CN206273830U - 人冠状病毒nl63检测试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本实用新型公开了一种人冠状病毒NL63检测试剂盒，包括：盒体，盒体为长方体、正方体或圆柱体；与所述盒体转动连接的盒盖；设置在所述盒体内的软性垫板，所述软性垫板远离所述盒体底部的一侧设有第一凹槽、第二凹槽、第三凹槽以及第四凹槽；以及与所述第一凹槽相匹配的第一试剂管，与所述第二凹槽相匹配的第二试剂管，与所述第三凹槽相匹配的第三试剂管，与所述第四凹槽相匹配的第四试剂管；所述第一试剂管用于承装预分装PCR反应液，所述第二试剂管用于承载RT‑PCR酶，所述第三试剂管用于承载阳性指控品，所述第四试剂管用于承载阴性指控品。这种人冠状病毒NL63检测试剂盒操作简单、实用性强，能够快速检测出待测样本中是否含有人冠状病毒NL63。
Description
技术领域
本实用新型涉及生物技术领域，特别是涉及一种人冠状病毒NL63检测试剂盒。
背景技术
呼吸道疾病可由几十种病原体引起，病原体的最终确认需要大量的操作步骤，费时费力。
人冠状病毒NL63为有膜单股正链RNA病毒，容易引起婴幼儿及免疫低下人群严重的临床症状，同时感染者与SARS感染具有一定的相似性。
目前市面上尚未出现能够快速检测出待测样本中是否含有人冠状病毒NL63的检测试剂盒。
实用新型内容
基于此，有必要提供一种能够快速检测出待测样本中是否含有人冠状病毒NL63的人冠状病毒NL63检测试剂盒。
一种人冠状病毒NL63检测试剂盒，包括：
盒体，盒体为长方体、正方体或圆柱体；
与所述盒体转动连接的盒盖；
设置在所述盒体内的软性垫板，所述软性垫板远离所述盒体底部的一侧设有第一凹槽、第二凹槽、第三凹槽以及第四凹槽；以及
与所述第一凹槽相匹配的第一试剂管，与所述第二凹槽相匹配的第二试剂管，与所述第三凹槽相匹配的第三试剂管，与所述第四凹槽相匹配的第四试剂管；
所述第一试剂管用于承装预分装PCR反应液，所述第二试剂管用于承载RT-PCR酶，所述第三试剂管用于承载阳性指控品，所述第四试剂管用于承载阴性指控品。
在一个实施例中，所述软性垫板为泡沫板、软性塑料板或橡胶板。
在一个实施例中，所述第一凹槽为圆柱状凹槽、椭圆柱状凹槽或长方体柱状凹槽；
所述第二凹槽为圆柱状凹槽、椭圆柱状凹槽或长方体柱状凹槽；
所述第三凹槽为圆柱状凹槽、椭圆柱状凹槽或长方体柱状凹槽；
所述第四凹槽为圆柱状凹槽、椭圆柱状凹槽或长方体柱状凹槽。
在一个实施例中，所述第一凹槽、所述第二凹槽、所述第三凹槽和所述第四凹槽均为圆柱状凹槽，所述第一凹槽的直径与所述第二凹槽的直径的比例为1.5～3：1，所述第二凹槽、所述第三凹槽和所述第四凹槽的大小相同。
在一个实施例中，所述第一凹槽的直径与所述第二凹槽的直径的比例为2：1。
在一个实施例中，所述盒盖包括主体和侧板，所述主体与所述盒体转动连接，所述侧板与所述主体转动连接。
在一个实施例中，还包括相互之间具有磁性吸引力的第一磁性块和第二磁性块；
所述第一磁性块设置在所述盒盖上，所述第二磁性块设置在所述盒体上，当所述盒盖与所述盒体接触时，所述第一磁性块与所述第二磁性块通过磁性吸引力吸引连接。
在一个实施例中，所述第一试剂管用于承装预分装人冠状病毒NL63正向引物、人冠状病毒NL63反向引物、TaqMan探针以及dNTPs。
在一个实施例中，所述第二试剂管用于承载M-MLV逆转录酶和热启动Taq DNA聚合酶。
在一个实施例中，所述第四试剂管用于承载DEPC水。
这种人冠状病毒NL63检测试剂盒操作简单、实用性强，能够快速检测出待测样本中是否含有人冠状病毒NL63。
附图说明
图1为一实施方式的人冠状病毒NL63检测试剂盒的结构示意图。
具体实施方式
下面主要结合附图及具体实施例对人冠状病毒NL63检测试剂盒及其制备方法作进一步详细的说明。
如图1所示的人冠状病毒NL63检测试剂盒，包括：盒体10、盒盖20、软性垫板30、第一试剂管(图中未显示)、第二试剂管(图中未显示)、第三试剂管(图中未显示)和第四试剂管(图中未显示)。
