CN209485829U - 医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置 - Google Patents
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Abstract
本实用新型装置适用于医疗技术领域,是一种医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置,用于慢性疾病早期诊断的无创性液体活检医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置,包括:溶液池,设置于所述装置的上端,所述溶液池盛放欲过滤的尿液样本;纳米膜滤器,设置于所述溶液池与废液收集器之间,包括上、下设置的两个过滤层和尿液外泌体收集器;设置于下端的所述过滤层与所述尿液外泌体收集器连接,所述两个过滤层过滤所述尿液样本中的尿液杂质,并且所述尿液外泌体收集器收集所述尿液外泌体;废液收集器,具有尿液杂质收集腔,并且所述废液收集器套接于所述纳米膜滤器的外侧。借此,本实用新型实现了尿液外泌体便捷提取。
Description
技术领域
本实用新型涉及医疗器械技术领域,尤其涉及一种医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置,不需要离心机及其他本装置以外的辅助设备,用于慢性疾病早期诊断的无创性液体活检。医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置
背景技术
Exosome,中文名外泌体,简称EXO,是一种能被大多数细胞分泌的微小膜泡,具有脂质双层膜结构,直径大约40-100nm。尽管外泌体最初在1983年就被发现,但人们一直认为它只是一种细胞的废弃物。然而最近几年,人们发现这种微小膜泡中含有细胞特异的蛋白、脂质和核酸,能作为信号分子传递给其他细胞从而改变其他细胞的功能。这些发现点燃了人们对细胞分泌膜泡的兴趣。最近的研究发现外泌体在很多生理病理上起着重要的作用,如免疫中抗原呈递、肿瘤的生长与迁移、组织损伤的修复等。不同细胞分泌的外泌体具有不用的组成成分和功能,可作为疾病诊断的生物标志物。外泌体具有脂质双层膜结构,能很好的保护其包被的物质,且能靶向特定细胞或组织,因此是一种很好靶向给药系统。外泌体作为一个新型的研究热点,由于它在体内存在的广泛性和获取的便捷性,已经成为了疾病诊断、治疗的潜在有效方式,在精准医学发展上有着光明的前景。
尿液作为一种无创的检测标本的来源,越来越受到大家的关注。尿液中的外泌体携带有肾脏结构和功能损伤的分子标记物,有助于肾脏疾病的诊断;尿液外泌体蛋白组学的研究有助于相关疾病病理生理机制的研究,有助于寻找潜在的新的疾病治疗靶点。
目前国内外报道分离外泌体的主要方法是超速离心法。但是超速离心法需要的超速离心机只有著名大学、部分科研机构、部分发达地区的三甲医院拥有,使得这一方法使用受限;其次,该方法一次处理样本量有限。超速离心法所得到的外泌体虽然纯度高,但由于需要配有价格昂贵的超高速离心机及相应耗材,并且整个提取过程耗时漫长,仅适用于少量样本的处理。
其二是依靠免疫亲和性捕获的磁珠吸附法。利用含有特定抗体的磁珠与样本一起孵育反应,与样本中膜表面含有对应抗原的外泌体结合,再通过磁力吸附将磁珠-外泌体联合体分离出来。磁珠吸附法尽管提取分离特定外泌体纯度高,可区分亚型,但需要对磁珠进行特殊加工处理,试剂耗材消耗量大,而且产量和产率低下。
其三是基于共沉淀的试剂盒提取方法。诸如Exo-Quick、Exo-Spin等的商业化试剂盒利用聚合共沉淀原理,在样本里加入试剂抑制EXO的水合作用,使其易于沉淀下来,然后通过后续低速离心富集得到EXO的沉淀。该方法的缺点在于会产生聚合微粒、脂蛋白、RNA(Ribonucleic Acid,核糖核酸)复合物等杂质,所得的EXO纯度较低,而且试剂盒价格昂贵,无法大规模应用在临床。
综上所述,目前仍缺少一种成本低廉,操作简单,耗时短,所得尿液外泌体产率和纯度高且结构完整,不需要离心机及其他本装置以外的辅助设备,可供家庭和社区大规模推广使用的尿液外泌体提取和分离的装置。
实用新型内容
针对上述的缺陷,本实用新型的目的在于提供一种医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置,不需要离心机及其他本装置以外的辅助设备,以实现尿液外泌体便捷提取。
为了实现上述目的,本实用新型提供一种医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置,包括:
溶液池,设置于所述装置的上端,所述溶液池盛放欲过滤的尿液样本;
纳米膜滤器,设置于所述溶液池与废液收集器之间,包括上、下设置的两个过滤层和尿液外泌体收集器;设置于下端的所述过滤层与所述尿液外泌体收集器连接,所述过滤层过滤所述尿液样本中的尿液杂质,并且所述尿液外泌体收集器收集所述尿液外泌体;
废液收集器,具有尿液杂质收集腔,并且所述废液收集器套接于所述纳米膜滤器的外侧。
根据所述的装置,所述两个过滤层包括:
首次过滤层,包括滤膜支撑架和初始滤膜,所述初始滤膜内嵌于滤膜支撑架上;
纳米过滤层,包括纳米膜支撑架和纳米滤膜;所述纳米膜支撑架内嵌于所述纳米膜滤器的底部,与所述纳米膜滤器的侧壁连接;所述尿液外泌体收集器设置于所述纳米过滤层的中央处,并且所述尿液外泌体收集器与所述纳米膜支撑架可拆卸连接。
根据所述的装置,所述废液收集器的侧壁上部设置有真空吸气接口,所述真空吸气接口用于连接真空泵;
所述装置的顶端具有托沿,并且所述托沿与所述废液收集器的顶端管口为封闭结构。
根据所述的装置,所述滤膜支撑架包括多个第一支架条,多个第一支架条的一端分别与所述与所述溶液池的侧壁的底部连接,其另一端连接在一起;
所述纳米膜支撑架包括多个第二支架条,多个第二支架条的一端分别与所述与所述纳米膜滤器的侧壁的底部连接,其另一端连接在一起。
根据所述的装置,所述初始滤膜具有多个第一过滤孔,所述第一过滤孔的孔径为0.15微米,所述初始滤膜用于去除体积大于直径为40-100nm的所述外泌体的囊泡以及其他细胞碎片等尿液杂质;所述纳米滤膜具有多个第二过滤孔,所述第二过滤孔的孔径为20nm,所述纳米滤膜用于截留直径为40-100nm的外泌体;
所述尿液外泌体收集器的容量为5~20毫升。
根据所述的装置,所述首次过滤层为过滤包括细胞碎片等尿液杂质的首次过滤层;所述纳米滤膜层过滤包括可溶性蛋白的尿液杂质的纳米滤膜层;经过所述首次过滤层和所述纳米滤膜层过滤获得的所述尿液外泌体收集于所述尿液外泌体收集器中。
根据所述的装置,所述首次过滤层的纵向截面为V字型;所述纳米过滤层的纵向截面为V字型;
所述溶液池、纳米膜滤器以及所述废液收集器的外形均呈圆柱体形。
所述溶液池、纳米膜滤器以及所述废液收集器的外壁由透明材质制成。
根据所述的装置,所述装置还包括:
上盖,盖设于所述样本池的顶端,与所述废液收集器的外侧壁可拆卸连接或者与所述托沿可拆卸连接;
排液口,设置于所述废液收集器的底部,并具有可拆卸的排液盖;
所述废液收集器的底部与所述废液收集器的外壁可拆卸连接。
根据所述的装置,所述所述溶液池、纳米膜滤器以及所述废液收集器的外壁上均设置有刻度线,并且这些所述刻度线不在横向方向上的同一直线上;
所述废液收集器的底部的内壁和所述废液收集器的外壁分别设置有对应的内、外螺纹。
根据所述的装置,所述装置还包括:
用于盛放超纯水的冲洗杯,设置于所述废液收集器体外,所述冲洗杯的材质为透明材料,并且所述冲洗杯上设置有刻度线,所述冲洗杯的容量为200毫升;
用于吹打所述所述纳米滤膜上的截留液的移液器,设置于所述废液收集器体外;以及
与所述真空吸气接口连接的,用于抽真空的真空泵。
本实用新型通过将医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置设置为包括溶液池、纳米膜滤器及废液收集器,纳米膜滤器的底部设有纳米膜,纳米膜滤器内部形成EXO纳米富的集器腔,废液收集器内部及纳米膜滤器下方之间形成尿液杂质的废液收集腔,纳米膜滤器的顶端管口设有托沿,该托沿与废液收集器顶端管口间为封闭结构,废液收集器侧壁上部设有真空泵吸气管接口,通过吸气管与真空泵连接。由此,可以通过真空泵进行负压抽气,利用静水压及滤膜两侧压力对尿液标本进行过滤,得到EXO,且无需复杂操作,无需离心机和本装置以外的其他实验装置及试剂处理,操作简单快捷。本装置便于携带,采用耗材成本价格低廉,适合在家庭及社区医院大规模推广使用。
附图说明
图1是本实用新型实施例提供的医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置结构示意图;
图2是图1所示的医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置结构简图;
图3是本实用新型实施例提供的医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置中滤膜支撑架结构示意图;
图4本实用新型实施例提供的医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置中纳米膜支撑架结构示意图;
图3是本实用新型实施例提供的医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置中滤膜支撑架结构示意图;
图4本实用新型实施例提供的医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置中纳米膜支撑架结构示意图;
图5是本实用新型实施例提供的装置富集尿液外泌体的示意图;
图6是本实用新型实施例提供的装置富集尿液外泌体的示意图;
图7是本实用新型实施例提供的装置富集尿液外泌体检测结果的外泌体的粒子直径和粒子数目的坐标示意图。
具体实施方式
为了使本实用新型的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合附图及实施例,对本实用新型进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本实用新型,并不用于限定本实用新型。
参见图1~图2,在本实用新型的一个实施例中提供了一种医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置100,包括:
溶液池10,设置于所述装置的上端,所述溶液池10盛放欲过滤的尿液样本;
纳米膜滤器20,设置于所述溶液池10与废液收集器30之间,包括包括上、下设置的两个过滤层和尿液外泌体收集器23;设置于下端的所述过滤层与所述尿液外泌体收集器23连接,所述过滤层过滤所述尿液样本中的尿液杂质,并且所述尿液外泌体收集器23收集所述尿液外泌体;
废液收集器30,具有尿液杂质收集腔,并且所述废液收集器30套接于所述纳米膜滤器20的外侧。
在该实施例中,医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置100包括溶液池10、纳米膜滤器20以及废液收集器30。其中溶液池10是用于放置欲过滤的尿液样本的;纳米膜滤器20包括两个过滤层和尿液外泌体收集器23,过滤层具有过滤膜,可以过滤掉尿液样本中的尿液杂质,将尿液外泌体提取,并存放在尿液外泌体收集器23中。该医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置100成本低廉,操作简单,耗时短,所得外泌体产率和纯度高且结构完整,不需要离心机及其他本装置以外的辅助设备,可供家庭和社区大规模推广使用。该装置100可供家庭和社区医院应用,所提取的外泌体可用于早期诊断多种慢性疾病,例如肾病和糖尿病等。
参见图1~图2,在本实用新型的一个实施例中,过滤层21包括:
首次过滤层21,包括滤膜支撑架211和初始滤膜222;滤膜支撑架211与溶液池10的底部连接,初始滤膜222内嵌于滤膜支撑架211上;
纳米过滤层22,包括纳米膜支撑架212和纳米滤膜213;纳米膜支撑架212设置于纳米膜滤器20的底部,与纳米膜滤器20的侧壁连接;纳米滤膜213内嵌于纳米膜支撑架212上;尿液外泌体收集器23设置于纳米过滤层22的中央处,并且尿液外泌体收集器23与纳米膜支撑架212可拆卸连接。样品池10的底部为向中部倾斜的滤膜支撑架211,滤膜支撑架211内侧嵌有初始滤膜222;纳米膜滤器20的底部为向中部倾斜的纳米膜支撑架212,纳米膜支撑架212内侧嵌有纳米滤膜213,纳米膜滤器20中央形成截面为V形的圆锥形的EXO的尿液外泌体收集器23;纳米膜滤器20及真空腔的废液收集器30外壁设有容积刻度。
此外,废液收集器30的侧壁上部设置有真空吸气接口315,真空吸气接口315用于连接真空泵;此外,装置100的顶端具有托沿32,并且托沿32与废液收集器30的顶端管口为封闭结构。初始滤膜222和纳米滤膜213的边缘均有封闭结构,纳米膜滤器20顶端管口设有托沿32,该托沿32与废液收集器30顶端管口间为封闭结构,真空腔的废液收集器30顶端管口设有盖帽,废液收集器侧壁上部设有真空抽气泵吸气管的真空吸气接口315,通过真空吸气接口315与真空抽气泵对接。
参见图3,在本实用新型的一个实施例中,所述滤膜支撑架211包括多个第一支架条2111,多个第一支架条2111的一端分别与所述溶液池10的底部的侧壁的连接,其另一端连接在一起;由此,首次过滤层21具有一定的倾斜度,可以很好的进行过滤;多个第一支架条2111与溶液池10的底部的侧壁连接,将构成一个圆锥型。
参见图4,所述纳米膜支撑架212包括多个第二支架条2121,多个第二支架条2121的一端分别与纳米膜滤器20的侧壁的底部连接,其另一端连接在一起。多个第二支架条2121与纳米膜滤器20的侧壁的底部连接,将构成一个圆锥型。
具体的,初始滤膜222具有多个第一过滤孔,所述第一过滤孔的直径大小为0.15微米;初始滤膜222用于去除体积大于直径为40-100nm的所述外泌体的其他外泌体以及其他细胞碎片等尿液杂质;纳米滤膜213具有多个第二过滤孔,纳米滤膜213孔径为20nm,纳米滤膜用于截留直径为40-100nm的外泌体尿液外泌体收集器23的容量为5~20毫升。优选的,所述第一过滤孔的大小为0.15微米,用于去除体积大于外泌体(直径为40-100nm)的囊泡以及细胞碎片等尿液杂质;纳米滤膜213具有多个第二过滤孔,第二过滤孔的孔径为20nm,用于截留直径为40-100nm的外泌体;初始滤膜222和纳米滤膜213为对应的微孔滤膜;其中,首次过滤层21为过滤包括细胞碎片等尿液杂质的首次过滤层;纳米滤膜层22位过滤包括可溶性蛋白的尿液杂质纳米滤膜层;经过首次过滤层21和所述纳米滤膜层22过滤获得的所述尿液外泌体收集于所述尿液外泌体收集器23中。尿液外泌体收集器23与纳米膜支撑架212底部的连接,可以是与该多个第二支架条2121共同连接端连接,并且该连接端可呈环状,便于尿液外泌体的滴落于尿液外泌体收集器23。
在本实用新型的一个实施例中,样本先倒入样品池10中,真空腔废液收集器30外侧的真空泵吸气管接口连接上真空泵进行负压抽气,利用静水压及滤膜两侧压力差,样品经过初始滤膜222可除去细胞碎片等尿液杂质;然后样品到达纳米膜滤器20中,经过纳米滤膜213时可截留直径在40-100nm纳米的EXO;最后富集的EXO将被收集到V形的EXO收集器(尿液外泌体收集器23)中,即完成尿液外泌体的提取。本实用新型成本低廉,操作简单,耗时短,所得外泌体产率和纯度高且结构完整,不需要离心机及其他本装置以外的辅助设备,可大规模推广供家庭和社区使用等优点。
在本实用新型的一个实施例中,首次过滤层21的纵向截面为V字型;所述纳米过滤层22的纵向截面为V字型。溶液池10、纳米膜滤器20以及所述废液收集器30的外形均呈圆柱体形;溶液池10、纳米膜滤器20以及所述废液收集器30的外壁由透明材质制成。溶液池10、纳米膜滤器20以及废液收集器30的外壁上均设置有刻度线,并且这些所述刻度线不在横向方向上的同一直线上。由此,可以清楚的看到溶液池10、纳米膜滤器20以及废液收集器30的外壁上的刻度,以及当前各个容器内装载的溶液的容量。
此外医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置100还包括:
用于盛放超纯水的冲洗杯,设置于所述废液收集器30体外,所述冲洗杯的材质为透明材料,并且所述冲洗杯上设置有刻度线,所述冲洗杯的容量为200毫升;
用于吹打所述所述纳米滤膜213上的截留液的移液器,设置于所述废液收集器30体外;以及
与所述真空吸气接口连接的,用于抽真空的真空泵
使用本实用新型提供的医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置100富集尿液外泌体的具体方法如下:
样本收集后按照样品池10容积分批加入样品池中,真空腔废液收集器30外侧的真空吸气接口315连接上真空泵进行负压抽气,利用静水压及滤膜两侧压力差,样品经过孔径为0.15微米的初始滤膜222可除去体积大于外泌体(直径为40-100nm)的囊泡以及细胞碎片等尿液杂质。样品到达纳米膜滤器20中,经过截留分子量为1000KDa的纳米滤膜213时可截留直径在40-100nm的EXO,而其余可溶性蛋白等则从纳米滤膜213上滤出,进入真空腔废液收集器30中。待纳米膜滤器20内的截留液剩余10ml左右时,用冲洗杯往EXO纳米富集器中加入200ml超纯水,继续上述纳米膜流程。待纳米膜滤器20内的截留液剩余5ml时,用移液器吹打截留液使其混匀并收集到EXO收集器中,该截留液即为最终尿液外泌体溶液。
此外,在本实用新型的一个优选实施例中,此外,该装置100还包括上盖40,盖设于样本池的顶端,与废液收集器30的外侧壁可拆卸连接或者与托沿32可拆卸连接;
排液口24,设置于所述废液收集器30的底部,并具有可拆卸的排液盖;
废液收集器30的底部与废液收集器30的外壁可拆卸连接。例如,可以与废液收集器30的外侧壁螺接,或者是与托沿32卡接,在上盖40的内侧设置有与托沿32相适配的密封胶垫。由此可以将装置100密闭,形成抽真空的环境。当需要使用该装置100时,加入样本液后,将上盖40与废液收集器30的外侧壁旋紧,在富集完成后,再旋开上盖40,进行装置100的清洗工作等。图2是图1所示的装置100未包括上盖的结构简图。此外参见图1及图2,废液收集器的底部301与废液收集器30的外壁可拆卸连接。两者可以通过适配的卡接件或者是螺纹连接的方式进行连接。具体的废液收集器的底部301的内壁和废液收集器30的外壁分别设置有对应的内、外螺纹。在富集过程完成后,可以通过将废液收集器的底部301拆卸,然后拆卸第一收集器23,取出富集到的EXO。优选的,排液口24则设置于废液收集器的30底部,并具有可拆卸的排液盖,在富集完成了,可以通过拆卸该排液盖,将尿液杂质排除,以及之后的方便装置100的清洗。
与现有常用的超速离心法、磁珠吸附法及试剂盒提取法相比,本实用新型提供的外泌体的具有以下优势:可富集获得与上述方法纯度相当的外泌体。因为本装置100中为截留分子量为1000KDa的纳米膜213时可截留直径在40-100nm纳米的EXO,而其余可溶性蛋白等则从纳米滤膜213上渗出。本装置100可一次性处理大量尿液标本,且无需复杂操作,不需要离心机及其他本装置以外的辅助设备。本装置100配置有小型真空泵的基层医院,甚至家庭即可使用,无需离心机和本装置以外的其他实验装置及试剂处理。本装置100通过真空泵进行负压抽气,利用静水压及滤膜两侧压力差实现的,操作简单快捷。本装置100便于携带,采用耗材成本价格低廉,适合在家庭及社区医院大规模推广使用。
本实用新型通过将医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置设置为包括溶液池、纳米膜滤器及废液收集器,纳米膜滤器的底部设有纳米膜,纳米膜滤器内部形成EXO纳米富的集器腔,废液收集器内部及纳米膜滤器下方之间形成尿液杂质的废液收集腔,纳米膜滤器的顶端管口设有托沿,该托沿与废液收集器顶端管口间为封闭结构,废液收集器侧壁上部设有真空泵吸气管接口,通过吸气管与真空泵连接。由此,可以通过真空泵进行负压抽气,利用静水压及滤膜两侧压力对尿液标本进行过滤,得到EXO,且无需复杂操作,无需离心机和本装置以外的其他实验装置及试剂处理,操作简单快捷。本装置便于携带,采用耗材成本价格低廉,适合在家庭及社区医院大规模推广使用。该医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置可以帮助多种慢性疾病的诊断。
在本实用新型的一个实施方式中,提供的采用二次膜滤过法分离尿液外泌体的方法,具体含有以下步骤:
(1)孔径大小为0.15微米的初始滤膜222:收集到的尿液样本全部经过设置有孔径大小为0.15微米的初始滤膜222过滤以除去细胞碎片、外泌体以外的囊泡等杂质;
(2)截留分子量为1000KDa的纳米滤膜213:初始滤膜222滤过的液体,全部经过具有截留分子量为1000KDa的纳米滤膜213过滤,待液体滤过到纳米膜底部3-5cm处时,加入200mlPBS液洗脱,进一步除去尿液中的可溶性蛋白,纯化尿液外泌体,收集5ml液体,此即为富集的外泌体,参见图5和图6。
纳米滤膜213、初始滤膜222均购自仕必纯(上海)贸易有限公司Spectrum LabsInc,孔径大小为0.15微米的第一滤过膜的截留直径为200nm以上的微囊泡,纳米膜截留分子量为1000KDa。
(3)透射电镜观察:取步骤(2)中制备的尿液外泌体20ul,点样于铜网,5分钟后,予3%(W/V)磷钨酸负染2分钟,超纯水洗涤两遍,干燥5分钟后检测,调节透射电镜焦距,观察尿液外泌体的形态和粒径,尿液外泌体呈杯状或圆形,粒径在100nm。
(4)纳米流式检测:用PBS稀释尿液外泌体,等比稀释,稀释为1000倍,上样1ul,对外泌体进行分析记录。尿液外泌体的粒径峰在40-100nm,没有杂峰,样品较纯;40-100nm粒径的外泌体占到94.1%(参见图7)。
(5)检测结果
透射电镜下尿液外泌体呈杯状或球形。
尿液外泌体的粒径40-100nm。
将步骤(2)收集的外泌体采用2D-DIGE蛋白组学和MALDI-TOF-MS质谱技术联合应用寻找糖尿病肾病(1-2期)早期诊断的尿液外泌体中的生物标记物。采用Western-blot验证尿液外泌体中的生物标记物在糖尿病肾病早期诊断中的符合率。
通过本实用新型分离的尿液外泌体特异性生物学标记物确诊的糖尿病肾病1-2期患者临床干预后效果显著。
对糖尿病患者使用本实用新型分离收集尿液外泌体,通过检测外泌体中糖尿病肾病1-2期的特异性生物标记物,确诊为的糖尿病肾病1-2期的患者,经过强化饮食运动治疗、强化血糖控制、调节血脂、控制血压等综合干预,随访2年,病情稳定,未发现明显进展至糖尿病肾病3期的患者,显著延缓了糖尿病肾病的进展。
本实用新型通过将医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置设置为包括溶液池、纳米膜滤器及废液收集器,纳米膜滤器的底部设有纳米膜,纳米膜滤器内部形成EXO纳米富的集器腔,废液收集器内部及纳米膜滤器下方之间形成尿液杂质的废液收集腔,纳米膜滤器的顶端管口设有托沿,该托沿与废液收集器顶端管口间为封闭结构,废液收集器侧壁上部设有真空泵吸气管接口,通过吸气管与真空泵连接。由此,可以通过真空泵进行负压抽气,利用静水压及滤膜两侧压力对尿液标本进行过滤,得到EXO,且无需复杂操作,无需离心机和本装置以外的其他实验装置及试剂处理,操作简单快捷。本装置便于携带,采用耗材成本价格低廉,适合在家庭及社区医院大规模推广使用
当然,本实用新型还可有其它多种实施例,在不背离本实用新型精神及其实质的情况下,熟悉本领域的技术人员当可根据本实用新型作出各种相应的改变和变形,但这些相应的改变和变形都应属于本实用新型所附的权利要求的保护范围。
Claims (10)
1.一种医院及家庭均可使用的富集尿液外泌体的装置,其特征在于,包括:
溶液池,设置于所述装置的上端,所述溶液池盛放欲过滤的尿液样本;
纳米膜滤器,设置于所述溶液池与废液收集器之间,包括上、下设置的两个过滤层和尿液外泌体收集器;设置于下端的所述过滤层与所述尿液外泌体收集器连接,所述过滤层过滤所述尿液样本中的尿液杂质,并且所述尿液外泌体收集器收集所述尿液外泌体;
废液收集器,具有尿液杂质收集腔,并且所述废液收集器套接于所述纳米膜滤器的外侧。
2.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,所述两个过滤层包括:
首次过滤层,包括滤膜支撑架和初始滤膜,所述初始滤膜内嵌于滤膜支撑架上;
纳米过滤层,包括纳米膜支撑架和纳米滤膜;所述纳米膜支撑架内嵌于所述纳米膜滤器的底部,与所述纳米膜滤器的侧壁连接;所述尿液外泌体收集器设置于所述纳米过滤层的中央处,并且所述尿液外泌体收集器与所述纳米膜支撑架可拆卸连接。
3.根据权利要求2所述的装置,其特征在于,所述废液收集器的侧壁上部设置有真空吸气接口,所述真空吸气接口用于连接真空泵;
所述装置的顶端具有托沿,并且所述托沿与所述废液收集器的顶端管口为封闭结构。
4.根据权利要求2所述的装置,其特征在于,所述滤膜支撑架包括多个第一支架条,多个第一支架条的一端分别与所述与所述溶液池的侧壁的底部连接,其另一端连接在一起;
所述纳米膜支撑架包括多个第二支架条,多个第二支架条的一端分别与所述与所述纳米膜滤器的侧壁的底部连接,其另一端连接在一起。
5.根据权利要求2所述的装置,其特征在于,所述初始滤膜具有多个第一过滤孔,所述第一过滤孔的孔径为0.15微米,所述初始滤膜用于去除体积大于直径为40-100nm的所述外泌体的囊泡以及细胞碎片尿液杂质;所述纳米滤膜具有多个第二过滤孔,所述第二过滤孔的孔径为20nm,所述纳米滤膜用于截留直径为40-100nm的外泌体;
所述尿液外泌体收集器的容量为5~20毫升。
6.根据权利要求5所述的装置,其特征在于,所述首次过滤层为过滤包括细胞碎片尿液杂质的首次过滤层;所述纳米过滤层过滤包括可溶性蛋白的尿液杂质的纳米过滤层;经过所述首次过滤层和所述纳米过滤层过滤获得的所述尿液外泌体收集于所述尿液外泌体收集器中。
7.根据权利要求2所述的装置,其特征在于,所述首次过滤层的纵向截面为V字型;所述纳米过滤层的纵向截面为V字型;
所述溶液池、纳米膜滤器以及所述废液收集器的外形均呈圆柱体形;
所述溶液池、纳米膜滤器以及所述废液收集器的外壁由透明材质制成。
8.根据权利要求3所述的装置,其特征在于,所述装置还包括:
上盖,盖设于样本池的顶端,与所述废液收集器的外侧壁可拆卸连接或者与所述托沿可拆卸连接;
排液口,设置于所述废液收集器的底部,并具有可拆卸的排液盖;
所述废液收集器的底部与所述废液收集器的外壁可拆卸连接。
9.根据权利要求8所述的装置,其特征在于,所述溶液池、纳米膜滤器以及所述废液收集器的外壁上均设置有刻度线,并且这些所述刻度线不在横向方向上的同一直线上;
所述废液收集器的底部的内壁和所述废液收集器的外壁分别设置有对应的内、外螺纹。
10.根据权利要求3所述的装置,其特征在于,所述装置还包括:
用于盛放超纯水的冲洗杯,设置于所述废液收集器体外,所述冲洗杯的材质为透明材料,并且所述冲洗杯上设置有刻度线,所述冲洗杯的容量为200毫升;
用于吹打所述纳米滤膜上的截留液的移液器,设置于所述废液收集器体外;以及
与所述真空吸气接口连接的,用于抽真空的真空泵。
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