CN203101407U - Abo血型反定型胶体金试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本实用新型公开了一种ABO血型反定型胶体金试剂盒,试剂盒包括盒体、瓶垫和密闭瓶,所述密闭瓶为三个,分别标记A瓶、B瓶和O瓶,所述A瓶内含有A红细胞膜抗原金粒子与抗原金粒子保存液,所述B瓶内含有B红细胞膜抗原金粒子与抗原金粒子保存液,所述O瓶内含有O红细胞膜抗原金粒子与抗原金粒子保存液。通过红细胞膜抗原金粒子密闭瓶,这样就不用考虑由于红细胞溶血或保存不当而引起的红细胞血型抗原性降低的因素,解决了新鲜红细胞保存期短的问题。ABO血型反定型胶体金试剂一般在2-8℃条件下保存有效期不低于12个月,而且具有灵敏度高、使用方便、结果好判读及成本较低等优点。
Description
技术领域
本实用新型涉及一种ABO血型反定型胶体金试剂盒。
背景技术
ABO血型系统是根据红细胞上A及B凝集原的不同,将血型分为O、A、B及AB血型。A型血红细胞上含A抗原,血清中含抗B抗体;B型血红细胞上含B抗原,血清中含抗A抗体;O型血红细胞上则没有A及B抗原,血清中含抗A及抗B抗体;AB型血红细胞上含A及B两种抗原,血清中则不含抗A及抗B抗体。A抗原和抗A抗体,B抗原和抗B抗体会发生免疫结合反应,使红细胞发生凝聚。
ABO血型是由红细胞表面抗原和血清中的抗体两者共同决定的。利用标准的抗A、抗B抗体检测红细胞抗原,称之为正定型;用标准的A及B抗原检测血清中的抗体,称之为反定型。正反定型同时检测,才能正确判断ABO血型。
正确的血型鉴定是保证临床输血安全和抢救生命的重要工作,ABO血型检测是常规的输血前血型血清学检测项目之一,为了保证正确的血型鉴定,卫生部在2000年发文(卫医法[2000]184号)明确规定:每位供血及受血的个体均要进行ABO血型正反定型。
目前临床实验室最常用的ABO血型反定型的鉴定方法是血凝试验和微柱凝胶试验。血凝试验中用到的标准A型、B型和O型红细胞,保存期短,一般为2~8℃条件下保存3个月,且容易发生微生物污染及溶血现象。微柱凝胶法检测时则需要特制的凝胶卡,同时需配备专用离心机,检测成本较高。除以上两种常用的方法之外,还有磁珠法。磁珠法在使用前,需进行试剂的复溶,复溶后的试剂存放时间较短,一般7天内必须使用完,而且需要专门的磁化程控振荡器。
目前,反定型用红细胞试剂存在有效期短、保存条件苛刻、质量不稳定等问题,容易导致血型鉴定出差错,甚至出现严重输血事故。所以急需一种使用方便、有效期长、准确性好、成本较低的检测ABO血型反定型的试剂盒。
实用新型内容
本实用新型所要解决的技术问题是,提供一种使用方便、有效期长、准确性好、成本较低的检测ABO血型反定型的胶体金试剂盒。
为了解决上述问题,本实用新型提供了一种ABO血型反定型胶体金试剂盒,其特征在于,包括盒体、瓶垫和密闭瓶,所述密闭瓶为三个,分别标记A瓶、B瓶和O瓶,所述A瓶内含有A红细胞膜抗原金粒子与抗原金粒子保存液,所述B瓶内含有B红细胞膜抗原金粒子与抗原金粒子保存液,所述O瓶内含有O红细胞膜抗原金粒子与抗原金粒子保存液。
作为一个优选方案,所述盒体为白卡材质,所述瓶垫为海绵材质,瓶垫中间是放置密闭瓶的三个卡槽。
作为一个优选方案,所述密闭瓶的材质是聚乙烯塑料或者玻璃瓶,瓶盖为塑料材质,瓶与瓶盖之间的垫片为硅胶材质以增强密封性。
本实用新型的优点在于,本实用新型通过红细胞膜抗原金粒子密闭瓶,这样就不用考虑由于红细胞溶血或保存不当而引起的红细胞血型抗原性降低的因素,解决了新鲜红细胞保存期短的问题。ABO血型反定型胶体金试剂一般在2-8℃条件下保存有效期不低于12个月,而且具有灵敏度高、使用方便、结果好判读及成本较低等优点。
附图说明
图1为ABO血型反定型胶体金试剂盒的内外部构造。
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐述本实用新型。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。应理解,这些实施例仅用于说明本实用新型而不用于限制本实用新型的范围。
实施例1.ABO血型反定型胶体金试剂盒
ABO血型反定型胶体金试剂盒的内外部构造如图1所示,包括盒体、瓶垫和密闭瓶,密闭瓶为三个,分别标记A瓶、B瓶和O瓶,所述A瓶内含有A红细胞膜抗原金粒子与抗原金粒子保存液,所述B瓶内含有B红细胞膜抗 原金粒子与抗原金粒子保存液,所述O瓶内含有O红细胞膜抗原金粒子与抗原金粒子保存液。
盒体为白卡材质;瓶垫为海绵材质,厚度25mm,中间是放置密闭瓶的三个卡槽;密闭瓶的材质可以是聚乙烯塑料、玻璃瓶等透明材料,瓶盖为塑料材质,试剂能稳定储存于密闭瓶中而不会吸附于容器,瓶与瓶盖之间的垫片为硅胶材质以增强密封性。
实施例2.ABO血型反定型胶体金试剂盒的制备方法及检测结果
1)制备胶体金溶液
由氯金酸在还原剂枸橼酸钠作用下,聚合成大小为40nm~60nm的金颗粒溶液。
2)制备红细胞膜血型抗原提取物
红细胞膜血型抗原提取物是采用低渗压溶液法,分别破碎A型红细胞、B型红细胞和O型红细胞,然后离心弃上清,再超纯水洗涤,离心弃上清,直到上清无色透明,弃上清和底层杂质即为红细胞膜血型抗原提取物。
低渗溶液为0.1%的CaCl2溶液,不仅降低可以降低成本,还可以保护膜抗原的完整性,防止膜抗原的不稳定性。
3)标记
将制备好的胶体金颗粒溶液调节pH至5.5-6.5,加入待标记红细胞膜血型抗原提取物,反应5分钟。
可以使用NaOH、Na2CO3、KOH或者K2CO3调节pH至5.5-6.5。
4)离心
3000r/min离心3分钟,弃上清,沉淀即红细胞膜抗原金粒子。
5)复溶
将红细胞膜抗原金粒子复溶于抗原金粒子保存液。
6)分装
将试剂储存于密闭瓶中,分装成2ml红细胞膜抗原金粒子溶液/瓶。
7)半成品检验
要求红细胞膜抗原金粒子与相应的血型抗体产生阳性反应,即在反应板微 孔中有凝集块出现。而与不含有红细胞膜抗原金粒子对应的血型抗体产生阴性反应,即在反应板微孔中有无凝集块出现。
8)保存实验
分装后经半成品检验合格的试剂在2~8℃下保存12个月,保存期间,ABO血型反定型胶体金试剂具有以下检测结果:
(1)外观
试剂密封不漏液、无絮状、不溶物或其它漂浮物质。
(2)灵敏度
用已注册上市的抗A抗B血型正定型试剂和抗H试剂与本试剂相应抗原金粒子溶液反应,结果应达到表1所示标准。
表1ABO血型反定型胶体金试剂灵敏度检测
抗血清 | 待检抗原金粒子 | 凝集3+抗血清最高稀释度 | 凝集1+抗血清最高稀释度 |
抗A | A | ≥8 | ≥64 |
抗B | B | ≥8 | ≥64 |
抗H | O | ≥原液 | ≥2 |
(3)特异性
特异性检测结果应达到表2标准。
表2ABO血型反定型胶体金试剂特异性检测
抗体 | A红细胞膜抗原金粒子 | B红细胞膜抗原金粒子 | O红细胞膜抗原金粒子 |
A型人血清 | - | + | - |
B型人血清 | + | - | - |
O型人血清 | + | + | - |
AB型人血清 | - | - | - |
抗H | / | / | + |
生理氯化钠溶液 | - | - | - |
“/”表示不进行此单项试验;“+”表示出现凝集,为阳性反应;“-”表示未出现凝集,为阴性反应。
(4)精密性
精密性检测要求同一样本重复检测10次,结果一致。
实施例3.ABO血型反定型胶体金试剂盒的使用方法
1.试剂使用前必须先摇匀。
2.取反应板一块,一份标本需要三孔,分别标记为A、B、O。分别加入待检血清或者血浆40ul于标记好的孔内,再将A红细胞膜抗原金粒子、B红细胞膜抗原金粒子、O红细胞膜抗原金粒子各10ul分别加入A、B、O孔中,手动使其在微孔板中完全扩散。
3.将反应板放置在普通振荡器上80~90rpm振荡8~10分钟。
4.反应结束后,观察反应板,肉眼判读结果,记录。
5.结果判定
5.1阳性结果(4+,3+,2+,1+)。
阳性反应表示反应体系中发生了特异性免疫反应,有特异性抗原抗体复合物产生,反应强度以4+~1+依次减弱,具体如下:
4+为反应板微孔中有一个完整而结实的大凝集块,颜色为深紫,无游离细小凝集块;
3+为反应板微孔中有一个完整而不结实的大凝集块,颜色为紫色,有少量游离细小凝集块;
2+一个完整而不结实的中等凝集块,颜色为浅紫色,有少量游离细小凝集块;
1+为反应板微孔中有一个蓬松的小凝集块,颜色为浅紫色,有少量游离细小凝集块。
5.2可疑阳性反应(±)。
±为反应板微孔中有很多肉眼可见细小凝集块,与阴性结果有差别,需重测或改用其它已注册上市试剂检测该样本。
5.3阴性反应(-)。
阴性反应表示反应体系中未发生了特异性免疫反应,无特异性抗原抗体复合物产生。
6.反应结果对照表如下:
7.实施例结果判读,结果易于观察保存。
8.注意事项
①血清或血浆不得有凝块、絮状物或沉淀;
②反应板应保持清洁;
③如果出现可疑阳性反应(±),则结果作废,需重测或改用其它已注册上市试剂检测该样本。
以上所述仅是本实用新型的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员,在不脱离本实用新型原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本实用新型的保护范围。
Claims (3)
1.ABO血型反定型胶体金试剂盒,其特征在于,包括盒体、瓶垫和密闭瓶,所述密闭瓶为三个,分别标记A瓶、B瓶和O瓶,所述A瓶内含有A红细胞膜抗原金粒子与抗原金粒子保存液,所述B瓶内含有B红细胞膜抗原金粒子与抗原金粒子保存液,所述O瓶内含有O红细胞膜抗原金粒子与抗原金粒子保存液。
2.根据权利要求1所述的ABO血型反定型胶体金试剂盒,其特征在于,所述盒体为白卡材质,所述瓶垫为海绵材质,瓶垫中间是放置密闭瓶的三个卡槽。
3.根据权利要求1所述的ABO血型反定型胶体金试剂盒,其特征在于,所述密闭瓶的材质是聚乙烯塑料或者玻璃瓶,瓶盖为塑料材质,瓶与瓶盖之间的垫片为硅胶材质以增强密封性。
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CN 201220684879 CN203101407U (zh) | 2012-12-12 | 2012-12-12 | Abo血型反定型胶体金试剂盒 |
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110426524A (zh) * | 2019-08-21 | 2019-11-08 | 安邦(厦门)生物科技有限公司 | 一种abo血型双判读反定型检测系统和检测方法 |
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2012
- 2012-12-12 CN CN 201220684879 patent/CN203101407U/zh not_active Expired - Lifetime
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CN110426524A (zh) * | 2019-08-21 | 2019-11-08 | 安邦(厦门)生物科技有限公司 | 一种abo血型双判读反定型检测系统和检测方法 |
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