CN1792167A - 防治魔芋软腐病的生物制剂及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种防治魔芋细菌性软腐病的生物制剂及其应用,属生物农药技术领域。其生产菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)C3,保藏号CGMCCNo.1553。发明的菌株具有以下显著特点:(1)菌落不规则圆形,菌落边缘裂页状,菌落初期粘稠,后期起皱,乳白色,不透明,菌体在液体中不易分散,产芽孢;菌体杆状。(2)该菌株定殖、抑菌能力强、能促进魔芋生长,具有防病增产作用。本发明将该菌株,通过液体发酵生产,获得包括细菌菌体培养物,加入润湿剂、展着剂、辅料等制备成液剂或可湿性粉剂。本发明对魔芋细菌性软腐病具有明显稳定的防治效果,综合性状好,易于工业化生产。
Description
技术领域:
本发明涉及一种防治魔芋细菌性软腐病的生物制剂及其应用,属生物农药技术领域。
背景技术:
魔芋富含葡甘露聚糖,是自然界仅有的几种含天然葡甘露聚糖的植物之一,也是唯一分布广、适应性强、可大量提取葡甘露聚糖的植物。是一种极具开发潜力的医疗保健食品和工业原料。随着魔芋产品的不断开发和农村产业结构的调整,魔芋已成为我国中西部山区的一种主要经济作物,是农民脱贫致富、振兴地方经济的有效途径之一。据不完全统计,2005年,云南省种植面积达15万亩,全国的种植面积约为80万亩。无论是国外或国内,由细菌引起的软腐病是魔芋产业发展的第一限制因素。魔芋往往前几年发展势头较好,但随着种植年限的延长,栽培面积的扩大,软腐病流行周期越来越短,病情逐年加重,局部地区软腐病的发生造成绝收,严重地阻碍魔芋产量和品质的提高,最后导致种植面积锐减。严重挫伤了农民种植魔芋的积极性,阻碍了地方经济的发展。
魔芋细菌性软腐病是一种对魔芋生产具有毁灭性危害的世界性植物病害,经我们研究证实主要由胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜亚种Erwinia carotovora subsp.carotovora引起,其次是菊欧文氏菌E.chrysanthermi。据不完全统计,仅在云南省,魔芋软腐病每年综合发病率达35%以上,魔芋损失率达21.5%,每亩造成经济损失774元,全县每年由于软腐病危害而造成的魔芋损失达1200多万元。对于魔芋细菌性软腐病,目前国内主要以轮作等农业措施和大剂量的化学农药等防治措施,但在我国人多地少的情况下,采用轮作来防治魔芋细菌性软腐病的可行性越来越低;化学防治不仅成本高、防效差,而且污染环境,影响品质,并且一些病原细菌对生产上常用的农用链霉素表现出抗药性,使防治效果更差。另外,由于化学农药使用及农药残留量超过国际标准,影响了其对外出口的增长。
随着科学技术的发展和人民生活水平的提高,人们对健康和环境问题日益关注,发展高产、优质、高效的魔芋生产已成为提高芋区农民经济收入的关键问题,特别是近几年有机魔芋或无公害魔芋生产已成为魔芋产业发展的主导方向,在防治病害方面更需要农业和生物防治等不造成农残和环境污染的防病措施。因此,筛选开发出一种高效、无毒、安全无残留、使用简便的防治魔芋细菌性软腐病的生物制剂,对减轻病害危害、提高品质、增强魔芋农田生态系统稳定性、保障魔芋产业的健康发展,使农民增产、增收具有重要的现实意义和广阔的应用前景。
发明内容:
本发明的目的在于克服现有方法的不足,提供了一种高效、无毒、安全、无残留、使用简便的防治魔芋细菌性软腐病的生物制剂。
本发明采用的细菌是解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)C3,保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心;地址:中国.北京.中关村;保藏日期:2005年12月05日;保藏登记入册的编号CGMCCNo.1553。
