CN206666531U - 一种肿瘤细胞团的简便分选过滤装置 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种肿瘤细胞团（多细胞球体）的简便分选过滤装置，包括过滤件一、过滤件二和连接管。两个过滤件底部均为滤网；连接管顶部设置有漏斗，外壁上设置有管嘴，管嘴的位置不低于漏斗底部以上1/3的高度。使用时，样品液依次经过过滤件一和过滤件二，过滤件一过滤掉组织块等大杂质，肿瘤细胞团被过滤件二截留，而单个细胞、细小杂质颗粒穿过过滤件二滤网流入连接管中被去除。该装置可一次性过滤获得所需大小均匀的细胞团，可显著降低因反复操作带来的细胞团数量损失和细胞团活性的损伤；且可有效去除单细胞和细小杂质，避免细小杂质颗粒过多造成对后续试验产生背景信号干扰，实现整体上规范细胞团的分选流程，提高试验过程质量的可控性。

Description

一种肿瘤细胞团的简便分选过滤装置

技术领域

本实用新型属于细胞分选技术领域。更具体地，涉及一种原代癌组织来源或癌细胞团体外培养物中的细胞团（多细胞球体）分选过滤装置。

背景技术

我国是全球癌症高发国家，癌症的发病率和死亡率一直在上升，已经成为当前我国居民主要的致死原因之一，临床上最常见恶性肿瘤主要为实体恶性肿瘤。诱发实体恶性肿瘤的原因很多，目前大多数实体恶性肿瘤发病机理尚不清楚，传统癌症治疗主要依赖手术、化疗、放疗，其中化疗作为最常用的全身治疗手段，广泛应用于癌症治疗的各个阶段，在癌症治疗中有着举足轻重的作用。然而，由于化疗个体化差异大，临床化疗疗效有限，如果患者选择了不适合的化疗方案，可能适得其反，难以从中获益。利用化疗药敏检测技术指导临床个体化化疗实践，帮助患者选择合适的化疗药物，减轻患者的化疗不良反应和经济负担。目前的药敏检测技术种类繁多，其中胶原凝胶滴包埋药敏检测技术（CD-DST）是一种新型体外药敏检测技术，采用原代肿瘤细胞团体外三维立体培养，进行药物评价，可有效模拟人体内肿瘤微环境，获得接近于人体的药物敏感性检测数据，因而有着广阔的临床应用前景。

不过，目前市面上尚无真正针对肿瘤细胞团的专用分选装置，传统的细胞团分选过程复杂，主要存在问题有：1）细胞悬液多次反复离心，过滤时滤过性差，细胞易丢失，细胞回收率低；2）操作时间长，对肿瘤细胞活性损伤大，回收细胞活性差异大；3）回收样品过滤后的滤过液，细胞团的大小差异较大，均一性不好，这些问题对后续药敏检测试验的质量控制存在不良影响。因此，最大限度的提高有限体积/重量的原代癌组织中细胞团的回收数量、细胞活性及细胞团大小的均一性，是目前本领域技术人员亟待解决的问题。

此外，近年来关于肿瘤微环境的研究日益兴起，在体外采用细胞系或原代癌细胞三维培养，构建多细胞球体模型，研究肿瘤微环境对肿瘤发生、发展、治疗等方面的影响，也需要一种快速可靠的分选工具。

发明内容

本实用新型要解决的技术问题是克服现有肿瘤细胞团获取方式的缺陷和技术不足，提供一种适用于癌组织来源或体外培养肿瘤细胞团的简便分选过滤装置，可有效提高肿瘤细胞团回收效率、细胞团活性及细胞团均一性。本发明的应用，可有助于临床科研人员克服实际工作中肿瘤细胞团回收的困难，提高试验的成功率和可重复性。

本实用新型上述目的通过以下技术方案实现：

一种肿瘤细胞团（多细胞球体）分选过滤装置，包括依次可拆卸式连接的过滤件一1、过滤件二2和连接管3；所述过滤件一1和过滤件二2的上端均开口，底部均为倾斜式滤网，过滤件一1的滤网孔径为300～500μm，过滤件二2的滤网孔径为20～60μm；所述连接管3顶部还设置有漏斗4，漏斗4上端与过滤件二2的滤网相连；连接管外壁上还设置有管嘴5，管嘴5的位置高于漏斗4的下端；即漏斗与连接管外壁之间形成中空夹层，管嘴5与中空夹层相通。

