenou sloučeninu obecného vzorce I nebo jejífarmaceuticky přijatelnou sůl ve směsi nebo společně s farmaceu-ticky přijatelným ředidlem nebo nosičem. Takové farmaceutickékompozice spadají rovněž do rozsahu vynálezu.

Obecně se předpokládá, že sloučenina obecného vzorce Ibude podávána perorálně, intravenózně nebo některou jinou lékařs-ky přijatelnou cestou (například inhalací, insuflací, sublingvál-ním podáním nebo transdermálním podáním) tak, aby bylo dosaženodávky například 0,001 až 10 mg/kg (a zejména například 0,05 až5 mg/kg) tělesné hmotnosti příjemce. Je však samozřejmé, žepřesná podaná dávka bude záviset na charakteru a závažnosti lé-čeného onemocnění nebo stavu a na věku a pohlaví pacienta.

Farmaceutická kompozice podle vynálezu může mít rozmanitédávkové formy. Tato kompozice může mít například formu tablet,kapslí, roztoků nebo suspenzí pro perorální podání, formu čípkůpro rektální podání, formu sterilního roztoku nebo suspenzepro podání intravenózní nebo intramuskulární injekcí, formuaerosolu nebo roztoku nebo suspenze pro rozprašovač pro podáníinhalací, formu prášku ve.směsi s farmaceuticky přijatelnýminertním pevným ředidlem, jakým je například laktóza, pro po-dání insuflací, nebo formu kožních náplastí pro transdermálnípodání. Uvedené kompozice mohou být vhodně formulovány do jed-notkových dávek obsahujících například 5 až 200 mg sloučeninyobecného vzorce I nebo ekvivalentní množství její farmaceutic-ky přijatelné soli.

Uvedené farmaceutické kompozice mohou být získány kon-venčními postupy za použití farmaceuticky přijatelných ředidelnebo nosičů, které jsou v oboru farmaceutického průmyslu velmidobře známé. Tablety a kapsle pro perorální podání mohou být vhodně opatřeny enterickým povlakem (například na bázi acetát-fta-látu celulózy) za účelem minimalizace kontaktu účinné látkyobecného vzorce I s žaludečními kyselinami. 28

Farmaceutické kompozice podle vynálezu mohou rovněžobsahovat jedno nebo několik činidel, o kterých je známo, žemohou mít význam při léčení onemocnění nebo stavu kardiovasku-lárního systému. Tyto kompozice mohou takto vedle sloučeninyobecného vzorce I obsahovat ještě například známé inhibitoryagregace krevních destiček, antagonizující činidla prostanoid-ní konstrikce nebo synthasovýinhibitor (tromboxan-A^-antago-nizující činidlo nebo inhibitor synthasy), cyklogenasový inhi-bitor, hypolipidemické činidlo, antihypertensivní činidlo, ino-tropní činidlo, beta-adrenergický blokátor, trombolytické či-nidlo nebo vasodilatátor.

Kromě použití v terapii mohou být sloučeniny obecnéhovzorce I rovněž použity jako farmakologické prostředky při vý-voji a standardizaci testovacích systémů pro vyhodnocení novýchkardiovaskulárních činidel za použití laboratorních zvířat, jakými jsou například kočky, psi,králíci, opice, krysy a myši. V následující části popisu bude vynález blíže objasněnformou konkrétních příkladů provedení vynálezu, přičemž tytopříklady mají pouze ilustrativní charakter a nikterak neomezujírozsah vynálezu, který je jednoznačně vymezen formulací patentových nároků. V těchto příkladech, pokud není výslovně uvedenojinak: i) odpaření se provádí za vakua v rotační odparce, ii) pracovní operace se provádí při okolní teplotě,t.zn. při teplotě v rozmezí 18 až 26 °C, iii) mžiková sloupcová chromatografie nebo středotlakákapalinová chromatografie (MPLC) se provádí na sili-kagelu (bud silikagel Fluka Kieselgel 60 (katalogo-vé číslo 60738) komerčně dostupný u firmy Fluka AG,Buchs, Switzerland, nebo silikagel Merck Kieselgelart. 9385, komerčně dostupný u firmy Merck, Darm-stadt, Nemecká spolková republika), iv) výtěžky jsou uvedeny pouze pro ilustraci a nepředsta 29 vují nezbytně maximální dosažitelné výtěžky, kte- rých by se dosáhlo optimalizací preparativních po- stupů , v) protonová nukleární magneticko rezonanční spektrajsou normálně stanovena při 200 MHz v deuterovanémdimethylsulfoxidu ve funkci rozpouštědla za po-užití tetramethylsilanu (TMS) jako vnitřního stan-dardu a jsou vyjádřena jako chemické posuny (hodno-ty delta) v ppm vzhledem k tetramethylsilanu za po-užití konvenčních zkratek pro označení majoritních píku: s = singlet, m = multiplet, t = triplet, d =dublet, q = kvartet, a vi) všechny finální produkty jsou charakterizoványelementární mikroanalýzou a nukleární magneticko-rezonanční a/nebo hmotovou spektroskopií. Příklady provedení Příklad 1 K míchané suspenzi hořčíku (0,63 g) v etheru (10 ml) sepřidá roztok fenylbromidu (2,7'ml) v etheru (20 ml) a směs semíchá po dobu jedné hodiny. Potom se při okolní teplotě přidároztok 7-aminu-2-(2-furyl)-5-methylsulfony1-/1,2,4/-triazolo-/1,3,5/-triazinu (1,2 g) v bezvodém tetrahydrofuranu (50 ml)a získaná směs se míchá po dobu 2 hodin. Reakční směs se pře-lije nasyceným vodným roztokem chloridu amonného a produkt seextrahuje ethylacetátem (3 x 100 ml). Organický roztok se vy-suší nad síranem hořečnatým, zfiltruje a odpaří. Zbytek sechromatografuje na silikagelu za použití elučního činidla tvo-řeného toluenem a ethylacetátem (20% obj.), přičemž se z odpo-vídající frakce eluátu získá pevný produkt, který se rekrysta-lizuje z isopropanolu, přičemž se získá finální 7-amino-2-(2-furyl)-5-fenyl-/1,2,4/-triazolo/1,5-a//1,3,5/triazin.

Teplota tání: vyšší než 300 °C, elementární mikroanalýza:

C14KiqN6O 30 C(%) H ( % ) N(%) vypočteno 60,4 3,7 29,9 nalezeno 60,6 3,7 29,6, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 6,73(dd, 1H,furyl-4H), 7,22(d,1K,furyl-3H), 7,55(komplex,3H,fenyl-3H,fenyl-4H a fenyl-5H), 7,94(d,1H,furyl-5K), 3,40(dd,2K,fenyl-2K a fenyl-6H), 8,9 3(d,2H,NH?), hmotové spektrum: m/e 279 (M+H)+. .

Nezbytná výchozí látka se připraví následujícím způso- bem. 1) Ledově chladnou směsí 2-furonitrilu (45,5 g) a absolut- ního ethanolu (23,0 g) se probublává plynný chlorovodík (20,0 g).Po přerušení zavádění plynu vykrystalizuje ze směsi pevný po-díl. Tento krystalický podíl se oddělí filtrací a zahřívá vpyridinu (300 ml) s aminoguanidinnitrátem (56,0 g) na teplotuvaru pod zpětným chladičem po dobu 4 hodin. Reakční směs sepotom ochladí, pevný podíl se oddělí filtrací a diltrát seodpaří, přičemž se jako zbytek po odpaření získá surový 3-amino-5-(2-furyl)-1,2,4-triazol. Tento produkt se přečistí působenímkyseliny dusičné (400 ml 50¾ obj.). Vytvořená krystalickásůl se izoluje filtrací, postupně promyje vodou (100 ml) a ethano-lem (50 ml) a vysuší na vzduchu, přičemž se získá 3-amino-5-(2-fury1)-1,2,4-triazolnitrát. Výtěžek: 45 g, teplota taní: 130-133 °C (za rozkladu). Několik šarží této soli (184 g) se suspenduje v horké vodě (400 ml) a k suspenzi se po částech přidá uhličitan sodný(46,0 g). Získaný bazický roztok se ponechá vychladnou, přičemžse získá 3-amino-5-(2-furyl)-1,2,4-triazol ve formě bezbarvýchhranolků. Výtěžek: 82,0 g, 31 teplota tání: 204-206 °C, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 6,05(s,2n,NH2), 6,6(s,1K,furyl-4H), 6,7(s,1K,furyl-3H), 7,7(s,1H,furyl-5H), 1 2/05 ( šir. s ,ΙΗ,ηΗ). 2) Homogenní směs 3-amino-5-(2-furyl)-1,2,4-triazolu (33,0 g) a dimethyl-N-kyanodithioiminokarbonátu (33,0 g) se zahřívá nateplotu 170 °C po dobu jedné hodiny pod mírným proudem argonu.

Po ochlazení se získaný pevný podíl přečistí sloupcovou chroma-tografií na silikagelu (600 g), přičemž se jako eluční sousta-va použije směs ethylacetátu a dichiormethanu se vzrůstajícímmnožstvím ethylacetátu (5-10 % obj.), načež se z odpovídajícífrakce eluátu získá 7-amino-2-(2-furyl)-5-methylthio/1,2,4/-triazolo/1,5-a//1,3, 5/triazin ve formě bezbarvého pevného pro-duktu, který byl po analýze provedené chromatografií na tenkévrstvě shledán v podstatě čistým. Výtěžek: 11,1 g.

Tento produkt se použije dále bez jakéhokoliv dalšího čištění.'Malé množství výše uvedeného pevného produktu se rekrystalizujez ethanolu, přičemž se získá krystalický produkt mající násle-dující charakteristiky: teplota taní: 238-240 °C, elementární mikroanalýza:

CgHgNgOS . 0,05 C2H5OH C(%) K( % ) N(%) vypočteno 43,6 3,3 33,6 nalezeno 44,0 3,3 33,7, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 1,05 a 3,4(t+q,krystalizační ethanol),2,5(s,3H,CH3S-), 6,7(dd,1H,furyl-4H), 7,2(d, 1H,fu.ryl-3H), 7,7(d,1H,furyl-5H),8,7-9,0(šir.d,2H,NH2), 32 hmotové spektrum: m/e 248 ( + ). 3) K míchané ledově chladné suspenzi 7-amino-2-(2-furyl)- 5-methylthio/l, 2,4/triazolo/1, 5-a//1,3,5/triazinu (8,0 g) vdichlormethanu (300 ml) se přidá roztok kyseliny 3-chlorperoxy-benzoové (50%, 45,0 g). Reziduální vodná fáze se odlije. Získanásuspenze se nechá ohřát na okolní teplotu a míchá se po dobu16 hodin. Rozpouštědlo se odpaří a ke zbytku se přidá ethanol(150 mi). Získaná suspenze se ponechá stát po dobu 30 minut zaobčasného zamíchání. Pevný podíl se oddělí filtrací, promyjeethanolem a vysuší, přičemž se získá 7-amino-2-(2-furyl)-5-me-thylsulfonyl/1,2,4/triazolo/1,5-a//1,3,5/triazin ve formě bez-barvé pevné látky. Výtěžek: 6,6 g, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 3,3(s,3H,CH3.SO2), 6,7(q,1H,furyl-4K), 7,3(q,1K,furyl-3E), 7,9(q,1H,furyl-5H), 9,4-9,8(d,2H,NH2).

