CN1762207A

CN1762207A - 一种富硒铁皮石斛的培养方法

Info

Publication number: CN1762207A
Application number: CN 200510061530
Authority: CN
Inventors: 刘俊
Original assignee: ZHEJIANG NATURAL MEDICAL PLANT RESEARCH CENTER
Current assignee: ZHEJIANG NATURAL MEDICAL PLANT RESEARCH CENTER
Priority date: 2005-11-11
Filing date: 2005-11-11
Publication date: 2006-04-26

Abstract

本发明公开了一种富硒铁皮石斛的培养方法，它包括采用组织培养方法，取铁皮石斛种子无菌试管苗诱导、原球茎诱导、原球茎驯化，再转移至培养基上培养苗生长，苗生长时的培养基组成是在1000份培养基中含：大量元素10份、微量元素1份、铁盐5份、香蕉100份、萘乙酸2份、糖25份、琼脂9份，调整pH值至5.6，在培养基中还包含亚硒酸钠浓度为200－300ppm，其中：大量元素组成：硝酸钾14.1497克、硫酸氨2.3160克、亚磷酸钾2.0046克、硫酸镁0.9245克、氯化钠0.6665克；微量元素组成；碘化钾0.8326克；高锰酸钠0.2532克；硫酸铜0.0248克；氯化钴0.0256克；硫酸锰22.3212克；硫酸锌8.6281克；硼酸6.2308克。按本发明所描述的一种富硒铁皮石斛的培养方法所得到的富硒铁皮石斛，以铁皮石斛为硒载体通过石斛体吸收，转化为富含有机硒的铁皮石斛，人体吸收利用率高，是最为安全的保健食品。兼医药、营养、保健、食品于一身。

Description

一种富硒铁皮石斛的培养方法

技术领域

本发明涉及一种石斛的人工栽培方法，特别是一种富硒铁皮石斛的培养方法。

背景技术

目前全国有72％人口需要科学补硒，从而使富硒产品形成了一个潜在的大市场。目前，国内大城市的消费群体，尤其是全国南方一些城市的消费群体正在形成一种补硒热潮，尤其对富硒产品特别青睐。

硒不能在人体内合成，必需从体外摄入，而我国人民膳食结构中硒含量低。中国营养学会推荐正常人体每日硒摄入量为60-200u克，我国13个省市的营养调查表明，成人每日摄硒量仅26.36u克，与中国营养学会推荐的日最低硒摄入量60mn克相差甚远。硒的低水平摄入对人体健康有潜在的威胁，要保证人体的健康，防治有关疾病，就应当有充足的硒的摄入。人体内硒的总积聚量为15m克，按60k克体重计算平均含量为0.25m克/k克，在摄人与排泄中保持动态平衡。

植物是人类和动物获取硒的主要来源。在硒化合物的营养作用中，有机硒大于无机硒，植物硒大于动物硒。国内目前尚不能人工合成植物有机硒，获取植物有机硒的途径大多是依靠植物转化技术来实现的，利用作物的生物转化提高有机硒的含量而进入食物链供人和动物食用是一项主要的富硒技术。

虽然硒对胃癌、肝癌有较强的抑制作用，但自然界中微量元素硒主要以无机态存在，难以被人体直接利用，而一般动植物食品中，活性微量元素含量甚微，难以满足人体需求，生物富集已成为人类开发利用的重要手段。

硒是联合国卫生组织确定的人体必需的微量元素，具有重要的生理功能、营养作用和临床诊疗意义。国内外大量资料报道.许多癌症与人体缺硒有关，临床证明硒可用于抗衰老、预防治疗冠心病、糖尿病以及食道癌、肝癌、肺癌、胃癌等多种疾病。

铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Mi克o)是传统名贵中药，具有滋阴清热、益气生津、止咳润肺及清咽明月之功效。石斛含有多糖及生物碱等多种化学成分。现代药理研究证明，石斛药用活性强弱与多糖量高低相关，石斛多糖具有增强机体免疫功能及显著提高机体杀伤肿瘤细胞的能力，是一种肿瘤免疫治疗的调节剂。由于石斛极高的保健及药用价值和硒(人体必需微量元素之一)对人体健康极为重要的作用，将二者有机结合，开发富硒石斛，将具有十分广阔的市场前景。

近年来，我国虽然已相继开发了诸如富硒黑木耳、富硒茶叶、富硒玉米、富硒梨、富硒苹果、富硒豆芽和富硒酵母等，但不同植物受到各自生存条件和环境的不同，其培养方法也各不相同，铁皮石斛本身就很难人工培育，而不恰当的硒元素的滥用更会影响铁皮石斛的生长，要使铁皮石斛富含有机硒，目前尚未技术报道。

发明内容

本发明的目的是为了解决上述技术的不足而提供一种生长周期短、无污染、富硒能力强、干物质积累大、出苗率高、易于大规模生产的一种富硒铁皮石斛的培养方法。

为了达到上述目的，本发明所设计的一种富硒铁皮石斛的培养方法，它包括采用组织培养方法，取铁皮石斛种子无菌试管苗诱导、原球茎诱导、原球茎驯化，再转移至培养基上培养苗生长，苗生长时的培养基组成是在1000份培养基中含：大量元素10份、微量元素1份、铁盐5份、香蕉100份、萘乙酸2份、糖25份、琼脂9份，调整PH值至5.6，在培养基中还包含亚硒酸钠(Na2SeO3)浓度为200-300ppm，其中：大量元素组成：硝酸钾(KNO3)14.1497克、硫酸氨[(NH4)SO4]2.3160克、亚磷酸钾(KH2PO4)2.0046克、硫酸镁(M克SO4.7H2O)0.9245克、氯化钠NaCL 0.6665克(或氯化钙CaCL0.83克)；微量元素组成(配置成1000毫升并吸取其中1毫升作为1份)：碘化钾(KI)0.8326克；高锰酸钠(NaMn04.2H20)0.2532克；硫酸铜0.0248克；氯化钴0.0256克；硫酸锰22.3212克；硫酸锌8.6281克；硼酸6.2308克；铁盐(配置成200毫升，吸取1毫升作为1份)：硫酸亚铁(FeSO4.7H2O 5.7524克)、螯合剂(Na-EDTA 5.4514克)，由于铁在配制中易引起沉淀，因而需单独配制，先加热硫酸亚铁使其溶解，再加入螯合剂Na-EDTA。

在种子发芽培育时，培养基组成可以是在1000份培养基中含：大量元素10份、微量元素1份、铁盐5份、维生素1份、土豆150份、糖20份、琼脂8份，调整PH值至5.6，其中每份维生素组成：甘氨酸2.0018克、维生素B1 0.4002克、维生素B6 0.5026克、烟酸0.5022克，配置土豆时，先洗净，去皮，切成小块，煮沸后烧20分钟，去渣，得上清夜即可。

在上述培养方法中，铁皮石斛幼苗生长可保持在23至27摄氏度，相对湿度保持在50％至70％，光照强度1500至2000Lux，光照时间为每日8小时，铁皮石斛幼苗在富硒培养基中可生长10个月左右可得到所需成苗。

本发明的有益技术效果是：

1、铁皮石斛幼苗作为富硒载体，均在温室的严格封闭的条件下进行，具有不受地区、季节与气候限制，便于大规摸生产，生产工艺即简单又易操作，而且，无机硒不会污染环境；

2、铁皮石斛幼苗将无机硒经生物转化成有机硒，因幼苗正趋生长期，富硒能力特别强，其有机硒可达99.5％以上；

3、铁皮石斛幼苗在富硒培养基中生长，能提高抗病能力，出苗率可达到98％以上；

4、铁皮石斛幼苗在富硒培养基中生长可提高干物质重量，生长10个月，干燥后得率可达12％以上(70℃，4小时，含水量＜2％)，

5、铁皮石斛幼苗的生长周期短，一年即可采收；

6、铁皮石斛幼苗的干品中，含有机硒4--6m克/k克；如未经本发明提供的富硒培养基生长的现有技术铁皮石斛幼苗干品中，含有机硒仅0.8毫克/公斤至1毫克/公斤。

7、亚硒酸钠等无机硒，人体不易吸收且毒性高，富硒铁皮石斛中的有机硒易被人体吸收利用，无毒性。

按本发明所描述的一种富硒铁皮石斛的培养方法所得到的富硒铁皮石斛，以铁皮石斛为硒载体通过石斛体吸收，转化为富含有机硒的铁皮石斛，人体吸收利用率高，是最为安全的保健食品。兼医药、营养、保健、食品于一身。

具体实施方式

下面通过实施例结合附图对本发明作进一步的描述。

实施例：富硒铁皮石斛的培养方法

采用组织培养方法，取铁皮石斛种子无菌试管苗诱导、原球茎诱导、原球茎驯化，再转移至培养基上生长，由于铁皮石斛的上述组培技术是现有成熟技术，在此不祥述，对于培养基的配置，其具体方法步骤如下：

培养液配置：

1)、无机营养物：

微量元素(配1000毫升，配置培养基时吸取1毫升即可配1000毫升)：碘化钾(KI)0.8326克；高锰酸钠(NaMnO4.2H2O)0.2532克；硫酸铜0.0248克；氯化钴0.0256克；硫酸锰22.3212克；硫酸锌8.6281克；硼酸6.2308克大量元素(1000毫升中，下列数据乘10)：硝酸钾(KNO3)14.1497克；硫酸氨[(NH4)2S04]2.3160克；亚磷酸钾(KH2PO4)2.0046克；硫酸镁(M克SO4.7H2O)0.9245克；氯化钠NaCL 0.6665克(或氯化钙CaCL20.83克)

铁盐(配200毫升，配制培养基时，吸取5毫升可配1000毫升)

硫酸亚铁(FeSO4.7H2O 5.7524克)、螯合剂(Na-EDTA 5.4514克)，由于铁在配制中易引起沉淀，因而需单独配制。先加热硫酸亚铁使其溶解，再加入螯合剂Na-EDTA；

2)、维生素(配1000毫升)

甘氨酸2.0018克、维生素B10.4002克、维生素B60.5026克、烟酸0.5022克；

3)、培养基的配制：

在种子发芽培育时，培养基组成可以是在1000份培养基中含：大量元素10份、微量元素1份、铁盐5份、维生素1份、土豆150份、糖20份、琼脂8份，调整PH值至5.6，其中每份维生素组成：甘氨酸2.0018克、维生素B1 0.4002克、维生素B6 0.5026克、烟酸0.5022克，

4)、苗生长时的培养基组成是在1000份培养基中含：大量元素10份、微量元素1份、铁盐5份、香蕉100份、萘乙酸2份、糖25份、琼脂9份，调整PH值至5.6，在培养基中还包含亚硒酸钠(Na2SeO3)浓度为200-300ppm，

5、)添加顺序：琼脂+土豆(或香蕉)+大量元素+糖+微量元素+萘乙酸

配制土豆时，先洗净，去皮，切成小块，煮沸后烧20分钟，去渣，得上清液即可；培养基中亚硒酸钠(Na2SeO3)的最佳浓度为250ppm，出苗率可达到98％以上，铁皮石斛幼苗在富硒培养基中生长10个月，以蒸馏水洗去富硒铁皮幼苗的根表面的无机硒，干燥后得率可达12.5％(70℃，4小时，含水量＜2％，铁皮石斛幼苗的干品中，含有机硒4.95m克/k克，据原子光谱测定，其有机硒可达99.7％。

Claims

1.一种富硒铁皮石斛的培养方法，它包括采用组织培养方法，取铁皮石斛种子无菌试管苗诱导、原球茎诱导、原球茎驯化，再转移至培养基上培养苗生长，其特征是苗生长时的培养基组成是在1000份培养基中含：大量元素10份、微量元素1份、铁盐5份、香蕉100份、萘乙酸2份、糖25份、琼脂9份，调整PH值至5.6，在培养基中还包含亚硒酸钠(Na2SeO3)浓度为200-300ppm，其中：大量元素组成：硝酸钾(KNO3)14.1497克、硫酸氨[(NH4)SO4]2.3160克、亚磷酸钾(KH2PO4)2.0046克、硫酸镁(MgSO4.7H2O)0.9245克、氯化钠NaCL 0.6665克(或氯化钙CaCL0.83克)；微量元素组成(配置成1000毫升并吸取其中1毫升作为1份)：碘化钾(KI)0.8326克；高锰酸钠(NaMn04.2H20)0.2532g；硫酸铜0.0248克；氯化钴0.0256克；硫酸锰22.3212克；硫酸锌8.6281克；硼酸6.2308克；铁盐(配置成200毫升，吸取1毫升作为1份)：硫酸亚铁(FeSO4.7H2O 5.7524克)、螯合剂(Na-EDTA 5.4514克)，由于铁在配制中易引起沉淀，因而需单独配制，先加热硫酸亚铁使其溶解，再加入螯合剂Na-EDTA。

2.根据权利要求1所述的一种富硒铁皮石斛的培养方法，其特征是种子发芽时的培养基组成是在1000份培养基中含：大量元素10份、微量元素1份、铁盐5份、维生素1份、土豆150份、糖20份、琼脂8份，调整PH值至5.6，其中每份维生素组成：甘氨酸2.0018克、维生素B1 0.4002克、维生素B6 0.5026克、烟酸0.5022克，配置土豆时，先洗净，去皮，切成小块，煮沸后烧20分钟，去渣，得上清夜即可。

3.根据权利要求1或2所述的一种富硒铁皮石斛的培养方法，其特征是在上述培养方法中，铁皮石斛幼苗保持在23-27摄氏度，相对湿度保持在50％-70％，光照强度1500-2000Lux，光照时间为每日8小时，铁皮石斛幼苗在富硒培养基中生长10个月。