CN85101484A - 一种固定化细胞载体及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明是一种固定化细胞新载体,它的特征是含有细胞,海带胶,钙盐和水,同时提供了该载体的制造方法及其应用。

Description

本发明是一种新的载体及其制造和使用的方法。特别是在固定化细胞技术中,本发明之载体是用于固定细胞的载体,其特征在于它含有海带胶,钙盐和细胞和水。
固定化细胞技术是七十年代迅速发展起来的一项新技术,特别是固定化酵母技术,是近几年开创研究的一项新的生物技术。这项技术可以广泛地应用在医学,生物化学,微生物学,生物工程,化工工程及食品工业等领域中。但目前,国内外尚都处在试验室与中试阶段。这主要是因为缺乏良好的载体。多年来,人们都在努力寻找一种载体,这种载体要符合以下条件,即、造价低廉,来源丰富,能够大量生产,具有良好的坚实性及韧性,无毒无害,能使反应的底物及产物易于出入载体而细胞又不易通过,细胞在载体中增殖快,生长稳定,寿命长。然而,迄今为止,人们所做的各种尝试都不甚成功。特别是造价比较昂贵,无法大量生产,载体的坚实性及韧性差,使用寿命短,酵母细胞的增殖不够理想。为了解决上述问题,本发明人做了大量的深入的研究,创造了一种新的载体,并现已完成了本发明。令人惊奇地是,本发明的载体具有众多的优点,其造价低廉,来源丰富,坚实性及韧性很好,使用寿命长,无毒无害,酵母细胞生长良好,增殖快,底物和产物能够顺利出入载体而细胞又不易漏出。
本发明之载体含有海带胶,钙盐和细胞和水。海带胶可以是一般的海带胶,但以分子量大的海带胶为好,如分子量为15万左右,聚合度为80至100的为宜,其中以D-甘露糖醛酸含量高者更好。所用的钙盐以碳酸钙为好。碳酸钙可以是普通碳酸钙,但以化学纯以上的为更好。所用的细胞可以根据具体的目的而选择。所含的水,应为普通卫生标准的水,如水中杂质含量过多,比如含有二氧化硫等,就应先行处理,以去除有害物质。海带胶的含量为1.5%~2.5%(重量百分比),以1.8%至2.2%为好(重量百分比)。碳酸钙的含量为0.5%至2%(重量百分比),以0.8%至1.2%(重量百分比)为好。细胞的含量,依具体使用的种类而定,如选用酵母细胞,比如啤酒酵母细胞(Sccharomyces    cereviside    Hansen),葡萄汁酵母(Sccharomyces    uvarum    Beijerinck),则含量应为0.5%至4%,而以1.8%至2.2%为好。水的含量为92.5%至97.5%。细胞海带胶碳酸钙和水的总量不超过100%。此外,如有必要,还可添加纤维素和化学凝胶等物质,以增加载体的强度及韧性。当本发明之载体为液态时,它应显酸性,其PH可以是大约3.5至6.5,而以4至5为好。本发明之载体的另外的特征是,它不溶于极性溶剂,如水等;它还不溶于含乙醇之溶液,如酒类中的啤酒,果汁啤酒,格瓦斯,麦精饮料,麦精露,汽酒类,如小香槟,葡萄汽酒,低度白酒,黄酒,及酱油、醋,它也不溶于有机酸或含有机酸的溶液中,如氨基酸,抗坏血酸,乳酸,甲叉丁二酸及含有它们的溶液;它还不溶于酮类,如丙酮、丁酮及含酮溶液;醇类如甲醇、乙醇、丙醇、山梨醇及含醇溶液;另外,它还不溶于糖浆,含糖的溶液。本发明的载体具有良好的坚实性及韧性,无论在远输,使用过程中,当载体受到碰撞,挤压时,它都能保证其完整性而不致破碎。
本发明的载体还具有另一个突出的特点,即它的使用寿命长,一般均能达到70至100天,最好的可达到120天至150天。
本发明的载体无毒无害,使用本发明的载体而制造出的产品,是不会因使用了本发明的载体而被污染的。特别是对医药,食品工业而言,它是符合安全,卫生要求的。
