CN1796363A - 苯丙烯酸苯丙烯酯和苯丙酸苯丙酯类化合物及其制备方法和用途 - Google Patents

苯丙烯酸苯丙烯酯和苯丙酸苯丙酯类化合物及其制备方法和用途 Download PDF

Info

Publication number
CN1796363A
CN1796363A CN 200410102894 CN200410102894A CN1796363A CN 1796363 A CN1796363 A CN 1796363A CN 200410102894 CN200410102894 CN 200410102894 CN 200410102894 A CN200410102894 A CN 200410102894A CN 1796363 A CN1796363 A CN 1796363A
Authority
CN
China
Prior art keywords
carbon
compound
ester
dimethoxy
formula
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN 200410102894
Other languages
English (en)
Other versions
CN100400497C (zh
Inventor
赵昱
周长新
白骅
胡利红
邹宏斌
巫秀美
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Zhejiang Hisun Naturelite Pharmaceutical Research & Development Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang Hisun Naturelite Pharmaceutical Research & Development Co Ltd filed Critical Zhejiang Hisun Naturelite Pharmaceutical Research & Development Co Ltd
Priority to CNB2004101028941A priority Critical patent/CN100400497C/zh
Publication of CN1796363A publication Critical patent/CN1796363A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN100400497C publication Critical patent/CN100400497C/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及一种具有细胞毒活性的式(1)所示的苯丙烯酸苯丙烯酯类化合物和其类似物或者式(2)所示的苯丙酸苯丙酯类化合物和其类似物及其可药用盐或溶剂化物,本发明还涉及这些化合物的制备方法及其制备中间体化合物,本发明还涉及这些化合物的药物用途和含有该化合物的药物组合物。本发明的化合物具有一定的抑制肿瘤细胞生长活性,可预期作为抗肿瘤药物用途。

