CN1788739A - 当归油在制备治疗更年期综合征和骨质疏松的药物中的应用 - Google Patents

当归油在制备治疗更年期综合征和骨质疏松的药物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了当归油在制备治疗更年期综合征和骨质疏松的药物中的应用，本发明提供的当归油可以通过水蒸气蒸馏法或CO2超临界萃取法获得。本发明还提供了以当归油为活性成分用于妇女更年期综合征和骨质疏松的药物组合物。

Description

当归油在制备治疗更年期综合征和骨质疏松的药物中的应用
技术领域
本发明涉及当归油在制备治疗更年期综合征和骨质疏松的药物中的应用。
背景技术
更年期综合征，是妇女绝经期前后出现的一种症候群，是妇女由生育期向老年期过渡时期的常见病。主要表现为性腺功能衰退所引起生理和心理上的一系列症状，例如，潮热、多汗、烦躁、记忆减退、失眠，严重的可并发心血管疾病或精神紊乱。目前有效的治疗方法是激素替代疗法和中药方剂的治疗。但由于激素替代疗法的安全性受到国内、外专家的置疑，中药方剂的质量控制问题一直是待解决的问题。因此开发安全、有效、质量可控的新的药物具有深远的临床意义。
本发明人通过大量的实验研究，提供了当归油在制备治疗妇女更年期综合征和骨质疏松的药物中的应用。
技术内容
本发明提供了当归油在制备治疗妇女更年期综合征的药物中的应用。
本发明提供了当归油在制备治疗骨质疏松的药物中的应用。
本发明提供了以当归油为活性成分用于妇女更年期综合征和骨质疏松的药物组合物。
本发明所述的当归油可以通过水蒸气蒸馏法或CO2超临界萃取法获得，优选为CO2超临界萃取法获得的；可按中国专利CN00103336.0中公开的方法制备。
本发明提供的药物组合物可以制成口服剂型、注射剂型、皮肤给药或粘膜给药的剂型；可以以胶囊，片剂，含片，软胶囊，注射液或皮肤贴剂形式存在，均按药学常规方法制备。
具体实施方式
实施例1当归油对摘卵巢大鼠血清雌激素和骨组织形态计量的影响
1药品和试剂
1.1受试样品当归油按中国专利CN00103336.0中实施例3中所述方法制备，临用前用植物油配制成所需浓度。
1.2阳性对照药龙牡壮骨颗粒(LM)，武汉健民药业股份有限公司，5g/袋，批号：0312322。
1.3低钙饲料：北京科奥协力饲料有限公司，配方(％)：玉米：43，面粉：20，黄豆：15，植物油：3.5，干酪素：15.2，维生素预混料：0.05，无钙矿物盐：3；钙：0.25
1.4试剂：碱性磷酸酶(ALP)试剂盒，中生北控生物技术股份有限公司，批号：030221；血清骨钙素(BGP)，德国罗氏公司，批号：167250-02；
甲状旁腺素(PTH)，德国罗氏公司，批号：167058-02；
雌二醇(E2)，德国罗氏公司，批号：166781-02。
2实验动物分组及给药
普通级Wistar大鼠，雌性，6月龄，体重300±30g，由山东绿叶天然药物研究开发有限公司动物实验中心提供。合格证号：鲁动质字200106005号。
将动物随机分为6组：假手术(Sham)对照组，骨质疏松模型组，当归油低剂量组(20mg/kg)，中剂量组(40mg/kg)，高剂量组(80mg/kg)，阳性对照药物龙牡壮骨颗粒组(5000mg/kg)，每组10只。其中除假手术组外均按[徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学，第三版.北京：人民卫生出版社，2003：1539]方法做卵巢摘除手术。手术3个月后，各组分别按上述剂量给药。1次/日，连续给药3个月。假手术组和骨质疏松模型组给予与给药组等体积的植物油(10ml/kg)。饲养室温度22℃～25C，湿度50％～70％，喂以低钙饲料(含钙量＜0.3％)，自由饮水，限量进食，每周称量一次体重，并按体重变化调整给药量。实验各组大鼠于处死前16d和3d分别腹腔注射盐酸四环素(SIGMA公司生产)，30mg/kg体重，对骨进行荧光标记。
3测定指标
采用AUTOLab全自动生化分析仪分别测定血清碱性磷酸酶(ALP)活性。采用Elecsys107电发光免疫分析仪(德国罗氏)测定血清骨钙素(BGP)、甲状旁腺素(PTH)、雌二醇(E2)。
4测定方法
取大鼠左侧胫骨近端1/3，去除软组织，包埋块，修块后，在Reicheit-Jung 2040切片机(德国)上，用钨钢刀分别切出5μm的纵向不脱钙骨切片。用二甲苯溶掉树脂后，梯度乙醇至水，甲苯胺蓝染色。按照[章明放，张乃鑫，谭郁彬。运动对雌性大鼠去势后骨质疏松症的作用.中华骨科杂志，1994，14(6)：365]的方法，采用Leica Qwin图象分析系统(德国)进行骨组织形态计量。
4.1骨小梁组织形态计量：
骨小梁体积百分比(TBV％)：骨小梁体积占被测骨髓腔总体积的百分比，是骨量水平的主要标志；
骨小梁吸收表面百分比(TRS％)：不规则、凹凸不平的骨小梁表面占骨小梁表面的百分比；
骨小梁形成表面百分比(TFS％)：有成骨细胞被覆的类骨质表面占骨小梁表面的百分比；
活性生成表面百分比(AFS％)：有荧光标记带的骨小梁表面占骨小梁表面的百分比；
骨小梁矿化率(MAR)：骨小粱表面荧光双标记带的平均距离除以两次标记相隔的天数；
4.2皮质内表面形态计量：
类骨质平均宽度(OSW)：皮质内表面类骨质的平均宽度；
骨皮质矿化率(mAR)：皮质内表面双标记带的平均距离除以两次标记相隔的天数。
5.结果
当归油可明显升高摘卵巢模型大鼠血清E2和BGP水平，降低ALP和PTH水平(表2)，明显增加骨小梁体积百分比(TBV％)，并显著降低骨小梁吸收表面百分比(TRS％)(表1，2)。
    表1各组大鼠胫骨TBV％和TRS％的变化
  组别   TBV％   TRS％
  假手术组   26.79±3.68   3.02±0.29
  模型组   7.99±4.05++   12.05±3.79++
  LM   14.26±1.50**   3.70±0.91**
  低剂量组   9.52±2.68   6.78±2.69*
  中剂量组   13.26±6.80*   6.13±3.09**
  高剂量组   13.99±3.65*   6.33±2.71**
与假手术组相比，+P＜0.05，++P＜0.01；与模型组相比，*P＜0.05，**P＜0.01。
            表2.当归油对骨质疏松症大鼠血清E2、BGP、PTH和BALP的影响( X±SD)
组别   剂量(mg/kg)   E2(pg/ml)   BGP(ng/ml)   PTH(ng/dL)   ALP(IU/L)
  假手术模型高剂量组中剂量组低剂量组LM   --8040205000   32.82±2.2114.57±0.93+17.51±3.57*20.21±3.09**20.58±5.71*16.45±1.16*   13.2±2.8016.37±4.7420.07±2.2024.77±10.75*22.71±7.5823.85±5.76**   17.64±1.3650.81±10.99++37.53±10.24*29.75±9.24*45.90±10.7324.13±9.74**   136.71±28.51256.90±31.79++150.86±72.9*161±37.09*202±53.91150±29.48*
n＝10，与假手术组相比，+P＜0.05，++P＜0.01；与模型组相比，*P＜0.05，**P＜0.01。
6.结论：当归油可以明显改善摘卵巢大鼠骨质疏松模型的骨代谢状态，提高体内雌二醇水平。
实施例2当归油对beagle犬血清雌激素的影响
2.1试验材料：
动物：同试验例1。
当归油软胶囊：按中国专利CN00103336.0实施例1方法制备。
Beagle犬：购自广东科金实验动物科技有限公司，雌性，体重4～6Kg，动物许可证号：SCXK(粤)2003-0006
碱性磷酸酶(ALP)试剂盒：北京中生生物工程高技术公司，批号030221；
自动血液生化分析仪(意大利，AUTOLab)。
电发光免疫分析仪(德国罗氏，Elecsys107)。
2.2方法：
将犬随机分为4组，分别为生理盐水对照组、当归油软胶囊低剂量组(6.7mg/kg)、中剂量组(20mg/kg)和高剂量组(60mg/kg)。每日口服(吞服)给药一次，连续给药3个月，根据体重调整给药量。
观察指标：每日观察记录一般情况。每周称体重1次，分别于给药前、给药后3个月取血进行检查碱性磷酸酶和雌二醇(E2)。
结果：当归油连续口服3个月可以明显升高beagle犬血清雌激素和碱性磷酸酶水平(表3)。
表3.当归油口服给药3个月对犬雌激素和碱性磷酸酶水平的影响
  项目   对照组   高剂量组   中剂量组   低剂量组
  雌激素(E2)碱性磷酸酶   7.99±1.69108.88±15.84   17.46±7.53**165.75±43.36*   19.87±11.22*151.63±40.32*   8.82±2.12123.25±23.04
结论：当归油连续口服3个月具有明显升高beagle犬血清雌激素和碱性磷酸酶水平，由于碱性磷酸酶反应骨质生成的指标，因此可以改善更年期妇女的雌激素水平和骨代谢紊乱状态。

Claims (6)

1.当归油在制备治疗妇女更年期综合征的药物中的应用。
2.当归油在制备治疗骨质疏松的药物中的应用。
3.当归油可以通过水蒸气蒸馏法或CO2超临界萃取法获得。
4.当归油优选为通过CO2超临界萃取法获得。
5.以当归油为活性成分的用于妇女更年期综合征和骨质疏松的药物组合物。
6.根据权利要求5所述的药物组合物，可以以胶囊、片剂、含片、软胶囊、注射液或皮肤贴剂形式存在。
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