CN1700928A - 用于治疗重症患者的方法和药剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及血液甘露聚糖结合凝集素(MBL)调节剂在制备用于治疗或治愈重症患者挽救生命的药物中的用途。本发明进一步包含通过测量MBL来预测重症ICU病人中的死亡率。本发明另一个方面是应用MBL的单体和寡聚体预防性和/或治愈性地治疗收住在重症监护病房(ICUs)的患者。
Description
技术领域
本发明是涉及用血液甘露聚糖结合凝集素(mannan-binding lectin，MBL)调节因子来制备一种挽救生命的药物以治疗或治愈重症患者。本发明进一步包括通过检测MBL来预测重症ICU病人中的死亡率。本发明的另一方面是应用MBL单体和寡聚体预防和/或治疗重症监护病房(ICU)的病人。
发明背景
在拖延性重症患者中的死亡率超过20％，其中大多数死因可归于败血症和多器官衰竭(Van den Berghe G et al.，N Engl J Med，2001；345(19)：1359-67；Takala J，et al.，N Engl J Med 1999；341(11)：785-92)。每年，仅在美国就有超过50万病人受到这种病况的影响(Wheeler AP et al.，N Engl J Med，1999；340(3)：207-14)。在重症中发展成为严重感染的增加可能性，以及对于器官机能进行过度系统炎症应答的副作用可能是可控制的。
在成人群体中MBL的平均血清浓度是1000-2000ng/ml，但变化很大(Turner MW and Hamvas RM.Rev.IMMUNOgenet.2000；2(3)：305-22)。在血清浓度上的个体差异主要是由遗传因素造成的。在MBL基因的外显子1和启动子上的点突变具有高发生率。结果是，人群中大约三分之一的MBL浓度低于500ng/ml，超过10％低于50ng/ml(Steffensen Ret al.J.Immunol.Methods，2000；241(1-2)：33-42)。正常的，个体内的MBL水平变化非常小(Hansen TK et al.J.Clin.ENDOCRINOL.Metab 2001；86(11)：5383-8)，但在急性反应期中血清浓度会升高(Thiel S，et al.Clin.Exp.Immunol.1992；90(1)：31-5)，在给予生长激素(GH)后可特异性地被诱导(Hansen TK et al.J.Clin.Endo-crinol.Metab 2001；86(11)：5383-8)。MBL的缺乏伴有增加的感染机率(Super M，et al.，Lancet 1989；2(8674)：1236-9；Koch A，et al.JAMA 2001；285(10)：1316-21；Summerfield JA，et al.BMJ 1997；314(7089)：1229-32；GarredP，et al.，Lancet 1995；346(8980)：941-3)，但是如果其它共存的免疫异常存在，由于过多的免疫系统，增加的危险只能是很明显的。与此一致的是，最近报道接受癌症化疗的低水平MBL患者与患发热的嗜中性白血球减少症(febrile neutropenic episodes)和严重感染的机率增加有关(Neth O，Hann I etal.，Lancet，2001；358(9282)：614-8.；Peterslund NA et al.，Lancet 2001；358(9282)：637-8)。还没有研究在其它免疫活性的重症病人中MBL浓度对疾病的影响，而这也是本发明的一个方面。
本研究是调查在重症患者中MBL怎样影响后果。在所有患者中，无论治疗与否，随着特别护理时间的增加MBL浓度明显增加(P＜0.0001)，该增加独立于基线水平的MBL浓度但是可归于存活者。本发明指出低MBL水平在重症患者中具有消极后果。在存活者中的MBL基线浓度几乎比非存活者中的高三倍(p＝0.04)。
本发明指出在重症患者中通过恢复MBL的水平至正常水平，优选至大于250μg/l血清的水平，更优选至大于500μg/l血清的水平，进一步优选至1000ng/ml，最优选在1000ng/ml-2000ng/ml，可产生提高例如使在重症监护病房(ICU)中重症患者存活的结果。然而，在本发明之后，对于本领域技术人员可以清楚的知道活性MBL衍生物或生物活性物质类的化合物也可以达到同样效果，其中所述生物活性物质刺激肝细胞合成和/或释放MBL并且增加循环系统中MBL的水平。
可以通过各种途径获得MBL。在钙离子的存在下通过在甘露聚糖-琼脂糖(甘露聚糖偶联在琼脂糖基质上)上的亲和层析法，在1983年首次从人血清中分离出甘露聚糖结合凝集素(Kawasaki N.et al.，J.Biochem(Tokyo)，1983，94，937-947)。使用EDTA将MBL从亲和柱上洗脱。利用甘露聚糖结合蛋白纯化的改进方法已公开于Ezewkowitz Raymond US 5270199；S.M.Tan etal.Biochemical journal Vol.319，no 2，15 October 1996，pages 329-332；RKoppel et al.Journal of chromatography B.：Bio-medical Applications.，vol.662，no 2，1994 pages 191-196.；D.C.Kilpatrick Transfusion Medicine，vol.7，no.4，1997 pages 289-294和WO 99/64453 Laursen Inga。MBL可用Wild et al.，Biochem.J.，210：167-174 1983或Drickamer et al.，J.of Bio.Chemistry，261：6878-6887 1986中公开的方法使其通过甘露聚糖-琼脂糖柱分离得到。MBL可由工程化细胞产生。重组MBL可由培养哺乳动物细胞而得到(Ezekowitz，US 5,270,1999)如骨髓瘤细胞、中国仓鼠卵巢细胞(CHO)、人肝细胞和人胚肾细胞(HEK)(Vorup-Jensen，-T et al.Int-Immunopharmacol.2001 Apr；1(4)：677-87)或者按照例如在US6337193中公开的通过在甲基营养酵母株中表达MBL而得到。
已经获得临床级的MBL，并且其在输液中显示是安全的。对于患有长期疾病的病人已有的例子表明从人体捐献血浆库中得到的MBL可以安全的向病人给药(Garred，-Pete et al.Pediatr-Pulmonol.2002 Mar；33(3)：201-7)。此外，本发明第一次证明了一种对收住在ICU中重症患者有效的MBL疗法，其中所述患者没有事先被免疫妥协(如在器官移植或得病后没有进行免疫抑制)。
而且，本领域技术人员将清楚地知道可以在预防或治疗处理中应用生物活性物质类的化合物以提高收住在ICU中的重症患者的疗效和存活率，其中所述生物活性物质刺激肝细胞合成和或释放MBL并提高循环系统中MBL的水平。具有促进MBL分泌活性的化合物如生长激素在本发明之前已得到充分公开(Hansen，-T-K et al.J-Clin-Endocrinol-Metab.2001 Nov；86(11)：5383-8)。
在EP 0375736B1 May 13，1998 Aug.5，1988中公开了MBL的一般结构式。
例如，可以按照例如在US5270199公开的标准技术分离得到编码MBL的核酸如DNA。例如，正如Drickamer et al.，J.Biol.Chem.，261：6878(1986)中所公开的，可以构建针对该核酸的特异性寡核甘酸探针，该探针可用于探查基因组或cDNA文库。作为替换，可以将来自相关基因的基因片断用作探针。探针优选与MBL糖结合域的区域具有同源性。用这种技术分离得到的克隆包含工程化的核酸。一旦分离，编码MBL的基因可用于制备重组的MBL或其肽片段。此外，可采用标准技术对核酸进行修饰以表达修饰的肽。例如，按照Woods et al.Proc.Natl.Acad.Sci.USA.5661，1982公开的标准技术，已经构建了人肝cDNA文库。应用凝胶纯化放射性标记的鼠源MBL-CcDNA序列探查了此文库，其中所述序列是按照Drickamer(J.Biol.Chem.263：9557，1988)所述方法采用Xho I和Ecro RI酶切处理的。可以在非严格条件下应用这些探针以识别可能的有用克隆(Kwiatkowski et al.，323 Nature 455，1986；Messing et al.，Proc.Nat.Acad.Sci.USA 74：3642，1977)。例如MBL的cDNA克隆已被用作人基因组文库的探针。例如可按照标准技术和克隆构建这些文库，那些在严格条件下杂交的文库可以被分离。
可按标准程序进行MBL肽片断的表达。例如编码DNA，优选cDNA，的MBL的所需区域可以从上述的克隆之一中分离，并可以插入到若干标准表达载体的任何一个中。优选的表达区域编码糖结合凝集素，所述糖结合凝集素可从海胆A.crassispina(Giga et al.，J.Biol.Chem.13：6197，1987)、鸡软骨核心蛋白多糖蛋白(Shigaku et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 83：5081，1986)和IgE Fc受体(Ikuta et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 84：819，1987)中分离得到。
这些表达的肽的抗体或MBL自身的抗体可按照标准技术制备。它们可以是单抗或多抗，可在动物血清或临床诊断试验中用以鉴别这些肽。
人们已经了解了一些糖结合蛋白(凝集素)。其中一类是C型凝集素。C型凝集素包含钙依赖型的糖识别域(C-type CRD)(Weis WI，Taylor ME andDrickamer K(1998)Immunological Reviews 163：19-34)。甘露聚糖结合凝集素(MBL)，与甘露糖结合凝集素、甘露聚糖结合蛋白或甘露糖结合蛋白同义，属于C型凝集素的亚类，称为胶原凝集素。这些可溶性蛋白是由含三个CRD的亚基组成，其中所述CRD结合在胶原茎上(Holmskov，U.，Malhotra，R.，Sim，R.B.and Jensenius，J.C.(1994)Immunol.Today 15：67-74)。MBL与广泛存在于微生物中的糖相互作用，积累的证据表明它在先天免疫防御中起着重要作用(Turner，M.W.(1996)Immunol.Today 17：532-540)。
当MBL与糖结合时可以激活补体系统。补体系统可以通过三种不同的途径激活：经典途径、旁路途径和甘露聚糖结合凝集素(MBL)途径，其中所述甘露聚糖结合凝集素(MBL)途径由MBL与存在于微生物中的糖结合作为起始。旁路途径和MBL途径的组分是先天免疫防御的一部分，先天免疫防御又被称作自然或非克隆的免疫防御，而经典途径包含与特异性免疫防御的抗体的协同作用(Janeway CA et al.(1999)Immunobiology，the immune systemin health and disease，Fourth Edition，Churchill Livingstone)。
MBL由肝脏中肝细胞合成并分泌到血液中。它与细菌、酵母、寄生性原虫和病毒中的糖结构结合，通过激活末期溶解补体成分或通过促进吞噬作用(调理作用)杀灭微生物显示抗菌活性。MBL的sertiform结构与Clq的花束样结构有些相似，其中C1q是经典途径中第一组分的免疫球蛋白结合亚单位(Turner，M.W.(1996)Immunol.Today 17：532-540)。Clq与两个丝氨酸蛋白酶Clr和Cls结合形成Cl复合体。同样地，MBL与丝氨酸蛋白酶MASP-l(Matsushita，M.and Fujita，T(1992).J.Exp.Med.176：1497-1502)、MASP-2(Thiel S，et al.，Nature，386(6624)：506-510)、MASP-3(DAHL MR，et al.，Immunity 2001；15(1)：127-35)以及其它称为MAP19的蛋白(StoverCM，et alJ Immunol 162：3481-3490)相结合。MASP-l、MASP-2和MASP-3具有与Clr和Cls相同的模块结构(Dahl MR et al.，Immunity.2001；15(1)：127-35)。MBL与糖的结合诱导MASP-1、MASP-2和MASP-3的激活。通过分裂补体因子C2和C4，激活的MASP-2产生C3蛋白转化酶C4bC2b(ThielS et al.(1997)Nature，386(6624)：506-510)。有报道显示MASP-1可直接激活C3(Matsushita M.et al.J.Exp.Med.1992；176(6)：1497-502)。对于MASP-3可能的底物尚不清楚。尚不清楚MBL/MASP复合物的化学计量学和激活序列。MBL也在其它动物中如啮齿动物、牛、鸡和猴子中被表征。
人MBL蛋白由18个相同的32kDa多肽链组成(Lu，J.et al.(1990)J.Immunol.144：2287-2294)，每条链包含21个氨基酸的短N末端片断，其中所述氨基酸含有3个半胱氨酸残基，所述N末端连接有7个重复的胶原基序Gly-X-Y和另外12个Gly-X-Y重复序列，在所述7个重复胶原基序Gly-X-Y和另外12个Gly-X-Y重复序列中插入有Gln残基。小的34残基的“颈区域”通过分子胶原部分连接于有93个氨基酸的C末端Ca2+依赖性凝集素区域(Sastry，K.et al.，(1989)J.Exp.Med.170：1175-1189)。
多肽链的胶原区结合于由三条多肽链组成的亚基上，所述多肽链通过二硫键共价相连，所述二硫键不但存在于各个亚基之间，而且存在于每个亚基的多肽链之间(Turner，M.W.(1996)Immunol.Today 17：532-540)。
然而，没有充分确定这些二硫键的位置。在非还原条件下对于MBL的SDS-PAGE分析显示，表观分子量(m.w.)大于200kDa的条带(bands)可能代表共价结合亚基的3×3、4×3、5×3甚至6×3复合物的嵌段(Lu，J.et al.(1990)J.Immunol.144：2287-2294)。
对于在自然人MBL蛋白中的确切亚基数还有争议。Lipscombe等通过超速离心得到的数据显示25％人血清中的MBL是由2-3个三聚体组成，只有一小部分达到6个三聚体的大小(Lipscombe，R.J.et al.(1995)Immunology85：660-667)。相对量是通过由于化学发光法而发展的蛋白质印迹法的密度测定法测定的。通过将从离子交换层析得到的片断经SDS-PAGE分析发现，共价连接于MBL亚基链上的主要种类是由四聚体组成，而只有五聚体或六聚体的复合体激活补体(Lu，J.，et al.(1990)J.Immunol.144：2287-2294.)。相反，由凝胶渗透色谱法(GPC)的分析表明MBL在大小上与Cl复合物相当。GPC可以在以下条件下进行，所述条件为允许在联合应用标准MBL分析技术时对于在MBL分子形成中蛋白质-蛋白质之间弱相互作用进行重要性研究，以及允许在GPC片断中准确测定MBL的含量。
人血清中的MBL浓度主要是由遗传决定的，但有报道说在急性反应期增加了三倍(Thiel S.et al.(1992)Clin Exp Immunol 90：31-35)。三种导致结构变化的突变和启动子区域的两种突变与MBL的缺乏相关(Madsen，H.O.et al.(1994)Immunogenetics 40：37-44)。MBL的缺乏伴有对各种感染的易感性。对患有罕见和严重感染的五个成人个体检查发现三个是MBL结构突变的纯合子，两个为杂合子(Summerfield JA，et al.(1995)Lancet 345：886-889)。对丹麦国家医院中229名非艾滋病性的免疫缺陷的儿童进行调查发现MBL结构等位基因上突变的纯合性机率是对照组的十倍(Garred P，et al.(1995)Lancet 346：941-943)。在伦敦圣玛丽医院连续就医的617名儿童中的异型显示，纯合和杂合突变异型在感染的儿童中发生率明显高于非感染儿童(Summerfield JA，(1997)BioMed J 314：1229-1232)。
MBL可以与很多寡糖结合。MBL通常不是自身决定识别的，而是适合与微生物细胞表面提供的重复糖决定簇进行相互作用。在体外，酵母(Candidaalbicans和Cryptococcus neoformans)、病毒(HIV-1、HIV-2、HSV-2和各种类型的流感病毒A)和一些细菌显示可以被MBL识别。在一些细菌中，荚膜的存在削弱了与MBL的结合(van Emmerik，LC，et al.(1994)Clin.Exp.Immunol.97：411-416)。然而，甚至被荚膜包被的细菌(Neisseria meningitidis)可以显示出很强的与MBL结合的能力(Jack DL，et al.(1998)B.J Immunol 160：1346-1353)。
使MBL缺陷个体感染的微生物可以是许多种类的细菌、病毒和真菌(Turner，M.W.(1996)Immunol.Today 17：532-540；Summerfield JA，et al.(1997)BioMed J 314：1229-1232)。MBL可能是对抗许多细菌的普遍防御分子，这也可能是为什么如此多细菌无致病性的原因。
在积累数据支持MBL具有保护作用的观点的同时，也有观察表明在MBL充足的个体中被某些微生物，特别是细胞内病原体的感染机率高于MBL缺乏的个体(Garred，P et al.(1994)Eur.J.Immunogen.21：125-131 andHoal-Van Helden EG et al.(1999)Pediatr Res 45：459-64；Hoal-Van Helden EGet al.(1999)Pediatr Res 45：459-64)。这与动物试验的结果一致，在之前注射人MBL的小鼠的肝中发现HSV-2的数量增加(Fischer，PB，et al.(1994)ScandJ Immunol 39：439-445)。
我们调查了低水平的MBL是否在非免疫妥协的重症患者中影响后果。拖延性的重症伴有实质性代谢紊乱和高死亡风险(Van den Berghe G et al.2000；143(1)：1-13)。在拖延性的重症患者中的死亡率超过20％(Van denBerghe G et al.，N Engl J Med，2001；345(19)：1359-67；Takala J et al.，N EnglJ Med1999；341(11)：785-92)，其中大多数死因可归于败血症和多器官衰竭。每年，仅在美国就有超过50万病人受到这种病况的影响(Wheeler AP et al.，N Engl J Med，1999；340(3)：207-14)。在重症期间对于严重感染增加的易感性以及在器官机能方面过度系统炎症反应的副作用可能是可控制的。
MBL输液以前已被建议用于在免疫妥协个体中MBL缺乏的治疗。免疫妥协是指其正常含义，如面对感染不能激发免疫反应的个体。MBL缺乏的经常被定义为随意水平的约50ng/ml。这一水平通常与各种MBL测试分析的灵敏度是相同的，因此该水平被设定为基本上无法测出MBL的水平。在病人经过化疗的情况下，建议500ng/ml的水平被定义为MBL缺乏。
本发明表明向收住于ICU的病人给予MBL可以降低在ICU延长阶段非免疫妥协性病人的死亡风险。疑似病人可能具有低于500ng/ml血清的MBL水平。已经获得临床级的MBL并在输液中显示是安全的(Garred，-Peter et al.，Pediatr-Pulmonol.2002 Mar；33(3)：201-7)。已经完成MBL重组体的制备，可以认为所述MBL重组体具有与天然MBL相似的结构和活性(专利申请PA1999 00668/C5/KH)。
发明概述
本发明的特点是将MBL用于治疗收住在ICU的个体，所述MBL可从天然来源或重组技术制备的物质或任何其它合适的生产MBL的细胞系中纯化。MBL可以在治疗开始前或治疗开始后给予，也可在认为合适的期间给予。
本发明的一个方面涉及治疗收住在ICU的病人、重症患者，或治疗具有延长的在ICU收住风险的患者，所述延长的在ICU收住风险是由于公知的与分配至ICU相关的操作/疗法(如大外科手术)。
因此，在ICU收住期出现的并发症有可能使疑似病人暴露于炎症条件和死亡的高风险中。根据本发明，可以预防性地在操作/疗法(如大外科手术)之前或之中治疗患者，所述的操作/疗法公知伴有延长在ICU收住的风险。通过预防性地在治疗之前或之中处理ICU并发症，可能减少出现于ICU收住期由败血症和感染性休克引起的死亡率，所述的治疗公知伴有延长收住在ICU的风险。
本发明的另一方面涉及应用组合物制备用于预防、改善或治愈由特别护理期间个人最初MBL血浆水平低于500ng/ml所带来病况的药剂，所述组合物包含至少一种甘露聚糖结合凝集素(MBL)多肽单体或至少一种寡聚体，其中所述寡聚体包含至少一种甘露聚糖结合凝集素(MBL)多肽单体。
本发明的另一方面在于提供通过检测个体血浆或血清中MBL的浓度，并在检测的浓度的基础上来预测收住于ICU个体发生致死后果的风险。
定义
术语“系统炎症反应综合症(SIRS)”在这里是指在休克中不受控制的疾病过程，所述过程引起起始损伤并产生由炎性介质的释放而继发的多系统紊乱。它可以指对于导致感染或非感染的炎症或外伤的应答，所述炎症或外伤需要符合下列中的两条：1)温度高于38摄氏度或低于36摄氏度，2)心率大于90，3)呼吸频率大于20或肺泡二氧化碳分压＜32托，4)WBC＞12000/mm3或＜40000，或＞10％带(bands)。
术语“败血症”在这里是指上述的“SIRS”，所述“SIRS”特别是由导致最初休克期的感染损伤引起的。
术语“菌血症”在这里是指通过血液培养而检测到的细菌在血流中的存在。
术语“感染性休克”在这里是指在无其它原因存在下伴有收缩压＜90mm或比基线值低40mm Hg的败血症。严重的败血症可以导致器官机能障碍。
术语“重症患者(CIP)”在这里是指由于疾病或外伤具有持续或有持续风险的急性威胁生命的单器官或多器官系统衰竭的病人，进行手术并伴有并发症的病人以及在前一周对重要器官进行手术后面临在前一周内进行大手术的病人。这些病况通常和优选需要延长并且不间断的(minute to minute)治疗和/或观察，通常和优选在作为医院一部分或类似的重症监护病房(ICU)，所述重症监护病房在质量和直接(immediacy)方面具有提供高水平加强治疗的能力。重症可以被解释为疾病或患者的状态，在所述疾病或状态下有可能发生死亡或逼进死亡，在该疾病或状态下病人在重症监护病房(ICU)中通过全部或部分的非肠道营养来维持，所述ICU是医院提供加强监护和医疗服务的机构或类似机构，所述ICU的特征在于高质量和高数量的持续监护。用比较严格的定义，术语“重症患者”在这里是指由于疾病或外伤具有持续或有持续风险的急性威胁生命的单器官或多器官系统衰竭的病人，或者进行手术并伴有并发症的病人。用更严格的定义，术语“重症患者”在这里是指由于疾病或外伤具有持续或有持续风险的急性威胁生命的单器官或多器官系统衰竭的病人。与此类似，该定义也可应用于相似表达如“重症的患者”以及“患者患重症”。重症患者的例子为需要心脏手术、脑手术、胸腔手术、腹部手术、血管手术或移植的患者，或者患有神经系统疾病、脑外伤、呼吸功能不全、腹部腹膜炎、复合创伤、严重烧伤或重症多发性神经病的病人。
说明性实施方案的描述
适应症
MBL输液以前已被建议用于在免疫妥协个体中MBL缺乏的治疗。免疫妥协是指其正常含义，如面对感染不具有激发免疫反应能力的个体。MBL缺乏的经常被定义为随意水平的约50ng/ml。这一水平通常与各种MBL测试分析的灵敏度是相同的，因此该水平被设定为基本上无法测出MBL的水平。在病人经过化疗的情况下，建议500ng/ml的水平被定义为MBL缺乏。
按照本发明，对ICU收住病人服用MBL可以降低在延长的ICU期间患败血症和感染性休克的死亡风险。疑似患者的MBL水平可能低于500ng/ml血清。
对于收住在ICU中个体的治疗也可以将MBL与相关的抗体、抗病毒剂或抗真菌剂联合向这些个体给药。
特别是由于外科或药物治疗而具有延长ICU收住时间风险的个体，可从应用MBL的预防性治疗中获益，以减少出现在ICU收住期间并发症(败血症、感染性休克或多器官障碍)的死亡率，其中所述应用MBL的预防性治疗为在治疗之前、之中、也可能之后应用MBL。
通常所有收住在ICU并伴有MBL水平低于500ng/ml的病人应当使用MBL治疗以减少出现在ICU收住期间并发症(败血症、感染性休克或多器官障碍)的死亡率，而不考虑各自的MBL水平。因此，特别是MBL水平低于400ng/ml的个体将获益，如MBL水平低于300ng/ml的个体，如MBL水平低于200ng/ml的个体如MBL水平低于100ng/ml的个体，如MBL水平低于50ng/ml的个体。
因此，本发明特别涉及应用MBL多肽或血液MBL增长因子来制造用于治疗血清中MBL浓度在0-500ng/ml范围个体的药剂。这种情况可能是由于在ICU中的治疗。然而，该情况也可能是由于公知与有延长在ICU收住期风险相关的手术或药物治疗。
无论是获得性的或者是遗传性的，MBL缺乏可以不必知道起源。MBL水平低于500ng/ml的个体通常将从应用MBL的治疗中获益，以防止ICU诱发的情况。
根据一种实施方案，本发明涉及应用MBL或血液MBL刺激因子制造挽救生命的药物以治疗或治愈重症患者。
根据另一种实施方案，本发明涉及应用MBL或血液MBL刺激因子制造药剂以治疗或治愈重症患者。
根据另一种实施方案，本发明涉及应用MBL或血液MBL刺激因子制造药剂以预防病人变成重症。
根据另一种实施方案，本发明涉及应用MBL或血液MBL刺激因子制造药剂以增加患重症患者的存活率。
根据另一种实施方案，本发明涉及应用MBL或血液MBL刺激因子制造药剂以减少重症患者住院如在ICU的时间。
根据另一种实施方案，本发明涉及应用MBL或血液MBL刺激因子制造药剂以预防治疗或治愈特别是在重症患者中的败血症和/或其介质。
根据另一种实施方案，本发明涉及应用MBL或血液MBL刺激因子制造药剂以减少死亡率、住院时间、菌血症、对辅助呼吸的需要和对透析需要。
根据本发明的另一种实施方案，重症患者是需要心脏手术的患者。
根据本发明的另一种实施方案，重症患者是需要脑手术的患者。
根据本发明的另一种实施方案，重症患者是需要胸部手术的患者。
根据本发明的另一种实施方案，重症患者是需要腹部手术的患者。
根据本发明的另一种实施方案，重症患者是需要血管手术的患者。
根据本发明的另一种实施方案，重症患者是需要移植的患者。
根据本发明的另一种实施方案，重症患者是患有神经疾病的患者。
根据本发明的另一种实施方案，重症患者是患有脑外伤的患者。
根据本发明的另一种实施方案，重症患者是患有呼吸功能不全的患者。
根据本发明的另一种实施方案，重症患者是患有腹部腹膜炎的患者。
根据本发明的另一种实施方案，重症患者是患有复合创伤的患者。
根据本发明的另一种实施方案，重症患者是患有严重烧伤的患者。
根据本发明的另一种实施方案，重症患者是患有重症神经病的患者。
根据本发明的另一种实施方案，重症患者是正在机械通气的患者。
此外，本发明涉及出售物质或所述物质组合物的方法，该方法通过给出其新用途、新活性和/或这里所述的新的适应症，其中所述物质或所述物质的组合物刺激在患者中循环的MBL水平。一种出售这种血液MBL调节剂的方法可以是，告诉某人如医生可以使用MBL或刺激肝细胞合成和/或释放MBL进而增加循环中MBL水平的因子，来治疗重症患者或减少由收住在ICU期间出现的并发症(败血症和感染性休克)带来的死亡率。作为选择的，出售血液MBL调节剂或MBL的方法可以是分发上述的广告和信息，其中媒体为小册子、用于制成顾客包裹的包装材料、任何随药物提供的印刷材料/传单，或病人信息、标签、网址、电影、广告电影、录像等。
另一种出售本权利要求所覆盖的血液MBL调节剂或MBL的方法是支持发言人介绍关于本发明血液葡萄糖调节剂的新用途、适应症和作用的信息，或是支持作家写关于本发明血液MBL调节剂或MBL的新用途、适应症和作用的文章。关于这点上的其它变化对于本领域技术人员而言是显而易见的，如按照上述进行分发和进行广告。
MBL
用于制备MBL药剂的MBL组合物可由任何可得到的来源的MBL制备。MBL来源可以是天然的MBL，其中MBL多肽在天然宿主生物体中制备，也就是说MBL是由正常表达MBL的细胞产生。制备MBL组合物的常规方法是从人体液如血清或血浆中提取MBL。
另一方面，MBL多肽寡聚体是由非天然表达MBL多肽如通过重组技术表达MBL多肽的宿主生物体产生的，。
在第一种实施方案中，MBL的来源可以是血清，通过合适的纯化方法如使用糖衍生物基质的亲和层析纯化血清、血浆、奶制品、初乳等得到MBL组合物，其中所述的糖衍生物基质如甘露糖或甘露聚糖基质。该方法已在WO99/64453中公开，在此引用作为参考。
用于制备MBL药剂的MBL组合物优选包含具有与血清中MBL大小分布相同大小分布的MBL寡聚体，例如大小分布特征至少80％与血清中MBL大小分布的相同，更优选大小分布特征至少90％与血清中MBL大小分布的相同，进一步优选大小分布特征至少95％与血清中MBL大小分布的相同。
基质可以由任何与MBL结合的糖或糖混合物衍生得到。优选的基质为甘露糖、岩藻糖、N-乙酰基-氨基葡萄糖或葡萄糖衍生的基质，例如最优选甘露糖基质。
通过确定如非衍生化基质的这些基质基本上不具有对MBL多肽的亲和性，得到糖衍生化基质的选择性。当这些基质是不含糖时，可以保证得到。
基质可以是任何适合层析的形式，主要是小珠(bead)的形式，如塑料珠。
在应用MBL来源后柱子被洗脱，优选通过使用非变性缓冲液，所述缓冲液具有组成、pH和离子强度使得在不洗脱MBL的条件下消除或减少污染蛋白的量。例如缓冲液可以是加有钙离子的TBS(10mM Tris，145mM NaCl，pH 7.4)。MBL的洗脱可以使用能够有效洗脱MBL的选择性解吸附剂，如加有EDTA的TBS，然后收集MBL寡聚体。该纯化方法已在国际专利申请(WO0070043和WO9937676)中公开。
在优选方面中，可通过使用由重组技术制备的MBL来源得到临床级的MBL组合物，所述MBL来源是培养产生MBL细胞的培养介质。
因此，本发明包含由制备人重组甘露聚糖结合凝集素(MBL)的方法生产的MBL，该方法包含以下步骤：
-制备基因表达构建体(construct)，其包含编码人MBL多肽或与其功能相同的DNA序列，
-将构建体转化至宿主细胞中培养，
-培养宿主细胞，从而在培养基中得到多肽的表达和分泌，然后
-得到包含人重组MBL多肽的培养基。
包含人重组MBL多肽的培养基然后可按上述的方法纯化。
基因表达构建体可按本领域技术人员常规的方法制备，如在美国专利号5270199中所公开的方法。
在另一实施方案中，基因此表达构建体可按照公开于丹麦专利申请No：PA 1999 00668或国际专利申请(WO0070043)中标题为“重组人甘露聚糖结合凝集素”中所述的进行制备。
表达优选在如哺乳动物细胞中进行，根据本发明的制备是使用了包含MBL基因内含子序列和至少一个外含子序列的表达载体。关于转基因动物作为表达体系在本文中是指经遗传修饰以含有和表达人MBL基因或片断或其类似物的动物。
除了纯化方法以外，优选基因表达构建体和宿主细胞也偏爱生产寡聚体，已发现通过使用基因表达构建体这已成为可能，所述基因表达构建体包含至少一个来自人MBL基因的内含子序列或与其功能上相同的序列。
MBL组合物特别是用于治疗和/或预防收住在重症监护病房(ICU)中病人所发生的败血症、感染性休克或多器官衰竭。这些病人可能有术后重症、创伤后重症，或是在ICU中需要使用呼吸机的病人。
本发明的目的是在重症患者挽救生命的治疗中应用MBL组合物。
本发明的另一个目的是应用MBL组合物以减少收住在ICU的重症患者的住院时间。
本发明的另一个目的是应用MBL组合物以抑制败血症、感染性休克或多器官衰竭的状态。
本发明的另一个目的是应用MBL组合物以减少多器官衰竭的风险或可能性，所述多器官衰竭在重症患者的尸检中证明有脓毒性。
本发明的另一个目的是应用MBL组合物以减少重症患者的死亡率，如医院死亡率。
本发明的另一个目的是应用MBL组合物以减少在重症患者中器官替代疗法和/或器官衰竭(如肾)的可能性。
本发明的另一个目的是应用MBL组合物以减少在重症患者中高胆红素血症(hyperbillirubinemia)的可能性。
本发明的另一个目的是应用MBL组合物以减少在重症患者中血液感染的可能性。
本发明的另一个目的是应用MBL组合物以减少在重症患者中以炎症和/或炎症反应为指标的紊乱的可能性
本发明的另一个目的是应用MBL组合物以减少在重症患者中抗生素的使用。
本发明的另一个目的是应用MBL组合物以减少重症患者患有重复阳性EMG的可能性。
本发明的另一个目的是应用MBL组合物以减少在重症患者中红细胞输液量。
本发明的另一个目的是应用MBL组合物以减少在重症患者中对侵入性治疗的需要。
组合物
包含MBL的药剂可以用从亲和层析得到的洗脱液制得。然而，洗脱液在使用之前优选进行进一步的纯化。
除了MBL多肽寡聚体，药剂中可包含可药用载体物质和/或赋形剂。特别是需要加入稳定剂以稳定MBL蛋白。稳定剂可以是糖醇、糖类、蛋白质和/或氨基酸。稳定剂的例子可以白蛋白。
例如根据服用形式也可以向药剂中加入其它的常规添加剂。在一种实施方案中药剂是适于注射的形式。可以使用常规的载体物质如等渗盐水。
在另一种实施方案中，药剂是适于肺部给药的形式，如以粉末吸入的形式或用于局部给药的乳剂或流体形式。
给药途径可以是任何合适的途径，如静脉途径、肌内途径、皮下途径或皮内途径。本发明也可以考虑肺部或局部给药。
特别是可给予MBL组合物以预防和/或治疗病人的“ICU并发症”，所述病人伴有先天性或获得性的MBL缺乏症或具有发展成这些症状风险的临床症状。
MBL组合物也可以与其它治疗同时、相继或分开给药。
MBL组合物可以以合适的剂量给药，特别是在ICU收住期间，至少在ICU收住的部分时间，优选整个ICU期，按照每周维持一次、二次或三次给药。
正常给药为每剂量1-100mg，例如2-10ng，最常见为每剂量5-10mg。对于其它适应症剂量范围可变化。
MBL组合物可以用于试剂盒的一部分，该试剂盒进一步包含抗真菌、抗酵母、抗细菌和/或抗病毒药剂。抗病毒药物可以是能够弱化和/或消除病毒的药物。
本发明还涉及将测量MBL的水平作为个体具有患ICU并发症风险的预后指标并因此显示需要治疗的方面。特别是MBL水平低于500ng/ml是指示需要MBL治疗的预后指标。
因此，本发明还涉及使用MBL多肽组合物来预防和/或减少个体“ICU并发症”的方法，该方法包含如下步骤：
i)检测个体血清中MBL多肽水平，
ii)估计个体发生ICU并发症的可能性，任选的向个体给予MBL多肽组合物。
测量血清或血浆中的MBL水平，可采用时间分辨免疫荧光检验法(TRIFMA)、ELISA、RIA或散射测浊法进行检测。
MBL的水平也可以通过分析MBL基因的基因型推导出。
现已解释和说明本发明的各个方面，但此外它可用下面的图1和2以及表1说明，但不限于优选实施方案的实施例。
图例
图1：
对接受延长(大于5天)特别护理病人的甘露聚糖结合凝集素(MBL)浓度进行的连续测量。横条表示中间值，框表示IQR，须状体(whiskers)表示10th、和90th百分点。P值是指对数个相关试样的Friedman检验。
图2：
从病人接受延长特别护理的第一天起(Δ％)MBL浓度的相对变化。
实施例
以下实施例表示收住在重症监护病房中个体MBL缺乏时对于后果影响的实验结果。
研究人群
本研究包含了对收住在比利时Leuven的Leuven大学重症特别护理部门的243名需要机械通气的病人进行的检查。本研究中的所有病人接受超过5天的重症特别护理。
盲法调查者将血流感染定义为在中央体温(central body temperature)迅速高于38.5℃时，在血液培养物中依照严格标准(Weinstein MP et al.，Clin.InfectDis，1997；24(4)：584-602.)存在的排除污染后的细菌病原体。在任何系统抗生素治疗中记录了抗生素使用的总天数。并且分析出现白血球减少症(≤4000个细胞/μl)或白细胞增多症(≥12000个细胞/μl)的天数和发生低体温(≤36℃)或高体温(≥38℃)的天数。记录了需要肾移植治疗的急性肾衰竭的发病率。进行每周EMG监测以诊断危急的多发性神经病。所有死亡病人的死因由主治医师进行临床确定并且由不知道治疗任务的病理学者通过尸检确认。
MBL的测量
在收住于ICU(基线)24小时内，以及随后的重症特别护理的第5天、第15天和/或最后一天(如出院或死亡当天)收集血样，以测定血清MBL的水平。
可采用时间分辨免疫荧光分析法(TRIFMA)(Thiel S et al.，Immunology，2002；204)来测量血清MBL浓度。培育稀释的测试样品和标准品之后，用甘露聚糖封闭微量滴定孔(fluoroNunc，Nunc，Denmark)。
清洗后，加入铕标记的抗MBL单克隆抗体(131-1，Immunolex，丹麦，用来自芬兰Wallac Oy的试剂用铕标记)，在培育和清洗后，加入荧光增强溶液(Wallac)，用时间分辨荧光测定法读取平板(Delfia 1232，Wallac)。用稀释的血浆作标准曲线，所述血浆在-80℃以分装试样保存。血浆中的MBL浓度(3.6μg/ml)是通过与高度纯化的MBL对比而测得的，所述高度纯化的MBL通过大量的氨基酸分析而量化。
用于分析MBL的代替的TRIFMA方法是通过使溶于100pf的PBS(0.14M NaCl，10mM磷酸盐，pH 7.4)中的500ng抗人源MBL抗体(Mab 131-1，Statens Serum Institut，Copenhagen，Denmark)于室温培育过夜，应用抗体封闭微量滴定孔。用含吐温的缓冲液(TBS，0.14M NaCl，10mM Tris/HCl，7.5mM NaN3，pH 7.4与0.05％Tween 20)清洗后，可向额外含0.5M NaCl和10mM EDTA的TBS/吐温中加入测试样品(血定1/20)和定标物稀释液。
在40℃培育过夜和清洗后，可向含25pM EDTA的TBS/吐温中加入得到的铕标记抗体(根据生产商芬兰Wallac，Turku，用含铕螯合物标记12.5ngMab 131-1，异硫氰基-苄基-二乙烯基-三胺-四乙酸)。
培育2小时和清洗后，加入荧光增强溶液(Wallac)，用时间分辨荧光测定法(Delfia 1232，Wal-lac)读取平板。采用稀释的血浆作标准曲线，该血浆在-80℃以分装试样保存。
将为TRIFMA法收集的血样加入到含EDTA(终浓度约为10mM)的空试管中。直到进行测定，血浆在-80℃以分装试样保存。血浆样品可类似地从健康血液捐献者获得。病人在采血时没有感染。
统计分析
通过Friedman检验分析在ICU收住期间MBL浓度的变化。应用带有双侧概率值的Spearman相关性估计变量间的相关性强度。用多元变量对数回归分析评估了MBL基线水平对于后果变量(死亡、急性肾衰竭、菌血症、需要延长的抗生素治疗、多发性神经病)的影响。此外，应用多元变量对数回归分析评估了是否MBL随时间的变化可以解释临床后果变量。除了其它特定的，以平均数和四分位数间范围给出数据，并且将统计显著性设定为P＜0.05。应用Statview 5.0.1.for Macintosh进行所有的统计计算(SAS InstituteInc.，North Carolina，USA)。
结果
临床病人特征和后果
本研究中的243名病人在重症特别护理期间49名死亡。死因为多器官衰竭，其伴有或不伴有证实的败血症、急性心脏血管破裂和严重脑损伤。
25％的病人患有菌血症。病人接受平均为12天(IQR 6-21)的抗生素治疗，白细胞减少症或白细胞增多症平均存在6天(IQR 2-13)，并且低体温或高体温平均为10天(IQR 5-16)。
血清中MBL的浓度
在ICU收住期间，平均血清MBL浓度为820μg/ml[IQR 241-1518]，其与文献记载的健康丹麦和英国个体具有可比性。病人的基线MBL水平低于500ng/ml和低于50ng/ml的分别占40％和8.9％。
对经过治疗的病人进行分析，非存活者的MBL浓度明显比存活者的低(分别为387[IQR 190-1289]μg/ml和897[IQR 246-1686]μg/ml，P＝0.04，表1)。MBL浓度低于500ng/ml病人占非存活者的比例为54％，占存活者的比例为36％(P＝0.02)。MBL浓度低于250ng/ml病人占非存活者的比例为34％，占存活者的比例为25％(P＝0.02)，MBL浓度低于50ng/ml病人占非存活者的比例为14％，占存活者的比例为7％。
随着重症特别护理时间的增加，MBL的浓度明显增加(P＜0.0001，图1)。该增加独立于基线MBL浓度，并主要归因于存活者。在第15天，与未发展成为菌血症的病人相比，发展成为菌血症的病人在MBL水平上显示出相对低的增加(P≤0.02)。
讨论
长期重症伴有实质上的代谢和免疫紊乱以及高死亡风险(Van den BergheG.et al.2000；143(1)：1-13；Van den Berghe G，et al.，N Engl J Med 2001；345(19)：1359-67；Takala J et al.，N Engl J Med，1999；341(11)：785-92))。我们观察到在重症特别护理的病人中收住时低浓度的MBL可能预示不好的后果。
超过三分之二收住在重症监护病房的病人由感染或组织损伤发展为系统炎症反应综合症(SIRS)的症状(Brun-Buisson C.Intensive Care Med 2000；26：S64-S74)，并且大量此类病人发展为休克或多器官衰竭。
一些出版物已报道了低水平MBL与增加的感染风险之间可能的联系，特别是在免疫妥协患者中，例如带有未成熟抗体所有组成成分的儿童(Koch，-A et al.，JAMA.2001 Mar 14；285(10)：1316-21)，在爱滋病患者中(Kelly，-P et al.，Gastroenterology，2000Nov；119(5)：1236-42.Gastroenterology)，或在接受化疗或干细胞移植的恶性肿瘤患者中(Neth，-O；et al.，Lancet.2001 Aug 25；358(9282)：614-8；Peterslund，-N-A；Koch，-C；Jensenius，-J-C；Thiel，-S Lancet.2001 Aug 25；358(9282)：637-8；Mullighan，-Charles-G et al.，Blood，2002 May 15；99(10)：3524-9.)。
在本发明中，对于243名以前不是免疫妥协的ICU治疗患者的现有分析显示，存活者位院时的MBL水平比非存活者的高几乎3倍，并支持在免疫活性重症患者中伴随低MBL水平的易损性。低水平的MBL与ICU治疗病人的后果之间的关联并不局限于严重的MBL缺乏，但正如Peterslund等(Lancet.2001 Aug 25；358(9282)：637-8)所建议的甚至当使用小于500ng/ml的浓度作为功能性MBL缺乏的截止水平时所述关联也是明显的，。
总之低水平的MBL可能预示拖延性重症的不良后果。
| 在ICU中死亡 | ICU幸存者 | P | ||
| 全部患者 | n＝49 | n＝194 | ||
| MBL浓度(μg/l，中间值[IQR]) | 第1天 | 387(190-1287) | 897(246-1686) | 0.045 |
| 第5天 | 460(158-2140) | 1321(346-2706) | 0.012 | |
| 第15天 | 1855(181-2594) | 1934(322-3574) | 0.376 | |
| 最后一天 | 990(240-2408) | 1960(569-3848) | 0.002 |
表1：在进行延长特别护理治疗患者中对于MBL浓度的一系列测量。
权利要求书
(按照条约第19条的修改)
1.甘露聚糖结合凝集素(MBL)在制备治疗或治愈重症患者的挽救生命药剂中的用途。
2.甘露聚糖结合凝集素(MBL)在制备治疗或治愈有死亡风险重症患者的挽救生命药剂中的用途。
3.如权利要求1所述的MBL在制备为增加重症监护病房(ICU)中存活率的药剂中的用途。
4.如权利要求1所述的MBL在制备为减少重症患者在医院如重症监护病房的收住时间的药剂中的用途。
5.如权利要求1所述的MBL的用途，其中“病况”是指术后重症。
6.如权利要求1所述的MBL的用途，其中“病况”是指创伤后重症。
7.如权利要求1至6中任一项所述的用途，其中MBL多肽单体是哺乳动物MBL多肽单体。
8.如权利要求1至6所述的用途，其中哺乳动物MBL多肽单体是人MBL多肽单体。
9.如权利要求1至6所述的用途，其中所述寡聚体优选选自包含三聚体、四聚体、五聚体和/或六聚体的寡聚体类。
10.如权利要求1至6所述的用途，其中MBL包含至少一种甘露聚糖结合凝集素(MBL)多肽单体，或至少一种甘露聚糖结合凝集素(MBL)多肽寡聚体，所述寡聚体包含至少一种甘露聚糖结合凝集素(MBL)多肽单体。
11.如权利要求1至6所述的用途，其中MBL包含至少一种甘露聚糖结合凝集素(MBL)多肽寡聚体，所述寡聚体包含至少一种甘露聚糖结合凝集素(MBL)多肽单体。
12.如权利要求1至11所述的用途，其中使用药剂后保持重症患者的血液MBL水平在250ng/ml以上。
13.如权利要求1至11所述的用途，其中使用药剂后保持重症患者的血液MBL水平在500ng/ml以上。
14.如权利要求1至11所述的用途，其中使用药剂后保持重症患者的血液MBL水平在1000ng/ml以上。
15.如权利要求1至11所述的用途，其中使用药剂后保持重症患者的血液MBL水平在1000ng/ml至2000ng/ml之间。
16.如权利要求1至15所述的用途，其中药剂在进行ICU中的另一项治疗之前向个体给药。
17.如权利要求1至15所述的用途，其中药剂与其它治疗同时、相继或分开向个体给药。
18.如权利要求1至15所述的用途，其中药剂在所述其它治疗之前、之中和之后向个体给药。
19.如权利要求1至18中任一项所述的用途，其中药剂是重症患者MBL多肽血清水平的激发剂，所述患者具有低于预定最低MBL多肽血清水平的MBL多肽血清水平。
20.如权利要求1至19中任一项所述的用途，其中药剂是在个体的特别护理治疗期间用于预防致命后果。
21.应用MBL多肽组合物来预防重症患者死亡的方法，该方法包含以下步骤：
i)检测个体中MBL多肽的血清水平，
ii)估计个体发生特别护理并发症的可能性，任选地
iii)向个体给予MBL多肽组合物。
Claims (51)
1.血液甘露聚糖结合凝集素(MBL)调节剂在制备治疗重症患者的药剂中的用途。
2.如权利要求1所述的血液MBL调节剂在制备预防性治疗重症患者的药剂中的用途。
3.如权利要求1所述的血液MBL调节剂在制备改善或治愈重症患者的药剂中的用途。
4.如权利要求1所述的血液MBL调节剂在制备预防性治疗或治愈重症患者的挽救生命药物中的用途。
5.如权利要求1所述的血液MBL调节剂在制备增加重症患者存活率的药剂中的用途。
6.如权利要求1所述的血液MBL调节剂在制备减少重症患者住院时间，如在重症监护病房时间的药剂中的用途。
7.如权利要求1所述的血液MBL调节剂在制备治疗或治愈重症患者系统性炎症反应综合症(SIRS)的药剂中的用途。
8.如权利要求1所述的血液MBL调节剂在制备预防、治疗或治愈重症患者药剂中的用途，其特征在于重症患者是预先非免疫妥协的。
9.如权利要求1所述的血液MBL调节剂在制备减少重症患者死亡率、住院时间、透析需要和辅助呼吸需要的药剂中的用途。
10.如权利要求1至9中任一项所述的血液MBL调节剂在制备预防性或治疗性治疗患者的药剂中的用途，所述患者收住在ICU中具有低于500ng/ml的MBL血清水平。
11.如权利要求1至10中的任一项，其中血液MBL调节剂是刺激肝细胞合成和/或释放MBL的生物活性物质类的化合物。
11.如权利要求1至10中的任一项，其中血液MBL调节剂是刺激肝细胞合成和/或释放MBL的生物活性物质类的化合物。
12.如权利要求1至10中的任一项，其中血液MBL调节剂是生长激素或其生物活性衍生物。
13.如权利要求1至10中的任一项，其中血液MBL调节剂是甘露聚糖结合凝集素(MBL)多肽。
14.如权利要求1至10中的任一项，其中血液MBL调节剂为组合物，所述组合物包含至少一种甘露聚糖结合凝集素(MBL)多肽单体，或至少一种甘露聚糖结合凝集素(MBL)多肽寡聚体，其中所述寡聚体包含至少一种甘露聚糖结合凝集素(MBL)多肽单体。
15.如权利要求1至10中的任一项，其中组合物包含至少一种甘露聚糖结合凝集素(MBL)多肽寡聚体，其中所述寡聚体包含至少一种甘露聚糖结合凝集素(MBL)多肽单体。
16.如权利要求14至15中的任一项，其中所述寡聚体优选选自寡聚体类，所述寡聚体类包括三聚体、四聚体、五聚体和/或六聚体。
17.如权利要求1至16中任一项所述的用途，其中药剂是为了防止个体在重症特别护理期间的致命后果。
18.如权利要求1至16中任一项所述的用途，其中“病况”是指多器官衰竭。
19.如权利要求1至16中任一项所述的用途，其中“病况”是指术后重症。
20.如权利要求1至16中任一项所述的用途，其中“病况”是指创伤后重症。
21.如权利要求1至16中任一项所述的用途，其中病人是需要心脏手术、脑手术、胸部手术、腹部手术、血管手术或移植的病人，或是患有神经疾病、脑外伤、呼吸功能不全、腹部腹膜炎、复合创伤、严重烧伤的病人。
22.如权利要求1至16中的任一项在试剂盒中的用途，所述试剂盒进一步包含抗菌药、抗病毒药或抗真菌药。
23.如权利要求13至16所述的用途，其中MBL多肽单体或MBL多肽寡聚体是由天然宿主生物体制备的。
24.如权利要求23所述的用途，其中天然宿主生物体是天然表达MBL多肽单体或MBL多肽寡聚体的人细胞。
25.如权利要求13至16所述的用途，其中MBL多肽单体或MBL多肽寡聚体是由非天然表达MBL多肽的宿主生物体制备的。
26.如权利要求13至16所述的用途，其中MBL多肽单体或MBL多肽寡聚体是由包含至少一个体外重组DNA技术步骤的方法制备的。
27.如权利要求24、25和26中任一项所述的用途，其中MBL多肽单体或MBL多肽寡聚体的制备是由表达控制序列所控制的，所述表达控制序列与MBL多肽表达不天然相关。
28.如权利要求24至27中任一项所述的用途，其中MBL多肽单体或MBL多肽寡聚体是从宿主生物体分离的。
29.如权利要求24至27中任一项所述的用途，其中MBL多肽单体或MBL多肽寡聚体是由包含至少一个涉及亲和层析步骤的方法分离的。
30.如权利要求29所述的用途，其中亲和层析步骤能够从组合物中分离MBL多肽的三聚体、四聚体、五聚体和/或六聚体，所述组合物进一步包含其它的MBL多肽寡聚体和/或MBL多肽单体。
31.如权利要求24至30中任一项所述的用途，其中MBL多肽单体和/或MBL多肽寡聚体不含任何杂质，所述杂质通常与在天然宿主生物体中制备MBL多肽有关。
32.如权利要求13至21中任一项所述的用途，其中MBL多肽单体是哺乳动物MBL多肽单体。
33.如权利要求32所述的用途，其中哺乳动物MBL多肽单体是人MBL单体。
34.如权利要求13至21中任一项所述的用途，其中MBL多肽寡聚体包含根据权利要求30至32中任一项所述的MBL多肽单体。
35.如权利要求1至34所述的用途，其中药剂在进行ICU中的另一项治疗之前向个体给药。
36.如权利要求1至34所述的用途，其中药剂与其它治疗同时、相继或分开向个体给药。
37.如权利要求1至34所述的用途，其中药剂在所述其它治疗之前、之中和之后向个体给药。
38.如前述任一项权利要求所述的用途，其中治疗是预防性治疗。
39.如权利要求13至38中任一项所述的用途，其中药剂是个体MBL多肽血清水平的激发剂，所述个体具有低于预定最低MBL多肽血清水平的MBL多肽血清水平。
40.如权利要求1至39中任一项所述的用途，其中个体的MBL多肽血清水平低于500ng/ml。
41.如权利要求1至39中任一项所述的用途，其中个体的MBL多肽血清水平低于400ng/ml。
42.如权利要求1至39中任一项所述的用途，其中个体的MBL多肽血清水平低于300ng/ml。
43.如权利要求1至39中任一项所述的用途，其中个体的MBL多肽血清水平低于200ng/ml。
44.如权利要求1至39中任一项所述的用途，其中个体的MBL多肽血清水平低于100ng/ml。
45.如权利要求1至39中任一项所述的用途，其中个体的MBL多肽血清水平低于50ng/ml。
46.如前述任一项权利要求所述的用途，其中个体中MBL多肽血清或血浆水平是通过定量分析测定的。
47.如权利要求41至48中所述的用途，其中分析包含ELISA、TRIFMA、RIA或散射测浊法中的至少一种。
48.应用MBL多肽组合物来预防和/或减少个体中炎症和/或死亡的方法，该方法包含以下步骤：
i)检测个体中MBL多肽的血清水平，
ii)估计个体发生特别护理并发症的可能性，任选地
iii)向个体给予MBL多肽组合物。
49.广告媒体和材料以及信息媒体和材料，其具有或给出有关血液MBL水平调节剂的适应症和用途的信息，所述血液MBL水平调节剂优选如权利要求1至48中任一项所公开的MBL本身或任何其它所述调节剂或其组合物。
50.通过给出关于适应症和用途的信息出售血液MBL水平调节剂的方法，所述血液MBL水平调节剂优选如权利要求1至50中任一项所公开的MBL本身或任何其它所述调节剂或其组合物。
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