盒体10为长方体、正方体或圆柱体。盒体10与盒盖20转动连接。
盒盖20包括主体22和侧板24，主体22与盒体10转动连接，侧板24与主体22转动连接。
软性垫板30设置在盒体10内。
优选的，软性垫板30为泡沫板、软性塑料板或橡胶板。
软性垫板30远离盒体10底部的一侧设有第一凹槽32、第二凹槽34、第三凹槽36以及第四凹槽38。
第一试剂管与第一凹槽32相匹配，第二试剂管与第二凹槽34相匹配，第三试剂管与第三凹槽36相匹配，第四试剂管与第四凹槽38相匹配。
第一凹槽32为圆柱状凹槽、椭圆柱状凹槽或长方体柱状凹槽。
第二凹槽34为圆柱状凹槽、椭圆柱状凹槽或长方体柱状凹槽。
第三凹槽36为圆柱状凹槽、椭圆柱状凹槽或长方体柱状凹槽。
第四凹槽38为圆柱状凹槽、椭圆柱状凹槽或长方体柱状凹槽。
本实施方式中，第一凹槽32为长方体柱状凹槽，第二凹槽34为圆柱状凹槽，第三凹槽36为长方体柱状凹槽，第四凹槽38为圆柱状凹槽。
在另一个实施例中，第一凹槽32、第二凹槽34、第三凹槽36和第四凹槽38均为圆柱状凹槽，第一凹槽32的直径与第二凹槽34的直径的比例为1.5～3：1(优选为2：1)，第二凹槽34、第三凹槽36和第四凹槽的大小相同。
结合图1，盒体10还包括第一磁性块12，盒盖20还包括第二磁性块26。第一磁性块12和第二磁性块26相互之间具有磁性吸引力。
第一磁性块12设置在盒盖10上，第二磁性块26设置在盒体20上，当盒盖10与盒体20接触时，第一磁性块12与第二磁性块26通过磁性吸引力吸引连接。
本实施方式中，第二磁性块26设置在侧板24上。
在另一个实施例中，第二磁性块26嵌入的设置在侧板24内。
第一试剂管用于承装预分装PCR反应液，第二试剂管用于承载RT-PCR酶，第三试剂管用于承载阳性指控品，第四试剂管用于承载阴性指控品。
PCR反应液包括人冠状病毒NL63正向引物、人冠状病毒NL63反向引物、TaqMan探针以及dNTPs。第一试剂管用于承装人冠状病毒NL63正向引物、人冠状病毒NL63反向引物、TaqMan探针以及dNTPs。
应用Primer Premier 5.0或Beacon Designer 8在病原体核酸保守区内设计特异的TaqMan探针，在针对TaqMan探针设计相应的人冠状病毒NL63正向引物和人冠状病毒NL63反向引物，其扩增子大小应为80～150bp，根据序列的比对的结果可以在引物上引入简并碱基。
1)设计依据：在人冠状病毒NL63正向引物、人冠状病毒NL63反向引物和TaqMan探针设计阶段首先要遵循设计的基本原则是人冠状病毒NL63正向引物和人冠状病毒NL63反向引物的Tm值相差小于2℃，TaqMan探针的Tm要比人冠状病毒NL63正向引物和人冠状病毒NL63反向引物的Tm值高7～10℃，且人冠状病毒NL63正向引物、人冠状病毒NL63反向引物和TaqMan探针之间不能有明显的二聚体结构。
2)应用Primer Premier 5.0、Beacon Designer 8或DNASTAR评估设计的人冠状病毒NL63正向引物、人冠状病毒NL63反向引物和TaqMan探针序列，分析人冠状病毒NL63正向引物、人冠状病毒NL63反向引物和TaqMan探针之间或内部可能形成的所有二聚体结构，其稳定性不能超过软件给出的范围，若超过则视为不合格序列，需要重新设计，一般要求形成的Dimer的ΔG绝对值小于4.5kcal/mol为佳；
3)BLAST分析设计的人冠状病毒NL63正向引物、人冠状病毒NL63反向引物和TaqMan探针序列，确保其特异性，且不能与人基因组高度同源；
RT-PCR酶包括M-MLV逆转录酶和热启动Taq DNA聚合酶。第二试剂管用于承装RT-PCR酶包括M-MLV逆转录酶和热启动Taq DNA聚合酶。
