CN1695456A - 知母提取物作为杀菌剂的应用及含有之的杀菌剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及知母提取物作为杀菌剂的应用及含有之的杀菌剂。所述的知母提取物主要含有至少一种下列知母提取化合物：芒果甙、异芒果甙、知母皂甙、菝葜皂甙元和知母总多糖。知母提取物及含有之的农用杀菌剂对多种农作物病害有很好的防治效果，并且对环境友好，具有残留低、防效高、杀菌谱广等特点。

Description

知母提取物作为杀菌剂的应用 及含有之的杀菌剂

【技术领域】

本发明涉及知母提取物作为农用杀菌剂的应用，以及涉及含有知母提取物作为活性成分的农用杀菌剂。

【背景技术】

农作物由于病虫害造成作物产量损失巨大，为此每年均需要施用大量的农药进行病虫害防治以挽回作物产量损失。近年来病虫害对农作物上的危害越来越重，而且由于农药滥用，是作物病原对农药产生了越来越严重的抗性，造成病虫害防治效果逐年降低，同时由于施药量过大，对环境造成一定程度的污染。因此，仍就需要具有更好的病原控制效果的农药品种。

将能够有效控制植物病原生长的植物提取物应用于农业病害防治，或者将之与其他杀菌化合物混配，从而最大限度降低农药残留，提供更安全有效的农用化学产品，一直是研究人员所追求的，但现有的杀菌剂在杀菌活性和残留等方面都并不能令人满意。

知母(Anemarrhena asphodeloides Bunge)是百合科知母属植物，为多年生草本植物，主产于河北。根茎横走，略呈扁圆形，上面残存黄褐色叶基纤维，下侧生有多数须根。叶基生，线型，质稍硬，长20～70cm，宽3～6mm。花茎高40～60cm，散生鳞片状小苞片，上部渐小；总状花序长20～40cm，花2～6朵呈簇，散生在花序轴上，每簇花具1苞片；花被片6，黄色或紫堇色，有3～5条脉；雄蕊3，与内轮花被片对生；子房上位，3室。蒴果长卵圆形，具六纵棱。种子黑色，三棱形，两端尖。花期5～6月，果期8～9月。知母喜温和湿润气候，适应性强，耐寒，以肥沃疏松排水良好的壤土种植为好。

知母根茎是一种传统中药，主治外感高热、肺热燥咳、阴虚骨蒸潮热、遗精盗汗、阴虚消渴等。其煎剂对伤寒杆菌、副伤寒杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、霍乱杆菌和葡萄球菌等病原细菌具有抑制作用。对堇色毛癣菌等10种皮癣真菌有不同程度的抑制作用。现有文献公开了知母的提取和中医药用途，例如CN1370537公开了中药知母中甾体总皂苷的医药新用途及其制备方法、CN1451384公开了知母总皂苷用于制备防治脑卒中药物的用途、CN1434053公开了知母提取物及其制备方法和用途，上述文献公开的均为知母提取物在医药方面的应用，而知母对于植物病原真菌、细菌的抑制作用及对植物病原病毒的抗病毒作用的研究还未见报道。

本发明人从大量的植物中筛选可以用于农业病害防治的一系列提取化合物，发现知母提取物具有良好的农业病害防治效果，并通过大量的药效试验加以证实。结果证实，本发明杀菌剂对许多农作物病害具有很好的防治作用，并且对环境友好，具有残留低、防效高、杀菌谱广等特点，于是完成了本发明。

【发明内容】

所解决的技术问题

本发明的目的是提供知母提取物作为农用杀菌剂的应用。

本发明的另一目的是提供一种含有知母提取化合物作为活性成分的农用杀菌剂，它具有宽广的杀菌谱和优异的增效防治效果。

本发明的再一目的是提供所述杀菌剂防治农作物病害的应用。

技术方案

本发明提供知母提取物作为农用杀菌剂防治农作物病害的应用。

在本发明中，知母提取物是一种或多种选自芒果甙、异芒果甙、知母皂甙、菝葜皂甙元或知母总多糖的化合物。上述知母提取化合物的具体结构可参见例如《中国药材学》(徐国钧主编，中国医药科技出版社，1996年，第614-618页)。优选的是例如芒果甙。知母提取物可以是上述提取化合物的混合物，也可是其单体。通常它们可以从市场上购得，例如芒果甙单体、异芒果甙单体、知母皂甙单体、菝葜皂甙元单体或知母总多糖单体都可从DELTA(甙尔塔)天然有机化合物信息中心购得。

此外，知母提取物也可以采用本领域技术人员公知的提取方法从知母中直接提取。例如将干燥的知母根茎、叶片和种子粉碎、过筛；用水或乙醇在回流条件下提取；然后用真空浓缩的方法，将知母提取物浓缩至与原知母粉碎物等重，得到知母提取物。