该装置使用时，将消化处理后的新鲜肿瘤组织分散液或培养后回收的肿瘤细胞团悬液加入过滤件一1中，通过滤网进行分离，组织分散液中的脂肪组织、膜组织、结缔组织等大的组织块或杂质首先被过滤件一1截留，而细胞团、单细胞及细胞裂解碎片等细小杂质一起进入过滤件二2，其中适中大小的细胞团被过滤件二2截留，而单细胞及细小杂质穿过滤网流入连接管3中被去除。然后取出过滤件二2，倒置冲洗后，即可获得所需细胞团。

该装置有效减少了对癌组织或细胞进行反复吹打、过滤、离心等操作次数，新鲜肿瘤组织分散液或培养后的肿瘤细胞团悬液加入后一次性过滤即可获得所需大小均匀的细胞团，可显著降低因反复离心带来的细胞团回收数量的减少以及反复操作对细胞团活性的损伤。而且过滤件二2还可有效去除单细胞及细小杂质颗粒，避免细小杂质颗粒过多造成对后续试验产生背景信号干扰，实现整体上规范细胞团的分选流程，提高试验过程质量的可控性。

另外，使用时，管嘴5可与真空泵相连接，可形成一定的负压（压力）保证组织分散液通过漏斗向下流，克服细胞悬液表面张力较大，难以通过自身重力作用穿过滤网的问题。同时，管嘴5的位置不低于漏斗4的底部以上1/3高度（即管嘴5内端在漏斗与外壁之间的中空夹层中），保证不会将滤液吸入真空泵，形成二次污染。

更优选地，所述连接管3包括连接部31和底管32，所述漏斗4和管嘴5均设置在连接部31上。底管32可以是现有市购的离心管（如50mL离心管），如此底管利用现有的离心管即可（因这里只是收集废液，在保证气密性的前提下，离心管可重复使用），以便降低成本。

更优选地，该装置还包括真空泵6，与管嘴5可拆卸式连接。真空泵可重复使用，过滤分选装置本体为一次性耗材，方便使用。

另外，需要说明的是，该装置中过滤件一1、过滤件二2和连接管3之间的连接密封性较好（现有技术可很好的实现）。同时，从设计的角度出发，该装置的部件设置可以要求如下：所述过滤件一1和过滤件一2完全相同（除滤网孔径大小不同外），且外径小于连接管3的内径，且过滤件一1和过滤件二2及过滤件二2与连接管3之间的连接方式均为内旋式旋转接口连接；连接管3的外壁向上一直延伸到顶部，与过滤件一1外壁顶部平齐。该设计可以非常保险的保证滤液不会外渗污染操作台。

具体地，所述过滤件一1和过滤件二2外形基本相同，过滤件一1底端有与过滤件二2连接的接口，过滤件二2顶端有与过滤件一1连接的接口，底端有与连接管3连接的接口；过滤件一1、过滤件二2底端连接处外径小于连接管3的内径，但可紧密连接；连接管3的外壁向上一直延伸到顶部，与过滤件一1、过滤件二2外壁顶部平齐。

优选地，过滤件一1和过滤件二2之间，过滤件二2与连接管3之间，连接口处均设置有密封圈。

另外，优选地，所述滤网的倾斜角度15°~45°。

优选地，所述滤网为尼龙网或不锈钢滤网。

优选地，该装置由透明材质制成。

优选地，所述透明材质为塑料或玻璃。

另外，作为一种可选择的优选方案，本实用新型的细胞团分选过滤装置包括一个真空泵6、一个底座7和若干个过滤装置本体；所述过滤装置本体由透明塑料制成，包括过滤件一、过滤件二、连接管，具体结构同上所述；若干个过滤装置本体均与真空泵6连接；底座7上设置有若干个槽，用于安放过滤装置本体。

本实用新型具有以下有益效果：

该装置有效减少了对癌组织或细胞进行反复吹打、过滤、离心等操作次数，倾斜式设计的过滤网可避免因大的组织块、细胞团或杂质堵塞网孔，造成后续组份无法滤过的情况发生，显著提高了肿瘤细胞团回收数量，降低了肿瘤细胞团活性的损伤。管嘴和真空泵的设计可更进一步地避免网孔堵塞问题。

