CN1969838A - 治理念珠菌病的微生态制剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治理皮肤、粘膜白色念珠菌感染疾病的壳聚糖衍生物外用制剂及其配方。该壳聚糖衍生物的特点是同时将Ag、Zn、Cu金属离子部分或全部与载体壳聚糖大分子形成螯合物。其配方的特点是采用了“多靶点”式的协同作用，即除了主要成分壳聚糖及其螯合物之外，还采用了混合精油、多酚类揉质等天然抗氧化剂以及高浓度的链烷酸或羟基酸及表面活性剂等。所形成的综合体系，体现了健康的微生态理念，即既可强化对病原体的抗附着及抑杀效力，还可有效提高组织的免疫力及修复速度，避免了单纯合成药剂的偏颇。

Description

治理念珠菌病的微生态制剂

一.技术领域

本发明涉及一种治理白色念珠菌感染疾病的壳聚糖衍生物外用制剂及其配方。该壳聚糖衍生物的特点，是同时将Ag、Zn、Cu金属离子部分或全部与载体壳聚糖大分子形成螯合物。其配方的特点，是采用了“多靶点”式的协同作用，即除了主要成分壳聚糖及其螯合物之外，还采用了混合精油、多酚类揉质以及高浓度的直链烷基酸及表面活性剂等。所形成的综合体系，体现了健康的微生态理念，即既可强化对病原体的抗附着及抑杀效力，还可有效提高组织的免疫力及修复速度，避免了单纯合成药剂的偏颇。

二.发明背景

念珠菌，特别是白色念珠菌病流行于各国(无国界)，尤其是在妇女人群。由于混合交义感染，还常被疑为性病，也容易在携HIV病毒的AIDS病人中感染(因为免疫缺损)。现状是一些过去常用、效果巳被肯定的抗菌剂，如克霉唑、益康唑、酮康唑、联笨苄唑……等等效力渐微，不断更新的类似产品并未有效解难，于是加大用药频率和剂量，以及复发性恶性循环，成了重大关注。专家们逐渐认识到：解决念珠菌病问题，除有效的药物制剂外，还必需综合解决机体的整体健康状况，包括微生态系的正常平衡。、

正常的粘膜微生态如阴道应具合宜的湿度、PH、免疫力、糖原或糖类和激素之间的微妙平衡，其中菌群中的益生菌、条件致病毒或病原菌处于和谐、平衡的共生关系。白色念珠菌在庞大数量的菌群中，并非典型病原体。但是，由于抗菌素、类固醇、激素等的滥用，口服避孕药、糖尿病、营养失衡、心理压力等因素导致的普遍免疫水平的下降，正常生态平衡打破后引起的菌群失调和酸碱度改变，便为酵母菌以及致病性的细菌、病毒、毛滴虫等的大肆繁衍造就条件。外来因子，如阴茎携带念珠菌病患的男子的性伴侣，得该病的几率将大大高于未感染男子的性伴侣。因此，念珠菌病今天越来越倾向于归类为“性传播疾病”。

阴道念珠菌感染病的治愈率尽管宣称可达80％，外用内服制剂如：克霉唑、米康唑可以在一周或数周见效。但迄今对常见的复发问题仍无有效措施。常在第一次用药后反反复复持续达到半年甚至数年。总体趋势看来，人群免疫力下降和病原体耐药性上升的双重作用夹攻之下，因循原来的处理念和药剂设计路子，即便不断翻新合成药剂，仍然无望解决“难言之隐”。

属于自然界唯一阳离子型的绿色大分子—甲壳素及其衍生物的广谱抗菌性并多重生理功能，如强化免疫(促进巨噬细胞繁衍、诱导细胞因子产生)，组织修复(促进粘膜表面细胞生长)，清理毒素(吸附诸多的内源性、外源性细胞毒素、代谢废物)，乳酸杆菌的生长因子等等。壳聚糖可以通过缓释等作用降低药物毒性，减少药物剂量，还可以促进药物渗透，加上无限的资源优势使它有潜力越来越成为绿色抗菌的主导载体物之一。

三.发明内容

本发明提供一种以激发机体组织免疫力及维持局部组织生态平衡为主导设计理念的绿色微生态制剂。这种微生态制剂的主要活性成分为：

①一种以上的壳聚糖及其衍生物，特别应包括一种或一种以上与金属元素Ag、Zn、Cu螯合的衍生物；

②一种或一种以上的强力抗氧化剂；

③一种以上的植物精油；

④一种或一种以上的链烷酸或羟基酸；

⑤一种或一种以上的非离子、兼性离子或阳离子表面活性剂。

这种多元成分复合体，体现了“多靶点”协同作用的理念，实际上也是一种生态平衡理念。由实施例的案例可以证明：其效果远非任何单一成分可以体现。

壳聚糖及其衍生物在本发明制剂中的综合作用包括：

(1).激活免疫细胞并激发免疫因子：

皮肤粘膜是免疫机制的重要防线。巨噬细胞、淋巴细胞、白细胞等对壳聚糖具有趋化性并具天然的细胞受体(甘露糖受体)极易受壳聚糖活化。活化的这类细胞可以产生NO、干扰素、白介素等等，特别是NO的水平对于抗菌和细胞的活力和寿命有着至关重要的作用。这些都可有效启动对病原微生物(包括细菌、真菌、病毒)的攻击并有利于组织修复。壳聚糖是粘膜溶菌酶及一些其它几丁酶的底物，分解产物更具免疫激活和抑菌作用。

(2).抗菌体附着、凝集菌体活细胞并破坏其内外结构：壳聚糖可成为粘膜组织的屏障，并破坏病原体的粘附物质，由此，可有效防阻菌体附着。壳聚糖(阳离子大分子)本身还具有天赋抑菌性。借助益生菌群和病原菌或潜在病原菌细胞结构的差异(电性、亲水性和结构成分)，壳聚糖对于乳酸杆菌、双歧杆菌等益生菌既是生长因子，并不表现解粘附和凝集，但对多数病原菌及外在酶系则是抑制因子。与Ag、Zn、Cu离子螯合以及表面活性剂的添加，则可使壳聚糖的抗菌力进一步增大。

(3).壳聚糖对诸活性因子促进透皮吸收和药物缓释：巳被用在多达近200种包括抗菌素、蛋白质、酶类、多酞、生长因子和细胞免疫因子、抗体因子等各类药物、制剂作为控释载体，以减少药物的毒付作用、投放剂量或促进渗透。

(4).抗氧化、抗自由基和吸附菌类毒素：壳聚糖具有抗氧化清除自由基作用，与其螯合的Zn、Cu则是组织中抗氧化酶的活性辅基，还可对一些含吲哚和硫的恶臭化物起结合抗臭作用。

(5).本发明配剂中提供的乳酸等高密度质子条件下，更加强化了壳聚糖的阳离子性抗菌力，并有助于复原利于乳酸菌优势繁衍的生理酸度。

壳聚糖的上述积极作用还可因本发明中其他因子的加入而得到协同、强化；如：

●免疫激活：多酚类、黄酮类、原花青素楺质类。

●抗菌(抗附着)：多酚类、萜类精油、复合的碘、揉质、螯合的Zn、Cu。

●抗氧化(抗自由基)：黄酮类、螯合的Zn、Cu多酚类精油。

●抗炎和组织修复：黄酮类。

特别需要强调的是，业巳证明：生物类黄酮、多酚类植物次生代谢物抑菌的主要机制之一是抑制菌体的GTF酶(葡糖基转移酶)础使菌体产生不了粘附物质葡聚糖。壳聚糖同时也具有这项作用。

本发明配方成分说明：

(1).壳聚糖及其衍生物，涉及各种阳离子性壳聚糖及其衍生物，如壳寡糖、低聚壳聚糖、壳聚糖及它们的各种盐，如抗坏血酸盐、乳酸盐、甲、乙、丙、丁酸盐、吡咯烷酮羧酸盐、壳聚糖季铵化物，壳聚糖与Ag、Zn、Cu单独和多种离子的螯合物，最好是与三种同时螯合生成者，壳聚糖与碘的复合物。各种壳聚糖的脱乙酰度是在75-95％，最好是在＞90％。分子量是在2000-100,000最好是2000-5000。它们的剂型可以是溶液的、悬液的和粉未的，或者是半流动的各种糊剂、涂剂、膏剂。最好是溶液剂(包括洗剂)和粉剂的结合。粉剂的粒径可以是0.1-200μm，但最好是0.1-150μm平均＜50μm也可以是海绵体。

(2).抗氧化剂类是指各类中草药和植物来源的天然抗氧化剂，包括多酚类、黄酮类、揉质类、原花青素、皂甙类、生物碱类等。各种酚性萜类精油如柚皮甙元、柑桔素、丁香油、肉桂油、冬青油、桉叶油、百里香酚、茶树油、薰衣草油、迷迭香油，也包括维生素类抗氧化剂，如抗坏血酸、α-硫辛酸、维生素A、E、谷光甘酞等。

(3).链烷酸是指甲、乙、丙、丁酸、羟基酸是指乳酸、抗坏血酸等。

(4).表面活性剂指的是各种非离子、兼性离子或阳离子表面活性剂，如甜菜碱类、季铵盐类、烷基葡糖苷类。

四.发明配方及工艺

(1).壳聚糖衍生物粉未的制备

●低聚壳聚糖Zn、Cu、Ag复合物：称取医用精品级低聚壳聚糖按4∶1(W/W)与乙酸一起溶入水中配成1％的溶液。按壳聚糖∶硫酸锌∶硫酸铜∶硝酸银＝1∶1∶0.2∶0.2，加入三种金属盐混合的1％的水溶液，在1000转/分快速搅拌下加热至50-80℃，反应3小时后，将沉淀物反复用乙醇和去离子水洗净后真空干燥粉碎，得浅灰蓝色粉未(检测不含游离的金属离子及酸根离子)，～200目。

●低聚壳聚糖-碘复合物：称取医用精品级低聚壳聚糖粉未(200目)与占壳聚糖重量10％的结晶碘在密闭的玻璃瓶中混合后，再在50℃烘箱中不时振荡保温24小时，得不合游离碘的棕色复合物粉未。

●低聚壳聚糖乳酸盐：称取医用精品级低聚壳聚糖粉未(200目)按壳聚糖∶乳酸＝2∶1(W/W)与乳酸一起加入10倍于壳聚糖重量含50％乙醇的水中，室温下搅拌24小时。滤去醇液，用75％乙醇洗净游离乳酸后真空干燥，即得浅黄色壳聚糖乳酸盐粉未。

●壳聚糖乙酸溶液：将医用精品级壳聚糖按壳聚糖∶乙酸＝1∶2.5最好是1∶5与乙酸混合配成含壳聚糖1-5％的粘稠溶液，即得。

(2).实用制剂的配方

●胶态(涂、膏)及粉态制剂(见表1.)选择剂型，按表中所列成分及含量比例(％)，将各成分彻底混合均匀即得，必要时可用均质设备。

●海绵柱：

①.将医用纱布捲成直径10mm、长40-50mm的园柱状。

②.将医用级壳聚糖(分子量500,000、脱乙酰度＞90％)以含2.5％乙酸的水溶液配成2.5-3.0％的壳聚糖乙酸

③.将①.中的柱状物纱布卷浸裹上②.中的壳聚糖乙酸.溶液，置入-20℃冰箱进行冻结。反复浸裹壳聚糖乙酸溶液，并冻结至柱状物的直径达到20mm左右(约经3-4次)。

④.将低聚壳聚糖ZnCuAg复合物(粉未)以5％乙酸水溶液配制成5％浓度复合物溶液，该溶液呈极浅的军绿色。

⑤.将③冻结柱状物浸裹一层④中的壳聚糖ZnCuAg复合物并再经-20℃冻结一次。

⑥.将⑤中冻结柱状物放在-40至-50℃的冻干机中冻干后即成本发明的海绵柱。

涂胶及粉态制剂的配方(％)

表1.

类别	成分	涂(膏)、胶	粉未(喷散)
				A       B       C	D       E     F
		壳聚糖衍生物	壳聚糖ZnCuAg			5-10              2-4	20-30
壳聚糖碘	5-10			20-30
			壳聚糖乳酸盐		5-10	20-30
低聚壳聚糖	5-10    5-20      5-10			40-50   40-50 40-50
			壳聚糖乙酸溶液1-5％		25-50   15-50     25-50
抗氧化剂	柑桔素原花青素银杏叶提取物α-硫辛酸V-E、V-C			5-10    5-10      5-10			10      10    10
		精油	桉叶油百里香酚迷迭香油丁香油		2.5-5   2.5-5     2.5-5	5       5     5
表面活性剂	季铵盐类甜菜碱类烷基葡糖苷类吐温类			2.5-5   2.5-5     2.5-5
		吸附剂	沸石氧化锌氧化镁活性炭硅胶			15      15    15
其它	润湿剂：：甘油、山梨醇等止痛剂：合成抗菌剂			5-10    5-10      5-10

实施例1.临床观察

①.选择经确诊(注1)的念珠菌阴道炎患者，先以表1中的壳聚糖乙酸溶液(含壳聚糖1.5％、乙酸8％)冲洗阴道。然后取一枚海绵柱塞入阴道，每日冲洗1-2次。海绵柱可以连续用三天、或每天更新。

②.选念珠菌阴道患炎者，先以表1中的壳聚糖乙酸溶液(含壳聚糖1.％、乙酸10％加或不加外用止痛剂)冲洗阴道的内外。然后取涂胶剂A分布整个阴道内外，最后取一枚海绵柱塞入阴道。每日清洗、施药一次，海绵柱不必每次更换。

③.经确诊为念珠菌和细菌性(注2)阴道炎患者，先按②中方法冲洗阴道内外，然后取粉未剂E喷敷(或撒布)阴道内外壁粘膜，用量2-3克，每日施药一次。

④.再发性念珠菌+细菌+疱疹(病毒)性阴道炎患者。先按②冲洗阴道内外。然后取涂，胶剂B分布整个阴道内外，涂布完后再喷敷粉未剂D，最后加塞海绵柱。每日施药一次。

⑤.再发性念珠菌+细菌+疱疹(病毒)性阴道炎患者。同②中方法冲洗阴道内外，然后取壳聚糖乙酸溶液(含壳聚糖2.0％、乙酸20％加或不加外用止痛剂)涂布阴道内外，最后喷敷粉未剂F布满阴道内外粘膜，用量3-4克/次，每日施药一次。

⑥.再发性念珠菌阴道炎患者同⑤冲洗法，但涂布以涂胶剂C，最后加塞海绵柱。每日施药一次。海绵柱可以连续用三天，或每天更新。

效果：按照上列6例彼此略有差别的配方施药，得到的效果均较肯定，但总的得分以涂胶剂A、B和粉剂D、E并使用海绵柱，结果更稳定。，症状在二周之内逐渐减轻，甚至基本好转。少数需持续施药至3-4周，也基本好转。复发回诊者极少。

注1.念珠菌阴道炎确诊的临床特征：

症状：严重瘙痒、烧灼感、溃疡脓疮，交媾困难。

分泌物：量不多，但呈白色团状粘稠物，附壁分布，无鱼腥味。

PH：4.0-4.5

镜检：生理盐水：多形核细胞(白细胞)：阴道表皮细胞＜1。含椭圆形菌体及大量菌丝的假丝酵母菌(～40％)(正常时乳酸杆菌占势)

10％KOH：假丝酵母菌(～70％)。

注2.细菌性阴道炎确诊的临床特征：：

症状：一般无症状，偶有腹痛、分泌为灰白均质粘液。

PH：＞4.5、接近中性有鱼腥味(与10％KOH接触时)

镜检：球杆菌占优势。

实施例2.鹅口疮

本发明的配方设计理念最早得自一种漱液，因为该漱液对口腔粘膜病变，特别是与白色念珠菌相关的鹅口疮效果很好。在长达近8年的应用中，经过逐步改进，使我们对配方设计坚定了信心。这种漱液的配方成分巳基本包括在涂胶剂C中，只是其中的微量元素锌用了葡糖酸锌。因为是漱用，诸成分的浓度就要低得多。

Claims (9)

1.本发明提出的一种可以强化粘膜组织免疫力，对病原体具凝集、抗附着和抑杀作用，但对常驻益生菌具有生长因子等有利作用，并同时具抗氧化和吸附毒素作用的绿色微生态外用制剂，用于抗御以白色念珠菌为主的各种真菌、霉菌性皮肤、粘膜感染疾患，如真菌性阴道炎，鹅口疮等。

2.权利要求1中的制剂成分包括一种以上的甲壳素衍生物；一种或一种以上的植化防御素抗氧化剂及其他食物来源的抗氧化剂；一种以上的植物精油；至少一种非离子或阳离子、兼性离子表面活性剂以及一种或一种以上的链烷酸或羟基酸。

3.权利要求2中的甲壳素衍生物包括：壳寡糖、低聚壳聚糖、壳聚糖以及它们的各种盐，如抗坏血酸盐、乳酸盐、甲、乙、丙、丁酸盐、壳聚糖水杨酸盐、壳聚糖的吡咯烷酮羧酸盐、壳聚糖季铵盐、各种壳聚糖与Zn、Cu、Ag单独或多种离子的螯合物、各种壳聚糖与分子态碘的复合物。各种壳聚糖的脱乙酰度应是＞75％，最好是＞90％，分子量是2000-500,000，最好是2000-5000。

4.权利要求2中的抗氧化剂包括各种天然抗氧化剂如植化多酚类、柑桔素、楺质类、黄酮类、原花青素、皂甙类、生物碱类等。

5.权利要求2中的植物精油包括：丁香油、肉桂油、冬青油、桉叶油、百里香酚、茶树油、薰衣草油、迷迭香油等。

6.权利要求2中的的其它抗氧化剂还包括各种维生素类抗氧化剂如α-硫辛酸、V-E、V-C、V-A。

7.权利要求2中的表面活性剂包括各种非离子型、兼性离子型和阳离子型表面活性剂如：季铵盐类、甜菜碱类、烷基葡萄糖苷类、吐温等。

8.权利要求2中的链烷酸包括甲、乙、丙、丁酸，羟基酸中的乳酸、抗坏血酸等。

9.根据本发明设计理念所提供的诸制剂的配方及制造工艺，制剂包括粉未剂，其特点在于壳聚糖粉未的粒子平均为50μm，即粘膜巨噬细胞可以吞噬的粒径；溶液剂及洗剂，其特点在于含有壳聚糖及浓度达到5-20％的乙酸或乳酸；涂胶剂其特点在于所含壳聚糖复合金属离子或碘的高效抗菌剂，以及高浓度的乙酸和表面活性剂；海绵体其特点在于带有纱布柱芯及壳聚糖衍生物双层构造的海绵柱体。