知母提取物可用于防治多种农作物病害，例如可以防治由下列病原引起的农作物病害：马铃薯晚疫病菌、番茄晚疫病菌、番茄叶霉病菌、棉花黄萎病菌、小麦根腐病菌、小麦赤霉病菌、玉米大斑病菌、苹果轮纹病菌、番茄灰霉病菌、黄瓜白粉病菌和黄瓜霜霉病菌。优选防治由下列病原引起的农作物病害：马铃薯晚疫病菌、番茄晚疫病菌、番茄灰霉病菌、番茄叶霉病菌、棉花黄萎病菌、小麦根腐病菌、小麦赤霉病菌和苹果轮纹病菌。

本发明还提供一种增效的农用杀菌剂，它含有知母提取物作为活性成分，所述的知母提取物的含量为0.01-90重量％，优选的是0.1-60重量％，更优选的是1-30重量％。

在本发明的组合物中，知母提取物主要含有一种或多种选自芒果甙、异芒果甙、知母皂甙、菝葜皂甙元、知母总多糖的化合物。优选的是例如芒果甙、知母总多糖。知母提取物可以是上述提取化合物的混合物，也可是其单体。

知母提取物和含有知母提取物本发明农用杀菌剂可以转换成常规制剂，如乳油、可湿性粉剂、粒剂、可溶性粉剂、水分散粒剂、油悬浮剂、水悬浮剂、水乳剂、微乳剂、乳剂、粉剂、粗粉剂、泡腾剂、膏剂和水面漂浮剂剂型。优选采用乳油、可湿性粉剂、油悬浮剂或水悬浮剂。

其中，乳油各组分重量百分比优选为：

      知母提取物            0.1-60％

      乳化剂                1-30％

分散剂          0.1-20％

溶剂            1-60％

可湿性粉剂各组分重量百分比优选为：

知母提取物      0.1-40％

润湿剂          1-10％

分散剂          1-5％

填料            10-90％

油悬浮剂各组分重量百分比优选为：

知母提取物      0.1-40％

表面活性剂      1-80％

溶剂            1-30％

乳化剂          1-30％

水悬浮剂各组分重量百分比优选为：

知母提取物      0.1-40％

溶剂            1-50％

水              30-50％

分散剂          1-10％

这些制剂可以用已知的方式制备，例如通过将活性化合物与溶剂和/或载体混合，如果需要，可以采用乳化剂和分散剂来填充，当用水作稀释剂时，也可以同时采用其它的有机溶剂作助溶剂。

其中，溶剂可以是芳族化合物(例如二甲苯)、氯代芳族化合物(例如氯苯)、石蜡(例如石油馏份)、醇类(例如甲醇、丁醇)、酮类(例如环己酮)、胺类(例如乙醇胺、二甲基甲酰胺)和水；载体可以是研碎的天然矿物质(例如高岭土、矾土、滑石、白垩)和研碎的合成矿物质(例如高分散的硅酸、硅酸盐)；乳化剂可以是非离子和阴离子乳化剂(例如聚氧乙烯脂肪醇醚、烷基磺酸盐和芳基磺酸盐)；分散剂可以是木素亚硫酸盐废液或甲基纤维素。

适合的表面活性剂可以是芳族磺酸(例如木素磺酸、苯酚磺酸、萘磺酸和二丁基萘磺酸)和脂肪酸的碱金属、碱土金属和铵盐，烷基磺酸盐和烷基芳基磺酸盐，烷基硫酸盐、月桂基醚硫酸和脂肪醇硫酸盐，以及硫酸化的十六-、十七-和十八醇以及脂肪醇醚的盐，磺化萘和其衍生物与甲醛的的缩合产物，萘或萘磺酸与苯酚和甲醛的缩合产物，聚氧乙烯辛基酚醚、乙氧基烷化的异辛基-、辛基-或壬基酚，烷基苯酚或三丁基苯基聚乙二醇醚，烷基芳基聚醚醇，异三癸基醇、脂肪醇环氧乙烷缩合物，乙氧基化蓖麻油，聚氧乙烯-或聚氧丙烯烷基醚，月桂醇聚乙二醇醚乙酸酯、失水山梨醇酯，木素亚硫酸盐废液或甲基纤维素。

可以采用混合或研磨方法将活性物质与固体载体混合在一起，生产出粉剂、撒施粉剂、泡腾剂、固态水面漂浮剂。

可以通过将活性化合物粘合到固体载体上，制备出颗粒剂(例如涂敷、浸渍或均质颗粒剂)。

其中，固体载体可以是矿石土如硅胶、硅酸、硅酸盐、滑石、高岭土、石灰石、石灰、白垩、红玄武土、黄土、陶土、白云石、硅藻土、硫酸钙和硫酸镁、氧化镁；研碎的合成材料、化肥，如硫酸铵、磷酸铵、硝酸铵、尿素和植物产物如面粉、树皮粉、木粉和坚果壳粉、纤维素粉和其它固体载体。在直接可用制剂中的活性化合物浓度可以在相对宽的范围内变化。