而且，该装置的过滤件二还可有效去除单细胞及细小杂质颗粒，提高肿瘤细胞团大小的均一性，同时避免细小杂质颗粒过多造成对后续试验产生背景信号干扰。本发明的应用，可有助于临床科研人员克服实际工作中肿瘤细胞团分选回收的困难，提高试验的成功率和可重复性。

附图说明

图1为实施例1细胞团分选过滤装置示意图。

图2为实施例2细胞团分选过滤装置示意图。

图3为实施例2细胞团分选过滤装置部件拆解示意图。

图4为实施例3细胞团分选过滤装置纵剖面图。

图5为实施例4细胞团分选过滤装置示意图。

图中，1为过滤件一，2为过滤件二，3为连接管（31为连接部、32为底管），4为漏斗，5为管嘴，6为真空泵。

具体实施方式

以下结合附图和具体实施例来进一步说明本实用新型，但实施例并不对本实用新型做任何形式的限定。除非特别说明，本实用新型采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

除非特别说明，本实用新型所用试剂和材料均为市购。

实施例1

一种肿瘤细胞团分选过滤装置，由透明塑料制成，如图1所示，包括依次可拆卸式连接的过滤件一1、过滤件二2和连接管3。所述过滤件一1和过滤件二2底部均为滤网，过滤件一1的滤网孔径为300～500μm，过滤件二2的滤网孔径为20～60μm。所述连接管3顶部还设置有漏斗4，且连接管外壁上设置有管嘴5，管嘴5的位置高于漏斗4的下端，不低于漏斗4底部1/3的高度，即漏斗与连接管外壁之间形成中空夹层，管嘴5内端位于中空夹层内。

另外，需要说明的是，该装置中过滤件一1、过滤件二2和连接管3之间的连接密封性较好（现有技术可很好的实现），使用时滤液不会外渗污染操作台。

该装置使用时，将新鲜组织分散液加入过滤件一1中，通过滤网进行分离，组织分散液中的脂肪组织、膜组织、结缔组织等较大组织和杂质首先被过滤件一1截留，细胞团和单细胞及细小杂质颗粒等进入过滤件二2，其中适中大小的肿瘤细胞团被过滤件二2截留，而单细胞、细小杂质颗粒等较小组份穿过滤网流入连接管3中被去除。然后取出过滤件二2，倒置冲洗后，即可获得所需肿瘤细胞团。

使用时，管嘴5可与真空泵相连接，可形成一定的负压，保证组织分散液通过漏斗向下流动，避免因滤液表面张力过大，难以利用自重穿过滤网；同时，管嘴5的位置不低于漏斗4的底部1/3高度（即管嘴5内端在漏斗与外壁之间的中空夹层中），保证不会将滤液吸出，形成二次污染。

实施例2

一种肿瘤细胞团分选过滤装置，由透明塑料制成，如图2和图3所示，包括依次可拆卸式连接的过滤件一1、过滤件二2和连接管3。所述过滤件一1和过滤件二2底部均为倾斜式滤网，过滤件一1的滤网孔径为300～500μm，过滤件二2的滤网孔径为20～60μm，滤网倾斜角度为15°~45°。所述连接管3包括连接部31和底管32，连接部31顶部设置有漏斗4，且连接管外壁上设置有管嘴5，管嘴5的位置不低于漏斗4的底部1/3高度；即漏斗与连接管外壁之间形成中空夹层，管嘴5内端位于中空夹层内。

底管32可以是现有市购的离心管（如50mL离心管），如此底管利用现有的离心管即可（因这里只是收集废液，在保证气密性的前提下，可重复使用），以降低成本。

实施例3

一种肿瘤细胞团分选过滤装置，由透明塑料制成，如图4所示，包括依次可拆卸式连接的过滤件一1、过滤件二2、连接管3和真空泵6。真空泵6数量一个，可重复使用，过滤本体（即过滤件一1、过滤件二2、连接管3）数量若干，为一次性耗材。

所述过滤件一1和过滤件二2底部均为倾斜式滤网，过滤件一1的滤网孔径为300～500μm，过滤件二2的滤网孔径为20～60μm，滤网倾斜角度为15°~45°。所述过滤件一1和过滤件二2外观基本相同，不同之处在于过滤件一1底端有与过滤件二2连接的接口，过滤件二2顶端有与过滤件一1连接的接口，底端有与连接管3连接的接口；接口内径均一致，但二者的底端连接接口外观相同，且过滤件一1和过滤件二2底端外径小于连接管3的顶端接口内径，连接管3的外壁向上一直延伸到顶部，与过滤件一1外壁顶部平齐，且过滤件一1和过滤件二2及过滤件二2与连接管3之间的连接方式均为内旋式旋转接口连接；过滤件一1和过滤件一2依次嵌合叠放设置在连接管3内。该设计可以非常保险的保证组织液不会外渗污染操作台。

所述连接管3包括连接部31和底管32，连接部31顶部设置有漏斗4，且连接管外壁上设置有管嘴5，管嘴5的位置不低于漏斗4的底部以上1/3的高度（即漏斗与连接管外壁之间形成中空夹层，管嘴5内端位于中空夹层内）。管嘴5外端与真空泵6可拆卸式连接。

实施例4

一种细胞团分选过滤装置，如图5所示，包括一个真空泵6、一个底座7和若干个过滤装置本体；若干个过滤装置本体均与真空泵6连接；底座7上设置有若干个槽，用于安放过滤装置本体。所述过滤装置本体由透明塑料制成，包括依次可拆卸式连接的过滤件一、过滤件二和连接管，具体结构同实施例1~3任一所述。

底座7和真空泵6可重复使用，过滤装置本体为一次性耗材。

最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本实用新型的技术方案而非对本实用新型保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本实用新型作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本实用新型的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本实用新型技术方案的实质和范围。

Claims (10)

1.一种肿瘤细胞团简便分选过滤装置，其特征在于，包括依次可拆卸式连接的过滤件一（1）、过滤件二（2）和连接管（3）；所述过滤件一（1）和过滤件二（2）底部均为滤网，过滤件一（1）的滤网孔径为300～500μm，过滤件二（2）的滤网孔径为20～60μm；所述连接管（3）顶部设置有漏斗（4），且连接管外壁上设置有管嘴（5），管嘴（5）的位置高于漏斗（4）的底部1/3高度。

2.根据权利要求1所述的肿瘤细胞团简便分选过滤装置，其特征在于，所述滤网可为倾斜式设置，倾斜角度为15°~45°。

3.根据权利要求1所述的肿瘤细胞团简便分选过滤装置，其特征在于，所述连接管（3）包括连接部（31）和底管（32），所述漏斗（4）和管嘴（5）均设置在连接部（31）上。

4.根据权利要求1所述的肿瘤细胞团简便分选过滤装置，其特征在于，还设置有真空泵（6），与管嘴（5）可拆卸式连接。

5.根据权利要求1所述的肿瘤细胞团简便分选过滤装置，其特征在于，所述过滤件一（1）和过滤件二（2）的外径均小于连接管（3）的内径；连接管（3）的外壁向上一直延伸到顶部，与过滤件一（1）、过滤件二（2）外壁顶部平齐。

6.根据权利要求1所述的肿瘤细胞团简便分选过滤装置，其特征在于，所述过滤件一（1）和过滤件二（2）之间，过滤件二（2）与连接管（3）之间，连接方式均为内旋式旋转接口连接。

7.根据权利要求6所述的肿瘤细胞团简便分选过滤装置，其特征在于，过滤件一（1）和过滤件二（2）之间，过滤件二（2）与连接管（3）之间，连接口处均设置有密封圈。

8.根据权利要求1所述的肿瘤细胞团简便分选过滤装置，其特征在于，所述滤网为尼龙网或不锈钢滤网。

9.根据权利要求1所述的肿瘤细胞团简便分选过滤装置，其特征在于，由透明材质制成。

10.根据权利要求1所述的肿瘤细胞团简便分选过滤装置，其特征在于，包括一个真空泵（6）、一个设置有若干个槽的底座（7）和若干个过滤装置本体；所述过滤装置本体由透明塑料制成，包括依次可拆卸式连接的过滤件一（1）、过滤件二（2）和连接管（3），具体结构同权利要求1~6任一所述；若干个过滤装置本体均与真空泵（6）连接。