Description

苯丙烯酸苯丙烯酯和苯丙酸苯丙酯类化合物及其制备方法和用途
发明领域
本发明涉及有机化学、药物化学和药理学领域,具体而言,本发明涉及苯丙烯酸苯丙烯酯和苯丙酸苯丙酯和苯丙酸丙苯酯类化合物和其关键中间体以及它们的制备方法和它们作为药物的用途。
发明背景
目前,由于工业发展中带来的环境污染等问题,人类的生存环境质量不断下降,肿瘤疾病的发病率和致死率也不断上升。然而治疗肿瘤疾病的特效药并不能令人满意,并且目前抗肿瘤临床所用细胞毒性药物的选择性不高所导致的对正常细胞的恶性杀伤,限制了该类药物的普遍适用性。因此,寻找和发现新的选择性高的细胞毒性抗肿瘤药物是世界范围内的研究热点。我们也致力于抗肿瘤药物的研究。2003年中国台湾学者Chen Jih-Jung等从薄叶风藤中分离得到一个具有苯丙酸苯丙酯结构的新化合物,并对其作了细胞毒性试验,发现对小鼠白血病细胞(P-388)有一定的细胞毒性(Chen,J.J.,Duh,C.Y.,Huang,H.Y.and Chen,I.S.(2003)Helv.Chim.Acta.86,2058-2064.)。因此本发明的目的在于对这类化合物进行合成和结构改造,以期寻找对肿瘤细胞株生长产生更强抑制作用的苯丙酸苯丙酯化合物及其类似物。根据全世界尤其是中国的常发肿瘤疾病谱及肿瘤细胞的敏感性,我们选择了人前列腺癌细胞(PC-3),鼻咽癌细胞(CNE),口腔上皮癌细胞(KB),人肺癌细胞(A549),人子宫颈癌细胞(Hela)五株肿瘤细胞作为体外细胞毒活性药理评价的指标。
发明目的
本发明的目的在于提供一种具有细胞毒活性的化合物,具体而言,本发明提供了一种具有式(1)所示的苯丙烯酸苯丙烯酯和其类似物及其可药用盐或溶剂化物:
式(1)
其中:
取代基R6,R7,R8,R6′,R7′,或R8′可以相同或不同,分别独立地选自氢,巯基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,含1~8个碳的烷胺基,1~15碳的不饱和烃基,1~15碳的不饱和烃氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基,取代或未取代的芳基,取代或未取代的芳氧基,取代或未取代的芳烷氧基,含1~8个碳的酰氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基,其条件是取代基R6,R7,R8,R6′,R7′和R8′不能同时是氢;取代基X选自氢(H)2,羟基(OH)2,氧,硫;基团R选自氧,氮,含1-8个碳的亚烷基,含1-8个碳的亚烷胺基,含1-8个碳的亚烷氧基,含1-8个碳的亚烷硫基;
其中用于取代的取代基选自含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,卤素,羟基,氨基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷胺基,或苯基。
本发明的另一目的是提供了具有细胞毒活性如式(2)所示的苯丙酸苯丙酯类化合物及其类似物以及其可药用盐或溶剂化物:
式(2)
其中取代基R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′及取代基X和基团R的定义与式(1)的相同。
本发明的另一目的是提供了式(1)、式(2)化合物的制备方法。
本发明的又一目的是提供了式(1)和式(2)化合物的用于制备防治肿瘤疾病药物的用途。
本发明的另一个目的是提供了一种含有式(1)、式(2)化合物的用于抗肿瘤疾病的药物组合物。
发明内容
本发明提供了一种具有式(1)所示的苯丙烯酸苯丙烯酯类化合物和其类似物及其可药用盐或溶剂化物:
Figure A20041010289400082
式(1)
其中:
取代基R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′可以相同或不同,分别独立地选自氢,巯基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,含1~8个碳的烷胺基,1~15碳的不饱和烃基,1~15碳的不饱和烃氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基,取代或未取代的芳基,取代或未取代的芳氧基,取代或未取代的芳烷氧基,含1~8个碳的酰氧基,其条件是取代基R6,R7,R8,R6′,R7′和R8′不能同时是氢;取代基X选自氢(H)2,羟基(OH)2,氧,硫;基团R选自氧,氮,含1-8个碳的亚烷基,含1-8个碳的亚烷胺基,含1-8个碳的亚烷胺基,,含1-8个碳的亚烷硫基;
其中用于取代的取代基选自含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,卤素,羟基,氨基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷胺基,或苯基。
本发明优选的式(1)化合物及其可药用盐或溶剂化物是,其中:
当式(1)中的取代基X为氧,取代基R为氧时,为式(I)所示的苯丙烯酸苯丙烯酯类化合物:
其中:
取代基R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′可以相同或不同,分别独立地选自氢,巯基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,含1~8个碳的烷胺基,1~15碳的不饱和烃基,1~15碳的不饱和烃氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基,取代或未取代的芳基,取代或未取代的芳氧基,取代或未取代的芳烷氧基,含1~8个碳的酰氧基,其条件是取代基R6,R7,R8,R6′,R7′和R8′不能同时是氢;
其中用于取代的取代基选自含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,卤素,羟基,氨基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷胺基,或苯基;
本发明优选的式(I)化合物及其可药用盐或溶剂化物是,其中:
R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′可以相同或不同,分别独立地选自氢,硝基,含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷胺基,含1~8个碳的烷氧基,含1~15个碳的不饱和烯氧基,取代或未取代的芳烷氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基,其条件是取代基R6,R7,R8,R6′,R7′和R8′不能同时是氢;
其中用于取代的取代基选自含1~8个碳的的烷基,含1~8个碳的烷氧基,卤素,羟基,氨基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷胺基,或苯基。
本发明进一步优选的式(I)化合物及其可药用盐或溶剂化物是,其中:
R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′可以相同或不同,分别独立地选自氢,硝基,含1~8个碳的烷氧基,含1~15个碳的不饱和烯氧基,取代或未取代的芳烷氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基,其条件是取代基R6,R7,R8,R6′,R7′和R8′不能同时是氢;
其中用于取代的取代基选自含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,卤素,羟基,氨基,硝基。
本发明优选的式(I)化合物包括:
I-a.(E)-7-甲氧基-苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基)苯丙烯酯;
I-b.(E)-(6,7,8-三甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基)苯丙烯酯;
I-c.(E)-(7-硝基)苯丙烯酸-(E)-(6′,7′-二甲氧基)苯丙烯酯;
I-d.(E)-(6,7,8-三甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′,7′,8′-三甲氧基)苯丙烯酸;
I-e.(E)-(7-甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′,7′-二甲氧基)苯丙烯酯;
I-f.(E)-(6,7-二甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′,7′-二甲氧基)苯丙烯酯;
I-g.(E)-(6,7,8-三甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′,7′-二甲氧基)苯丙烯酸;
I-h.(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′,7′-二甲氧基甲氧基)苯丙烯酸;
I-i.(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基甲氧基)苯丙烯酯;
I-j.(E)-(7-羟基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基)苯丙烯酯;
I-k.(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-苯丙烯酯;
I-l.(E)-(6,7-二甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-苯丙烯酯;
I-m.(E)-(6,7-二甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基甲氧基)-苯丙烯酯;
I-n.(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基)苯丙烯酯;
I-o.(E)-(6,8-二甲氧基-7-O-(3″,4″-二氯)苄基)-苯丙烯酸-(E)-(6′,8′-二甲氧基-7′-O-(3,4-二氯)苄基)-苯丙烯酯;
I-p.(E)-(6,8-二甲氧基-7-O-(4″-溴)苄基)-苯丙烯酸-(E)-(6′,8′-二甲氧基-7′-O-(4-溴)苄基)-苯丙烯酯;
I-q.(E)-(6,8-二甲氧基-7-O-(3″-溴)苄基)-苯丙烯酸-(E)-(6′,8′-二甲氧基-7′-O-(3-溴)苄基)-苯丙烯酯;
I-r.(E)-(6,8-二甲氧基-7-O-(2″-碘,4″-溴)苄基)-苯丙烯酸-(E)-(6′,8′-二甲氧基-7′-O-(2-碘,4-溴)苄基)-苯丙烯酯;
I-s.(E)-(6,8-二甲氧基-7-O-香叶基)-苯丙烯酸-(E)-(6′,8′-二甲氧基-7′-O-香叶基)-苯丙烯酯;
本发明提供了一种具有式(2)所示的苯丙酸苯丙酯类化合物和其类似物及其可药用盐或溶剂化物:
Figure A20041010289400111
式(2)
其中:
取代基R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′可以相同或不同,分别独立地选自氢,巯基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,含1~8个碳的烷胺基,1~15碳的不饱和烃基,1~15碳的不饱和烃氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基,取代或未取代的芳基,取代或未取代的芳氧基,取代或未取代的芳烷氧基,含1~8个碳的酰氧基,其条件是取代基R6,R7,R8,R6′,R7′和R8′不能同时是氢;取代基X选自氢(H)2,羟基(OH)2,氧,硫;基团R选自氧,氮,含1-8个碳的亚烷基,含1-8个碳的亚烷胺基,含1-8个碳的亚烷氧基,含1-8个碳的亚烷硫基;