上述的各种施用形式主要取决于特定的使用方式与使用条件；在任何情况下，都须保证它们的尽可能分散，的分散颗粒细微和均匀。

含水的施用形式可以通过加水，例如由乳油、分散液、膏剂、可湿性粉剂、泡腾剂或水可分散颗粒剂制备。制备乳剂、膏剂、油分散液或液态水面漂浮剂时，通过加入润湿剂、粘合剂、分散剂或乳化剂，将物质于水中均质化或溶于油或溶剂中。而且，也可以制备由活性物质、润湿剂、粘合剂、分散剂或乳化剂和可能的溶剂或油组成的浓缩物，该浓缩物适合于用水稀释。

通常，该农用杀菌剂可以含有按重量计0.01至90％的知母提取物活性成分，且通常根据制剂类型的不同，优选含有按重量计0.1至60％的知母提取物活性成分。

本发明组合物施用剂量，根据不同的作物、施用时间、气候条件等因素的不同，一般为50-5000g a.i./ha，优选为400-2000g a.i./ha。一般采用叶面施用，例如叶面喷雾处理。也可以做其他处理如拌种、灌根等，在这种情况下，可以根据需要调整施用剂量。例如在土壤处理防治时，施用剂量介于1000-2500g a.i./ha的范围内。

本发明杀菌组合物可用于防治多种农作物病害，例如马铃薯晚疫病、番茄晚疫病、番茄灰霉病、番茄叶霉病、棉花黄萎病、小麦根腐病、小麦赤霉病和苹果轮纹病。特别是对于马铃薯晚疫病的防治作用尤为显著。

有益效果

本发明杀菌剂较已有技术相比有如下优点：

1、无毒、无残留，对非靶标生物安全。本发明产品为无公害农药。

2、杀菌谱广，对马铃薯晚疫病、番茄晚疫病、番茄叶霉病、棉花黄萎病、小麦根腐病、小麦赤霉病、玉米大斑病、苹果轮纹病、番茄灰霉病、黄瓜白粉病和黄瓜霜霉病具有较好的防治效果，防效均达到50％以上。

3、对环境安全。知母杀菌剂中的活性物质来源于自然，在长期的进化中已经形成了其固有的参与能量与物质循环代谢途径，施用到植物或环境中，不会引起残留或生物富集。

4、本发明产品对病原菌的作用机制与常规农药不同，不易引起病原菌的抗药性，也可以延缓病原菌对常规农药的抗药性。

【附图说明】

图1为知母提取物对马铃薯晚疫病菌菌丝生长的抑制作用图。

图2为知母提取物对马铃薯晚疫病菌游动孢子萌发的抑制作用图。

【具体实施例】

本发明用下列实施例进行说明，但不限制本发明。

下述实施例中使用的芒果甙单体、异芒果甙单体、知母皂甙单体、菝葜皂甙元单体和知母总多糖单体均从DELTA(甙尔塔)天然有机化合物信息中心购得。

制剂实施例

制剂实施例1：2％乳油

原料                        用量(重量份)

芒果甙                           2

脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠           10

氮酮                             5

氯仿                             83

称取芒果甙溶解于溶剂氯仿中，然后再加入脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(德州埃法化学有限公司生产)和氮酮(湖北南星化工总厂生产)，搅拌均匀，即制得所述的2％乳油。

制剂实施例2：30％乳油

原料                         用量(重量份)

芒果甙                           15

异芒果甙                         15

农乳2201                         10

YZ-901                           15

二甲苯                           45

称取芒果甙和异芒果甙溶解于二甲苯中，然后再加入农乳2201(德仕化工有限公司生产)和YZ-901(广东农友精细化工厂生产)，搅拌均匀，即制得所述的30％乳油。

制剂实施例3：60％乳油

原料                        用量(重量份)

芒果甙                          20

异芒果甙                        10

知母皂甙                        10

菝葜皂甙                        10

知母总多糖                      10

农乳2201                        10

渗透剂T                         5

甲醇                            25

称取芒果甙、异芒果甙、知母皂甙、菝葜皂甙元和知母总多糖溶解于甲醇中，然后再加入农乳2201(德仕化工有限公司生产)和渗透剂T(安阳市双环助剂有限责任公司生产)，搅拌均匀，即制得所述的60％乳油。

制剂实施例4：10％可湿性粉剂

原料                       用量(重量份)

