CN218860720U - 一种核酸提取管 - Google Patents
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Abstract
本申请提供了一种核酸提取管,包括:管体,所述管体形成有容置腔,所述容置腔容置有核酸释放剂;盖体,所述盖体可拆卸连接在所述管体上,所述盖体朝向所述管体的一端设置有吸附件,所述吸附件吸附有非离子洗涤剂,所述非离子洗涤剂用于和所述核酸释放剂混合,消除所述核酸释放剂对扩增反应的影响,应用本核酸提取管,能够实现快速获得核酸粗提液,并对核酸粗提液进行高效检测,适用于核酸的快速检测,方便操作。
Description
技术领域
本申请涉及生物医学技术领域,尤其涉及一种核酸提取管。
背景技术
现有的核酸提取方法主要是采用高盐裂解液现有的核酸裂解液主要采用高盐缓冲液,一般包括盐离子溶液(Tris-HCl、NaCl、EDTA)、蛋白酶k、去污剂,缓冲液不能直接加入到体系中,需要进行按比例的稀释后才能加入,造成目标检测物浓度的稀释,而且实验过程繁琐,耗时加长,并不适用需要快速的检测的情况。
实用新型内容
本申请提供了一种核酸提取管,以至少解决现有技术中存在的以上技术问题。
根据本申请实施例的第一方面,提供了一种核酸提取管,包括:管体,所述管体形成有容置腔,所述容置腔容置有核酸释放剂;盖体,所述盖体可拆卸连接在所述管体上,所述盖体朝向所述管体的一端设置有吸附件,所述吸附件吸附有非离子洗涤剂,所述非离子洗涤剂用于和所述核酸释放剂混合,消除所述核酸释放剂对扩增反应的影响。
在一可实施方式中,所述吸附件为滤芯,所述滤芯为聚酯纤维滤芯、植物纤维滤芯、玻璃纤维滤芯、聚乙烯滤芯的任一种。
在一可实施方式中,所述盖体上开设有供吸附件固定的安装腔,所述盖体位于所述吸附件背向管体的一端还开设有与安装腔连通的出液口,所述出液口用于供所述非离子洗涤剂和所述核酸释放剂的核酸粗提液出液。
在一可实施方式中,所述出液口的可拆卸连接有用于密封所述出液口的密封件。
在一可实施方式中,所述核酸释放剂为十二烷基硫酸钠、脱氧胆酸钠、乙基苯基聚乙二醇的其中一种。
在一可实施方式中,所述非离子洗涤剂为Triton系列非离子洗涤剂或Tween系列非离子洗涤剂的其中一种。
在一可实施方式中,所述管体位于所述吸附件和所述核酸释放剂之间设置有隔离层,所述隔离层粘贴固定在所述管体开口处。
根据本申请实施例的第二方面,提供了一种利用上述可实施方式中任一项所述的核酸提取管进行核酸提取的方法,所述方法包括:将待测样本浸入管体的核酸释放剂中,静置至核酸释放剂将待测样本中的核酸释放;将盖体与管体连接,对核酸提取管进行上下翻转,使核酸释放剂与所述非离子洗涤剂混合均匀,得到核酸粗提液。
在一可实施方式中,在得到核酸粗提液之后,所述方法还包括:通过出液口将核酸粗提液滴入盛放有液体核酸扩增反应试剂或冻干核酸扩增反应试剂的反应管中,进行扩增反应。
根据本申请实施例的第三方面,提供了一种利用上述可实施方式中任一项所述的核酸提取管进行核酸检测的方法,所述方法包括:将待测样本浸入管体的核酸释放剂中,静置至核酸释放剂将待测样本中的核酸释放;将盖体与管体连接,对核酸提取管进行上下翻转,使核酸释放剂与所述非离子洗涤剂混合均匀,得到核酸粗提液;对所述核酸粗提液进行扩增,得到核酸扩增液;对所述核酸扩增液进行核酸检测,确定核酸检测结果。
本申请实施例通过核酸提取管的设计,能够实现快速获得核酸粗提液,并对核酸粗提液进行高效检测,适用于核酸的快速检测,方便操作。
应当理解,本部分所描述的内容并非旨在标识本申请的实施例的关键或重要特征,也不用于限制本申请的范围。本申请的其它特征将通过以下的说明书而变得容易理解。
附图说明
通过参考附图阅读下文的详细描述,本申请示例性实施方式的上述以及其他目的、特征和优点将变得易于理解。在附图中,以示例性而非限制性的方式示出了本申请的若干实施方式,其中:
在附图中,相同或对应的标号表示相同或对应的部分。
图1示出了本申请实施例一种核酸提取管的爆炸结构示意图;
图2示出了本申请实施例一种核酸提取管的整体结构示意图。
图中标号说明:1、管体;11、容置腔;12、核酸释放剂;2、盖体21、安装腔;22、出液口;23、密封件;3、吸附件;31、非离子洗涤剂;4、隔离层。
具体实施方式
为使本申请的目的、特征、优点能够更加的明显和易懂,下面将结合本申请实施例中的附图,对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例,而非全部实施例。基于本申请中的实施例,本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本申请保护的范围。
图1示出了本申请实施例一种核酸提取管的爆炸结构示意图;图2示出了本申请实施例一种核酸提取管的整体结构示意图。参见图1和图2,
根据本申请实施例的第一方面,提供了一种核酸提取管,包括:管体1,管体1形成有容置腔11,容置腔11容置有核酸释放剂12;盖体2,盖体2可拆卸连接在管体1上,盖体2朝向管体1的一端设置有吸附件3,吸附件3吸附有非离子洗涤剂31,非离子洗涤剂31用于和核酸释放剂12混合,消除核酸释放剂12对扩增反应的影响。
本申请实施例通过核酸提取管的设计,能够利用核酸释放剂12释放核酸样本中的核酸,然后再通过对管体1进行上下翻转,使吸附件3中的非离子洗涤剂31与核酸释放剂12进行混合,从而使核酸释放剂12能够吸附到由非离子洗涤剂31形成的胶束中,从而能够消除核酸释放剂12对后续扩增反应中酶以及其他蛋白物质的影响,由该核酸提取管获得的核酸粗提液可以直接加入至扩增反应中,应用本核酸提取管,能够实现快速获得核酸粗提液,并对核酸粗提液进行高效检测,适用于核酸的快速检测,方便操作。
其中,管体1可以由不影响核酸反应的透明塑料材质制成,管体1可以是柔性材料也可以是刚性材料,核酸释放剂12选为能够灭活常见的致病病毒并且释放核酸的表面活性剂,进一步选为离子型表面活性剂,如十二烷基硫酸、脱氧胆酸钠、乙基苯基聚乙二醇的其中一种。
盖体2可拆卸连接在管体1上,盖体2和管体1的连接方式包括但不限于:螺纹连接、卡接等。盖体2和管体1的连接方式需满足在盖体2连接在管体1时,连接处紧密连接,不会出现漏液、渗液等情况。盖体2朝向管体1的一端设置有吸附件3,从而能够使核酸提取管在上下混匀时,吸附件3中的非离子洗涤剂31能够与核酸释放剂12混合,从而消除核酸释放剂12对扩增反应的影响。具体的,非离子洗涤剂31为能够对核酸释放剂12进行吸附的非离子表面活性剂。非离子表面活性剂性质温和,能够与核酸释放剂12混合形成胶束,进而隔离核酸释放剂12,使核酸释放剂12在释放核酸后不影响后续反应。具体的,非离子洗涤剂31为Triton系列非离子洗涤剂或Tween系列非离子洗涤剂的其中一种。如:Triton X-100、Tween20、Tween80等。
而在核酸提取管保持竖直状态的时候,非离子洗涤剂31能够与核酸释放剂12保持分离,从而实现对非离子洗涤剂31与核酸释放剂12的分离保存。进一步的,由于吸附件3还具有过滤效果,在上下混匀过程中,吸附件3还能过滤核酸粗提液中的细胞碎片、残渣等杂质,从而提高核酸粗提液中核酸的纯度。
在一可实施方式中,盖体2上开设有供吸附件3固定的安装腔21,盖体2位于吸附件3背向管体1的一端还开设有与安装腔21连通的出液口22,出液口22用于供非离子洗涤剂31和核酸释放剂12的核酸粗提液出液。
通过安装腔21能够将吸附件3固定在盖体2上,避免吸附件3掉落到管体1中,进而避免非离子洗涤剂31提前与核酸释放剂12进行混合。具体的,安装腔21和吸附件3之间可以采用过盈配合的方式进行固定。在吸附件3的材料选择上,吸附件3还可以选择为在吸附液体过程中会进行膨胀的材料,从而能够核酸提取管在混匀过程中,吸附件3与盖体2的固定更加牢固,避免混匀过程中出现意外。在盖体2位于吸附件3背向管体1的一端开设出液口22,能够保证从出液口22出液的核酸粗提液是进行充分混合的,且能够通过吸附件3对核酸粗提液中的杂质进行过滤,保证了在出液口22出液的核酸粗提液具有较高的纯度。
出液口22区别于管体1和盖体2的连接处,管体1和盖体2的连接处需要满足吸附件3、核酸释放剂12、核酸样本的安装及容置需求,故连接处具有较大的开口,如果通过连接处进行出液,出液存在流量不可控的问题,而在管体1上开设出液口22,其功能为出液,从而能够根据出液量对预先设计出液口22的大小,从而控制出液量,通过出液口22出液,在将核酸粗提液转移过程中,无需采用其他的移液工具,进一步方便了核酸提取过程,加快检测速度。
在一可实施方式中,吸附件3为滤芯,用于制成滤芯的材料选择为不会破坏核酸粗提液的材料,如,用于制成滤芯的材料可以包括但不限于聚酯纤维滤芯、植物纤维滤芯、玻璃纤维滤芯、聚乙烯滤芯的任一种。上述材料具有较好的过滤和吸附效果,从而满足对细胞碎片、残渣进行过滤,对非离子洗涤剂31进行吸附的目的。
在一可实施方式中,出液口22的可拆卸连接有用于密封出液口22的密封件23。可以理解的是,在混合过程中,为了避免核酸粗提液从出液口22出液,出液口22连接有用于密封出液口22的密封件23。在完成混合后,将密封件23与出液口22分离,再从出液口22滴出核酸粗提液。其中,密封件23与出液口22的密封方式包括但不限于螺纹连接、卡接、过盈配合等。具体的,密封件23可以为与出液口22螺纹连接的密封盖。
在一可实施方式中,管体1位于吸附件3和核酸释放剂12之间设置有隔离层4,隔离层4粘贴固定在管体1开口处。
为了方便核酸提取管的运输与存储,保证在进行核酸提取之前,非离子洗涤剂31和核酸释放剂12不会混合,本方法还可以在管体1开口处设置隔离层4,隔离层4由不与非离子洗涤剂31和核酸释放剂12反应的材料制成,隔离层4可以通过粘贴固定在管体1开口处,在核酸提取管使用时,撕下隔离层4。进一步的,隔离层4可以为易撕的封装膜,使用时先将封装膜撕下。
根据本申请实施例的第二方面,提供了一种利用上述可实施方式中任一项的核酸提取管进行核酸提取的方法,方法包括:首先,将待测样本浸入管体1的核酸释放剂12中,静置至核酸释放剂12将待测样本中的核酸释放;然后,将盖体2与管体1连接,对核酸提取管进行上下翻转,使核酸释放剂12与非离子洗涤剂31混合均匀,得到核酸粗提液。
在利用上述实施方式中描述的核酸提取管进行核酸提取时,本方法先将待测样本浸入管体1的核酸释放剂12中,具体的,待测样本可以是对待测对象进行采样获得的咽拭子或鼻咽拭子,将咽拭子或鼻咽拭子的棉球浸入核酸释放剂12静置2~5分钟,以实现核酸释放剂12将待测样本中的核酸释放的目的。然后,取出咽拭子或鼻咽拭子,将盖体2与管体1连接,从而使容置腔11处于密封状态。对核酸提取管进行上下翻转,使核酸释放剂12与非离子洗涤剂31混合均匀,得到核酸粗提液。
在一可实施方式中,在得到核酸粗提液之后,方法还包括:通过出液口22将核酸粗提液滴入盛放有液体核酸扩增反应试剂或冻干核酸扩增反应试剂的反应管中,进行扩增反应。
根据实际情况的后续操作需要,本方法可以通过分离出液口22与密封盖,从而通过出液口22将核酸粗提液滴入盛放有液体核酸扩增反应试剂或冻干核酸扩增反应试剂的反应管中,进行扩增反应。在管体1内的核酸粗提液需要通过滤芯过滤后才能进入出液口22,从而保证了出液口22滴出的核酸粗提液已经对细胞碎片和杂质进行过滤。
根据本申请实施例的第三方面,提供了一种利用上述可实施方式中任一项的核酸提取管进行核酸检测的方法,方法包括:首先,将待测样本浸入管体1的核酸释放剂12中,静置至核酸释放剂12将待测样本中的核酸释放;然后,将盖体2与管体1连接,对核酸提取管进行上下翻转,使核酸释放剂12与非离子洗涤剂31混合均匀,得到核酸粗提液;再后,对核酸粗提液进行扩增,得到核酸扩增液;之后,对核酸扩增液进行核酸检测,确定核酸检测结果。
当核酸提取管用于进行核酸检测的情况下,本方法先利用上述方法获得核酸粗提液,再通过出液口22滴出指定出液量范围的核酸粗提液,然后对核酸粗提液进行PCR扩增,得到目标DNA或RNA,再对核酸扩增液进行核酸检测,确定核酸检测结果。通常,指定出液量范围为20~30微升。
为方便上述实施方式的进一步理解,以下提供一种具体实施场景,在该具体实施场景中,核酸释放液选为十二烷基硫酸钠试剂,非离子洗涤剂31为Tween 80。
在制作核酸提取管时,
首先,将定量的十二烷基硫酸钠试剂灌注进管体1中,将滤芯浸入Tween 80中进行吸附,完成吸附的滤芯固定至盖体2的安装腔21中;
然后,通过封装膜对管体1进行封装,将核酸提取管运输至指定地点。需要补充的是,本方法可以同时对盖体2进行封装。本方法在运输过程中,盖体2可以连接在管体1上一起运输,也可以将盖体2和管体1分开运输,从而避免运输损耗。
在进行核酸提取时,
首先,采用核酸采样拭子对待测对象进行采样,获得目标拭子;
然后,撕开封装膜,将目标拭子浸入十二烷基硫酸钠试剂中,静置2~5分钟;
再后,将盖体2与管体1螺纹连接后,对核酸提取管进行上下翻转,混匀管体1中的核酸释放液与盖体2的吸附件3吸附的非离子洗涤剂31,得到核酸粗提液;
之后,分离出液口22和密封件23,将核酸粗提液通过出液口22直接滴入盛放有液体核酸扩增反应试剂或冻干核酸扩增反应试剂的反应管中,进行扩增反应,对目标DNA或RNA进行扩增,得到扩增结果。
最后,对扩增结果进行核酸检测,以确定目标拭子中是否含有目标DNA或RNA。
应该理解,可以使用上面所示的各种形式的流程,重新排序、增加或删除步骤。例如,本发申请中记载的各步骤可以并行地执行也可以顺序地执行也可以不同的次序执行,只要能够实现本申请提出的技术方案所期望的结果,本文在此不进行限制。
此外,术语“第一”、“第二”仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此,限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或隐含地包括至少一个该特征。在本申请的描述中,“多个”的含义是两个或两个以上,除非另有明确具体的限定。
以上所述,仅为本申请的具体实施方式,但本申请的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本申请揭露的技术范围内,可轻易想到变化或替换,都应涵盖在本申请的保护范围之内。因此,本申请的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。
Claims (7)
1.一种核酸提取管,其特征在于,包括:
管体(1),所述管体为由透明材料制成,所述管体(1)形成有容置腔(11),所述容置腔(11)容置有核酸释放剂(12);
盖体(2),所述盖体(2)螺纹连接在所述管体(1)上,所述盖体(2)朝向所述管体(1)的一端设置有吸附件(3),所述吸附件(3)吸附有非离子洗涤剂(31),所述非离子洗涤剂(31)用于和所述核酸释放剂(12)混合,消除所述核酸释放剂(12)对扩增反应的影响。
2.根据权利要求1所述的核酸提取管,其特征在于,所述吸附件(3)为滤芯,所述滤芯为聚酯纤维滤芯、植物纤维滤芯、玻璃纤维滤芯、聚乙烯滤芯的任一种。
3.根据权利要求1所述的核酸提取管,其特征在于,所述盖体(2)上开设有供吸附件(3)固定的安装腔(21),所述盖体(2)位于所述吸附件(3)背向管体(1)的一端还开设有与安装腔(21)连通的出液口(22),所述出液口(22)用于供所述非离子洗涤剂(31)和所述核酸释放剂(12)的核酸粗提液出液。
4.根据权利要求3所述的核酸提取管,其特征在于,所述出液口(22)可拆卸连接有用于密封所述出液口(22)的密封件(23)。
5.根据权利要求1所述的核酸提取管,其特征在于,所述管体(1)位于所述吸附件(3)和所述核酸释放剂(12)之间设置有隔离层(4)。
6.根据权利要求5所述的核酸提取管,其特征在于,所述隔离层(4)粘贴固定在所述管体(1)开口处。
7.根据权利要求3所述的核酸提取管,其特征在于,所述出液口的出液量为20~30微升/滴。
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