其中用于取代的取代基选自含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,卤素,羟基,氨基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷胺基,或苯基;
本发明优选的式(2)化合物及其可药用盐或溶剂化物是:当式(2)中的取代基X为氧,取代基R为氧时,为式(II)所示的苯丙酸苯丙酯类化合物:
其中:
取代基R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′可以相同或不同,分别独立地选自氢,巯基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,含1~8个碳的烷胺基,1~15碳的不饱和烃基,1~15碳的不饱和烃氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基,取代或未取代的芳基,取代或未取代的芳氧基,取代或未取代的芳烷氧基,含1~8个碳的酰氧基,其条件是取代基R6,R7,R8,R6′,R7′和R8′不能同时是氢;
其中用于取代的取代基选自含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,卤素,羟基,氨基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷胺基,或苯基;
本发明优选的式(II)化合物及其可药用盐或溶剂化物,其中:
R6,R7,R8,R6′,R7′和R8′可以相同或不同,分别独立地选自氢,硝基,含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷胺基,含1~8个碳的烷氧基,含1~15个碳的不饱和烯氧基,取代或未取代的芳烷氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基,其条件是取代基R6,R7,R8,R6′,R7′和R8′不能同时是氢;
其中用于取代的取代基选自含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,卤素,羟基,氨基,硝基,氰基含1~8个碳的烷胺基,或苯基。
本发明进一步优选的式(II)化合物及其可药用盐或溶剂化物是,其中:
R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′可以相同或不同,分别独立地选自氢,硝基,含1~8个碳的烷氧基,含1~15个碳的不饱和烯氧基,取代或未取代的芳烷氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基,其条件是取代基R6,R7,R8,R6′,R7′和R8′不能同时是氢;
其中用于取代的取代基选自含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,卤素,羟基,氨基,硝基。
本发明优选的式(II)化合物包括:
II-a.7-甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基-苯丙酯;
II-b.6,7,8-三甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基-苯丙酯;
II-c.7-氨基-苯丙酸-6′,7′-二甲氧基-苯丙酯;
II-d.6,7-二甲氧基-苯丙酸-6′,7′-二甲氧基-苯丙酯;
II-e.7-甲氧基-苯丙酸-6′,7′-二甲氧基-苯丙酯;
II-f.7-甲基-苯丙酸-7′-甲基-苯丙酯;
II-g.6,7,8-三甲氧基-苯丙酸-6′,7′-二甲氧基-苯丙酯;
II-h.7-甲氧基甲氧基-苯丙酸-6′,7′-二甲氧基甲氧基-苯丙酯;
II-i.6,7-二甲氧基甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基甲氧基-苯丙酯;
II-j.7-甲氧基甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基甲氧基-苯丙酯;
II-k.7-甲氧基甲氧基-苯丙酸苯丙酯;
II-l.6,7-二甲氧基甲氧基-苯丙酸苯丙酯;
II-m.7-甲氧基甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基-苯丙酯;
II-n.7-羟基-苯丙酸-7′-甲氧基-苯丙酯;
本发明提供了一种如式(3)所示的式(1)和式(2)化合物的关键中间体苯丙烯类化合物及其类似物以及其可药用盐或溶剂化物:
式(3)
其中取代基R6,R7,R8取代基X的定义与式(1)的相同;取代基R选自氢。巯基,胺基,羟基,含1-8个碳的烷基,含1-8个碳的烷胺基,含1-8个碳的烷氧基,含1-8个碳的烷硫基;
本发明优选的式(3)化合物及其可药用盐或溶剂化物是,其中:
R6,R7,R8可以相同或不同,分别独立地选自氢,羟基,硝基,含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷胺基,含1~8个碳的烷氧基,含1~15个碳的不饱和烯氧基,取代或未取代的芳烷氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基;取代基X选自氢(H)2,氧,硫;基团R选自氢,巯基,胺基,羟基,含1~8个碳的烷氧基;
其中用于取代的取代基选自含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,卤素,羟基,氨基,硝基。
本发明进一步优选的式(3)化合物及其可药用盐或溶剂化物是,其中:
R6,R7,R8可以相同或不同,分别独立地选自氢,羟基,硝基,含1~8个碳的烷氧基,含1~15个碳的不饱和烯氧基,取代或未取代的芳烷氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基;取代基X是氢(H)2,氧;基团R是羟基,含1~8个碳的烷氧基;
其中用于取代的取代基选自含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,卤素,羟基,氨基,硝基。
本发明进一步的实施方案是:
当式(3)化合物中的取代基X是氧,取代基R是乙氧基(CH3CH2O)时,如式(4)所示,为式I-1化合物:
式(4)
其中取代基R6,R7,R8的定义与式(3)相同。
本发明的式I-1化合物包括:
I-1-a.(E)-7-甲氧氧基苯丙酸乙酯;
I-1-b.(E)-6,7-二甲氧基甲氧基-苯丙酸乙酯;
I-1-c.(E)-6,8-二甲氧基-7-O-(4′-溴苄基)-苯丙酸乙酯;
I-1-d.(E)-7-硝基苯丙酸乙酯;
I-1-e.(E)-7-甲氧基甲氧基苯丙酸乙酯;
I-1-f.(E)-6,8-二甲氧基-7-O-(2′-氟,4′-溴苄基)-苯丙酸乙酯;
I-1-g.(E)-6,7-二甲氧基-苯丙酸乙酯;
I-1-h.肉桂酸乙酯;
I-1-i.(E)-6,8-二甲氧基-7-O-(3′-溴苄基)-苯丙酸乙酯;
I-1-j.(E)-6,7,8-三甲氧基-苯丙酸乙酯;
I-1-k.(E)-7-甲基-苯丙酸乙酯;
I-1-l.(E)-6,8-二甲氧基-7-O-(3′,4′-二氯苄基)-苯丙酸乙酯;
I-1-m.(E)-6,8-二甲氧基-7-O-香叶基-苯丙酸乙酯;
当式(3)化合物中的取代基X是氧,取代基R是羟基(OH)时,如式(5)所示,为式I-2化合物:
Figure A20041010289400141
式(5)
其中取代基R6,R7,R8的定义与式(3)相同。
本发明的式I-2化合物包括:
I-2-a.(E)-7-甲氧基苯丙烯酸;
I-2-b.(E)-7-硝基苯丙烯酸;
I-2-c.(E)-6,8-二甲氧基-7-O-(2′-氟,4′-溴苄基)-苯丙烯酸;
I-2-d.(E)-6,7-二甲氧基-苯丙烯酸;
I-2-e.(E)-6,8-二甲氧基-7-O-(4′-溴苄基)-苯丙烯酸;
I-2-f.(E)-6,8-二甲氧基-7-O-(3′-溴苄基)-苯丙烯酸;
I-2-g.(E)-6,7,8-三甲氧基-苯丙烯酸;
I-2-h.(E)-6,7-二甲氧基甲氧基苯丙烯酸;
I-2-i.(E)-7-甲基-苯丙烯酸;
I-2-j.(E)-7-甲氧基甲氧基苯丙烯酸;
I-2-k.(E)-6,8-二甲氧基-7-O-(3′,4′-二氯苄基)-苯丙烯酸;
I-2-l.肉桂酸;
I-2-m.(E)-6,8-二甲氧基-7-O-香叶基-苯丙烯酸;
当式(3)化合物中的取代基代基X是氢(H2),取基基R是羟基(OH)时,如式(6)所示,为式I-3化合物:
Figure A20041010289400151
式(6)
其中取代基R6,R7,R8的定义与式(3)相同。
本发明的式I-3化合物包括:
I-3-a.(E)-7-甲氧基苯丙烯-1-醇;
I-3-b.(E)-6,7-二甲氧基甲氧基苯丙烯-1-醇;
I-3-c.(E)-6,8-二甲氧基-7-O-(4′-溴苄基)-苯丙烯-1-醇;
I-3-d.(E)-6,7,8-三甲氧基-苯丙稀-1-醇;
I-3-e.(E)-7-甲氧基甲氧基苯丙烯-1-醇;
I-3-f.(E)-6,8-二甲氧基-7-O-(3′,4′-二氯苄基)-苯丙烯-1-醇;
I-3-g.(E)-6,7-二甲氧基-苯丙烯-1-醇;
I-3-h.(E)-6,8-二甲氧基-7-O-(2′-氟,4′-溴苄基)-苯丙烯-1-醇;
I-3-i.(E)-6,8-二甲氧基-7-O-(3′-溴苄基)-苯丙烯-1-醇;
I-3-j.(E)-7-甲基-苯丙烯-1-醇;
I-3-k.(E)-6,8-二甲氧基-7-O-香叶基-苯丙烯-1-醇;
本发明的另一目的是提供一种由中间体式(3)化合物制备式(1)、式(2)化合物的方法。该合成工艺路线特征(以取代基X为氧,取代基R为氧为例说明)是:
以取代的苯甲醛化合物通过与三苯基乙氧羰基次甲基膦烷经历魏悌息(wittig)反应制备得到式I-1化合物;由式I-1化合物经过碱水解得到式I-2化合物;式I-1化合物通过氢化锂铝(LiAlH4)还原得到I-3化合物;式(1)化合物可由式I-2化合物与式I-3化合物在N,N-二环己基碳二亚胺(DCC)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)存在下通过酯化反应制备得到式I化合物,或者由式I-2化合物与式I-3化合物在1,1′-二羰基咪唑(CDI),1,8-二氮杂双环[5,4,0]11烷-7-烯(DBU)存在下通过酯反应得到。式(2)化合物可由式(1)化合物通过钯碳(Pd-C)催化加氢反应制得。优选的式(1)化合物,式(2)化合物,式(3)化合物的具体制备过程如下所示:
Figure A20041010289400161
其中,当式I化合物和式II化合物的取代基R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′中含1~8个碳的烷胺基,含1~15个碳的饱和或不饱和烃基,取代或未取代的芳基,取代或未取代的芳烷基,含1~8个碳的酰基,含1~8个碳的烷氧基烷基时,反应要求初始原料即取代的苯甲醛需由该位未取代的苯甲醛化合物通过与生成该取代基的相关原料反应制备而得。以取代基R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′中含芳烷基氧基为例说明,当取代基R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′中含芳烷基氧基即由对应位置含羟基的苯甲醛化合物与卤代芳烷基反应制备而得,以取代基R6,R8,R6′,R8′为甲氧基,R7,R7′为对溴苄氧基的式I化合物为例说明原料取代苯甲醛的制备,具体如下所示:
Figure A20041010289400171
其中,当式I化合物和式II化合物的取代基R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′中含羟基时,反应要求初始原料即取代的苯甲醛需由含羟基的苯甲醛化合物通过甲氧基甲基氯(MOMCl)保护后制得,同时式I化合物和式II化合物都需经过10%盐酸(10%HCl)水解后制得。具体制备过程以取代基R6,R86′R8′氢,R7,R7′为羟基的式I化合物和式II化合物为例说明这类反应,具体如下所示:
i:原料羟基保护
ii:水解脱保护
本发明的式(1)化合物、式(2)化合物及式(3)化合物或其可药用盐及其溶剂化物可以与药学上常用的辐料或载体结合,制备得到具有肿瘤细胞生长抑制活性从而可以用于防治肿瘤的药物组合物。上述各类药物组合物可以采用注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂、软膏剂等剂型药物。
本发明的式(1)化合物、式(2)化合物及式(3)化合物或其可药用盐及其溶剂化物可以与现已上市的抗肿瘤药物如铂类药物顺铂(DDP)、喜树碱类药物伊立替康(Irinatecan、CPT-11)、长春花碱类药物失碳长春花碱(Vinorebine,NVB诺维本)、脱氧胞昔类药物吉西他滨(Gemcitabine,Gemzar,健择)、足叶乙甙(Etoposide)、紫杉醇(Paditaxel)等联合使用,制备得到具有肿瘤生长抵制活性的细胞毒性组合物,可用于治疗肿瘤疾病。该类药物组合物可以采用注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂、软膏剂等剂型药物。
下面通过实施例进一步说明本发明。实施例给出了代表性化合物的合成及相关结构鉴定数据以及部分活性数据。必须说明,下述实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。
实施例1:化合物I-i((E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙酸-(E)-(7′-甲氧基甲氧基)苯丙烯酯)的制备
本例涉及到具有细胞毒活性的式(1)化合物的一般合成方法。具体涉及化合物(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙酸-(E)-(7′-甲氧基甲氧基)苯丙烯酯的合成。将对甲氧甲氧基肉桂酸(292mg,1.4mmol),N,N-二环己基碳二亚胺(318mg,1.5mmol),4-二甲氨基吡啶(34mg,0.28mmol)溶于二氯甲烷中,在室温下搅拌10分钟,出现白色浑浊,加入对甲氧甲氧基肉桂醇(300mg,15mmol)的二氯甲烷溶液,在室温下搅拌24小时。硅藻土过滤,滤液浓缩,粗品柱层析分离(正己烷/乙酸乙酯=8∶1,粗品/硅胶=1∶50)得到白色固体468mg,产率为87.0%。
化合物I-i:Rf(正己烷/乙酸乙酯:4/1):0.6;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ3.48(6H,s),4.84(2H,d,J=6.4Hz),5.21(4H,s),6.25(1H,dt,J=16.0,6.4Hz),6.37(1H,d,J=16.0Hz),6.66(1H,d,J=16.0Hz),7.00~7.49(8,m),7.68(1H,d,J=16.0Hz)。
根据实施例1的方法制备以下表一所示实施例2-19化合物:
表一
  实施例号   化合物编号                               取代基
  R6   R7   R8   R6′   R7′   R8′
  2   I-a   H   OCH3   H   H   OCH3   H
  3   I-b   OCH3   OCH3   OCH3   H   OCH3   H
  4   I-c   H   NO2   H   OCH3   OCH3   H
  5   I-d   OCH3   OCH3   OCH3   OCH3   OCH3   OCH3
  6   I-e   H   OCH3   H   OCH3   OCH3   H
  7   I-f   OCH3   OCH3   H   OCH3   OCH3   H
Figure A20041010289400191
下面列出表一中各化合物的理化数据:
化合物I-a:
白色固体,熔点:63~64℃,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.71;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ3.84(6H,s),4.84(2H,d,J=6.4Hz),6.26(1H,dt,J=16.0,6.4Hz),6.35(1H,d,J=16.0Hz),6.66(1H,d,J=16.0Hz),6.83~75.0(8H,m),7.69(1H,d,J=16.0Hz)。
化合物I-b:
白色固体,熔点:62~63℃,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.21;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ3.78(H,s)),3.88(6H,s),3.90(3H,s),4.85(2H,d,J=6.4Hz),6.24(1H,dt,J=16.0,6.4Hz),6.36(1H,d,J=16.0Hz),6.66(1H,d,J=16.0Hz),6.76~7.37(6H,m),7.64(1H,d,J=16.0Hz)。
化合物I-c:
黄色固体,熔点:89~90℃,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.26;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ3.89(3H,s),3.91(3H,s),4.88(2H,d,J=6.8Hz),6.24(1H,dt,J=16.0,6.8Hz),6.58(1H,d,J=16.0Hz),6.82(1H,d,J=16.0Hz),6.95~7.18(7H,m),7.75(1H,d,J=16.0Hz)。
化合物I-d:
白色固体,熔点:60~62℃,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.27;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ3.83(3H,s),3.86(3H,s),3.87(3H,s),3.88(3H,s),3.89(3H,s),3.90(3H,s),4.87(2H,t,J=6.4Hz,)6.30(1H,dt,J=16.0,6.4Hz)6.40(1H,t,J=16.0Hz),6.64(2H,s),6.64(1H,d,J=16.0Hz),6.77(2H,s),7.66(1H,d,J=16.0Hz)。
化合物I-e:
白色固体,熔点:66~67℃,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.22;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ3.84(3H,s),3.89(3H,s),3.91(3H,s),4.85(2H,d,J=6.8Hz),6.24(1H,dt,J=16.0,6.8Hz),6.36(1H,d,J=16.0Hz),6.65(1H,d,J=16.0Hz),6.80~7.49(7H,m),7.69(1H,d,J=16.0Hz)。
化合物I-f:
白色晶体,熔点:78~79℃,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.21;1HNMR(400MHZ,CDCl3):δ3.91(6H,s),3.92(6H,s),4.86(2H,d,J=6.4Hz),6.23(1H,dt,J=16.0,6.4Hz),6.36(1H,d,J=16.0Hz),6.66(1H,d,J=16.0Hz),6.84~7.13(6H,m),7.68(1H,d,J=16.0Hz)。
化合物I-g:
白色固体,熔点:77~78℃,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.27;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ3.85(3H,s),3.86(6H,s),3.88(6H,s),4.86(2H,d,J=6.4Hz),6.25(1H,dt,J=16.0,6.4Hz),6.40(1H,d,J=16.0Hz),6.66(1H,d,J=16.0Hz),6.76~6.97(5H,m)7.65(1H,d,J=16.0Hz)。
化合物I-h:
白色固体,熔点:65~66℃,Rf(正己烷/乙酸乙酯:4/1):0.38;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ3.48(3H,s),3.52(3H,s),3.53(3H,s),4.84(2H,d,J=6.4Hz),5.21(2H,s),5.24(2H,s),5.26(2H,s),6.25(1H,dt,J=16.0,6.4Hz),6.37(1H,d,J=16.0Hz),6.63(1,d,J=16.0Hz),7.00~7.50(7H,m),7.69(1H,d,J=16.0Hz)。
化合物I-i:
白色晶体,熔点:30~31℃,Rf(正己烷/乙酸乙酯:4/1):0.60;1HNMR(400MHZ,CDCl3):δ3.48(6H,s),4.84(2H,d,J=6.4Hz),5.21(4H,s),6.25(1H,dt,J=16.0,6.4Hz),6.37(1H,d,J=16.0Hz),6.66(1H,d,J=16.0Hz),7.00~7.48(8H,m),7.68(1H,d,J=16.0Hz)。
化合物I-j:
无色油滴,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.18;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ3.93(3H,s),4.87(2H,d,J=6.8Hz),5.90(1H,s),6.36(1H,dt,J=16.0,6.8Hz),6.37(1H,d,J=16.0Hz),6.71(1H,d,J=16.0Hz),6.94~7.43(8H,m),7.67(1H,d,J=16.0Hz)。
化合物I-k:
白色固体,熔点:52~53℃,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.54;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ3.49(3H,s),4.88(2H,d,J=6.4Hz,5.22(2H,s),6.36(1H,dt,J=16.0,6.4Hz),6.36(1H,d,J=16.0Hz0,6.72(1H,d,J=16.0Hz),7.04~7.51(9H,m),7.70(1H,d,J=16.0Hz)。
化合物I-l:
无色油滴,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.53;1HNMR(400MHZ,CDCl3:δ3.52(3H,s),3.53(3H,s),4.87(2H,d,J=6.8Hz,5.26(2H,s),5.27(2H,s),6.36(1H,dt,J=16.0,6.8Hz),6.37(1H,d,J=16.0Hz),6.72(1H,d,J=16.0Hz),6.85~7.62(8H,m),7.66(1H,d,J=16.0Hz)。
化合物I-m:
白色晶体,熔点32~33℃,Rf(正己烷/乙酸乙酯:4/1):032;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ3.48(3H,s),3.52(3H,s),3.53(3H,s),4.84(2H,d,J=6.4Hz),5.18(2H,s),5.26(2H,s),5.27(2H,s),6.25(1H,dt,J=16.0,6.4Hz),6.37(1H,d,J=16.0Hz),6.66(1H,d,J=16.0Hz),6.99~7.38(7H,m),7.65(1H,d,J=16.0Hz)。
化合物I-n:
白色固体,熔点:49~50℃,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.20;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ3.48(3H,s),3.82(3H,s),4.84(2H,d,J=6.8Hz),5.21(2H,s),6.24(1H,dt,J=16.0,6.8Hz),6.36(1H,d,J=16.0Hz),6.66(1H,d,J=16.0Hz),6.83~7.49(8H,m),7.68(1H,d,J=16.0Hz)。
化合物I-o:
白色固体,熔点:101~104℃,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.33;1HNMR(400MHzH,CDCl3):δ3.83(3H,s),3.84(3H,s),3.86(3H,s),3.87(3H,s),4.87(2H,d,J=6.4Hz),4.97(2H,s),5.00(2H,s),6.28(1H,dt,J=16.0,6.8Hz),6.40(1H,d,J=16.0Hz),6.63(1H,d,J=16.0Hz),6.63(2H,s),6.65(1H,d,J=16.0Hz),6.75(2H,s),7.26~7.30(2H,m),7.39~7.42(2H,m),7.65(2H,s)。
化合物I-p:
白色固体,熔点:88~91℃,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.31;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ3.81(3H,s),3.82(3H,s),3.83(3H,s),3.85(3H,s),4.87(2H,d,J=6.8Hz),4.97(2H,s),5.00(2H,s),6.29(1H,dt,J=16.0,6.8Hz),6.39(1H,d,J=16.0Hz),6.60(1H,d,J=16.0Hz),6.62(2H,s),6.74(2H,s),7.35(4H,d,J=6.8Hz),7.47(4H,d,J=6.8Hz),7.64(1H,d,J=16.0Hz)。
化合物I-q:
白色胶状,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.32;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ3.83(3H,s),3.84(3H,s),3.87(3H,s),3.89(3H,s),4.87(2H,d,J=6.4Hz),4.97(2H,s),5.01(2H,s),6.26(1H,dt,J=16.0,6.4Hz),6.39(1H,d,J=16.0Hz),6.61(1H,d,J=16.0Hz),6.61(2H,s),6.75(2H,s),7.20(2H,m)7.37(2H,d,J=8.0Hz),7.42(2H,d,J=8.0Hz),7.64(1H,d,J=16.0Hz),7.71(2H,s)。
化合物I-r:
白色固体,熔点:75~78℃,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.38;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ3.81(3H,s),3.82(3H,s),3.84(3H,s),3.85(3H,s),4.87(2H,d,J=6.4Hz),5.05(2H,s),508(2H,s),6.25(1H,dt,J=16.0,6.4Hz),6.40(1H,d,J=16.0Hz),6.61(2H,s),6.63(1H,d,J=16.0Hz),6.74(2H,s),7.20~7.29(4H,m),7.48(2H,d,J=8.0Hz),7.64(1H,d,J=16.0Hz)。
化合物I-s:
淡黄液体,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.58;1HNMR(400Mz,CDCl3):δ1.59(6H,s),1.67(12H,s),2.04(8H,m)3.84(3H,s),3.85(3H,s),3.87(3H,s),3.88(3H,s),4.54(4H,m),4.87(2H,d,J=6.4Hz),5.07(2H,m),5.56(2H,m),6.28(1H,dt,J=16.0,6.4Hz),6.40(1H,d,J=16.0Hz),6.60(2H,s),6.63(1H,d,J=16.0Hz),6.75(2H,s),7.65(1H,d,J=16.0Hz)。
实施例20:化合物II-j(4-甲氧基甲氧基-苯丙酸-4-甲氧基甲氧基-苯丙酯)的制备
Figure A20041010289400221
本例涉及到具有细胞毒活性的式(2)化合物的一般合成方法。具体涉及化合物7,7′-二甲氧甲氧基苯丙酸丙苯酯的合成。将化合物(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙酸-(E)-(7′-甲氧基甲氧基)苯丙烯酯(50mg,0.13mmol)的乙酸乙酯(8mL)溶液加入装有5mg 10%钯碳的三颈瓶中,导入氢气,室温反应过夜。硅藻土过滤,滤液浓缩,柱层析(正己烷/乙酸乙酯=4∶1,粗品/硅胶=1∶50)分离得到无色油滴48mg,产率达95.2%。
化合物II-j:无色油滴,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.67;
1HNMR(400MHz,CDCl3):δ1.90(2H,m),2.53((2H,t,J=8.0Hz),2.64(2H,t,J=8.0Hz),2.91(2H,t,J=8.0Hz),3.47(3H,s),3.48(3H,s),4.12(2H,t,J=6.8Hz),5.15(2H,s),5.16(2H,s),6.95~7.15(8H,m)。
根据实施例20的方法制备以下表二所示实施例21-33化合物:
Figure A20041010289400231
表2
  实施例号   化合物编号                               取代基
  R6   R7   R8   R6′   R7′   R8′
  21   II-a   H   OCH3   H   H   OCH3   H
  22   II-b   OCH3   OCH3   OCH3   H   OCH3   H
  23   II-c   H   NH2   H   OCH3   OCH3   H
  24   II-d   OCH3   OCH3   H   OCH3   OCH3   H
  25   II-e   H   OCH3   H   OCH3   OCH3   H
  26   II-f   H   CH3   H   H   CH3   H
  27   II-g   OCH3   OCH3   OCH3   OCH3   OCH3   H
  28   II-h   H   OCH2OCH3   H   OCH2OCH3   OCH2OCH3   H
  29   II-i   OCH2OCH3   OCH2OCH3   H   H   OCH2OCH3   H
  30   II-k   H   OCH2OCH3   H   H   H   H
  31   II-l   OCH2OCH3   OCH2OCH3   H   H   H   H
  32   II-m   H   OCH2OCH3   H   H   OCH3   H
  33   II-n   H   OH   H   H   OCH3   H
化合物II-a:
无色油滴,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.71;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ1.91(2H,m),25.8(2H,t,J=8.0Hz),2.60(2H,t,J=8.0Hz),2.90(2H,t,J=8.0Hz),3.78(6H,s),4.07(2H,t,J=6.4Hz),6.82~7.14(8H,m)。
化合物II-b:
无色油滴,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.23;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ1.91(2H,m)2.61(2H,t,J=8.0Hz),2.63(2H,t,J=8.0Hz),2.90(2H,t,J=8.0Hz),3.78(3H,s),3.81(3H,s),3.84(6H,s),4.09(2H,t,J=6.4Hz),6.42~7.73(6H,m)。
化合物II-c:
无色油滴,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.13;1HNMR(400MHz,CEDCl3):δ1.91(2H,m),2.58(2H,t,J=8.0Hz),2.63(2H,t,J=8.0Hz),2.85(2H,t,J=8.0Hz),3.86(3H,s),3.87(3H,s),4.10(2H,t,J=6.4Hz),5.30(2H,s),6.43~7.02(7H,m)。
化合物II-d:
无色油滴,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.26;1HNMR(400MHz,CDDl3):δ1.92(2H,m),2.61(2H,t,J=8.4Hz),2.63(2H,t,J=8.4Hz),2.91(2H,t,J=8.4Hz),3.85(3H,s),3.86(3H,s),3.87(6H,s),4.10(2H,t,J=6.4Hz),6.70(2H,s),6.68~6.80(6H,m)。
化合物II-e:
无色油滴,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.25;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ1.91(2H,m),2.59(2H,t,J=8.4Hz),2.62(2H,t,J=8.4Hz),2.90(2H,t,J=8.4Hz),3.78(3H,s),3.86(3H,s),3.88(3H,s),4.09(2H,t,J=6.4Hz),6.68~7.14(7H,m)。
化合物II-f
无色油滴,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.26;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ1.92(2H,m),2.33(3H,s),2.34(3H,s),2.63(2H,t,J=8.0Hz),2.70(2H,t,J=8.0Hz),2.93(2H,t,J=8.0Hz),4.09(2H,t,J=6.4Hz),7.05~7.12(8H,m)。
化合物II-g:
无色油滴,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.28;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ1.91(2H,m),2.61(2H,t,J=8.0Hz),2.66(2H,t,J=8.0Hz),2.90(2H,t,J=8.0Hz),3.81(3H,s),3.84(3H,s),3.86(6H,s),3.87(3H,s),4.10(2H,t,J=6.4Hz),6.43~7.80(5H,m)。
化合物II-h:
无色油滴,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.39;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ1.91(2H,m),2.57(2H,t,J=8.0Hz),2.68(2H,t,J=8.0Hz),2.92(2H,t,J=8.0Hz),3.46(3H,s),3.52(3H,s),3.63(3H,s),4.09(2H,t,J=6.8Hz),5.14(2H,s),5.20(2H,s),5.23(2H,s),6.73~7.14(7H,m)。
化合物II-i:
无色油滴,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.35;1HNMR(400MHz,CDCl3:δ1.91(2H,m),2.61(2H,t,J=8.0Hz),2.63(2H,t,J=8.0Hz),2.89(2H,t,J=8.0Hz),3.48(3H,s),3.51(3H,s),3.52(3H,s),4.08(2H,t,J=6.8Hz),5.16(2H,s),5.20(2H,s),5.23(2H,s),6.79~7.27(7H,m)。
化合物II-k:
无色油滴,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.55;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ1.94(2H,m),2.61(2H,t,J=8.0Hz),2.65(2H,t,J=8.0Hz),2.91(2H,t,J=8.0Hz),3.47(3H,s),4.11(2H,t,J=6.8Hz),5.15(2H,s),6.96~7.31(9H,m)。
化合物II-l:
无色油滴,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.54;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ1.91(2H,m),2.61(2H,t,J=8.0Hz),2.66(2H,t,J=8.0Hz),2.89(2H,t,J=8.0Hz),3.51(3H,s),3.52(3H,s),4.12(2H,t,J=6.8Hz),5.20(2H,s),5.23(2H,s),6.80~7.31(8H,m)。
化合物II-m:
无色油滴,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.22;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ1.90(2H,m),2.59(2H,t,J=8.0Hz),2.61(2H,t,J=8.0Hz),2.91(2H,t,J=8.0Hz),3.29(3H,s),3.79(3H,s),4.08(2H,t,J=6.0Hz),5.15(2H,s),6.83~7.15(8H,m)。
化合物II-n:
无色油滴,Rf(正己烷/乙酸乙酯:3/1):0.18;1HNMR(400MHz,CDCl3):δ1.92(2H,m),258(2H,t,J=8.0Hz),2.64(2H,t,J=8.0Hz),2.88(2H,t,J=8.0Hz),3.79(3H,s),4.07(2H,t,J=6.0Hz),5.38(1H,brs),6.74~7.26(8H,m)。
为了更好地理解本发明的实质,下面分别用化合物对五种肿瘤细胞株生长的抑制作用的药理实验结果,说明其在制药领域中的新用途。
实施例34:化合物I-l对KB细胞的细胞毒活性
KB(口腔上皮癌)细胞用RPMI 1640培养基培养,培养基中含10%的胎牛血清,100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。细胞以每孔5×103的浓度加入到96孔板中,在37℃含5%CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法。细胞经过24小时的孵育后,分别将新配的化合物I-l的二甲亚砜溶液加入到孔中,使孔中化合物最终浓度为100μg/mL。72小时后,加入10μL MTT(5mg/mL)的磷酸盐缓冲液,再继续在37℃培养4小时后,离心5分钟除去未转化的MTT,每孔中加入200μL二甲亚砜,以溶解还原的的MTT晶体甲臜(formazan),所形成的formazan用酶标仪在570nm波长下比色,细胞存活率由样品相对于对照品的比值计算。
化合物I-l在浓度为100μg/mL时对KB细胞的抑制率为:66.21%
实验结论:本实验表明此类具有苯丙烯酸烯丙苯酯结构的化合物,对KB细胞的生长具有一定的抑制作用,有可能发展成为新的具有抗肿瘤作用的药物。
根据实施例34的方法,我们测试了本发明化合物对KB细胞的药理活性,具体数据见表三。
表三
化合物代号   II-e   II-m
100μg/mL时的抑制率  30.10%   42.36%
实施例35化合物I-3-f对PC-3细胞的细胞毒活性
PC-3(前列腺癌)细胞用F-12培养基培养,培养基中含10%的胎牛血清,100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。细胞以每孔5×103的浓度加入到96孔板中,在37℃含5%CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法,具体方法如实施例34。
化合物I-3-f在浓度为100μg/mL时对PC-3细胞的抑制率为:70.12%
实验结论:本实验表明此类具有苯丙烯结构的化合物,对PC-3细胞的生长具有一定的抑制作用,有可能发展成为新的具有抗肿瘤作用的药物。
根据实施例35的方法,我们测试了本发明化合物对PC-3细胞的药理活性,具体数据见表四。
表四
 化合物代号   II-e   II-m   I-l
 100μg/mL时的抑制率   23.71%   30.69%   47.79%
实施例36:化合物II-g对CNE细胞的细胞毒活性
CNE(鼻咽癌)细胞用RPMI 1640培养基培养,培养基中含10%的胎牛血清,100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。以每孔5×103细胞的浓度加入到%孔板中,在37℃含5%CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法,具体方法如实施例34。
化合物II-g在浓度为100μg/mL时对CNE细胞的抑制率为:48.75%
实验结论:本实验表明此类具有苯丙酸丙苯酯结构的化合物,对CNE细胞的生长具有一定的抑制作用,有可能发展成为新的具有抗肿瘤作用的药物。
根据实施例36的方法,我们测试了本发明化合物对CNE细胞的药理活性,具体数据见表五。
表五
化合物代号     I-k   II-d
100μg/mL时的抵制率  7.51%   40.26%
实施例37:化合物I-g对A549细胞的细胞毒活性
A549(人肺癌)细胞用RPMI 1640培养基培养,培养基中含10%的胎牛血清,100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。细胞以每孔5×103的浓度加入到96孔板中,在37℃含5%CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法,具体方法如实施例34。
化合物I-g在浓度为100μg/mL时对A549细胞的抑制率为:74.40%
实验结论:本实验表明此类具有苯丙烯酸烯丙苯酯结结构的化合物,对A549细胞的生长具有一定的抑制作用,有可能发展成为新的具有抗肿瘤作用的药物。
根据实施例37的方法,我们测试了本发明化合物对A549细胞的药理活性,具体数据见表六。
表六
化合物代号     I-n   II-g
100μg/mL时的抑制率 22.57%   11.53%
实施例38:化合物I-n对Hela细胞的细胞毒活性
Hela(人子宫颈癌)细胞用RPMI 1640培养基培养,培养基中含10%的胎牛血清,100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。细胞以每孔5×103的浓度加入到96孔板中,在37℃含5%CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法,具体方法如实施例34。
化合物I-n在浓度为100μg/mL时对Hela细胞的抑制率为:64.28%
实验结论:本实验表明此类具有苯丙酸丙苯酯结构的化合物,对Hela细胞的生长具有一定的抑制作用,有可能发展成为新的具有抗肿瘤作用的药物。
根据实施例38的方法,我们测试了本发明化合物对Hela细胞的药理活性,具体数据见表七。
表七
化合物代号    II-m   II-d   I-k
100μg/mL时的抑制率   29.85%   36.68%   39.33%
为了更好地理解本发明的实质,下面分别用该类化合物的各种药物剂型例如片剂、胶囊剂、注射剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂和软膏剂的制备方法,说明其在制药领域中的新应用。
实施例39:片剂
用含有权利要求1、权利要求2和权利要求3中化合物的化合物(以化合物II-m为例)2000mg,按照药剂学一般压片法混匀后加辅料8000mg,压制成100片,每片重100mg。
实施例40:胶囊剂
用含有权利要求1、权利要求2和权利要求3中化合物的化合物(以化合物I-k为例)2000mg,按照药剂学胶囊剂的要求将8000mg辅料混匀后,装入空心胶囊,每个胶囊重100mg。
实施例41:注射剂
用含有权利要求1、权利要求2和权利要求3中化合物的化合物(以化合物II-n为例)2000mg,按照常规药剂学方法,进行活性炭吸附,经0.65μ微孔滤膜过滤后,填入氮气罐制成水针制剂。每只针剂罐装2ml,共罐装1000瓶。
实施例42:气雾剂
用含有权利要求1、权利要求2和权利要求3中化合物的化合物(以化合物II-e为例)2000mg,用适量丙二醇溶解后,加入蒸馏水及其他辅料后,制成200ml的澄清溶液即得。
实施例43:栓剂
用含有权利要求1、权利要求2和权利要求3中化合物的化合物(以化合物I-3-f为例)2000mg,将之研细加入甘油适量,研匀后加入已熔化的甘油明胶,研磨均匀,倾入已涂润滑剂的模型中,制得化合物I-3-f栓20颗。
实施例44:膜剂
用含有权利要求1、权利要求2和权利要求3中化合物的化合物(以化合物I-g为例)2000mg,将聚乙烯醇、药用甘油、水等搅拌膨胀后加热溶解,80目筛网过滤,再将化合物II-l加入到滤液中搅拌溶解,涂膜机制膜200片。
实施例45:滴丸剂
用含有权利要求1、权利要求2和权利要求3中化合物的化合物(以化合物II-e为例)2000mg,与明胶等基质700mg加热溶化混匀后,滴入低温液体石蜡中,共制得滴丸100丸。
实施例46:外用搽剂
用用含有权利要求1、权利要求2和权利要求3中化合物的化合物(以化合物II-m为例)2g,按照常规药剂学方法,与乳化剂等辅料0.5g混合研磨,再加蒸馏水至50ml制成。
实施例47:软膏剂
用含有权利要求1、权利要求2和权利要求3中化合物的化合物(以化合物I-o为例)2000mg,研细后与凡士林等油性基质198g研匀即得。

