CN1763212A - 酶法水解褐藻制备岩藻聚糖硫酸酯的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种酶法水解褐藻制备岩藻聚糖硫酸酯的方法，是将纤维素酶和果胶酶，按重量比例为2～6∶1配制成复合纤维素酶；以褐藻为原料，向原料中加入原料重量10～20倍的水，并加入原料重量0.23～0.34％的复合纤维素酶，在pH为6.0～8.0的条件下酶解50～80分钟，然后以90～100℃水浴加热3～4小时，降至室温，离心得上清液；在上清液中加入乙醇产生沉淀，离心得上清液；在c步骤所得上清液中加入乙醇产生沉淀，收集沉淀；乙醚清洗沉淀，真空冷冻干燥沉淀得白色粉末。克服了现有酸解法破坏性大、污染严重的缺点，对提取后所剩原料的综合利用价值无任何影响；同时其目的性强，提取率高，其提取率在现有技术的基础上提高0.37～2.40％；所配制的复合纤维素酶价格低廉，降低了提取岩藻聚糖硫酸酯的成本。

Description

酶法水解褐藻制备岩藻聚糖硫酸酯的方法
技术领域：
本发明涉及一种岩藻聚糖硫酸酯的制备方法，尤其是一种提取率高的酶法水解褐藻制备岩藻聚糖硫酸酯的方法。
背景技术：
岩藻聚糖硫酸酯(fucoidan)是一种存在于褐藻中的特殊硫酸多糖，国内外研究表明其具有抗凝血、降血脂、抗肿瘤、抗病毒，增强机体免疫机能等多种生物学活性。由于海带在我国养殖区域广泛，产量巨大，占世界产量的89％左右，因此海带已成为岩藻聚糖硫酸酯的主要生产原料之一，而目前的生产方法之有酸解和蒸煮两种。酸解法破环性大，环境污染较严重且目的性差、提取率低；蒸煮法虽然克服了酸解法所具有的破环性大、污染严重等缺点，但是其提取率更低。
发明内容：
本发明是为了解决现有技术所存在的提取率低的缺点，提供一种无污染、破坏性小、提取率高的酶法水解褐藻制备岩藻聚糖硫酸酯的方法。
本发明的技术解决方案是：一种酶法水解褐藻制备岩藻聚糖硫酸酯的方法，其特征在于有如下步骤：
a.将纤维素酶和果胶酶，按重量比例为2～6∶1配制成复合纤维素酶；
b.以褐藻为原料，向原料中加入原料重量10～20倍的水，并加入原料重量0.23～0.34％的复合纤维素酶，在pH为6.0～8.0的条件下酶解50～80分钟，然后以90～100℃水浴加热3～4小时，降至室温，离心得上清液；
c.在上清液中加入乙醇产生沉淀，离心得上清液；
d.在c步骤所得上清液中加入乙醇产生沉淀，收集沉淀；
e.乙醚清洗沉淀，真空冷冻干燥沉淀得白色粉末。
所述的褐藻为海带或裙带菜。
所述的乙醇浓度为95％。
本发明是将纤维素酶和果胶酶按比例配制成复合纤维素酶，对褐藻进行酶解并蒸煮以提取岩藻聚糖硫酸酯，克服了现有酸解法破坏性大、污染严重的缺点，对提取后所剩原料的综合利用价值无任何影响；同时其目的性强，提取率高，其提取率在现有技术的基础上提高0.37～2.40％；所配制的复合纤维素酶价格低廉，降低了提取岩藻聚糖硫酸酯的成本，所提取的岩藻聚糖硫酸酯可制备具有抗凝血、降血脂、抗肿瘤、抗病毒，增强机体免疫机能的保健产品或作为药品的先导物。本发明操作简单、可操作性强，适合工业化生产。
具体实施方式：
实施例1：
a.取0.46g纤维素酶和0.22g果胶酶，混合配制成0.68g复合纤维素酶；
b.称200g干海带为原料，向干海带中加入原料重量18倍(3600g)的水，并加入所配制的复合纤维素酶(占原料重量的0.34％)，在pH为8.0的条件下酶解50分钟，然后以94℃水浴加热4小时，降至室温，离心得上清液；
c.在上清液中加入乙醇使其产生沉淀，离心得上清液；
d.在c步骤所得上清液中加入乙醇直至产生沉淀，收集沉淀；
e.乙醚清洗沉淀，真空冷冻干燥沉淀得白色粉末。
所提取的白色粉末中为岩藻聚糖硫酸酯，分子量10～25道尔顿，重量为原料重量的1.2％。
实施例2：
a.取0.44g纤维素酶和0.08g果胶酶，混合配制成0.52复合纤维素酶；
b.称200g干海带为原料，向干海带中加入原料重量13倍(2600g)的水，并加入所配制的复合纤维素酶(占原料重量的0.26％)，在pH为6.0的条件下酶解80分钟，然后以100℃水浴加热3.5小时，降至室温，离心得上清液；
c.在上清液中加入95％乙醇使其产生沉淀，离心得上清液；
d.在c步骤所得上清液中加入95％乙醇直至产生沉淀，收集沉淀；
e.乙醚清洗沉淀，真空冷冻干燥沉淀得白色粉末。
所提取的白色粉末中为岩藻聚糖硫酸酯，分子量10～25道尔顿，重量为原料重量的1.2％。
实施例3：
a.取0.48g纤维素酶和0.16g果胶酶，混合配制成0.64g复合纤维素酶；
b.称200g干海带为原料，向干海带中加入原料重量20倍(4000g)的水，并加入所配制的复合纤维素酶(占原料重量的0.32％)，在pH为7.0的条件下酶解60分钟，然后以96℃水浴加热3.5小时，降至室温，离心得上清液；
c.在上清液中加入95％乙醇使其产生沉淀，离心得上清液；
d.在c步骤所得上清液中加入95％乙醇直至产生沉淀，收集沉淀；
e.乙醚清洗沉淀，真空冷冻干燥沉淀得白色粉末。
所提取的白色粉末中为岩藻聚糖硫酸酯，分子量10～25道尔顿，重量为原料重量的1.3％。
实施例4：
a.取2g纤维素酶和1g果胶酶，混合配制成3g复合纤维素酶；
b.称1000g干裙带菜为原料，向干裙带菜中加入原料重量15倍(15000g)的水，并加入所配制的复合纤维素酶(占原料重量的0.3％)，在pH为6.0的条件下酶解70分钟，然后以98℃水浴加热3.5小时，降至室温，离心得上清液；
c.在上清液中加入95％乙醇使其产生沉淀，离心得上清液；
d.在c步骤所得上清液中加入95％乙醇直至产生沉淀，收集沉淀；
e.乙醚清洗沉淀，真空冷冻干燥沉淀得白色粉末。
所提取的白色粉末中为岩藻聚糖硫酸酯，分子量10～25道尔顿，重量为原料重量的6％。
实施例5：
a.取0.36g纤维素酶和0.1g果胶酶，混合配制成0.46g复合纤维素酶；
b.称200g干海带为原料，向干海带中加入原料重量10倍(2000g)的水，并加入所配制的复合纤维素酶(占原料重量的0.23％)，在pH为7.0的条件下酶解80分钟，然后以100℃水浴加热3小时，降至室温，离心得上清液；
c.在上清液中加入95％乙醇使其产生沉淀，离心得上清液；
d.在c步骤所得上清液中加入95％乙醇直至产生沉淀，收集沉淀；
e.乙醚清洗沉淀，真空冷冻干燥沉淀得白色粉末。
所提取的白色粉末中为岩藻聚糖硫酸酯，分子量10～25道尔顿，重量为原料重量的1.2％。

Claims (3)

1.一种酶法水解褐藻制备岩藻聚糖硫酸酯的方法，其特征是有如下步骤：
a.将纤维素酶和果胶酶，按重量比例为2～6∶1配制成复合纤维素酶；
b.以褐藻为原料，向原料中加入原料重量10～20倍的水，并加入原料重量0.23～0.34％的复合纤维素酶，在pH为6.0～8.0的条件下酶解50～80分钟，然后以90～100℃水浴加热3～4小时，降至室温，离心得上清液；
c.在上清液中加入乙醇产生沉淀，离心得上清液；
d.在c步骤所得上清液中加入乙醇产生沉淀，收集沉淀；
e.乙醚清洗沉淀，真空冷冻干燥沉淀得白色粉末。
2.根据权利要求1所述的酶法水解褐藻制备岩藻聚糖硫酸酯的方法，其特征在于：所述的褐藻为海带或裙带菜。
3.根据权利要求1或2所述的酶法水解褐藻制备岩藻聚糖硫酸酯的方法，其特征在于：所述乙醇的浓度为95％。
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