CN1733244A - 一种减轻激素副作用的中药组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种减轻激素副作用的中药组合物。所述的组合物包括淫羊藿总黄酮提取物，知母总皂苷提取物和甘草次酸。本发明还公开了制备减轻激素副作用的药物的方法。本发明提供的组合物具有减轻激素副作用同时又不干预激素免疫抑制的正作用。

Description

一种减轻激素副作用的中药组合物

技术领域

本发明涉及一种减轻激素副作用的组合物，尤其是用于减轻糖皮质激素副作用的中药组合物。

背景技术

糖皮质激素(Glucocorticoid；GC)是一组类固醇药物，又称为皮质激素(简称激素)，它是现代医学的一种重要药物。1949年，Hench等首次应用皮质激素治疗类风湿关节炎取得成功。皮质激素疗效显著，大多用于抗炎及抑制免疫，特别是抑制体液免疫。

但是，由于皮质激素具有严重的副作用而使其临床应用受到了限制。应用皮质激素而引起的并发症和副作用可分为三类：

第一类是由于激素过多而引起皮质醇增多症的外在表现，如肥胖、满月脸、水牛背、多毛、紫纹、兴奋不寐、易饥多食等；

第二类是激素过多引起代谢紊乱，如骨质疏松、高血糖、高血脂、高血压、消化性溃疡甚至出血、抑制免疫功能、容易感染；

第三类是激素长期应用后导致肾上腺皮质受抑制而成废用性萎缩，此类患者对激素常呈依赖状态而不易撤除，而且遇到大的应激，如手术或严重感染，随时可能发生急性肾上腺皮质功能不足的危象而威胁生命。

现代临床药理学研究表明，短期使用皮质激素安全范围是很广的，但长期服用，即使是中等剂量也会出现多种严重的机能障碍。这是由于皮质激素对糖、蛋白质、脂肪、骨的代谢作用以及下丘脑垂体-肾上腺-胸腺(HPAT)轴的抑制所致。因此，研究如何减轻皮质激素的副作用是临床迫切需要解决的难题，具有重要的实际意义。

如何减轻激素的副作用和并发症，欧美、日本等先进国家已投入很大人力、物力开展这方面的研究。目前，医学界正致力于解决GC(皮质激素)副作用的研究，主要包括：(1)改变皮质激素的化学结构；(2)改变给药途径，如局部关节用药、皮肤用药、呼吸道用药等；(3)在使用GC同时加用其它药物，以减轻GC的副作用。

国外在以上三方面做了不少工作，取得了一定效果，但尚未做到既不影响其抗炎、抑制体液免疫这一主要作用，又能较全面纠正其副作用和并发症，而且使其自身肾上腺不受抑制，并有利于激素撤除。

国内同样缺乏解决这一临床治疗的难题的理想方案。

综上所述，本领域迫切需要开发既可减轻激素副作用同时又不干预激素免疫抑制的正作用的组合物。

发明内容

本发明的目的是提供一种既可减轻激素副作用同时又不干预激素免疫抑制的正作用的组合物。本发明还提供了所述组合物的制法和用途。

在本发明的一个方面，是提供了一种组合物，它含有药学上可接受的载体以及以下活性成分：

(a)1-5重量份淫羊藿总黄酮；

(b)1-8重量份知母总皂苷；

(c)0.0005-0.05重量份甘草次酸。

上述的组合物，按组合物的总重量计，淫羊藿总黄酮的浓度为5.53％-41.66％，知母总皂苷的浓度为8.24％-44.4％，或甘草次酸的浓度为1.92×10^-3％-1.22％。

本发明的另一方面是提供了一种上述组合物的制备方法，它包括下述步骤：将(a)1-5重量份淫羊藿总黄酮；(b)1-8重量份知母总皂苷；(c)0.0005-0.05重量份甘草次酸与药学上可接受的载体混合，从而得到上述组合物。

在上述的制备方法中，所述的淫羊藿总黄酮以总黄酮含量≥50％的淫羊藿总黄酮提取物形式加入，知母总皂苷以总皂苷含量≥50％的知母总皂苷提取物形式加入。

更佳地，所述的淫羊藿是朝鲜淫羊藿(Epimeddium koreanum Nakai)地上部分。

在本发明的另一个方面，是提供了一种组合物，它含有选自下组的必要组份：

(a)30-90重量份数的淫羊藿；

(b)60-120重量份数的知母；

(c)15-90重量份数的甘草或0.0005-0.05重量份甘草次酸；以及50-1000重量份数的药学上可接受的载体。

本发明的另一方面是，提供的组合物可以是粉剂、口服液、片剂或胶囊制剂；还可以是药物组合物、食物组合物、或饮食补充剂。

在本发明的另一个方面，是提供了一种组合物，它由以下组分构成：

(a)1-5重量份淫羊藿总黄酮；

(b)1-8重量份知母总皂苷；

(c)0.0005-0.05重量份甘草次酸。

本发明所提供的组合物可以用于制备减轻激素副作用的药物，较佳地，所述的激素是糖皮质激素。

本发明提供的组合物具有既减轻激素副作用同时又不干预激素免疫抑制正作用的有益效果。

具体实施方式

淫羊藿温补肾阳，而知母滋阴泻火。然而，这两味药材难以有效地配伍在一起。发明人经过广泛而深入的研究，通过添加一定量的甘草次酸(或甘草提取物或甘草)，可以将滋阴泻火的知母与温补肾阳的淫羊藿有效地配伍在一起，形成一种新的组合物。当该组合物配合激素使用时，可纠正激素应用过程中内在的阴阳转化，既不影响激素的正作用，又有显著拮抗或减轻激素副作用的效果。在此基础上完成了本发明。

为了便于理解本发明，本发明人提出本发明组合物可降低副作用的可能的机理。然而，应指出的是，本发明并不受该机理的任何限制。本发明的机理如下：

糖皮质激素应用于疑难危重病症都有显著疗效，但由于其严重的副作用而使其临床应用受到了一定的限制。外源性糖皮质激素在有效抗炎作用的同时通过负反馈机制抑制HPAT轴：临床病人的血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇及淋巴细胞增殖反应明显下降；实验动物还表现为下丘脑单胺类递质被激活；垂体、肾上腺、胸腺重量减轻；室旁核，正中隆起CRH神经细胞与神经纤维减少，垂体ACTH分泌细胞减少，肾上腺束状带与胸腺皮质萎缩；NKCC活性淋巴细胞产生IL-2，γ-IFN水平降低等等。中医认为皮质激素是外源性“纯阳”之品，作用于人体后，肾精阴阳失衡，初始阴精内敛，滋养之性被遏导致肾阴虚。停药减激素时，肾阴封蛰日久，阴液渐亏至阴损及阳，使肾阳不振，肾动态平衡失调，阴阳消长由肾阴虚——肾阳虚——阴阳俱虚。

使用滋阴和温补肾阳的中药能在一定程度上改善上述各项指标，又不影响其抗炎这一主要治疗作用，提示滋阴和温补肾阳的中药具有对抗外源性糖皮质激素抑制神经内分泌免疫的保护作用。

如本文所用，术语“必要组份”指必要的中药药材，即淫羊藿(Epimeddiumkoreanum Nakai)、知母(Anemarrhena asphodeloides Bge)和甘草(Glycyrrhizauralensis Fisch)。

如本文所用，术语“必要成分”指作为活性成分的必要的化学物质，即淫羊藿总黄酮、知母总皂苷和甘草次酸。

如本文所用，术语“基本上由……构成”指在组合物中，除了含有必要成分或必要组份之外，还可含有少量的且不影响有效成分的次要成分和/或杂质。例如，可以含有甜味剂以改善口味、抗氧化剂以防止氧化，以及其他本领域常用的添加剂。

如本文所用，术语“药学上可接受的载体”指用于治疗剂给药的载体，包括各种赋形剂和稀释剂。该术语指这样一些药剂载体：它们本身并不是必要的活性成分，且施用后没有过分的毒性。合适的载体是本领域普通技术人员所熟知的。在Remington’s Pharmaceutical Sciences(Mack Pub.Co.，N.J.1991)中可找到关于药学上可接受的赋形剂的充分讨论。在组合物中药学上可接受的载体可包括液体，如水、盐水、甘油和乙醇。另外，这些载体中还可能存在辅助性的物质，如崩解剂、润湿剂、乳化剂、pH缓冲物质等。来自于淫羊藿、知母、甘草的除必要成分(即淫羊藿总黄酮、知母总皂苷和甘草次酸)之外的非必要成分，以及其他非必要成分(例如其他辅助性药材)，也包括在药学上可接受的载体的定义中。

例如，本发明的组合物还可以含有以下中药材或其提取物或活性成分：熟地、生地、肉桂、附子、菟丝子、黄芪、锁阳、肉苁蓉、补骨脂、人参、玄参、天冬、麦冬、山药、仙茅、丹皮、泽泻、夏枯草等。

如本文所用，术语“本发明的组合物”包括药物组合物、食品组合物和饮食补充剂，是指它们含有或基本上由(1)淫羊藿或淫羊藿总黄酮；(2)知母或知母总皂苷；和(3)甘草或甘草次酸构成。通常，淫羊藿+知母+甘草的重量占组合物总重量的30-99％，较佳地50-99％，更佳地60-90％。

在本发明的药物组合物中，作为必要组份的三种中药药材是(1)淫羊藿，其中的活性成分是淫羊藿总黄酮；(2)知母；其中的活性成分是知母总皂苷；和(3)甘草，其中的活性成分是甘草次酸。

更佳地，所述的淫羊藿是朝鲜淫羊藿(Epimeddium koreanum Nakai)地上部分。

除了按必要活性成分来限定本发明的组合物之外，还可用必要组份(药材)的配比来限定本发明的组合物。

在本发明组合物中，按重量计，三种必要的活性成分的配比如下：

(a)1-5重量份，较佳地1.5-3.5重量份的淫羊藿总黄酮；

(b)1-8重量份，较佳地1.5-5重量份的知母总皂苷；

(c)0.0005-0.05重量份，较佳地0.0015-0.025重量份的甘草次酸。

在本发明组合物中，按重量计，三种必要药材的合适配比是：

30-90重量份数淫羊藿，较佳地40-80重量份数，更佳地50-70重量份数的淫羊藿；

60-120重量份数知母，较佳地70-110重量份数，更佳地80-100重量份数的知母；

15-90重量份数甘草，较佳地30-70重量份数，更佳地40-60重量份数的甘草，

且淫羊藿+知母+甘草的重量占组合物总重量的30-99％，较佳地50-99％，更佳地60-95％。余量的物质是药学上可接受的载体，例如淀粉、麦芽糊精等。

本发明的药物组合物或饮食补充剂，可以通过常规方法制成任何常规的制剂形式，优选的是粉剂、丸剂、口服液、片剂或胶囊制剂。

本发明的组合物可用常规方式施用，例如口服。在使用药物组合物时，按3种活性成分的总重量计，通常每天给药量为至少约5毫克/千克体重，而且在大多数情况下不超过约50毫克/千克体重，较佳地该剂量是约5毫克/千克体重-约50毫克/千克体重。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。

在本发明的另一方面，提供了一种制备本发明药物组合物或饮食补充剂的方法，它包括下述步骤：将(a)1-5重量份淫羊藿总黄酮；(b)1-8重量份知母总皂苷；(c)0.0005-0.05重量份甘草次酸与药学上可接受的载体混合，从而得到本发明所述的组合物。

或者，将相应重量份的淫羊藿、知母和甘草药材混合在一起，从而得到药材组合物。当然，还可用常规方法对所述的药材组合物进行提取，以便于服用。

在另一优选例中，可以分别用本领域已知方法提取淫羊藿、知母和甘草药材中的有效部位或有效成分，即淫羊藿总黄酮、知母总皂苷和甘草次酸(或含这些有效成分的提取物)，然后将其混合在一起，制得本发明的组合物。

另一方面，本发明的组合物可用于制备减轻激素副作用的药物，较佳地，所述的激素是糖皮质激素。

本发明的主要优点在于：

(a)本发明的组合物具有显著减轻激素的副作用，又不影响皮质激素抗炎免疫抑制等药理作用。

(b)组份简单、活性成分明确且针对性强；

(c)成本低廉。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。

实施例1

提取淫羊藿总黄酮

(1)将朝鲜淫羊藿(Epimeddium koreanum Nakai)地上部分粉碎成粗粉；

(2)取一份(1千克)粗粉，每次加15倍水，水煎煮三次，每次1小时，得到水煮提取液，然后将提取液减压浓缩至原料重量的2倍；

(3)过滤除去不溶物，滤液上处理好的D101大孔吸附树脂，上样量(相当于生药量)与树脂用量的比例为1∶2(W/V)，用10倍柱床体积的去离子水洗脱；

(4)用15倍柱床体积的20％乙醇洗脱；

(5)用10倍柱床体积的60％乙醇洗脱，收集60％乙醇洗脱液，浓缩蒸干得到淫羊藿总黄酮提取物。

经检测，结果表明淫羊藿总黄酮提取物的得率约为2％，其中淫羊藿总黄酮含量为62％。

实施例2

提取知母总皂苷

(1)将知母(Anemarrhena asphodeloides Bge)粉碎成粗粉；

(2)取一份(1千克)粗粉，加6倍75％乙醇加热回流三次，每次1小时，得到提取液，然后将提取液减压浓缩回收乙醇，水溶液过滤除去不溶物，加水稀释至4倍药材重量；

(3)稀释液上处理好的D101大孔吸附树脂，上样量(相当于生药量)与树脂用量的比例为1∶2(W/V)，用5倍柱床体积的1％NaOH溶液洗脱；

(4)用10倍柱床体积的20％乙醇洗脱；

(5)用10倍柱床体积的75％乙醇洗脱，收集75％乙醇洗脱液，浓缩蒸干得到知母总皂苷提取物。

经检测，结果表明，知母总皂苷提取物的得率约为4％，其中知母总皂苷含量为60％。

实施例3

提取甘草次酸

(1)将甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch)粉碎成粗粉；

(2)取一份(1千克)粗粉，每次加10倍含氨0.5％的10％乙醇溶液，在85℃加热提取三次，每次2小时，得到提取液，然后将提取液减压浓缩至原体积三分之一；

(3)搅拌下滴加浓H2SO4酸化至不再析出沉淀，放置6h，过滤收集沉淀，得到甘草酸粗品；

(4)粗品用常规的KOH溶剂处理法，经多步纯化制得甘草酸单钾盐纯品；

(5)经5％H₂SO₄加热处理，纯化后，得到甘草次酸纯品。

经检测，甘草次酸的纯度为＞98％。

实施例4

制备组合物No.1

取用实施例1-3分别获得的淫羊藿总黄酮提取物30克(含量62％)，知母总皂苷提取物45克(含量60％)，甘草次酸0.014克(含量98％)，混合制得组合物No.1。

实施例5

制备药物制剂

在50克实施例4获得的组合物中加入40克淀粉、5克甲基纤维素、5克硬脂酸镁，压片，制得片剂。

每片含60mg淫羊藿总黄酮，90mg知母总皂苷和0.3mg甘草次酸。

实施例6

单味、二味、三味药配比的药效学研究

实验材料

1、实施例1-3方法分别获得的淫羊藿总黄酮提取物(含量62％)，知母总皂苷提取物(含量60％)，甘草次酸(含量98％)

2、造模药物：皮质酮，Sigma公司，批号17721。皮质酮溶于灭菌橄榄油中，工作浓度为5mg/ml。

3、实验动物：2个月的雄性SD大鼠，体重200-230g。

实验方法

1、动物随机分成五组，每组10只，分别为正常对照组(NC)，皮质酮模型组(MC)，淫羊藿总黄酮组(A)，淫羊藿总黄酮+知母总皂组(A+B组，A∶B＝3∶4.5)，淫羊藿总黄酮+知母总皂苷+甘草次酸组(A+B+C组，A∶B∶C＝3∶4.5∶0.0014)，试验用药量为成人有效剂量的10倍，分别以150mg/kg剂量灌胃给药，正常对照组，皮质酮模型组以同体积蒸馏水灌胃，每日一次，连续36天。从给药第六天开始，除正常对照组每天注射同体积橄榄油外，其它各组均皮下注射皮质酮5mg/kg造模，连续造模36天，第36天称重，氯胺酮麻醉，股动脉采血，无菌取脾脏，分离肾上腺，称重并计算肾上腺指数(肾上腺重量/100g体重)。

2、血浆皮质醇水平的测定：采用Cortisol测定试剂盒(Roche)

3、淋巴细胞转化率测定：无菌取脾脏，剪碎，采用淋巴细胞分离液常规分离单个核淋巴细胞，调整细胞浓度至5×106/ml，加入96孔平底细胞培养板中，每孔100μl，同时，每孔加入PHA(Sigma)2μg，并设对照孔，对照孔以完全培养液代替PHA，每份样本设实验孔与对照孔各2孔。置37℃、5％CO₂条件下常规培养48小时后每孔加入0.5微居里3H-TdR(购自中国科学院上海核技术开发公司)，18小时后，多头细胞收集器收集细胞，LKB1214型液闪计数仪测定cpm值。刺激指数＝实验孔cpm均值/对照孔cpm均值

4、统计学办法：数据以 X±SD表示，采用SPSS10.0软件进行统计学处理。

实验结果

见表1、2、3。

1、各组大鼠肾上腺比较

表1.各组大鼠肾上腺指数( X±SD)

组别     例数   肾上腺指数       P

NC       10     24.85±4.68**    0.001

MC       10     16.60±6.67

A        10     23.08±4.71*     0.040

A+B      10     22.13±4.69*     0.042

A+B+C    10     25.20±3.95**    0.001

*与模型组相比P＜0.05；**与模型组相比P＜0.01

模型组与正常对照组相比，肾上腺重量显著减轻，P＜0.01；给药组A和给药组A+B肾上腺重量与模型组相比具有显著性差异P＜0.05；给药组A+B+C与模型组相比具有极显著性差异P＜0.01；表明一味药、二味药及三味药配伍均可提高大鼠肾上腺重量，对激素抑制肾上腺的作用均具有对抗效应。

2、各组大鼠淋巴细胞转化率(LPR)的比较

表2.各组大鼠LPR( X±SD)

组别    例数    LPR             P

NC      10      2.55±1.75**    0.000

MC      10      1.03±0.27

A       10      2.45±0.66**    0.001

A+B       10      0.50±0.14     0.335

A+B+C     10      0.42±0.15     0.239

**与模型组相比P＜0.01

与正常对照组相比，模型组淋巴细胞转化率显著降低，P＜0.01；给药组A+B和给药组A+B+C淋巴细胞转化率与模型组相比均无显著性差异，P＞0.05。给药组A淋巴细胞转化率与模型组相比有显著性差异，P＜0.01。表明给药组A+B和给药组A+B+C配伍可不干扰激素对外周淋巴细胞的免疫抑制作用，而单味给药组A则对激素抑制外周淋巴细胞具有抑制作用。

3、各组大鼠血浆皮质醇含量比较

表3.各组大鼠血浆皮质醇含量测定( X±SD)

组别     例数   血浆皮质醇     P

NC       10     1.67±0.22*    0.02

MC       10     0.98±0.22

A        10     1.64±0.11*    0.03

A+B      10     1.41±0.44     0.21

A+B+C    10     1.65±0.15*    0.03

*与模型组相比P＜0.05

模型组与正常对照组相比，血浆皮质醇含量显著减少，P＜0.05，表明肾上腺皮质功能已明显减退；给药组A+B血浆皮质醇含量与模型组相比无显著差异，P＞0.05；给药组A和给药组A+B+C血浆皮质醇含量与模型组相比显著增高，有显著差异，P＜0.05，结果表明一味药及三味药配伍可提高血浆皮质醇含量。

上述结果表明，淫羊藿总黄酮、知母总皂苷和甘草次酸三种配伍可显著提高皮质酮大鼠血浆皮质醇含量水平，同时显著增加皮质酮大鼠肾上腺重量，体现出减轻激素负反馈引起的肾上腺皮质功能受抑制的良好作用，对应用激素情况下HPA轴具有一定的保护作用，同时不干预激素免疫抑制的正作用；而单味淫羊藿总黄酮可显著提高皮质酮大鼠血浆皮质醇含量水平，并显著增加皮质酮大鼠肾上腺重量，但对激素抑制淋巴细胞的免疫抑制有显著的对抗作用。故比较单味淫羊藿总黄酮、二味淫羊藿总黄酮和知母总皂苷配伍及三味淫羊藿总黄酮、知母总皂苷和甘草次酸三种配伍的实验结果表明，三味药配伍更为合理，即既不干预激素免疫抑制作用，又对激素造成的肾上腺皮质内抑制具有良好的保护作用。

实施例7

三味药不同剂量配比的药效学研究

实验材料

1、实施例1-3中分别获得的淫羊藿总黄酮提取物(含量62％)，知母总皂苷提取物(含量60％)，甘草次酸(含量98％)按3∶4.5：0.0014重量比所得到的混合物。

2、造模药物：皮质酮，Sigma公司，批号17721。皮质酮溶于灭菌橄榄油中，工作浓度为5mg/ml。

3、实验动物：2个月的雄性SD大鼠，体重200-230g。

实验方法

1、动物随机分五组，每组10只，分别为正常对照组(NC)，皮质酮模型组(MC)，给药高剂量组，中剂量组，低剂量组，高中低剂量组分别以300mg/kg、150mg/kg、50mg/kg剂量灌胃给药，正常对照组，皮质酮模型组以同体积蒸馏水灌胃，每日一次，连续36天。从给药第六天开始，除正常对照组每天注射同体积橄榄油外，其它各组均皮下注射皮质酮5mg/Kg造模，连续造模36天，第36天称重，氯胺酮麻醉，股动脉采血，无菌取脾脏，分离肾上腺和胸腺，称重并计算脏器指数：胸腺指数(胸腺重量/100g体重)、肾上腺指数(肾上腺重量/100g体重)。

2、血浆皮质醇水平的测定：采用Cortisol测定试剂盒(Roche)

3、淋巴细胞转化率测定：无菌取脾脏，剪碎，采用淋巴细胞分离液常规分离单个核淋巴细胞，调整细胞浓度至5×106/ml，加入96孔平底细胞培养板中，每孔100μl，同时，每孔加入PHA(Sigma)2μg，并设对照孔，对照孔以完全培养液代替PHA，每份样本设实验孔与对照孔各2孔。置37℃、5％CO2条件下常规培养48小时后每孔加入0.5微居里3H-TdR(购自中国科学院上海核技术开发公司)，18小时后，多头细胞收集器收集细胞，LKB1214型液闪计数仪测定cpm值。刺激指数＝实验孔cpm均值/对照孔cpm均值

4、统计学办法：数据以 X±SD表示，采用SPSS10.0软件进行统计学处理。

实验结果

见表4、5、6、7、8。

1、各组大鼠体重比较

表4.各组大鼠体重比较( X±SD)

组别              例数                 体重

NC                10                   308.36±11.93**

MC                10                   266.55±14.94

高剂量            10                   282.36±11.41*

中剂量            10                   288.55±13.39**

低剂量            10                   298.00±18.13**

*与模型组相比P＜0.05；**与模型组相比P＜0.01

模型组与正常对照组相比，体重显著减轻，P＜0.05；高剂量给药组、中剂量给药组及低剂量给药组体重与模型组相比均具有显著性差异，P＜0.05，P＜0.01；表明高、中、低三种剂量配伍均可提高大鼠体重，抵消激素对全身皮肤、结缔组织、肌肉等各组织的消耗作用。

2、各组大鼠胸腺重量的比较

表5.各组大鼠胸腺指数(X±SD)

组别              例数                 胸腺指数

NC                10                   151.01±26.33**

MC                10                   91.51±28.23

高剂量            10                   100.70±14.44^△

中剂量            10                   127.39±18.41**

低剂量            10                   144.38±25.42**

^△与模型组相比P＞0.05。**与模型组相比P＜0.01

模型组与正常对照组相比，胸腺重量显著减轻，P＜0.01；高剂量给药组对胸腺重量无明显增加作用，P＞0.05；中剂量给药组及低剂量给药组胸腺重量与模型组相比均具有极显著性差异，P＜0.01；表明中、低剂量配伍可提高大鼠胸腺重量，抵消激素对中枢淋巴器官的抑制。

3、各组大鼠肾上腺体重比较

表6.各组大鼠肾上腺指数( X±SD)

组别              例数                 肾上腺指数

NC                10                   16.45±6.00**

MC                10                   7.52±0.42

高剂量            10                   18.07±3.83**

中剂量            10                   17.61±4.46**

低剂量            10                   13.99±3.40**

**与模型组相比P＜0.01

模型组与正常对照组相比，肾上腺重量显著减轻，P＜0.01，表明激素对肾上腺具有抑制作用；高剂量给药组、中剂量给药组及低剂量给药组肾上腺重量与模型组相比均具有极显著性差异，P＜0.01，表明高、中、低三种剂量配伍均可提高大鼠肾上腺重量，对激素抑制肾上腺的作用具有对抗效应。

4、各组大鼠淋巴细胞转化率(LPR)的比较

表7.各组大鼠淋巴细胞转化率LPR( X±SD)

组别              例数                 LPR

NC                10                   1.30±0.23*

MC                10                   0.96±0.12

高剂量            10                   0.91±0.09^△

中剂量            10                   0.97±0.12^△

低剂量            10                   1.14±0.10^△

*与模型组相比P＜0.05；^△与模型组相比P＞0.05

模型组与正常对照组相比，淋巴细胞转化率显著降低，P＜0.05，表明激素对外周淋巴细胞具有抑制作用；高剂量给药组、中剂量给药组及低剂量给药组淋巴细胞转化率与模型组相比均无显著性差异，P＞0.05，表明高、中、低三种剂量配伍均不干扰激素对外周淋巴细胞的免疫抑制作用。

5、各组大鼠血浆皮质醇含量比较

表8.各组大鼠血浆皮质醇含量测定( X±SD)

组别              例数                 血浆皮质醇

NC                10                   3.68±2.30*

MC                10                   1.94±1.27

高剂量            10                   2.98±1.75^△

中剂量            10                   4.48±2.67***

低剂量            10                   2.99±1.90^△

*与模型组相比P＜0.05；***与模型组相比P＜0.01；^△与模型组相比P＞0.05

模型组与正常对照组相比，血浆皮质醇含量显著减少，P＜0.05，表明肾上腺皮质功能已明显减退；高剂量给药组及低剂量给药组血浆皮质醇含量与模型组相比无显著增高，P＞0.05；中剂量给药组血浆皮质醇含量与模型组相比增高，具有极显著性差异，P＜0.01，表明中剂量配伍可提高和保护大鼠肾上腺皮质功能，对激素抑制肾上腺皮质功能的作用具有对抗效应。

上述结果表明，高、中、低三个剂量配比均可显著提高大鼠体重、肾上腺指数；中、低剂量配比可显著提高大鼠胸腺指数；中剂量配比可显著增加血浆皮质醇含量；由此可见，中剂量配比具有较为全面的保护激素作用下的HPAT轴的效应。同时，三个剂量配比均对皮质酮大鼠的淋巴细胞转化率无显著影响，表明三个剂量配比均不干预激素免疫抑制的正作用。因此，通过本实验，明确了有效的剂量配比，即中等剂量的三味药配比具有更为合理、全面的拮抗激素副作用的效应。

实施例8

制备组合物No.2-8

按实施例4相同的方法，制备组合物No.2-8，不同点在于用下表所示的配比。

                                 表：组合物No.2-8

组合物编号	2	3	4	5	6	7	8
								淫羊藿总黄酮提取物(含量62％)	70	60	50	40	30	20	10
知母总皂苷提取物(含量60％)	20	30	40	50	60	70	80
								甘草次酸(含量98％)	0.05	0.04	0.03	0.02	0.015	0.01	0.005

用实施例7相同的方式，以中剂量(150mg/kg)施用于大鼠，从而测试这些组合物的效果。

结果表明，这些组合物同样可以显著降低糖皮质激素的副作用同时又不干预激素免疫抑制的正作用。

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (10)

1.一种组合物，其特征在于，它含有药学上可接受的载体以及以下活性成分：

(a)1-5重量份淫羊藿总黄酮；

(b)1-8重量份知母总皂苷；

(c)0.0005-0.05重量份甘草次酸。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，按组合物的总重量计，淫羊藿总黄酮的浓度为5.53％-41.66％，知母总皂苷的浓度为8.24％-44.4％，或甘草次酸的浓度为1.92×10^-3％-1.22％。

3.一种组合物，其特征在于，它含有选自下组的必要组份：

30-90重量份数的淫羊藿；

60-120重量份数的知母；

15-90重量份数的甘草或0.0005-0.05重量份数的甘草次酸；

以及50-1000重量份数的药学上可接受的载体。

4.如权利要求1或3所述的组合物，其特征在于，它是粉剂、口服液、片剂或胶囊制剂。

5.如权利要求1或3所述的组合物，其特征在于，它是药物组合物、食物组合物、或饮食补充剂。

6.一种制备权利要求1所述的组合物的方法，其特征在于，包括下述步骤：将(a)1-5重量份淫羊藿总黄酮；(b)1-8重量份知母总皂苷；(c)0.0005-0.05重量份甘草次酸与药学上可接受的载体混合，从而得到权利要求1所述的组合物。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的淫羊藿总黄酮以总黄酮含量≥50％的淫羊藿总黄酮提取物形式加入，知母总皂苷以总皂苷含量≥50％的知母总皂苷提取物形式加入。

8.权利要求1所述的组合物在制备减轻激素副作用的药物中的应用。

9.一种组合物，其特征在于，它由以下组分构成：

(a)1-5重量份淫羊藿总黄酮；

(b)1-8重量份知母总皂苷；

(c)0.0005-0.05重量份甘草次酸。

10.如权利要求9所述的组合物的用途，其特征在于，用于制备减轻激素副作用的药物。