本发明的另一个特点是,在完成了细胞的固定化后,细胞在载体内的增殖很快,如固定酵母菌,则固定化的酵母细胞数量,比游离培养的要高100倍以上。
再者,本发明的载体在固定酵母细胞时,还具有这样的特点,即载体内酵母不断增殖,而依附在载体表面的酵母则遗漏在发酵液中,因此,载体内的酵母总是处于新生状态。而载体内酵母增殖量约为1000倍。
此外,本发明所用的原料资源十分丰富,海带胶及钙盐,特别是碳酸钙,在很多国家和地区仰俯即是,因而造价非常便宜,对工业化大生产的需求量,是可以满足而毫无问题。
本发明之载体内含的细胞可以是啤酒酵母(Saccharomyces    cereviside    Hansen)、葡萄汁酵母(Saccharomyces    u    uvarum    Beijerinck)、丙酮丁醇梭状芽孢杆菌(Clostridium    acetobutylicum)、黑醋杆菌(A.melanogenum)及其他的用于发酵生产的细胞。
制备本发明之载体的方法包括以下步骤:
1.把海带胶、钙盐溶于水中,并加以适宜的助溶剂;
2.对步骤1所得产物进行杀菌处理;
3.对步骤2所得产物进行冷却处理;
4.在步骤3所得产物中加入细胞并混匀;
5.对步骤4所得产物进行冷却处理;
6.将步骤5所得产物进行硬化处理;
7.对步骤6所得产物进行漂洗。
更具体地讲,所用海带胶以分子量大的海带胶为好,如分子量在15万,聚合度为80至100的海带胶。而钙盐以碳酸钙为好,特别是去除了杂质的碳酸钙,或化学纯以上的碳酸钙更好。助溶剂以氯化钠为好。取海带胶1.5%至2.5%,以1.8%至2.2%为更好,碳酸钙0.5%至2%,以0.8%至1.2%为更好,氯化钠0.1%至1%,以0.2%至0.4%为更好,溶于水中,如需要时,进行搅拌以使它们溶解充分,溶液总量不超过100%。
对所得溶液进行杀菌处理。以加热杀菌处理为好。加热温度为65~85℃,75~80℃更好。温度太低,则达不到杀菌的要求,温度过高,会引起不良的后果,如变性,焦化等,均会对最终制出的产品的质量造成不利影响。如改用其他消毒法处理,虽然能达到杀菌的目的,但会有残留的有害物存在于产品中,这也是十分不利的。除去这些残留物会耗费更多步骤及设备,因此,不倾向于用这些方法,若残留物具有毒性,更会影响细胞的正常生长及繁殖,要除去这些有毒物,就会增加开支,因而更应当尽力避免。
将经过加热杀菌处理的产物进行冷却处理,可用常规的冷却方法,如自然冷却,通风冷却及循环水冷却等。无论采用哪一种方式,最终要使溶液温度降至15~35℃,以25~30℃为更好。因为在这个温度范围内,加入所要固定的细胞,是能使细胞本身不受损害的,过低、过高的温度,都会对所要固定的细胞造成极为不利的影响。如果所用的细胞本身具有特殊的要求,则当然不在此列。如所用的细胞为酵母细胞,则用量为0.5%~4%,而以1.8%~2.2%为好,这个用量范围,是酵母悬浮液的浓度为108/毫升来计算使用量的,而实际上所用的就是酵母细胞的悬浮液。对于不同的细胞,要视具体情况进行而定。如果酵母细胞的数量太小,则对完成生产不利;如果酵母细胞用量过大,则不能保证它们生长、发育、繁殖的同步性,因而使固定化细胞载体的功能不稳定,从而导致产品质量不稳定。加入细胞后,如需要混匀,可用常规的方法完成。
把混有细胞的载体溶液放入成形器中,用喷射或滴漏的方式,使该载体溶液进入氯化钙溶液,形成不溶于水的凝胶颗粒。所形成的颗粒的直径为1.5~4mm,以2~3mm为更好。所用的氯化钙的溶液浓度为2%~4%,以2.5%~3%为好。
将成形的载体,放入氯化钙溶液中浸泡,所用氯化钙溶液之浓度为2%~4%,以2.5%~3%为好。温度要求15~35℃,以25~30℃为好。硬化处理的时间为30分钟以上,以2~8小时为好。经硬化处理的载体,其坚实性及韧性均良好。把这样的固定化酵母颗粒,从氯化钙溶液中取出,用无菌水漂洗,直至氯化物被冲洗干净。
这样,就制成了本发明之载体。所制成的固定化酵母颗粒可以直接应用于生产,也可放在适宜的发酵液中培养一段时间再用于生产。
由于本发明之载体具有独特的优点,因而其使用的范围相当广泛。它可应用到医药生产中,特别是用在利用微生物细胞生产,或转化出昂贵的抗生素或其他药品,如干扰素等。
它还可应用在微生物学领域中,如制取大量的微生物,对新产生的微生物进行迅速的培养。
特别是在生物工程中,由于本发明之载体的特点,使得将用生物工程技术获得的新的微生物,能够被应用到实际生产之中去,从而造福于社会。
由于本发明之载体无毒无害,所以它特别适宜于应用在食品工业中,如生产各种氨基酸,维生素C等。
作为本发明之最主要的应用领域之一,是酿造工业。本发明之载体,如所包含的酵母菌,就特别适用于制造各种酒类,如啤酒,啤酒类饮料,果汁啤酒,格瓦斯,麦精露,麦精饮料,汽酒,小香槟等发酵性饮料,此外,还适用于制造黄酒,低度白酒,酱油、醋等发酵酿造工业。
在制作啤酒的生产过程中,其中关键的一个步骤是主发酵(又称前酵)。以往的传统工艺,都是用游离培养酵母菌在发酵池(或罐中)进行主发酵的,发酵的时间一般均为7~12天。利用本发明之固定化酵母,可使主发酵的时间缩短至20~36小时,并且能够连续使用70~100天,最好的情况可以使用120~150天。发酵时温度控制在6~9℃。另外,使用本发明之固定化酵母生产啤酒时,也使后酵时间由传统工艺的30~60天缩短到8~15天。使得啤酒生产的周期缩短,设备利用率提高,带来很大的经济效益。
更为重要的是,由于本发明之固定化酵母的诞生,使啤酒生产的连续化,自动化成为可能。将底物由装有固定化酵母的发酵器的下部送入并逆向上升,在此期间内由固定化酵母使底物进行反应,当产物合格时,由反应器的上部放出,同时控制底物的进入量与产物的流出量,以达到最佳状态为准。这样啤酒的生产连续化就得以实现。要是同时使用相应的机械进行入料,出料等步骤那么就完成了啤酒生产的连续自动化。这样就会对现行的啤酒生产工艺进行一场革命,同时能节省大量的资金,器材,人力,提高设备利用率,可想而知,使用本发明之固定化酵母所带来的好处一定会是巨大的。
此外,以往传统工艺生产黄酒时,前酵时间一般为三个月左右,而使用本发明之固定化酵母,前酵时间一般只用60小时。传统工艺之后酵时间为90天,而采用本发明之固定化酵母,后酵时间仅为一个月。而且由于使用本发明之固定化酵母,使黄酒的生产除原有的分批式以外,也可采用连续式。这样,显而易见,使用本发明之固定化酵母,在黄酒制造工业中所带来的收益,是非常可观的。
以往,由于固定化酵母不能应用于工业生产中,特别是发酵工业中,所以使白酒的生产只局限于生产高度数的白酒。因为当用传统工艺生产白酒时,生产的酒的度数过低,就会使产出的酒带有极大的不适口的缺点,风味也不好,口味也不醇和。这些都是因为其中含有着大量的杂醇油,醛类,酯类所造成的。而传统工艺又无法解决这方面的问题。但如若使用本发明之固定化酵母,就能克服上述技术困难。即在传统工艺生产白酒的过程中,用本发明之固定化酵母进行发酵,就能使所产出的低度白酒含杂醇油,醛类,酯类较少,酒的口味醇和,酒精度在25~50度。特别适宜制造25~38度的低度白酒。同时,由于使用固定化酵母,使低度白酒的生产也能成为连续化,自动化,由此可见,使用本发明之固定化酵母,在生产出含杂醇油,醛类,酯类较少的低度白酒的同时,也还使白酒生产的工艺得到了巨大的改进,收益是难以估量的。
另外,本发明还可用于葡萄酒的生产中。以往葡萄酒的生产,主要是带葡萄皮发酵,主要是利用葡萄皮的野生酵母为发酵剂。这样所产的葡萄酒,由于葡萄皮中的丹宁花色苷都溶在葡萄汁中,使后酵期延长,特别是在生产白葡萄酒时,造成保持颜色及透明度上的困难,另外,使用野生酵母也难以保证安全生产。要是采用本发明之固定生长酵母,则可使发酵速度加快,前酵期可由原来的7天降至24小时左右,后酵期可由原来的半年降至3个月左右。同时,也给葡萄酒的安全生产以有力的保证。特别是在生产白葡萄酒时,可以不用葡萄皮中原有的野生酵母作为发酵剂,因而就可以除去葡萄皮,使白葡萄酒的颜色更易保证。
再者,本发明之固定化酵母,在改造传统的制造酱油和醋的过程时,由于它替代了以往的发酵步骤从而大大缩短了发酵的时间,也大大地缩短了生产周期。与传统工艺相比,可提高效率几十倍。并且生产出的产品,完全可以同传统工艺生产出的产品相媲美。
以下实施例进一步说明本发明,但无论如何也不限制本发明。
实施例1
海带胶    2公斤
碳酸钙    1.2公斤
啤酒酵母悬浮液    2升
(108个/毫升)
氯化钠    0.2公斤
水    94.6公斤
以上述组分制成的载体,具有良好的坚实性、韧性。
实施例2
海带胶    2.2公斤
碳酸钙    0.8公斤
啤酒酵母悬浮液    2.2升
(108个/毫升)
氯化钠    0.4公斤
水    94.4公斤
这样制成的载体坚实性及韧性均很好。
实施例3
海带胶    1.5公斤
碳酸钙    1公斤
啤酒酵母悬浮液    1.8升
(108个/毫升)
氯化钠    0.30公斤
水    94.8公斤
这样配方制成的载体坚实性及韧性均好。
实施例4
海带胶    1.8公斤
碳酸钙    1.1公斤
啤酒酵母悬浮液    2.0公斤
(108个/毫升)
氯化钠    0.30公斤
水    94.80公斤
以这样的配方制成的载体,特别适于应用在制造酱油的生产中。
实施例5
海带胶    80公斤
碳酸钙    48公斤
啤酒酵母悬浮液    80升
(108个/毫升)
氯化钠    8公斤
水    4000公斤
用这样的配方,可制成固定化酵母颗粒约4吨,进行大型试验,共产啤酒800吨,载体颗粒使用寿命为100天。
实施例6
海带胶    220公斤
碳酸钙    80公斤
啤酒酵母悬浮液    220升
(108个/毫升)
氯化钠    40公斤
水    10000公斤
由这样的配方制成的固定化酵母颗粒10吨,进行大型试验,共产啤酒约3200吨,使用寿命为100天,特别是,此为连续式生产,即第一次在发酵器内装好底物后,首先发酵36小时,此后用泵以每秒0.40公升的流量将底物由发酵器的底部泵入,每日共得啤酒33吨。
在试验过程中,对发酵时间与温度、糖度,PH,酵母量的变化,做了测定,结果见表1。
表1
时间    温度    糖度    发酵度    PH    发酵液酵母量
(小时)    ℃    %
0    6.5    12    0    5.5
2 8.8 9.9 17 4.8 3.94×106
8 9.5 6.5 46 4.6 10.10×106
16 8.0 4.0 67 4.5 12.10×106
24 6.9 3.0 75 4.36 8.7×106
30 6.3 2.8 77 4.40 6.5×106
36 6.1 2.6 78 4.42 6.5×106
表1的结果说明,发酵过程中,应保持PH在4至5.5之间为好。另外,当反应进行到24小时以后,产品已基本形成,极根发酵度为78%,发酵最低糖度2.6。而温度应该控制在6~10℃为好。
对所生成的啤酒进行检验,所得结果见表2:
表2
项目    分析结果
原麦汁浓度    11.99
酒精    4.028
真正浓度    4.130
真正发酵度    65.1
双乙酰    0.15以下
色度    0.51
总酸    1.85
PH值    4.35
二氧化碳    0.30
比重    1.017
d-氨基酸    85
表2的结果说明,固定化酵母技术生产出的啤酒完全符合啤酒生产的要求。
此外,由于使用本发明之固定酵母,不仅获得了生产啤酒工艺的改进,生产出了合格的啤酒,同时出现了另一个令人惊奇的效果,即所生产出的啤酒的氨基酸的含量,高于传统工艺生产之啤酒,无论是生啤酒还是熟啤酒都是如此。具体的测定结果见表3,表4:
表3
氨基酸    北京生啤酒    固定化生啤酒
天门冬氨酸    0.564    2.186
苏氨酸    0.401    /
丝氨酸    0.224    0.310
谷氨酸    1.115    3.550
甘氨酸    0.801    2.800
丙氨酸    1.061    8.446
胱氨酸    /    /
缬氨酸    0.917    6.950
蛋氨酸    0.082    0.492
异亮氨酸    0.239    2.494
亮氨酸    0.333    3.971
酪氨酸    1.072    6.796
苯丙氨酸    1.038    9.456
赖氨酸    0.445    2.796
组氨酸    1.070    3.005
精氨酸    0.917    4.062
脯氨酸    10.476    28.900
色氨酸    1.014    2.071
合计    21.769    88.288
表4
氨基酸    北京熟啤酒    固定化熟啤酒
天门冬氨酸    0.782    1.860
苏氨酸    0.789    /
丝氨酸    0.417    0.390
谷氨酸    1.851    2.563
甘氨酸    1.807    2.053
丙氨酸    5.075    5.854
胱氨酸    /    /
缬氨酸    3.180    5.309
蛋氨酸    0.090    0.392
异亮氨酸    0.616    1.666
亮氨酸    0.289    2.639
酪氨酸    4.114    5.565
苯丙氨酸    5.526    7.607
赖氨酸    0.635    2.920
组氨酸    1.916    2.388
精氨酸    4.896    5.198
脯氨酸    26.941    30.900
色氨酸    1.681    1.320
合计    61.574    78.624
由表3可以明确地得知,使用固定化酵母技术所制造的生啤酒的氨基酸含量,比传统工艺生产的啤酒之含量要高很多。
由表4可以得知,除色氨酸外,其余的氨基酸均以固定化酵母生产的氨基酸含量为高。

Claims (64)

1、一种固定化细胞载体,其特征在于,它含有细胞、海带胶、钙盐和水。
2、一种根据权项1所述的载体,其特征在于,所述的海带胶为分子量大的海带胶。
3、一种根据权项1或所述的载体,其特征在于,所述的海带胶的含量为1.5%至2.5%。
4、一种根据权项3所述的载体,其特征在于,所述的海带胶的含量为1.8%至2.2%。
5、一种根据权项1所述的载体,其特征在于,所述的钙盐为碳酸钙。
6、一种根据权项5所述的载体,其特征在于,所述的碳酸钙的含量为0.5%~2%。
7、一种根据权项5或6所述的载体,其特征在于,所述的碳酸钙的含量为0.8%至1.2%。
8、一种根据权项1所述的载体,其特征在于,所述的细胞为酵母细胞。
9、一种根据权项8所述的载体,其特征在于,所述的酵母细胞为啤酒酵母细胞(Saccharomyces  cereviside  Hansen)、或葡萄汁酵母(Saccharomyces  uvarum  Beijerinck)。
