CN1911427A - 一种治疗慢性泄泻的药物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及消化系统药物的技术领域，具体地说是以中药材提取物为原料制成的一种治疗慢性泄泻的药物。是由：赤石脂、黄连、黄柏、诃子、肉豆蔻、厚朴、建曲、吴茱萸、肉桂、干姜、花椒、川芎、牡蛎、五倍子、乌梅为原料制成胶囊，并在胶囊质量标准中设置厚朴定量指标及其含量测定方法。固肠胶囊具有涩肠止泻、散寒清热、调和气血的功能，临床治疗慢性泄泻、寒热错杂、虚实互见证有效，药物疗效不受年龄、病程、病情的影响，临床试用对心肝肾无损害，并未发现其它不良反应。

Description

一种治疗慢性泄泻的药物

技术领域

本发明涉及消化系统药物的技术领域，具体地说是以中药材提取物为原料制成的一种治疗慢性泄泻的药物。

背景技术

慢性泄泻是临床上常见的一种病症，其病变主要是在肝、脾、肾与胃、大小肠，常与感受外邪、饮食所伤、情致失调及脏腑虚弱等因素有关。用中医治疗慢性泄泻的药物已有文献报道，目前有以下几种：

1.陕西中医学院学报2004年3月第27卷第2期57-60页<溃疡性结肠炎的中医药治疗概况>该文献报道是用香军四逆散加减(柴胡、白芍、枳壳、木香、大黄炭、炙甘草)或是用味军理中汤加减(党参、炮姜、白术、五味子、制大黄、炙甘草)肝脾不和，气滞湿郁型和脾虚湿郁、寒热错杂型进行施治。

2.河北中医2001年11月第23卷第11期878-880页<溃疡性结肠炎的中医药研究进展>该文献报道是用赤石脂、黄连、厚朴、神曲、川椒、乌梅、川芎、干姜、牡蛎治疗溃疡性结肠炎。

中医治疗溃疡性结肠炎的的方法多样，但是还需在开展中药现代药理、生物活性研究基础上，筛选和组方，开发新的疗法好、便于患者服用的新剂型。

发明内容

本发明的目的在于提供一种治疗慢性泄泻的药物。慢性泄泻是临床上常见的一种病症，其病变主要是在肝、脾、肾与胃、大小肠，常与感受外邪、饮食所伤、情致失调及脏腑虚弱等因素有关。其主要病机为肝、脾、肾功能失调，脾失健运，水湿不化，下走大肠，急性泄泻，失治误治，病情迁延不愈，以致更伤中焦(脾胃)，累及下焦(肝肾)，脾肾阳虚而生寒，下元失温而不固，故大便清稀或完谷不化，甚则滑脱不禁，湿浊蕴滞，气血壅阻不畅则腹痛，肠鸣，湿浊宿滞久积不除，郁久化热，则可见寒热错杂，虚实兼见之证，针对本病特点，治当酸涩固肠为首务，辅以关门截流而止泻，温里助阳以散寒，清热燥湿以坚肠，行气活血兼理气。

本发明的解决方案是提供一种治疗慢性泄泻的药物，其特征在于是由下述重量配比的原料制成：

赤石脂(煅)450-550份       黄连225-275份

黄柏225-275份             诃子(去核)225-275份

肉豆蔻(煨)225-275份       厚朴(炙)225-275份

建曲225-275份               吴茱萸(制)180-220份

肉桂180-220份               干姜225-275份

花椒180-220份               川芎180-220份

牡蛎(煅)180-220份           五倍子225-275份

乌梅(去核)225-275份。

所述的治疗慢性泄泻的药物，其特征在于是由下述优选重量配比的原料制成：

赤石脂(煅)500份      黄连250份        黄柏250份

诃子(去核)250份      肉豆蔻(煨)250份  厚朴(炙)250份

建曲250份            吴茱萸(制)200份  肉桂200份

干姜250份            花椒200份        川芎200份

牡蛎(煅)200份        五倍子250份      乌梅(去核)250份。

所述的治疗慢性泄泻的药物，其特征在于是由下述优选重量配比的原料制成胶囊：

赤石脂(煅)500份、黄连250份、黄柏250份、诃子(去核)250份、肉豆蔻(煨)250份、厚朴(炙)250份、建曲250份、吴茱萸(制)200份、肉桂200份、干姜250份、花椒200份、川芎200份、牡蛎(煅)200份、五倍子250份、乌梅(去核)250份。

将以上十五味生药按处方量之比配伍，经挑选去杂物，水洗去泥沙后，烘干，粉碎成细粉，混匀，加适量水，制颗粒，干燥，整粒，分装入胶囊，即得。

一种治疗慢性泄泻的药物的质量标准，其特征在于本品每粒含厚朴酚C₁₈H₁₈Ox与和厚朴酚的总量应不少于0.49mg。

一种治疗慢性泄泻的药物的检验方法，其特征在于其厚朴以厚朴酚(C₁₈H₁₈O₂)与和厚朴酚(C₁₈H₁₈O₂)的含量测定方法是：

含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(75∶25)为流动相；检测波长294nm。理论板数按厚朴酚峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备  精密称取厚朴酚12mg与和厚朴酚5mg，置100ml棕色容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取5ml置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml中含厚朴酚0.06mg，和厚朴酚0.025mg)。

供试品溶液的制备  取装量差异项下的内容物，混匀，精密称取2.0g，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，塞紧，称定重量，超声提取1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

用固肠胶囊进行了药效学试验，观察固肠胶囊对大鼠实验性慢性结肠炎的治疗作用、固肠胶囊对肠运动及吸收功能的影响、固肠胶囊对小鼠醋酸扭体试验的影响材料和方法、固肠胶囊对免疫功能的影响、固肠胶囊抗炎作用的研究，以证实固肠胶囊的临床散寒清热、调和气血、涩肠止泻。用于寒热错杂、虚实互见的肠易激综合征。症见大便清稀或夹有少许白粘冻，或完谷不化，甚则滑脱不禁，腹痛肠鸣，畏寒肢冷，腰膝酸软的作用。

试验结果表明：

1.结肠损伤计数在实验组与对照组间有明显差异，固肠胶囊各组与柳氮磺胺嘧啶组较生理盐水对照组少，有明显的统计学差异(p＜0.01-0.001)，且固肠胶囊中剂量组及固肠胶囊大剂量组损伤计数明显少于柳氮磺胺嘧啶组(p＜0.01-0.05)，说明固肠胶囊对大鼠实验性慢性结肠炎有明显的促愈合作用，且优于柳氮磺胺嘧啶。

2.病理观察结果显示各实验组较生理盐水对照组肠粘膜完整率及肠粘膜轻度损伤率高；固肠胶囊中剂量组及固肠胶囊大剂量组肠粘膜完整率及肠粘膜轻度损伤率较柳氮磺胺嘧啶组高，固肠胶囊小剂量组略低于柳氮磺胺嘧啶组，其病理观察与结肠粘膜损伤计数相一致。

可以认为固肠胶囊对大鼠实验性慢性结肠炎有较好的促愈合作用。

3、固肠胶囊对离体兔肠管因乙酰胆碱的致痉状态有缓解作用，说明其解痉镇痛机理在于通过神经介质使平滑肌解痉，作用与阿托品相仿。

固肠胶囊对离体兔肠管因氯化钡的致痉状态也有缓解作用，说明其解痉机理在于通过影响平滑肌本身的收缩机理使其松驰达到临床止痛作用。

因此固肠胶囊的解痉作用的机理是对抗神经介质和直接作用于平滑肌。

4、固肠胶囊能促进肠道对水及氯离子的吸收。

5、固肠胶囊对小鼠醋酸扭休反应，有与阿托品相似的抑制作用，表示固肠胶囊有止痛作用。

6、通过血清凝集素测定可以反映致敏动物血清中血凝素的水平，后者系循环抗体之一，可以反映动物体液免疫水平。

固肠胶囊有抑制动物血清凝集素的产生的作用，并且有量效关系。大剂量组、中剂量组与空白对照组相比较，抗体积数明显下降，并有统计学意义(p＜0.02)，小剂量组与空白对照组相比较，抗体积数也有下降，但未能显示统计学差异(p＞0.05)。

柳氮磺胺嘧啶是治疗溃疡性结肠炎的经典药物，但在本实验中未能显示出有抑制动物血清凝集素产生的作用，可能其作用机制与体液免疫反应的调节无关。

7、固肠胶囊对大鼠棉球肉芽肿抗炎试验，证实固肠胶囊有与阿斯匹林相似的抑制大鼠棉球植入的肉芽肿形成的作用，对棉球湿重、干重和肉芽肿净重都有不同程度的抑制，说明固肠胶囊有一定的抗炎作用。

8、固肠胶囊对小鼠二甲苯致炎有显著的消炎作用，与阿斯匹林相似。

9、固肠胶囊对甲醛致大鼠足趾肿胀试验的证实：

1)、大鼠足趾在甲醛致炎后，在3小时达到肿胀高峰，以后逐渐降到致炎前正常水平。

2)、中药固肠胶囊有阿斯匹林相似的抑制甲醛引起的大鼠足趾肿胀的作用，有量效变化，大剂量(2.0g/kg)作用较中剂量(1.0g/kg)作用更明显。

通过固肠胶囊治疗慢性泄泻II期临床，对固肠胶囊治疗慢性泄泻(寒热错杂，虚实互见证)的疗效及安全性进行考察，与固本益肠片比较其优劣。试验方法：试验分两部分，第一部分采用随机、双盲双模拟对照试验，第二部分采用非对照试验。试验结果：双盲双模拟对照试验共选择病例206例，剔除3例，共观察合格病例203例，其中试验组102例，显效以上60例，显效率58.82％，对照组101例，显效以上46例，显效率45.54％，两组比较有显著性差异(P＜0.05)；非对照试验选择病例208例，剔除4例，共观察合格病例204例，显效以上122例，显效率59.80％，试验组合并显效率59.48％。试验中未发现固肠胶囊、固本益肠片对主要脏器的损害及其它副作用。采用双盲双模拟对照试验与非对照试验两种方法，考察固肠胶囊治疗慢性泄泻的疗效与安全性。

采用固肠胶囊选择寒热错杂，虚实互见的慢性泄泻进行临床试验，因为试验组与对照组在例数上不等，所以采用双盲双模拟对照试验和非对照试验两种方式进行，在双盲双模拟对照试验中，试验组显效率58.82％，对照组显效率45.54％，组间比较有显著性差异(P＜0.05)。非对照试验组显效率为59.80％，对照试验组与非对照试验组疗效齐同，无显著性差异(P＞0.05)，试验组合并显效率为59.48％，与对照组比较具有显著性差异(P＜0.01)。治后慢性泄泻各症状为大便次数、大便性状等症状均有明显改善，药物疗效不受年龄、病程、病情的影响，对心肝肾等主要脏器无损害，未发现其它副作用。

临床观察证明了固肠胶囊具有涩肠止泻、散寒清热、调和气血的功能，治疗慢性泄泻、寒热错杂、虚实互见证有效，药物疗效不受年龄、病程、病情的影响，临床试用对心肝肾无损害，并未发现其它不良反应。

为了严格控制药品的质量，确保疗效，制定了固肠胶囊生产用质量标准如下：

固肠胶囊Guchang Jiaonang

【处方】赤石脂(煅) 黄连 黄柏 诃子(去核) 肉豆蔻(煨) 厚朴(炙) 建曲 吴茱萸(制) 肉桂 干姜 花椒 川芎 牡蛎(煅) 五倍子 乌梅(去核)

制法：以上十五味生药粉碎成细粉，混匀，加适量水，制颗粒，干燥，整粒，分装入胶囊，制成1000粒，即得。

性状：本品为胶囊剂，内容物为棕黄色至棕褐色颗粒与粉末；味辛、苦。鉴别：(1)取本品少量，置显微镜下观察：韧皮纤维鲜黄色，成束或散在，有的与石细胞相连接，呈纺锤或梭形，末端斜尖、钝圆或狭细，长136～185μm，直径27～37μm，壁厚、木化、孔沟明显，纤维束周围薄壁细胞中含草酸钙方晶，形成晶纤维，方晶至为密集，含晶细胞的壁不均匀木化增厚。

(2)取本品内容物2g，加乙酸乙酯10ml，超声提取20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取川芎对照药材0.2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液4μl、对照药材溶液2μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯(9∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。

(3)取本品内容物2g，加三氯甲烷10ml，超声提取20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取吴茱萸对照药材0.2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液4μl、对照药材溶液2μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。

(4)取本品内容物2g，加无水乙醇10ml，超声提取20分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。另取桂皮醛对照品，加无水乙醇制成每1ml含1μl的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液4μl、对照品溶液1μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(85∶15)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼乙醇试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。

(5)取本品内容物2g，加乙酸乙酯10ml，超声提取20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取花椒对照药材0.2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液4μl、对照药材溶液2μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯(17∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。

检查：重金属 取本品1.0g，依法检查(中国药典2005年版一部附录IXE第二法)，含重金属不得过百万分之二十五。

其他 应符合胶囊剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录IL)。

含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(75∶25)为流动相；检测波长294nm。理论板数按厚朴酚峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备  精密称取厚朴酚12mg与和厚朴酚5mg，置100ml棕色容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取5ml置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml中含厚朴酚0.06mg，和厚朴酚0.025mg)。

供试品溶液的制备：取装量差异项下的内容物，混匀，精密称取2.0g，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，塞紧，称定重量，超声提取1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液。

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每粒含厚朴酚(C₁₈H₁₈O₂)与和厚朴酚(C₁₈H₁₈O₂)的总量应不少于0.49mg。

功能与主治：散寒清热、调和气血、涩肠止泻。用于寒热错杂、虚实互见的肠易激综合征。症见大便清稀或夹有少许白粘冻，或完谷不化，甚则滑脱不禁，腹痛肠鸣，畏寒肢冷，腰膝酸软。

用法与用量：口服。一次4粒，一日3次。4周为一疗程。

注意事项：1.孕妇慎用。2.服药期间忌食生冷、辛辣、油腻之物。

规格：每粒装0.375g。

贮藏：置阴凉干燥处。

有效期：24个月。

固肠胶囊质量标准说明：

1.显微鉴别：

(1)黄连的鉴别：取黄连药材粉末少量，置于载玻片上，加2滴水合氯醛溶液研磨均匀，盖上盖玻片，在酒精灯上透化后，置40×10倍显微镜下观察显示：韧皮纤维鲜黄色，成束或散在，有的与石细胞相连接。呈纺缍或梭形，末端斜尖、钝圆或狭细，长136～185um，直径27～37um，壁厚、木化、孔沟明显。

取固肠胶囊内容物少量，同上操作，显示黄连的显微特征，说明样品中含有黄连。

(2)黄柏的鉴别：取黄柏药材粉末少量，置于载玻片上，加2滴水合氯醛溶液研磨均匀，盖上盖玻片，在酒精灯上透化后，置40×10倍显微镜下观察显示：纤维束周围薄壁细胞中含草酸钙方晶，形成晶纤维，方晶至为密集，含晶细胞的壁不均匀木化增厚。

取固肠胶囊内容物少量，同上操作，显示黄柏的显微特征，说明样品中含有黄柏。

2.薄层鉴别：

(1)川芎定性鉴别：供试品溶液的制备：取本品内容物4g，加乙酸乙酯20ml，超声波提取20分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。

对照药材溶液的制备：称取川芎对照药材0.2g，按供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。

川芎阴性对照溶液的制备：除川芎外，按处方配制诸药，粉碎，称取4g，照供试品溶液的制备方法操作，作为川芎阴性对照溶液。

照薄层色谱法(《中国药典》95年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各4ul、2ul、4ul，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以苯--乙酸乙脂(9∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相同的位置上显相同颜色的荧光斑点，而川芎阴性对照色谱中则无此斑点。说明该方法专属、可靠。

(2)吴茱萸定性鉴别：供试品溶液的制备：取本品内容物4g，加氯仿20ml，超声波提取20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。

对照药材溶液的制备：称取吴茱萸对照药材0.2g，按供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。

吴茱萸阴性对照溶液的制备：除吴茱萸外，按处方配制诸药，粉碎，称取4g，照供试品溶液的制备方法操作，作为吴茱萸阴性对照溶液。

照薄层色谱法(《中国药典》95年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各4ul、2ul、4ul，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以正丁醇--冰醋酸--水(7∶1∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相同的位置上显相同颜色的荧光斑点，而吴茱萸阴性对照色谱中则无此斑点。说明该方法专属、可靠。

(3)肉桂定性鉴别：

供试品溶液的制备：取本品内容物4g，加无水乙醇20ml，超声波提取20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。

对照品溶液的制备：精取桂皮醛对照品1ul，用1ml甲醇溶解制成对照品溶液。

肉桂阴性对照溶液的制备：除肉桂外，按处方配制诸药，粉碎，称取4g，照供试品溶液的制备方法操作，作为肉桂阴性对照溶液。

照薄层色谱法(《中国药典》95年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各4ul、1ul、4ul，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)--乙酸乙脂(17∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼乙醇液。供试品色谱中，在与对照品色谱相同的位置上显相同颜色的斑点，而肉桂阴性对照色谱中则无此斑点。说明该方法专属、可靠。

(4)花椒定性鉴别：供试品溶液的制备：取本品内容物4g，加乙酸乙酯20ml，超声波提取20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。

对照药材溶液的制备：称取花椒对照药材0.2g，按供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。

花椒阴性对照溶液的制备：除花椒外，按处方配制诸药，粉碎，称取4g，照供试品溶液的制备方法操作，作为花椒阴性对照溶液。

照薄层色谱法(《中国药典》95年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各4ul、2ul、4ul，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以石油醚(30～60℃)--乙酸乙脂(17∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相同的位置上显相同颜色的荧光斑点，而花椒阴性对照色谱中则无此斑点。说明该方法专属、可靠。

[检查]检查内容包括：水份、装量差异、崩解时限、卫生学检查(卫生部)、鉴别等主要依据《中国药典》95年版一部附录IL.胶囊剂项下规定。卫生部药品检查标准及本文质量标准中规定的鉴别内容、方法。

	水分(％)	重量差异	崩解时限(min)	砷盐(ppm)	重金属(ppm)	卫生学检查(个/克)
										细菌	霉菌	致病菌	活螨
						一批二批三批	5.905.555.27	合格合格合格	191618					＜2＜2＜2	＜20＜20＜20	24003500500	＜10＜10＜10	未检出未检出未检出	未检出未检出未检出

[含量测定]取装量差异项下的内容物，混匀，精密称取2.0g，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，塞紧，称定重量，超声提取1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液。另取厚朴酚与和厚朴酚对照品，加甲醇制成每1ml含厚朴酚0.06mg，和厚朴酚0.025mg浓度的混合溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法(中国药典95年版一部附录IA)试验，采用ODS色谱柱，波长294nm，流动相为75％甲醇溶液，流量0.4ml/min，对照品与供试品的进样量均为10ul，测量相应的吸收面积，计算，即得。

本品每粒含厚朴酚(C₁₈H₁₈O₂)与和厚朴酚(C₁₈H₁₈O₂)的总量应不少于0.49mg。

固肠胶囊厚朴酚与和厚朴酚含量测定方法学研究：

固肠胶囊由赤石脂、黄连、黄柏、厚朴等十五味中药组成，具有涩肠止泻、散寒清热、调和气血之功效。为了加强产品质量控制手段，选用处方中臣药厚朴所含厚朴酚与和厚朴酚的总量为定量指标，采用HPLC法测定其含量，作为判断和控制产品质量优劣的依据。

实验部分：

一、仪器及药品

1.仪器条件：

仪器：岛津LC-6A高效液相色谱仪

色谱柱：ODS-5 id4.6×75mm(理论塔板数＞3000)

检测器：SPD-6AV 0.08AUFS

流动相：75％甲醇    波长：294nm    进样量：均为10ul

柱温：室温    流速：0.4ml/min

2.试剂与药品：

厚朴酚与和厚朴酚对照品：均购自中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号：0729-9605，0730-9204

纯度检查：精密称取厚朴酚与和厚朴酚对照品适量，分别加甲醇制成每1ml含厚朴酚0.68mg，和厚朴酚0.27mg浓度的对照品溶液。精密吸取厚朴酚与和厚朴酚对照品溶液各15ml，照高效液相色谱法(中国药典95年版一部附录IA)试验，其纯度分别为99.9％和99.0％(见图1，图2)。

固肠胶囊样品：由天津达仁堂制厂提供

甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。

二、实验方法考察

1.提取条件的考察

1.1提取溶媒的选定：本实验对甲醇、乙醇、50％乙醇三种不同的提取溶媒进行考察，结果甲醇的提取率最高，故选择甲醇为最佳提取溶媒。

不同溶媒	甲醇	乙醇	50％乙醇
				厚朴酚与和厚朴酚总含量(％)	0.356	0.293	0.241

1.2提取方法的选择：本实验采用以甲醇为提取溶媒，以回流、振荡、超声波三种方法提取相同时间进行考察，结果以超声波提取率最高，且操作简便、省时，峰形及分离度好，故选择甲醇超声波提取为最佳提取方法。

提取方法	回流	振荡	超声波
				厚朴酚与和厚朴酚总含量(％)	0.351	0.327	0.368

1.3提取时间的选定：以甲醇为提取溶媒，超声15，30，60，90min，结果以超声60min厚朴酚与和厚朴酚总含量最高。

提取时间(min)	15	30	60	90
					厚朴酚与和厚朴酚总含量(％)	0.263	0.305	0.347	0.346

2.测定条件的选择

2.1波长的选择：应用紫外分光光度计(UV-2100)测定厚朴酚与和厚朴酚的紫外吸收光谱图，确定在294nm处有最大吸收，故选择294nm为检测波长(见图3)。

2.2流动相的选择：

参考文献报导的几组流动相系统均不适合本样品，经反复摸索实验，以甲醇-水(75∶25)为最佳，和厚朴酚与厚朴酚的保留时间分别为7min和10min左右，样品中厚朴酚与和厚朴酚的分离效果最好。

3.空白干扰实验：

按样品处方称取除厚朴的中药材适量，按供试品溶液的制备方法制成空白对照溶液，用于样品相同色谱条件测定，同时测定样品，结果表明空白对照溶液色谱图中在厚朴酚与和厚朴酚吸收峰位置上无干扰(见图4)。

4.线性关性考察：

精密称取厚朴酚与和厚朴酚对照品适量，用甲醇溶解制成每1ml含厚朴酚0.12mg，和厚朴酚0.05mg的混合对照品溶液。在上述色谱条件下，精密吸取对照品溶液1、3、5、7、9、11ul，依次进样分析。测得吸收面积如下：

和厚朴酚：

进样量(ug)0.05     0.15     0.25     0.35     0.45      0.55

吸收面积  11073    37363    62935    87319    112830    137394

厚朴酚：

进样量(ug)0.12     0.36     0.60     0.84     1.08      1.32

吸收面积  21192    72036    121657   168570   216698    264835

经统计学计算得和厚朴酚回归方程为Y＝-814.4+252111.4X(r＝0.9999)，和厚朴酚在0.05～0.55ug之间成线性关系。厚朴酚回归方程为Y＝-1473.7+202275X(r＝0.9999)，厚朴酚在0.12～1.32ug之间成线性关系。以含量为横坐标，峰面积积分为纵坐标，绘制标准曲线(见图5)

根据厚朴酚与和厚朴酚标准曲线色谱图所得回归方程标准曲线，采用外标一点法进行定量。

5.精密度试验：对同一厚朴酚与和厚朴酚混合对照品溶液连续进样5次，每次5u1，测定吸收面积分别为：

和厚朴酚：76012    76472    76494    75952    76052

变异系数RSD(％)＝0.35

厚朴酚：  146425   147270   147506   146060   146343

变异系数RSD(％)＝0.43

6.重复性试验：取同一批样品，精密称取6份，按拟定的含量测定方法进行提取、分析、测定，结果为：

取样量(g)	2.0017	1.9186	2.0663	1.9451	1.8724	1.9905
							含量(mg/g)	2.00	1.97	2.04	2.01	2.02	2.03
RSD(％)＝1.23

7.回收率试验：取厚朴酚含量1.52mg/g，和厚朴酚含量0.50mg/g的固肠胶囊样品，倾出内容物混匀，精密称取6份，每份1g，分别加入厚朴酚与和厚朴酚混合对照品溶液(厚朴酚0.153mg/ml，和厚朴酚0.050mg/ml)10ml，依法提取、测定，结果如下：

厚朴酚回收率测定结果(n＝6)

取样量(g)	原含量(mg)	加入量(mg)	测得量(mg)	回收率(％)
					1.00101.00751.00691.00441.00571.0066	1.52151.53141.53051.52671.52871.5300	1.531.531.531.531.531.53	3.02373.06383.04613.07833.05423.0697	98.18100.1699.06101.4199.71100.63
平均回收率(％)＝99.86  RSD(％)＝1.15

和厚朴酚回收率测定结果(n＝6)

取样量(g)	原含量(mg)	加入量(mg)	测得量(mg)	回收率(％)
					1.00101.00751.00691.00441.00571.0066	0.50050.50380.50350.50220.50290.5003	0.500.500.500.500.500.50	0.99501.01411.01110.99801.00880.9958	98.90102.06101.5299.16101.1899.10
平均回收率(％)＝100.32  RSD(％)＝1.41

8.稳定性试验：

将制备好的供试品溶液进行分析，以后每2小时进样一次，重复4次，吸收面积积分值如下：

时间(小时)	0	2	4	6	8	RSD
							和厚朴酚吸收面积厚朴酚吸收面积	3065475629	3058575222	3046974761	3024474762	2933572517	1.78％1.62％

结果表明，供试品溶液的吸收面积在8小时内基本无变化，说明样品稳定。

9.固肠胶囊中厚朴酚与和厚朴酚总含量的测定

供试品溶液的制备：取本品10粒，倾出内容物，混匀，精密称取2.0g，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，塞紧，称定重量，超声波提取1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45um滤膜过滤，即得。

对照品溶液的制备：称取厚朴酚与和厚朴酚对照品，加甲醇制成每1ml含厚朴酚0.06mg，和厚朴酚0.025mg浓度的混合溶液，即得。依照拟定方法，共测定了10批固肠胶囊的含量，结果如下：

批号	和厚朴酚(mg/g)	厚朴酚(mg/g)	含量总和(mg/g)
				970101970102970103980201980202980203980401990605990706990907	0.4810.4800.5380.5430.5020.5010.4640.4680.3110.3060.4370.4410.3310.3240.5190.5220.4460.4550.6140.605	1.4481.4431.6181.6341.5281.5191.4071.4091.0411.0261.3121.3331.0130.9961.6081.5901.3711.3881.8301.856	1.931.922.162.182.032.021.871.881.351.331.751.771.341.322.132.111.821.842.442.46

本品含厚朴以厚朴酚与和厚朴酚的总量计算不得低于1.3mg/g。“质量标准正文中规定本品每粒含厚朴酚(C₁₈H₁₈O₂)与和厚朴酚(C₁₈H₁₈O₂)的总量应不少于0.49mg。”

经过对精密度、重现性的试验考察，确定了采用HPLC法测定含量，重现性好，能快速准确的检测药品的质量。

发明效果：选用处方中臣药厚朴所含厚朴酚与和厚朴酚的总量为定量指标，采用HPLC法测定其含量，并在色谱条件与系统适用性试验及供试品溶液的制备方面作出合理的选择，作为判断和控制产品质量优劣的依据，加强了产品质量控制手段。

附图说明

图1是厚朴酚标准曲线图。

图2是和厚朴酚标准曲线图。

图3是厚朴酚、和厚朴酚紫外吸收光谱图。

图4是厚朴酚与和厚朴酚标准品、固肠胶囊样品及厚朴阴性色谱图。

图5是厚朴酚与和厚朴酚标准曲线色谱图。

具体实施方式

实施例1：优选重量配比的原料制备胶囊剂的方法：用赤石脂(煅)500g、黄连250g、黄柏250g、诃子(去核)250g、肉豆蔻(煨)250g、厚朴(炙)250g、建曲250g、吴茱萸(制)200g、肉桂200g、干姜250g、花椒200g、川芎200g、牡蛎(煅)200g、五倍子250g、乌梅(去核)250g

制法：将以上十五味生药按处方量之比配伍，经挑选去杂物，水洗去泥沙后，烘干。混匀，加适量水，制颗粒，干燥，整粒，分装入胶囊，制成10000粒，即得。每粒胶囊含生药0.375g，应出成品10000粒，0.375g/粒。

本发明药物功能与主治：散寒清热、调和气血、涩肠止泻。用于寒热错杂、虚实互见的肠易激综合征。症见大便清稀或夹有少许白粘冻，或完谷不化，甚则滑脱不禁，腹痛肠鸣，畏寒肢冷，腰膝酸软。用法与用量：口服，一次4粒，一日3次。

Claims (5)

1、一种治疗慢性泄泻的药物，其特征在于是由下述重量配比的原料制成：

赤石脂(煅)450-550份          黄连225-275份

黄柏225-275份                诃子(去核)225-275份

肉豆蔻(煨)225-275份          厚朴(炙)225-275份

建曲225-275份                吴茱萸(制)180-220份

肉桂180-220份                干姜225-275份

花椒180-220份                川芎180-220份

牡蛎(煅)180-220份            五倍子225-275份

乌梅(去核)225-275份。

2、根据权利要求1所述的治疗慢性泄泻的药物，其特征在于是由下述优选重量配比的原料制成：

赤石脂(煅)500份      黄连250份          黄柏250份

诃子(去核)250份      肉豆蔻(煨)250份    厚朴(炙)250份

建曲250份            吴茱萸(制)200份    肉桂200份

干姜250份            花椒200份          川芎200份

牡蛎(煅)200份        五倍子250份        乌梅(去核)250份。

3、根据权利要求1所述的治疗慢性泄泻的药物，其特征在于是由下述优选重量配比的原料制成胶囊：

赤石脂(煅)500份、黄连250份、黄柏250份、诃子(去核)250份、肉豆蔻(煨)250份、厚朴(炙)250份、建曲250份、吴茱萸(制)200份、肉桂200份、干姜250份、花椒200份、川芎200份、牡蛎(煅)200份、五倍子250份、乌梅(去核)250份，

将以上十五味生药按处方量之比配伍，经挑选去杂物，水洗去泥沙后，烘干，粉碎成细粉，混匀，加适量水，制颗粒，干燥，整粒，分装入胶囊，即得。

4、一种治疗慢性泄泻的药物的质量标准，其特征在于本品每粒含厚朴酚C₁₈H₁₈O₂与和厚朴酚的总量应不少于0.49mg。

5、一种治疗慢性泄泻的药物的检验方法，其特征在于其厚朴以厚朴酚(C₁₈H₁₈O₂)与和厚朴酚(C₁₈H₁₈O₂)的含量测定方法是：

含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定；

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(75∶25)为流动相；检测波长294nm。理论板数按厚朴酚峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备：精密称取厚朴酚12mg与和厚朴酚5mg，置100ml棕色容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取5ml置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml中含厚朴酚0.06mg，和厚朴酚0.025mg)；

供试品溶液的制备：取装量差异项下的内容物，混匀，精密称取2.0g，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，塞紧，称定重量，超声提取1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

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