阳性指控品通过如下方法制备得到：分别以人冠状病毒NL63病原体的核酸为模板，以设计的人冠状病毒NL63正向引物和人冠状病毒NL63反向引物进行PCR扩增，得到扩增产物，再分别将扩增产物回收并纯化后克隆至pMD18-T载体，得到质粒DNA，再通过统一稀释，使其Ct值在一定范围，得到阳性质控品。
阴性指控品为DEPC水。第四试剂管用于承装DEPC水。
这种人冠状病毒NL63检测试剂盒操作简单、实用性强，能够快速检测出待测样本中是否含有人冠状病毒NL63。
以上所述实施例仅表达了本实用新型的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本实用新型专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本实用新型的保护范围。因此，本实用新型专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (9)
1.一种人冠状病毒NL63检测试剂盒，其特征在于，包括：
盒体，盒体为长方体、正方体或圆柱体；
与所述盒体转动连接的盒盖；
设置在所述盒体内的软性垫板，所述软性垫板远离所述盒体底部的一侧设有第一凹槽、第二凹槽、第三凹槽以及第四凹槽；以及
与所述第一凹槽相匹配的第一试剂管，与所述第二凹槽相匹配的第二试剂管，与所述第三凹槽相匹配的第三试剂管，与所述第四凹槽相匹配的第四试剂管；
所述第一试剂管用于承装预分装PCR反应液，所述第二试剂管用于承载RT-PCR酶，所述第三试剂管用于承载阳性指控品，所述第四试剂管用于承载阴性指控品。
2.根据权利要求1所述的人冠状病毒NL63检测试剂盒，其特征在于，所述软性垫板为泡沫板、软性塑料板或橡胶板。
3.根据权利要求1所述的人冠状病毒NL63检测试剂盒，其特征在于，所述第一凹槽为圆柱状凹槽、椭圆柱状凹槽或长方体柱状凹槽；
所述第二凹槽为圆柱状凹槽、椭圆柱状凹槽或长方体柱状凹槽；
所述第三凹槽为圆柱状凹槽、椭圆柱状凹槽或长方体柱状凹槽；
所述第四凹槽为圆柱状凹槽、椭圆柱状凹槽或长方体柱状凹槽。
4.根据权利要求1所述的人冠状病毒NL63检测试剂盒，其特征在于，所述第一凹槽、所述第二凹槽、所述第三凹槽和所述第四凹槽均为圆柱状凹槽，所述第一凹槽的直径与所述第二凹槽的直径的比例为1.5～3：1，所述第二凹槽、所述第三凹槽和所述第四凹槽的大小相同。
5.根据权利要求4所述的人冠状病毒NL63检测试剂盒，其特征在于，所述第一凹槽的直径与所述第二凹槽的直径的比例为2：1。
6.根据权利要求1所述的人冠状病毒NL63检测试剂盒，其特征在于，还包括相互之间具有磁性吸引力的第一磁性块和第二磁性块；
所述第一磁性块设置在所述盒盖上，所述第二磁性块设置在所述盒体上， 当所述盒盖与所述盒体接触时，所述第一磁性块与所述第二磁性块通过磁性吸引力吸引连接。
7.根据权利要求1所述的人冠状病毒NL63检测试剂盒，其特征在于，所述第一试剂管用于承装预分装人冠状病毒NL63正向引物、人冠状病毒NL63反向引物、TaqMan探针以及dNTPs。
8.根据权利要求1所述的人冠状病毒NL63检测试剂盒，其特征在于，所述第二试剂管用于承载M-MLV逆转录酶和热启动Taq DNA聚合酶。
9.根据权利要求1所述的人冠状病毒NL63检测试剂盒，其特征在于，所述第四试剂管用于承载DEPC水。
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109439737A (zh) * | 2019-01-09 | 2019-03-08 | 赵志军 | 一种用于脑脊液疑难病原体诊断的试剂盒及其诊断装置 |
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- 2016-08-08 CN CN201620854358.5U patent/CN206273830U/zh not_active Expired - Fee Related
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