CN206736279U - 一种用于简单提取检测用核酸的工具 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种用于简单提取检测用核酸的工具，涉及生物工具领域。所述工具的主体结构为试管或离心管，所述主体结构中设置缓冲液层和凝胶层，所述缓冲液层与所述凝胶层成上、下设置。本实用新型的使用方法简单方便，且提高精制效率，缩短核酸提取时间。

Description

一种用于简单提取检测用核酸的工具

技术领域

本实用新型涉及生物工具领域，尤其涉及一种用于简单提取检测用核酸的工具。

背景技术

分子诊断是近年发展起来的诊断方法，是应用分子生物学方法检测患者体内遗传物质的结构或表达水平，或检测病原体的遗传物质而做出诊断的技术。分子诊断的主要材料为核酸(DNA、RNA)，主要技术有核酸分子杂交、聚合酶链反应和生物芯片技术。

但是无论何种方法，分子诊断的第一步是核酸提取。

现有临床检验中，核酸提取方法主要有PC法(苯酚/氯仿)、提取试剂盒法等，提取试剂盒一般包括核酸放出试剂、蛋白等杂质清除试剂以及洗涤试剂组成，提取核酸需要三步或四步操作：即破细胞游离核酸、去除干扰物质和/或洗涤、洗脱核酸。现有提取核酸需要10min-60min或更长的时间，且操作相对繁杂，耗材量大。

现有方法中尽管采用标本直接PCR方法缩短检测时间，简化核酸处理，但，由于临床标本成分复杂，直接PCR的灵敏度经常达不到检测要求。

为了解决上述问题亟需开发快速简便可靠的核酸提取工具。

实用新型内容

本实用新型的目的在于提供一种用于简单提取检测用核酸的工具，从而解决现有技术中存在的前述问题。

为了实现上述目的，本实用新型所述用于简单提取检测用核酸的工具，所述工具的主体结构为试管或离心管，所述主体结构中设置缓冲液层和凝胶层，所述缓冲液层与所述凝胶层成上、下设置。

优选地，所述缓冲液层中设置提取核酸的缓冲液。

优选地，所述凝胶层为单层凝胶层或多层凝胶层。

更优选地，所述单层凝胶层为Sephadex G25凝胶层或聚丙烯酰胺凝胶层。

更优选地，所述多层凝胶层的中间层为Sephadex G25凝胶层，所述中间层的上层、下层均为聚丙烯酰胺凝胶层。

更优选地，所述下层聚丙烯酰胺凝胶层的厚度为1-2mm。

本实用新型的有益效果是：

本实用新型使用凝胶进行核酸精制，凝胶可以是单层结构,也可以是多层结构，多层结构一般由三层凝胶组成,其中上下两层去除蛋白等大分子，提高精制效率，中间一层进行脱盐，只需要一次操作，就可以提取核酸，缩短核酸提取时间；本实用新型也可用于临床分子诊断所用核酸提取，临床样本可以直接加入到提取试剂中，减少生物风险，可以广泛应用于桌上POCT-PCR、检验科PCR检测试剂等，可以显著缩短诊断所需时间，并且不影响诊断精度，并且保存性能良好，如果结合我公司开发的干燥PCR试剂，更可以进行大标本量PCR，提高灵敏度。

附图说明

图1是凝胶层为单层的用于简单提取检测用核酸的工具；

图2是凝胶层为多层的用于简单提取检测用核酸的工具；

1表示工具的主体结构，2表示缓冲液，3表示单层凝胶层中由Sephadex G25制成的凝胶层或由聚丙烯酰胺制成的凝胶层，4表示多层凝胶层中的上层聚丙烯酰胺凝胶层，5表示多层凝胶层中的中间层Sephadex G25凝胶层，6表示多层凝胶层中的下层聚丙烯酰胺凝胶层。

具体实施方式

为了使本实用新型的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图，对本实用新型进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施方式仅仅用以解释本实用新型，并不用于限定本实用新型。

实施例

本实施例所述用于简单提取检测用核酸的工具，所述工具的主体结构为试管或取样器的枪头，所述主体结构中设置缓冲液和凝胶层。

更详细的解释说明为：

(一)所述缓冲液用于提取核算，所述凝胶层为具有去除蛋白等大分子和具有脱盐功能的凝胶层；

采用本实施例所述工具保证一步操作完成进行破坏细胞、去除蛋白质、脱盐等核酸提取步骤，得到用于分子诊断的核酸；所得到的核酸为标本中的全核酸,完成对临床标本的核酸检测。