Tento produkt se použije bez jakéhokoliv dalšího čištění. Příklad 2

Roztok 2-(2-furyl)-7-methylthio-5-fenylethinyl/1,2,4/triazolo/1,5-a//1,3,5/triazinu (0,8 g) v ethanolickém amoniaku(40 ml) se ponechá stát při okolní teplotě po dobu dvou hodin.Rozpouštědlo se potom odpaří a zbytek se přečistí chromatogra-ficky na silikagelu, přičemž se jako eluční soustava postupněpoužije směs dichlormethanu a ethylacetátu (2% obj.) a směsdichlormethanu a methanolu (1% obj.), načež se z odpovídajícífrakce eluátu získá pevný produkt. Výtěžek: 0,25 g.

Tento produkt se krystalizuje z isopropanolu (50 ml), přičemž se získá 7-amino-2-(2-furyl)-5-fenylethinyl/1,2,4/triazolo- /1,5-a//1,3,5útriazin ve formě bezbarvých krystalů.

Teplota tání: vyšší než 280 °C, 33 elementární mikroanalýza: C16H10N6° (0,5) C3H?OH C(3) H ( *) U( i ) vypočteno 53,2 4,2 2 5,3 nalezeno 52,9 4,2 24,9, nukleární magnetickorezonančn6, 7, 7, í spektrum: 7'4(dd, 1H,fu.ryl-4H)24(dd,1H,furyl-3H)53(komplex,3H,feny Z z '1-311, fenvl-5H), 7,68(komplex,2H,fenyl-2H a feny1-6H),7,95(m,1H,furyl-5K), 9,07(šir.s,2K,NK„), , -i- z hmotové spektrum: m/e 381(M+H) .

Uvedená výchozí látka se připraví následujícím způsobem. a) K roztoku 2-(2-furyl)-5-jod-7-methylthio/1,2,4/triazolo- /1,5-a//1,3,5/triazinu (2,5 g) a fenylacetylenu (1,5 mi) v di-methylformamidu (40 ml) se přidá triethylamin (1,1 ml),chlorid(trifenylfosfin)paladnatý (0,2 g) a jodid mědný (0,1 g), načež szískaná směs míchá po dobu 3 hodin oři okolní teplotě. Tatoreakční směs se potom zředí vodou (350 mi) a extrahuje ethylace-tátem (3 x 50 ml). Organický extrakt se promyje vodou, vysušínad síranem hořečnatým a odpaří. Surový produkt se přečistíchromatograficky na silikagelu (150 g), přičemž se jako elučnísoustava použije směs ethylacetátu a aichlormethanu (1% obj.).Zbytek z frakcí obsahujících produkt se rozetře s etherem a zfiltruje, přičemž se získá 2-(2-furyl)-7-methyithio-5-fenylethi-nyl/1,2,4/triazolo/1,5-a//1,3,5/triazin. Výtěžek: 1,0 g).

Krystalizací alikvotu tohoto produktu z isopropanolu se získážlutý krystalický produkt.

Teplota tání: 188-190 °C,elementární mikroanalýza: C1?H1 34 C(%) H ( %) N ( % ) vypočteno 61,2 3,3 21 ,0 nalezeno 60,8 3,1 20,9, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 2,8(s,3H,CH3S), 6,75(dd,1H,fůry1-4H) , 7,35(d,1 K,furyl-3H), 7,55(komplex,3H,fenyl-3H,fenyl-4H a £enyl-5K), 7,74(komplex,2K,fenyl-2H a fenyÍ-6K),8,0(d,1H,furyl-5H), hmotové spektrum: m/e 353 M+. b) Směs 5-amino-2-(2-fu.ryl)-7-methylthio/1,2,4/triazoio-/1 , 5-a//1,3,5/triazinu (5 g), dijodmethanu (40 ml) a amyl-nitritu (8 ml) se míchá při teplotě 120 °C po dobu 75 minut.Reakční směs se potom zfiltruje přes silikagel (250 g), přičemžse jako rozpouštědlo použije dichlormsthan a získaný 2-(2-fu-ryl)-5-jod-7-methylthio/1,2,4/triazolo/1,5-a//1,3,5/triazin sepoužije přímo. Alikvot tohoto produktu se krystalizuje z tolue-nu, přičemž se získá žlutý pevný produkt.