Claims (13)

1.一种式(1)所示的具有细胞毒活性的苯丙烯酸苯丙烯酯类衍生物及其可药用盐或溶剂化物:
其中:
取代基R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′可以相同或不同,分别独立地选自氢,巯基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,含1~8个碳的烷胺基,1~15碳的不饱和烃基,1~15碳的不饱和烃氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基,取代或未取代的芳基,取代或未取代的芳氧基,取代或未取代的芳烷氧基,含1~8个碳的酰氧基,其条件是取代基R6,R7,R8,R6′,R7′和R8′不能同时是氢;取代基X选自氢(H)2,羟基(OH)2,氧,硫;基团R选自氧,硫,氮,含1-8个碳的亚烷基,含1-8个碳的亚烷胺基,含1-8个碳的亚烷氧基,含1-8个碳的亚烷硫基;
其中用于取代的取代基选自含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,卤素,羟基,氨基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷胺基,或苯基。
2.根据权利要求1的式(1)化合物及其可药用盐或溶剂化物,其中式(1)中的取代基X为氧,取代基R为氧,为式(I)所示的苯丙烯酸苯丙烯酯类化合物:
Figure A2004101028940002C2
其中:
取代基R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′可以相同或不同,分别独立地选自氢,巯基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,含1~8个碳的烷胺基,1~15碳的不饱和烃基,1~15碳的不饱和烃氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基,取代或未取代的芳基,取代或未取代的芳氧基,取代或未取代的芳烷氧基,含1~8个碳的酰氧基,其条件是取代基R6,R7,R8,R6′,R7′和R8′不能同时是氢;
其中用于取代的取代基选自含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,卤素,羟基,氨基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷胺基,或苯基。
3.根据权利要求2的式(I)化合物,它们是:
I-a.(E)-7-甲氧基-苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基)苯丙烯酯;
I-b.(E)-(6,7,8-三甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基)苯丙烯酯;
I-c.(E)-(7-硝基)苯丙烯酸-(E)-(6′,7′-二甲氧基)苯丙烯酯;
I-d.(E)-(6,7,8-三甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′,7′,8′-三甲氧基)苯丙烯酯;
I-e.(E)-(7-甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′,7′-二甲氧基)苯丙烯酯;
I-f.(E)-(6,7-二甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′,7′-二甲氧基)苯丙烯酯;
I-g.(E)-(6,7,8-三甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′,7′-二甲氧基)苯丙烯酯;
I-h.(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(6′,7′-二甲氧基甲氧基)苯丙烯酯;
I-i.(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基甲氧基)苯丙烯酯;
I-j.(E)-(7-羟基)苯丙烯酯-(E)-(7′-甲氧基)苯丙烯酯;
I-k.(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-苯丙烯酯;
I-l.(E)-(6,7-二甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-苯丙烯酯;
I-m.E)-(6,7-二甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基甲氧基)-苯丙烯酯;
I-n.(E)-(7-甲氧基甲氧基)苯丙烯酸-(E)-(7′-甲氧基)苯丙烯酯;
I-o.(E)-(6,8-二甲氧基-7-O-(3″,4″-二氯)苄基)-苯丙烯酸-(E)-(6′,8′-二甲氧基-7′-O-(3,4-二氯)苄基)-苯丙烯酯;
I-p.(E)-(6,8-二甲氧基-7-O-(4″-溴)苄基)-苯丙烯酸-(E)-(6′,8′-二甲氧基-7′-O-(4-溴)苄基)-苯丙烯酯;
I-q.(E)-(6,8-二甲氧基-7-O-(3″-溴)苄基)-苯丙烯酸-(E)-(6′,8′-二甲氧基-7′-O-(3-溴)苄基)-苯丙烯酯;
I-r.(E)-(6,8-二甲氧基-7-O-(2″-碘,4″-溴)苄基)-苯丙烯酸-(E)-(6′,8′-二甲氧基-7′-O-(2-碘,4-溴)苄基)-苯丙烯酯;
I-s.(E)-(6,8-二甲氧基-7-O-香叶基)-苯丙烯酸-(E)-(6′,8′-二甲氧基-7′-O-香叶基)-苯丙烯酯。
4.一种具有式(2)所示的具有细胞毒活性的苯丙酸苯丙酯类衍生物及其可药用盐或溶剂化物:
Figure A2004101028940004C1
其中:
取代基R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′可以相同或不同,分别独立地选自氢,巯基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,含1~8个碳的烷胺基,1~15碳的不饱和烃基,1~15碳的不饱和烃氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基,取代或未取代的芳基,取代或未取代的芳氧基,取代或未取代的芳烷氧基,含1~8个碳的酰氧基,其条件是取代基R6,R7,R8,R6′,R7′和R8′不能同时是氢;取代基X选自氢(H)2,羟基(OH)2,氧,硫;基团R选自氧,硫,氮,含1-8个碳的亚烷基,含1-8个碳的亚烷胺基,含1-8个碳的亚烷氧基,含1-8个碳的亚烷硫基;
其中用于取代的取代基选自含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,卤素,羟基,氨基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷胺基,或苯基。
5.根据权利要求4的式(2)化合物及其可药用盐或溶剂化物,其中式(2)中的取代基X为氧,取代基R为氧,为式(II)所示的苯丙酸苯丙酯类化合物:
其中:
取代基R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′可以相同或不同,分别独立地选自氢,巯基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,含1~8个碳的烷胺基,1~15碳的不饱和烃基,1~15碳的不饱和烃氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基,取代或未取代的芳基,取代或未取代的芳氧基,取代或未取代的芳烷氧基,含1~8个碳的酰氧基,其条件是取代基R6,R7,R8,R6′,R7′和R8′不能同时是氢;
其中用于取代的取代基选自含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,卤素,羟基,氨基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷胺基,或苯基。
6.根据权利要求式(II)化合物及其可药用盐或溶剂化物,其中:
R6,R7,R8,R6′,R7′或R8′可以相同或不同,分别独立地选自氢,硝基,含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷胺基,含1~8个碳的烷氧基,含1~15个碳的不饱和烯氧基,取代或未取代的芳烷氧基,含1~8个碳的烷氧基烷氧基,其条件是取代基R6,R7,R8,R6′,R7′和R8′不能同时是氢;
其中用于取代的取代基选自含1~8个碳的烷基,含1~8个碳的烷氧基,卤素,羟基,氨基,硝基,氰基,含1~8个碳的烷胺基,或苯基。
7.根据权利要求6的式(II)化合物,它们是:
II-a.7-甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基-苯丙酯;
II-b.6,7,8-三甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基-苯丙酯;
II-c.7-氨基-苯丙酸-6′,7′-二甲氧基-苯丙酯;
II-d.6,7-二甲氧基-苯丙酸-6′,7′-二甲氧基-苯丙酯;
II-e.7-甲氧基-苯丙酸-6′,7′-二甲氧基-苯丙酯;
II-f.7-甲基-苯丙酸-7′-甲基-苯丙酯;
II-g.6,7,8-三甲氧基-苯丙酸-6′,7′-二甲氧基-苯丙酯;
II-h.7-甲氧基甲氧基-苯丙酸-6′,7′-二甲氧基甲氧基-苯丙酯;
II-i.6,7-二甲氧基甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基甲氧基-苯丙酯;
II-j.7-甲氧基甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基甲氧基-苯丙酯;
II-k.7-甲氧基甲氧基-苯丙酸苯丙酯;
II-l.6,7-二甲氧基甲氧基-苯丙酸苯丙酯;
II-m.7-甲氧基甲氧基-苯丙酸-7′-甲氧基-苯丙酯;
II-n.7-羟基-苯丙酸-7′-甲氧基-苯丙酯;
8.根据权利要求2中式I化合物的制备方法,包括将式I-2化合物与式I-3化合物在N,N-二环己基羰二亚胺(DCC)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)存在下通过酯化反应制备得到式I化合物:
Figure A2004101028940005C1
将式I-2化合物与式I-3化合物在1,1′-二羰基咪唑(CDI),1,8-二氮杂双环[5,4,0]11烷-7-烯(DBU)存在下通过酯化反应得式I化合物:
其中取代基R6,R7,R8,R6′,R7′,R8′的定义与权利要求2相同。
9.根据权利要求5中式II化合物制备方法,包括将式I化合物通过钯碳催化加氢反应制备得到式II化合物:
Figure A2004101028940006C2
其中取代基R6,R7,R8,R6′,R7′,R8′的定义与权利要求5相同。
10.根据权利要求1-7之一的化合物或者它们的可药用盐或它们的溶剂化物用于制备防治肿瘤疾病药物的用途。
11.一种用于防治肿瘤疾病的药物组合物,其含有治疗有效量的作为活性成分的根据权利要求1-7之一的化合物或者它们的可药用盐或它们的溶剂化物和可药用辅料。
12.一种用于防治肿瘤疾病的药物组合物,其含有治疗有效量的作为活性成分的根据权利要求1-7之一的化合物或者它们的可药用盐或它们的溶剂化物以及与其他抗肿瘤药物组成的混合物和可药用辐料。
13.根据权利要求11或者12的药物组合物,其选自注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂、软膏剂剂型药物。
CNB2004101028941A 2004-12-29 2004-12-29 苯丙烯酸苯丙烯酯和苯丙酸苯丙酯类化合物及其制备方法和制备药物的用途 Expired - Fee Related CN100400497C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2004101028941A CN100400497C (zh) 2004-12-29 2004-12-29 苯丙烯酸苯丙烯酯和苯丙酸苯丙酯类化合物及其制备方法和制备药物的用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2004101028941A CN100400497C (zh) 2004-12-29 2004-12-29 苯丙烯酸苯丙烯酯和苯丙酸苯丙酯类化合物及其制备方法和制备药物的用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1796363A true CN1796363A (zh) 2006-07-05
CN100400497C CN100400497C (zh) 2008-07-09

Family

ID=36817696

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB2004101028941A Expired - Fee Related CN100400497C (zh) 2004-12-29 2004-12-29 苯丙烯酸苯丙烯酯和苯丙酸苯丙酯类化合物及其制备方法和制备药物的用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN100400497C (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101015543B (zh) * 2007-02-15 2010-07-07 浙江海正药业股份有限公司 苯丙烯酸苯丙烯酯类化合物抗氧化保肝及保护脑损伤用途
CN101225031B (zh) * 2007-05-15 2011-10-05 浙江海正药业股份有限公司 二取代苯丙烯类衍生物及其制备方法和用途
CN101541717B (zh) * 2007-06-15 2012-01-25 广东中科药物研究有限公司 一种反式苯丙烯酸衍生物及其制备方法和应用
WO2014102504A1 (fr) * 2012-12-27 2014-07-03 Basf Beauty Care Solutions France Sas Nouveaux derives de l'acide sinapique et leurs utilisations cosmetiques ou pharmaceutiques.

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG93823A1 (en) * 1998-02-13 2003-01-21 Givaudan Roure Int Aryl-acrylic acid esters
US7323496B2 (en) * 1999-11-08 2008-01-29 Theracos, Inc. Compounds for treatment of inflammation, diabetes and related disorders
AU2055301A (en) * 1999-12-03 2001-06-12 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Alpha-ketoamide inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease
US20040248762A1 (en) * 2003-06-09 2004-12-09 Mcgee Thomas Malodor counteractant compositions

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101015543B (zh) * 2007-02-15 2010-07-07 浙江海正药业股份有限公司 苯丙烯酸苯丙烯酯类化合物抗氧化保肝及保护脑损伤用途
CN101225031B (zh) * 2007-05-15 2011-10-05 浙江海正药业股份有限公司 二取代苯丙烯类衍生物及其制备方法和用途
CN101541717B (zh) * 2007-06-15 2012-01-25 广东中科药物研究有限公司 一种反式苯丙烯酸衍生物及其制备方法和应用
WO2014102504A1 (fr) * 2012-12-27 2014-07-03 Basf Beauty Care Solutions France Sas Nouveaux derives de l'acide sinapique et leurs utilisations cosmetiques ou pharmaceutiques.
FR3000488A1 (fr) * 2012-12-27 2014-07-04 Basf Beauty Care Solutions F Nouveaux derives de l'acide sinapique et leurs utilisations cosmetiques ou pharmaceutiques
CN105026358A (zh) * 2012-12-27 2015-11-04 巴斯夫美容护理法国公司 新的芥子酸衍生物及其美容化妆或药物用途

Also Published As

Publication number Publication date
CN100400497C (zh) 2008-07-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1305839C (zh) 苯基甘氨酸衍生物
CN1122668C (zh) 环氧噻酮衍生物,其制备方法及其药物组合物
CN1310907C (zh) 杂环化合物和以其为有效成分的抗肿瘤药
CN1036920C (zh) 含杂环碳酸衍生物
CN1153771C (zh) 苯并呋喃并[3,4-f]喹啉衍生物、含有其的药物组合物及其应用
CN1030757A (zh) 苯并噻唑衍生物
CN1747948A (zh) 新n-单乙酰代邻苯二胺类、其稠合杂环衍生物及其作为药剂的应用
CN1910177A (zh) 取代的喹啉及其作为分枝杆菌抑制剂的用途
CN1016507B (zh) 新的福斯克林衍生物的制备方法
CN1049500A (zh) 苯并吡喃化合物,其生产方法及药物组合物
CN1715283A (zh) 新藤黄酸衍生物及其制备方法和用途
CN1031532A (zh) 杂环化合物
CN1317277C (zh) 苯并呋喃衍生物及其作为药物制剂的应用
CN1058494C (zh) 新的洋芫荽黄素化合物,其制备方法和含它们的药用组合物
CN1113240A (zh) 噁唑烷酮衍生物的制备方法
CN1927861A (zh) 一种藤黄酸衍生物及其制备方法和在制药中的应用
CN1896065A (zh) 1-(3′,4′,5′-三取代苯基)-异喹啉类化合物及其制备方法和用途
CN1302804A (zh) 二氢呋喃并[3,4-b]喹啉-1-酮类新化合物、其制备方法和含有这些化合物的药物组合物
CN1796363A (zh) 苯丙烯酸苯丙烯酯和苯丙酸苯丙酯类化合物及其制备方法和用途
CN1297556C (zh) 苯并[b]色烯并-萘啶-7-酮和吡喃并[2',3':7,8]喹啉并[2,3-b]喹喔啉-7-酮化合物、其制备方法及药用组合物
CN1138040A (zh) 新的环己烷化合物,其制备方法和含有它们的药物组合物
CN1721416A (zh) 取代亚甲基吡喃酮类衍生物及其制备方法和用途
CN1147491C (zh) 新的吖啶羧酸酯化合物、其制备方法及其药物组合物
CN1127757A (zh) 新四氢吡喃化合物,它们的制备以及含这类化合物的药物组合物
CN1680270A (zh) 3,4,5-三取代的苯丙烯类衍生物及其制备方法和用途

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: HAIZHENG MEDICINE STOCK CO., LTD., ZHEJIANG PROV.

Free format text: FORMER OWNER: HAIZHENG TIANHUA MEDICINE RESEARCH CO., LTD., ZHEJIANG PROV.

Effective date: 20080321

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20080321

Address after: Jiaojiang District of Taizhou City, Zhejiang Province Road outside No. 46 post encoding: 318000

Applicant after: Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co., Ltd.

Address before: G, 19 floor, building A, Hua zhe square, Zhejiang, Hangzhou Province, China: 310006

Applicant before: Zhejiang Hisun Naturelite Pharmaceutical Research & Development Co., Ltd.

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20080709

Termination date: 20191229

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee