CN205538992U - 一种检测试纸盘及检测试纸盘盒 - Google Patents
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Abstract
本实用新型提供了一种检测试纸盘及检测试纸盘盒,包括底基(3)、固定于底基(3)上的样品垫(2)、以及连接于所述样品垫(2)周侧的试纸条(1);所述的试纸盘盒包括盒体(4)及上述置于盒体(4)内的胶体金免疫层析检测试纸盘。本实用新型提供的胶体金免疫层析检测试纸盘适用于临床中同时检测样品中待测的多种生物标志物。检测结果具有较高的阳性符合率。
Description
技术领域
本实用新型涉及胶体金免疫层析检测领域,具体而言,涉及一种检测试纸盘以及检测试纸盘盒。
背景技术
胶体金免疫层析法是一种快速、简便、灵敏、直观,并可进行现场检测的方法,而且有实验结果表明,胶体金检测的敏感性正逐步接近和达到ELISA的水平。
临床上往往需要两种或以上的方法联合检测,目前市场上已有同时测定三种待测待测物的方法,如公告号为CN204347034U的中国公告授权的实用新型专利,提供了一种同时检测血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物和转铁蛋白的检测方法,该方法中将三种待测物的金标复合物划在硝酸纤维素膜上,硝酸纤维素膜上平行设置有3条检测线,进行检测。该种方法适于待测物较少的检测,若待测物较多,需要设置的检测线过多,则试纸条过长,易于折断,不便于使用。
25羟基维生素D检测试剂盒常备用于骨质疏松的早期诊断,但由于该技术方案中缺乏针对多项骨转换生化标志物的检测,而阳性符合率较低。但是不仅是针对骨质疏松的诊断需要检测多项相关的生物标志物,同时临床中疾病的诊断往往也需要多种生物 标志物的佐证。
因此,本领域迫切需要提供一种在临床中能够实现较高阳性符合率的快速检测装置。
实用新型内容
有鉴于此,本实用新型提供了一种检测试纸盘,包括底基、固定于底基上的样品垫、以及连接于所述样品垫周侧的试纸条;所述的试纸条包括依次连接的结合物垫、包被膜和吸水垫;所述的样品垫与所述的试纸条由结合物垫处连接;所述的结合物垫含有胶体金与待测物的单克隆抗体的交联物;所述的包被膜沿背离所述的结合物垫方向依次设有一道检测线和一道质控线,所述的检测线包被有固相化的待测物的单克隆抗体,所述的质控线包被有固相化羊抗鼠多克隆抗体。
优选地,所述的结合物垫一端具有搭接样品垫的样品搭接部,所述的结合物垫另一端具有搭接在所述包被膜的结合物搭接部,所述的吸水垫一端具有搭接在包被膜的吸水搭接部。
优选地,所述的样品垫位于底基中央;所述的试纸条有多个条;所述的试纸条以样品垫为中心分布于所述的底基上。
优选地,所述的试纸条成辐射状连接于所述的样品垫。
优选地,任意两条试纸条之间形成的夹角值相同。
优选地,所述的试纸条位于所述的样品垫同一侧
优选地,所述试纸条设有四条,其中,第一条试纸条的结合物垫和检测线T分别含有抗I型胶原末端肽单克隆抗体的胶体金 交联物和固相化的抗I型胶原末端肽单克隆抗体,第二条试纸条的结合物垫和检测线T分别含有抗血清组织蛋白酶单克隆抗体的胶体金交联物和固相化的抗血清组织蛋白酶单克隆抗体,第三条试纸条的结合物垫和检测线T分别含有抗I型前胶原氨基末端前肽单克隆抗体的胶体金交联物和固相化的抗血清组织蛋白酶单克隆抗体,第四条试纸条的结合物垫和检测线T分别含有抗25羟基维生素D单克隆抗体的胶体金交联物和固相化的抗25羟基维生素D单克隆抗体。