Teplota tání: 211-213 °C, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 2,73(s,3K,CH3S), 6,73(dd,1H,furyl-4H), 7,33(d,1H,furyl-3H), 7,98(d,1H,furyl-5H), hmotové spektrum: m/e 360 (M+H)+. c) Homogenní směs 3-amino-5-(2-furyl)-/1,2,4/triazolu (15 g) a dimethyl-N-kyanodithioiminokarbonatu (16 g) se zahří-vá na teplotu 170 °C po dobu 50 minut pod mírným proudem argo-nu. Po ochlazení se získaný pevný podíl rozetře s methanolem apotom zfiltruje, přičemž se získá 7-amino-2-(2-furyl)-5-methyl-thio/1,2,4/triazolo/1,5-a//1,3,5/triazin ve formě žlutošedéhopevného produktu. Zbytek z filtrátu se chromatografuje na sili-kagelu, přičemž se jako eluční soustava použije směs dichlor- 35 methanu a methanolu v objemovém poměru 97,5:2,5, přičemž sezíská 7-amino-2-(2-furyl)-5-methylthio/1,2,4/triazolo/1,5-a/-/1,3,5/triazin (4,4 g) následovaný 5-amino-2-(2-furyl)-7-me-thylthio/1,2,4/triazolo/1,5-a//1,3,5/triazinem (2,2 g) veformě žlutého produktu. Malé množství výše uvedeného pevnéhoproduktu se krystalizuje z methanolu, přičemž se získají svět-ležluté jehličky.

Teplota tání: 254-257 °C, elementární mikroanalýza:

CnHoN„0S (0,125) Cíl,OH9 8 o 3 C(%) H(%) K ( % ) S (% ) vypočteno 43,4 3,6 33,3 12,7 nalezeno 43,0 3,5 33,4 12,4, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 2,67(s,3H,CH3S), 6,68(dd,1H,furyl-4H), 7,15(d,lH,íuryl-3H), 7,6 8 ( šir.s,2H,)/ 7,89(d,1H,furyl-5H), hmotové spektrum: m/e 248 (M+). 5-Jod-7-methylthio-2-(2-furyl)-/1,2,4/triazolo/1,5-a/- /1,3,5/triazin může být rovněž připraven následujícím způso-bem.

Směs 5-amino-2-(2-furyl)-7-methylthio/1,2,4/triazolo-/1,5-a//1,3,5/triazinu (5,95 g) , jodu (6,07 g), jodidu mědné-ho (4,85 g) , dijodmethanu (15 ml) a isopentylnitritu (10 ml) vtetrahydrofuranu (120 ml) se míchá a zahřívá na teplotu varupod zpětným chladičem a pod atmosférou argonu po dobu 2 hodin.Reakční směs se potom ochladí, zfiltruje přes rozsivkovou ze-minu a odpaří. Zbylý olej se rozpustí v dichlormethanu (200 ml),promyje roztokem sirnatanu sodného za účelem odstranění ne-zreagovaného jodo, zfiltruje přes fáze rozdělující papír aodpaří, přičemž se získá hnědý olej (5,5 g), který se přečistíchromatografií na silikagelu (200 g), přičemž se jako elučnísoustava použije 1% methanol v dichlormethanu. Z odpovídající 36 frakce eluátu se potom získá pevný produkt. Výtěžek: 3,5 g.

Rekrystalizací tohoto produktu z ethanolu se získá 5-jod-7-me-thylthio-2-(2-furyl )-/1,2,4/triazolo/1,5-a//1,3,5/triazin.Výtěžek: 1,6 g. Příklad 3

Roztok produktu z příkladu 2 (0,17 g) v ethanolu (150 ml)se hydrogenuje při okolní teplotě a tlaku za použití 10% pa.la-dia na uhlí (0,19 g) jako hydrogenačního katalyzátoru. Po spo-třebě teoretického množství vodíku se hydrogenační katalyzá-tor odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se krystalizujez isopropanolu, přičemž se získá 7-amino-ý-(2-furyl)— 5—/(2-fe-nyl)et’nyi/-/1,2,4/triazolo/1,5~a//1,3,5/triazin.

Teplota tání: 235-237 °C, elementární mikroanalýza: r· ti v π"16“14' o C(%) H( % ) N ( %') vypočteno 62,7 4,6 27,4 •nalezeno 62,2 4,6 27,3, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 2,98(m,2H,CH2), 3,07(m,2K,CH2), 6,71(d,1H,furyl~4H), 7,16 (m,furyl-3H), 7,1-7,3(komplex,5H,fenyl-H),7,93(s,1H,furyl-5H),8,84(sir.d,2H,NK2). Příklad 4

Za použití postupu, který je popsán v příkladu 1, avšaks výjimkou spočívající v tom, že se použije 3-trifluormethyl-brombenzen, se získá 7-amino-2-(2-furyl)-5~/3-trifluormethyl-fenyl/-/1,2,4/triazolo/1,5-a//1,3,5/triazin.

Teplota tání: 296-298 °C, 37 elementární mikroanalýza: C (%) H ( % ) N( % ) vypočteno 52,0 2,6 24,3 nalezeno 51,8 2,6 24,0, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 6,74(dd,1H,furyl-4H), 7,23(d,1H,furyl-3H) , 7,o 1(t,1H,fenyl-5H), 7,96(komplex,2H,furyl-5H a fenyl-4H) ,3,66(s a d,2H,fenyl-6H a fenyl-211),9,07(d,2H,NK2), hmotové spektrum: m/e 347 (M+H)+. Přiklaď 5

Za použití postupu, který je popsán v příkladu 1, avšaks výjimkou spočívající v tom, že se použije 4-methoxybromben-zen, se získá 7-amino-2-(2-furyl)-5-/4-methoxyfenyl/-/1,2,4/-triazolo/1,5-a//1,3,5/triazin.

