CN206956028U - 用于分离羊膜间充质干细胞的试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本实用新型涉及试剂盒，公开了用于分离羊膜间充质干细胞的试剂盒，其包括放置板(1)，放置板(1)包括器械耗材放置区(11)、清洗液放置区(12)、胰蛋白酶放置区(13)和培养基放置区(14)，器械耗材放置区(11)内放置有无菌剪刀等，清洗液放置区(12)内放置有用于装清洗液的试剂瓶；胰蛋白酶放置区(13)内放置有装有胰蛋白酶的试剂瓶；培养基放置区(14)内放置有装有装羊膜干细胞养基的试剂瓶。本实用新型通过设置在试剂盒内的分离板，对处理后的羊膜组织进行离心和保温，采用了一次性无菌器械和试剂，结构简单，既减少了分离羊膜间充质干细胞的前期准备工作，又排除了污染的源头，可以实现羊膜间充质干细胞的高效分离。
Description
技术领域
本实用新型涉及试剂盒，尤其涉及用于分离羊膜间充质干细胞的试剂盒。
背景技术
间充质干细胞是一种具有多项分化潜能的干细胞，来源于发育早期的中胚层，除了骨髓以外，脂肪组织、胎肝、血液、肺、脐带血中均能少量分离出MSC。在体内外，MSC可以分化为骨、软骨、肌腱、肌肉、脂肪组织和骨髓基质等，作为一种具有良好分化潜能的祖细胞，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。此外，研究发现MSC具有免疫调节特性和抑制淋巴细胞增殖的能力，这种免疫抑制作用可以摆脱自体或者供体细胞来源的限制，MSC容易获取保存为临床治疗移植排斥提供了可观的前景。
羊膜间充质干细胞分离方法虽已经比较稳定，但是分离过程所用器械试剂需要前期大量的准备工作，特别是使用前要对多种器械进行洗刷和灭菌，有污染的风险，而本用于分离羊膜间充质干细胞的试剂盒提供了一次性无菌器械，简单便捷无风险。
发明内容
本实用新型针对现有技术中需要进行大量准备工作，有污染风险的缺点，提供了用于分离羊膜间充质干细胞的试剂盒。
为了解决上述技术问题，本实用新型通过下述技术方案得以解决：
用于分离羊膜间充质干细胞的试剂盒，包括盒体，盒体内安装有放置板和分离板，放置板包括器械耗材放置区、清洗液放置区、胰蛋白酶放置区和培养基放置区，器械耗材放置区内放置有无菌剪刀、无菌镊子、无菌药勺、无菌塑料杯、无菌平皿和无菌细胞滤网，清洗液放置区内放置有用于装清洗液的试剂瓶；胰蛋白酶放置区内放置有装有胰蛋白酶的试剂瓶；培养基放置区内放置有装有装羊膜干细胞养基的试剂瓶；分离板包括板体和固定在板体上的保温棉层，板体为圆形板，板体的轴线上固定有旋转轴，旋转轴上连接有电机并通过电机带动板体和保温棉层旋转，保温棉层内镶嵌有电热丝，还包括控制器和安装在保温棉层内并检测保温棉层温度的温度传感器，控制器控制电机的转动，控制器接收温度传感器发出的温度信号并控制电热丝的工作，保温棉层的上表面上设有多个下陷的凹槽，还包括装有经处理后的羊膜组织的离心管，离心管插入凹槽内并通过旋转和加热分离干细胞。
作为优选，器械耗材放置区中放有两把无菌剪刀、两把无菌塑料镊子、两只无菌药勺、两只200mL的无菌塑料杯、两个无菌平皿、一个100um的无菌专用细胞滤网。
作为优选，清洗液放置区放置有一个200mL用于装清洗液的试剂瓶。
作为优选，胰蛋白酶放置区放置有一个50mL用于装胰蛋白酶的试剂瓶。
作为优选，培养基放置区放置一个200mL用于装羊膜干细胞培养基的试剂瓶。
本实用新型由于采用了以上技术方案，具有显著的技术效果：通过设置在试剂盒内的分离板，对处理后的羊膜组织进行离心和保温，采用了一次性无菌器械和试剂，结构简单，既减少了分离羊膜间充质干细胞的前期准备工作，又排除了污染的源头，可以实现羊膜间充质干细胞的高效分离。
附图说明
图1是本实用新型的结构示意图。
图2是图1的放置板的结构示意图。
附图中各数字标号所指代的部位名称如下：1—放置板、2—分离板、3—电机、4—控制器、5—温度传感器、6—盒体、11—器械耗材放置区、12—清洗液放置区、13—胰蛋白酶放置区、14—培养基放置区、21—板体、22—保温棉层、23—旋转轴、221—电热丝、222—凹槽。
具体实施方式
下面结合附图与实施例对本实用新型作进一步详细描述。
实施例1
