CN1989830A - 加州鲈专用微生物饲料添加剂及制作方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种加州鲈专用微生物饲料添加剂及制作方法，其特征在于，由植物乳杆菌、啤酒酵母菌分别进行液体发酵，然后对其离出物再进行第二次固体发酵，同时对上清液进行真空浓缩，最后将浓缩物与固体发酵产物混合、干燥粉碎后得到该饲料添加剂成品。该产品中富含了有益微生物及其发酵代谢产物，包括了微生物多糖、酶及肽、抗氧化物质等。本发明的优点是采用科学配方，优质原料，完全满足加州鲈快速生长的营养需求，同时还可提高加州鲈的非特异性免疫力，改变目前加州鲈养殖中基本上只能投喂活体饵料的情况。

Description

加州鲈专用微生物饲料添加剂及制作方法

技术领域

本发明涉及一种加州鲈专用微生物饲料添加剂及制作方法，属于饲料添加剂技术领域。

背景技术

目前，已公开的专利，公开号为CN00133695，题为生物饲料添加剂及其制备方法，其特征在于：由筛选绿色乳杆菌、嗜粪乳杆菌纯菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌经一次扩大培养、二次扩大培养，用米糠、麦麸吸附液堆积发酵，烘干而达到菌种数量8-10亿/克。这种生物饲料添加剂所述的菌种中，绿色乳杆菌、嗜粪乳杆菌纯菌并未在国家农业部规定允许使用的15种微生物范围内，将不能被允许生产，而且该产品活菌数低，也并未说明其中是否含有其它生理代谢物质。

发明内容

本发明的目的是提供一种含有微生物多糖、有益菌数高、并具有多种活性酶及小肽等物质的加州鲈专用微生物饲料添加剂及制作方法，在添加饲喂后，可形成动物机体良性生态环境，提高加州鲈的非特异性免疫力。

为实现以上目的，本发明的技术方案是提供一种加州鲈专用微生物饲料添加剂，其特征在于，由植物乳杆菌、啤酒酵母菌分别进行液体发酵，发酵结束后对培养物进行离心，两种离出物混合后进行固体发酵；上清液进行真空浓缩后，与固体发酵产物按比例混合，最后经干燥粉碎得到成品，

植物乳杆菌采用液体发酵，其由下述重量百分比的原料配制：

植物乳杆菌菌液      8-15％、

培养基              84-93％；

啤酒酵母菌采用液体发酵，其由下述重量百分比的原料配制：

啤酒酵母菌菌液      8-15％、

培养基              84-93％；

离出物采用固体发酵，其由下述重量百分比的原料配制：

植物乳杆菌离出物         10-20％、

啤酒酵母菌离出物         24-40％、

培养基                   49-65％。

所述的植物乳杆菌培养基由大豆蛋白胨、胰蛋白胨、蛋白胨、牛肉浸膏、葡萄糖、低聚糖、乳糖、酵母浸出粉、胡萝卜汁、西红柿汁、黄豆芽汁组成，其重量百分比为：大豆蛋白胨0.2-1.0％、胰蛋白胨0.4-0.8％、蛋白胨0.4-0.8％、牛肉浸膏1.0-1.5％、葡萄糖0.8-1.2％、低聚糖0.3-0.7％、乳糖0.3-0.7％、酵母浸出粉0.2-0.8％、胡萝卜汁10-18％、西红柿汁10-15％、黄豆芽汁8-12％、水48-68％。

所述的啤酒酵母菌培养基由葡萄糖、尿素、磷酸二氢钾、酵母膏、硫酸镁、硫酸铁、水组成，其重量百分比为：葡萄糖3-7％、尿素0.8-1.2％、磷酸二氢钾1.5-3％、酵母膏0.3-0.7％、硫酸镁1-1.2％、硫酸铁0.05-0.15％、水86-93％。

所述的固体发酵培养基由米糠、麦麸、糖蜜、豆饼粉组成，其重量百分比为：米糠30-50％、麦麸20-35％、糖蜜10-18％、豆饼粉5-10％；

加州鲈专用微生物饲料添加剂的制作方法，其特征在于，分别对植物乳杆菌和啤酒酵母菌单独培养，培养物离心后其离出物按比例混合后进行固体发酵，对其离心上清液浓缩，然后按照比例与固体发酵产物混合，它包括下列步骤：

第一步：将植物乳杆菌接种于其专用液体培养基中培养，培养温度为35-39℃，培养时间为16-22小时；

第二步：将啤酒酵母菌接种于其专用液体培养基中培养，培养温度为30-34℃，培养时间为32-42小时；

第三步：将植物乳杆菌和啤酒酵母菌的培养物分别通过碟式离心机进行离心，离心机转速为6900r/min；将离心后的上清液按照1∶1的比例混合后放入真空浓缩罐，在温度为55-65℃、真空度为0.07-0.09条件下，维持4-6小时，得到浓缩产物；