Teplota tání: vyšší než 275 °C, elementární mikroanalýza: C (%) - H(%) N(%) vypočteno 58,4 3,9 27,3 nalezeno 58,3 3,9 26,9, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 3,86(s,3H,CK^O), 6,73(dd,1H,furyl-4H), 7,08 a 8,35 { struktura 4H,fenyl-H), 7,20 (d, 1H, f u.ryl-3H), 7,94(d,1H,furyl-5H), 8,85(d,2H,NH2ú, hmotové spektrum: m/e 309 (M+H)+. 38 Příklad

Za použití postupu, který je popsán v příkladu 1, avšaks výjimkou spočívající v tom, že se použije 4-methylbrombenzen,se získá 7-amino-2-(2-furyl)-5-/4-methylfeny1/-/1,2,4/triazolo-/1,5-a//1,3,5/triazin.

Teplota tání: vyšší než 275 °C, elementární mikroanalýza: C15H12N6° C(%) H ( %) H(%) vypočteno 81,6 4,1 28,8 nalezeno 61 ,8 4,2 28,6, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 6,73(dd,1H,£uryl-4H), 7,21(d,1H,furyl-3H), 7,35 a 8,29 ( struktura , 4n, fenyl-H) , 7,94(d,1K,furyl-SH), 8,88(d,2H,Κ«2)< hmotové spektrum: m/e 293 (M+H)+. Příklad 7

Za použití postupu, který je popsán v příkladu 1, avšaks výjimkou spočívající v tom, že se použije 3-fluorbrombenzen,se získá 7-amino-5-/3-fluorfenyl/-2-(2-furyl)-/1,2,4/triazolo-/1,5-a//1,3,5/triazin.

Teplota tání: vyšší než 300 °C, elementární mikroanalýza: C(%) H(%) N(%) vypočteno 56,8 3,1 · 28,4 nalezeno 56,8 2,9 28,2, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 6,73(dd,1H,furyl-4H), 7,23(dd,1H,furyl-3H),7,44(komplex t,1H,fenyl-4H), 39 7,60(komplex,1H,fenyl-5H), 7,95(d,1K,furyl-5H), 8,09 a 8,24(komplex d, fenyl-2H a fenyl-GU), 9,00(d,2íI,NH2) , hmotové spektrum: m/e 297 (M+H)+. Příklad 8

Za použití postupu, který je popsán v příkladu 1, avšaks výjimkou spočívající v tom, že se použije 3,5-difluorbrombenzen, se získá 7-amino-5-/3,5-difluorfenyl/-2-(2-furyl)-/1,2,4/triazolo/1,5-a//1,3,5/triazin.

Teplota tání: 356-360 °C, elementární mikroanalýza: C(%) H(%) N(%) vypočteno 53,5 2,6 26,7 nalezeno 53,6 2,4 26,7, nukleární magnetickorezonanční spektruM: 6,74(dd,1H,furyl-4H), 7,23(d,1H,furyl-3H), 7,48(tt,1H,fenyl-4H), 7,95(komplex,3H,furyl-5H,fenyl-2H a fenyl-6H), 9,07(d,2H,NH2), hmotové spektrum: m/e 315 (M+H)+. Příklad 9

Za použití postupu, který je popsán v příkladu 1, avšaks výjimkou spočívající v tom, že se použije 2-bromthiofen, sezíská 7-amino-2-(2-furyl)-5-(2-thienyl)-/1,2,4/triazolo/1,5-a//1,3,5/triazin.

Teplota tání: 324-328 °C (za rozkladu), 40 elementární mikroanalýza:

Ci2H8N6°S C (% ) H ( % ) N ( % ) vypočteno 50,7 2,8 29,6, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 6,73(dd,1K,furyl-4H), 7,2,1 (d, 1K, thienyl-4H) , 7,23(d,1H,furyl-3H), 7,64(dd,1H,thienvl-5H), 7,95(komplex,2H,furyl-5H a thienyl-3H),8,94(d,2H,NH2), hmotové spektrum: m/e 285 (M+H)+. Příklad 10

Za použití postupu, který je popsán v příkladu 1, avs výjimkou, že se použije 4-benzyloxybenzylchlorid, se získá7-amino-5-/4-benzyloxybenzyl/-2-(2-furyl)/1,2,4/triazolo/1,5-a/-/1,3,5/triazin.

Teplota tání: 220-222 °C, .elementární mikroanalýza: C22H18N6°2 C(%) H( % ) N(%) vypočteno 65,9 4,6 20,95 nalezeno 65,7 4,5 20,8, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 3,91(s,2H,CH2), 5,07(s,2H,CH2O), 6,70(dd,1H,furyl-4H), 6,93 a 7,25(struktura A2B2,4K,fenyl-H), 7,16(d,1K,furyl-3H), 7,3-7,5( komplex,5H,fenyl-H), 7,92(d,1H,furyl-5K), 8,8(d,2H,NH2), hmotové spektrum: m/e 399 (M+H)+. 41 Příklad 11

Za použití postupu, který je popsán v příkladu 1, avšaks výjimkou spočívající v tom, že se použije 3-trif luormeťnyl-brombenzen, se získá 7-amino-2-(2-furyl)-5-/3-tnfluormethyl-fenyl/pyrazolo/2,3-a//1,3,5/triazin.

Teplota tání: 252-254 °C, elementární mikroanalýza: C(%) H(%) N (%) vypočteno 55,7 2,9 20,3 nalezeno 55,4 2,9 20,3, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 6,70(dd, 1K,fu.ryl-4K) , 6,81(s,1H,pyrazol~3K), 7,09(dd,1H,furyl-3H), 7,77(t,1E,fenyl-5H), 7,88(komplex,2H,furyl-5E a fenyl-4H)8,64(komplex,2H,fenyl-6H a fenyl-2H)8,70(d,2H,NH„), hmotové spektrum: 346 (M+H) . Příklad 12

Za použití postupu, který je popsán v příkladu 1, avšaks výjimkou spočívající v tom, že se použije 1-brom-3-fenylpro-pan, se získá 7-amino-2-(2-furyl)-5-/3-fenylpropyl/-/1,2,4/triazolo/1,5-a//1,3,5/triazin.

Teplota tání: 164-147 °C, elementární mikroanalýza: C17H16N6° C(%) H{%) K(%) vypočteno 63,7 5,0 26,2 nalezeno 64,0 5,1 26,3, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 2,05(kvintet,2H,CH2CH2CH2),2,68(komplex,4H,aryl-CH2), 42 6, 73(dd,1H,furyl-4H), 7,1-7,4(komplex,6H,fenyl-H a furyl-3H),7,94(d, 1Ii, furyl-5H) , 8,8(d,2H,NH2). hmotové spektrum: m/e 321 (M+K)+. Přiklaď 13

Za použití postupu, který je popsán v příkladu 1, avšaks výjimkou spočívající v tem, že se vytvoří hexin-Grignardovočinidlo kovovou výměnou mezi 1-hexinem a ethyhGrignardovým či-nidlem, se získá 7-amino-2-{2-furyl)-5-/hex-1-inyl/-/1,2,4/-triazolo/1 , 5-a.//1,3,5/triazin.

Teplota tání: 188-191 °C, elementární mikroanalýza: C14H14K6° (0,1)H2O C(%) H (%) M(%) vypočteno 59,1 5,0 29,6 nalezeno 59,1 5,0 29,8, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 0,93(t,3H,CK3), 1,3-1,65(komplex,4H,-CH2CK2),2,50(komplex,CH2C=), 6,7 3 (dd, 1H, f uryl-4II) , 7,23(d,1H,furyl-3H), 7,95(d,1H,furyl-5H), 8,95(d,2H,NH2), hmotové spektrum: m/e 283 (M+H)+. Příklad 14

Roztok 7-amino-2-(2-furyl)-5-/4-methoxyfenyl/-/1,2,4/-triazolo/1,5-a//1,3,5/triazinu (0,23 g) v anhydridu kyselinyoctové (10 ml) se zahřívá na parní lázni po dobu 18 hodin. Roz-pouštědlo se potom odpaří za vakua a zbytek se přečistí chro-matografií na silikagelu, přičemž se jako eluční soustava po- 43 užije dichiormethan obsahující ethylacetát (5 % obj.). Pevnýprodukt získaný z odpovídající frakce eluátu se krystalizujez ethanolu, přičemž se získá 7-acetyiamino-2-(2-furyl)-5-/4-methoxyfenyl//1,2,4/triazolo/1,5-a//1,3,5/triazin.

Teplota tání: 243-246 °C, elementární mikroanalýza:C17H14-]6°3 C(%) H(%) N(%) vypočteno 58,3 4,0 24,0 nalezeno 58,0 4,0 23,9, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 2,50(s,NHCOCK3), 3,87(s,3H,CH3O), 6,75(dd,1H,furyl-4H), 7,12 a 8,42(struktura A2B2,4H,fenyl-H),7,32(d,1H,furyl-3H), 7,98(d,1H,řuryl-5K), 11,4 2(s,H,NHCOCH), hmotové spektrum: m/e 351 (M+H)+. Příklad 15

Za použití postupu, který je popsán v příkladu 1, avšak svýjimkou spočívající v tom, že se použije 4-brom-1-buten, se zís-ká 7-amino-5-(but-3-enyl)-2-(2-furyl )-/1,2,4/triazolo/1,5-a//1,3,5/triazin.

Teplota tání: 194-196 °C, elementární mikroanalýza: • C12H12NgO (0,4)C2H5OH C(%) H(%) N(%) vypočteno 56,0 5,3 30,6 nalezeno 55,8 5,3 30,6, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 2,77(t,2H,CH2CH=),3,46(t,CH2), 4,9-5,15( komplex,2H,CH2=), 44 5,9(m,1H,CB=), 6,71(dd,1K,furyl-4H),7,17(d,1H,furyl-3H), 7,92(d,1H,furvl-5H),8,8(d,2H,NH2, hir.o tové spektrum: m/e 25 7 (í-í-ťH) ' . Příklad 16