用于分离羊膜间充质干细胞的试剂盒，如图所示，包括盒体6，盒体6内安装有放置板1和分离板2，放置板1包括器械耗材放置区11、清洗液放置区12、胰蛋白酶放置区13和培养基放置区14，器械耗材放置区11内放置有无菌剪刀、无菌镊子、无菌药勺、无菌塑料杯、无菌平皿和无菌细胞滤网，清洗液放置区12内放置有用于装清洗液的试剂瓶；胰蛋白酶放置区13内放置有装有胰蛋白酶的试剂瓶；培养基放置区14内放置有装有装羊膜干细胞养基的试剂瓶；分离板2包括板体21和固定在板体21上的保温棉层22，板体21为圆形板，板体21的轴线上固定有旋转轴23，旋转轴23上连接有电机3并通过电机3带动板体21和保温棉层22旋转，保温棉层22内镶嵌有电热丝221，还包括控制器4和安装在保温棉层22内并检测保温棉层22温度的温度传感器5，控制器4控制电机3的转动，控制器4接收温度传感器5发出的温度信号并控制电热丝221的工作，保温棉层22的上表面上设有多个下陷的凹槽222，还包括装有经处理后的羊膜组织的离心管，离心管插入凹槽222内并通过旋转和加热分离干细胞。通过控制器4控制电机3带动分离板2旋转从而使转速达到150r/min，通过温度传感器5和电热丝221保持温度为37℃。
器械耗材放置区11中放有两把无菌剪刀、两把无菌塑料镊子、两只无菌药勺、两只200mL的无菌塑料杯、两个无菌平皿、一个100um的无菌专用细胞滤网。
清洗液放置区12放置有一个200mL用于装清洗液的试剂瓶。
胰蛋白酶放置区13放置有一个50mL用于装胰蛋白酶的试剂瓶。
培养基放置区14放置一个200mL用于装羊膜干细胞培养基的试剂瓶。
步骤一：分别打开器械耗材放置区11中的两个200ml一次性无菌塑料杯；
步骤二：打开清洗液放置区12的清洗液试剂瓶，分别往两个一次性无菌塑料杯中加入80mL清洗液；
步骤三：打开器械耗材放置区11中的一次性无菌镊子，将羊膜放入步骤二中的装有清洗液的一个无菌塑料杯中洗涤，之后在第二个无菌塑料杯中重复洗涤；
步骤四：取出器械耗材放置区11中的一次性无菌平皿，用一次性无菌镊子将羊膜放入平皿正中央，使用一次性无菌剪刀将其彻底剪碎至1mm3；
步骤五：将胰蛋白酶放置区13的胰蛋白酶取出，将剪好的羊膜组织用一次性无菌药勺放入50mL离心管中，离心管插入保温棉层222中，按照羊膜组织体积和胰蛋白酶体积4:1的比例加入胰蛋白酶，控制温度为37℃、转速为150r/min的分离板2中消化30-40min。
步骤六：拿出器械耗材放置区11的一次性细胞专用滤网，将消化后羊膜组织经过一次性细胞筛网专用过滤，将固体组织过滤后，细胞悬液1500r/min，5min离心。
步骤七：取出培养基放置区14的培养基，将步骤六离心后的上清去掉，加入15ml培养液充分混匀后加入T75培养瓶中。然后在37℃、5％CO 2的培养箱中培养，之后72小时换液。
总之，以上所述仅为本实用新型的较佳实施例，凡依本实用新型申请专利范围所作的均等变化与修饰，皆应属本实用新型专利的涵盖范围。
Claims (5)
1.用于分离羊膜间充质干细胞的试剂盒，包括盒体(6)，其特征在于：盒体(6)内安装有放置板(1)和分离板(2)，放置板(1)包括器械耗材放置区(11)、清洗液放置区(12)、胰蛋白酶放置区(13)和培养基放置区(14)，器械耗材放置区(11)内放置有无菌剪刀、无菌镊子、无菌药勺、无菌塑料杯、无菌平皿和无菌细胞滤网，清洗液放置区(12)内放置有用于装清洗液的试剂瓶；胰蛋白酶放置区(13)内放置有装有胰蛋白酶的试剂瓶；培养基放置区(14)内放置有装有装羊膜干细胞养基的试剂瓶；分离板(2)包括板体(21)和固定在板体(21)上的保温棉层(22)，板体(21)为圆形板，板体(21)的轴线上固定有旋转轴(23)，旋转轴(23)上连接有电机(3)并通过电机(3)带动板体(21)和保温棉层(22)旋转，保温棉层(22)内镶嵌有电热丝(221)，还包括控制器(4)和安装在保温棉层(22)内并检测保温棉层(22)温度的温度传感器(5)，控制器(4)控制电机(3)的转动，控制器(4)接收温度传感器(5)发出的温度信号并控制电热丝(221)的工作，保温棉层(22)的上表面上设有多个下陷的凹槽(222)，还包括装有经处理后的羊膜组织的离心管，离心管插入凹槽(222)内并通过旋转和加热分离干细胞。
2.根据权利要求1所述的用于分离羊膜间充质干细胞的试剂盒，其特征在于：器械耗材放置区(11)中放有两把无菌剪刀、两把无菌塑料镊子、两只无菌药勺、两只200mL的无菌塑料杯、两个无菌平皿、一个100um的无菌专用细胞滤网。
3.根据权利要求1所述的用于分离羊膜间充质干细胞的试剂盒，其特征在于：清洗液放置区(12)放置有一个200mL用于装清洗液的试剂瓶。
4.根据权利要求1所述的用于分离羊膜间充质干细胞的试剂盒，其特征在于：胰蛋白酶放置区(13)放置有一个50mL用于装胰蛋白酶的试剂瓶。
5.根据权利要求1所述的用于分离羊膜间充质干细胞的试剂盒，其特征在于：培养基放置区(14)放置一个200mL用于装羊膜干细胞培养基的试剂瓶。
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| CN108753608A (zh) * | 2018-06-27 | 2018-11-06 | 李璇 | 一种鉴定喉癌细胞的核酸试剂盒 |
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