10、一种根据权项1、8或9中任何一项所述的载体,其特征在于,所述的细胞的含量为0.5%至3%。
11、一种根据权项10所述的载体,其特征在于,所述细胞的含量为1.5%至2%。
12、一种根据权项1所述的载体,其特征在于,所述的载体当为液态时,其PH为酸性。
13、一种根据权项12所述的载体,其特征在于,所述的载体为液态时,其PH为3.5至6.5。
14、一种根据权项1、12或13中任何一项所述的载体,其特征在于,所述的载体为液态时,其PH为4至5。
15、一种根据权项1所述的载体,其特征在于,所述的载体不溶于极性溶剂。
16、一种根据权项1所述的载体,其特征在于,所述的载体是不溶于含糖溶液。
17、一种根据权项1所述的载体,其特征在于,所述的载体不溶于含乙醇溶液。
18、一种根据权项1所述的载体,其特征在于,所述的载体不溶于有机酸或含有机酸的溶液。
19、一种根据权项1所述的载体,其特征在于,所述的载体不溶于酮类或含酮溶液。
20、一种根据权项1所述的载体,其特征在于,它具有很好的坚实性及韧性,受到挤压、碰撞不会破碎。
21、一种制备载体的方法,其特征在于,它所制备的载体含有海带胶,钙盐和细胞,该方法包括以下几个步骤:
1)将海带胶,钙盐,氯化钠溶于水中并混匀;
2)对步骤1)之产物进行杀菌处理;
3)对步骤2)之产物进行冷却处理;
4)在步骤3)之产物中加入细胞;
5)对步骤4)之产物进行成形处理;
6)对步骤5)之产物进行硬化处理;
7)对步骤6)之产物进行漂洗。
22、一种根据权项21之步骤1)所述的方法,其特征在于所述的海带胶的用量为1.5%至2.5%。
23、一种根据权项22所述的方法其特征在于所述海带胶的用量为1.8%至2.2%。
24、一种根据权项21之步骤1)所述的方法,其特征在于,所述的钙盐为碳酸钙。
25、一种根据权项24所述的方法,其特征在于,所述的碳酸钙的用量为0.5%至2%。
26、一种根据权项25所述的方法,其特征在于,所述碳酸钙的用量为0.8%至1.2%。
27、一种根据权项21之步骤1)所述的方法,其特征在于,所述氯化钠的用量是0.1%至1%。
28、一种根据权项27所述的方法,其特征在于,所述的氯化钠的用量为0.2%至0.4%。
29、一种根据权项21之步骤2)所述的方法,其特征在于,所述的杀菌处理为加热杀菌处理。
30、一种根据权项29所述的方法,其特征在于,加热处理的温度为65°至85℃。
31、一种根据权项30所述的方法,其特征在于,所述的加热温度为75°至80℃。
32、一种根据权项21之步骤3)所述的方法,其特征在于,所述的冷却处理的温度为15至35℃。
33、一种根据权项32所述的方法,其特征在于,所述的冷却处理的温度为25°至30℃。
34、一种根据权项21之步骤4)所述的方法,其特征在于,所加入的细胞为酵母细胞,如啤酒酵母细胞(Saccharomycescereviside  Hansen)或葡萄汁酵母(Saccharomyces  uvarum  Beijerinck)。
35、一种根据权项34所述的方法,其特征在于,所加入的酵母细胞为酵母细胞悬浮液。
36、一种根据权项35所述的方法,其特征在于,所述的酵母细胞悬浮液的用量为0.5%至4%。
37、一种根据权项36所述的方法,其特征在于,所述的酵母细胞悬浮液的用量为1.8%至2.2%。
38、一种根据权项21之步骤5)所述的方法,其特征在于,所述的成形处理,是把液态的载体通过成形器滴入到氯化钙溶液中。
39、一种根据权项38所述的方法,其特征在于,所述的氯化钙溶液的浓度为2%至4%。
40、一种根据权项39所述的方法,其特征在于,所述的氯化钙的溶液之浓度为2.5%至3%。
41、一种根据权项21之步骤6)所述的方法,其特征在于,所述的硬化处理,是把成形之载体放在氯化钙溶液中浸泡。
