CN103828720B - 一种植物愈伤组织生长培养基及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种植物愈伤组织生长培养基及其制备方法与应用，所述的植物愈伤组织生长培养基包括重量份硝酸钾400~700份、氯化钙60~80份、硫酸镁50~90份、磷酸二氢钾50~110份、铁盐25~50份、复合维生素8~10份、琼脂250~350份、处理后的土豆物质90~110份、碳粉40~60份。所述的制备方法包括前处理、制备步骤。本发明采用天然的土豆、香蕉等制备的培养基，全面提升作物育苗的成活率等指标，进一步降低组培单位原材料成本，并实现了工艺流程标准化。本发明通过降低死亡率、提高生根率、降低死亡率的指标，缩短生长时间，提高生产产量、提升经济效益。

Description

一种植物愈伤组织生长培养基及其制备方法与应用
技术领域
本发明属于植物营养调理技术领域，具体涉及一种植物愈伤组织生长培养基及其制备方法与应用。
背景技术
植物愈伤组织培养指将母体植物上各个部分切下、形成外植体、接种到无菌培养基上、进行愈伤组织诱导、生长同发育的一门技术。一般情况下，植物组织均能诱发形成愈伤组织，由外植体形成愈伤组织，标志着植物组织培养地开始。是细胞全能性的体现。
虽然植物愈伤组织培养是一种常见的培养方式，这种培养方式对于常规作物品种如胡萝卜等较为有效，但针对一些经济价值较高的作物如石斛等高级中草药材还是存在一定风险。这类风险体现在：一、培养基成分配方没有针对这些高端药材幼苗做出优化；二、在生产工艺流程上没有做到标准化。因此，开发一种能解决上述问题的培养基是非常必要的。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种植物愈伤组织生长培养基；第二目的在于提供所述植物愈伤组织生长培养基的制备方法；第三目的在于提供所述植物愈伤组织生长培养基的应用。
本发明的第一目的是这样实现的，所述的植物愈伤组织生长培养基包括重量份硝酸钾400~700份、氯化钙60~80份、硫酸镁50~90份、磷酸二氢钾50~110份、铁盐25~50份、复合维生素8~10份、琼脂250~350份、处理后的土豆物质90~110份、碳粉40~60份。
本发明的第二目的是这样实现的，包括前处理、制备步骤，具体包括：
A、前处理：按配比比例分别称量，将硝酸钾、氯化钙、硫酸镁、铁盐、复合维生素混合后加入重量比1.5~2.5倍的纯净水制成母液，将土豆、琼脂、香蕉于压力0.1~0.15MPa、温度110~130℃下蒸煮30~50min后降温至40~50℃备用；
B、制备：将前处理后得到的土豆物质、琼脂或土豆物质、琼脂、香蕉的混合物加入到母液中混合均匀，加入配比比例的碳粉，消毒灭菌，调整pH值至6.5~7.5得到目标物。
本发明的第三目的是这样实现的，所述的植物愈伤组织生长培养基在诱导植物组织形成愈伤组织中的应用。
本发明采用天然的土豆、香蕉等制备的培养基，全面提升作物育苗的成活率等指标，进一步降低组培单位原材料成本，并实现了工艺流程标准化。本发明通过降低死亡率、提高生根率、降低死亡率的指标，缩短生长时间，提高生产产量、提升经济效益。
附图说明
图1为本发明培养基应用到石斛幼苗增殖阶段的生产车间状况示意图；
图2为本发明培养基应用到石斛幼苗生根阶段的生产车间状况示意图；
图3为本发明培养基应用到石斛幼苗生根阶段的生长状况示意图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。
本发明所述的植物愈伤组织生长培养基，包括重量份硝酸钾400~700份、氯化钙60~80份、硫酸镁50~90份、磷酸二氢钾50~110份、铁盐25~50份、复合维生素8~10份、琼脂250~350份、处理后的土豆物质90~110份、碳粉40~60份。
所述的铁盐为高分子聚合铁盐。
所述的复合维生素为维生素C60%和维生素E40%。
所述的土豆物质是将土豆削皮、洗净、切片（1cm厚度）在压力0.1~0.15MPa、温度110~130℃下蒸煮30~50min后，打泥，进搅拌锅，和配方其他物质混合，进行二次蒸煮10分钟，注瓶后进入高温消毒流程，冷却后使用。完成后的培养基瓶必须做好密封，进入到满足条件的组培室待用。
所述的植物愈伤组织生长培养基还包括重量份香蕉90~110份。
所述的植物愈伤组织生长培养基的pH值为6.5~7.5。
所述的植物愈伤组织生长培养基包括增殖型培养基和生根型培养基。
所述的增殖型培养基包括重量份的硝酸钾500~700份、氯化钙60~80份、硫酸镁70~90份、磷酸二氢钾50~70份、铁盐40~50份、复合维生素8~10份、琼脂250~350份、处理后的土豆物质90~110份、碳粉40~60份。
所述的生根型培养基包括重量份的硝酸钾400~600份、氯化钙60~80份、硫酸镁50~70份、磷酸二氢钾90~110份、铁盐25~35份、复合维生素8~10份、琼脂250~350份、处理后的土豆物质90~110份、香蕉90~110份、碳粉40~60份。
本发明所述植物愈伤组织生长培养基的制备方法，包括前处理、制备步骤，具体包括：
A、前处理：按配比比例分别称量，将硝酸钾、氯化钙、硫酸镁、铁盐、复合维生素混合后加入重量比1.5~2.5倍的纯净水制成母液，将土豆、琼脂、香蕉于压力0.1~0.15MPa、温度110~130℃下蒸煮30~50min后降温至40~50℃备用；
B、制备：将前处理后得到的土豆物质、琼脂或土豆物质、琼脂、香蕉的混合物加入到母液中混合均匀，加入配比比例的碳粉，消毒灭菌，调整pH值至6.5~7.5得到目标物。
所述的复合维生素包括维生素C和维生素E。所述的复合维生素包括重量比维生素C60%和维生素E40%。
本发明的应用为所述的植物愈伤组织生长培养基在诱导植物组织形成愈伤组织中的应用。
实施例1
称量硝酸钾500g、氯化钙60g、硫酸镁70g、铁盐40g、复合维生素8g，混合后加入1.7Kg的纯净水制成母液，将土豆90g、琼脂250g于压力0.1~0.15MPa、温度110℃下蒸煮50min后降温至40℃加入到母液中混合均匀，加入40g的碳粉，于压力0.1MPa、121℃下灭菌40min，调整pH值至6.5得到目标物。
实施例2
称量硝酸钾700g、氯化钙80g、硫酸镁90g、铁盐50g、复合维生素10g，混合后加入1.4Kg的纯净水制成母液，将土豆110g、琼脂350g于压力0.15MPa、温度130℃下蒸煮30min后降温至50℃加入到母液中混合均匀，加入60g的碳粉，于压力0.1MPa、121℃下灭菌40min，调整pH值至7.5得到目标物。
实施例3
称量硝酸钾650g、氯化钙70g、硫酸镁80g、铁盐45g、复合维生素9g，混合后加入2Kg的纯净水制成母液，将土豆100g、琼脂300g于压力0.11MPa、温度120℃下蒸煮40min后降温至45℃加入到母液中混合均匀，加入50g的碳粉，于压力0.1MPa、121℃下灭菌40min，调整pH值至7.0得到目标物。
实施例4
称量硝酸钾400g、氯化钙60g、硫酸镁50g、铁盐25g、复合维生素8g，混合后加入1.6Kg的纯净水制成母液，将土豆100g、琼脂300g、香蕉90g于压力0.12MPa、温度121℃下蒸煮40min后降温至45℃加入到母液中混合均匀，加入60g的碳粉，于压力0.1MPa、121℃下灭菌40min，调整pH值至6.9得到目标物。
实施例5
称量硝酸钾600g、氯化钙80g、硫酸镁70g、铁盐35g、复合维生素10g，混合后加入2.3Kg的纯净水制成母液，将土豆110g、琼脂350g、香蕉110g于压力0.15MPa、温度130℃下蒸煮50min后降温至50℃加入到母液中混合均匀，加入40g的碳粉，于压力0.1MPa、121℃下灭菌40min，调整pH值至7.0得到目标物。
下面仅以石斛幼苗做如下试验以进一步说明本发明，但不限植物。
试验例1
以实施例1制备得到的植物愈伤组织生长培养基应用于石斛幼苗增殖阶段，其生长情况见附图1。
以实施例4制备得到的植物愈伤组织生长培养基应用于石斛幼苗生根阶段，其生长情况见附图2和附图3。

Claims (2)

1.一种石斛愈伤组织生长培养基，其特征在于所述石斛愈伤组织生长培养基包括增殖型培养基和生根型培养基，pH值分别为6.5和6.9；所述的增殖型培养基为称量硝酸钾500g、氯化钙60g、硫酸镁70g、铁盐40g、复合维生素8g，混合后加入1.7Kg的纯净水制成母液，将土豆90g、琼脂250g于压力0.1~0.15MPa、温度110℃下蒸煮50min后降温至40℃加入到母液中混合均匀，加入40g的碳粉，于压力0.1MPa、121℃下灭菌40min，调整pH值至6.5得到增殖型培养基；所述的生根型培养基为称量硝酸钾400g、氯化钙60g、硫酸镁50g、铁盐25g、复合维生素8g，混合后加入1.6Kg的纯净水制成母液，将土豆100g、琼脂300g、香蕉90g于压力0.12MPa、温度121℃下蒸煮40min后降温至45℃加入到母液中混合均匀，加入60g的碳粉，于压力0.1MPa、121℃下灭菌40min，调整pH值至6.9得到生根型培养基；所述的复合维生素为重量比为60:40的维生素C和维生素E。
2.一种权利要求1所述的石斛愈伤组织生长培养基的应用，其特征在于所述的石斛愈伤组织生长培养基在石斛幼苗增殖阶段、石斛幼苗生根阶段的应用。
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