第四步：将植物乳杆菌和啤酒酵母菌的离心离出物按照比例与固体培养基混合后进行固体厌氧发酵，培养温度为30-35℃，培养时间为96-120小时；

第五步：将固体发酵结束后的产物按照1∶0.5-0.7的比例与浓缩产物混合，然后进行低温干燥，在温度35-40℃下干燥8-10小时，控制最终水分小于11％，然后经粉碎后得到粉末状成品。

加州鲈专用微生物饲料添加剂含有丰富的微生物多糖、有益菌，并含有多种活性酶及小肽等活性代谢物质。在添加饲喂后，可形成动物机体良性生态环境，提高加州鲈的非特异性免疫力。

非特异性防御机制是无脊椎动物的抵抗微生物感染的第一道防线，指机体组织和体液中的大量细胞和抗菌的蛋白质、醣蛋白、肽类。鱼类的抗菌蛋白包括粘液胰岛素，金属离子螯合剂(铁传递蛋白、血浆铜蓝蛋白、金属硫蛋白)，蛋白酶抑制因子，溶菌酶(溶解酵素、几丁质酶、非特异性细胞溶素)，补体，外源凝集素。细菌脂多糖激活的单核巨噬细胞可产生细胞因子，它的生物学活性相当广泛，已远远超过其名称本身的含义，除了具有抗肿瘤作用外，对免疫反应、机体代谢、炎症反应均具有重要的调节和介导作用。免疫细胞包括噬菌细胞(嗜中性粒细胞和巨噬细胞)及自然杀伤细胞，这些细胞与免疫系统中的淋巴细胞和其它细胞通过细胞因子相互影响。

非特异性免疫在抵抗微生物感染中所起到的重要作用已越来越为人们所认同，免疫学家们已意识到尽管无脊椎动物没有类似于脊椎动物的特异性免疫系统，但是却能有效地抵抗微生物感染。

在正常畜禽的肠道中存活着多种细胞构成的菌群，当本发明的加州鲈微生物饲料添加剂中的有益微生物进入动物肠道后，结合原有的有益菌，迅速形成优势微生物菌群，抑制了肠道有害菌的生长，其中的有益微生物在肠道壁周围通过磷壁酸与肠粘膜上皮细胞紧密结合，形成菌膜屏障，阻止有害菌的定植；微生物还可代谢产生嗜酸菌素、乳糖菌素、杆菌肽等，抑制大肠杆菌、沙门氏菌等有害菌在肠道内的繁殖、定植和吸附、中和毒性产物，同时促进肠道相关淋巴组织的高度反应能力，使免疫器官发育增快，免疫系统成熟早、快，T、B淋巴细胞的数量增多，使动物的体液和细胞免疫水平提高，增强机体抗病能力。

多糖类物质能提高机体免疫系统的功能，它不仅能促进细胞免疫及体液免疫功能，还能促进免疫细胞分泌细胞因子，调节机体的免疫功能。产品中多糖的免疫调节作用可通过自由基特别是活性氧介导的信号转导而实现。在某些病理状态下，若体内自由基浓度升高，对细胞内DNA等生物大分子造成损伤，应用外源性生物活性多糖可清除过多的自由基，使之维持在一个正常的生理水平。

免疫活性多糖对氧化应激诱导的细胞凋亡具有抑制作用，抑制脂质过氧化链式反应的启动和扩展，保护细胞膜免受氧化应激损伤，从而维持细胞内Ca²⁺平衡，防止或减少凋亡发生；其还可增强肝脏中SOD的活性，对超氧阴离子自由基和羟自由基均有直接清除作用；同时对SOD和谷胱甘肽过氧化物酶活力具有增强作用，可提高机体清除活性氧的能力，从而避免病理状态下活性氧对机体的损伤。关于多糖的抗氧化作用机制尚无定论，一种解释是·OH可夺取多糖碳氢链上的氢原子结合成水，而多糖的碳原子上留下单电子可继续氧化形成过氧自由基，后者可进一步分解；另一种解释是多糖环上的羟基可与产生·OH等所必需的金属离子络合，从而抑制活性氧自由基的生成，这与多糖化学结构等有关。