Za použití postupu, který je popsán v příkladu 1, avšaks výjimkou spočívající v tom, že se použije bromhexan, se získá7-amino-2-(2-furyl)-5~hexyl/1,2,4/triazolo/1,5-a//1,3,5/triazinTeplota tání: 131,5-133 °C, elementární mikroanalýza: c p s n^14~18"6~ C(%) H (%) K ( % ) vypočteno 58,7 6,3 29,3 nalezeno 58,7 6,3 29,3 nukleární magnetickorezonanční spektrum: 0,86(t,3H,CH3), 1,29(m,4H,CH3CH2CH2), 1,73(m,2H,betaCH2),2,65(t,2K,alfaCH2), 6,71(dd,1H,furyl-4H), 7,17(1H,furyl-3H), 7,92(d,1H,furyl-5H), 8,77(d,1 π,furyl-5H), hmotové spektrum: m/e 287 (M+H)+. Příklad 17 K míchanému roztoku 7-amino-5-/3,5-difluorfenyl/~2(2-furyl)-1,2,4-triazolo/1,5-a//1,3,5/triazinu (0,421 g) v dime-thylformamidu (5 ml) se přidá hydrid sodný (86 mg 50% disperzev oleji). Směs se potom míchá až do okamžiku, kdy ustane bouřli 45 vý průběh reakce, přičemž se získá čirý roztok. Potom se přidájodmethan (0,256 g, 0,11 ml) a reakční směs se míchá při okol-ní teplotě pc dobu 2 hodin. Potom se přidají voda (25 ml) aledová kyselina octová (0,5 ml) a získaná vodná suspenze seextrahuje ethylacetátem (3 x 50 ml). Organické extrakty sesloučí a promyjí vodou (2 x 25 mi) a solankou (25 ml), vysušínad síranem hořečnatým a odpaří, přičemž se získá žlutý pevnýprodukt. Tento produkt se přečistí chromátografií na silikage-lu, přičemž se jako eluční soustava použije toluen obsahujícíethylacetát (10 % obj.), načež se z odpovídající frakce eluátuzíská 5-/3,5-difluorfeny1/-2-(2-furyl)-7-methylamino-/1,2,4 ,/tria-zolo/1,5-a//1,3,5/triazin ve formě bílého pevného produktu.Teplota tání: 231-234 °C, elementární mikroanalýza:

C1E.H,nF„N.. O 15 10 z 6 C ( % ) H ( ) N ( % ) vypočteno 54,9 3,1 25,6 nalezeno 55,0 3,1 25,5, nukleární magnetickorezonanční spektrum: 3,16(s,3K,CH3N), 6,7 3(dd,1K,fury1-4H), 7,21(dd,1H,furyl-3H), 7,47(tt,1H,fenyl-4H), 7,9 3(d,1K,furyl-5H), 7,97-8,05(komplex,2H,fenyl-2H a fenyl-6H), 9,31 (3,1H,NřI) , hmotové spektrum:m/e 329 (í-l+H) + . Příklad 18 V tomto příkladu jsou uvedeny příklady farmaceutickýchdávkových forem obsahujících sloučeninu obecného vzorce I,například sloučeninu z některého z předcházejících příkladů(tato sloučenina bude označena jako "sloučenina X"), kteréjsou vhodné pro terapeutické nebo profylaktické použití u lidí. 46 a) Takieta mg/tableta

Sloučenina X 50

Laktóza 223,75

Natrium-kroskarmelóza 6,0

Kukuřičný škrob 15,0

Polyvinylpyrrolidon (5%, pasta hm./obj.)2,25Stearát horečnatý 3,0; b) Kapsle

Sloučenina XLaktóza

Stearát horečnatý mc/kapsle 10 488,5 1,5. Výše uvedené formulace mohou být získány konvenčnímipostupy, které jsou ve farmaceutickém průmyslu velmi dobřeznámé. Tablety mohou být konvenčním způsobem opatřeny enterickým povlakem, vytvořeným například z acetát-ftalátu celulózy.

Claims (9)

1. - 47 - NÁROKY ΑΛ3ΓΕ0 '/ ÁZ3TyN,·..' Jtid nvyrt—-------~ I 7 6 A '9 3 ’ < t-

   1. Sloučenina obecného vzorce I NER

   N O (i) ve kterém r1 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 6 uhlíko- vými atomy nebo alkanoylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkový-mi atomy, 2 R znamená fenylovou skupinu-,přes atom uhlíku připojený aromatický 5- nebo β-členný heterocyklický kruh obsahující jeden atomze skupiny zahrnující atom kyslíku a atom síry a/nebo je-den nebo dva atomy dusíku, nebo alkylovou, alkenylovounebo alkinylovou skupinu s 1 až 8 uhlíkovými atomy, kteráje nesubstituována nebo substituována fenylovou skupinounebo přes atom uhlíku připojeným aromatickým 5- nebo 6-členným heterocyklickým kruhem obsahujícím jeden atomze skupiny zahrnující atom kyslíku a atom síry a/nebojeden nebo dva atomy dusíku, přičemž uvedené fenylovéskupiny jsou nesubstituované nebo substituované jednou,dvěma nebo třemi substituenty ze skupiny zahrnujícíalkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, alkoxylovouskupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, atom halogenu, tri-fluormethylávou skupinu, hydroxy-skupinu, benzyloxy-skupinu a 48 alkanoyloxy-skupinu s 1 až 5 uhlíkovými atomy, A znamená N nebo skupinu CT, ve které T znamená atom vo- díku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy,nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
2. 2. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I, ve kterémznamená atom vodíku, methylovou skupinu nebo acetylovou sku- pinu .
3. 3. Sloučenina podle nároku 1 nebo 2 obecného vzorce I, , 2 x . 3 ve kterem R znamena skupinu obecného vzorce R (CH~) X , ve kterem ť 2 n m n znamená 0 nebo celé číslo od 1 do 6, m znamená 0 nebo 1, Xznamená skupinu íIC=CH nebo C=.C a R^ znamená fenylovou skupinunesubstituovanou nebo substituovanou jedním, dvěma nebo třemisubstituenty zvolenými z množiny zahrnující alkylovou skupinus 1 až 4 uhlíkovými atomy, alkoxylovou skupinu s 1 až 4 uhlíko-vými atomy, atom halogenu, trifluormethylovou skupinu, hydroxy-skupinu, benzyloxy-skupinu a alkanoyloxy-skupinu s 1 až 5 uhlíko-vými atomy, nebo přes atom uhlíku připojený aromatický 5- nebo6-členný heterocyklický kruh obsahující jeden atom ze skupinyzahrnující atom kyslíku a atom síry a/nebo jeden nebo dva atomydusíku, nebo v případě, že n je větší než 0, atom vodíku.
4. 4. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 3, ve kterépřes atom uhlíku připojený aromatický heterocyklický kruh jezvolen z množiny zahrnující thiofenylový kruh, furylový kruh,pyridylový kruh a thiazolylový kruh.
5. 5. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 4, ve kterépřípadné substituenty na fenylové skupině jsou zvoleny z mno-žiny zahrnující methylovou skupinu, ethylovou skupinu, methoxylo-vou skupinu, ethoxylovou skupinu, atom fluoru, atom chloru, trifluormethylovou skupinu, hydroxy-skupinu, benzyloxy-skupinu a pivaloyloxy-skupinu. 6. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 5, ve které A 49 znamená N nebo CH.
6. 7. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelné soli podle nároku 1, vyznačený > t í m , že zahrnuje * a) reakci sloučeniny obecného vzorce II NHR 1

   ve které Z znamená vhodnou odštěpitelnou skupinu, s příslušnýmorganokovovým činidlem, b) reakci sloučeniny obecného vzorce IV

   při zvýšené teplotě se sloučeninou obecného vzorce X

   (X) 50 ve kterém Z znamená odštěpitelnou skupinu, cl 1 c) za účelem přípravy sloučeniny obecného vzorce I, ve kte- rém A znamená N, přesmyk /1,2,4/triazolo/4,3-a//1,3,5/triazino-vého derivátu obecného vzorce XI

   d) za účelem přípravy sloučeniny obecného vzorce I, ve kte-z 2 rem R zanrnuje hydroxyfenylovy zbytek, odstraněni ochranné sku-piny v odpovídajícím derivátu obecného vzorce I, ve kterém jehydroxy-skupina chráněna, e) za účelem přípravy sloučeniny obecného vzorce. I, ve kte-rém R znamená nesubstituovanou nebo substituovanou alkinylovouskupinu, reakci sloučeniny obecného vzorce II, ve kterém Z zna-mená atom jodu, s příslušným alkinem v přítomnosti paladiovéhokatalyzátoru, f) za účelem přípravy sloučenin obecného vzorce I, ve kte-rém A znamená N a R^ znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinus 1 až 6 uhlíkovými atomy, reakci sloučeniny obecného vzorceXII

   A O (XII) 51 ve kterém Z, znamená vhodnou odštěpitelnou skupinu, se slouče-~ 1 mnou obecného vzorce R Ní^, načež se v případě, že je žádoucí připravit sloučeninu obecné-ho vzorce I, ve kterém znamená alkylovou skupinu s 1 až 6uhlíkovými atomy nebo alkanoyloyou skupinu s 1 až 4 uhlíkovýmiatomy, alkyluje nebo acyluje konvenčním způsobem odpovídajícísloučenina obecného vzorce I, ve kterém R znamená atom vodíku, v případě, že je žádoucí připravit sloučeninu obecného vzorceI, ve kterem R obsahuje acyloxy-skupinu, potom se acyluje kon-venčním způsobem odpovídající sloučenina obecného vzorce I, ve 2 kterém R obsahuje hydroxy-skupinu, v případě, že je žádoucí připravit sloučeninu obecného vzorceI, ve kterém R znamená nesubstituovanou nebo substituovanoualkylovou nebo alkenylovou skupinu, potom se hydrogenuje kon-venčním způsobem odpovídající sloučenina obecného vzorce I, vekterém R znamená alkenylovou nebo alkinylovou skupinu, v případě, že je žádoucí připravit opticky aktivní formu chirální sloučeniny obecného vzorce I, potom se provede některý zvýše uvedených postupů a) až f) za použití příslušného optickyaktivního výchozího produktu nebo se racemická forma rozštěpíkonvenčním způsobem a v případě, že je žádoucí připravit farmaceuticky přijatelnousůl sloučeniny obecného vzorce I, potom se sloučenina obecnéhovzorce I uvede v reakci s příslušnou kyselinou nebo bází posky-tující fysiologicky přijatelný iont nebo se použije jiný kon-venční způsob přípravy soli, přičemž ve výše uvedených vzorcích R , R a A mají významyuvedené v nároku 1.
7. 8. Farmaceutická "kompozice, vyznačená tím, že obsahuje sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky 52 přijatelnou sůl podle nároku 1 ve směsi nebo společně s farmaceu-ticky přijatelným ředidlem nebo nosičem.
8. 9. Sloučenina obecného vzorce I nebo její farmaceutickypřijatelná sůl podle nároku 1 pro použití v terapii.
9. 10. Sloučenina obecného vzorce XII, ve kterém R má významuvedený v nároku 7 a Z^ znamená odštěpitelnou skupinu zvolenou zmnožiny zahrnující aryloxy-skupinu, alkylthio-skupinu a atomhalogenu. Zastupuje: