CN1939472A - 一种治疗糖尿病的复方制剂的质量控制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种由葛根、地黄、玉米须、天花粉、黄芪、五味子、山药和格列本脲制成的复方制剂的质量控制方法，该质量控制方法包括该组方制剂中多种组分的鉴别测试方法和/或含量测定方法，本发明为该组方制剂的质量控制提供了一套可靠、稳定、全新的方法，使该制剂的工艺控制更加严格合理，质量更加稳定，同时为大生产提供了可靠稳定的检测方法，为确保患者用药的有效性、安全性提供了保障。
Description
技术领域
本发明涉及一种治疗糖尿病药物复方制剂的质量控制方法，属于中药的技术领域。
背景技术
本发明所述的复方制剂是由中药葛根、地黄、玉米须、天花粉、黄芪、五味子、山药与化学药格列本脲制成的复方制剂。具有滋肾养阴、益气生津的功效，用于多饮，多尿，多食，消瘦，体倦无力，眠差腰痛，尿糖及血糖升高之气阴两虚型消渴症，其范畴包括现代医学中的糖尿病。据报道，2000年我国糖尿病总患病率已达到2.4％，全国糖尿病患者总量已达近3100万人。除日渐增多的糖尿病患者外，目前我国尚有约8000万可能患糖尿病的高危人群。据预计，至2010年，我国的糖尿病患病率将达到4％，患者总人数将超过5000万。糠尿病的危害来自于其并发症，常见的并发症有：感染合并症、视网膜病变、高血压、肾脏病变、冠心病、下肢血管病变、脑血管病变。这些并发症已成为糖尿病死亡的主要原因。目前，糖尿病已成为人类社会中仅次于心脑血管疾病与癌症的第三大致死疾病。因此，研究开发用于治疗糖尿病的药物具有极大的现实意义。中医药治疗糖尿病有疗效确切、副作用小、成本低等优势。本中西复方制剂用治疗糖尿病的临床应用疗效已得到肯定。但药物的疗效只有在质量可控的前提下才得到保证，而本药物组合的已有质量控制方法极其简单粗糙，根本不能全面准确的反映和控制该复方制剂的质量。中药化学成分复杂，往往每种药材中的有化学成分有几十种至数百种或更多，已知有生物活性的成分也不少于数种，包涵数种药材的中药复方制剂的化学成分更为复杂。如果仅用其一、二种活性成分来说明其内在质量，具有一定的片面性，更不用说现有技术根本没有相关的含量测定方法。
为了更好的控制该制剂的质量，保证用药的安全性，更好的指导生产，使工艺控制更加严格合理，使消费者能全面认识产品质地，申请人系统研究了本中药复方制剂的质量控制方法，增加了大量鉴别与含量测定项目，使制剂的质量标准有了大幅提高，具有显著的进步。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种治疗糖尿病的中药复方制剂的质量控制方法，从而向相关的生产、检测机构提供了检测的指标、检测的手段、技术方法等等；更好的控制了该制剂的质量，保证用药的安全性，更有利于指导生产，使生产工艺控制更加严格合理，使消费者能全面认识产品质地。
上述中药复方制剂的剂型为口服制剂，包括：片剂、分散片剂、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、丸剂、微丸剂、散剂、滴丸剂、缓释制剂、控释制剂、口服液剂、凝胶剂。
本发明是这样构成的：
一种治疗糖尿病的中药复方制剂的质量控制方法，包括以下全部或部分内容：
(1)葛根药材、地黄药材、天花粉药材、黄芪药材、五味子药材、格列本脲、葛根素、梓醇、瓜氨酸、黄芪甲苷、五味子醇甲、五味子甲素中全部或部分的鉴别测试方法；
(2)格列本脲、葛根素、梓醇、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素、黄芪甲苷中全部或部分成分的含量测定方法。
所述中药复方制剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容：
a、治疗糖尿病的中药复方制剂中黄芪的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，提取液蒸干，残渣加碱性溶液溶解，碱液加盐酸调节至酸性，用醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷提取，提取液调整浓度，制得供试品溶液；另取黄芪对照药材，参照供试品溶液制法，制成对照药材溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷或二氯甲烷-甲醇或乙醇或正丁醇＝3～10∶0.2～1为展开剂，展开，取出，晾干，显色，检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
b、治疗糖尿病的中药复方制剂中黄芪甲苷的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，提取液加于氧化铝柱，用20～60％甲醇或30～70％乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水溶解后加水饱和正丁醇提取，合并正丁醇液，用水适量洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加50～100％甲醇或50～100％乙醇溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷或二氯甲烷-甲醇或乙醇-水＝8～20∶3～12∶0.1～4的溶液或分层后的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含硫酸的显色剂，加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，应显相同颜色斑点；
c、治疗糖尿病的中药复方制剂中黄芪甲苷的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，提取液蒸干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇提取，提取液用碱性溶液洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后通过D101大孔吸附树脂柱，依次用水、不同浓度的甲醇或乙醇洗脱，收集40～80％甲醇或50～90％乙醇洗脱部分，蒸干，残渣用甲醇或乙醇或水中的一种或几种溶解，制得供试品溶液；以黄芪甲苷对照品，制成对照品溶液，采用液相色谱法，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇或乙腈-水或0.05％～3％冰醋酸水溶液或0.05％～3％甲酸水溶液＝20～60∶80～40为流动相，蒸发光散射检测器检测；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
d、治疗糖尿病的中药复方制剂中五味子、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的薄层色谱鉴别方法：
取待测生中药复方制剂适量，加三氯甲烷或二氯甲烷或醋酸乙酯提取，提取液适当浓缩，作为供试品溶液；取五味子对照药材，参照供试品溶液制法，制备对照药材溶液；取五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品中的一种或几种，制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述对照溶液中的一种或几种、及供试溶液适量，点于同一硅胶薄层板，以石油醚或环己烷或正己烷-甲酸乙酯或醋酸乙酯或醋酸乙酯-甲酸或冰醋酸＝10～25∶2～10∶0.1～2的溶液或上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
e、治疗糖尿病的中药复方制剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇或乙醇提取，并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中的一种或几种，制成对照品溶液，采用液相色谱法试验，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇或乙腈-水＝40～90∶50～10为流动相，检测波长为200～400nm之间的一个；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
f、治疗糖尿病的中药复方制剂中格列本脲的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加三氯甲烷或二氯甲烷或醋酸乙酯提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；另取格列本脲对照品，制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷或二氯甲烷-环己烷或正己烷-甲醇或乙醇-甲酸或冰醋酸＝4～12∶9～17∶0.3～3∶0.3～3为展开剂，展开，取出，晾干，检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
g、治疗糖尿病的中药复方制剂中格列本脲的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇或乙醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取格列本脲对照品，制成对照品溶液，采用液相色谱法，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇或乙腈-水或0.05％～3％冰醋酸水溶液或0.05％～3％甲酸水溶液或0.001％～1％磷酸水溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢钠溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢钾溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢胺溶液＝45～80∶55～20为流动相，检测波长为200～400nm中的一个；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，具与对照品色谱保留时间一致的色谱峰；
h、治疗糖尿病的中药复方制剂中地黄、梓醇的一种或两种的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取地黄对照药材，参照供试品溶液的制法制成对照药材溶液；取梓醇对照品，制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷或二氯甲烷-甲醇或乙醇-水＝10～18∶3～10∶0.2～3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含茴香醛的显色剂，加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
i、治疗糖尿病的中药复方制剂中梓醇的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，提取液浓缩至近干，残渣用流动相或50～100％甲醇或50～100％乙醇溶解，作为供试品溶液；以梓醇对照品制成对照品溶液，采用液相色谱法，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈或甲醇-水＝0.5～10∶99.5～90为流动相，检测波长为200～400nm中的一个；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
j、治疗糖尿病的中药复方制剂中天花粉、瓜氨酸的一种或两种的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取天花粉对照药材，参照供试品溶液制法制成对照药材溶液；取瓜氨酸，制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶薄层板上，以正丁醇-无水乙醇或甲醇-甲酸或冰醋酸-水＝4～12∶0.5～4∶0.5～4∶1～5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含茚三酮的显色剂，加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
k、治疗糖尿病的中药复方制剂中葛根、葛根素的一种或两种的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取葛根对照药材，参照供试品溶液制法制成对照药材溶液；取葛根素对照品，制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷或二氯甲烷-甲醇或乙醇-醋酸乙酯或甲酸乙酯-水＝1～5∶1～5∶2～6∶0.1～2为展开剂，展开，取出，晾干，检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
l、治疗糖尿病的中药复方制剂中葛根素的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取葛根素对照品，制成对照品溶液；采用液相色谱法，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇或乙腈-水或0.05％～3％冰醋酸水溶液或0.05％～3％甲酸水溶液或0.001％～1％磷酸水溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢钠溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢钾溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢胺溶液＝10～35∶90～65为流动相，检测波长为200～400nm中的一个；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
所述中药复方制剂的鉴别方法经过优选，包括以下全部或部分内容：
a、治疗糖尿病的中药复方制剂中黄芪的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加乙醇提取，滤过，滤液蒸干，残渣加0.3％氢氧化钠溶液溶解，滤过，滤液用盐酸调节pH值至5～6，用醋酸乙酯提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取黄芪对照药材、同法制成对照药材溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇＝10∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸汽中熏后置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
b、治疗糖尿病的中药复方制剂中黄芪甲苷的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取，提取液加于氧化铝柱，用40％甲醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水溶解后加水饱和正丁醇提取，合并正丁醇液，用水洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，置日光下及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，应显相同颜色斑点；
c、治疗糖尿病的中药复方制剂中黄芪甲苷的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取，提取液蒸干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇提取，提取液用氨溶液洗涤，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后通过D101大孔吸附树脂柱，依次用水、40％乙醇或70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱部分，蒸干，残渣用甲醇溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以黄芪甲苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水＝32∶68为流动相，蒸发光散射检测器检测；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
d、治疗糖尿病的中药复方制剂中五味子、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的薄层色谱鉴别方法：
取待测生中药复方制剂适量，加三氯甲烷提取，提取液适当浓缩，作为供试品溶液；取五味子对照药材，参照供试品溶液制法，制备对照药材溶液；取五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品中的一种或几种，加三氯甲烷制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述对照溶液中的一种或几种、及供试溶液适量，点于同一硅胶GF254薄层板，以30～60℃的石油醚-甲酸乙酯-甲酸＝15∶5∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
e、治疗糖尿病的中药复方制剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，以甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中的一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水＝65∶35为流动相，检测波长为250nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
f、治疗糖尿病的中药复方制剂中格列本脲的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加三氯甲烷提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；另取格列本脲对照品，加三氯甲烷制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-环己烷-乙醇-冰醋酸＝8∶13∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
g、治疗糖尿病的中药复方制剂中格列本脲的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以格列本脲对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇-用磷酸调节pH＝3.5的0.05mol/L磷酸二氢胺水溶液＝65∶35，检测波长为230nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，具与对照品色谱保留时间一致的色谱峰；
h、治疗糖尿病的中药复方制剂中地黄药材、梓醇中一种或两种的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取地黄对照药材，参照供试品溶液的制法制成对照药材溶液；取梓醇对照品，加甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水＝14∶6∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
i、治疗糖尿病的中药复方制剂中梓醇的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取，提取液浓缩至近干，残渣用流动相溶解，作为供试品溶液；以梓醇对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水＝1∶99为流动相，检测波长为210nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
j、治疗糖尿病的中药复方制剂中天花粉、瓜氨酸的一种或两种的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加乙醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取天花粉对照药材，参照供试品溶液制法制成对照药材溶液；取瓜氨酸，加甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水＝8∶2∶2∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
k、治疗糖尿病的中药复方制剂中葛根、葛根素的一种或两种的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取葛根对照药材，参照供试品溶液制法制成对照药材溶液；取葛根素对照品，加甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-醋酸乙酯-水＝2.5∶3∶4∶0.5为展开剂，展开，展距5cm，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
l、治疗糖尿病的中药复方制剂中葛根素的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以葛根素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-1％冰醋酸水溶液＝25∶75为流动相，检测波长为250nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
所述中药复方制剂的含量测定方法包括以下全部或部分内容：
a、治疗糖尿病的中药复方制剂中黄芪甲苷的液相色谱含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，精密称定或量取，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，提取液蒸干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇提取，提取液用碱性溶液洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后通过D101大孔吸附树脂柱，依次用水、不同浓度的甲醇或乙醇洗脱，收集40～80％甲醇或50～90％乙醇洗脱部分，蒸干，残渣用甲醇或乙醇或水中的一种或种溶解并定容至适当浓度，制得供试品溶液；以黄芪甲苷对照品，制成对照品溶液，采用液相色谱法，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇或乙腈-水或0.05％～3％冰醋酸水溶液或0.05％～3％甲酸水溶液＝20～60∶80～40为流动相，蒸发光散射检测器检测；分别精密吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；以外标两点法对数方程进行计算，制剂每日用剂量中含黄芪甲苷的限度不得少于0.10mg；
b、治疗糖尿病的中药复方制剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，精密称定或量取，加甲醇或乙醇提取，并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中的一种或几种，制成对照品溶液，采用液相色谱法测定，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇或乙腈-水＝40～90∶50～10为流动相，检测波长为200～400nm之间的一个；分别精密吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，以外标一点法或标准曲线法进行计算，制剂每日用剂量中含量限度应为以下一项或几项：
(1)含五味子醇甲不得少于1.0mg；
(2)含五味子甲素不得少于0.10mg；
(3)含五味子乙素不得少于0.30mg；
c、治疗糖尿病的中药复方制剂中格列本脲的含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，精密称定或量取，加甲醇或乙醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取格列本脲对照品，制成对照品溶液，采用液相色谱法，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇或乙腈-水或0.05％～3％冰醋酸水溶液或0.05％～3％甲酸水溶液或0.001％～1％磷酸水溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢钠溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢钾溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢胺溶液＝45～80∶55～20为流动相，检测波长为200～400nm中的一个；分别精密吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，以外标一点法或标准曲线法进行计算，制剂每日用剂量含格列本脲应为3.0～9.0mg。
d、治疗糖尿病的中药复方制剂中葛根素的液相色谱含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，精密称定或量取，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取葛根素对照品，制成对照品溶液；采用液相色谱法，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇或乙腈-水或0.05％～3％冰醋酸水溶液或0.05％～3％甲酸水溶液或0.001％～1％磷酸水溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢钠溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢钾溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢胺溶液＝10～45∶90～55为流动相，检测波长为200～400nm中的一个；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，以外标一点法或标准曲线法进行计算，制剂每日用剂量含葛根素不得少于3.0mg；
e、治疗糖尿病的中药复方制剂中梓醇的液相色谱含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，精密称定或量取，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，提取液浓缩至近干，残渣用流动相或50～100％甲醇或50～100％乙醇溶解，作为供试品溶液；以梓醇对照品制成对照品溶液，采用液相色谱法，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈或甲醇-水＝0.5～10∶99.5～90为流动相，检测波长为200～400nm中的一个；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，以外标一点法或标准曲线法进行计算，制剂每日用剂量含梓醇不得少于1.5mg。
所述中药复方制剂的含量测定方法，经过选选，包括以下全部或部分内容：
a、治疗糖尿病的中药复方制剂中黄芪甲苷的含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取，提取液蒸干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇提取，提取液用氨溶液洗涤，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后通过D101大孔吸附树脂柱，依次用水、40％乙醇、70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱部分，蒸干，残渣用甲醇溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以黄芪甲苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水＝32∶68为流动相，蒸发光散射检测器检测；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪；以外标两点法对数方程进行计算，制剂每日用剂量含黄芪甲苷的限度不得少于0.20mg；
b、治疗糖尿病的中药复方制剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，以甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中的一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水＝65∶35为流动相，检测波长为250nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪；以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含量限度应为以下一项或几项：
(1)含五味子醇甲不得少于2.0mg；
(2)含五味子甲素不得少于0.20mg；
(3)含五味子乙素不得少于0.60mg；
c、治疗糖尿病的中药复方制剂中格列本脲的含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以格列本脲对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇-用磷酸调节pH＝3.5的0.05mol/L磷酸二氢胺水溶液＝65∶35，检测波长为230nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含格列本脲应为3.3～8.3mg。
d、治疗糖尿病的中药复方制剂中葛根素的液相色谱含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以葛根素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-1％冰醋酸水溶液＝25∶75为流动相，检测波长为250nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含葛根素不得少于6.0mg；
e、治疗糖尿病的中药复方制剂中梓醇的液相色谱含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取，提取液浓缩至近干，残渣用流动相溶解，作为供试品溶液；以梓醇对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水＝1∶99为流动相，检测波长为210nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含梓醇不得少于3.0mg。
与现有技术相比，本发明能更加完善的控制由中药葛根、地黄、玉米须、天花粉、黄芪、五味子、山药和合成药格列本脲制成的治疗糖尿病的中药复方制剂的质量。该组方成分复杂，现有技术只通过检测其中一、两种成分来说明其内在质量，具有一定的片面性，根本无法判断其药效的指标成分。因此本申请人通过大量的实验研究，制定了完善的鉴别和含量测定方法来全面控制该复方制剂的质量。但是由于该复方制剂中的各药材之间所含的化学成分复杂，对鉴别和含量测定造成干扰，导致鉴别、含量测定和特征不稳定，所以必须通过控制流动相、展开剂等色谱条件，才能得到良好的薄层色谱和含测条件。也就是说，由于处方中各成分相互之间的干扰影响，只有采用本发明的条件，才能得到理想的薄层色谱和含量测定方法。
通过实验证明，本发明质量控制方法对以由中药葛根、地黄、玉米须、天花粉、黄芪、五味子、山药和合成药格列本脲制成的治疗糖尿病的中药复方制剂的质量控制更为有效，方法精密度、稳定性均较高。
实验例1片剂中黄芪的薄层色谱鉴别方法研究：
为了突出黄芪的特征，选择了黄芪对照药材作为对照，但是由于该复方制剂中成分极多，会对特征斑点鉴别造成干扰，例如地黄中的多糖与梓醇，五味子中的五味子醇甲等成分。只有排除这些成分的干扰，才能获得理想的色谱效果。薄层色谱法效果优劣的关键因素为展开条件，特别是展开剂的组成。因此，试验筛选了多种展开条件，部分展开条件与结果如下：
片剂中黄芪的薄层色谱鉴别方法研究
条件 结果
正己烷-醋酸乙酯(8∶2)硅胶H薄层板 Rf值偏低
丙酮-冰醋酸-水(8∶2∶1)硅胶G薄层板 分离不清晰
石油醚-甲醇(7-3)硅胶GF254薄层板 阴性有干扰
三氯甲烷-丙酮-甲酸(20∶2∶1)硅胶G薄层板 分离不清晰，阴性有干扰
三氯甲烷-丙酮-甲醇(20∶3∶2)硅胶H薄层板 阴性有干扰
二氯甲烷-乙醇(3∶2)硅胶G薄层板 分离不清晰，Rf值偏高
分离清晰，Rf值适中，阴性无
三氯甲烷-甲醇(10∶1)硅胶G薄层板
干扰
经过筛选，确定最佳条件：以硅胶G薄层板为固定相，以三氯甲烷-甲醇(10∶1)为展开剂，在此条件下，黄芪对照药材特征斑点的Rf值适中，和其它斑点分离清晰，阴性无干扰。
实验例2微丸剂中黄芪甲苷的薄层色谱鉴别方法研究：
为了突出黄芪的特征，选择了黄芪甲苷作为其特征斑点，但是由于该复方制剂中存在较多与黄芪甲苷结构相近、极性相似的成分，例如地黄中的多糖与梓醇，葛根中的葛根素等成分。只有排除这些成分的干扰，才能获得理想的色谱效果。薄层色谱法效果优劣的关键因素为展开条件，特别是展开剂的组成。因此，试验筛选了多种展开条件，部分展开条件与结果如下：8～20∶3～12∶0.1～4
微丸剂中黄芪甲苷的薄层色谱鉴别方法研究
条件 结果
三氯甲烷-丙酮-水(10∶8∶0.5)硅胶G薄层板 阴性有干扰
二氯甲烷-丙酮-水(10∶8∶0.5)硅胶G薄层板 分离不清晰，阴性有干扰
甲醇-丙酮(2∶9)硅胶H薄层板 对照品展至前沿
三氯甲烷-丙酮(10∶5)硅胶GF254薄层板 阴性有干扰
醋酸乙酯-乙醇(13∶7)硅胶H薄层板 阴性有干扰
三氯甲烷-乙醇-水(7∶3∶0.5)硅胶G薄层板 分离不清晰，阴性有干扰
三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液
分离清晰，Rf值适中，阴性无干扰
硅胶G薄层板
经过筛选，确定了最佳条件：以硅胶G薄层板为固定相，以三氯甲烷-甲醇-水(13-7-2)的下层溶液为展开剂，在此条件下，黄芪甲苷特征斑点的Rf值适中，和其它斑点分离清晰，阴性无干扰。
实验例3胶囊剂中五味子、五味子醇甲、五味子甲素的薄层色谱鉴别方法：
为了突出五味子的特征，选择了五味子对照药材、五味子醇甲、五味子甲素作为其特征斑点，但是由于中药复方制剂中存在较多与五味子醇甲、五味子甲素结构相近、极性相似的成分，例如地黄中的梓醇，葛根中的黄酮类成分。只有排除这些成分的干扰，才能获得理想的色谱效果。薄层色谱法效果优劣的关键因素为展开条件，特别是展开剂的组成。因此，试验筛选了多种展开条件，部分展开条件与结果如下：
胶囊剂中五味子、五味子醇甲、五味子甲素的薄层色谱鉴别方法
条件 结果
正己烷-甲酸乙酯(9∶4)硅胶H薄层板 Rf值偏高
正己烷-甲苯-醋酸乙酯(5∶7∶5)硅胶H薄层板 阴性有干扰
甲苯-甲酸乙酯-甲酸(10∶10∶3)的上层溶液
硅胶G薄层板 分离不清晰
石油醚(60～90℃)-甲酸乙酯-乙酸(8∶5∶3)
硅胶GF254薄层板 阴性有干扰
石油醚(60～90℃)-甲酸乙酯(19∶1)硅胶H薄层板 Rf值偏低
石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶 分离清晰，Rf值适中，阴性无
液硅胶GF254薄层板 干扰
经过筛选，确定了以硅胶G薄层板为固定相，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，在此条件下，五味子醇甲、五味子甲素的Rf值适中，和其它斑点分离清晰，阴性无干扰。
实验例4丸剂中天花粉、瓜氨酸的一种或两种薄层色谱鉴别方法：
为了突出天花粉的特征，选择了瓜氨酸作为其特征斑点，但是由于该中药复方制剂中存在较多与瓜氨酸结构相近或极性相似的成分，例如黄芪与葛根中的苷类成分。只有排除这些成分的干扰，才能获得理想的色谱效果。薄层色谱法效果优劣的关键因素为展开条件，特别是展开剂的组成。因此，试验筛选了多种展开条件，部分展开条件与结果如下：
丸剂中天花粉、瓜氨酸的一种或两种薄层色谱鉴别方法
条件 结果
醋酸乙酯-甲醇-冰醋酸(10∶3∶4)硅胶H薄层板 Rf值偏低，分离不清晰
正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水(14∶5∶0.5∶1)硅胶G薄层板 Rf值偏高，分离不清晰
正丁醇-甲醇-水(10∶6∶0.5)硅胶G薄层板 阴性有干扰
正丁醇-甲醇-醋酸乙酯(12∶1∶5)硅胶H薄层板 阴性有干扰
正丁醇-乙醇-醋酸乙酯(8∶3∶7)硅胶GF254薄层板 阴性有干扰
醋酸乙酯-乙醇-水(10∶4∶5)硅胶G薄层板 阴性有干扰
分离清晰，Rf值适中，阴性无
正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水(8∶2∶2∶3)硅胶G薄层板
干扰
经过筛选，确定了最佳条件：以硅胶G薄层板为固定相，以正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水(8∶2∶2∶3)为展开剂，在此条件下，瓜氨酸的Rf值适中，和其它斑点分离清晰，阴性无干扰。
实验例5滴丸剂中葛根、葛根素的一种或两种薄层色谱鉴别方法：
为了突出葛根的特征，选择了葛根、葛根素作为其特征斑点，但是由于该复方制剂中存在较多与葛根素结构相近或极性相似的成分，例如黄芪中的苷类，地黄中的多糖与梓醇等成分。只有排除这些成分的干扰，才能获得理想的色谱效果。薄层色谱法效果优劣的关键因素为展开条件，特别是展开剂的组成。因此，试验筛选了多种展开条件，部分展开条件与结果如下：
滴丸剂中葛根、葛根素的一种或两种薄层色谱鉴别方法
条件 问题
醋酸乙酯-甲醇-冰醋酸(10∶3∶4)硅胶H薄层板 分离不清晰
正丁醇-甲醇-苯(4∶3∶10)硅胶GF254薄层板 阴性有干扰
三氯甲烷-甲醇-醋酸乙酯-水(10∶2∶3∶2) 分离不清晰，Rf值偏低
硅胶GF254薄层板
醋酸乙酯-甲醇-甲苯(8-3-6)硅胶G薄层板 阴性有干扰
二氯甲烷-醋酸乙酯-苯(7-4-4)硅胶H薄层板 阴性有干扰
三氯甲烷-乙醇-水(5-4-3)硅胶GF254薄层板 阴性有干扰
三氯甲烷-甲醇-醋酸乙酯-水(2.5∶3∶4∶0.5) 分离清晰，Rf值适中，阴性
硅胶G薄层板 无干扰
经过筛选，确定了最佳条件：以硅胶G薄层板为固定相，以三氯甲烷-甲醇-醋酸乙酯-水(2.5∶3∶4∶0.5)为展开剂，在此条件下，葛根素的Rf值适中，和其它斑点分离清晰，阴性无干扰。
实验例6胶囊剂中葛根素的含量测定
1仪器与试药
(1)主要仪器：
高效液相色谱仪 1100series Agilent
高效液相色谱仪 2010-AHT SHIMADZU
电子分析天平 BP211D SARTORIUS
紫外/可见分光光度仪 TU-1810SPC 北京普析通用仪器有限责任公司
超声波清洗仪 KQ250DB 昆山超声仪器有限公司
(2)试药：
葛根素 中国药品生物制品检定所
甲醇 分析纯 北京市通广精细化工公司
冰醋酸 优级纯 天津市永大化学试剂开发中心
磷酸二氢胺 优级纯 北京市益利精细化学品有限公司
磷酸 优级纯 天津市化学试剂三厂
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2检测波长的选择 精密称取葛根素对照品适量，加甲醇制成每1ml含15μg的溶液，在200～400nm波长范围内扫描。结果表明，葛根素在250nm处有最大吸收，因此选择250nm作为测定胶囊剂中葛根素含量的检测波长。
3提取时间的选择 取本品内容物，从中取约0.12g(共4份)，精密称定，分置具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇20ml，精密称定重量，分别超声处理(功率250W，频率33KHz)5分钟、10分钟、20分钟、30分钟，取出，放至室温，精密称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，，精密吸取续滤液10μl，注入液相色谱仪，测定，结果如下：
提取时间考察
提取时间(min) 葛根素含量(mg/粒)
5 1.828
10 2.065
20 2.047
30 2.082
结果表明，超声处理10min即可提取完全，因此超声时间定为10分钟。
4色谱条件
色谱仪：SHIMADZU 2010AHT；
色谱柱：DIKMAD-C18 250×4.6mm 5μm；
流动相：甲醇∶1％冰醋酸水溶液＝25∶75；
检测波长：250nm；
柱温：30℃；
流速：1ml/min；
进样量：10μl。
5对照品溶液的制备 精密称取葛根素对照品适量，加甲醇制成每1ml含40μg的溶液，摇匀，即得。
6供试品溶液的制备 取本品内容物，从中取约0.12g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，精密称定重量，超声处理(功率250W，频率33KHz)10分钟，取出，放至室温，精密称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。
7测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
根据上述条件得到葛根素对照品、供试品色谱，其理论板数n大于4000。样品中葛根素色谱峰与相近峰分离清晰完全，分离度均大于1.5。
8阴性干扰排除试验 为考察其它药材、原料和辅料是否干扰葛根素的测定，除葛根外，按处方比例称取其它药材、原料和辅料同法制成阴性对照品溶液并测定。结果表明，阴性样品对葛根素的含量测定无干扰。
9线性关系的考察 精密量取葛根素对照品溶液(0.4168mg/ml)0.4ml、0.8m、1.2ml、1.6ml、2.0ml，分置10ml量瓶中，加甲醇定至刻度，摇匀，配制成0.016672mg/ml、0.033344mg/ml、0.050016mg/ml、0.066688mg/ml、0.08336mg/ml的对照品溶液，分别从中精密吸取10μl，注入液相色谱仪，测定，结果如下：
葛根素线性关系
编号 葛根素量(μg) 峰面积
1 0.16672 654488
2 0.33344 1329030
3 0.50016 1985802
4 0.66688 2627315
5 0.83360 3300969
以葛根素的量(μg)为横坐标，峰面积为纵坐标做图，绘制标准曲线。
回归方程：Y＝3953483.09X+2146.70
相关系数：γ＝0.9999
结果表明，葛根素在0.16672μg～0.8336μg之间线性关系良好。
经过计算，葛根素标准曲线为一过原点的直线，因此选择外标一点法测定消渴微丸中葛根素的含量。
10精密度试验 精密吸取同一份葛根素对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，重复测定5次，考察对照品溶液精密度，结果如下：
精密度试验
试验次数 1 2 3 4 5 平均值 RSD(％)
峰面积 1634292 1644270 1649155 1649277 1648708 1645140 0.39
结果表明，对照品溶液精密度良好。
11供试品溶液稳定性试验 精密吸取同一份供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，分别在0、2、6、10、24小时进样测定，结果如下：
供试品溶液稳定性试验结果
时间(h) 0 2 6 10 24 平均值 RSD(％)
含量(mg/袋) 8.233 8.173 8.150 8.239 8.197 8.198 0.47
结果表明，供试品溶液在24小时内稳定性良好。
12重复性试验取本品内容物，从中取约0.12g(共5份)，精密称定，依法测定，结果如下：
重复性试验
编号 1 2 3 4 5 平均值 RSD(％)
含量(mg/粒) 2.055 1.988 2.049 2.073 2.054 2.044 1.59
结果表明，重复性良好。
13加样回收率试验 取本品内容物，从中取约60mg(共6份)，精密称定，分置具塞锥形瓶中；精密称取葛根素10.21mg，置25ml量瓶中，加甲醇适量超声处理使溶解，取出，放至室温，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取0.6ml，0.75ml，0.9ml(各两份)，分置上述具塞锥形瓶中，加甲醇至20ml，摇匀，精密称定重量，超声处理(功率250W，频率33KHz)10分钟，取出，放至室温，精密称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，精密吸取续滤液10μl，注入液相色谱仪，测定，结果如下：
葛根素加样回收率试验
| 编号 | 供试品称量(mg) | 供试品中纯品量(mg) | 葛根素加入量(mg) | 测得量(mg) | 回收率(％) |
| 123456 | 60.6662.1161.9664.1859.8164.37 | 0.32840.33630.33550.34750.32380.3485 | 0.24500.24500.30630.30630.36760.3676 | 0.57040.57750.63330.64810.68330.7085 | 98.7898.4597.2298.1497.8097.93 |
平均回收率＝98.05％，RSD＝0.55％。
结果表明，回收率良好。
14样品含量测定 取十批样品，依法测定，结果如下：
十批样品含量测定结果
批号 葛根素(mg/粒)
1批 0.937
2批 1.204
3批 1.185
4批 1.173
5批 1.221
6批 1.096
7批 1.142
8批 1.088
9批 1.236
10批 1.194
实验例7微丸剂中格列本脲的含量测定
1仪器与试药
(1)主要仪器：
高效液相色谱仪 1100series Agilent
高效液相色谱仪 2010-AHT SHIMADZU
电子分析天平 BP211D SARTORIUS
紫外/可见分光光度仪 TU-1810SPC 北京普析通用仪器有限责任公司
超声波清洗仪 KQ250DB 昆山超声仪器有限公司
(2)试药：
格列本脲 中国药品生物制品检定所
甲醇 分析纯 北京市通广精细化工公司
冰醋酸 优级纯 天津市永大化学试剂开发中心
磷酸二氢胺 优级纯 北京市益利精细化学品有限公司
磷酸 优级纯 天津市化学试剂三厂
纯净水 娃哈哈
2检测波长的选择 精密称取格列本脲对照品适量，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，在200～400nm波长范围内扫描。结果表明，格列本脲在230nm处有最大吸收，故选择230nm作为测定微丸剂中格列本脲含量的检测波长。
3提取时间的选择 取本品，粉碎成细粉，从中取约0.8g(共4份)，精密称定，分置具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇20ml，精密称定重量，分别超声处理(功率250W，频率33KHz)5分钟、10分钟、20分钟、30分钟，取出，放至室温，精密称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，精密吸取续滤液10μl，注入液相色谱仪，测定，结果如下：
提取时间考察
提取时间(min) 格列本脲含量(mg/袋)
5 1.323
10 1.310
20 1.315
30 1.319
结果表明，超声处理5min即可提取完全，因此超声时间定为5分钟。
4色谱条件
色谱仪：Aglient 1100series；
色谱柱：DIKMAD-C18 250×4.6mm 5μm；
流动相：甲醇∶0.05mol/L磷酸二氢胺(用磷酸调节pH＝3.5)＝65∶35；
检测波长；230nm；
柱温：30℃；
流速：1ml/min；
进样量：10μl。
5对照品溶液的制备 精密称取在格列本脲对照品适量，加甲醇制成每1ml含40μg的溶液，摇匀，即得。
6供试品溶液的制备 取本品，粉碎成细粉，从中取约0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，精密称定重量，超声处理(功率250W，频率33KHz)10分钟，取出，放至室温，精密称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。
7测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
根据上述条件得到格列本脲对照品、供试品色谱图，其理论板数n大于5000。样品中格列本脲色谱峰与相近峰分离清晰完全，分离度均大于1.5。
8阴性干扰排除试验 为考察其它药材和辅料是否干扰格列本脲的测定，除格列本脲外，按处方比例称取其它药材和辅料同法制成阴性对照品溶液并测定。结果表明，阴性样品对格列本脲的含量测定无干扰。
9线性关系的考察 精密量取格列本脲对照品溶液(0.5036mg/ml)0.4ml、0.8m、1.2ml、1.6ml、2.0ml，分置10ml量瓶中，加甲醇定至刻度，摇匀，配制成0.020144mg/ml、0.040288mg/ml、0.060432mg/ml、0.080576mg/ml、0.10072mg/ml的对照品溶液，分别从中精密吸取10μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，结果如下：
格列本脲线性关系
编号 格列本脲量(μg) 峰面积
1 0.20144 711.379
2 0.40288 1409.371
3 0.60432 2112.89
4 0.80576 2801.792
5 1.0072 3539.442
以格列本脲的量(μg)为横坐标，峰面积为纵坐标做图，绘制标准曲线。
回归方程：Y＝3499.1X+0.4107
相关系数：γ＝0.9999
结果表明，格列本脲在0.20144μg～1.0072μg之间线性关系良好。
经过计算，格列本脲标准曲线为一过原点的直线，因此选择外标一点法测定消渴颗粒中格列本脲的含量。
10精密度试验 精密吸取同一份格列本脲对照品溶液(40.288μg/ml)10μl，注入液相色谱仪，重复测定5次，考察对照品溶液精密度，结果如下：
精密度试验
试验次数 1 2 3 4 5 平均值 RSD(％)
峰面积 1407.236 1415.773 1427.405 1400.895 1406.669 1411.596 0.73
结果表明，精密度良好。11供试品溶液稳定性试验 精密吸取同一份供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，分别在0、2、6、10、24小时进样测定，结果如下：
供试品溶液稳定性试验结果
时间(h) 0 2 6 10 24 平均值 RSD(％)
含量(mg/袋) 1.274 1.278 1.272 1.278 1.281 1.277 0.28
结果表明，供试品溶液在24小时内稳定性良好。
12重复性试验取 本品同一批样品，粉碎成细粉，从中取约0.8g(共5份)，精密称定，平行5份，按正文供试品溶液制备和测定项下进行操作，结果如下：
重复性试验
编号 称量(g) 峰面积 含量(mg/袋)
1 0.84256 1206.374 1.242
2 0.83809 1196.385 1.238
3 0.79318 1164.847 1.274
4 0.82503 1188.505 1.250
5 0.79531 1182.482 1.290
平均含量＝1.259mg/袋，RSD＝1.77％。
结果表明，重复性良好。
13加样回收率试验 取本品同一批样品，粉碎成细粉，从中取约0.4g(共6份)，精密称定，分置具塞锥形瓶中；精密称取格列本脲10.21mg，置25ml量瓶中，加甲醇适量超声处理使溶解，取出，放至室温，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取0.7ml，0.85ml，1.0ml(各两份)，分置上述具塞锥形瓶中，加甲醇至20ml，摇匀，精密称定重量，超声处理(功率250W，频率33KHz)10分钟，取出，放至室温，精密称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，精密吸取续滤液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得，结果如下：
格列本脲加样回收率试验
| 编号 | 供试品称量(g) | 供试品中纯品量(mg) | 格列本脲加入量(mg) | 测得量(mg) | 回收率(％) |
| 123456 | 0.436720.427310.472740.475930.476020.52155 | 0.36340.35550.39330.39600.39600.4339 | 0.28590.28590.34710.34710.40840.4084 | 0.64520.63890.73210.73570.79970.8328 | 98.5799.1397.6197.8798.8597.67 |
平均回收率＝98.28％，RSD＝0.66％。
14样品含量测定 取十批样品，依法测定，结果如下：
十批样品含量测定结果
批号 格列本脲(mg/袋)
1批 1.142
2批 1.259
3批 1.202
4批 1.222
5批 1.173
6批 1.203
7批 1.293
8批 1.284
9批 1.298
10批 1.188
实验例8片剂中黄芪甲苷含量测定
1仪器与试药
(1)主要仪器：
高效液相色谱仪 P-426 Alltech
蒸发光散射检测器 2000ES Alltech
高效液相色谱仪 1100series Agilent
超声波清洗机 KQ250B 昆山市超声仪器有限公司
电热真空干燥箱 ZK-30ABX 北京中兴伟业仪器公司
电子分析天平 AE240 Mettler
(2)试药：黄芪甲苷：中国药品生物制品检定所
所用甲醇、乙腈均为色谱纯，均购于天津四友生物医学技术开发公司水为重蒸水，其它试剂均为分析纯。
2色谱条件
色谱柱：Platinum C18 4.6×250mm 5μm；
流动相：乙腈-水＝32∶68；
流速：1.0ml/min；
蒸发光检测器检测：漂移管温度：110℃，气流量：2.7L/min；
柱温：30℃。
根据上述条件得到黄芪甲苷、供试品、阴性色谱图；黄芪甲苷峰达到基线分离，与相近峰分离清晰完全，保留时间适中，峰形尖锐，对称，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000。
3对照品溶液的制备 分别精密称取经五氧化二磷干燥器减压干燥24小时的黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1ml各含0.1mg的溶液，即得。
4供试品溶液的制备 取本品，研细，从中精密称取约45g，加水200ml溶解后用水饱和正丁醇提取，每次200ml，和并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次200ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml溶解后通过D101大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长12cm)，依次用水50ml、40％醇30ml、70％乙醇80ml洗脱，收集70％乙醇洗脱部分，蒸干，残渣用甲醇5ml溶解，摇匀，滤过，取续滤液即得。
5测定法 分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl，供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算黄芪甲苷的含量，即得。
6线性关系考察 精密吸取黄芪甲苷(0.2085mg/ml)对照品溶液2、4、8、12、16μl，注入液相色谱仪，以黄芪甲苷的量(μg)的常用对数值为横坐标，峰面积的常用对数值为纵坐标做图，绘制标准曲线，结果如下：。
黄芪甲苷线性关系
| 编号 | 黄芪甲苷(μg) | 黄芪甲苷常用对数值 | 峰面积 | 峰面积常用对数值 |
| 12345 | 0.4170.8341.6682.5023.336 | -0.3799-0.078830.22220.39830.5232 | 461895971004202268031112694312244 | 5.66455.98726.30596.49296.6347 |
黄芪甲苷回归方程：Y＝1.0700X+6.0705；
黄芪甲苷相关系数：γ＝0.9999；
结果表明，黄芪甲苷在0.417～3.336μg范围内线性良好。
7精密度试验 精密吸取对照品溶液(0.1668mg/ml)10μl，注入液相色谱仪，连续进样5次，结果如下：
对照品溶液精密度试验
试验次数 1 2 3 4 5 均值 RSD(％)
峰面积 2031539 2041338 2021467 2015966 2030855 2028233 0.48
结果表明，精密度良好。8供试品稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，分别在0、6、12、24、48小时重复测定1次，记录峰面积积分值，结果如下：
供试品溶液稳定性试验
时间(h) 0 6 12 24 48 均值 RSD(％)
含量(mg/袋) 0.0262 0.0258 0.0254 0.0261 0.0257 0.0258 1.24
结果表明，供试品溶液在48小时内稳定性良好。
9重复性试验 取本品，研细，从中精密称取约45g(共5份)，按正文供试品溶液的制备和测定项下的方法进行处理，分别从中精密吸取20μl，注入液相色谱仪，测定，结果如下：
供试品重复性试验结果
编号 1 2 3 4 5 均值 RSD(％)
含量(mg/袋) 0.0253 0.0266 0.0264 0.0259 0.0255 0.0259 2.16
结果表明，重现性良好。
10加样回收率试验 采用加样回收法，取本品，研细，从中精密称取约23g(共6份)，分置具塞锥形袋中；精密吸取黄芪甲苷对照品水溶液(0.3972mg/ml)1ml(共6份)，分置上述具塞锥形瓶中，加水20ml溶解后用水饱和正丁醇提取，每次40ml，和并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml溶解后通过D101大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长12cm)，依次用水50ml、40％乙醇30ml、70％乙醇80ml洗脱，收集70％乙醇洗脱部分，蒸干，残渣用甲醇5ml溶解，摇匀，滤过，取续滤液即得。精密吸取续滤液20μl，注入液相色谱仪，测定，结果如下：
黄芪甲苷加样回收率试验
| 编号 | 供试品称量(g) | 供试品中纯品量(mg) | 纯品加入量(mg) | 测量值(mg) | 回收率(％) |
| 123456 | 23.548122.669723.085421.462922.034223.1417 | 0.40310.38810.39520.36740.37720.3962 | 0.39720.39720.39720.39720.39720.3972 | 0.7940.7810.7840.7570.7700.777 | 98.5299.0397.94981598.8295.97 |
黄芪甲苷平均回收率＝98.07％；RSD＝1.03％
11三批样品黄芪甲苷含量测定 取样品10批，依法测定，结果如下：
10批中试样品黄芪甲苷含量测定结果
批号 黄芪甲苷含量(mg/片)
1批 0.0243
2批 0.0268
3批 0.0255
4批 0.0271
5批 0.0254
6批 0.0269
7批 0.0251
8批 0.0273
9批 0.0264
10批 0.0267
实验例9胶囊剂中五味子醇甲的含量测定
1仪器与试药
(1)仪器：Agilent1100高效液相色谱仪，chemstationsys工作站；TU-1800SPC紫外分光光度计；AE240电子天平。
(2)试药：五味子醇甲：中国药品生物制品检定所；
2检测波长的选择 精密称取五味子醇甲适量，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得每1ml分别含0.10mg的溶液，在200-400nm波长范围扫描。结果表明：五味子醇甲在250nm处有最大吸收，因此选择250nm作为含量测定的检测波长。
3色谱条件：Dikma ODS(4.6×250mm，5um)；流动相：甲醇-水(65∶35)为流动相；检测波长为250nm；流速：1.0ml/min。
4系统适用性试验
4.1对照品溶液的制备 精密称取五味子醇甲对照品适量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲0.02mg的对照品混合溶液，即得。
4.2供试品溶液的制备 取本品内容物，研细，从中取约1.5g，精密称定，置50ml量袋中，加甲醇适量超声处理(功率250W，频率33KHz)使溶解，取出，放至室温，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液即得。
4.3阴性供试品溶液的制备 称取不含五味子的阴性样品，照供试品溶液的制备方法制备，作为阴性供试品溶液。
分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图。由图可知，供试品中五味子醇甲峰分离良好，与相近峰分离清晰，完全，阴性供试品无干扰。
5线性关系考察
精密称取五味子醇甲对照品10.27mg，置50ml量袋中，加甲醇适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量取2ml，置10ml量袋中，加甲醇定至刻度，摇匀，精密吸取2μl、4μl、6μl、8μl、10μl，注入液相色谱仪，以峰面积为纵坐标，进样量(μg)为横坐标做图，绘制标准曲线，结果如下：
五味子醇甲线性关系考察
编号 五味子醇甲(μg) 峰面积
1 0.08216 121.45
2 0.16432 238.71
3 0.24648 362.58
4 0.32864 487.62
5 0.41080 601.91
回归方程：Y＝1472.5X-0.495；
决定系数：γ＝0.9998；
五味子醇甲在0.08216～0.4108μg范围内线性关系良好。
6精密度试验精密吸取同一份对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，连续测定5次，考察对照品溶液的精密度，结果如下：
对照品精密度试验
试验次数 1 2 3 4 5 均值 RSD(％)
峰面积 305.17 311.24 309.33 315.27 314.62 311.13 1.33
结果表明，对照品溶液精密度良好。
7稳定性试验 取同一份供试品溶液，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，分别在0、6、12、24、48小时进样测定，记录五味子醇甲峰面积，结果如下：
供试品溶液稳定性试验
时间(h) 0 6 12 24 48 均值 RSD(％)
峰面积 320.54 318.25 323.15 325.64 327.21 322.96 1.01
结果表明，对照品溶液稳定性良好。
8重复性试验 取同一批号的本品，取样5份，依法测定，结果如下：
重复性试验
编号 1 2 3 4 5 均值 RSD(％)
五味子醇甲 0.210 0.201 0.212 0.205 0.207 0.207 1.86
(mg/粒)
结果表明，重复性良好。
9加样回收率试验 采用加样回收法，取本品取内容物，研细，从中取约0.75g(共6份)，精密称定，分置50ml量瓶中；精密量取五味子醇甲对照品溶液(0.4272mg/ml)1ml(共6份)，分置上述50ml量瓶中，加甲醇适量超声处理(功率250W，频率33KHz)使溶解，取出，放至室温，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，测定，结果如下：
五味子醇甲加样回收率试验
| 编号 | 供试品称量(g) | 供试品中纯品量(mg) | 纯品加入量(mg) | 测量值(mg) | 回收率(％) |
| 12345 | 0.742660.781850.752340.749210.75059 | 0.39990.42100.40510.40340.4042 | 0.42720.42720.42720.42720.4272 | 0.8110.8300.8200.8270.824 | 96.1995.8497.0399.1298.34 |
五味子醇甲平均回收率＝97.30％；RSD＝1.44％。
结果表明，回收率良好。
10样品含量测定
取本品样品十批，依法测定，结果如下：
十批样品含量测定结果
批号 五味子醇甲含量(mg/粒)
1批 0.2334
2批 0.2291
3批 0.2225
4批 0.2136
5批 0.2278
6批 0.2405
7批 0.2306
8批 0.2229
9批 0.2171
10批 0.2235
具体的实施方式
实施例1片剂中黄芪的薄层色谱鉴别
取待测样品，研细，取粉末适量，加乙醇提取，滤过，滤液蒸干，残渣加0.3％氢氧化钠溶液溶解，滤过，滤液用盐酸调节pH值至5～6，用醋酸乙酯提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取黄芪对照药材、同法制成对照药材溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇＝10∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸汽中熏后置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例2微丸中黄芪的薄层色谱鉴别
取待测样品，研细，取粉末适量，加甲醇提取，滤过，滤液蒸干，残渣加0.05％氢氧化钠钾溶液溶解，滤过，滤液用盐酸调节pH值至3～4，用三氯甲烷提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取黄芪对照药材、同法制成对照药材溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶H薄层板上，以二氯甲烷-甲醇＝3∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例3颗粒剂中黄芪的薄层色谱鉴别
取待测样品适量，加50％乙醇提取，滤过，滤液蒸干，残渣加5％氨溶液溶解，滤过，滤液用盐酸调节pH值至4～5，用三氯甲烷提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取黄芪对照药材、同法制成对照药材溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醇＝10∶0.2为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸汽中熏后置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例4胶囊剂中黄芪甲苷的薄层色谱鉴别方法：
取样品内容物适量，加甲醇提取，提取液加于氧化铝柱，用40％甲醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水溶解后加水饱和正丁醇提取，合并正丁醇液，用水洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，置日光下及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例5胶囊剂中黄芪甲苷的薄层色谱鉴别方法：
取样品内容物适量，加50％甲醇提取，提取液加于氧化铝柱，用70％乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水溶解后加水饱和正丁醇提取，合并正丁醇液，用水洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醇-水＝8∶3∶4的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以20％硫酸甲醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，置日光下及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，应显相同颜色斑点。
实施例6水丸剂中黄芪甲苷的薄层色谱鉴别方法：
取样品，研碎，取粉末适量，加95％乙醇提取，提取液加于氧化铝柱，用20％甲醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水溶解后加水饱和正丁醇提取，合并正丁醇液，用水洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶H薄层板上，以二氯甲烷-甲醇-水＝8∶12∶0.1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例7片剂中黄芪甲苷的液相色谱鉴别方法：
取样品，研细，取粉末适量，加甲醇提取，提取液蒸干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇提取，提取液用0.2％氢氧化钾溶液洗涤，氢氧化钾溶液弃去，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后通过D101大孔吸附树脂柱，依次用水、10％甲醇、40％甲醇洗脱，收集40％甲醇洗脱部分，蒸干，残渣用甲醇溶解，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以黄芪甲苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.05％冰醋酸水溶液＝60∶40为流动相，蒸发光散射检测器检测；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例8控释制剂中黄芪甲苷的液相色谱鉴别方法：
取样品，研细，取适量，加50％乙醇提取，提取液蒸干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇提取，提取液用0.5％氢氧化钠溶液洗涤，氢氧化钠溶液弃去，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后通过D101大孔吸附树脂柱，依次用水、20％乙醇、90％乙醇洗脱，收集90％乙醇洗脱部分，蒸干，残渣用95％乙醇溶解，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以黄芪甲苷对照品的95％乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-3％冰醋酸水溶液＝20∶80为流动相，蒸发光散射检测器检测；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例9滴丸剂中黄芪甲苷的液相色谱鉴别方法：
取样品适量，加甲醇提取，提取液蒸干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇提取，提取液用氨溶液洗涤，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后通过D101大孔吸附树脂柱，依次用水、40％乙醇、70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱部分，蒸干，残渣用甲醇溶解，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以黄芪甲苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水＝32∶68为流动相，蒸发光散射检测器检测；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例10颗粒剂中五味子醇甲的薄层色谱鉴别方法：
取样品适量，加醋酸乙酯提取，提取液适当浓缩，作为供试品溶液；取五味子醇甲对照品，加三氯甲烷制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述对照溶液及供试溶液适量，点于同一硅胶G薄层板，以石油醚(60～90℃)-甲酸乙酯-甲酸＝10∶10∶2的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点清晰；供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例11微丸剂中五味子、五味子甲素的薄层色谱鉴别方法：
取样品，研细，取粉末适量，加醋酸乙酯提取，提取液适当浓缩，作为供试品溶液；取五味子对照药材，参照供试品溶液制法，制备对照药材溶液；取五味子甲素对照品，加三氯甲烷制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述对照溶液及供试溶液适量，点于同一硅胶GF254薄层板，以石油醚(60～90℃)-甲酸乙酯-甲酸＝25∶2∶0.1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例12胶囊剂中五味子甲素的薄层色谱鉴别方法：
取样品内容物剂适量，加三氯甲烷提取，提取液适当浓缩，作为供试品溶液；取五味子甲素对照品，加三氯甲烷制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述对照溶液及供试溶液适量，点于同一硅胶GF254薄层板，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸＝15∶5∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实验例13散剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的液相色谱鉴别方法：
取样品适量，以甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水＝65∶35为流动相，检测波长为250nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例14微囊剂中五味子醇甲的液相色谱鉴别方法：
取样品适量，以95％乙醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以五味子醇甲对照品的95％乙醇溶液为对照，采用液相色谱法试验，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水＝40∶50为流动相，检测波长为200nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例15软胶囊剂中五味子甲素、五味子乙素的液相色谱鉴别方法：
取样品内容物适量，以9甲醇乙醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以五味子甲素、五味子乙素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法试验，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水＝90∶10为流动相，检测波长为400nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例16分散片剂中格列本脲的薄层色谱鉴别方法：
取样品，研细，取粉末适量，加三氯甲烷提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；另取格列本脲对照品，加三氯甲烷制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-环己烷-乙醇-冰醋酸＝8∶13∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例17缓释制剂中格列本脲的薄层色谱鉴别方法：
取样品，研细，取粉末适量，加醋酸乙酯提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；另取格列本脲对照品，加醋酸乙酯制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-正己烷-乙醇-冰醋酸＝12∶9∶0.3∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例18凝胶剂中格列本脲的薄层色谱鉴别方法：
取样品，加二氯甲烷提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；另取格列本脲对照品，加二氯甲烷制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-环己烷-甲醇-甲酸＝4∶17∶3∶3为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
实施例19胶囊剂中格列本脲的液相色谱鉴别方法：
取样品内容物适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以格列本脲对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇-0.05mol/L磷酸二氢胺水溶液(磷酸调节pH＝3.5)＝65∶35，检测波长为230nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，具与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。
实施例20口服液中格列本脲的液相色谱鉴别方法：
取待测样品，加95％乙醇稀释至适当浓度，作为供试品溶液；以格列本脲对照品的95％乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇-3％甲酸水溶液＝45∶55，检测波长为200nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，具与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。
实施例21微丸中格列本脲的液相色谱鉴别方法：
取样品，研细，取粉末适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以格列本脲对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为乙腈-0.005mol/L磷酸二氢钾溶液＝80∶20，检测波长为400nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，具与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。
实施例22片剂中地黄药材、梓醇的薄层色谱鉴别方法：
取样品，研细，取粉末适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取地黄对照药材，参照供试品溶液的制法制成对照药材溶液；取梓醇对照品，加甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水＝14∶6∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例23胶囊剂中梓醇的薄层色谱鉴别方法：
取样品，研细，取粉末适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取地黄对照药材，参照供试品溶液的制法制成对照药材溶液；取梓醇对照品，加甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶H薄层板上，以二氯甲烷-乙醇-水＝10∶3∶0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例24微囊剂中梓醇的薄层色谱鉴别方法：
取样品适量，加50％乙醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取地黄对照药材，参照供试品溶液的制法制成对照药材溶液；取梓醇对照品，加甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶H薄层板上，以二氯甲烷-甲醇-水＝18∶3∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例25微丸剂中梓醇的液相色谱鉴别方法：
取样品，研细，取粉末适量，加甲醇提取，提取液浓缩至近干，残渣用流动相溶解，作为供试品溶液；以梓醇对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水＝1∶99为流动相，检测波长为210nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例26分散片剂中梓醇的液相色谱鉴别方法：
取样品，研细，取粉末适量，加50％甲醇提取，提取液浓缩至近干，残渣用流动相溶解，作为供试品溶液；以梓醇对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水＝10∶90为流动相，检测波长为200nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例27分散片剂中梓醇的液相色谱鉴别方法：
取样品，研细，取粉末适量，加95％乙醇提取，提取液浓缩至近干，残渣95％乙醇溶解，作为供试品溶液；以梓醇对照品的95％乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水＝0.5∶99.5为流动相，检测波长为400nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例28胶囊剂中天花粉、瓜氨酸的薄层色谱鉴别方法：
取样品内容物适量，加乙醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取天花粉对照药材，参照供试品溶液制法制成对照药材溶液；取瓜氨酸，加甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水＝8∶2∶2∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例29颗粒剂中瓜氨酸的薄层色谱鉴别方法：
取本品内容物，加50％乙醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取天花粉对照药材，参照供试品溶液制法制成对照药材溶液；取瓜氨酸，加50％乙醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-甲醇-冰醋酸-水＝4∶0.5∶0.5∶5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例30片剂中瓜氨酸的薄层色谱鉴别方法：
取本品内容物，加乙醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取天花粉对照药材，参照供试品溶液制法制成对照药材溶液；取瓜氨酸，加乙醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶H薄层板上，以正丁醇-甲醇-甲酸-水＝12∶4∶0.5∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例31颗粒剂中葛根、葛根素的一种或两种的薄层色谱鉴别方法：
取样品适量，加乙醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取葛根对照药材，参照供试品溶液制法制成对照药材溶液；取葛根素对照品，加乙醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙醇-甲酸乙酯-水＝1∶5∶2∶0.1为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例32微丸剂中葛根、葛根素的一种或两种的薄层色谱鉴别方法：
取样品，研细，取粉末适量，加50％甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取葛根对照药材，参照供试品溶液制法制成对照药材溶液；取葛根素对照品，加50％甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇-醋酸乙酯-水＝5∶1∶6∶0.1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例33胶囊剂中葛根、葛根素的一种或两种的薄层色谱鉴别方法：
取样品内容物适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取葛根对照药材，参照供试品溶液制法制成对照药材溶液；取葛根素对照品，加甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-醋酸乙酯-水＝2.5∶3∶4∶0.5为展开剂，展开，展距5cm，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例34微囊剂中葛根素的液相色谱鉴别方法：
取样品适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以葛根素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-1％冰醋酸水溶液＝25∶75为流动相，检测波长为250nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例35分散片剂中葛根素的液相色谱鉴别方法：
取样品，研细，取粉末适量，加50％乙醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以葛根素对照品的50％乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.3mol/L磷酸二氢钠溶液＝10∶90为流动相，检测波长为200nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例36散剂中葛根素的液相色谱鉴别方法：
取样品适量，加乙醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以葛根素对照品的乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.001％磷酸水溶液＝35∶65为流动相，检测波长为400nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例37片剂中黄芪甲苷的含量测定方法：
取样品，研细，取粉末适量，精密称定，加甲醇提取，提取液蒸干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇提取，提取液用氨溶液洗涤，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后通过D101大孔吸附树脂柱，依次用水、40％乙醇、70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱部分，蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以黄芪甲苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水＝32∶68为流动相，蒸发光散射检测器检测；分别吸取上述对照溶液5μ、10μl，供试溶液10μl，注入液相色谱仪；以外标两点法对数方程进行计算，制剂每日用剂量含黄芪甲苷的限度不得少于0.20mg。
实施例38分散片中黄芪甲苷的含量测定方法：
取样品，研细，取粉末适量，精密称定，加50％甲醇提取，提取液蒸干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇提取，提取液用氨溶液洗涤，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后通过D101大孔吸附树脂柱，依次用水、20％乙醇、50％乙醇洗脱，收集50％乙醇洗脱部分，蒸干，残渣用水溶解并定容至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以黄芪甲苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-3％冰醋酸水溶液＝20∶80为流动相，蒸发光散射检测器检测；分别吸取上述对照溶液8μ、16μl，供试溶液10μl，注入液相色谱仪；以外标两点法对数方程进行计算，制剂每日用剂量含黄芪甲苷的限度不得少于0.10mg。
实施例39微丸中黄芪甲苷的含量测定方法：
取样品，研细，取粉末适量，精密称定，加乙醇提取，提取液蒸干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇提取，提取液用氨溶液洗涤，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后通过D101大孔吸附树脂柱，依次用水、20％乙醇、50％乙醇洗脱，收集50％乙醇洗脱部分，蒸干，残渣用95％乙醇溶解并定容至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以黄芪甲苷对照品的95％乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.05％甲酸水溶液＝60∶40为流动相，蒸发光散射检测器检测；分别吸取上述对照溶液10μ、20μl，供试溶液10μl，注入液相色谱仪；以外标两点法对数方程进行计算，制剂每日用剂量含黄芪甲苷的限度不得少于0.10mg。
实施例40颗粒剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量测定方法：
取样品适量，精密称定，以甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水＝40∶50为流动相，检测波长为400nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液各10μl，注入液相色谱仪；以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含量限度应为以下几项：
(1)含五味子醇甲不得少于2.0mg；
(2)含五味子甲素不得少于0.20mg；
(3)含五味子乙素不得少于0.60mg。
实施例41胶囊剂中五味子醇甲的含量测定方法：
取样品内容物适量，精密称定，以乙提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以五味子醇甲对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水＝65∶35为流动相，检测波长为250nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液各10μl，注入液相色谱仪；以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含五味子醇甲不得少于2.0mg。
实施例42片剂中五味子醇甲的含量测定方法：
取样品，研细，取粉末适量，精密称定，以乙提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以五味子醇甲对照品的乙醇溶液为对照，采用液相色谱法试验，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水＝90∶10为流动相，检测波长为200nm；分别吸取上述供试溶液10μl、对照溶液20μl，注入液相色谱仪；以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含五味子醇甲不得少于1.0mg。
实施例43微丸剂中格列本脲的含量测定方法：
取样品，研细，取粉末适量，精密称定，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以格列本脲对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇-0.05mol/L磷酸二氢胺水溶液(磷酸调节pH＝3.5)＝65∶35，检测波长为230nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含格列本脲应为3.3～8.3mg。
实施例44分散片剂中格列本脲的含量测定方法：
取样品，研细，取粉末适量，精密称定，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以格列本脲对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为乙腈-0.005mol/L磷酸二氢钠水溶液＝45∶55，检测波长为400nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液各5μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含格列本脲应为3.0～9.0mg。
实施例45颗粒剂中格列本脲的含量测定方法：
取样品适量，精密称定，加乙醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以格列本脲对照品的乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇-3％冰醋酸＝80∶20，检测波长为200nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，以标准曲线法进行计算，制剂每日用剂量含格列本脲应为3.0～9.0mg。
实施例46胶囊剂中格列本脲的含量测定方法：
取样品内容适量，精密称定，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以格列本脲对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇-0.05mol/L磷酸二氢胺水溶液(磷酸调节pH＝3.5)＝65∶35，检测波长为230nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含格列本脲应为3.3～8.3mg。
实施例47胶囊剂中葛根素的液相色谱含量测定方法：
取样品内容物适量，精密称定，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以葛根素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-1％冰醋酸水溶液＝25∶75为流动相，检测波长为250nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含葛根素不得少于10.0mg。
实施例48片剂中葛根素的液相色谱含量测定方法：
取样品，研细，取粉末适量，精密称定，加50％甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以葛根素对照品的50％甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.001％磷酸水溶液＝10∶90为流动相，检测波长为400nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含葛根素不得少于6.0mg。
实施例49颗粒剂中葛根素的液相色谱含量测定方法：
取样品内容物适量，精密称定，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以葛根素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.3mol/L磷酸二氢钠溶液＝45∶55为流动相，检测波长为200nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含葛根素不得少于6.0mg。
实施例50微丸剂中葛根素的液相色谱含量测定方法：
取样品，研细，取粉末适量，精密称定，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以葛根素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-1％冰醋酸水溶液＝25∶75为流动相，检测波长为250nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含葛根素不得少于15.0mg。
实施例51控释制剂中梓醇的液相色谱含量测定方法：
取样品，研细，取粉末适量，精密称定，加50％乙醇提取，提取液浓缩至近干，残渣用流动相溶解，作为供试品溶液；以梓醇对照品的50％乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水＝10∶90为流动相，检测波长为200nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液各20μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含梓醇不得少于1.0mg。
实施例52胶囊中梓醇的液相色谱含量测定方法：
取样品内容物适量，加甲醇提取，精密称定，提取液浓缩至近干，残渣用流动相溶解，作为供试品溶液；以梓醇对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水＝1∶99为流动相，检测波长为210nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液各5μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含梓醇不得少于3.0mg。
实施例53颗粒剂中梓醇的液相色谱含量测定方法：
取样品适量，精密称定，加甲醇提取，提取液浓缩至近干，残渣用流动相溶解，作为供试品溶液；以梓醇对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水＝0.5∶99.5为流动相，检测波长为400nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含梓醇不得少于1.5mg。
Claims (5)
1、一种治疗糖尿病的中药复方制剂的质量控制方法，其特征在于：该方法包括以下全部或部分内容：
(1)葛根药材、地黄药材、天花粉药材、黄芪药材、五味子药材、格列本脲、葛根素、梓醇、瓜氨酸、黄芪甲苷、五味子醇甲、五味子甲素中全部或部分的鉴别测试方法；
(2)格列本脲、葛根素、梓醇、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素、黄芪甲苷中全部或部分成分的含量测定方法。
2、按照权利要求1所述的治疗糖尿病的中药复方制剂的质量控制方法，其特征在于：所述中药复方制剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容：
a、治疗糖尿病的中药复方制剂中黄芪的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，提取液蒸干，残渣加碱性溶液溶解，碱液加盐酸调节至酸性，用醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷提取，提取液调整浓度，制得供试品溶液；另取黄芪对照药材，参照供试品溶液制法，制成对照药材溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷或二氯甲烷-甲醇或乙醇或正丁醇＝3～10∶0.2～1为展开剂，展开，取出，晾干，显色，检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
b、治疗糖尿病的中药复方制剂中黄芪甲苷的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，提取液加于氧化铝柱，用20～60％甲醇或30～70％乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水溶解后加水饱和正丁醇提取，合并正丁醇液，用水适量洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加50～100％甲醇或50～100％乙醇溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷或二氯甲烷-甲醇或乙醇-水＝8～20∶3～12∶0.1～4的溶液或分层后的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含硫酸的显色剂，加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，应显相同颜色斑点；
c、治疗糖尿病的中药复方制剂中黄芪甲苷的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，提取液蒸干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇提取，提取液用碱性溶液洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后通过D101大孔吸附树脂柱，依次用水、不同浓度的甲醇或乙醇洗脱，收集40～80％甲醇或50～90％乙醇洗脱部分，蒸干，残渣用甲醇或乙醇或水中的一种或几种溶解，制得供试品溶液；以黄芪甲苷对照品，制成对照品溶液，采用液相色谱法，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇或乙腈-水或0.05％～3％冰醋酸水溶液或0.05％～3％甲酸水溶液＝20～60∶80～40为流动相，蒸发光散射检测器检测；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
d、治疗糖尿病的中药复方制剂中五味子、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的薄层色谱鉴别方法：
取待测生中药复方制剂适量，加三氯甲烷或二氯甲烷或醋酸乙酯提取，提取液适当浓缩，作为供试品溶液；取五味子对照药材，参照供试品溶液制法，制备对照药材溶液；取五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品中的一种或几种，制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述对照溶液中的一种或几种、及供试溶液适量，点于同一硅胶薄层板，以石油醚或环己烷或正己烷-甲酸乙酯或醋酸乙酯或醋酸乙酯-甲酸或冰醋酸＝10～25∶2～10∶0.1～2的溶液或上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
e、治疗糖尿病的中药复方制剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇或乙醇提取，并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中的一种或几种，制成对照品溶液，采用液相色谱法试验，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇或乙腈-水＝40～90∶50～10为流动相，检测波长为200～400nm之间的一个；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
f、治疗糖尿病的中药复方制剂中格列本脲的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加三氯甲烷或二氯甲烷或醋酸乙酯提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；另取格列本脲对照品，制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷或二氯甲烷-环己烷或正己烷-甲醇或乙醇-甲酸或冰醋酸＝4～12∶9～17∶0.3～3∶0.3～3为展开剂，展开，取出，晾干，检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
g、治疗糖尿病的中药复方制剂中格列本脲的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇或乙醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取格列本脲对照品，制成对照品溶液，采用液相色谱法，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇或乙腈-水或0.05％～3％冰醋酸水溶液或0.05％～3％甲酸水溶液或0.001％～1％磷酸水溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢钠溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢钾溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢胺溶液＝45～80∶55～20为流动相，检测波长为200～400nm中的一个；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，具与对照品色谱保留时间一致的色谱峰；
h、治疗糖尿病的中药复方制剂中地黄、梓醇的一种或两种的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取地黄对照药材，参照供试品溶液的制法制成对照药材溶液；取梓醇对照品，制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷或二氯甲烷-甲醇或乙醇-水＝10～18∶3～10∶0.2～3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含茴香醛的显色剂，加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
i、治疗糖尿病的中药复方制剂中梓醇的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，提取液浓缩至近干，残渣用流动相或50～100％甲醇或50～100％乙醇溶解，作为供试品溶液；以梓醇对照品制成对照品溶液，采用液相色谱法，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈或甲醇-水＝0.5～10∶99.5～90为流动相，检测波长为200～400nm中的一个；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
j、治疗糖尿病的中药复方制剂中天花粉、瓜氨酸的一种或两种的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取天花粉对照药材，参照供试品溶液制法制成对照药材溶液；取瓜氨酸，制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶薄层板上，以正丁醇-无水乙醇或甲醇-甲酸或冰醋酸-水＝4～12∶0.5～4∶0.5～4∶1～5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含茚三酮的显色剂，加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
k、治疗糖尿病的中药复方制剂中葛根、葛根素的一种或两种的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取葛根对照药材，参照供试品溶液制法制成对照药材溶液；取葛根素对照品，制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷或二氯甲烷-甲醇或乙醇-醋酸乙酯或甲酸乙酯-水＝1～5∶1～5∶2～6∶0.1～2为展开剂，展开，取出，晾干，检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
l、治疗糖尿病的中药复方制剂中葛根素的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取葛根素对照品，制成对照品溶液；采用液相色谱法，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇或乙腈-水或0.05％～3％冰醋酸水溶液或0.05％～3％甲酸水溶液或0.001％～1％磷酸水溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢钠溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢钾溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢胺溶液＝10～35∶90～65为流动相，检测波长为200～400nm中的一个；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
3、按照权利要求2所述的治疗糖尿病的中药复方制剂的质量控制方法，其特征在于：所述中药复方制剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容：
a、治疗糖尿病的中药复方制剂中黄芪的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加乙醇提取，滤过，滤液蒸干，残渣加0.3％氢氧化钠溶液溶解，滤过，滤液用盐酸调节pH值至5～6，用醋酸乙酯提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取黄芪对照药材、同法制成对照药材溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇＝10∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸汽中熏后置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
b、治疗糖尿病的中药复方制剂中黄芪甲苷的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取，提取液加于氧化铝柱，用40％甲醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水溶解后加水饱和正丁醇提取，合并正丁醇液，用水洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，置日光下及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，应显相同颜色斑点；
c、治疗糖尿病的中药复方制剂中黄芪甲苷的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取，提取液蒸干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇提取，提取液用氨溶液洗涤，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后通过D101大孔吸附树脂柱，依次用水、40％乙醇或70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱部分，蒸干，残渣用甲醇溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以黄芪甲苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水＝32∶68为流动相，蒸发光散射检测器检测；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
d、治疗糖尿病的中药复方制剂中五味子、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的薄层色谱鉴别方法：
取待测生中药复方制剂适量，加三氯甲烷提取，提取液适当浓缩，作为供试品溶液；取五味子对照药材，参照供试品溶液制法，制备对照药材溶液；取五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品中的一种或几种，加三氯甲烷制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述对照溶液中的一种或几种、及供试溶液适量，点于同一硅胶GF254薄层板，以30～60℃的石油醚-甲酸乙酯-甲酸＝15∶5∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
e、治疗糖尿病的中药复方制剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，以甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中的一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水＝65∶35为流动相，检测波长为250nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
f、治疗糖尿病的中药复方制剂中格列本脲的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加三氯甲烷提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；另取格列本脲对照品，加三氯甲烷制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-环己烷-乙醇-冰醋酸＝8∶13∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
g、治疗糖尿病的中药复方制剂中格列本脲的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以格列本脲对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇-用磷酸调节pH＝3.5的0.05mol/L磷酸二氢胺水溶液＝65∶35，检测波长为230nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，具与对照品色谱保留时间一致的色谱峰；
h、治疗糖尿病的中药复方制剂中地黄药材、梓醇中一种或两种的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取地黄对照药材，参照供试品溶液的制法制成对照药材溶液；取梓醇对照品，加甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水＝14∶6∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
i、治疗糖尿病的中药复方制剂中梓醇的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取，提取液浓缩至近干，残渣用流动相溶解，作为供试品溶液；以梓醇对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水＝1∶99为流动相，检测波长为210nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
j、治疗糖尿病的中药复方制剂中天花粉、瓜氨酸的一种或两种的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加乙醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取天花粉对照药材，参照供试品溶液制法制成对照药材溶液；取瓜氨酸，加甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水＝8∶2∶2∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
k、治疗糖尿病的中药复方制剂中葛根、葛根素的一种或两种的薄层色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取葛根对照药材，参照供试品溶液制法制成对照药材溶液；取葛根素对照品，加甲醇制成对照品溶液；采用薄层色谱法试验，分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-醋酸乙酯-水＝2.5∶3∶4∶0.5为展开剂，展开，展距5cm，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
l、治疗糖尿病的中药复方制剂中葛根素的液相色谱鉴别方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以葛根素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-1％冰醋酸水溶液＝25∶75为流动相，检测波长为250nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
4、按照权利要求1所述的治疗糖尿病的中药复方制剂的质量控制方法，其特征在于：所述中药复方制剂的含量测定方法应包括以下全部或部分内容：
a、治疗糖尿病的中药复方制剂中黄芪甲苷的液相色谱含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，精密称定或量取，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，提取液蒸干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇提取，提取液用碱性溶液洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后通过D101大孔吸附树脂柱，依次用水、不同浓度的甲醇或乙醇洗脱，收集40～80％甲醇或50～90％乙醇洗脱部分，蒸干，残渣用甲醇或乙醇或水中的一种或种溶解并定容至适当浓度，制得供试品溶液；以黄芪甲苷对照品，制成对照品溶液，采用液相色谱法，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇或乙腈-水或0.05％～3％冰醋酸水溶液或0.05％～3％甲酸水溶液＝20～60∶80～40为流动相，蒸发光散射检测器检测；分别精密吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，供试品色谱中，与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；以外标两点法对数方程进行计算，制剂每日用剂量中含黄芪甲苷的限度不得少于0.10mg；
b、治疗糖尿病的中药复方制剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，精密称定或量取，加甲醇或乙醇提取，并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中的一种或几种，制成对照品溶液，采用液相色谱法测定，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇或乙腈-水＝40～90∶50～10为流动相，检测波长为200～400nm之间的一个；分别精密吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，以外标一点法或标准曲线法进行计算，制剂每日用剂量中含量限度应为以下一项或几项：
(1)含五味子醇甲不得少于1.0mg；
(2)含五味子甲素不得少于0.10mg；
(3)含五味子乙素不得少于0.30mg；
c、治疗糖尿病的中药复方制剂中格列本脲的含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，精密称定或量取，加甲醇或乙醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取格列本脲对照品，制成对照品溶液，采用液相色谱法，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇或乙腈-水或0.05％～3％冰醋酸水溶液或0.05％～3％甲酸水溶液或0.001％～1％磷酸水溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢钠溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢钾溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢胺溶液＝45～80∶55～20为流动相，检测波长为200～400nm中的一个；分别精密吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，以外标一点法或标准曲线法进行计算，制剂每日用剂量含格列本脲应为3.0～9.0mg；
d、治疗糖尿病的中药复方制剂中葛根素的液相色谱含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，精密称定或量取，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，并调整至适当浓度，作为供试品溶液；取葛根素对照品，制成对照品溶液；采用液相色谱法，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇或乙腈-水或0.05％～3％冰醋酸水溶液或0.05％～3％甲酸水溶液或0.001％～1％磷酸水溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢钠溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢钾溶液或0.005mol/L～0.3mol/L磷酸二氢胺溶液＝10～45∶90～55为流动相，检测波长为200～400nm中的一个；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，以外标一点法或标准曲线法进行计算，制剂每日用剂量含葛根素不得少于3.0mg；
e、治疗糖尿病的中药复方制剂中梓醇的液相色谱含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，精密称定或量取，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，提取液浓缩至近干，残渣用流动相或50～100％甲醇或50～100％乙醇溶解，作为供试品溶液；以梓醇对照品制成对照品溶液，采用液相色谱法，色谱柱用烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈或甲醇-水＝0.5～10∶99.5～90为流动相，检测波长为200～400nm中的一个；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，以外标一点法或标准曲线法进行计算，制剂每日用剂量含梓醇不得少于1.5mg。
5、按照权利要求4所述的治疗糖尿病的中药复方制剂的质量控制方法，其特征在于：所述中药复方制剂的含量测定方法包括以下全部或部分内容：
a、治疗糖尿病的中药复方制剂中黄芪甲苷的含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取，提取液蒸干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇提取，提取液用氨溶液洗涤，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后通过D101大孔吸附树脂柱，依次用水、40％乙醇、70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱部分，蒸干，残渣用甲醇溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以黄芪甲苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水＝32∶68为流动相，蒸发光散射检测器检测；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪；以外标两点法对数方程进行计算，制剂每日用剂量含黄芪甲苷的限度不得少于0.20mg；
b、治疗糖尿病的中药复方制剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，以甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中的一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水＝65∶35为流动相，检测波长为250nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪；以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含量限度应为以下一项或几项：
(1)含五味子醇甲不得少于2.0mg；
(2)含五味子甲素不得少于0.20mg；
(3)含五味子乙素不得少于0.60mg；
c、治疗糖尿病的中药复方制剂中格列本脲的含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以格列本脲对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇-用磷酸调节pH＝3.5的0.05mol/L磷酸二氢胺水溶液＝65∶35，检测波长为230nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含格列本脲应为3.3～8.3mg；
d、治疗糖尿病的中药复方制剂中葛根素的液相色谱含量测定方法：
取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取并调整至适当浓度，作为供试品溶液；以葛根素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-1％冰醋酸水溶液＝25∶75为流动相，检测波长为250nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含葛根素不得少于6.0mg；
e、治疗糖尿病的中药复方制剂中梓醇的液相色谱含量测定方法：取待测中药复方制剂适量，加甲醇提取，提取液浓缩至近干，残渣用流动相溶解，作为供试品溶液；以梓醇对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水＝1∶99为流动相，检测波长为210nm；分别吸取上述供试溶液与对照溶液适量，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，制剂每日用剂量含梓醇不得少于3.0mg。
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