本发明的优点是：

1.采用特别的菌种及营养组配配方，满足加州鲈快速生长所需营养，避免因投喂野杂鱼造成的营养不均衡，饵料系数高，自然资源浪费巨大。

2.具强烈诱食效果，易于加州鲈鱼苗的训食，适口性好。

3.提供外源酶且激活内源酶的分泌，促进动物对饲料的消化吸收，提高饲料转化率，提高生产性能；

4.通过微生物多糖、抗氧化物质等代谢产物和酶的协同作用，提高动物机体的非特异性免疫力，激活免疫功能，提高加州鲈的抗病能力；

5.使用后，在残饵和粪便中还含大量有益微生物，既分解了水体中的有机污染物又改善了水环境；

6.在加州鲈鱼的肠道中形成优势菌群并抑制有害细菌，形成良性微生态环境，可替代以预防及促生长为目的的抗生素使用，生产出绿色、安全的有机农付产品。

具体实施方案

下面结合实施例对本发明作进一步详细说明：

实施例一

加州鲈专用微生物饲料添加剂的制作方法：

第一步：将植物乳杆菌接种于其专用液体培养基中培养，其培养基由大豆蛋白胨、胰蛋白胨、蛋白胨、牛肉浸膏、葡萄糖、低聚糖、乳糖、酵母浸出粉、胡萝卜汁、西红柿汁、黄豆芽汁组成，其重量百分比为：大豆蛋白胨0.5％、胰蛋白胨0.6％、蛋白胨0.6％、牛肉浸膏1.0％、葡萄糖1.0％、低聚糖0.5％、乳糖0.5％、酵母浸出粉0.6％、胡萝卜汁12％、西红柿汁15％、黄豆芽汁10％、水57.7％；培养温度为36℃，培养时间为16小时；

第二步：将啤酒酵母菌接种于其专用液体培养基中培养，其培养基包括葡萄糖、尿素、磷酸二氢钾、酵母膏、硫酸镁、硫酸铁、水，其重量百分比为：葡萄糖5％、尿素1.0％、磷酸二氢钾2％、酵母膏0.5％、硫酸镁1％、硫酸铁0.1％、水90.4％；32℃培养36h；

第三步：将植物乳杆菌和啤酒酵母菌的培养物分别通过碟式离心机进行离心，离心机转速为6900r/min；将离心后的上清液按照1∶1的比例混合后放入真空浓缩罐，在温度60℃、真空度为0.08条件下，维持4-6小时，得到浓缩产物；

第四步：将植物乳杆菌和啤酒酵母菌的离心离出物按照比例与固体培养基混合后进行固体厌氧发酵，混合比例为：植物乳杆菌离物20％、啤酒酵母菌离出物30％、培养基50％，离出物固体培养基包括米糠、麦麸、糖蜜、豆饼粉，其重量百分比为：米糠45％、麦麸30％、糖蜜15％、豆饼粉10％，培养温度为30-35℃培养时间为96小时；

第五步：将固体发酵结束后的产物按照1∶0.6的比例与浓缩产物混合，然后进行低温干燥，干燥温度为35℃，干燥时间为8-10小时，控制最终水分小于11％，然后经粉碎后得到粉末状成品。

实施例二：

加州鲈专用微生物饲料添加剂的制作方法：

第一步：将植物乳杆菌接种子其专用液体培养基中培养，其培养基由大豆蛋白胨、胰蛋白胨、蛋白胨、牛肉浸膏、葡萄糖、低聚糖、乳糖、酵母浸出粉、胡萝卜汁、西红柿汁、黄豆芽汁组成，其重量百分比为：大豆蛋白胨0.8％、胰蛋白胨0.4％、蛋白胨0.8％、牛肉浸膏1.2％、葡萄糖0.8％、低聚糖0.7％、乳糖0.3％、酵母浸出粉0.8％、胡萝卜汁18％、西红柿汁10％、黄豆芽汁8％、水58.2％；培养温度为35℃，培养时间为20小时；

第二步：将啤酒酵母菌接种于其专用液体培养基中培养，其培养基包括葡萄糖、尿素、磷酸二氢钾、酵母膏、硫酸镁、硫酸铁、水，其重量百分比为：葡萄糖7％、尿素0.8％、磷酸二氢钾2.5％、酵母膏0.7％、硫酸镁1.2％、硫酸铁0.05％、水87.8％；培养温度为30℃，培养时间为38小时；

第三步：将植物乳杆菌和啤酒酵母菌的培养物分别通过碟式离心机进行离心，离心机转速为6900r/min；将离心后的上清液按照1∶1的比例混合后放入真空浓缩罐，在温度60℃、真空度为0.08条件下，维持时间4-6小时，得到浓缩产物；