优选地,所述的检测试纸盘盒包括盒体,以及置于所述的盒体内的胶体金免疫层析检测试纸盘,所述的盒体设有加样孔。
优选地,所述的盒体包括结果观察口;所述的结果观察口的位置与包被膜的位置相对应。
优选地,所述盒体为透明材质制成的盒体。
与现有技术相比,有益效果在于:
能够同时检测更多的相关的生物标志物,在临床中的实用性较好,获得的检测结果阳性符合率更高;避免了检测线过多,包被膜过长,试纸条易于折断;避免了加样处与结果观察处距离较远,不易于观察检测过程、读出检测结果;避免了多条检测线与质控线设置过于密集,影响观察者对于检测结果的判断。
由此可以看出,本实用新型的提供的胶体金免疫层析检测试纸盘特异性强,灵敏度高,无需专门的技术人员操作,不需任何仪器设备,结果易读,以上改进能够有效的节约检测流程所需要 的时间、有效的提高了检测结果的阳性符合率。
附图说明
图1是本实用新型检测试纸盘一种实施例的结构示意图;
图2是本实用新型检测试纸盘一种实施例的结构示意图;
图3是本实用新型检测试纸盘再一种实施例的结构示意图;
图4是本实用新型提供的试纸条的结构示意图;
图5是本实用新型提供的检测试纸盘盒的示意图;
图6是本实用新型提供的试纸条判定结果为阳性时俯视图;
图7是本实用新型提供的试纸条判定结果为阴性时俯视图;
图8是本实用新型提供的试纸条判定结果为无效时俯视图;
其中:试纸条1,样品垫2,底基3,结合物垫11,包被膜12,吸水垫13,检测线T,质控线C,盒体4,加样孔41,结果观察口42。
具体实施方式
下面结合具体实施例的方式对本实用新型的权利要求做进一步的详细说明,但并不构成对本实用新型的任何限制,任何人在本实用新型权利要求范围内所做的有限次的修改,仍在本实用新型的权利要求范围之内。
本实用新型提供了一种检测试纸盘,当然本实用新型检测试纸盘不局限于利用胶体金免疫层析法,还可以应用到于其他的检测领域中。
参照图1、图2和图3,是本实用新型胶体金免疫层析检测试纸盘一种实施例的结构示意图,图4为本实用新型中试纸条的结构示意图。
可以理解的是,本实用新型的检测试纸盘在其他实施例中不局限于以上结构。
本实用新型提供的骨质疏松检测试纸盘,包括底基3、固定于底基3上的样品垫2、以及连接于所述样品垫2周侧的试纸条1;所述的试纸条1包括依次连接的结合物垫11、包被膜12和吸水垫13;所述的样品垫2与所述的试纸条1由结合物垫11处连接;所述的结合物垫11含有胶体金与待测物的单克隆抗体的交联物;所述的包被膜12沿背离所述的结合物垫11方向依次设有一道检测线T和一道质控线C,所述的检测线T包被有固相化的待测物的单克隆抗体,所述的质控线C包被有固相化羊抗鼠多克隆抗体。
前述,每个试纸条1都包括依次连接的结合物垫11、包被膜12和吸水垫13,其结合物垫11连接在同一个样品垫2上;样品添加到样品垫2上后,样品通过不同方向的毛细作用被分流,分流后依次移动到各个试纸条1的结合物垫11和包被膜12上。当样品移动到结合物垫11时,样品中的待检测抗体,如人抗体,可与结合物垫11上包被的胶体金标记的特异性抗体相结合,而后含有从结物合垫11上结合或混合的物质的样品继续移动到包被膜12上,并与包被膜12上包被的特异性抗体相结合并且被截留,从而使得样品中的待测物得以被检测。应该理解的是特异性抗体经包 被液包被于包被膜12上,即检测线T;质控线C通常为包被液包被的羊抗鼠多克隆抗体或羊抗兔多克隆抗体。检测线T与质控线C之间应留有适当间距,而设置为相互平行的区域,更便于区分两者。