42、一种根据权项41所述的方法,其特征在于,所述氯化钙溶液之浓度为2%至4%。
43、一种根据权项42所述的方法,其特征在于,所述氯化钙溶液的浓度为2.5%至3%。
44、一种根据权项41所述的方法,其特征在于,所述的硬化处理温度为15°至35℃。
45、一种根据权项44所述的方法,其特征在于,所述的硬化温度为25°至30℃。
46、一种根据权项41所述的方法,其特征在于,所述的强化时间为30分钟以上。
47、一种根据权项46所述的方法,其特征在于,所述的强化时间为2至8小时。
48、一种根据权项21之步骤7)所述的方法,其特征在于,所述的漂洗,是用无菌水进行漂洗。
49、一种载体的应用方法,其特征在于,所用的载体含有海带胶,钙盐和细胞,把这种载体应用在发酵工业中。
50、一种根据权项49所述的应用方法,其特征在于,把这种载体应用在酿造工业中。
51、一种根据权项50所述的应用方法,其特征在于把这种载体应用在制酒工业中。
52、一种根据权项51所述的应用方法,其特征在于,将所述的载体应用在啤酒制造的前酵中。
53、一种根据权项50所述的方法,其特征在于,把所述的载体应用在黄酒制造的前酵中。
54、一种根据权项50所述的方法,其特征在于,把所述的载体应用在低度白酒的制造中。
55、一种根据权项51所述的应用方法,其特征在于,把本发明之载体应用在葡萄酒生产的前酵中。
56、一种根据权项55所述的应用方法,其特征在于,把本发明之载体应用到白葡萄酒生产的前酵中。
57、一种根据权项55或56所述的方法,其特征在于,把本发明之载体应用到葡萄酒的生产中后,生产葡萄酒时,发酵的底物是去除了葡萄皮的。
58、一种根据权项50所述的方法,其特征在于,把所述的载体应用在酱油生产中。
59、一种根据权项50所述的方法,其特征在于,把所述的载体应用到醋的生产中。
60、一种根据权项49所述的方法,其特征在于,把所述的载体应用到维生素C的生产中。
61、一种根据权项60所述的方法,其特征在于,把所述的载体应用到制造维生素C前体,即把山梨糖转化为山梨醇的生产中。
62、一种根据权项49所述的方法,其特征在于,把所述的载体应用到用微生物制取抗菌素的生产中去。
63、一种根据权项49至62中任何一项所述的方法,其特征在于,所述的方法为连续化生产。
64、一种低度白酒,其特征在于,其中的杂醇油,醛类,酯类的含量低。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN101544944A (zh) * 2008-03-29 2009-09-30 杨迪 利用固定化酶加速白酒老熟除杂的新方法
CN102112609B (zh) * 2008-10-09 2013-08-14 独立行政法人农业·食品产业技术综合研究机构 固定有进行并行复式无机化反应的微生物群的固体载质,催化剂柱,及植物栽培用固态培养基的制备方法

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101544944A (zh) * 2008-03-29 2009-09-30 杨迪 利用固定化酶加速白酒老熟除杂的新方法
CN101544944B (zh) * 2008-03-29 2013-01-23 杨迪 利用固定化酶加速白酒老熟除杂的方法
CN102112609B (zh) * 2008-10-09 2013-08-14 独立行政法人农业·食品产业技术综合研究机构 固定有进行并行复式无机化反应的微生物群的固体载质,催化剂柱,及植物栽培用固态培养基的制备方法

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