第四步：将植物乳杆菌和啤酒酵母菌的离心离出物按照比例与固体培养基混合后进行固体厌氧发酵，混合比例为：植物乳杆菌离物15％、啤酒酵母菌离出物30％、培养基55％，离出物固体培养基包括米糠、麦麸、糖蜜、豆饼粉，其重量百分比为：米糠50％、麦麸35％、糖蜜10％、豆饼粉5％，发酵温度为30-32℃，培养时间为120小时；

第五步：将固体发酵结束后的产物按照1∶0.5-0.7的比例与浓缩产物混合，然后进行低温干燥，干燥温度37℃，干燥时间为8-10小时，控制最终水分小于11％，然后经粉碎后得到粉末状成品。

本产品可直接在加州鲈饲料中生产或使用过程中添加使用。

在饲料生产过程中按照0.15-0.2％的比例添加，混合均匀后制粒即可；在养殖池塘直接使用时，与粘合剂或蛋清混合，与饲料搅拌均匀后投喂。

Claims (5)

1.一种加州鲈专用微生物饲料添加剂，其特征在于，由植物乳杆菌、啤酒酵母菌分别进行液体发酵，发酵结束后对培养物进行离心，两种离出物混合后进行固体发酵；上清液进行真空浓缩后，与固体发酵产物按比例混合，最后经干燥粉碎得到成品，

植物乳杆菌采用液体发酵，其由下述重量百分比的原料配制：

植物乳杆菌菌液      8-15％、

培养基              84-93％；

啤酒酵母菌采用液体发酵，其由下述重量百分比的原料配制：

啤酒酵母菌菌液      8-15％、

培养基              84-93％；

离出物采用固体发酵，其由下述重量百分比的原料配制：

植物乳杆菌离出物    10-20％、

啤酒酵母菌离出物    24-40％、

培养基              49-65％。

2.根据权利要求1所述的加州鲈专用微生物饲料添加剂，其特征在于，所述的植物乳杆菌培养基由大豆蛋白胨、胰蛋白胨、蛋白胨、牛肉浸膏、葡萄糖、低聚糖、乳糖、酵母浸出粉、胡萝卜汁、西红柿汁、黄豆芽汁组成，其重量百分比为：大豆蛋白胨0.2-1.0％、胰蛋白胨0.4-0.8％、蛋白胨0.4-0.8％、牛肉浸膏1.0-1.5％、葡萄糖0.8-1.2％、低聚糖0.3-0.7％、乳糖0.3-0.7％、酵母浸出粉0.2-0.8％、胡萝卜汁10-18％、西红柿汁10-15％、黄豆芽汁8-12％、水48-68％。

3.根据权利要求1所述的加州鲈专用微生物饲料添加剂，其特征在于，所述的啤酒酵母菌培养基由葡萄糖、尿素、磷酸二氢钾、酵母膏、硫酸镁、硫酸铁、水组成，其重量百分比为：葡萄糖3-7％、尿素0.8-1.2％、磷酸二氢钾1.5-3％、酵母膏0.3-0.7％、硫酸镁1-1.2％、硫酸铁0.05-0.15％、水86-93％。

4.根据权利要求1所述的加州鲈专用微生物饲料添加剂，其特征在于，所述的离出物固体发酵培养基由米糠、麦麸、糖蜜、豆饼粉组成，其重量百分比为：米糠30-50％、麦麸20-35％、糖蜜10-18％、豆饼粉5-10％；

5.根据权利要求1所述的加州鲈专用微生物饲料添加剂的制作方法，其特征在于，分别对植物乳杆菌和啤酒酵母菌单独培养，培养物离心后其离出物按比例混合后进行固体发酵，对其离心上清液浓缩，然后按照比例与固体发酵产物混合，它包括下列步骤：

第一步：将植物乳杆菌接种于其专用液体培养基中培养，培养温度为35-39℃，培养时间为16-22小时；

第二步：将啤酒酵母菌接种于其专用液体培养基中培养，培养温度为30-34℃，培养时间为32-42小时；

第三步：将植物乳杆菌和啤酒酵母菌的培养物分别通过碟式离心机进行离心，离心机转速为6900r/min；将离心后的上清液按照1∶1的比例混合后放入真空浓缩罐，在温度为55-65℃、真空度为0.07-0.09条件下，维持4-6小时，得到浓缩产物；

第四步：将植物乳杆菌和啤酒酵母菌的离心离出物按照比例与固体培养基混合后进行固体厌氧发酵，培养温度为30-35℃，培养时间为96-120小时；

第五步：将固体发酵结束后的产物按照1∶0.5-0.7的比例与浓缩产物混合，然后进行低温干燥，在温度35-40℃下干燥8-10小时，控制最终水分小于11％，然后经粉碎后得到粉末状成品。