本发明的生产菌株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)C3,分离自云南富源魔芋根际土壤,经形态学、培养性状、常规生理生化和Biolog全自动鉴定系统测定,该生防细菌为解淀粉芽孢杆菌的一个新菌株(Bacillus amyloliquefaciens)C3。该菌株具有以下特征:(1)菌落不规则圆形,菌落边缘裂页状,菌落初期粘稠,后期起皱,乳白色,不透明,菌体在液体中不易分散,不产色素,产芽孢;在显微镜下观察:菌体直杆状,大小0.7~0.8×2.0~2.4μm;(2)该菌株定殖能力强、抑菌能力强、能促进魔芋生长,具有杀菌、防病、增产的作用。该菌株可在魔芋的根际和体内定殖。对该作物上的主要病原菌Erwinia carotovora有显著抑制作用,抑菌圈直径平均为14.0-20.0mm。(3)具有以下生理生化特征:革兰氏染色阳性、能利用糖原、吐温40、N-乙酰-D-葡糖胺、核糖醇、L-阿拉伯糖、D-阿拉伯糖醇、L-岩藻糖、D-半乳糖、龙胆二糖、meso-肌醇、乳酮糖、D甘露醇、D-阿洛酮糖、D-棉子糖、L-鼠李糖、D-山梨醇、甲基丙酮酸、乙酸、柠檬酸、甲酸、D-半乳糖酸内、D-葡糖酸、A-羟基乙酸、Y-羟基乙酸、衣康酸、a-丁酮酸、a-酮基戊酸、丙酸、琥珀酸、D-丙氨酸、L-丙氨酸、L-丙氨酰-甘氨酸、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-亮氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、DL-肉碱、Y-氨基丁酸、尿苷酸、次黄苷、尿苷、胸苷、苯乙胺、丁二胺、2-氨基乙醇、葡糖-6-磷酸;不能利用环化糊精、糊精、N-乙酰D半乳糖、纤维二糖、D果糖、a-D-葡萄糖、a-D-乳糖、麦芽糖、蔗糖、D-海藻糖、木糖醇、内二酸、L-脯氨酸、D-丝氨酸、甘油。
本发明是这样实现的:解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)C3菌株的试管培养,摇床扩大培养,发酵培养制备为生物制剂,将其运用于魔芋上,测定其对魔芋细菌性软腐病的防治效果和产量。
本发明生防菌株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)C3的培养方法(以下为重量百分比):
1、试管种培养
试管斜面培养基配方为:牛肉浸0.3%,酵母浸膏0.1%,蛋白胨0.5%,葡萄糖1.0%,琼脂1.7-2.0%,pH6.8-7.0。
将Bacillus amyloliquefaciens C3移到试管斜面培养基上,在28℃恒温培养1-2天,获得试管种。
2、液体发酵培养
液体发酵培养基配方为:黄豆粉2.0%,淀粉1.0%,葡萄糖0.30%,KH2PO4 0.1%,蛋白胨0.2%(NH4)2SO4 0.05%,MgSO4.7H2O 0.03%,CaCO3 0.1%,花生油0.1%,消泡剂0.01%,pH 7.5-8.0。
将试管种接种到500ml三角瓶液体培养基中,每瓶装200ml,于28℃恒温振荡培养14小时,转速为150-200rpm,所得培养液即可为制剂,也可转接至发酵罐中进行发酵生产,获得液体制剂。
液体发酵条件
罐温:发酵罐的罐温均控制在25-32℃,通过插入培养基的温度计测量,以夹层内通入冷却水或热水的方法进行调节。
罐压:发酵罐的罐压控制在0.5/平方厘米,通过无菌空气入口和废气排放口进行调节。
搅拌:发酵罐的搅拌速度为200转/分钟。
抽样检查和培养条件调节:每2小时自取样管取样1次,测定pH,并涂片以结晶紫染色镜检菌体形态、有无杂菌的污染,观察菌体是否产芽孢等,待镜检菌体芽孢数占整个菌体的5%以上时,减少通风量和降低培养温度至22℃左右,其它条件不变,继续培养和抽样检查,待镜检菌体芽孢数占整个菌体的85%以上时,停止培养和放罐,发酵罐放罐时镜检计数,并用培养基平板方法进行活菌的计数。
培养周期:发酵罐的培养周期约为36-48小时。
液体发酵制剂:经平板计数测定含菌量,含菌量达180亿CFU/ml,供田间防治病害用。
3、固体发酵培养
首先进行细菌的液体发酵培养(同上)。然后经加入填充剂、板框过滤、打浆、干燥、粉碎,制成可湿性粉剂。具体过程如下:
具体加入填充剂:将发酵液压入贮罐,根据以下计算公式加入硅藻土(轻质碳酸钙)作为填充剂,加入后搅拌30分钟。
填充剂硅藻土(轻质碳酸钙)的加入量(公斤)=〖发酵液菌数(亿/毫升)×放罐体积(升)×收率〗/成品菌数-发酵液中的残存物(公斤)。
板框过滤:用2公斤/平方厘米的压力,将物料由贮罐压入板框,通过7号滤布过滤,压力应随时调节,使滤液中的含菌量不超过0.2亿/毫升。
打浆:将滤饼卸入打浆罐,按加入碳酸钙量的8%加入浓乳100号,或按3%加入SDS,加入适量的滤液均匀搅拌30分钟。
混匀:将打浆后的含菌硅藻土粉碎,阴干,再按5倍体积稀释,搅拌混匀。
干燥:在温度60℃以下的烘干房内通风干燥至含水量5%-8%。
粉碎:粉碎时出料温度不能超过60℃,以防止菌体失活。
成品质量指标测定:含菌量、含水量、悬俘率、细度的测定均参照国家企业标准(Q/KWL02-2003)进行,含菌量10亿/克,其余各项指标均符合标准。
本发明生物制剂防治软腐病田间药效试验和增产试验
1、制备生物制剂:按前述Bacillus amyloliquefaciens C3培养方法制备试验用制剂。
2、生防菌C3液体制剂对魔芋软腐病田间药效和增产试验
2.1供试药剂及处理:
A、生防菌C3液体制剂250倍稀释液:采用浇根法,每株魔芋根部浇药液50毫升,发病初期施第一次用药,共施药2次,间隔7天。
B、生防菌C3液体制剂500倍稀释液:采用浇根法,每株魔芋根部浇药液50毫升,发病初期施第一次用药,共施药2次,间隔7天。
C、生防菌C3液体制剂1000倍稀释液:采用浇根法,每株魔芋根部浇药液50毫升,发病初期施第一次用药,共施药2次,间隔7天。
D、对照杀菌剂百菌清500倍倍稀释液:采用浇根法,每株魔芋根部浇药液50毫升,发病初期施第一次用药,共施药2次,间隔7天。
E、空白对照:施用清水,采用浇根法,每株魔芋根部浇药液50毫升,发病初期施第一次施用,共施用2次,间隔7天。
2.2、试验方法:供试作物为花魔芋(富源县地方品种),防治对象为魔芋细菌性软腐病,试验地点为云南省富源县竹园镇。
试验设5个处理,3次重复,共15个小区。小区面积不小于20平方米,随机排列。
四周设保护行,收获时每小区测产。
2.3、调查方法:在魔芋发病后期,对试验小区进行病害调查.根据魔芋软腐病地上部分症状特点及病情发展趋势,我们将病斑分为环绕型和纵向型,前者病斑环绕叶柄,病情发展快.会很快引起复叶倒伏,危害性大;后者病斑只在叶柄一侧,多沿维管束纵向扩展,后期向横向扩展后导致整个叶柄腐烂。
魔芋软腐病的分级标准(病情分为5级):
0级:无症状;1级:叶柄一侧有2cm以下小型水浸状病斑,或病斑长占叶柄总长度的1/10以下,同侧叶片轻度黄化;2级:叶柄一侧有2cm以上病斑,或病斑长占叶柄总长度的1/10-5/10,同侧叶片黄化;3级:病斑呈环绕型,或纵向型病斑长度占叶柄总长的5/10以上,叶片大部分黄化或部分枯死;4级:全叶枯黄或倒伏腐烂。
若整个复叶从顶端开始黄化,叶柄与块茎连接处有软腐症状,为块茎发病,病情归入3级。
3、生防菌C3可湿性粉剂对魔芋软腐病田间药效和增产试验
1、供试药剂及处理:
A、生防菌C3可湿性粉剂250倍稀释液:采用浇根法,每株魔芋根部浇药液50毫升,发病初期施第一次用药,共施药2次,间隔7天。
B、生防菌C3可湿性粉剂500倍稀释液:采用浇根法,每株魔芋根部浇药液50毫升,发病初期施第一次用药,共施药2次,间隔7天。
C、生防菌C3可湿性粉剂1000倍稀释液:采用浇根法,每株魔芋根部浇药液50毫升,发病初期施第一次用药,共施药2次,间隔7天。
D、对照杀菌剂百菌清500倍倍稀释液:采用浇根法,每株魔芋根部浇药液50毫升,发病初期施第一次用药,共施药2次,间隔7天。
E、空白对照:施用清水,采用浇根法,每株魔芋根部浇药液50毫升,发病初期施第一次施用,共施用2次,间隔7天。
2、试验方法:供试作物为花魔芋(富源县地方品种),防治对象为魔芋细菌性软腐病,试验地点为云南省富源县竹园镇。
试验设5个处理,3次重复,共15个小区。小区面积不小于20平方米,随机排列。
四周设保护行,收获时每小区测产。
3、调查方法:在魔芋发病后期,对试验小区进行病害调查.根据魔芋软腐病地上部分症状特点及病情发展趋势,我们将病斑分为环绕型和纵向型,前者病斑环绕叶柄,病情发展快.会很快引起复叶倒伏,危害性大;后者病斑只在叶柄一侧,多沿维管束纵向扩展,后期向横向扩展后导致整个叶柄腐烂。
魔芋软腐病的分级标准(病情分为5级):
0级:无症状;1级:叶柄一侧有2cm以下小型水浸状病斑,或病斑长占叶柄总长度的1/10以下,同侧叶片轻度黄化;2级:叶柄一侧有2cm以上病斑,或病斑长占叶柄总长度的1/10--5/10,同侧叶片黄化;3级:病斑呈环绕型,或纵向型病斑长度占叶柄总长的5/10以上,叶片大部分黄化或部分枯死;4级:全叶枯黄或倒伏腐烂。
若整个复叶从顶端开始黄化,叶柄与块茎连接处有软腐症状,为块茎发病,病情归入3级。
4、试验结果
4.1生防菌C3液体制剂对魔芋软腐病田间药效和增产试验
表1解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)C3液体制剂对魔芋软腐病田间防治效果
处理 | 病情指数 | 总株数(株) | 平均病株率(%) | 平均病指 | 防治效果(%) | ||
重复I | 重复II | 重复III | |||||
CK稀释250倍稀释500倍 | 19.173.334.67 | 21.675.929.33 | 17.175.8313.08 | 900941953 | 123.593.22 | 19.344.269.03 | ——77.953.3 |
稀释1000倍 | 6.33 | 11.75 | 12.83 | 952 | 3.68 | 10.30 | 46.7 |
百菌清500倍 | 10.17 | 15.08 | 13.67 | 927 | 5.23 | 12.97 | 32.9 |
表2解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)C3液体制剂对魔芋的增产效果
处理 | 亩产(kg) | 增产量(kg) | 增产率(%) |
CK稀释250倍稀释500倍稀释1000倍 | 1600.82267.82134.42134.4 | ——667533.6533.6 | ——41.6733.3333.33 |
百菌清500倍 | 1734.2 | 133.4 | 8.33 |
从表1和表2可以看出生防菌C3液体制剂对魔芋软腐病防治和增产效果明显,其中稀释250倍处理防治和增产效果最好,防治效果达到77.9%.灌根500倍和1000倍的处理,对魔芋软腐病控制效果分别为53.3%和46.7%。与稀释500倍百菌清相比,施用生防菌C3液体制剂的各个处理(250倍,500倍,1000倍,)的病株率分别比其低1.64%,2.01%,1.55%,病情指数比百菌清低8.71、3.94、2.67,防治效果比其高45.00%,20.40%,13.80%,显示了该生防制剂具有较好的防效;同时与稀释500倍百菌清相比,施用生防菌C3的各个处理(250倍,500倍,1000倍,)的增产率分别比其高33.34%,25.00%,25.00%,显示该产品具有一定的促生、增产作用,故该产品具备了生产上大量推广的基本条件。
本次施药方法采用浇根法,研究中发现,灌根处理的魔芋植株,病原菌从茎基部侵入的机率显著降低,但仍发现一些田间地上部分腐烂植株,主要从叶片等地上部侵入。因此,今后在施药方法上应用浇根法和叶面喷雾法结合使用,达到有效控制魔芋软腐病的目的。
4.2生防菌C3可湿性粉剂对魔芋软腐病田间药效和增产试验
表3解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)C3可湿性粉剂对魔芋软腐病田间防治效
果
处理 | 病情指数 | 总株数(株) | 平均病株率(%) | 平均病指 | 防治效果(%) | ||
重复I | 重复II | 重复III | |||||
CK稀释250倍稀释500倍 | 19.174.007.05 | 21.674.509.30 | 17.173.5310.14 | 900950959 | 123.203.32 | 19.344.018.83 | ——79.354.3 |
稀释1000倍 | 8.23 | 10.11 | 9.05 | 960 | 3.57 | 9.13 | 52.8 |
百菌清500倍 | 10.17 | 15.08 | 13.67 | 927 | 5.23 | 12.97 | 32.9 |
表4解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)C3可湿性粉剂对魔芋的增产效果
处理 | 亩产(kg) | 增产量(kg) | 增产率(%) |
CK稀释250倍稀释500倍稀释1000倍 | 1600.82301.32190.22103.4 | ——700.5589.4502.6 | ——43.7636.8231.40 |
百菌清500倍 | 1734.2 | 133.4 | 8.33 |
从表3和表4可以看出生防菌C3可湿性粉剂对魔芋软腐病防治和增产效果明显,其中稀释250倍处理防治和增产效果最好,防治效果达到79.3%。灌根500倍和1000倍的处理,对魔芋软腐病控制效果分别为54.3%和52.8%。与稀释500倍百菌清相比,施用生防菌C3可湿性粉剂的各个处理(250倍,500倍,1000倍,)的病株率分别比其低2.03%,1.91%,1.66%,病情指数比百菌清低8.96、4.14、3.84,防治效果比其高46.40%,21.40%,19.90%,显示了该生防制剂具有较好的防效;同时与稀释500倍百菌清相比,施用生防菌C3的各个处理(250倍,500倍,1000倍,)的增产率分别比其高35.43%,28.49%,23.07%,显示该产品具有一定的促生、增产作用,故该产品具备了生产上大量推广的基本条件。
总体结果表明,本发明的生物制剂(不管是液体制剂还是可湿性粉剂)防治魔芋细菌性软腐病效果显著,且兼有促生、增产的效果。
本发明的制剂主要防治对象为魔芋软腐病。本制剂可通过浸种、灌根、喷雾等方式施用。本发明的制剂已在云南省曲靖市富源县进行了田间小区防效试验,证明该生防制剂防效显著、稳定,可以有效地解决长期困扰芋农的魔芋细菌性软腐病的防治难题。对魔芋细菌性软腐病防效达46.7-79.30%。
具体实施方式:
本生防制剂可以与其他的杀细菌农药、植物生长调节剂混合使用,但必须保证所混药剂对本发明采用的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)C3无副作用。
本发明的细菌生防制剂一般在作物播种或病害始发期施用。方法是播种前,采用发酵制剂与种球浸(拌)种后,凉干施入土壤中,或在病害始发期将本制剂通过灌根施入魔芋茎基部或喷雾方法,稀释300-500倍使用。对魔芋细菌性软腐病发生严重地区可在魔芋生长过程中追施2-3次。
本发明具有对魔芋细菌性软腐病防、治效果明显,适用于魔芋整个生育期,具有成本低、使用简便、有效期较长等特点。
下面用实施例来进一步详述本发明,但本发明的内容并不局限于此。
实施例一:
将解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)C3转到试管斜面培养基上,试管斜面培养基配方为:牛肉浸0.3%,酵母浸膏0.1%,蛋白胨0.5%,葡萄糖1.0%,琼脂1.7%,pH:7.0。
在28℃恒温培养2天,获得试管种。
液体发酵培养基配方为:黄豆粉2.0%,淀粉1.0%,葡萄糖0.30%,KH2PO4 0.1%,蛋白胨0.2%(NH4)2SO4 0.05%,MgSO4.7H2O 0.03%,CaCO3 0.1%,花生油0.1%,消泡剂0.01%,pH 7.5;
