CN1913925A - 含有两组不同聚合物－活性剂缀合物的组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了含有两组不同聚合物－活性剂缀合物的组合物，其中与每组缀合物相关的聚合物重均分子量是不同的；还提供了制备此类组合物的方法以及施用此类组合物的方法。

Description

含有两组不同聚合物-活性剂缀合物的组合物
                       本发明的领域
[0001]本发明一般地涉及含有两组聚合物-活性剂缀合物的组合物，其适合于在给患者施用时提供期望的药物动力学特性。此外，本发明还涉及制备该组合物、含有该组合物的药物制剂以及类似物的方法。
                       本发明的背景
[0002]科学家和临床工作人员在他们试图将活性剂研制成适合向患者给药的形式中面临许多挑战。例如，多肽类活性剂往往是通过注射方式给药而不是口服。用这种方式，该多肽就不必接触胃的蛋白水解环境而被直接引入体内循环系统。
[0003]然而，注射多肽也有几个缺点。例如，很多种多肽的半衰期较短，故需要反复注射，这往往造成不便和痛苦。而且，某些多肽可能会引发一种或多种免疫反应，其结果是可能会激活患者体内的免疫系统以降解多肽。因此，即使是通过注射方式给予这些药剂，多肽之类的活性剂的给药往往也是成问题的。
[0004]在解决以注射方式给予活性剂的问题方面，获得了某些成功。例如，使活性剂与水溶性聚合物缀合而产生具有降低的免疫原性和抗原性的聚合物-活性剂缀合物。此外，由于肾脏清除率降低和/或体循环系统内酶降解减少，这些聚合物-活性剂缀合物与它们的非缀合的相对物相比，其半衰期往往大大地延长。由于其半衰期较长，所以聚合物-活性剂缀合物所需用药的次数不太频繁，其依次减少了令人痛苦的注射和不便的就医的总次数。而且，当微溶性的活性剂与一种水溶性聚合物缀合后，其水溶性显著增加。
[0005]由于聚乙二醇经证实是安全的并经FDA批准可供局部使用和内服，它已被用于与活性剂进行缀合。当活性剂与聚乙二醇或“PEG”的聚合物缀合时，该缀合的活性剂在习惯上被称为“聚乙二醇化”。聚乙二醇化活性剂例如PEGASYS®聚乙二醇化干扰素α-2a(Hoffmann-La Roche，Nutley，NJ)、PEG-INTRON®聚乙二醇化干扰素α-2b(Schering Corp.，Kennilworth，NJ)以及NEULASTATMPEG-filgrastim(Amgen Inc.，Thousand Oaks，CA)的商业化成功显示，缀合形式活性剂的给药比非缀合形式活性剂的给药具有显著的优越性。与小分子例如二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(Zalipsky(1993)Bioconjug.Chem.4(4)：296-299)和氟尿嘧啶(Ouchi等(1992)DrugDes.Discov.9(1)：93-105)的缀合物也已经被制备。
[0006]尽管取得了这些成功，但要提供具有药理活性又在迅速起效和持久作用之间具有适当平衡的含缀合物的药物制剂，往往仍然是富有挑战性的。例如，PEGASYS®牌聚乙二醇化干扰素α-2a与这种干扰素的天然形式比较，仅具有约7％的体外活性。虽然生成的聚乙二醇化干扰素产品因其更长的半衰期而弥补了活性的下降，但并非所有药物产品都将具有仅产生持久体内活性的柔性；许多药物产品除了产生持久的体内活性以外，还将理想地产生相对迅速的起效。因此，通过提供含缀合物的组合物，本发明寻求解决本技术领域内的这些需求和其它需求，使得给患者施用该组合物时，产生较迅速的起效，然后产生较持久的活性。
                       本发明的概述
[0007]相应地，本发明提供了一种组合物，其含有：第一组聚合物-活性剂缀合物，每种聚合物-活性剂缀合物都含具有一定重均分子量的一种或多种聚合物；以及第二组聚合物-活性剂缀合物，每种聚合物-活性剂缀合物也都含具有一定重均分子量的一种或多种聚合物，其中，第一组中一种或多种聚合物的重均分子量不同于第二组中一种或多种聚合物的重均分子量。
[0008]本发明也提供了这样一种组合物，其中第一组中每种聚合物的重均分子量范围为约100道尔顿至小于120,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为大于100道尔顿至约120,000道尔顿，其中，第一组中一种或多种聚合物的重均分子量不同于第二组中一种或多种聚合物的重均分子量。
[0009]此外，本发明还提供了这样一种组合物，其中第一组中每种聚合物的重均分子量范围为约100道尔顿至小于20,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为大于100道尔顿至约120,000道尔顿，其中，第一组中一种或多种聚合物的重均分子量不同于第二组中一种或多种聚合物的重均分子量。
[0010]本发明还进一步提供了这样一种组合物，第一组中每种聚合物的重均分子量范围为约100道尔顿至小于20,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为大于20,000道尔顿至约100,000道尔顿。
[0011]本发明另外还提供了这样一种组合物，其中第一组和第二组的聚合物重均分子量之间的绝对差为约500至约100,000。
[0012]此外，本发明还提供了这样一种组合物，其中第一组和第二组的聚合物重均分子量之间的绝对差为约2,000至约100,000。
[0013]本发明也提供了这样一种组合物，其中，第一组和第二组中每种聚合物都是聚(乙二醇)。
[0014]此外，本发明还提供了一种进一步含有药学上可接受的赋形剂的组合物，从而提供了一种药物制剂。
[0015]而且，本发明提供了一种制备组合物的方法，其中该方法包括以下步骤：(i)提供第一组聚合物-活性剂缀合物；(ii)提供第二组聚合物-活性剂缀合物；以及(iii)将第一组和第二组聚合物-活性剂缀合物合并，从而形成第一组和第二组聚合物-活性剂缀合物的混合物，其中第一组缀合物和第二组缀合物不相同。
[0016]本发明更进一步提供了一种引起活性最初开始和活性延迟开始的方法，其中该方法包括以下步骤：(i)给患者施用第一组聚合物-活性剂缀合物，每种聚合物-活性剂缀合物均含有一种或多种具有一定重均分子量的聚合物；以及(ii)给患者施用第二组聚合物-活性剂缀合物，每种聚合物-活性剂缀合物均含有一种或多种具有一定重均分子量的聚合物，该重均分子量大于第一组中一种或多种聚合物的重均分子量。
[0017]本发明的其它特点和新颖特点将在随后的叙述中加以阐述，而且其部分特点对于那些熟悉本技术的人士而言，在阅读以下内容后将变得显而易见，或者可通过实施本发明而得以掌握。
[0018]在本发明的一种实施方案中，提供了一种含有两组聚合物-活性剂缀合物的组合物。在第一组中，该缀合物由各具有基本上相同重均分子量的聚合物制成。相似地，第二组中的缀合物也由各具有基本上相同重均分子量的聚合物制成，但该重均分子量不同于第一组中聚合物的重均分子量。
[0019]任一指定组的缀合物均可含有单连接的缀合物(即单一聚合物与单一活性剂连接，或“1-mer”)，以及多重连接的缀合物，例如两种聚合物分别与单一活性剂连接(或“2-mer”)，三种聚合物分别与单一活性剂连接(或“3-mer”)，等等。本说明也包括单一聚合物与两种活性剂连接的缀合物。单连接的和多重连接的缀合物的组合也包括在内。虽然任何聚合物均可用于形成缀合物，但优选聚合物是聚(乙二醇)。此外，将聚合物与活性剂连接的共轭键，既可以是一种稳定的键也可以是一种可解离的(例如可水解的)键。此外，该组合物中每一种缀合物都可含有稳定的键或可解离的键，或者该组合物可由一种混合物组成，其中该混合物中的某些缀合物含有稳定的键而组合物中的其它缀合物含有可解离的键。
[0020]在本发明的另一种实施方案中，提供了一种制备组合物的方法。虽然有许多方法可用于制备本文所述的组合物，但典型的方法包括以下步骤：(i)提供第一组聚合物-活性剂缀合物；(ii)提供第二组聚合物-活性剂缀合物；以及(iii)将第一组和第二组聚合物-活性剂缀合物合并，从而形成第一组和第二组聚合物-活性剂缀合物的混合物，其中第一组和第二组互不相同。无论使用何种方法制备该组合物，优选的是在上述合并步骤之后采用一个混合步骤，以便提供基本上均匀的组合物。有利的是，可将药学上可接受的赋形剂加入该组合物，从而形成药物组合物。
[0021]正如即将在下文中进一步详细解释的，现在所述组合物的一个优点是它们在施用于患者时提供理想药物动力学特性的能力。因此，提供了一种引起活性最初开始和活性延迟开始的方法，其中该方法包括以下步骤：(i)给患者施用第一组聚合物-活性剂缀合物，每种聚合物-活性剂缀合物均含有一种或多种具有一定重均分子量的聚合物；以及(ii)给患者施用第二组聚合物-活性剂缀合物，每种聚合物-活性剂缀合物也均含有一种或多种具有一定重均分子量的聚合物，该重均分子量大于第一组中一种或多种聚合物的重均分子量。通常，尽管并非必须如此，给药是可以同时进行的，例如，当第一组和第二组缀合物存在于单一组合物中时，将该组合物给患者施用。
                      附图的简要说明
[0022]图1和2是当给患者施用实施例1中所述的缀合物和混合物时，网状细胞计数和血红蛋白水平的近似和预期结果的图示。
                       本发明的详述
[0023]在详细叙述本发明之前，应当理解，本发明不限于特定的聚合物、合成技术、活性剂，等等，因为这些都可以改变。
[0024]必须注意，如本说明书和权利要求中所使用的，单数的“某”、“某个”和“该”包括复数形式的事物，除非上下文中另行明确规定。因此，例如，“某聚合物”的提法包括某种单一聚合物以及两种或更多种相同或不同的聚合物，“某缀合物”的提法是指单一缀合物以及两种或更多种相同或不同的缀合物，“某赋形剂”的提法包括某种单一赋形剂以及两种或更多种相同或不同的赋形剂，等等。
[0025]在叙述和要求保护本发明时，将按照下述定义使用以下术语。
[0026]如本文所用的“PEG”、“聚乙二醇”以及“聚(乙二醇)”意为包括任何水溶性聚(环氧乙烷)。通常，按照本发明所使用的PEG含有以下结构“-O(CH2CH2O)m-”，其中m为2至4000。如本文所用，PEG也包括“-CH2CH2-O(CH2CH2O)m-CH2CH2-”以及“-(CH2CH2O)m-”，取决于末端的氧是否被置换。当PEG进一步含有间隔部分(下面将进一步详述)时，含有间隔部分的原子，当与水溶性聚合物链段以共价键连接时，不会导致氧-氧键(即“-O-O-”或过氧化物键)的形成。在本说明书和权利要求中，应记住“PEG”这一术语包括具有各种各样末端或“封端”基团的结构。“PEG”这一术语还意为一种含有多数(即大于50％)-CH2CH2O-单体亚单位的聚合物。至于具体形式，PEG可具有任何不同的分子量，以及任何结构或几何形状，例如“支化的”、“线性的”、“分叉的”、“多官能的”等等，其将在下文中详述。
[0027]“封端的”或“末端封闭的”这些术语在本文中可互换使用，以说明具有一个封端部分的聚合物的末端或终端。通常，尽管并非必须如此，封端部分含有羟基或C1-20烷氧基。因此，封端部分的实例包括烷氧基(例如甲氧基、乙氧基和苄氧基)，以及芳基、杂芳基、环基、杂环基，等等。此外，也考虑到了上述各基团的饱和的、不饱和的、取代的和未取代的形式。而且，封端部分也可以是硅烷。封端部分还可有利地含有可检测的标记。当聚合物具有含可检测标记的封端部分时，所研究的该聚合物和/或与该聚合物偶联的部分(例如活性剂)的量或者位置，可通过使用适当的检测器来测定。这类标记包括，但不限于，荧光剂、化学发光剂、用于酶标记的部分，比色剂(例如染料)、金属离子、放射性部分等。适宜的检测器包括光度计、胶片、分光仪等。
[0028]在提及聚合物或水溶性聚合物的链段时，“非天然存在的”意为聚合物的整体未在自然界里发现。但是，非天然存在的聚合物或水溶性聚合物的链段也许含有天然存在的一个或数个亚单位或一个亚单位的某些部分，只要该聚合物整体结构未在自然界里发现即可。
[0029]“水溶性聚合物链段”和“水溶性聚合物”中的“水溶性”是指在室温条件下可溶于水的任何链段或聚合物。通常，与同样的溶液过滤之后所能传播的光相比，水溶性聚合物或链段将传播至少约75％、更优选的是至少约95％的光。以重量计，水溶性聚合物或其链段将优选是至少约35％(重量)溶于水，更优选的是至少约50％(重量)溶于水，还更优选的是约70％(重量)溶于水，并且还更优选的是约85％(重量)溶于水。然而，最优选的是水溶性聚合物或链段为约95％(重量)溶于水或完全溶于水。
[0030]就本发明的水溶性、非天然存在的聚合物例如PEG而论，“分子质量”是指聚合物的重均分子量，通常是以尺寸排阻色谱法、光散射技术或在1，2，4-三氯苯中以特性速度测定法测定的。一种被本领域的普通技术人员称为MALDI的方法能够测定聚合物的真实质量。本发明的聚合物通常是多分散性的，具有较低的多分散性值，该分散性值优选低于约1.2，更优选低于约1.15，还更优选低于约1.10，还更优选低于约1.05，并且最优选低于约1.03。
[0031]如本文所用，如“羧酸”衍生物中的“羧酸”这一术语是指含有
Figure A20048004155500131
官能团[也可表示为“-COOH”或-C(O)OH]的部分。除非上下文中另行明确规定，羧酸这一术语不仅包括酸的形式，也包括对应的酯类和被保护形式。参考Greene等，Protecting Groups in OrganicSynthesis(有机合成中的保护基团)Third Edition，，Wiley，New York，1999中关于羧酸和其它官能团的适当保护基。
[0032]“反应性”或“活化的”这一术语，当与特定官能团结合使用时，是指易与另一分子的亲电子体或亲核体发生反应的反应性官能团。这与那些需要强催化剂或非常不切实际的反应条件才能发生反应的基团(即“非反应性”或“惰性”基团)相反。
[0033]如本文所用，“官能团”这一术语或其任何同义词均意在包括其被保护形式。
[0034]本文所用的“间隔”或“间隔部分”这一术语是指任选地用于将一个部分与另一个部分连接的原子或原子的集合。本发明的间隔部分可以是稳定而不易水解的或可含在生理条件下可水解的或用酶降解的键。
[0035]“亲电子体”是指离子或原子、或原子的集合，它可以是离子型的，具有亲电子中心，即追踪电子的中心，能与亲核体发生反应。
[0036]“亲核体”是指离子或原子、或原子的集合，它可以是离子型的，具有亲核中心，即追踪亲电子中心或带有亲电子体的中心。
[0037]“在生理条件下可解离的”或“可水解的”或“可降解的”键是一种相对较弱且能在生理条件下与水反应(即水解)的键。一个键在水中发生水解的倾向将不仅取决于连接两个中心原子的键的一般类型，还取决于与这些中心原子连接的取代基。适宜的不稳定而易水解的键或弱键包括但不限于羧酸酯、磷酸酯、酸酐、缩醛、酮缩醇、酰氧烷基醚、亚胺、原酸酯、肽和低聚核苷酸。
[0038］“酶可降解的键”意为可被一种或多种酶降解的键。
[0039]“稳定而不易水解的”键合或键是指一种化学键，通常是一种共价键，它在水中基本上是稳定的，即在生理条件下在一段较长时间内不会水解至任何可察觉的程度。稳定而不易水解的键的实例包括但不限于：碳-碳键(例如在脂肪烃链中)、醚、酰胺、氨基甲酸乙酯等。通常，稳定而不易水解的键是在生理条件下水解速率低于每天约1-2％的键。典型化学键的水解速率可在大多数标准的化学教科书中查到。
[0040]“活性剂”、“生物活性剂”和“药理活性剂”这些术语在本文中互换使用，并定义为包括能产生可在体内或体外证实的、经常是有利的一些药理效果的任何试剂、药物、化合物，物质的组合物或混合物。这包括食品、食品增补剂、营养素、营养药物(nutriceutical)、药物、蛋白、疫苗、抗体、维生素以及其它有益的物质。如本文所用，这些术语还进一步包括能在患者身上产生局部或全身效应的任何生理或药理活性物质。
[0041]“药学上可接受的赋形剂”或“药学上可接受的载体”是指可包括在本发明的组合物中，且不会对患者产生显著不良毒理学效应的赋形剂。
[0042]“药理有效量”、“生理有效量”以及“治疗有效量”在本文中互换使用，意为在血流或靶组织内提供理想水平的活性剂和/或缀合物所需的聚合物-活性剂缀合物(通常存在于药物制剂内)的量。确切的量将取决于许多因素，例如具体的活性剂、药物制剂的组分和物理特性、目标患者群、患者自己的考虑等，并可由本领域的普通技术人员根据本文及有关文献中可获得的信息来决定。
[0043]就本发明的聚合物而论，“多官能团的”意为聚合物含有3个或3个以上官能团，这些官能团可相同或不同。本发明的多官能团聚合物在聚合物中通常将含有约3-100个官能团，或3-50个官能团，或3-25个官能团，或3-15个官能团，或3-10个官能团，或将含有3、4、5、6、7、8、9或10个官能团。“双官能团”聚合物意为其中含有两个官能团，相同(即同双官能团)或不同(即杂双官能)的聚合物。
[0044]至于聚合物的几何形状或整体结构，“支化的”是指聚合物具有2条或2条以上聚合物“臂”。支化聚合物可具有2条聚合物臂、3条聚合物臂、4条聚合物臂、6条聚合物臂、8条聚合物臂或更多的聚合物臂。高度支化聚合物的一个具体类型是树枝状聚合物或树状聚合物，出于本发明的目的，它被认为具有不同于支化聚合物的结构。
[0045]“树状聚合物”或树枝状聚合物是球状的、尺寸单分散性聚合物，其中所有的键均从一个中心焦点或核心以一种规则的支化模式径向伸出并具有重复的单元，其中每个单元都提供一个支化点。树状聚合物展示了某些树枝状性质，例如核心封闭，使得它们不同于其它类型的聚合物。
[0046]“患者”这一术语是指活生物，包括人和动物，该活生物患有或易患可通过施用本文所提供的缀合物来预防或治疗的某种病症。
[0047]“任选的”和“任选地”意为随后所述的情况也许发生或也许不发生，因此该叙述包括所述情况发生的情况以及所述情况不发生的情况。
[0048]回到本发明的第一种实施方案，其提供了一种含有两组不同聚合物-活性剂缀合物的组合物。与先前所述的含有缀合物的组合物不同，当本文所述的混合的组组合物施用于患者时，它除了产生较持久的药理作用之外，还产生较迅速的药理作用的开始。尤其是，通过产生较迅速的药理作用的开始，现述的组合物比先前所述的缀合物组合物有所改进，后者一般只能提供较持久的药理作用。
[0049]有利的是，现述的组合物通过提供两组不同的聚合物-活性剂缀合物，产生了较迅速的开始作用和较持久的作用的活性。因此，该组合物含有第一组聚合物-活性剂缀合物和第二组聚合物-活性剂缀合物。除了任何其它区别，与第一组相关的聚合物的重均分子量不同于第二组聚合物-活性剂缀合物中的重均分子量。
[0050]由于与每一组中聚合物相关的重均分子量不同，与一组相关的聚合物的重均分子量将必需低于与另一组相关的聚合物的重均分子量。仅为一致性起见，并为了清晰地叙述本发明，通常将与相对较低的重均分子量相关的活性剂缀合物称为“第一组”，而通常将与相对较高的重均分子量相关的活性剂缀合物称为“第二组”。然而，必须记住，术语“第一”和“第二”只是为了识别和区分这彼此不同的两组，并不赋予它们任何其它含意或数值。因此，如果将与相对较低的重均分子量相关的那组聚合物-活性剂缀合物称为“第二组”，而将与相对较高的重均分子量相关的那组称为“第一组”，也是完全可接受的。
[0051]虽然不希望受理论的约束，但据信正是由于与第一组和第二组相关的重均分子量之间的差别，才产生了期望的较迅速开始作用和较持久作用的联合作用。尤其是，据信具有较低分子量聚合物的那组缀合物产生与具有较高分子量聚合物的那组缀合物无关的较迅速的开始作用。因此，通过提供两组缀合物的混合物，本文中所述的组合物(在施用于患者时)产生了具有较迅速开始作用及较持久作用的药物动力学特性。
[0052]第一组和第二组均含有聚合物-活性剂缀合物。聚合物-活性剂缀合物均含有至少一种聚合物和至少一种活性剂。
[0053]至于活性剂，任何活性剂都可使用而且本发明在这方面并无限制。适宜的药剂可选自：例如，催眠药和镇静剂、精神供能剂、安定药、呼吸道药物、抗惊厥剂、肌肉松弛剂、抗帕金森氏症剂(例如多巴胺拮抗剂)、镇痛药、消炎药、抗焦虑药(例如抗焦虑药)、食欲抑制剂、抗偏头痛剂、肌肉收缩药、抗感染剂(例如抗生素、抗病毒剂、抗真菌剂和疫苗)、抗关节炎药、抗疟疾剂、止吐剂、抗癫痫药、支气管扩张剂、细胞因子、生长因子、抗癌剂、抗血栓形成剂、抗高血压药、心血管药物、抗心律失常药、抗氧化剂、抗哮喘剂、激素剂(包括避孕药)、拟交感神经药、利尿药、脂质调节剂、抗雄激素剂、抗寄生物药、抗凝剂、肿瘤药、抗肿瘤药、降血糖药、营养剂和增补剂、生长增补剂、抗肠炎剂、抗体、诊断试剂和造影剂。
[0054]更尤其是，该活性剂可归于下列一系列结构中的一种，包括但不限于小分子(优选的是不溶性小分子)、肽、多肽、蛋白、多糖、类固醇、核苷酸、低聚核苷酸、多核苷酸、脂肪、电解质等。优选的是，与本文所述的聚合物偶联的活性剂具有一个天然的氨基，或者，被修改成含有至少一个适合与本文所述聚合物缀合的反应性氨基。
[0055]适合以共价键连接的活性剂具体实例包括但不限于天冬酰胺酶、amdoxovir(DAPD)、安泰德(antide)、贝卡普勒明、降钙素、蓝藻抗病毒蛋白(cyanovirin)、地尼白介素毒素连接物、红细胞生成素(EPO)、EPO激动剂(例如长度为约10-40个氨基酸并包括一种特殊核心序列的肽)、链球菌NDA酶α、红细胞生成刺激蛋白(NESP)、凝血因子，例如因子V、因子VII、因子VIIa、因子VIII、因子IX、因子X、因子XII、因子XIII、冯·维勒布兰德因子；西利酶(ceredase)、依米格西酶(cerezyme)、α-葡糖苷酶、胶原、环孢菌素、α防御素、β-防御素、exedin-4、粒细胞集落刺激因子(GCSF)、血小板生成素(TPO)、α-1蛋白酶抑制剂、依降钙素、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)、纤维蛋白原、非格司亭、生长激素、人类生长激素(hGH)、生长激素释放激素(GHRH)、GRO-β、GRO-β抗体、骨形成蛋白如骨形成蛋白-2、骨形成蛋白-6、OP-1；酸性成纤维细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、CD-40配体、肝素、人血清蛋白、低分子量肝素(LMWH)、干扰素如干扰素α、干扰素β、干扰素γ、干扰素ω、干扰素τ、复合(consensus)干扰素；白细胞介素以及白细胞介素受体如白细胞介素-1受体、白细胞介素-2、白细胞介素-2融合蛋白、白细胞介素-1受体拮抗剂、白细胞介素-3、白细胞介素-4、白细胞介素-4受体、白细胞介素-6、白细胞介素-8、白细胞介素-12、白细胞介素-13受体、白细胞介素-17受体；乳铁蛋白和乳铁蛋白片段、促黄体激素释放激素(LHRH)、胰岛素、胰岛素原、胰岛素类似物(例如美国专利第5,922,675号所述的单酰化胰岛素)、糊精、C-肽、促生长素抑制素、促生长素抑制素类似物，包括奥曲肽、抗利尿激素、促卵泡激素(FSH)、流行性感冒疫苗、胰岛素样生长因子(IGF)、胰岛调理素(insulintropin)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、纤维蛋白溶酶原活化剂如阿替普酶(alteplase)、尿激酶、瑞替普酶(reteplase)、链激酶、帕米替普酶(pamiteplase)、拉诺普酶(lanoteplase)以及替尼普酶(teneteplase)；神经生长因子(NGF)、骨保护素、血小板衍生生长因子、组织生长因子、转化生长因子-1、血管内皮细胞生长因子、白血病抑制因子、角质细胞生长因子(KGF)、角质生长因子(GGF)、T细胞受体、CD分子/抗原、肿瘤坏死因子(TNF)、单核细胞化学吸引剂蛋白-1、内皮细胞生长因子、副甲状腺激素(PTH)、胰高血糖素样肽、生长激素、胸腺素α1、rasburicase、胸腺素α1 IIb/IIIa抑制剂、胸腺素β10、胸腺素β9、胸腺素β4、α-1抗 胰蛋白酶、磷酸二酯酶(PDE)化合物、VLA-4(极晚抗原-4)、VLA-4抑制剂、二膦酸酯、呼吸合胞体病毒抗体、囊性纤维化跨膜调节剂(CFTR)基因、脱氧核糖核酸酶(Dnase)、杀菌/渗透性增加蛋白(BPI)以及抗-CMV抗体。典型的单克隆抗体包括etanercept(由与IgG1的Fc部分连接的人的75kD TNF受体的细胞外配体结合部分组成的二聚融合蛋白)、阿昔单抗、阿达木单抗、阿非莫单抗、阿仑单抗、B-淋巴细胞抗体、atlizumab、巴利昔单抗、贝伐单抗、比西单抗、bertilimumab、CDP-571、CDP-860、CDP-870、西妥昔单抗、克立昔单抗、达克珠单抗、eculizumab、依决可单抗、efalizumab、依帕珠单抗、fontolizumab、gavilimomab、吉姆单抗奥佐米星、替伊莫单抗、英夫利昔单抗、inolimomab、凯利昔单抗、labetuzumab、lerdelimumab、奥立珠单抗、放射性标记的lym-l、metelimumab、美泊利单抗、米妥莫单抗、莫罗-CD3、奈巴库抗体、那他珠单抗、奥度莫单抗、omalizumab、oregovomab、帕利珠单抗、pemtumomab、pexelizumab、rhuMAb-VEGF、利妥昔单抗、沙妥莫单抗喷地肽、司韦单抗、siplizumab、托西莫单抗、I131托西莫单抗、曲妥单抗、妥韦单抗、visilizumab、他克林、美金刚、利凡斯的明、加兰他敏、多奈哌齐、左乙拉西坦、瑞格列奈、阿伐他汀、alefacept、伐地那非、西地那非，以及伐昔洛韦。
[0056]其它适宜于共价链接的药剂包括，但不限于，阿德福韦、阿洛司琼、氨磷汀、乙胺碘呋酮、氨基己酸、氨基马尿酸钠、氨鲁米特、氨基乙酰丙酸、氨基水杨酸、安吖啶、阿那格雷、阿那曲唑、阿立哌唑、天冬酰胺酶、蒽环霉素、贝沙罗汀、比卡鲁胺、博来霉素、布舍瑞林、白消胺、卡麦角林、卡培他滨、碳铂、卡莫司汀、氯氨布西(chlorambucin)、西拉司丁钠、顺铂、克拉屈滨、氯膦酸盐、环磷酰胺、环丙孕酮、阿糖胞苷、喜树碱、13-顺式视黄酸、全反式视黄酸；达卡巴嗪、放线菌素D、柔红霉素、去铁胺、地塞米松、双氯芬酸、己烯雌酚、多西他赛、阿霉素、度他雄胺、表阿霉素、雌莫司汀、依托泊苷、依西美坦、依泽替米贝、非索非那定、氟达拉滨、氟氢可的松、氟尿嘧啶、氟甲睾酮、氟他胺、磺达肝素、氟维司群、γ-羟基丁酸酯、吉西他滨、肾上腺素、L多巴、羟基脲、伊达比星、异环磷酰胺、伊马替尼、伊立替康、伊曲康唑、戈舍瑞林、来曲唑、亚叶酸、左旋咪唑、赖诺普利、左旋甲状腺素钠、罗莫司汀、氮芥、甲孕酮、甲地孕酮、美法仑、巯基嘌呤、间羟胺酒石氢酸盐、甲氨蝶呤、灭吐灵、美西律、丝裂霉素、米托坦、米托蒽醌、纳洛酮、尼古丁、尼鲁米特、尼替西农、奥曲肽、奥沙利铂、帕米膦酸盐、喷司他丁、普卡霉素、卟吩姆、强的松、丙卡巴肼、丙氯拉嗪、昂丹司琼、帕洛诺司琼、奥沙利铂、雷替曲塞、西罗莫司、链佐星、他克莫司、吡美莫司、他莫西芬、替加色罗、替莫唑胺、替尼泊苷、睾酮、四氢大麻酚、沙利度胺、硫鸟嘌呤、塞替派、托泊替康、treprostinil、维甲酸、伐地考昔、塞来考昔、罗非考昔、戊柔比星、长春碱、长春新碱、长春酰胺、长春瑞滨、伏立康唑、多拉司琼、格拉司琼；福莫特罗、氟替卡松、亮丙立德、咪达唑仑、阿普唑仑、两性霉素B、鬼臼毒素(podophylotoxins)、核苷类抗病毒剂、芳酰腙、舒马曲坦、依来曲普坦、大环内酯类例如红霉素、竹桃霉素、醋竹桃霉素、罗红霉素、克拉霉素、达发新红霉素(davercin)、阿奇霉素、氟红霉素、地红霉素、交沙霉素、螺旋霉素、麦迪霉素、氯雷他定、地氯雷他定、吉他霉素、美奥卡霉素、洛他霉素、安达际霉素(andazithromycin)，以及swinolideA；氟喹诺酮类例如环丙沙星、氧氟沙星、左氟沙星、曲伐沙星、阿拉曲沙星、莫西沙星、诺氟沙星、依诺沙星、格帕沙星、加替沙星、洛美沙星、司帕沙星、替马沙星、培氟沙星、氨氟沙星、氟罗沙星、托氟沙星、普卢利沙星、依洛沙星、帕珠沙星、克林沙星，以及西他沙星；氨基糖甙类例如庆大霉素、奈替米星、草履虫素、妥布霉素、阿米卡星、卡那霉素、新霉素，以及链霉素、万古霉素、替考拉宁、雷莫拉宁(rampolanin)、麦地拉宁、多粘菌素E、达托霉素、短杆菌肽、多粘菌素E(colistimethate)；多粘菌素类(polymixins)例如多粘菌素B(polymixinsB)、卷曲霉素、杆菌肽、青霉烯类；青霉素类包括对青霉素酶敏感的药剂，例如青霉素G、青霉素V；抗青霉素酶的药剂，例如甲氧苯青霉素、苯唑青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素、氟氯青霉素、萘夫西林；格兰氏阴性的微生物活性剂，例如氨苄青霉素、羟氨苄青霉素，以及海他西林、西林(cillin)，以及galampicillin；抗假单胞菌(antipseudomonal)青霉素，如卡比西林、替卡西林、阿洛西林、美洛西林，以及哌拉西林；头孢菌素类如头孢泊肟、头孢罗齐、头孢布坦、头孢唑肟、头孢曲松、头孢噻吩、头孢吡硫、头孢氨苄、头孢拉定、头孢西丁、头孢羟唑、头孢唑啉、头孢噻啶、头孢克洛、头孢羟氨苄、头孢格来星、头孢氨呋肟、头孢雷特、头孢噻肟、头孢曲嗪、头孢乙氰、头孢吡肟、头孢克肟、头孢尼西、头孢哌酮、头孢替坦、头孢美唑、头孢他啶、氯拉卡比，以及拉氧头孢、单菌霉素类如菌克单；以及碳青霉烯类例如伊米配能、美洛培南，以及厄他培南(ertapenem)、依西酸喷他脒、硫酸沙丁胺醇、利多卡因、硫酸奥西那林、倍氯米松双丙酸酯(beclomethasone diprepionate)、确炎舒松乙酰胺、布地奈德丙酮化物(budesonide acetonide)、氟替卡松、异丙托溴铵、氟尼缩松、色甘酸钠，以及酒石酸麦角胺；紫杉烷类例如紫杉醇；SN-38、以及tyrphostines。
[0057]与本文所述聚合物偶联的优选小分子是含有至少一个天然存在的氨基或羟基的那些分子。优选的是含有氨基的分子包括氨基马尿酸钠、两性霉素B、阿霉素、氨基己酸、氨基酮戊酸、氨基水杨酸、间羟胺酒石酸氢盐、帕米膦酸钠、道诺霉素、左旋酒石酸钠、赖诺普利、西拉司丁钠、美西律、头孢氨苄、甲磺酸去铁胺以及阿米斯丁。
[0058]用于与本文所述聚合物偶联的优选的肽或蛋白包括EPO(红细胞生成素)、IFN-α、 IFN-β、复合IFN、因子VIII、因子IX、GCSF、GMCSF、hGH、胰岛素、FSH以及PTH。
[0059]可适用时，上述典型的生物活性剂意在包括其类似物、激动剂、拮抗剂、抑制剂、异构体和药学上可接受的盐等形式。至于肽和蛋白，本发明意在包括合成的、重组的、天然的、糖基化和非糖基化的形式，及其生物活性片段。
[0060]本发明尤为优选的活性剂包括EPO(红细胞生成素)或任何具有红细胞生成素激动剂活性的药理活性剂。具有红细胞生成素活性的活性剂包括文献中所述的那些活性剂，例如，美国专利申请公开号2002/0081734、国际公开号WO96/40749和美国专利第5,106,954、6,642,353、6,048,971、5,986,047，以及5,888,772号。确定任何特定的活性剂是否具有红细胞生成素激动剂活性可以用常规的实验来实现。例如，如美国专利申请公开2002/0081734中所解释的，红细胞生成素激动剂活性的测定可在拟使用的活性剂与人体细胞系TF-1接触时，通过测量在含10％胎牛血清的RPMI 1640培养基中培养的依赖EPO的该细胞系的增长(若有的话)来确定。见Kitamura等(1989)Blood73：375-380。诱导这些细胞增殖的活性剂是具有红细胞生成活性的药剂。当然，用于确定一种活性剂是否具有红细胞生成素激动剂活性的其它方法也可以使用。
[0061]红细胞生成素(或具有红细胞生成素激动剂活性的任何肽活性剂)优选是以重组方式生产，尽管其它的方法(尤其是用于小型肽)，例如Merrifield(1963)J.Am.Chem.Soc. 85：2149一文中所述的固相合成技术也可以使用。尤为优选的是，按照本发明所使用的活性剂是人的、重组红细胞生成素。
[0062]至于聚合物，只要该聚合物是非抗原性和非致免疫性的，任何聚合物均可以使用。尤其是，对于较大的活性剂(例如蛋白)，优选的是缀合物内的聚合物为水溶性的。对于较小的活性剂(通常是非肽活性剂)，缀合物内的聚合物可以是水溶性的，也可以是非水溶性的。然而，对于与缀合物有关的聚合物，该聚合物通常是非肽的。尽管优选的是聚(乙二醇)，但适用于本申请的聚合物可以是，例如，其它水溶性(聚亚烷基二醇)、乙二醇和丙二醇的共聚物等、聚(烯醇)、聚(乙烯基吡咯烷酮)、聚(羟基烷基甲基丙烯酰胺)、聚(羟基烷基甲基丙烯酸酯)、聚(糖类)、聚(α-羟酸)、聚(乙烯醇)、聚磷腈、聚噁唑啉、聚(N-丙烯酰吗啉)，如美国专利第5,629,384号所述，以及前述任何物质的共聚物、三元共聚物、非无规嵌段聚合物和无规嵌段聚合物。
[0063]而且，尽管用于第一组缀合物的聚合物优选与用于第二组的聚合物具有相同的类型(例如线性、支化、分叉等等)，但该组合物也可包括其中各组聚合物不同的情况。例如，聚(乙二醇)类聚合物可用于第一组和第二组各缀合物。另外，也可在该组合物中将聚(乙二醇)聚合物类型聚合物用于某一组，而将乙二醇和丙二醇的共聚物用于另一组。
[0064]此外，聚合物往往是线性的，但也可以是其它形式(例如支化、分叉等等)，正如下文中将详述的。在存在于整体结构中的情况下，水溶性聚合物链段具有1至约300个终端。
[0065]除了上述形式的聚合物之外，在聚合物中聚合物也可含有一个或多个弱键或可降解的键。例如，可将聚(乙二醇)(“PEG”)制备成使该聚合物中含有易水解的酯键。如下所示，此水解导致聚合物解离为分子量较低的片段：
[0066]适用作聚合物内可降解键的其它可以水解方式降解的键包括碳酸酯键；如胺和醛反应而形成的亚胺键(可参阅Ouchi等，(1997)Polymer preprints  38(1)：582-3)；如醇与磷酸基反应而形成的磷酸酯键；通常由酰肼和醛反应而形成的腙键；通常由醛和醇反应而形成的缩醛键；例如，由甲酸酯和醇反应而形成的原酸酯键；例如，由位于一种聚合物如PEG末端的胺基和另一个PEG链上的羧基所形成的酰胺键；例如，由带有一个终端异氰酸酯基的PEG和PEG醇反应而形成的氨基甲酸乙酯键；例如，由位于一种聚合物如PEG末端的胺基和肽的羧基所形成的肽键；以及如一种聚合物末端的氨基亚磷酸酯基和低聚核苷酸5’端羟基所形成的低聚核苷酸键。
[0067]该聚合物通常是生物相容的和非致免疫性的。关于生物相容性，如果与某种物质单独或与另一种物质(例如活性剂)一起用于活组织(例如给患者施用)，经临床工作人员例如医师评估，所产生的有益作用超过其任何有害作用，则该物质就被认为是生物相容的。关于非致免疫性，如果某种物质单独或与另一种物质一起用于活组织，未产生某种免疫反应(例如抗体形成)，或如果产生了某种免疫反应，但这种反应经临床工作人员评估，不认为具有临床意义或是重要的，则该物质就被认为是非致免疫性的。
[0068]由于它的水溶性、非致免疫性和生物相容性，聚(乙二醇)是用于本文所述组合物每一组聚合物-活性剂缀合物中的优选聚合物。从结构上说，聚(乙二醇)是一种每端以羟基封端的线性聚合物：
    HO-CH2CH2O-(CH2CH2O)m’-CH2CH2-OH
其中(m′)是代表重复单体数目的正整数(通常为约2至约4000)。方便的是，聚(乙二醇)可简写为“PEG”，无论何时当结构式中有“PEG”出现时，都假设以下结构可适用：
    -CH2CH2O-(CH2CH2O)m’-CH2CH2-
其中(m′)如上所定义。
[0069]此外，该聚合物可具有以较为惰性的基团例如烷氧基封端的一个或多个的末端。因此，如上面所示的线性聚(乙二醇)可具有以较为惰性的甲氧基封端的末端。该“甲氧基-聚(乙二醇)”的结构如下：
      CH3O-CH2CH2O-(CH2CH2O)m’-CH2CH2-OH
其中(m′)如上所定义。除烷基之外的其它封端基团也是可能的。代表性封端部分包括选自以下一组的那些：烷氧基、取代的烷氧基、烯氧基、取代的烯氧基、炔氧基、取代的炔氧基、芳基氧基、取代的芳基氧基以及羟基。优选的封端基团选自烷氧基(例如甲氧基)和羟基。
[0070]如先前所述，本发明的组合物包括第一组和第二组缀合物。任一特定组的缀合物均可使用本领域的普通技术人员所知的任何技术来制备。然而，通常允许一种聚合物与一种活性剂在适合于缀合的条件下发生反应。尽管前述聚合物都可与一定的活性剂发生反应，但常用含有与反应基团连接的聚合物的聚合物试剂。这类聚合物试剂的应用，提供了一种把聚合物与活性剂连接从而形成聚合物-活性剂缀合物的方便手段。
[0071]使这些聚合物试剂与活性剂缀合的代表性聚合物试剂和方法在本领域中是已知的，并且在“官能化聚乙二醇在多肽修饰方面的应用”一文[Zalipsky等，“Use of Functionalized Poly(Ethylene Glycols)for Modification of Polypeptides”in Polyethylene Glycol Chemistry：Biotechnical and Biomedical Applications，J.M.Harris，Plenus Press，New York(1992)]，以及Zalipsky(1995)Advanced Drug Reviews  16：157-182中有进一步阐述。方便地是，许多聚合物试剂可从NektarTherapeutics公司(Huntsville，AL)购得。这些以及其它聚合物试剂更详述如下。
[0072]聚合物试剂的反应基可以是适合与活性剂反应的任何基团。通常，反应基含有一个亲电子基或亲核基，其允许活性剂在共价偶联条件下发生共价连接。这类与聚合物试剂结合的反应基实例包括，但不限于选自下列一组基团的那些反应基：羟基(-OH)、酯、原酸酯、碳酸酯、缩醛、醛、醛水合物、酮、酮水合物、硫酮、硫酮水合物、半酮缩醇、硫取代的半酮缩醇、酮缩醇、链烯基、丙烯酸酯、甲基丙烯酸酯、丙烯酰胺、砜、胺、酰肼、硫醇、硫醇水合物、羧酸、异氰酸酯、异硫氰酸酯、马来酰亚胺 琥珀酰亚胺 苯并三唑乙烯基砜、氯乙基砜、二硫代吡啶、乙烯基吡啶、碘乙酰胺、环氧化物、乙二醛类、二酮类、甲磺酸酯类、甲苯磺酸酯类、硫代磺酸酯、三氟乙磺酸酯、硅烷，及其被保护或活化形式。
[0073]关于活性剂，为聚合物试剂的反应基提供共价链接点的优选基团包括氨基(优选的是伯氨基)、羧酸和硫醇。当该活性剂是肽时，肽的N-端可提供一个适宜的氨基，而肽的C-端可提供一个适宜的羧基，以便与聚合物试剂发生反应。一个适当的氨基也可与该肽中任何赖氨酸残基侧链上的氨基连接。肽的组氨酸残基侧链也可用作为一个连接点。相似地，含半胱氨酸的肽侧链上的硫醇基团也可使用。此外，与活性剂的碳水化合物部分(例如在某些肽的糖基化形式中)相连的其它基团也可用于与聚合物试剂形成缀合物。
[0074]现将典型的聚合物试剂进一步详述如下。
[0075]典型的聚合物试剂包括那些其中反应基是亲电子体的聚合物试剂。这种“亲电子型活化”的聚合物试剂能与某些活性剂中发现的胺(例如在赖氨酸残基中)反应。适用于与某些活性剂相连的可利用胺形成共价键的特定聚合物试剂的非限制性实例，包括mPEG-琥珀酰亚胺基丙酸酯(如美国专利第5,672,662号中所述)、mPEG-琥珀酰亚胺基丁酸酯(如美国专利第5,672,662号中所述)、mPEG-苯并三唑碳酸酯(如美国专利第5,650,234号中所述)、mPEG-丙醛(如美国专利第5,824,784号中所述)、mPEG-乙醛(如美国专利第5,990,237号中所述)。所有这些均可从Nektar Therapeutics公司(Huntsville，AL)购得。
[0076]作为参考，每种衍生物的实例如下所示：
      mPEG-琥珀酰亚胺基丙酸酯；                                 mPEG-琥珀酰亚胺基丁酸酯；
Figure A20048004155500262
      mPEG-苯并三唑碳酸酯；                                     mPEG-丙醛；以及
                mPEG-乙醛二乙基缩醛。
其中(n)代表环氧乙烷单体的重复次数。
[0077]含有酮、酮水合物、半酮缩醇以及酮缩醇的聚合物试剂(及其对应的硫代形式)也可用于与胺的缀合反应。这些聚合物衍生物一个特别的优点是它们的相对稳定性(至少与对应的醛形式相比)，使得能够进行更特异性和更为定向的缀合反应。
[0078]亲电子型活化的聚合物的支化形式也是已知的，例如：“mPEG2-N-羟基琥珀酰亚胺”和“mPEG2-乙醛”，如下所示：
            mPEG2-N-羟基琥珀酰亚胺；以及
Figure A20048004155500265
                       mPEG2-乙醛。
其中(n)代表环氧乙烷单体的重复次数。
[0079]同样，诸如“mPEG2-N-羟基琥珀酰亚胺”和“mPEG2-乙醛”之类的试剂，也可从Nektar Therapeutics公司(Huntsville，AL)购得。
[0080]可使用采用已知反应条件的常规偶联反应以便使聚合物试剂与活性剂缀合。有关文献和本文援引的许多文章、专利及专利公开书中阐述了这类反应和条件。
[0081]有一种方法其特点是还原性氨基化反应，例如用于使伯胺与以酮或醛官能化的聚合物发生缀合。在这一方法中，活性剂的伯胺与醛或酮的羰基发生反应而形成席夫碱。然后，依次，席夫碱在氢硼化钠存在条件下可还原转化为一种稳定的缀合物。在较低的pH值条件下，有可能在N-端发生选择性反应。这样，有可能生成某些特殊的缀合物(例如含有以共价键连接的一至三种水溶性聚合物的缀合物)。
[0082]与活性剂中除胺之外的基团发生反应的其它聚合物试剂也是可利用的。例如，如果该聚合物试剂是以羟基在末端实现官能化或“活化的”，则通过该末端是羟基的聚合物试剂与一种含有羧酸基的活性剂反应即可形成一个酯键。而且，如果该聚合物试剂是以硫醇基实现官能化的，则将在该聚合物试剂的硫醇基和含有羧酸基的活性剂之间形成一个硫酯键。
[0083]其它聚合物试剂包括那些含有酰肼部分的聚合物试剂。这类含酰肼的聚合物试剂也可用于与活性剂中任何可利用的羧基发生缀合。这类聚合物试剂的实例包括具有以下结构的聚合物试剂：
其中的POLY代表一种聚合物。
[0084]与活性剂中(例如半胱氨酸残基中)巯基发生反应的聚合物试剂是已知的。适用于与某些活性剂有关的可利用的硫醇基形成共价键的特定聚合物试剂的非限制性实例包括N-马来酰亚胺基聚合物试剂，如美国专利第5,739,208号和国际专利公开书WO01/62827中所述。用于本发明这一具体实施方案的典型的硫氢基选择性PEG包括mPEG-分叉的马来酰亚胺[mPEG(MAL)2]、mPEG2-分叉的马来酰亚胺[mPEG2(MAL)2]、mPEG马来酰亚胺(mPEG-MAL)，以及mPEG2-马来酰亚胺(mPEG2-MAL)。所有这些均可从Nektar Therapeutics公司(Huntsville，AL)购得。
[0085]这些活化PEG的结构分别如下所示：
mPEG-CONHCH[(CH2CONH(CH2CH2O)2CH2CH2-MAL]2；
mPEG2-赖氨酸-NH-CH[CH2CONH(CH2CH2O)2CH2CH2-MAL]2，
mPEG-MAL；以及
mPEG2-赖氨酸-NH-CH2CH2NHC(O)CH2CH2MAL，
其中mPEG是单甲氧基PEG，赖氨酸是氨基酸赖氨酸，且MAL代表马来酰亚胺，即，
[0086]传统上称为“硫醇选择性”聚合物的其它聚合物试剂适合于与硫醇基发生反应，并在国际公开书WO04/63250中有所阐述。
[0087]虽然在两组缀合物中用于形成缀合物的该聚合物试剂(并可引伸至所生成的聚合物-活性剂缀合物中的聚合物)其重均分子量可以处于几乎任何范围(只要与各组有关的聚合物具有不同的重均分子量)，但该重均分子量通常是在以下一个或数个范围内：约50道尔顿至约130,000道尔顿；约100道尔顿至约100,000道尔顿；约500道尔顿至约80,000道尔顿；约l,000道尔顿至约50,000道尔顿；约2,000道尔顿至约25,000道尔顿；以及约5,000道尔顿至约20,000道尔顿。
[0088]典型的重均分子量包括约100道尔顿、约200道尔顿、约300道尔顿、约400道尔顿、约500道尔顿、约600道尔顿、约700道尔顿、约750道尔顿、约800道尔顿、约900道尔顿、约1,000道尔顿、约2,000道尔顿、约2,500道尔顿、约3,000道尔顿、约4,000道尔顿、约5,000道尔顿、约6,000道尔顿、约7,000道尔顿、约7,500道尔顿、约8,000道尔顿、约9,000道尔顿、约10,000道尔顿、约11,000道尔顿、约12,000道尔顿、约12,500道尔顿、约15,000道尔顿、约20,000道尔顿、约25,000道尔顿、约30,000道尔顿、约40,000道尔顿、约50,000道尔顿、约60,000道尔顿、约70,000道尔顿、约75,000道尔顿、约80,000道尔顿、约85,000道尔顿、约90,000道尔顿、约100,000道尔顿，以及约120,000道尔顿。
[0089]虽然已经叙述了许多聚合物试剂的实例，但仍还有其它聚合物试剂可供利用，以形成聚合物-活性剂缀合物。因此，本发明不限于由现述的聚合物试剂所形成的聚合物-活性剂缀合物。此外，由于可能分子量范围非常广，故本发明不限于任何特定的重均分子量。
[0090]为了形成每一组聚合物-活性剂缀合物，可让一种适宜的聚合物试剂与活性剂接触。本领域的普通技术人员知道或者能够通过常规的实验来确定，任何一种特定的聚合物试剂是否适用于与一种特定的活性剂形成缀合物。例如，含有一个或多个胺基的活性剂将与如上所述载有亲电子基的聚合物试剂发生反应。此外，也可以直接让拟议中的聚合物试剂与该活性剂接触，并让反应混合物通过一个尺寸排阻柱来确定缀合是否实现；既含有聚合物又含有活性剂的尺寸较大的缀合物将在非缀合聚合物试剂和活性剂之前被洗脱。
[0091]在选定形成一组所需缀合物的聚合物试剂和活性剂之后，通常以等摩尔量(相对于适合于与反应基反应的基团所需的数量)或以过量摩尔量将聚合物试剂加入活性剂中。例如，可以约1∶1(聚合物∶活性剂)、1.5∶1、2∶1、3∶1、4∶1、5∶1、6∶1、8∶1、10∶1、20∶1或40∶1等各种摩尔比率，将聚合物试剂加入目标活性剂中。
[0092]应让缀合反应一直进行至基本上不再有缀合发生为止。一般可通过监测反应随时间的进展来确定这一点。反应的进展可通过在不同的时间点取出等量的反应混合物，并以SDS-PAGE或MALDI-TOF质谱法、高效液相色谱法(HPLC)，或其它任何适当的分析方法来分析反应混合物而加以监测。所形成缀合物的量被或未缀合的聚合物试剂剩余的量一旦达到平态，则认为反应已经完全。
[0093]通常，缀合反应进行大概几分钟乃至几小时(例如从5分钟至24小时或更长)。生成的每一组聚合物-活性剂缀合物的组优选(但并非必须)加以纯化，以便分离出过量的试剂、未缀合的反应物(例如活性剂)，不需要的多重缀合物以及游离的或未反应的聚合物试剂。生成的每一组缀合物也可采用诸如MALDI、毛细管电泳法、凝胶电泳法和/或色谱法等分析方法加以进一步表征。
[0094]为了达到预期的结果，可以修改缀合反应的条件。例如，调节反应介质的pH值往往会对聚合物试剂和活性剂之间的反应性产生影响，从而可以调节与活性剂连接的聚合物数量。例如，含醛的聚合物试剂可与某种肽在pH值7.5条件下发生反应，使得主要产物为三种聚合物分别与单一活性剂连接的缀合物。然而，同样的含醛的聚合物试剂和肽在pH值6.5条件下缀合主要形成与该肽连接的单一聚合物。本领域的普通技术人员通过在某个条件范围(例如某个pH值条件范围)内进行任何特定的缀合反应，即可确定这种选择性，并确定哪些条件能够产生期望的结果(例如与期望数量的活性剂连接的聚合物的期望数量)。
[0095]对于任何特定组的聚合物-活性剂缀合物，该缀合物都可加以纯化，以获得或分离出不同类型的缀合物。或者，而且对于分子量较低(例如低于约20,000道尔顿，更优选的是低于约10,000道尔顿)的聚合物而言，更优选的是该组聚合物-活性剂缀合物可加以纯化，以获得每个活性剂的聚合物分布。例如，每一组都可加以纯化，以获得每一个活性剂(例如蛋白)与平均大概一至五个PEG连接，通常为每一个活性剂(例如蛋白)与平均约一至三个PEG连接。最终的缀合反应混合物的纯化策略将取决于一系列因素，包括例如所用聚合物试剂的分子量、具体的活性剂、所需的给药方案，以及个体缀合物的残余活性和活体内特性。
[0096]虽然优选的是使单一聚合物与单一活性剂连接，但含有与一种或多种活性剂连接的一种或多种聚合物的其它缀合物也是可能的。此外，组合物中每一组可含有与不同数目活性剂连接的不同数目的聚合物(例如一种组合物，其包含的第一组含有与一种活性剂单一连接和双重连接的聚合物混合物，第二组基本上只含有与单一活性剂单一连接的聚合物)。表1列出了适合于组合物中任何一组的典型缀合物。
                      表1
   含有典型的聚合物数目对活性剂数目的缀合物
  每组缀合物中的聚合物数   每组缀合物中的活性剂数
  5   1
  4   1
  3   1
  2   1
  1   1
  5   2
  4   2
  3   2
  2   2
  1   2
  5   3
  4   3
  3   3
  2   3
  1   3
  5   4
  4   4
  3   4
  2   4
  1   4
  5   5
  4   5
  3   5
  2   5
  1   5
[0097]如果需要，具有不同分子量(因连接的聚合物数量不同)的任一特定组的缀合物均可以采用色谱法或其它非树脂分离技术(例如渗滤、膜滤等)加以分离。也就是说，根据缀合物的不同分子量(该差别基本上对应于水溶性聚合物链段的平均分子量)，可采用凝胶过滤色谱法以及其它技术来分级分离聚合物对活性剂的比例不同数目的缀合物(例如1-mer，2-mer，3-mer等，其中“1-mer”表示一个聚合物对一个活性剂，“2-mer”表示两个聚合物对活性剂，依此类推)。例如，在一种典型的反应中，一种分子量为100,000道尔顿的蛋白与一种分子量为约20,000道尔顿的PEG链烷酸随机地发生缀合，生成的反应混合物很可能含有未修饰的蛋白(分子量为100,000道尔顿)、单PEG化蛋白(分子量为120,000道尔顿)、双PEG化蛋白(分子量为140,000道尔顿)，等等。虽然这种方法可用于分离具有不同分子量的PEG和其它聚合物-活性剂缀合物，但这种方法对于分离蛋白内具有不同聚合物连接点的位置异构体一般是无效的。例如，凝胶过滤色谱法可用于将PEG 1-mers、2-mers、3-mers等的混合物相互分离，尽管每一种回收的PEG-mer组合物可能含有与活性剂内不同反应性氨基(例如赖氨酸残基的ε-氨基)连接的PEG。
[0098]适合于进行这类分离的凝胶过滤柱包括SuperdexTM和SephadexTM柱，可从Amersham Biosciences(Piscataway，NJ)购得。具体柱的选择将取决于所需的分级分离范围。通常使用适宜的缓冲剂，例如磷酸盐、乙酸盐等进行洗脱。例如，所收集的级分可通过一系列不同的方法分析，例如，(i)于280nm测量光学密度(OD)，以确定蛋白含量，(ii)使用一种标准品如牛血清白蛋白(BSA)，进行蛋白质基于染料的分析，(iii)进行碘试验以测定PEG含量[Sims等，(1980)Anal.Biochem， 107：60-63]，以及(iv)硫酸十二酯钠聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS PAGE)，随之用碘化钡进行PEG的染色，用考马斯或其它染料进行肽的染色。也可以利用其它为本领域的普通技术人员所知的分离技术。
[0099]位置异构体的分离是以反相色谱法进行的，采用一种反相高效液相色谱法(RP-HPLC)C18柱(Amersham Biosciences或Vydac)；或以离子交换色谱法进行，采用一种离子交换柱，例如可从AmershamBiosciences购得的SepharoseTM离子交换柱。任一种方法都可用于分离具有相同分子量的聚合物-活性剂异构体(位置异构体)。
[0100]如先前所指出，本文所述的组合物包括两组不同的聚合物-活性剂缀合物，其中这两组之间的区别在于聚合物的重均分子量。因此，本发明的组合物可通过以下方法形成：(a)制备通过使具有一定重均分子量的聚合物试剂反应而形成的第一组缀合物；(b)制备通过使具有一定重均分子量的聚合物试剂反应而形成的第二组缀合物，该聚合物试剂的重均分子量与步骤(a)中的聚合物试剂重均分子量不同；以及(c)将第一组和第二组合并而形成一种组合物。
[0101]本发明的组合物也可用“一釜”合成法来制备。在这一方法中，缀合物是由一种活性剂和两种聚合物试剂结合而形成的，每种聚合物试剂具有不同的重均分子量。通常，在这一方法中，每种聚合物试剂的反应基将完全相同。此外，每种聚合物试剂中的聚合物通常也是相同的(例如PEG)，但每种聚合物将具有不同的重均分子量。
[0102]无论在其形成时采用何种方法，都可采用各种常规技术来实现一个任选的混合组合物，以形成一种基本上均匀的混合物的步骤。至于涉及两组不同缀合物的各自形成方法，优选是将该任选的混合第一组和第二组聚合物-活性剂的步骤包括在内，以形成一种基本上均匀的混合物。
[0103]出于某种特定目的(如迅速开始或持久作用)的每组有关的聚合物的具体重均分子量，将是本领域的普通技术人员已知的，或无需过度的实验即可测定。例如，通过形成一系列的重均分子量较小(例如500、750、1,000、2,000、3,000、4,000及5,000)的缀合物，然后(例如通过向动物试验对象给药)确定哪一种将产生期望的迅速开始效应(例如从12小时至2天)，就可决定第一组聚合物-活性剂缀合物中适宜的聚合物尺寸。相似地，通过形成一系列各重均分子量较大(例如10,000、20,000、30,000、40,000、50,000、100,000及120,000)的缀合物，然后(例如通过向动物试验对象给药)确定哪一种将产生期望的持久活性(例如从4天至几个星期)，就可决定缀合物中适宜的聚合物尺寸。然后，通过选择(i)由较小重均分子量、经发现能产生期望的迅速起效的聚合物之一形成的缀合物组，以及(ii)由较大重均分子量、经发现能产生期望的持久作用的聚合物之一形成的缀合物组，可确定既能产生迅速起效又能产生持久作用所必需的所需组合。
[0104]典型的重均分子量包括以下各范围：第一组中每种聚合物的重均分子量范围为约50道尔顿至小于30,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为大于5,000道尔顿至小于约130,000道尔顿(其中每一组相关的聚合物的重均分子量是不同的)；第一组中每种聚合物的重均分子量范围为约100道尔顿至小于20,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为大于20,000道尔顿至约100,000道尔顿；第一组中每种聚合物的重均分子量范围为约1,000道尔顿至约15,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为大于约25,000道尔顿至约50,000道尔顿；第一组中每种聚合物的重均分子量范围为约2,500道尔顿至10,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为大于30,000道尔顿至40,000道尔顿；并且第一组中每种聚合物的重均分子量为约5,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为约30,000道尔顿至约40,000道尔顿。
[0105]如果在两组中都使用小分子作为活性剂，则重均分子量通常(尽管不必需如此)会更小。因此，小分子的重均分子量包括以下各典型范围：第一组中每种聚合物的重均分子量范围为约50道尔顿至小于5,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为大于100道尔顿至小于约10,000道尔顿；第一组中每种聚合物的重均分子量范围为约100道尔顿至小于3,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为大于200道尔顿至小于约5,000道尔顿；第一组中每种聚合物的重均分子量范围为约150道尔顿至小于1,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为大于500道尔顿至小于约3,000道尔顿，其中(对于每个实例)每一组相关的聚合物的重均分子量是不同的。
[0106]此外，因为与每一不同组相关的重均分子量是不同的，故有可能以数字来表征这种区别。例如，5,000道尔顿聚合物-活性剂缀合物和30,000道尔顿聚合物-活性剂缀合物之间的绝对差为25,000道尔顿。第一组中聚合物重均分子量和第二组的重均分子量之间的典型绝对差包括以下范围：约500至约100,000；约2,000至约100,000；约10,000至约100,000；约20,000至约100,000；约30,000至约100,000；约20,000至约40,000；以及约25,000至约35,000。应该认识到，采用绝对差是为了消除进行计算时和得到负值结果时的影响。
[0107]组合物中的每一组也将与摩尔比率有关。第一和第二两组聚合物-活性剂缀合物之间的典型摩尔比率包括以下范围：约1000∶1至约100∶1；约100∶1至约10∶1；约10∶1至约1∶1；约1∶1至约1∶10；约1∶10至约1∶100；以及约1∶100至约1∶1000。
[0108]有利的是，可以调整第一组和第二组之间的特定比例，以发挥期望的药物动力学特性。例如，可以制备一种包含第一组与第二组之间最初比例为1∶1的组合物，并施用于试验对象，然后监测该试验对象的药理活性随时间的变化。如果通过提供更多的迅速起作用的成分能够更好地满足临床适应症，则可增加缀合物内含有较小聚合物的组。此外，如果通过提供更多的持久作用的成分将能更好地满足临床适应症，则可增加缀合物内含有较大聚合物的组。在另一种方法中，可以提供一系列各具有独特比例的各组的组合物，并分别施用于不同的患者。监测每名患者一段时间，并根据对显示出最佳总体药理反应(如足够的迅速起作用和持久活性所表现出的)的患者所给予的所选组合物，可确定最佳比例。这些方法和其它方法均可用于为任何特定的应用优化各组之间的最佳比例。
[0109]对于拟用于皮下给药和透皮给药的聚合物-活性剂缀合物，本发明具有特别的适用性。这是由于包括治疗剂分子大小等其它因素会影响皮下给药和透皮给药，因为任何试剂都必须贯穿皮肤的几个层才能达到全身循环系统。结果，分子尺寸的增大导致了皮下给药和透皮给药达到体内循环的时间同时增加。因此，本文提供的组合物既可通过采用与第一组缀合物有关的较小(以产生较小缀合物)的、能更好地穿过皮肤层的聚合物，来产生较迅速的开始作用，又可采用与第二组缀合物有关的较大(以产生较大缀合物)的、需要更长时间才能穿过皮肤层的聚合物，来产生更持久的作用。
[0110]本发明也包括含有本文所述的组合物与药物赋形剂的药物制剂。因此，制备该组合物的方法包括一个添加一种药学上可接受的赋形剂的任选步骤。通常，该组合物本身是一种固体形式(例如沉淀物)，它可与一种适宜的固体或液体形式的药物赋形剂结合。例如，该组合物(以及对应的药物制剂)可以一种冻干或溶液的形式提供。
[0111]典型的赋形剂包括但不限于选自下列一组的那些赋形剂：碳水化合物、无机盐、抗微生物剂、抗氧化剂、表面活化剂、缓冲剂、酸、碱及其组合。
[0112]碳水化合物例如糖、衍生糖例如糖醇、醛糖酸、酯化糖和/或糖聚合物均可作为赋形剂存在。具体的碳水化合物赋形剂包括，例如：单糖(例如果糖、麦芽糖、半乳糖、葡萄糖、D-甘露糖、山梨糖等)；二糖(例如乳糖、蔗糖、海藻糖、纤维素二糖等)；多糖(例如棉子糖、松三糖、麦芽糖糊精、葡聚糖、淀粉等)；以及糖醇(例如甘露醇、木糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、木糖醇、山梨糖醇(葡萄糖醇)、吡喃山梨糖醇、肌醇等)。
[0113]赋形剂也可包括无机盐或缓冲剂，例如柠檬酸、氯化钠、氯化钾、硫酸钠、硝酸钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠及其组合。
[0114]该制剂也可包括抗微生物剂，以预防或阻止微生物的生长。适合于本发明的抗微生物剂的非限制性实例包括苯扎氯铵、苯索氯铵、苄醇、十六烷基氯化吡啶鎓、氯代丁醇、苯酚、苯乙醇、硝酸苯汞、硫柳汞及其组合。
[0115]该制剂中也可存在抗氧化剂。抗氧剂是用于防止氧化，从而防止该制剂的缀合物或其它组分的降解。适合用于本发明的抗氧化剂包括，例如，棕榈酸抗坏血酸酯、丁基化羟基茴香醚、丁基化羟基甲苯、次磷酸、一硫代甘油、没食子酸丙酯、亚硫酸氢钠、次硫酸甲醛钠、偏亚硫酸氢钠及其组合。
[0116]表面活化剂可作为赋形剂存在。典型的表面活化剂包括：聚山梨酯，例如“Tween 20”和“Tween 80”以及泊洛沙姆例如F68和F88(两者均可从BASF，Mount Olive，New Jersey购得)；山梨糖醇酐酯；类脂，例如卵磷脂和其它磷脂酰胆碱之类的磷脂、磷脂酰乙醇胺(尽管优选不是脂质体的形式)、脂肪酸和脂肪酯；类固醇，例如胆固醇；以及螯合剂，例如EDTA、锌以及其它这类适合的阳离子。
[0117]酸或碱也可作为赋形剂存在于该制剂中。可被使用的酸的非限制性实例包括选自下列一组的那些酸：盐酸、乙酸、磷酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、甲酸、三氯乙酸、硝酸、高氯酸、磷酸、硫酸、富马酸及其组合。适用的碱的实例包括但不限于选自下列一组碱的那些碱：氢氧化钠、乙酸钠、氢氧化铵、氢氧化钾、乙酸铵、乙酸钾、磷酸钠、磷酸钾、柠檬酸钠、甲酸钠、硫酸钠、硫酸钾、富马酸钾及其组合。
[0118]该药物制剂包括所有各种类型的制剂，尤其是那些适宜于注射的制剂，例如可重新溶解的粉末以及悬浮液和溶液。组合物中缀合物(即本文中所述的活性剂和聚合物之间形成的缀合物)的含量将随着一系列因素而变化，但当该组合物储存于单位剂量容器(例如小瓶)内时，最好是治疗有效量。此外，该药物制剂也可储存于注射器中。治疗有效量可通过实验确定，即反复给以增加剂量的该缀合物，以便确定哪种剂量能产生临床期望的终点。
[0119]该组合物中任何一种赋形剂的量将随着该赋形剂的活性和组合物的特殊需要而变化。通常，任何个体赋形剂的最佳量是通过常规的实验来确定的，即通过制备赋形剂含量不同(从低到高)的组合物，考查其稳定性和其它参数，然后确定在哪一范围可获得最佳的表现而无明显的不良作用。
[0120]然而，该组合物中赋形剂的含量以重量计通常将是约1％至99％，优选的是约5％-98％重量，更优选的是约15％-95％重量的赋形剂，最优选的是浓度低于30％重量。
[0121]上述药物赋形剂以及其它赋形剂在″Remington：The Science& Practice of Pharmacy″(《药剂学科学与实践》)，19th ed.，Williams& Williams，(1995)、″the Physician′s Desk Reference″(《医师参考手册》)，52nd ed.，Medical Economics，Montvale，NJ(1998)，以及Kibbe，A.H.，Handbook of Pharmaceutical Excipients(医药赋形剂手册)，3rdEdition，American Pharmaceutical Association，Washington，D.C.，2000等文献中均有阐述。
[0122]本发明的药物制剂通常(尽管并非必须)是通过注射方式给药，故一般是在给药前当即配制的液体溶液或悬浮液。药物制剂也可采取其它形式、例如糖浆、霜剂、凝胶剂、软膏、片剂、粉末等等。其它给药方式也包括在内，例如经肺、经直肠、经皮、经粘膜、经口、经鞘内、经皮下、经动脉内等等。有利的是，该药物制剂(以及组合物)可以单位剂量的形式提供。此外，药物制剂(以及组合物)可在小瓶(例如玻璃小瓶或塑料小瓶)内使用，或在注射器内使用以提供预填充注射器。
[0123]如前所述，药物制剂可经肠胃外以静脉内注射的方式注射，或较不优选的是采取肌肉内或皮下注射的方式。适合于胃肠外给药的制剂类型包括可供即可注射的溶液、在使用前与溶剂结合的干粉、即可注射的悬浮液、在使用前与载体结合的不溶性干组合物、乳液以及在给药前稀释的液体浓缩液，等等。通常，该制剂是以干(例如冻干)的形式提供以便储存，并以适宜的液体稀释剂重构。首选的液体稀释剂选自注射用抑菌水、5％葡萄糖水溶液、磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液、盐水溶液、无菌水、去离子水及其组合。
[0124]本发明还包括一种产生活性最初开始和活性延迟开始的方法，该方法包括以下步骤：(i)给患者施用第一组活性剂-聚合物缀合物，每种聚合物-活性剂缀合物含有一种或多种具有一定重均分子量的聚合物；以及(ii)给患者施用第二组活性剂-聚合物缀合物，每种聚合物-活性剂缀合物含有一种或多种具有一定重均分子量的聚合物，该分子量大于第一组中一种或多种聚合物的重均分子量。通常，第一组和第二组是同时施用的。通过施用如本文所述的药物制剂可很方便地实现同时给药。然而，也可能进行第一组和第二组先后依次给药，无论那组在先均可，或者中间停顿一定时间以确定患者是否对治疗有反应。
[0125]在某些情况下，可能希望只施用两组聚合物-活性剂缀合物的混合物作为初始剂量，随后将给药限制于例如与重均分子量较高有关的第二组活性剂-聚合物缀合物。因此，例如，本发明的组合物可被急救医务人员在紧急情况下使用，而通过只在常规基础上施用单一聚合物-活性剂组，来维持该聚合物-活性剂的治疗水平。
[0126]本发明还提供了一种给患者施用如本文所提供药物制剂的方法，该患者患有对使用聚合物-活性剂缀合物的治疗有反应的病症。该方法包括施用(通常是以注射方式)治疗有效量的聚合物-活性剂缀合物(优选的是作为药物制剂的一部分而提供)。该施用方法可用于治疗通过施用该聚合物-活性剂组合物可治疗或预防的任何病症。本技术领域内那些普通技术人员应能理解，哪些症状可用特定的聚合物-活性剂缀合物有效地治疗。给药的实际剂量将取决于给药对象的年龄、体重、总的状况、所治疗病症的严重性，医护专业人员的判断，以及所用的缀合物。治疗有效量对于那些熟悉本技术的人士而言是众所周知的和/或在有关参考书籍和文献中有所阐述。通常，治疗有效量的范围为约0.001mg至100mg，优选的剂量是0.01mg/日至75mg/日，更优选的剂量是0.10mg/日至50mg/日。
[0127]任何特定缀合物的单位剂量(同样，优选的是作为药物制剂的一部分而提供)，可根据临床工作人员的评断、患者的需要等等，按照不同的给药方案加以施用。具体的给药方案将为本技术领域内那些普通技术人员所熟知，或可以常规方法通过实验加以确定。典型的给药方案包括但不限于，每天给药5次、每天4次、每天3次、每天2次、每天1次、每星期3次，每星期2次，每星期1次，每月2次、每月一次，及其任何组合。一旦达到临床终点，即停止该组合物的给药。
[0128]当缀合物含有可从治疗剂上解离的聚合物时，则该组合物的一个优点是，作为聚合物与缀合物其余部分解离时尺寸减小的结果，能够使较大的聚合物从身体内被清除的能力。最理想的是，通过使用在生理条件下可发生解离和/或酶降解的键，例如氨基甲酸乙酯、酰胺、碳酸酯或含酯键，可促进每个聚合物的解离。这样，通过选择聚合物分子的大小和将提供所需清除特性的官能团类型，可调节缀合物的清除率(通过个体聚合物的解离)。本领域的普通技术人员能够确定适宜的聚合物分子大小以及可解离的官能团。例如，本技术领域内的普通技术人员，采用常规的实验，首先制备一系列含有不同聚合物重量和可解离官能团的缀合物，然后通过给患者给予该聚合物衍生物并定期采取血样和/或尿样而获得清除曲线(例如通过定期采取血样或尿样)，可确定适宜的聚合物分子尺寸以及可解离官能团。一旦获得所测试的每种缀合物的一系列的清除曲线，可鉴别适宜的缀合物。
[0129]应当理解，尽管结合某些优选的具体实施方案已经说明了本发明，但前面的说明以及随后的实验部分，都是企图说明而不是限制本发明的范围。本发明范围内的其它方面、优点以及修改，对于那些熟悉本发明相关技术领域的技术人员而言将是显而易见的。
                           实验
[0130]本发明的实施，除非另行指出，将采用有机合成的常规技术及类似技术，这类技术可为本领域的普通技术人员所理解，并在文献中有所阐述。在以下实施例中，已做出许多努力以保证所用的有关数字的准确性(例如剂量、温度等)，但一定的实验误差和偏差也应考虑在内。以下预言的每个实施例提供了相对于先前技术意料之外的益处。
                          实施例1
[0131]按照EP 1 333 036中实施例8制备了第一组线性单PEG缀合rhEPO的缀合物。此第一组组合物中缀合物的聚合物部分的重均分子量为5,000道尔顿。
[0132]按照EP 1 333 036中的实施例8制备了第二组线性单PEG缀合rhEPO的缀合物。但此第二组组合物中缀合物的聚合物部分的重均分子量为30,000道尔顿。
[0133]然后合并第一组和第二组并充分混合。
[0134]按照EP 1 333 036中实施例11中所述的方案，分别给大鼠给予第一组、第二组以及合并的混合物。简而言之，用含有0.05％大鼠血清白蛋白和0.05％Tween 20的生理盐水将第一组、第二组以及合并的混合物稀释至2.5μg/mL(假设合并的混合物中第一组缀合物与第二组缀合物的比例为1∶1)。以单尾注射2mL/kg的方式给每组大鼠分别注射第一组和第二组和合并的混合物。
[0135]于给药后第1、2、4、5、7、10、15、21、29及35天，从每组的每只大鼠(通过从尾静脉抽血)抽取血样。测试每个血样的网状细胞计数和血红蛋白水平。每组的近似和预期平均值如图1(网状细胞计数)和图2(血红蛋白水平)所示。
[0136]从图1和图2可见，与单独给药的任一组比较，合并的PEG-EPO缀合物的混合物产生了相对更快的开始作用与较持久的作用。
                         实施例2
[0137]现发现，含有单一组干扰素缀合物(与单一干扰素连接的单一聚合物)的第一组合物具有较迅速的开始作用(例如约5小时)，正如其Tmax(即给药后药剂达到其最高浓度的时间的量)所证明，其中该聚合物(PEG)具有较小的重均分子量(例如约5,000道尔顿)。
[0138]现发现，含有单一组干扰素缀合物(与单一干扰素连接的单一聚合物)的第二组合物具有较长的开始作用(例如约96小时)，正如其Tmax所证明，其中该聚合物(PEG)具有较大的重均分子量(例如约40,000道尔顿)。
[0139]将该两个聚合物干扰素组的各组合并充分混合，以形成由不同的组组成的单一组合物。经皮下向患者给药后，预期该单一组合物将很快地提供较高水平的PEG-干扰素缀合物(从而较快地达到最低治疗浓度)，以及在一段时间内提供持续的水平(从而在一段时间内保持浓度高于该最低治疗浓度)。
                        实施例3
[0140]现发现，含有单一组G-CSF(例如非格司亭)缀合物的第一组合物具有较迅速的开始作用，正如其Tmax(即给药后药剂达到其最高浓度的时间的量)所证明，其中该聚合物(PEG)具有较小的重均分子量(例如约5,000道尔顿)。
[0141]现发现，含有单一组G-CSF(例如非格司亭)缀合物的第二组合物具有较长的开始作用，正如其Tmax所证明，其中该聚合物(PEG)具有较大的重均分子量(例如约20,000道尔顿)。
[0142]将这两组聚合物G-CSF的各组合并充分混合，以形成由不同的组组成的单一组合物。经皮下向患者给药后，预期该单一组合物将很快地提供较高水平的PEG-G-CSF缀合物，以及在一段时间内提供持续的水平，直至最低点后绝对中性白细胞计数恢复正常。
                        实施例4
[0143]现发现，含有单一组胰岛素缀合物的第一组合物具有较迅速的开始作用，正如其Tmax(即给药后药剂达到其最高浓度的时间的量)所证明，其中该聚合物(PEG)具有较小的重均分子量(例如约750道尔顿)。
[0144]现发现，含有单一组胰岛素缀合物的第二组合物具有较长的开始作用，正如其Tmax所证明，其中该聚合物(PEG)具有较大的重均分子量(例如约5,000道尔顿)。
[0145]将这两组聚合物胰岛素的各组合并充分混合，以形成由不同的组组成的单一组合物。经皮下向患者给药后，预期该单一组合物将很快地提供较高水平的PEG-胰岛素缀合物，以及在一段时间内提供持续的水平。

Claims (57)

1.一种组合物，其含有：
第一组聚合物-活性剂缀合物，第一组中的每种聚合物-活性剂缀合物均含有一种或多种具有一定重均分子量的聚合物；以及
第二组聚合物-活性剂缀合物，第二组中的每种聚合物-活性剂缀合物均含有一种或多种具有一定重均分子量的聚合物，
其中，第一组中一种或多种聚合物的重均分子量不同于第二组中一种或多种聚合物的重均分子量。
2.权利要求1所述的组合物，其中第一组中每种聚合物的重均分子量范围为约100道尔顿至小于120,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为大于100道尔顿至约120,000道尔顿，其中第一组中一种或多种聚合物的重均分子量不同于第二组中一种或多种聚合物的重均分子量。
3.权利要求1所述的组合物，其中第一组中每种聚合物的重均分子量范围为约100道尔顿至小于20,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为大于100道尔顿至约120,000道尔顿，其中第一组中一种或多种聚合物的重均分子量不同于第二组中一种或多种聚合物的重均分子量。
4.权利要求1所述的组合物，其中第一组中每种聚合物的重均分子量范围为约100道尔顿至小于20,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为大于20,000道尔顿至约100,000道尔顿。
5.权利要求4所述的组合物，其中第一组中每种聚合物的重均分子量范围为约1,000道尔顿至约15,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为大于约25,000道尔顿至约50,000道尔顿。
6.权利要求5所述的组合物，其中第一组中每种聚合物的重均分子量范围为约2,500道尔顿至约10,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为大于30,000道尔顿至约40,000道尔顿。
7.权利要求6所述的组合物，其中第一组中每种聚合物的重均分子量为约5,000道尔顿，第二组中每种聚合物的重均分子量范围为约30,000道尔顿至约40,000道尔顿。
8.权利要求1所述的组合物，其中第一组中聚合物的重均分子量与第二组的重均分子量之间的绝对差为约500道尔顿至约100,000道尔顿。
9.权利要求1所述的组合物，其中第一组中聚合物的重均分子量和第二组的重均分子量之间的绝对差为约2,000道尔顿至约100,000道尔顿。
10.权利要求1所述的组合物，其中第一组中聚合物的重均分子量和第二组的重均分子量之间的绝对差为约10,000道尔顿至约100,000道尔顿。
11.权利要求1所述的组合物，其中第一组中聚合物的重均分子量和第二组的重均分子量之间的绝对差为约20,000道尔顿至约100,000道尔顿。
12.权利要求1所述的组合物，其中第一组中聚合物的重均分子量和第二组的重均分子量之间的绝对差为约30,000道尔顿至约100,000道尔顿。
13.权利要求1所述的组合物，其中第一组中聚合物的重均分子量和第二组的重均分子量之间的绝对差为约20,000道尔顿至约40,000道尔顿。
14.权利要求1所述的组合物，其中第一组中聚合物的重均分子量和第二组的重均分子量之间的绝对差为约25,000道尔顿至约35,000道尔顿。
15.权利要求1所述的组合物，其中第一和第二两组聚合物-活性剂缀合物之间的摩尔比率为约1000∶1至约100∶1。
16.权利要求1所述的组合物，其中第一和第二两组聚合物-活性剂缀合物之间的摩尔比率为约100∶1至约10∶1。
17.权利要求1所述的组合物，其中第一和第二两组聚合物-活性剂缀合物之间的摩尔比率为约10∶1至约1∶1。
18.权利要求1所述的组合物，其中第一和第二两组聚合物-活性剂缀合物之间的摩尔比率为约1∶1至约1∶10。
19.权利要求1所述的组合物，其中第一和第二两组聚合物-活性剂缀合物之间的摩尔比率为约1∶10至约1∶100。
20.权利要求1所述的组合物，其中第一和第二两组聚合物-活性剂缀合物之间的摩尔比率为约1∶100至约1∶1000。
21.权利要求1所述的组合物，其中第一组和第二组中聚合物-活性剂缀合物中的每种聚合物独立地选自聚(环氧烷)、聚(乙烯基吡咯烷酮)、聚(乙烯醇)、聚噁唑啉，聚(丙烯酰吗啉)，以及聚(氧乙烯化多元醇)。
22.权利要求1所述的组合物，其中每种聚合物都是聚(乙二醇)。
23.权利要求22所述的组合物，其中每种聚(乙二醇)的末端均以一种封端部分封端。
24.权利要求23所述的组合物，其中每个封端部分独立地选自烷氧基、取代的烷氧基、烯氧基、取代的烯氧基、炔氧基、取代的炔氧基、芳基氧基、取代的芳基氧基和羟基。
25.权利要求24所述的组合物，其中每个封端部分是烷氧基。
26.权利要求25所述的组合物，其中每个烷氧基是甲氧基。
27.权利要求24所述的组合物，其中所述封端部分是羟基。
28.权利要求1所述的组合物，其中第一组和第二组聚合物-活性剂缀合物中的每种聚合物独立地具有选自均聚物、交替共聚物、无规共聚物、嵌段共聚物、交替三聚物、无规三聚物和嵌段三聚物的结构。
29.权利要求1所述的组合物，其中第一组中的每种聚合物-活性剂缀合物均含有与单一活性剂连接的单一聚合物。
30.权利要求1所述的组合物，其中第二组中的每种聚合物-活性剂缀合物均含有与单一活性剂连接的单一聚合物。
31.权利要求1所述的组合物，其中第一和第二两组中的每种聚合物-活性剂缀合物均含有与单一活性剂连接的单一聚合物。
32.权利要求31所述的组合物，其中所述聚合物是聚(乙二醇)。
33.权利要求30所述的组合物，其中所述聚乙二醇是线性的。
34.权利要求1所述的组合物，其中所述活性剂具有红细胞生成的活性。
35.权利要求1所述的组合物，其中所述活性剂是促红细胞生成素。
36.权利要求35所述的组合物，其中所述促红细胞生成素是以重组方式衍生的。
37.权利要求1所述的组合物，其中所述活性剂是小分子。
38.权利要求1所述的组合物，其中所述活性剂是肽。
39.权利要求1所述的组合物，其中所述活性剂是蛋白质。
40.权利要求1所述的组合物，其进一步含有药学上可接受的赋形剂。
41.权利要求40所述的组合物，其中所述赋形剂是糖。
42.权利要求40所述的组合物，其为冻干形式。
43.权利要求1所述的组合物，其中进一步含有液体稀释剂。
45.权利要求37所述的组合物，其中所述液体稀释剂选自注射用抑菌水、5％葡萄糖水溶液、磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液、盐水溶液、无菌水、去离子水及其组合。
46.权利要求1所述的组合物，其呈单位剂量形式。
47.权利要求40所述的组合物，其储存在玻璃小瓶内。
48.一种制备混合物的方法，其中该方法包括以下步骤：
(i)提供第一组聚合物-活性剂缀合物；
(ii)提供第二组聚合物-活性剂缀合物；以及
(iii)将第一组和第二组聚合物-活性剂缀合物合并，从而形成第一组和第二组聚合物-活性剂缀合物的混合物。
49.权利要求48所述的方法，其进一步包括将第一组和第二组聚合物-活性剂缀合物混合的步骤，以形成基本上均匀的混合物。
50.权利要求49所述的方法，其进一步包括添加药学上可接受的赋形剂的步骤。
51.权利要求50所述的方法，其中所述赋形剂是糖。
52.权利要求48所述的方法，其进一步包括将所述混合物冻干的步骤。
53.一种递送药物制剂的方法，其包括给患者施用治疗有效量的权利要求40所述的组合物的步骤。
54.一种提供活性的最初开始和活性的延迟开始的方法，其中该方法包括以下步骤：
(i)给患者施用第一组聚合物-活性剂缀合物，每种聚合物-活性剂缀合物均含有一种或多种具有一定重均分子量的聚合物；以及
(ii)给患者施用第二组聚合物-活性剂缀合物，每种聚合物-活性剂缀合物均含有一种或多种其重均分子量大于第一组中一种或多种聚合物的重均分子量的聚合物。
55.权利要求54所述的方法，其中所述第一组和第二组先后依次给药。
56.权利要求54所述的方法，其中所述第一组和第二组同时给药。
57.权利要求54所述的方法，其中所述第一组和第二组以注射方式给药。
58.含有权利要求1所述组合物的凝胶剂。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105582547A (zh) * 2016-02-29 2016-05-18 南开大学 一种持续恒速释放药物的药物载体

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2434035T3 (es) 2004-12-27 2013-12-13 Baxter International Inc. Conjugados de polímero-factor von Willebrand
EP1861125A2 (en) * 2005-03-23 2007-12-05 Nektar Therapeutics Al, Corporation Conjugates of an hgh moiety and peg derivatives
WO2007078820A2 (en) * 2005-12-19 2007-07-12 Sun Bio, Inc. Methylmaleimidyl polymer derivatives
JP2009523129A (ja) 2006-01-05 2009-06-18 ユニバーシティ オブ ユタ リサーチ ファウンデーション 神経系を標的する薬理学的物質の性質を改善することに関連する方法および組成物
JP2009508852A (ja) * 2006-01-23 2009-03-05 クワンジュ インスティチュート オブ サイエンス アンド テクノロジー 薬理活性物質と粘膜粘着性高分子とが共有結合されたコンジュゲート及びこれを用いた薬理活性物質の経粘膜運搬方法
US7645860B2 (en) 2006-03-31 2010-01-12 Baxter Healthcare S.A. Factor VIII polymer conjugates
CA2647314A1 (en) 2006-03-31 2007-11-08 Baxter International Inc. Pegylated factor viii
WO2011075611A1 (en) * 2009-12-18 2011-06-23 Aegis Therapeutics, Llc Compositions and methods for non-invasive treatment of chronic complication of diabetes
US20100178307A1 (en) * 2010-01-13 2010-07-15 Jianye Wen Transdermal anti-dementia active agent formulations and methods for using the same
HUE054318T2 (hu) * 2010-11-12 2021-08-30 Nektar Therapeutics IL-2 molekularész konjugátumai és polimer
AU2011343822B2 (en) * 2010-12-15 2017-06-29 Neuroadjuvants, Inc. Neuropeptide analogs, compositions, and methods for treating pain
EP3228325A1 (en) 2011-06-10 2017-10-11 Mersana Therapeutics, Inc. Protein-polymer-drug conjugates
US8815226B2 (en) 2011-06-10 2014-08-26 Mersana Therapeutics, Inc. Protein-polymer-drug conjugates
UA116217C2 (uk) 2012-10-09 2018-02-26 Санофі Пептидна сполука як подвійний агоніст рецепторів glp1-1 та глюкагону
BR112015014510A2 (pt) 2012-12-21 2017-11-21 Sanofi Sa agonistas de glp1/gip duais ou de glp1/gip/glucagon trigonais
EP3054991B1 (en) 2013-10-11 2019-04-03 Mersana Therapeutics, Inc. Protein-polymer-drug conjugates
JP6427564B2 (ja) 2013-10-11 2018-11-21 アサナ・バイオサイエンシズ，リミテッド・ライアビリティ・カンパニー タンパク質−ポリマー−薬物共役体
WO2015077444A1 (en) * 2013-11-20 2015-05-28 King Abdullah University Of Science And Technology Amine functionalized porous network
WO2015086730A1 (en) 2013-12-13 2015-06-18 Sanofi Non-acylated exendin-4 peptide analogues
EP3080149A1 (en) 2013-12-13 2016-10-19 Sanofi Dual glp-1/glucagon receptor agonists
TW201609795A (zh) 2013-12-13 2016-03-16 賽諾菲公司 作為雙重ｇｌｐ－１／ｇｉｐ受體促效劑的艾塞那肽－４（ｅｘｅｎｄｉｎ－４）胜肽類似物
WO2015086729A1 (en) 2013-12-13 2015-06-18 Sanofi Dual glp-1/gip receptor agonists
TW201625670A (zh) 2014-04-07 2016-07-16 賽諾菲公司 衍生自ｅｘｅｎｄｉｎ－４之雙重ｇｌｐ－１／升糖素受體促效劑
TW201625669A (zh) 2014-04-07 2016-07-16 賽諾菲公司 衍生自艾塞那肽－４（Ｅｘｅｎｄｉｎ－４）之肽類雙重ＧＬＰ－１／升糖素受體促效劑
TW201625668A (zh) 2014-04-07 2016-07-16 賽諾菲公司 作為胜肽性雙重ｇｌｐ－１／昇糖素受體激動劑之艾塞那肽－４衍生物
US9932381B2 (en) 2014-06-18 2018-04-03 Sanofi Exendin-4 derivatives as selective glucagon receptor agonists
AR105319A1 (es) 2015-06-05 2017-09-27 Sanofi Sa Profármacos que comprenden un conjugado agonista dual de glp-1 / glucagón conector ácido hialurónico
AR105284A1 (es) 2015-07-10 2017-09-20 Sanofi Sa Derivados de exendina-4 como agonistas peptídicos duales específicos de los receptores de glp-1 / glucagón
WO2023155872A1 (zh) * 2022-02-18 2023-08-24 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 一种实现生物活性分子其活性控释和缓释的方法及药物应用

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4179337A (en) * 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
US5817753A (en) * 1985-12-04 1998-10-06 The Ohio State University Research Foundation Antigenic modification of polypeptides
US4855285A (en) * 1985-12-04 1989-08-08 The Ohio State University Research Foundation Antigenic modification of polypeptides
CA2207093A1 (en) 1994-12-06 1996-06-13 Ryan Pharmaceuticals, Inc. Water soluble ubiquinone compositions, prodrugs, and methods relating thereto
US7238368B2 (en) * 1999-04-23 2007-07-03 Alza Corporation Releasable linkage and compositions containing same
PE20010288A1 (es) * 1999-07-02 2001-03-07 Hoffmann La Roche Derivados de eritropoyetina
US6586398B1 (en) * 2000-04-07 2003-07-01 Amgen, Inc. Chemically modified novel erythropoietin stimulating protein compositions and methods
JP5170931B2 (ja) * 2000-10-16 2013-03-27 中外製薬株式会社 Ｐｅｇ修飾エリスロポエチン
AU2002346686A1 (en) 2001-12-07 2003-06-23 Intermune, Inc. Compositions and method for treating hepatitis virus infection
EP2644206B1 (en) 2003-05-23 2019-04-03 Nektar Therapeutics PEG derivatives containing two PEG chains
WO2005062949A2 (en) 2003-12-23 2005-07-14 Intermune, Inc. Method for treating hepatitis virus infection

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105582547A (zh) * 2016-02-29 2016-05-18 南开大学 一种持续恒速释放药物的药物载体
CN105582547B (zh) * 2016-02-29 2019-07-30 南开大学 一种持续恒速释放药物的药物载体

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Publication number Publication date
WO2005058366A3 (en) 2006-03-23
IL176195A0 (en) 2006-10-05
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JP2007513965A (ja) 2007-05-31
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CA2549011A1 (en) 2005-06-30

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