CN1838888A - 婴儿或第二阶段配方奶 - Google Patents
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Abstract
既可用于婴儿又可用于幼儿的本发明的配方奶包含至少一种LC－PUFA和至少一种益生菌。本发明还涉及通过完全或部分用所说的配方奶喂养来增强婴儿或幼儿的天然免疫防御和促进其健康的心智发展的方法。
Description
技术领域
本发明涉及一种用于婴儿和/或幼儿的新营养组合物、以及通过完全或部分用上述配方奶喂养来强化天然免疫防御和促进婴儿或幼儿健康的心智发展的方法。
背景技术
人乳的组成对改善婴儿配方奶而言很有参考价值。但是，人乳包含活细胞、激素、有活性的酶、免疫球蛋白和一些不能复制到婴儿配方奶中的具有独特分子结构的组分。与人乳不同，婴儿配方奶在储存时在长达三十六(36)个月的时间内必需保持稳定。人乳和婴儿配方奶之间的这些根本差异常常要求其在组成上有差异以获得相似的临床结果。
对人乳组成进行的研究已经激励人们进行了许多研究以确定加入什么样的组分可以改善婴儿配方奶。对人乳组成了解的日益深入为人们设计在组成上更接近人乳的婴儿配方奶提供了机会。但是，越来越显而易见的是，婴儿配方奶绝对不能完全复制母乳。人乳中的许多组分是有生物学活性的，并且因为这些组分之间有协同作用，所以几乎没有理由相信相同的化合物将具有与在婴儿配方奶中的生物活性相同的生物活性。当考虑为了灭菌而进行的热处理的影响和该配方奶的长期储存时，这种可能的可能性进一步降低。
人乳的组成与其它种属的略有不同，并且对它的各种组分给予了很大的关注。一些研究者已经对人乳的核苷酸含量进行了报道。许多出版物也已经对用于人类婴儿的人工营养中的各种脂质、油或脂肪掺合物进行了讨论。
需要可以为婴儿或幼儿提供具有保护性营养物的独特组合的新配方奶，其尤其可确保与母乳喂养的婴儿具有相似的生长和代谢方式，从而使得可以在以后的儿童期和成人期产生相似的健康特性。
本发明的概述
因此，本发明涉及既可用于婴儿又可用于幼儿的配方奶。本发明的配方奶包含蛋白源、脂质源、碳水化合物源和益生菌，其中所说的脂质源包括至少一种LC-PUFA。
本发明还提供了一种强化婴儿或幼儿的天然免疫防御的方法，其包括完全或部分用所说的配方奶喂养婴儿或幼儿。
本发明还提供了一种促进婴儿或幼儿健康的心智发展的方法，其包括完全或部分用所说的配方奶喂养婴儿或幼儿。
本发明的详细描述
在本说明书中，对以下词语给出了定义，在阅读和解释本说明书、实施例和权利要求时，必需考虑这些定义。
婴儿：根据1991年5月14日婴儿配方奶和第二阶段(follow-on)配方奶的委员会指令(Commission Directive)91/321/EEC，第1.2(a)款，术语“婴儿”指的是年龄小于12个月的儿童。在本说明书中采用该定义。
幼儿：根据1991年5月14日婴儿配方奶和第二阶段配方奶的委员会指令(Commission Directive)91/321/EEC，第1.2(b)款，术语“幼儿”指的是年龄在一岁和三岁之间的儿童。在本说明书中采用该定义。
婴儿配方奶：根据1991年5月14日婴儿配方奶和第二阶段配方奶的委员会指令(Commission Directive)91/321/EEC，第1.2(c)款，术语“婴儿配方奶”指的是用于婴儿出生后的前四至六个月的特定营养应用并且其本身可以满足该类人群的营养需求的食品。在本说明书中采用该定义。应当清楚的是，可以仅用婴儿配方奶喂养婴儿，或者看护者也可以将该婴儿配方奶用作人乳的补充。其与广泛使用的表述“初始配方奶(starter formula)”是同义词。
第二阶段配方奶：根据1991年5月14日婴儿配方奶和第二阶段配方奶的委员会指令(Commission Directive)91/321/EEC，第1.2(d)款，术语“第二阶段配方奶”指的是用于四个月以上的婴儿的特定营养应用并且构成了该类人群日益多样化的饮食中的主要的液体部分的食品。在本说明书中采用该定义。
益生菌：根据论文“人和动物体内的益生菌”(Probiotics in Man andAnimals)，J.Appl Bacteriol.66：365-378，益生菌被定义为通过改善宿主动物肠内的微生物平衡而对宿主动物产生有益影响的活的微生物饮食补充物。
本发明第一方面提供了一种用于婴儿或幼儿的营养配方奶(包括初始组合物)。正如已经提及的那样，本发明的一个目的是要提供一种与牛乳喂养的婴儿和儿童相比可以确保改善天然防御的保护性营养组分的独特组合，其特征在于可以降低肠胃胀气、呕吐、反流和发病率，并且还可以降低腹泻并改善对接种疫苗的反应。通过部分或完全用本发明的配方奶进行喂养，本发明的独特组合还可以促进婴儿或儿童健康的心智发展。
人乳包含二十二碳六烯酸(DHA)和花生四烯酸(ARA)，因此母乳喂养为婴儿提供了预先形成的LC-PUFA。人乳DHA含量的群体间差异很大，并且受母亲饮食的影响很大。就全球而言，吃西餐(Western diets)的母亲的母乳DHA含量为0.1至0.4％，平均为0.25％，而吃非西餐的母亲的母乳DHA含量较高，为0.1至1.4％，平均为0.6％。但是，一般认为0.2至0.3％是其典型含量。与DHA含量相比，饮食对人乳ARA含量的影响程度较低。就全球而言，吃西餐的母亲的母乳ARA含量为0.2至0.7％，平均为0.45％，而吃非西餐的母亲的母乳ARA含量为0.4至1.2％，平均为0.6％。DHA和ARA水平都会受到哺乳持续时间的影响，并且从初乳到过渡乳和成熟乳逐渐降低。
因为在延长和去饱和以及混入到磷脂中和转化成类花生酸类物质方面，n-3和n-6途径的脂肪酸之间存在竞争，所以我们在n-6和n-3脂肪酸方面对婴儿配方奶中的脂肪进行了平衡。仅用α-亚麻酸作为n-3脂肪酸源来对婴儿配方奶进行补充时，既使使用推荐的亚油酸进行平衡，也不能提供与母乳喂养的婴儿的DHA状态相等的DHA状态。实际上，许多研究已经证明，与用配方奶喂养的婴儿相比，母乳喂养的婴儿的脂质循环池：血浆磷脂、红细胞脂质、红细胞磷脂、红细胞磷脂酰乙醇胺中的DHA水平更高。在大多数情况中花生四烯酸状态并不受影响并且与母乳喂养的婴儿相似。许多研究已经表明，通过用DHA对配方奶进行补充，在配方奶喂养的婴儿的各种血池中可以获得与用母乳喂养的婴儿相似的DHA水平或者比其更高的DHA水平。
因此，本发明的配方奶包含至少一种LC-PUFA，优选DHA。但是，仅有高含量的DHA、或者使用提供高水平EPA(DHA的脂肪酸前体)的DHA源可能会导致花生四烯酸状态的耗减。因此，本发明配方奶中的DHA优选是由已经证实其含量可以在配方奶喂养的婴儿的各种血池中获得与母乳喂养的婴儿相似的DHA水平的低EPA鱼油提供的。DHA的含量优选为脂质源中总脂肪酸的0.2至0.5％。
ARA广泛分布于所有的细胞膜中；其是大部分外周组织(例如心、肝)中主要的LC-PUFA并且其以更高的数量存在于神经组织中。其还是在免疫调节、炎性过程和肌肉收缩中起作用的被统称为类花生酸类物质的生物学物质：前列腺素、白三烯和血栓烷的前体。花生四烯酸还被认为对于最佳生长而言是很重要的，这是因为已经发现在血浆花生四烯酸水平和婴儿机体生长之间有显著的相关性。因此，本发明配方奶的脂质源优选还包括可以得自真菌来源如高山被孢霉(Mortierella Alpina)的ARA源。如果DHA和ARA同时存在，则ARA∶DHA的比例优选为0.8∶1至1.2∶1，更优选地1∶1。
与ARA相反，除神经元组织如视网膜和脑外，DHA在大部分组织所含的脂肪酸中所占的百分比都很低。在视网膜中，其集中于光感受器外节的特定膜中(该膜是一种其组分每天更新的动态结构)并且占主要磷脂的脂肪酸的高达50％。视网膜DHA水平低的动物会出现异常的视网膜电流图。在脑中，在脑生长突增期间总的DHA含量剧烈增加，其原因不仅是因为脑体积的增加(从妊娠的妊娠末三个月开始的100g增加到产后18个月的约1100g)，而且还在于相对DHA含量的增加，已经计算出其从妊娠的妊娠末三个月开始直至一岁末，每周增加约35mg。
如现在将要描述的那样，优选仔细地对本发明脂质源中剩余的脂肪进行选择。脂肪提供了大约一半的饮食能量并且构成了婴儿和幼儿体内主要的能量储备。目前，越来越注重婴儿期中饮食脂质供给的质量，这是因为其是生长、视觉和神经元发育、以及长期健康的主要决定因素。因此，认为对生命早期饮食脂质供给进行选择是十分重要的。
因为胃的体积小并且对高渗食物的耐受性有限，所以婴儿需要浓缩的能量源。在3种提供能量的营养物中，脂肪提供的能量为9kcal/克，即比存在于碳水化合物或蛋白中的能量高两倍。大多数专家推荐在婴儿和第二阶段配方奶中，脂肪应供给总能量30％至55％的能量。在本发明的配方奶中所用的脂肪优选地主要是植物脂肪。但是，乳清和脱脂乳天然包含痕量的乳脂，因此，可能存在极低百分比的乳脂。
饮食的脂肪酸组成决定了包括贮藏组织在内的所有组织的脂肪酸组成。因此，本发明配方奶中所用的脂肪掺合物优选具有尽可能接近人乳的整体脂肪酸组成，从而确保相似的膜塑性和在需求增加时具有相同的能量动员。因此，优选的脂肪掺合物提供了必需脂肪酸(亚油酸和α-亚麻酸)，以及充足的油酸、棕榈酸、月桂酸和肉豆蔻酸。
如之前所提及的那样，本发明的配方奶包含至少一种益生菌，以便于无论其传递方式或其卫生环境如何都可以为所有婴儿提供保护肠道微生物系统的优点。
优选的益生菌是那些总体上安全的物质，其是产L(+)乳酸的培养物并且对于需要在长达36个月的时期内仍然安全有效的产品例如婴儿和第二阶段配方奶而言具有可接受的储藏期。优选益生菌的实例有：
比菲德氏菌(Bifidobacterium lactis)，最先由Christian Hansen公司销售；
嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)，以TH4的名称由Chr.Hansen，丹麦提供；
鼠李糖类干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei rhamnosus)GG(ATCC53103)，由Valio Oy，芬兰提供；
长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)BB536，由Morinaga MilkIndustry Co.Ltd，日本，提供。
本发明益生菌的存在量优选为106至109cfu/克干品，优选为106至108cfu/g，并且更优选为2×107cfu/克干品。
本发明的组合物包含至少一种益生菌菌株，但是也可以使用不同菌株的组合，特别是在第二阶段配方奶中。如果使用该类组合，则优选包含至少一种双歧杆菌和至少一种乳酸杆菌。一种特别优选的组合是长双歧杆菌BB536和鼠李糖类干酪乳杆菌GG。
饮食蛋白提供了蛋白合成和生长所需的必需氨基酸，并且蛋白的质量与蛋白的数量同样重要。直到最近，才认为为了提供足够的必需氨基酸，以牛乳为基础的配方奶需要显著高于参考人乳蛋白含量的蛋白含量。常规的乳清适配型(whey-adapted)配方奶的蛋白含量范围为2.1至2.6g/100kcal，而人乳的含量范围为1.4至1.8g/100kcal。过量的蛋白摄入可能会在还没有充分发育的婴儿器官中引起代谢性应激。按照降低婴儿配方奶蛋白密度的儿科建议，已经报道了通过给婴儿喂食包含1.6至2.0g/100kcal的蛋白密度的配方奶而进行的临床试验。然而，虽然证明该原理是可信的，但是这些通过使用传统的牛乳蛋白源或将目前可获得的级分——酪蛋白和乳清进行混合来降低蛋白含量的尝试并不能复制人乳蛋白代谢的所有指数或者不能确保婴儿令人满意地成长。例如，结果已经表明其综合血浆氨基酸模式与母乳喂养的婴儿不同，其血浆色氨酸水平降低、血浆苏氨酸水平升高、生长延迟并且能量摄入更高，这表明可能在以后引起肥胖的脂肪沉积增加。
牛乳的蛋白级分是一些蛋白的混合物，这些蛋白具有不同的氨基酸组成。Caseino-glyco-macropeptide(CGMP)是一种在该级分中发现的蛋白。其来自κ-酪蛋白，κ-酪蛋白通过蛋白水解裂解被分裂成2/3对-κ-酪蛋白(一种仍然存在于酪蛋白级分中的不溶性级分)和1/3 CGMP(一种在乳清级分中发现的可溶性级分)。已经开发了一种乳清蛋白的最初分级处理方法并且在EP 880902中对其进行了解释；这种处理方法使得可以从牛乳清中除去几乎所有的CGMP(一种富含苏氨酸而色氨酸含量很少的级分)，从而增加了α-乳清蛋白(一种十分富含色氨酸的级分)的比例。通过将这种改性的甜乳清(MSW)级分与脱脂乳相结合并加入一些游离L-组氨酸和L-精氨酸(以达到EC指令所要求的这些氨基酸的最低含量)，本发明配方奶的蛋白源具有更接近于人乳的氨基酸组成，其特征特别是在于具有与人乳相当的色氨酸和苏氨酸水平，从而使得其蛋白含量与人乳的含量相适配。
已经用大鼠测定了这种蛋白混合物的营养价值。结果表明(见表1)这种制剂具有与标准乳清适配型配方奶相当的蛋白功效比值(PER)、氮消化率、生物值(BV)和净蛋白利用(NPU)。
表1
| 营养参数 | 酪蛋白 | 标准乳清适配型配方奶 | 本发明的配方奶 |
| PER相对PER(酪蛋白＝100％)消化率(％)BVNPU(％) | 1.36100.096.70.8885.4 | 2.49182.892.80.9688.8 | 2.70198.391.40.9687.5 |
此外，与用标准乳清适配型配方奶喂养的大鼠相比，用本发明的配方奶喂养的大鼠表现出血浆苏氨酸水平显著降低和血浆色氨酸水平显著增加。
本发明配方奶的蛋白含量优选不高于2g/100kcal，更优选低于1.85，最优选为1.8至1.85g/100kcal。该水平与对生命早期的蛋白需求进行评估的最新数据相一致，所说的最新数据表明对于最佳蛋白摄入而言，推荐数量比过去所报道的数量低。
为了确保最佳的蛋白合成并且因此确保最佳的生长，需要以与人乳中的数量相同的数量提供必需和半必需(即仅在婴儿时需要)氨基酸。本发明的配方奶优选富含乳清(酪蛋白/乳清比例被设定为大约40/60)或者，更优选地，主要是乳清(酪蛋白/乳清比例优选被设定为30/70或更高，如20/80)。本发明配方奶的优选的氨基酸组成与人乳的组成相当(见表2)。
表2
| 氨基酸(g/16g N) | 人乳 | 本发明(典型值) | ||
| 均值 | 最低值 | 最高值 | ||
| 异亮氨酸* | 6.4 | 5.7 | 6.8 | 5.8 |
| 亮氨酸* | 11.5 | 11.0 | 11.9 | 11.9 |
| 赖氨酸* | 7.9 | 7.4 | 8.4 | 10.0 |
| 蛋氨酸* | 1.7 | 1.3 | 2.1 | 2.5 |
| 胱氨酸** | 2.3 | 1.7 | 2.9 | 2.4 |
| 苯丙氨酸* | 4.6 | 4.2 | 5.1 | 4.6 |
| 酪氨酸** | 4.7 | 3.3 | 6.3 | 4.0 |
| 苏氨酸* | 5.6 | 5.3 | 6.6 | 5.4 |
| 色氨酸* | 2.3 | 1.8 | 2.6 | 2.1 |
| 缬氨酸* | 6.8 | 5.9 | 8.0 | 5.9 |
| 精氨酸** | 4.2 | 3.5 | 4.9 | 4.5 |
| 组氨酸** | 2.8 | 2.4 | 3.8 | 2.5 |
| 丙氨酸 | 4.8 | 4.5 | 5.3 | 5.1 |
| 天门冬氨酸 | 10.4 | 10.1 | 10.8 | 11.1 |
| 谷氨酸 | 19.6 | 17.6 | 22.7 | 19.7 |
| 甘氨酸 | 3.2 | 2.8 | 3.6 | 2.7 |
| 脯氨酸 | 10.2 | 8.9 | 11.2 | 7.8 |
| 丝氨酸 | 5.6 | 5.0 | 5.9 | 5.3 |
所有的值都被修正至40％NH3
*必需氨基酸 **半必需氨基酸
这些蛋白可以是完整的或者用例如在欧洲专利322589中所述的方法部分水解的。
本发明组合物唯一的碳水化合物源优选地是乳糖。碳水化合物是新生儿饮食中重要的能量源。乳糖是人乳中的天然碳水化合物。健康状况良好的大多数婴儿可以充分地消化乳糖。此外，乳糖还与粪便酸度以及在大肠中形成与母乳喂养的婴儿相似的双歧杆菌和乳酸杆菌占优势的微生物系统有关。认为这一点对于抑制大肠中不希望的细菌生长而言是很重要的。此外，已经表明乳糖可增加钙的吸收和潴留，并且可能也可增加其它矿物的吸收和潴留。最新的研究已经表明由包含乳糖的配方奶产生的钙吸收比用葡萄糖聚合物代替了乳糖的相同配方奶产生的钙吸收高10％。
本发明的配方奶还提供了在特定情况中可能需要的半必需营养物(例如牛磺酸、核苷酸、肉碱、硒)。
牛磺酸是一种游离氨基酸，其不能用于构建蛋白分子。已经证实在许多生理学功能中都涉及牛磺酸，例如其可作为中枢神经系统发育中的营养因子、可维持膜的结构完整性、调节体内钙平衡、作为渗透物、神经调节剂和神经递质。其还可以与胆汁酸轭合形成胆汁盐(其是胶束形成和脂肪吸收所必需的)。
核苷酸是一种非蛋白类的含氮化合物，其包含三个特征性组分：含氮碱基、糖(核糖或脱氧核糖)和一个或多个磷酸根基团。人乳中的总核苷酸含量占非蛋白氮的2至5％。牛乳的核苷酸浓度比人乳低并且其核苷酸组成与人乳的显著不同。在本发明的婴儿配方奶中加入核苷酸遵循了人乳中核苷酸水平的生理学模式——易于代谢的嘧啶类物质比较不需要的嘌呤类物质多：向婴儿配方奶中加入核苷酸是安全的。加入的水平在欧盟食品科学委员会和欧盟指令所允许的范围内。
肉碱是一种特定的含氮化合物，其属于被称为维生素样营养物的食物因子类。其通过促进长链脂肪酸转运到线粒体中(在那里发生β-氧化)而在胎儿生命期间的组织能量供给和新生儿的能量供给中起着重要的作用。脂肪酸实际上并不能以游离形式通过线粒体壁；至少有三种酶系统控制着向线粒体中的转运，即肉碱-棕榈酰转移酶I和II以及肉碱-移位酶，其中都有肉碱的参与。因此，肉碱是适当的脂质氧化所必需的，肉碱缺乏或肉碱摄入量降低可能会导致脂肪利用率降低并改变脂质代谢。肉碱也在其它代谢过程中起一定的作用，例如酮生成、脂解以及维持生热作用和氮代谢。此外，还已经证实肉碱改善了婴儿对中链甘油三酯的利用。新生儿的肉碱储备相对较低，并且其催化肉碱合成的最后一步的酶的活性十分低。因此，在没有充足的外源性肉碱供给的情况下，新生儿特别容易出现肉碱不足的情况。优选向婴儿配方奶中加入肉碱以达到与人乳的肉碱水平接近的水平。
本发明的配方奶可以为粉末形式或者即可饮用的液体形式。在粉末配方奶的情况中，可以用下面的喂养表(表4)作为指导。但是，可以根据医疗指导改变这些数量。应当在医学监督下引入婴儿配方奶。本发明配方奶的标准重组为12.9％，即12.9g粉末使用90mL水，其给出了67kcal/100mL的热量密度。
表4
| 每次喂食的数量 | 每天的喂食次数 | |||
| 婴儿的年龄 | 煮沸过的水(mL) | 测量用勺的勺数 | 配方奶 | 其它 |
| 第1周和第2周第3周和第4周2个月3和4个月5和6个月7个月以上 | 90120150180210210 | 345677 | 655554-3 | -----1-2 |
在即可饮用的液体的情况中，需要特别注意确保所说的益生菌不会意外地与该液体相接触。所说益生菌优选以粉末的形式独立于所说的液体进行储存，并且在临被消耗前，例如在被消耗前最多两小时才被均匀混入到该液体中。
本发明还涉及一种增强婴儿或幼儿的天然免疫防御的方法，其包括完全或部分用本发明的配方奶来喂养婴儿或幼儿。
小肠粘膜是免疫系统的一个重要位置并且胃肠微生物系统在与肠有关的淋巴组织(GALT)的发育中起着重要的作用。这种十分有组织的免疫系统由淋巴滤泡组成，所述淋巴滤泡可以是孤立的，也可以成组地位于存在于小肠粘膜深处和粘膜下层中的淋巴集结中。GALT具有区别致病微生物(其对致病微生物有动态响应)和大量食物性抗原以及共生菌群(其能耐受这些物质)的能力。益生菌在许多水平下与免疫系统相互作用，包括细胞因子产生、单核细胞增殖、巨噬细胞吞噬作用和杀伤作用、自身免疫性的调节以及对细菌和原生动物病原体的免疫性。这些免疫学性质可能具有菌株特异性。已经表明比非德氏菌对粘膜免疫有积极影响：对成人个体而言，比非德氏菌增强了外周血液淋巴细胞对吞噬作用的刺激，而对于婴儿而言，比非德氏菌增强了粪便IgA(在病原体的消除中起重要的作用免疫球蛋白)的分泌。
更重要的是，这种免疫刺激产生了更明显的健康益处，即降低了处于医院环境和更常见的日托托儿站条件的高污染风险下的婴儿发生腹泻的风险。最近，在对具有不同蛋白水平和比非德氏菌加入量的初始乳清水解配方奶进行比较的研究中发现了相似的趋势。唾液轮状病毒特异性的IgA滴度是良好的轮状病毒感染指示剂。虽然在健康的新生儿体内探测不到这种滴度，但是其在被感染婴儿体内的水平增加。当与被污染的环境接触时，用富含比非德氏菌的配方奶喂养的婴幼儿唾液抗-轮状病毒滴度的增加常常更低，其支持了补充比非德氏菌可以防止轮状病毒感染的假设。
炎症(其特征通常为发红、肿胀、热和疼痛)是机体对感染的正常的直接响应。其是正常的先天免疫系统的一部分。因此，免疫反应太强可能会导致过度的炎性反应。变态反应也是由于对抗原的不适当的识别和响应而导致的免疫反应加剧的结果。因此，免疫系统的适宜刺激应当产生具有充分保护作用的粘膜免疫而不会产生过度炎症和形成全身口服免疫耐受。
新生儿的免疫响应模式倾向于导致变态反应的Th-2型响应，并且在出生后的成熟过程中将朝向平衡的Th-1/Th-2响应发展。
肠道微生物系统平衡了Th2活性并影响着许多其它免疫参数的发展。出现变态反应的婴儿和健康婴儿的肠道微生物系统在组成上存在差异：与健康婴儿相比，患有特应性皮炎的婴儿被双歧杆菌寄居的频率较低，因此，认为益生菌是潜在的变应性反应调节剂。但是与免疫保护相似，这种活性具有菌株特异性。已经在细胞培养物的体外模型中首次表明了比非德氏菌的抗炎性质，并且在对用广泛水解的婴儿配方奶进行喂养没有反应的十分敏感的婴儿中得到了证实。对该类婴儿而言，比非德氏菌减轻了特应性皮炎的症状。此外，补充比非德氏菌还防止了断奶期间类杆菌和大肠杆菌数的增加，而类杆菌和大肠杆菌的高数量与患有特应性湿疹的婴儿的特异性敏化的程度有关。
所谓的“卫生学假设”表明变应性疾病的增加可能是由于缺乏微生物接触对免疫系统的刺激造成的，并且使得不成熟的新生儿免疫响应模式一直延续到出生后的前几年。因为与第一次接触抗原有关的响应模式可能被编程到长期的免疫记忆中，因此，通过所选择的益生菌如比非德氏菌所实现的在生命早期的无害接触可能进一步有助于在生命后期具有最佳的健康状态。
饮食脂质的数量和品质以及其代谢对于健康和患病儿童的生长、机体组成、发育和长期健康而言都是十分重要的。脂质是幼童时期主要的能量源并且提供了早期生长期间需要的相对较高数量的脂溶性必需维生素和多不饱和脂肪酸。脂质影响着膜结构的组成并调节着膜功能以及中枢神经系统的功能发育。一些LC-PUFA是生物活性的脂质介质(包括前列腺素、血栓烷和白三烯)的前体，这些介质是许多细胞功能如血小板聚集、炎性反应和免疫功能的有力调节剂。
炎性和免疫细胞的脂肪酸组成对饮食脂肪酸组成的变化很敏感。具体而言，这些细胞中不同类型PUFA的比例特别易于被改变，其使得饮食PUFA摄取量、炎症和免疫性之间有了关联性。n-6 PUFA ARA是在炎症和免疫调节中都具有重要作用的前列腺素、白三烯以及相关化合物的前体。在其它化合物中，已证实脂质，尤其是n-3多不饱和脂肪酸可影响免疫响应。鱼油包含n-3 PUFA EPA和DHA。食用鱼油可导致细胞膜中的ARA被EPA部分替代。这导致源自ARA的介质的产生减少。此外，EPA还是环加氧酶和脂氧合酶的底物，并且会产生与由ARA形成的介质生物学作用或效力通常不同的介质。动物研究已经表明饮食性鱼油改变了淋巴细胞功能并且抑制了巨噬细胞产生致炎细胞因子。用得自鱼油的n-3 PUFA对健康人类志愿者的饮食进行补充降低了单核细胞和中性白细胞的趋化性并降低了致炎细胞因子的产生。
环加氧酶和脂氧合酶催化由LCPUFA前体(ARA，EPA)进行的类花生酸类物质的合成。类花生酸类物质是一些C-20 PUFA衍生物，其包括前列腺素、血栓烷和白三烯。除了其无所不在的生物学作用如对免疫细胞功能的作用外，在胃液分泌和胃动力的正常调节以及胃粘膜防御中都涉及这类物质。
n-3脂肪酸从信号转导到蛋白表达都影响着炎性细胞的活化过程，甚至还涉及基因组水平的作用。n-3脂肪酸介导的机理降低了细胞因子诱导的粘着分子表达，从而降低了炎性白细胞-内皮相互作用并改变了脂质介质的合成，从而影响了白细胞的跨内皮迁移和总的白细胞传输量。n-3脂肪酸甚至调节特定免疫活性细胞的所有代谢组分例如细胞因子的释放或增殖。
PUFA对新生儿的T-细胞功能有影响。婴儿存活率取决于对环境刺激产生有效和适当的响应的能力。婴儿在出生时具有一定程度的免疫学不成熟性，从而使其易于发生感染和产生异常的饮食性响应(过敏)。在出生时，T-淋巴细胞功能的发育很差。婴儿对促分裂原响应能力低可能是由于CD45RO+(记忆性/接触过抗原的)T细胞的数目低或其产生细胞因子、特别是干扰素-γ和白介素IL-4、IL-10的能力有限所造成的。对婴儿的母乳代用品进行优化时已经发生了许多重要的改变；但是，很少是针对母乳中传递免疫益处的替代因子的。
与标准配方奶相比，喂食包含DHA和ARA的配方奶增加了成熟抗原(CD45RO+)CD4+细胞的比例、改善了IL-10产生，并将IL-2的产生降低至与人乳喂养的婴儿没有差异的水平。
在口腔粘膜之后，小肠上皮以及与其相关的肠相关性淋巴组织是饮食性组分的主要靶点。
许多细胞类型的质膜包含富含特定脂质(饱和脂肪酸、鞘脂类)和胆固醇的被称为脂筏(lipid raft)的区域。通过稳定受体/激酶的相互作用，这些区域可作为多种受体介导的信号事件的进入点，表明其参与了信号级联反应的引发。造血细胞表面受体的交联导致了这些受体与其它下游信号分子一起在该筏中富集。已经由该筏的概念产生了一种信号怎样通过该质膜进行传导的可能解释。从对富含Src-族酪氨酸激酶成员的质膜中的细胞响应进行的研究来看，筏可以通过形成一些集结来发挥信号转导中枢的作用。在生理学条件下，这些元素协同作用，从而成功地对质膜上的信号进行转换。
在T淋巴细胞中，关键的T细胞抗原受体(TCR)信号分子与一些筏相结合，破坏其中的某些筏结合会消除TCR信号转导。TCR本身与脂筏相结合，并且TCR交联造成了与筏结合的蛋白的聚集。此外，筏聚集促进了酪氨酸磷酸化和信号蛋白的募集，但是排除了酪氨酸磷酸酶CD45。因此，表明这些阀在控制造血细胞中适宜蛋白的相互作用方面是很重要的，并且在受体结合后筏的聚集可能是促进免疫细胞发信号的一般机理。虽然不希望受到理论的束缚，但是我们认为富含饱和脂肪酸的这些筏受饮食性LC-PUFA的影响，这部分解释了其对免疫功能的生物学作用。已经证明了LC-PUFA或其前体对一些功能如全身免疫性或脂质和碳水化合物代谢有很明显的作用，尽管这些功能中的大部分功能在成年的人或动物中已经完成了。
饮食性LC-PUFA被吸收并掺入到肠细胞膜中。它们似乎可以调节局部炎性响应并促进应激反应后小肠的修复。因此，饮食性LC-PUFA可以改善例如之前已经营养失调的个体的小肠的修复。LC-PUFA影响炎性级联反应的可能的机理有很多。然而，仍然还不清楚LC-PUFA在对肠炎进行特定调节中的作用。
一些报道提出PUFA的产物上调了非特异性的屏障功能。因此，类花生酸类物质，特别是得自ARA的物质将影响肠分泌、粘膜分泌和粘液中表面活性剂的密度、磷脂合成并为GI粘膜提供细胞保护作用。还有人提出小肠糖基转移酶受饮食中脂肪酸综合不饱和指数的调节，而Occludin(致密关节复合体的主要组分)表达将被γ-亚麻酸(18：3n-6)和二十碳五烯酸上调和被AA和亚油酸(18：2n-6)下调。
最后，PUFA和LC-PUFA可能能调节肠道微生物系统的组成。亚油酸和α-亚麻酸抑制了金黄色酿脓葡萄球菌的增殖。类似地，相对高浓度(但仍在生理学范围内)的游离亚油酸、γ-亚麻酸、花生四烯酸、α-亚麻酸和二十二碳六烯酸抑制了Lactobacillus GG，干酪乳酸杆菌和保加利亚乳酸杆菌的生长和粘液附着。此外，较低浓度的γ-亚麻酸和ARA促进了干酪乳酸杆菌的生长和粘液附着。
此外，这些细菌对在包含PUFA的培养基中生长的Caco-2细胞的附着也受LC-PUFA类型和浓度的调控。由于对小肠表面附着的能力看起来对于益生菌的功能性和致病菌的毒性而言都很重要，所以我们认为补充LC-PUFA影响着益生菌的功效和病原体的侵入能力。
虽然不希望受到理论的束缚，但是我们认为可以通过与LC-PUFA组合来改善益生菌的有益作用，并且LC-PUFA可以促进益生菌的作用。因此，本发明的配方奶利用了这两类组分的协同作用。
本发明第三方面提供了一种促进婴儿或幼儿健康的心智发展的方法，其包括完全或部分用本发明的配方奶来喂养所说的婴儿或儿童。主张向婴儿配方奶中补充LC-PUFA主要是认为它可以改善视觉功能和神经-发育。但事实上在足月婴儿中的结果很有争议。虽然在小规模研究中有时会观察到一些积极结果，但这些结果还没有在大规模研究中得到证实。采用TellerAcuity Card或视觉诱发电位(VEP)视敏度的观察研究表明，母乳喂养的婴儿的视网膜功能比用不含DHA和/或DHA & ARA的配方奶喂养的婴儿好。在LC-PUFA情况的研究中采用一些综合神经发育的标准化程序：婴儿发育的Bayley等级(Bayley Scales of Infant Development)(提供了Bayley精神运动发育指数和Bayley心智发育指数)、Brunet-Lezine试验、MacArthur Communicative Development Inventories，以及更具体的非标准化试验如解决问题的能力。一些研究表明向配方奶中加入DHA或DHA& AA对认识发育有积极影响。
实施例
用下面的实施例来对本发明范围内的产品和制备所说产品的方法进行说明。这些实施例并不以任何方式对本发明进行限制。可以对本发明进行一些改变和变化。即，本领域技术人员将意识到可以对这些实施例进行许多变化以覆盖多种配方奶、成分、加工方法和混合物，以合理调节本发明化合物天然存在的水平从而将其用于各种应用。
实施例1
下面仅仅是说明本发明优选配方奶的实例
| 营养物 | 每100kcal | 每升 |
| 能量(kcal) | 100 | 670 |
| 蛋白(g) | 1.83 | 12.3 |
| 总脂肪(g) | 5.3 | 35.7 |
| 其中：- | ||
| 亚油酸(g) | 0.79 | 5.3 |
| α-亚麻酸(mg) | 101 | 675 |
| DHA(mg) | 12 | 77 |
| ARA(mg) | 12 | 77 |
| 乳糖(g) | 11.2 | 74.7 |
| 矿物(g) | 0.37 | 2.5 |
| Na(mg) | 23 | 150 |
| K(mg) | 89 | 590 |
| Cl(mg) | 64 | 430 |
| Ca(mg) | 62 | 410 |
| P(mg) | 31 | 210 |
| Mg(mg) | 7 | 50 |
| Mn(μg) | 8 | 50 |
| Se(μg) | 2 | 13 |
| 维生素A(μg RE) | 105 | 700 |
| 维生素D(μg) | 1.5 | 10 |
| 维生素E(mg TE) | 0.8 | 5.4 |
| 维生素K1(μg) | 8 | 54 |
| 维生素C(mg) | 10 | 67 |
| 维生素B1(mg) | 0.07 | 0.47 |
| 维生素B2(mg) | 0.15 | 1.0 |
| 烟酸(mg) | 1 | 6.7 |
| 维生素B6(mg) | 0.075 | 0.50 |
| 叶酸(μg) | 9 | 60 |
| 泛酸(mg) | 0.45 | 3 |
| 维生素B12(μg) | 0.3 | 2 |
| 生物素(μg) | 2.2 | 15 |
| 胆碱(mg) | 10 | 67 |
| Fe(mg) | 1.2 | 8 |
| I(μg) | 15 | 100 |
| Cu(mg) | 0.06 | 0.4 |
| Zn(mg) | 0.75 | 5 |
长双歧杆菌BB 536： 1×107cfu/克干品
鼠李糖类干酪乳杆菌GG：2×107cfu/克干品
实施例2
将大约300名出生体重至少为2500g、他们的母亲在其出生后第5天放弃了母乳喂养并且参加了接种乙型肝炎、脊髓灰质炎、白喉、破伤风和百日咳疫苗的程序的健康婴儿招募到两组平行的随机对照的单中心双盲临床试验中。给第一组喂食实施例1的配方奶并给第二组喂食不含益生菌的相似配方奶。用按照下述测定的IgG滴度对这些婴儿对该接种疫苗程序的响应进行评估：-
乙型肝炎 7个月和11个月
脊髓灰质炎 6个月和12个月
DTP 6个月和12个月
在第2个月和第4个月还测定了抗牛β-乳球蛋白IgG和IgE滴度并通过在第2、4和12个月对粪便中的乳酸杆菌族(Lactobacillae)、总双歧杆菌、产气荚膜梭状芽胞杆菌、肠杆菌科、类杆菌和益生菌进行分析来对细菌定殖进行评估。最后，在第2和第4个月通过粪便中IgA和caloprotectin的水平对肠屏障功能进行评估。
此外，在募集时以及其后的每个月都进行该类研究中常用的人体测量(体重增加，身长和头围)，并且在进行这些测量的同时，对消化耐受性(粪便特性、呕吐和反流的发生率、腹痛的频率和持续时间)进行观测并注意疾病发作的频率(健康护理专职人员观察到的次数加上疾病发作的次数)。
与对照组相比，发现喂食本发明配方奶的婴儿通常表现出增强的免疫防御(表现为对接种疫苗的响应增强)和/或改善的肠屏障功能以及对牛乳蛋白的不耐受性水平的降低(同时具有令人满意的身体发育)。
Claims (19)
1.婴儿或第二阶段配方奶，其包含蛋白源、脂质源、碳水化合物源和益生菌，其中所说的脂质源包含至少一种LC-PUFA。
2.如权利要求1所述的配方奶，其中所说的LC-PUFA是DHA。
3.如权利要求2所述的配方奶，其中DHA含量为脂质源中总脂肪酸的0.2至0.5％。
4.如权利要求2或3所述的配方奶，其还包含ARA。
5.如权利要求4所述的配方奶，其中ARA：DHA的比例为0.8∶1至1.2∶1，优选为1∶1。
6.如前面任意一项权利要求所述的配方奶，其中所说的益生菌是双歧杆菌或乳酸杆菌。
7.如权利要求6所述的配方奶，其中所说的双歧杆菌是长双歧杆菌BB536。
8.如权利要求6所述的配方奶，其中所说的乳酸杆菌是鼠李糖类干酪乳杆菌GG。
9.如前面任意一项权利要求所述的配方奶，其同时包含双歧杆菌和乳酸杆菌。
10.如权利要求9所述的配方奶，其中所说的双岐杆菌是长双岐杆菌BB536，所说的乳酸杆菌是鼠李糖类干酪乳杆菌GG。
11.如前面任意一项权利要求所述的配方奶，其中所说蛋白的至少40％是不含CGMP或具有降低的CGMP的改性甜乳清蛋白。
12.如权利要求11所述的配方奶，其中所说蛋白的至少60％是不含CGMP或具有降低的CGMP的改性甜乳清蛋白。
13.如权利要求11或权利要求12所述的配方奶，其中所说蛋白是以2g/100kcal，优选1.85，最优选1.8至1.85g/100kcal的最大比例存在的。
14.增强婴儿或幼儿的天然免疫防御的方法，其包括完全或部分用包含蛋白源、脂质源、碳水化合物源和益生菌的配方奶喂养所述的婴儿或幼儿，其中所说的脂质源包含至少一种LC-PUFA。
15.如权利要求14所述的方法，其使用如权利要求1至13中任意一项所述的配方奶。
16.如权利要求14或权利要求15所述的方法，其特征在于其降低了肠胃胀气、呕吐、反流和/或发病率。
17.促进婴儿或幼儿健康的心智发展的方法，其包括完全或部分用包含蛋白源、脂质源、碳水化合物源和益生菌的配方奶喂养所述的婴儿或幼儿，其中所说的脂质源包含至少一种LC-PUFA并且其中所说蛋白的至少40％是不含CGMP或具有降低的CGMP的改性甜乳清蛋白。
18.如权利要求17所述的方法，其使用如权利要求1至11中任意一项所述的配方奶。
19.如权利要求17或18所述的方法，其中所说的婴儿是早产儿。
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