将试管种接种到500ml三角瓶(每瓶装200ml)液体培养基中,培养基配方为:牛肉浸0.3%,酵母浸膏0.1%,蛋白胨0.5%,葡萄糖1.0%,琼脂1.7。于28℃恒温振荡培养14小时,转速为150rpm,所得培养液即为本发明生物制剂。
实施例二:
首先获得试管种(同实施例一),将试管种接种到500ml三角瓶(每瓶装200ml)液体培养基中,培养基配方为:牛肉浸0.3%,酵母浸膏0.1%,蛋白胨0.5%,葡萄糖1.0%,琼脂2.0%。于28℃恒温振荡培养14小时,转速为200rpm,所得培养液转接至发酵罐中进行发酵生产,获得液体制剂。
液体发酵培养基配方为:黄豆粉2.0%,淀粉1.0%,葡萄糖0.30%,KH2PO4 0.1%,蛋白胨0.2%(NH4)2SO4 0.05%,MgSO4.7H2O 0.03%,CaCO3 0.1%,花生油0.1%,消泡剂0.01%,pH 8.0。
液体发酵条件
罐温:发酵罐的罐温均控制在25℃,通过插入培养基的温度计测量,以夹层内通入冷却水或热水的方法进行调节。
罐压:发酵罐的罐压控制在0.5/平方厘米,通过无菌空气入口和废气排放口进行调节。
搅拌:发酵罐的搅拌速度为200转/分钟。
抽样检查和培养条件调节:每2小时自取样管取样1次,测定pH,并涂片以结晶紫染色镜检菌体形态、有无杂菌的污染,观察菌体是否产芽孢等,待镜检菌体芽孢数占整个菌体的5%以上时,减少通风量和降低培养温度至22℃左右,其它条件不变,继续培养和抽样检查,待镜检菌体芽孢数占整个菌体的85%以上时,停止培养和放罐,发酵罐放罐时镜检计数,并用培养基平板方法进行活菌的计数。
培养周期:发酵罐的培养周期约为36小时。
液体发酵制剂:经平板计数测定含菌量,含菌量达180亿CFU/ml,供田间防治病害用。
即得本发明生物制剂。
实施例三:
首先进行细菌的液体发酵培养(同实施例二)。然后经加入填充剂、板框过滤、打浆、干燥、粉碎,制成可湿性粉剂。具体过程如下:
具体加入填充剂:将发酵液压入贮罐,按放罐体积的10%加入填充剂硅藻土(轻质碳酸钙),加入后搅拌30分钟。
板框过滤:用2公斤/平方厘米的压力,将物料由贮罐压入板框,通过7号滤布过滤,压力应随时调节,使滤液中的含菌量不超过0.2亿/毫升。
打浆:将滤饼卸入打浆罐,按加入碳酸钙量的8%加入浓乳100号,或按3%加入SDS,加入2%的滤液均匀搅拌30分钟。
混匀:将打浆后的含菌硅藻土粉碎,阴干,再按5倍体积稀释,搅拌混匀。
干燥:在温度60℃以下的烘干房内通风干燥至含水量8%。
粉碎:粉碎时出料温度不能超过60℃,以防止菌体失活。
成品质量指标测定:含菌量、含水量、悬俘率、细度的测定均参照国家企业标准(Q/KWL02-2003)进行,含菌量10亿/克,其余各项指标均符合标准。
即得本发明生物制剂。
Claims (3)
1、一种防治魔芋细菌性软腐病病害的生物制剂,其特征在于:该制剂的生产菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)C3,保藏号CGMCCNo.1553。
2、权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)C3菌株的培养方法,其特征在于,所述菌株是经过常规的液体和固体发酵培养获得的,所述的液体和固体发酵培养基配方如下:
(1)液体发酵培养基配方:黄豆粉2.0%,淀粉1.0%,葡萄糖0.30%,KH2PO4 0.1%,蛋白胨0.2%(NH4)2SO4 0.05%,MgSO4·7H2O 0.03%,CaCO3 0.1%,花生油0.1%,消泡剂0.01%,含水量为96.11%,pH 7.5-8.0;
(2)固体发酵培养基配方:牛肉浸0.3%,酵母浸膏0.1%,蛋白胨0.5%,葡萄糖1.0%,琼脂1.7-2.0%,含水量为96.1%-96.4%,pH 7.5-8.0。
3、权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)C3菌株在防治魔芋细菌性软腐病病害中的应用。
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