可以理解的是该种方法仅需取样一次,即可进行多种待测物的检测。添加样品后,样品于多个结合物垫11处分流,之后的检测方式与常规的检测方法一致。采用该种结构的试纸盘中试纸条1的中的包被膜12长度不至过长,避免了试纸条过长。
该种检测试纸盘适用于多种生物标志物联合检测的情况,如骨质疏松、癌症、帕金森病以及孕妇的产检和儿童早期代谢类疾病的筛查。
参阅图1,即底基3为圆形,样品垫2置于底基3中央位置处,四条试纸条1以样品垫2为中心,任意两个试纸条1的夹角为90°,成辐射状分布于样品垫2的周侧。四个试纸条1的结合物垫11与样品垫2连接。本实用新型的实施例中检测试纸盘可以检测四中不同的待测物。
参阅图2,即底基3为矩形,样品垫2置于底基3中央位置处,四条试纸条1以样品垫2为中心,样品垫2的两侧各分布两条试纸条1。四个试纸条1的结合物垫11与样品垫2连接。本实用新型的其他实施例中检测试纸盘可以检测四中不同的待测物。
参阅图3,即底基3为矩形,样品垫2置于底基3的边缘,四条试纸条1置于样品垫2的同一侧。四个试纸条1的结合物垫11 与样品垫2连接。本实用新型的其他实施例中检测试纸盘可以检测五种不同的待测物。
本实用新型实施例中,结合物垫11一端具有搭接样品垫2的样品搭接部,结合物垫11另一端具有搭接在所述包被膜12的结合物搭接部,吸水垫13一端具有搭接在包被膜12的吸水搭接部。
前述“搭接”是指,相邻的两个组件的首尾部分重叠,并且在重叠处形成可以允许液体样品移动的连接结构。例如,可以在相邻的两个组件的首尾部分通过按压操作形成较为紧密的重叠结构,使得样品能够从上游组件的尾部通过该重叠结构移动至下游组件上。上游组件可以重叠在下游组件的上方,也可以重叠在下方。在检测时,可以将液体状态的样品(如血液,血浆及其他体液稀释液等)加样到样品垫2上,该液态状态的样品可以通过吸水作用,沿着样品垫2向与之搭接的结合物垫11移动,接触到结合物垫11后再沿着结合物垫11向与之搭接的包被膜12移动,接触到包被膜12之后再沿着包被膜4向与之搭接的吸水垫13移动。
这样的移动通常称为层析作用,由此可知,进一步的,所述的样品搭接部在其延伸方向上与所述的结合物搭接部留有间距,可以使得结合物垫上胶体金标记后特异性抗体能够与样品中的待测抗原留有充分的结合时间,如待测样品中存在所要检测的特异性抗原,则可以在含有胶体金标记后特异性抗体的结合物垫处形成抗原—抗体—胶体金复合物;所述的结合物搭接部在其延伸方向上与所述的吸水搭接部留有间距,预留充分的结合时间以便形 成双抗夹心的胶体金复合物,即发生双抗夹心的特异性结合。
在本实用新型实施例中,样品垫2位于底基3中央;所述的试纸条1有多个条;所述的试纸条1以样品垫2为中心分布于所述的底基3上。
前述,样品垫2的位置及试纸条的位置包含多种形式,当样品垫2位于底基3的中央时,底基3可以为圆形,试纸条1则以样品垫2为圆心,分布于样品垫2的周侧;当底基3为矩形时,则以样品垫2为中心,分布于样品垫2的两侧。
在本实用新型其他实施例中,试纸条1成辐射状连接于所述的样品垫2。
参见图1,底基3为圆形,样品垫2为圆心,四个试纸条1成辐射状分布于样品垫2的周侧。可以理解的是,试纸条1可以是多个,不局限于四个。
本实用新型实施例中,任意两条试纸条1之间形成的夹角值相同。
前述,试纸条1利用吸水垫13的吸水作用,分流添加于样品垫2上的样品,因此任意两条试纸条1之间形成的夹角值相同时,样品垫2上的样品受到沿试纸条1多个方向的吸水作用相同,样品分配均匀。
在本实用新型其他实施例中,试纸条1位于所述的样品垫2同一侧。
参见图3,底基3为矩形,样品垫2靠近矩形的边长较长的边, 五条试纸条1以样品垫2为起点,成辐射状分布于样品垫2同一侧。可以理解的是,试纸条1可以是多个,不局限于五条。试纸条1的分布形状亦不局限于此。
在本实用新型实施例中,试纸条1设有四条,其中,第一条试纸条1的结合物垫11和检测线T分别含有抗I型胶原末端肽单克隆抗体的胶体金交联物和固相化的抗I型胶原末端肽单克隆抗体,第二条试纸条1的结合物垫11和检测线T分别含有抗血清组织蛋白酶单克隆抗体的胶体金交联物和固相化的抗血清组织蛋白酶单克隆抗体,第三条试纸条1的结合物垫11和检测线T分别含有抗I型前胶原氨基末端前肽单克隆抗体的胶体金交联物和固相化的抗血清组织蛋白酶单克隆抗体,第四条试纸条1的结合物垫11和检测线T分别含有抗25羟基维生素D单克隆抗体的胶体金交联物和固相化的抗25羟基维生素D单克隆抗体。
首先需要理解的是,抗骨质疏松治疗的目的主要是降低脆性骨折的发生率。目前临床上骨代谢生化指标的改变早于骨密度的改变,因此测定骨转换生化标志物对抗骨质疏松治疗的早期诊断及早期疗效判定有重要价值。
其次,骨转换生化标志物中I型胶原末端肽是I型胶原在破骨细胞的参与骨吸收过程中产生的特异性降解产物,能直观的反映出骨吸收的状态。I型胶原末端肽在血清中和尿液中均可检出。
同时,国际骨质疏松研讨会建议使用I型前胶原氨基末端前肽作为反映骨形成的特异和敏感的参照指标;I型前胶原氨基末端前 肽有稳定性好,受昼夜节律、室温和饮食的影响小/不受激素的影响的特点。
再者,研究发现骨质疏松患者或骨量减少者的血清中的抗血清组织蛋白酶水平也明显高于骨量正常者,抗血清组织蛋白酶是反映骨吸收的敏感而特异的标志物,可作为原发性骨质疏松症筛查、诊断、疗效判断的敏感而特异的指标。
并且有研究发现,维生素D为固醇类衍生物,具抗佝偻病作用,在肾脏内生成具有生物活性的1,25-二羟基维生D。25-羟基维生素D在血液中的半衰期长,血清中的清除率较慢,常用来评价体内维生素D的水平。
由此可知,针对骨质疏松的待测物应包括以上生物标志物,当然,相应的所述的检测线T包被有固相化的抗I型胶原末端肽单克隆抗体;所述的检测线T包被有固相化的抗血清组织蛋白酶单克隆抗体;所述的检测线T包被有固相化的抗I型前胶原氨基末端前肽单克隆抗体;所述的检测线T包被有固相化的抗25羟基维生素D单克隆抗体。
本实用新型实施例中,检测试纸盘盒包括盒体4,以及置于所述的盒体4内的胶体金免疫层析检测试纸盘,所述的盒体4设有加样孔41。
本实用新型中还提供了一种检测试纸盘盒,参阅图5,为本实用新型提供的检测试纸盘盒示意图。可以理解的是检测试纸盘盒的盒体4便于保护置于其内的检测试纸盘。当然,加样孔41与样 品垫2位置相对应,
本实用新型中实施例中,检测试纸盘盒包括用于保护检测试纸盘的盒体4,盒体4包括加样孔41,可以理解的是加样孔41应与样品垫2位置相对应,便于添加样品。
在本实用新型其他实施例中,盒体4为透明材质制成的盒体。
上述,盒体4可以不设有结果观察口,亦可便于观察及读出结果。
可以理解的是,若样品中含有上述待测物,该待测物可与结合物垫11上特异性抗体交联物结合形成复合物,含有所述复合物的样品液继续移动至包被膜12上,并与包被膜12上检测线T处包被的特异性抗体相结合,形成双抗夹心的胶体金复合物,检测线T出现红色条带,质控线C处也出现红色条带,检测结果为阳性;
若样品中不存在待测物,检测线T则无红色条带出现,只有质控线C处出现红色条带,检测结果为阴性;
若检测线T和质控线C均未出现红色条带,则代表操作有误或检测结果无效,需重复试验。
本实用新型实施例的结果判断:加样10分钟后,观察包被膜处的检测线T及质控线C,参阅图6,当质控线C和检测线T都有红色条带出现时说明样品中含有能够与检测蛋白特异性结合的抗体,待测物为阳性;
参阅图7,当只有质控线C有红色条带而检测线T无红色条 带时,说明样品中待测物为阴性。
参阅图8当质控线C和检测线T均未出现红色条带,则代表操作有误或检测结果无效,需重复试验。
在本实用新型实施例中,
1)样品垫2的制备方法为:将样品垫2裁成半径为10mm大小圆片形的,浸泡在样品垫缓冲液中,1小时之后取出,于室温干燥16-18小时。
样品垫2的缓冲液配方如下:2%BSA、1%PVP、0.5%Tween溶解于0.01的PBS(pH7.4)缓冲液中。
2)结合物垫11的制备方法:
①胶体金溶液的配制:将浓度为1mg/ml氯金酸溶液950ml加热煮沸5~10分钟,加入浓度为100mg/ml的柠檬酸三钠溶液50ml,混匀,继续加热5~10分钟,直至溶液变透明玫瑰红色为止。加纯化水补足体积至1000ml。
②抗待测物单克隆抗体金标液的配制:取上述胶体金溶液300ml,加入0.1M K2CO3置于室温搅拌,调节溶液的pH值至8.0;取抗待测物单克隆6mg,加入浓度为0.015M体积为20ml PBS缓冲溶液中混匀后加入搅拌中的胶体金溶液中;将上述混合溶液室温下搅拌2小时;搅拌结束后加入3%聚乙二醇20000溶液160ml,混匀;室温下以13000转/分钟,离心30分钟分离上述溶液;离心结束后弃去上清液,取沉淀,将该沉淀溶解于100ml的金标抗体保存液中。
③将上述抗待测物的单克隆抗体金标液用金标抗体保存液稀释后,分别铺于各个检测试纸的结合物垫3上,置于温度为37℃的干燥间内干燥4~6小时;干燥后的金标结合物垫3同干燥剂一同放入密封袋,置玻璃干燥器中保存备用。
3)包被膜12的制备方法:
①包被
包被液的制备:取硼酸12g,氢氧化钠2g溶于纯化水并定容至1000ml。
检测线T:在包被膜4上划线,在膜的一端用记号笔做好质控线C和检测线T的标记,质控线C和检测线T的距离为0.5cm,检测线T与包被膜4下缘的距离为1cm,用上述包被液将抗待测物单克隆抗体稀释到1.2mg/mL进行包被,划线浓度为1μL/cm,速度100mm/s。
质控线C:上述包被液将羊抗鼠多克隆抗体稀释到1.2mg/mL进行包被,划线浓度为1μL/cm,速度100mm/s。
②干燥
置于37℃干燥间内4~6小时;干燥完毕后将包被膜4与干燥剂一同放入密封袋置于玻璃干燥器中保存备用。
在某些实施例中,检测试纸盘还可含有未图示的滴管、干燥剂、说明书、颜色标签、样品收集管、和样品稀释液。
此外,应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙 述方式仅仅是为清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
进一步验证本申请的有益效果,通过设置对照组对比突出本申请的有益效果。
对比例1
对照组1为通过现有技术制得骨质疏松检测检测装置;该检测装置为常见的长条形胶体金免疫层析检测试纸条,具体制作方法参见背景技术,对照组2采用ELISA法,对照组3采用液相色谱质谱联用技术,实施例1采用本申请实施例中提供的检测试纸盘进行检测。各组的检测过程均为所属领域内的常规技术手段。
