CN1861105A - 治疗人乳头瘤病毒感染的中药 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及治疗人乳头瘤病毒感染的中药，所述中药由红花、木贼等原料药制成。经临床疗效及实验室药效学的研究，本发明药物具有极强的特异性的破坏人乳头瘤病毒的功能，能有效清除体内人乳头瘤病毒。
Description
技术领域：
本发明涉及治疗人乳头瘤病毒感染的中药。
背景技术：
人乳头瘤病毒(Human papilloma virus，简称HPV)属DNA类病毒，其生物特性及其生物反应为：呈正20面体，球形粒的直径约50-55nm，人是它唯一的宿主，能引起人类的各种疣，如寻常疣、扁平疣、跖疣、甲缘疣及生殖器疣(如尖锐湿疣)等，利用核酸杂交技术可将其分为28个型，不同型别可引起同一种疣，而一种疣可由多个型别的HPV所引起。
HPV与艾滋病病毒一样，自身没有繁殖能力，需要嵌入人的DNA中搭车繁殖，与其它病原体不同的是，它并不引发炎症性反应，而是促发宿主细胞的增殖，呈肿瘤性生长，并可导致恶性肿瘤的发生，如皮肤癌、舌癌等，尖锐湿疣有10％的癌变率，上个世纪末，国际上已确认宫颈上皮HPV的慢性感染是宫颈癌的病因。HPV目前组织培养尚未成功，也未发现可供实验的模型动物。
传染途径：HPV是通过直接接触传染，例如尖锐湿疣主要是通过性接触传染，因此它在艾滋病的传播中起到推波助澜的作用。尖锐湿疣是危害社会的性病中人数最多的一种。由于它在生殖器内外呈肿瘤样生长，给人们生活带来极大不便与家庭的不和，它所引起的恶性肿瘤将致人于死命。
HPV在人体内可有一个或长或短的潜伏期或带毒状态，在此期内，没有任何临床症状，但却有传染性，成为潜在的传染源。而宫颈的长期HPV的慢性感染，终将出现宫颈癌。
目前对人乳头瘤病毒感染还没有能够杀死HPV的药物，现有技术在治疗各种疣病时只能采取破坏疣体的办法，如激光、冷冻、微波等物理方法，或者使用鬼臼素、斑蝥素、平阳霉素等药物腐蚀组织等。这些方法不但过程痛苦，还有创面形成，不易愈合，而且因不能杀灭病毒而极易复发。因此，需要有一种特效的，可杀灭病毒的药物问世。
发明内容：
本发明的目的是开发一种以中药为活性成分的治疗人乳头瘤病毒感染的药物。
本发明开发的治疗人乳头瘤病毒感染的中药复方由如下重量份的原料药制成：
红花6-60、木贼5-100。
上述原料药的优选配比是：红花10-60、木贼5-30；
最佳配比是：红花10、木贼5。
上述复方中君药不变，还可以加入其它药物，组合成多种组方，发挥不同程度的功效。
如上述复方中可另加入香附10-30份。
经实验室和临床研究发现，单用红花一味药或单用木贼一味药，也有较好的药效。
此外，研究还发现，当红花与香附配伍，或者木贼与香附配伍，也都得到了较好的效果。其用药比例为：
红花∶香附＝2∶1，或者木贼∶香附＝2∶1
因此，本发明所述的治疗人乳头瘤病毒感染药物可以有如下多种配伍方式：
1.红花
2.木贼
3.红花+木贼
4.红花+香附
5.木贼+香附
6.红花+木贼+香附
从中医理论讲，红花和木贼具有理气活血之功；从西医理论讲，红花和木贼具有杀灭病毒作用。
本发明药物可以采用中药制剂的常规方法制备成任何常规的制剂，例如将原料药物进行粉碎后加工成片剂、丸剂，或水煎，或用醇或醇水混合物提取，然后浓缩水煎液或提取液，精制成为中药提取物。将提取物与药物可接受的各种载体、辅剂配伍，用本领域技术人员常规的制药方法，制备成各种制剂。
本发明药物的剂型可以是各种口服剂，如传统的水煎剂、浓缩口服液、粉剂、颗粒剂、胶囊、片剂、冲剂等。也可以制成外用药剂，包括中药硬膏、醑剂、软膏、乳膏剂、涂膜剂、栓剂、气雾剂等，于感染的局部使用。
本发明所述的治疗人乳头瘤病毒感染药物可用于下述疾病或患者：尖锐湿疣、尖锐湿疣及其宻切接触的性伴侣、家属；各种HPV携带者，包括宫颈、尿道HPV携带者；尖锐湿疣及宫颈的早期癌变患者；各种常见的皮肤疣，如寻常疣、甲缘疣、跖疣、扁平疣及痘病毒感染的传染性软疣。
经临床疗效及实验室药效学的研究，本发明药物具有极强的特异性的破坏人乳头瘤病毒(HPV)的功能，经口服进入人体，能有效清除体内HPV，复发率极低，临床上应用不但方便简单，没有痛苦，而且有极高的治愈率与极低的复发率。
尖锐湿疣的临床研究证明，对典型的尖锐湿疣病人89例及8例经过FQ-PCR-HPV检测证实为阳性的带毒者进行了临床疗效的观察，并在实验室进行了药效学的研究。结果显示：97例治愈95人，治愈率97.95％，复发2人，复发率2，1％。病毒携带者8人，经治疗后，HPV全部阴转，经过充分的长期随访未见复发。在实验室，在有阳性对照的条件下，含有HPV的混悬液中，加入定量药物后，无论HPV 6，11或HPV 16，18，24小时后均不能再检出HPV的DNA，说明本发明的药物在体内可清除HPV的治疗机制。由于具备能在体内清除HPV的功能，因此不仅能治愈有临床症状的病人，而且对尚未发病的性伴侣、带毒者以及处于亚临床状态的患者均能有效清除体内病毒，从而起到了预防及消除传染源的作用，在流行病学上有重要意义。
由于HPV的慢性感染是宫颈癌的重要原因，本发明药物在清除宫颈HPV后，还可以起到预防宫颈癌的作用。
在研究中，我们还发现它对HPV感染的其它皮肤病及传染性软疣也有很好的效果，此外对因HPV感染而致的恶性倾向性疾病，如鲍温样丘疹病、宫颈的CIN的治疗也极具研究价值。
以下是本发明进行的药效学研究等研究，所述“疣毒清”指本发明的中药组合物，“AC”指尖锐湿疣。
具体实施方式：
实施例1 实验室药效学的研究
实验药物：配方1(以下称为“疣毒清”)，配方为(重量份)：红花：6，木贼：3，香附：2，水煎剂。
将含有HPV的试液中加入“疣毒清”，用FQ-PCR技术定时检测，以考察其对HPV的杀灭能力。
1材料与方法
1.1HPV来源：HPV6、11取自未经治疗的AC病人的疣体，经NS清洗后在无菌条件下研磨成组织匀浆备用。HPV 16、18取自病人皮损的清洗液。
1.2中药样品：将“疣毒清”及对照中药制成与临床应用相同的水煎剂。(对照中药成分：1号：当归：30克，白术：15克。2号：茯苓：30，甘草：15。)
1.3主要仪器：PE-5700型荧光定量PCR仪及相关电脑软件。
1.4PCR引物及荧光探针：来自经国家批准上市的中山医科大学达安基因诊断中心提供的HPV6、11，HPV16、18型FQ-PCR诊断试剂盒，其敏感度为25个拷贝。
2实验方法
2.1取AC组织匀浆或清洗液0.6ml，分别加入中药试验样本2.4ml，对照管则加入NS 2.4ml，在4℃下，按时提取DNA，每次试验同时设阴性及阳性对照管。
2.2FQ-PCR反应步骤：采用常规碱裂解法提取DNA，每次取0.2ml加入薄壁反应管中，同时加入一定量的引物、F-probe、dNTP、DNA聚合酶及缓冲液等，放入PE-5700荧光PCR仪，93℃2min予变性后，按93℃45s、55℃120s反复循环40次，定量结果由电脑软件自动分析，计算出其初始拷贝数。
3结果
3.1第一次试验，加入“疣毒清”24小时后即不能测出HPV6、11，而对照管及中药对照管直至第13天仍保持原始高浓度拷贝数(表1)
表1 第一次试验结果(HPV-6，11)
| 时间 | 对照管 | 1号中药对照管 | 2号中药对照管 | 疣毒清管 |
| 24hrs | 2.8×107 | 5×107 | 1.5×107 | 0 |
| 第5天 | 1.86×106 | 1.97×106 | 1.88×106 | 0 |
| 第8天 | 5.6×107 | 8.2×106 | 1.3×106 | 0 |
| 第13天 | 1.6×107 | 2.1×106 | 5.3×106 | 0 |
表2 第2次实验结果(HPV-6、11)
| 时间 | 对照管 | 1号中药对照管 | 2号中药对照管 | 疣毒清管 |
| 24hrs | 8.9×104 | 3.6×104 | 1.2×104 | 0 |
| 48hrs | 1.56×105 | 2.6×104 | 1.2×105 | 0 |
| 笫7天 | 1.4×104 | 3.7×104 | 2.8×105 | 0 |
表3 第3次实验结果(HPV-16、18)
| 时间 | NS对照管 | 疣毒清对照管 |
| 24hrs | 1.7×104 | 0 |
| 72hrs | 6.4×104 | 0 |
3次试验的结果均一致，说明试验的可重复性及可信性。实验也证明疣毒清在试管内对HPV-6、11及HPV-16、18均有相同的杀灭效果，具有广谱的杀灭HPV的能力。下述实验证明了在疣毒清试管内对HPV-DNA与一般化学性灭菌剂无选择性地破坏不同，而是与抗生素等药物一样具有选择性灭菌作用，我们选择了HBV作为对照进性了考察。
| 时间 | 对照管 | HBV试验管 | 疣毒清管 |
| 24hrs | 3.6×105 | 2.8×105 | 0 |
试验证明‘疣毒清’在体外对HBV的DNA没有破坏作用，而对HPV-DNA却有明显的破坏作用，因此它的杀灭HPV的作用是特异性的，与抗生素的作用相同。
实施例2 AC及带毒者97例的临床研究
1临床资料
1.1AC 97例，男65人，女32人。疗前曾接受过其它治疗复发而入选者共计31人，占全部AC的32.29％。
1.2发病部位：以部位统计
包皮：20例
龟头：12例
冠状沟：23例
阴茎：7例
尿道口内外：8例
肛周：10例
阴道：19例
阴道外：14例
宫颈：2例
1.3疣体数量：
计数标准：
＜3个：十
＞3-10个：卄
＞10个或皮疹融合：卅
巨大型：卌
除8名带毒者外，89名尖锐湿疣病人疣体＞卅以上者共30人，占有疣体病人的31.25％
1.4无临床症状，但FQ-PCR-HPV检测阳性者8人，男3人，女5人，其原始拷贝数：
HPV6，11：4.53×108 2.61×106 4.96×106 6.72×104 1.6×102 3.77×102
HPV16，18：5.16×104 6.72×104
2服药方法：每日口服“疣毒清”一付，分二次服用，服药前后禁饮茶。
3入选条件：所有参加治疗者均不能接受其它类型治疗，否则不列入观察之中。治疗时间以满6个月为标准，坚持6个月治疗而未愈者，判为无效。
4禁忌症：妊娠或有出血性疾病者禁忌。
5疗效判断标准
痊愈：全部疣体脱落或FQ-PCR-HPV为0拷贝。
无效：少数疣体脱落或FQ-PCR-HPV阳性。
6结果
6.1治疗效果：97人中
治愈：95人治愈率：97.93％
无效：2人，占2.06％
31名经其它治疗复发的病人全部治愈。
6.2治愈时间分析，95名治愈者中：
≤1个月治愈者：24人，占25.26％
≤2个月治愈者：累计47人，占49.47％
≤3个月治愈者：累计61人，占64.21‰
≤4个月治愈者：累计81人，占85.26％
＜6个月治愈者：91人，占95.79％
＞7个月治愈者：4人，占4.21％
平均治愈时间为2.74个月
6.38名带毒者，其中3人于1个月内FQ-PCR-HPV阴转，2人于2个月内阴转，3人于4个月内阴转。
6.4治愈的95人中，37人治疗后进行了FQ-PCR-HPV检测，占治愈者的38.94％，他们不但达到临床治愈而且FQ-PCRHPV也全部阴转。其中24人作了疗前后HPV的对比檢测，占全部治愈者的25.26％
6.5随访及复发
6.5.195名治愈者中除3人正进入随访期，不足3个月外，其馀患者随访期均在3个月以上，占96.84％；91人随访期超过6个月，占96.8％，83人随访超过1年，占88.29％，超过3个月的常规随访期。
6.5.2复发：复发2人，复发率2.1％。
7讨论
7.1在体外药效学实验中，含有HPV的试管中，加入“疣毒清”，24小时后即不再能扩增出HPV拷贝，说明“疣毒清”是一种能有选择性的破坏HPV生命基础DNA的药物。这种破坏作用与加热或化学杀菌剂不同，它是有特异性的，以HBS代替HPV，疣毒清并不能破坏它的DNA。临床37名治愈者疗后FQ-PCR-HPV的阴转，也说明它的治疗机制是通过口服吸收后在体内杀灭病毒而取得疗效，这也可以解释它能取得高治愈率与低复发率的原因。
7.2一般随访期为3个月。本组患者随访期超过6个月者占96.8％，因此其复发率是可靠的。
7.3临床研究表明。“疣毒清”具有极高的治愈率(97.91％)，以2个月为一个疗程计算，一个疗程的治愈率为44.21％，二个疗程的治愈率为85.26％。
研究发现，超过6个月未达到治愈的病人，继续坚持治疗仍可以获得治愈。
7.4虽然复发性尖锐湿疣病人在临床上显示它对常规治疗上的顽固与抵抗，但疣毒清对它们仍保持很好的效果。30名入选的复发病人的各个疗程治愈率与初发病人没有差别，本组有一例龟头及冠状沟宻布许多尖锐湿疣，曾作过12次冷冻，每次均于术后1周复发，然而服用疣毒清2月即愈，不再复发，并未显示有任何治疗障碍。
7.5治愈的95名患者中有2例复发，2例的病情均不重，疣体的数量在1-3个，均非复发病人，经治后疣体脱落时间亦不长，1例为1个月，另例为4.5个月，2例的共同之处为疣体脱落后没有进行充分的巩固治疗，没有检测体内病毒是否存在，因此均于2个月后有新疣体出现，这实际上属于没有治愈即停药所致。
7.6引起AC的病毒绝大多数为HPV 6，11及HPV 16，18，实验及临床均证明“疣毒清”对两者均有相同的杀灭与治疗能力。
7.7临床证明，没有症状的带毒者及亚临床患者，“疣毒清”能清除其体内的HPV，不但终止了疾病的发生，而且也消除了传染源，在流行病学上有重要意义，同时也对接触密切的性伴侣提供了治疗的可能性。
7.8肿瘤及妇科专家已经确认HPV16的宫颈慢性隐性感染是引发宫颈癌的原因，因此“疣毒清”可以考虑作为宫颈带毒者清除HPV以预防宫颈癌的用药。
7.9感染HPV 16可以导致上皮细胞的间变，鲍温样丘疹病就是因为感染HPV 16出现的具有细胞恶变的尖锐湿疣。我们曾经用“疣毒清”治愈一名这样的病人，在临床症状及HPV消失的同时，病理上恶变的上皮细胞也恢复了正常。说明“疣毒清”可以使因HPV而发生恶变的细胞逆转为正常细胞。宫颈癌的早期改变，其恶性度病理上分为CIN1-3度，它的病理改变与鲍温样丘疹病相似，因此对有HPV 16感染的CIN也可试用“疣毒清”以观察其效果。
实施例3
1.实验药物：用下列各配方制成水煎剂
| 配方号 | 各成分重量份数配比 | ||
| 红花 | 木贼 | 香附 | |
| 2 | 1 | 0 | 0 |
| 3 | 0 | 1 | 0 |
| 4 | 2 | 1 | 0 |
| 5 | 3 | 0 | 1 |
| 6 | 0 | 3 | 1 |
2.实验方法：大体同实施例1，包括体外药效学实验及临床考察
3.实验结果：实验室及临床的结果与配方1基本相接近，但以配方1效果最理想。
Claims (10)
1.治疗人乳头瘤病毒感染的中药，由如下重量份的原料药制成：
红花6-60、木贼5-100。
2.权利要求1所述的治疗人乳头瘤病毒感染的中药，由如下重量份的原料药制成：红花10-60、木贼5-30。
3.权利要求1所述的治疗人乳头瘤病毒感染的中药，由如下重量份的原料药制成：红花10、木贼5。
4.权利要求1所述的治疗人乳头瘤病毒感染的中药，还包括10-30重量份的香附。
5.权利要求4所述的治疗人乳头瘤病毒感染的中药，由如下重量份的原料药制成：红花6、木贼3，香附2。
6.治疗人乳头瘤病毒感染的中药，由红花制成。
7.权利要求6所述的治疗人乳头瘤病毒感染的中药，其原料还包括香附，重量份配比为：红花∶香附＝2∶1。
8.治疗人乳头瘤病毒感染的中药，由木贼制成。
9.权利要求8所述的治疗人乳头瘤病毒感染的中药，其原料还包括香附，重量份配比为：木贼∶香附＝2∶1。
10.权利要求1～9中任一项所述的治疗人乳头瘤病毒感染的中药，剂型为口服剂或外用药。
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