CN1970025B - 六味地黄汤的中药生物制剂及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种六味地黄汤的中药生物制剂及其制备方法。本发明将生物技术与传统中药方剂结合起来，将光合细菌引入到六味地黄汤中进行发酵代谢，通过光合细菌的生物代谢转化功能和自身营养价值的利用，制备出六味地黄汤的中药生物制剂。它将六味地黄汤药材水煎煮并浓缩至浓度为0.2～2g/ml；另取豆浆4～8份，发酵，过滤。将豆浆发酵液加到六味地黄汤水煎液中，调pH至6～10。将光合细菌接种到六味地黄汤中，在10～30℃温度和光照条件下发酵1～5个月，所得药液进行分离，提取，精制，灭菌，制成各种剂型。六味地黄汤经光合细菌代谢后制备的中药生物制剂，在增强免疫、抗衰老和治疗肾阴虚证模型小鼠等方面的作用增强，明显优于传统的六味地黄汤。

Description

六味地黄汤的中药生物制剂及制备方法

技术领域

本发明涉及一种中药制剂，特别是涉及一种六味地黄汤的中药生物制剂及制备方法。

背景技术

植根于中国传统文化的中药，已经有了几千年的发展历史，而西药的历史只有一百多年，可是在现代医疗体系中，占主要地位的还是西药。究其原因，西药是单体药，分子量小，易于进入人体细胞，因此对病灶的治疗更为直接、见效快；而中药是复方(群体)药，分子量大，是各种化学成分的混合物，至今尚未明了其中各成分在细胞及分子水平上的功能及作用机理，因此它在疾病的治疗中见效慢。

发明内容

本发明的目的在于克服纯中药制剂的上述缺点，提供一种具有中药小分子活性成分，分子量小，易于进入人体细胞，见效快的六味地黄中药生物制剂。

本发明的另一个目的是提供上述六味地黄汤中药生物制剂的制备方法。

传统中药主要依靠大分子发挥疗效，本发明将现代生物技术与传统中药方剂有机结合起来，将微生物引入到六味地黄汤中进行发酵代谢，通过微生物的生物转化功能和自身营养价值的利用，以强强联合的方式，制备六味地黄汤的中药生物制剂。

上述六味地黄汤，包括如下组分和重量份数：

熟地20-80  制山萸20-60  山药20-60

泽泻10-50  牡丹皮10-50  茯苓20-60。

上述本发明所用的微生物优选光合细菌，所述光合细菌优选紫色非硫细菌科细菌。

上述中药生物制剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)将上述六味地黄汤药材水煎煮并浓缩至浓度为0.2～2g/ml；

(2)取豆浆4～8份，发酵，过滤得到豆浆发酵液；

(3)将上述豆浆发酵液加到六味地黄汤水煎液中，调pH至6～10；

(4)将光合细菌接种到六味地黄汤中，在10～30℃温度和光照条件下发酵1～5个月，所得药液进行分离，提取，精制，灭菌，制成口服制剂、喷雾干燥或冷冻干燥制成颗粒装胶囊或固体制剂。

本发明的主要原料为熟地、制山萸、山药、泽泻、牡丹皮、茯苓，通过光合细菌发酵，使药效更充分的发挥。熟地滋肾填精，为主药；辅以山药补脾固精，制山萸肉养肝涩精，称为三补。又用泽泻清泻肾火，并防熟地黄之滋腻；茯苓淡渗脾湿，以助山药之健运，丹皮清泄肝火，并制山萸肉之温，共为佐使药，谓之三泻。六药合用，补中有泻，寓泻于补，相辅相成，补大于泻，共凑滋补肝肾之效。

与已有技术相比，本发明具有以下优点及效果：

1.传统的六味地黄制剂存在的农药、重金属等杂质残留。中药材中的重金属、农药、致癌物等有害物质残留超标问题一直未得到解决，影响六味地黄制剂的长期服用。本发明将光合细菌引入到六味地黄汤中进行发酵代谢，通过光合细菌的生物转化功能将药材中的重金属，农药，致癌物质降低或去除，这对于需长期服用六味地黄制剂作为保健用途的消费者尤为重要。

2.由于生产工艺的原因，传统制剂需加大量辅料才能成型，所以服用量大，生物利用度低。本发明的制备方法经微生物发酵处理，将大分子物质代谢为小分子活性物质，提高了生物利用度，吸收迅速，完全，并降低了服用量。

3.六味地黄汤经光合细菌代谢后制备的中药生物制剂，在增强免疫、抗衰老和治疗肾阴虚证模型小鼠等方面的作用明显增强，优于传统的六味地黄汤。

具体实施方式

实施例1六味地黄汤中药生物制剂的制备

将熟地20g，制山萸30g，山药55g，泽泻15g，牡丹皮50g，茯苓30g，用水煎煮并浓缩至浓度为0.5g/ml；取豆浆4份，发酵，过滤得到豆浆发酵液；将豆浆发酵液加到六味地黄汤水煎液中，调pH至中性；将紫色非硫细菌科细菌(红螺菌)接种到六味地黄汤中，在30℃温度和光照条件下发酵2个月，所得药液进行分离，提取，精制，灭菌，制成口服制剂。

实施例2六味地黄汤中药生物制剂的制备

将熟地70g，制山萸50g，山药25g，泽泻45g，牡丹皮12g，茯苓50g，用水煎煮并浓缩至浓度为1.5g/ml；取豆浆7份，发酵，过滤得到豆浆发酵液；将豆浆发酵液加到六味地黄汤水煎液中，调pH至10；将紫色非硫细菌科细菌(红细菌)接种到六味地黄汤中，在28℃温度和光照条件下发酵5个月，所得药液进行分离，提取，精制，灭菌，喷雾干燥胶囊或冷冻干燥制成固体片剂。

实施例3治疗肾阴虚证实验

采用NIH小鼠，雌雄各半，随机分组，即正常组、模型组、六味地黄汤组、光合细菌组、光合细菌加六味地黄汤组。除正常对照组外，其余各组动物每天灌胃给予甲状腺素3mg、利血平0.02mg/只，每日一次，连续7天，与此同时，各组动物灌胃给予相应的药物，每日一次，连续7天，每天观察动物症状、体重、7天内存活动物数，末次给药后1h脱臼处死动物，称取脾、胸腺重量，计算脏器指数。结果见表1，表明六味地黄汤，光合细菌加六味地黄汤组均能明显改善阴虚模型的体征(闭眼、静卧、行动迟缓等虚象)，增加阴虚动物的体重，提高动物的存活率，并能显著增加脾指数、胸腺指数，且相比之下光合细菌加六味地黄汤组更有优势。

表1光合细菌加六味地黄汤对肾阴虚小鼠的影响

注：与正常组比较：^*P＜0.05  ^**P＜0.01

与模型组比较：★P＜0.05，★★P＜0.01

实施例4增强免疫力实验

采用NIH小鼠，雌雄各半，随机分组，即正常组、模型组、六味地黄汤组、光合细菌组、光合细菌加六味地黄汤组。各组动物每天灌胃给予相应的药物0.2ml/10g，正常组予以同容量的蒸馏水，每日1次。与此同时，除正常对照组外，其余各组动物均同时皮下注射氢化可的松40mg/kg以造成免疫力低下模型，每日1次。给药后第10d，腹部去毛约3cm×3cm，在去毛部位涂1％二硝基氟苯50μl，于给药后第14d以1％二硝基氟苯10μl涂右耳，24h后处死小鼠，用8MM打孔器打取两耳相同部位的耳片，称重量，以左右耳片重量之差为肿胀度，观察对小鼠迟发型变态反应的影响。结果见表2，表明光合细菌加六味地黄汤对免疫功能低下小鼠有明显的免疫增强作用，而六味地黄汤在该剂量下无此作用。

表2光合细菌加六味地黄汤对小鼠迟发型变态反应的影响

注：与模型组比较，^*P＜0.05

实施例5抗衰老实验

采用SD大鼠，以D-半乳糖腹腔注射(50mg/kg，0.5ml/100g，1次/日)。造模6周，给中药4周(开始造模后第3周给中药)。末次给药24h后，取血和脑，制备脑组织匀浆液和血清，进行指标检测：超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)。结果见表3，表明六味地黄汤，光合细菌加六味地黄汤均有显著的抗衰老的作用，其中光合细菌加六味地黄汤的抗衰老的作用明显增强。

表3光合细菌加六味地黄汤对衰老大鼠SOD，MDA，GSH-P_X的影响

#与生理盐水组比较，p＜0.05；^*与模型组比较，p＜0.05；

&与六味地黄汤组比较，p＜0.05

实施例6化学成分研究

对六味地黄汤加光合细菌前后进行扫描，得到质谱图，发现：(m/z)50～1000范围内，六味地黄汤加光合细菌前与后的碎片离子数量及母离子大小发生了明显的变化。六味地黄汤加光合细菌前母离子分散在(m/z)50～900范围内，母离子比较多及碎片离子数量较多；六味地黄汤加光合细菌后母离子分散在(m/z)50～500的范围内，母离子比较多及碎片离子数量较少，并且(m/z)500～1000范围内几乎无m/z大的母离子。初步说明六味地黄汤加光合细菌后，由于光合细菌的代谢作用使大分子物质变成小分子活性物质。

Claims (3)

1.一种六味地黄汤的中药生物制剂，其特征是将紫色非硫细菌科细菌接种到六味地黄汤中进行发酵制备而成。

2.如权利要求1所述的六味地黄汤的中药生物制剂，其特征在于所述六味地黄汤包括如下组分和重量份数：

熟地20-80  制山萸20-60  山药20-60

泽泻10-50  牡丹皮10-50  茯苓20-60。

3.权利要求1或2所述中药生物制剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将上述药材水煎煮并浓缩至浓度为0.2～2g/ml；

(2)取豆浆4～8份，发酵，过滤得到豆浆发酵液；

(3)将上述豆浆发酵液加到六味地黄汤水煎液中，调pH至6～10；

(4)将紫色非硫细菌科细菌接种到六味地黄汤中，在10～30℃温度和光照条件下发酵1～5个月，所得药液进行分离，提取，精制，灭菌，制成口服制剂、喷雾干燥或冷冻干燥制成颗粒装胶囊或固体制剂。