具体方法为:收集来源于临床的200份经骨密度检查确诊的骨质疏松早期患者的血清,通过对200份患者血清的检测结果进行统计和分析,以验证本实用新型提供的检测试纸盘检测骨质疏松的阳性符合率。测定结果如表1所示。
表1
由表1中的检测见过可知,现有技术制得的试纸条检测骨质疏松的阳性符合率交底,同时检测结果中出现无效的个数较多,为20个,而对照组2及对照组3虽然阳性符合率较高,但耗时较长,而本实用新型提供的检测试纸盘的阳性符合率虽然与ELISA法接近而低于液相色谱质谱联用技术,但检测时间短,无需专业人员的操作,方法简便并对于临床的早期诊断和筛查具有一定的价值。
Claims (10)
1.一种检测试纸盘,其特征在于:包括底基(3)、固定于底基(3)上的样品垫(2)、以及连接于所述样品垫(2)周侧的试纸条(1);所述的试纸条(1)包括依次连接的结合物垫(11)、包被膜(12)和吸水垫(13);所述的样品垫(2)与所述的试纸条(1)由结合物垫(11)处连接;所述的结合物垫(11)含有胶体金与待测物的单克隆抗体的交联物;所述的包被膜(12)沿背离所述的结合物垫(11)方向依次设有一道检测线(T)和一道质控线(C),所述的检测线(T)包被有固相化的待测物的单克隆抗体,所述的质控线(C)包被有固相化羊抗鼠多克隆抗体。
2.如权利要求1所述的一种检测试纸盘,其特征在于:所述的结合物垫(11)一端具有搭接样品垫(2)的样品搭接部,所述的结合物垫(11)另一端具有搭接在所述包被膜(12)的结合物搭接部,所述的吸水垫(13)一端具有搭接在包被膜(12)的吸水搭接部。
3.如权利要求1所述一种检测试纸盘,其特征在于:所述的样品垫(2)位于底基(3)中央;所述的试纸条(1)有多个条;所述的试纸条(1)以样品垫(2)为中心分布于所述的底基(3)上。
4.如权利要求1所述一种检测试纸盘,其特征在于:所述的试纸条(1)成辐射状连接于所述的样品垫(2)。
5.如权利要求4所述的一种检测试纸盘,其特征在于:任意两条试纸条(1)之间形成的夹角值相同。
6.权利要求1所述一种检测试纸盘,其特征在于:所述的试纸条(1)位于所述的样品垫(2)同一侧。
7.权利要求1所述一种检测试纸盘,其特征在于:所述试纸条(1)设有四条,其中,第一条试纸条(1)的结合物垫(11)和检测线(T)分别含有抗I型胶原末端肽单克隆抗体的胶体金交联物和固相化的抗I型胶原末端肽单克隆抗体,第二条试纸条(1)的结合物垫(11)和检测线(T)分别含有抗血清组织蛋白酶单克隆抗体的胶体金交联物和固相化的抗血清组织蛋白酶单克隆抗体,第三条试纸条(1)的结合物垫(11)和检测线(T)分别含有抗I型前胶原氨基末端前肽单克隆抗体的胶体金交联物和固相化的抗血清组织蛋白酶单克隆抗体,第四条试纸条(1)的结合物垫(11)和检测线(T)分别含有抗25羟基维生素D单克隆抗体的胶体金交联物和固相化的抗25羟基维生素D单克隆抗体。
8.一种检测试纸盘盒,其特征在于:所述的检测试纸盘盒包括盒体(4),以及置于所述的盒体(4)内的胶体金免疫层析检测试纸盘,所述的盒体(4)设有加样孔(41);所述胶体金免疫层析检测试纸盘为权利要求1所述的检测试纸盘。
9.如权利要求8所述的检测试纸盘盒,其特征在于:所述 的盒体(4)包括结果观察口(42);所述的结果观察口(42)的位置与包被膜(12)的位置相对应。
10.如权利要求8所述的检测试纸盘盒,其特征在于:所述盒体(4)为透明材质制成的盒体。
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