(二)关于缓冲液层

所述缓冲液层中设置提取核酸的缓冲液。所述提取核酸的缓冲液包括：盐酸胍、乙硫氰酸胍等胍盐类、Tris-HCI、Brij58缓冲液和表面活性剂。1L所述核酸提取液包括：3～6mol盐酸胍(或者4mol异硫氰酸胍或适当浓度的胍盐类)、100mmol Tris-HCl(pH8.3)、16.6％Brij58。

提取核酸的缓冲液在常温破坏细胞壁、细胞膜等膜结构，放出膜结构中的核酸；由Sephadex G25凝胶脱盐或Sephadex G25和聚丙烯酰胺凝胶组成的三层凝胶通过离心或真空吸引,进行脱盐和去除蛋白等大分子物质工程。

(二)关于凝胶层

所述凝胶层为单层凝胶层或多层凝胶层。

当所述凝胶层为单层凝胶层时，所述单层凝胶层为由Sephadex G25制成的凝胶层或由聚丙烯酰胺制成的凝胶层。

当所述凝胶层为多层凝胶层时，所述多层凝胶层的中间层为由Sephadex G25制成的凝胶层，所述中间层的上层、下层均为由聚丙烯酰胺制成凝胶层。

经过缓冲液的样本提取液通过Sephadex G25凝胶进行脱盐，经过聚丙烯酰胺凝胶进行蛋白等大分子去除，达到只需一次操作就获得纯度较高的核酸，可直接用于PCR等分子诊断。

由Sephadex G25制成的凝胶层的制备方法：Sephadex G25凝胶干粉浸泡过量无菌纯净水中溶胀24小时，浸泡结束后进行搅拌2小时后静置，待Sephadex G25沉积后轻轻倾倒上层细微悬浮微粒，反复多次到见不到细微颗粒为止。由聚丙烯酰胺制成凝胶层中聚丙烯酰胺凝胶浓度为15～30％。

通过采用本实用新型公开的上述技术方案，得到了如下有益的效果：

本实用新型使用凝胶进行核酸精制，凝胶可以是单层结构,也可以是多层结构，多层结构一般由三层凝胶组成,其中上下两层去除蛋白等大分子，提高精制效率，中间一层进行脱盐，只需要一次操作，就可以提取核酸，缩短核酸提取时间；本实用新型也可用于临床分子诊断所用核酸提取，临床样本可以直接加入到提取试剂中，减少生物风险，可以广泛应用于桌上POCT-PCR、检验科PCR检测试剂等，可以显著缩短诊断所需时间，并且不影响诊断精度，并且保存性能良好，如果结合我公司开发的干燥PCR试剂，更可以进行大标本量PCR，提高灵敏度。

以上所述仅是本实用新型的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视本实用新型的保护范围。

Claims (7)

1.一种用于简单提取检测用核酸的工具，其特征在于，所述工具的主体结构为试管或离心管，所述主体结构中设置缓冲液层和凝胶层，所述缓冲液层与所述凝胶层成上、下设置。

2.根据权利要求1所述用于简单提取检测用核酸的工具，其特征在于，所述缓冲液层中设置提取核酸的缓冲液。

3.根据权利要求1所述用于简单提取检测用核酸的工具，其特征在于，所述凝胶层为单层凝胶层或多层凝胶层。

4.根据权利要求3所述用于简单提取检测用核酸的工具，其特征在于，所述单层凝胶层为Sephadex G25凝胶层或聚丙烯酰胺凝胶层。

5.根据权利要求3所述用于简单提取检测用核酸的工具，其特征在于，所述多层凝胶层的中间层为Sephadex G25凝胶层，所述中间层的上层、下层均为聚丙烯酰胺凝胶层。

6.根据权利要求5所述用于简单提取检测用核酸的工具，其特征在于，所述下层聚丙烯酰胺凝胶层的厚度为1-2mm。

7.根据权利要求5所述用于简单提取检测用核酸的工具，其特征在于，所述工具的主体结构还为取样器的枪头。