知母皂甙                        3

菝葜皂甙元                      7

白炭黑                          5

十二烷基苯磺酸钠                5

轻质碳酸钙                      80

先将轻质碳酸钙预粉碎，然后将之与上述知母皂甙、菝葜皂甙元、白炭黑(上海伊盟化工有限公司生产)和十二烷基苯磺酸钠(上海盛众化工公司生产)充分混合，再采用气流粉碎法加工，即制得所述得10％可湿性粉剂。

制剂实施例5：20％油悬浮剂

原料                    用量(重量份)

芒果甙                      10

知母皂甙                    5

知母总多糖                  5

邻苯二甲酸二甲脂            20

脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠      10

矿物油                      50

称取芒果甙、知母皂甙和知母总多糖，加入矿物油和邻苯二甲酸二甲脂(石家庄白龙化工股份有限公司生产)及脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(德州埃法化学有限公司生产)，经过球磨、砂磨处理，即制得所述的20％油悬乳剂。

制剂实施例6：40％水悬浮剂

原料                  用量(重量份)

异芒果甙                    30

知母总多糖                  10

乙二醇                      10

脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠      10

水                          40

称取异芒果甙和知母总多糖，加入水和乙二醇及脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(德州埃法化学有限公司生产)，经过球磨、砂磨处理，即制得所述的40％水悬乳剂。

生物实施例

生物实施例1：知母提取物对马铃薯晚疫病菌的抑制活性测定试验

本实验在离体条件下测试了知母提取物对马铃薯晚疫病菌的抑制活性，实验方法和和实验结果如下：

1、供试菌种：马铃薯晚疫病菌(Phytophthora infestans)。

2、试验方法：将上述知母提取物采用生长速率法和游动孢子萌发法测试对马铃薯晚疫病菌的抑制活性。

菌丝生长抑制率＝(空白对照菌落直径-处理菌落直径)/空白对照菌落直径×100％

游动孢子萌发抑制率＝(对照游动孢子萌发率-处理游动孢子萌发率)/对照游动孢子萌发率×100％

3、试验结果

知母提取物对马铃薯晚疫病菌菌丝生长的抑制作用见附图1，得到知母提取物对马铃薯晚疫病菌菌丝生长的抑制方程y＝2.4981x-3.1944根据此方程计算得到知母提取物对马铃薯晚疫病菌菌丝生长的抑制中浓度(EC50)为1.9g/L。

知母提取物对马铃薯晚疫病菌游动孢子萌发的抑制作用见附图2，根据提取物对游动孢子萌发的抑制曲线方程y＝1.9533x-0.9039，得到抑制中浓度EC50值为1.05g/L。

试验结果表明，知母提取物对马铃薯晚疫病菌菌丝生长和马铃薯晚疫病菌游动孢子萌发均有良好的抑制作用。

生物实施例2：本发明杀菌剂对马铃薯晚疫病的大田防治试验

采用农药田间试验准则(农业部药检所生测室主编，中国标准出版社出版，2000)中所规定的方法，对知母杀菌剂乳油、油悬浮剂和水悬浮剂的田间药效进行了测试，稀释浓度为600倍和800倍，测试结果见表1

表1知母杀菌剂对马铃薯晚疫病的田间防效

剂型	防效％
			600倍	800倍
	乳油	90.5			78.2

油悬浮剂	89.3	68.6
			水悬浮剂	87.5	66.1

乳油：含活性成分60％

油悬浮剂：含活性成分20％

水悬浮剂：含活性成分40％

由表1的田间试验结果表明，知母杀菌剂不同剂型对马铃薯晚疫病菌表现出比较好的防治效果，其中稀释600倍的处理，防效均达到85％以上。

生物实施例3：知母提取物对多种不同植物病原真菌菌丝生长的抑制作用试验

试验方法：采用本领域公知公用的实验方法“生长速率法”测试了知母提取物对番茄灰霉病菌，番茄叶霉病菌、棉花黄萎病菌、小麦根腐病菌、小麦赤霉病菌和苹果轮纹病菌的室内抑菌作用。具体方法是：将提取物用熔化的PDA培养基稀释为50×、100×、200×、400×和800×共5个浓度，把带药培养基倒入9.0cm平皿中，待培养基冷却凝固后，把病原菌菌盘(直径0.6cm)置于平皿中央，在适宜的温度(20-25℃)下培养5-8天，测量菌落直径，计算抑制率并绘制LD-P线。

      表2知母提取物对多种不同植物病原真菌菌丝生长的抑制作用试验

供试菌种	LD-P线	EC50值	决定系数
				(Y＝)	(g/L)	R2
	番茄灰霉病菌	1.5746x-0.7164	4.2696				0.9872
番茄叶霉病菌				1.7141x-1.9935	12.0222	0.9908
	棉花黄萎病菌	1.5281x-0.7173	5.5137				0.9681
小麦根腐病菌				1.2291x+0.1735	8.4500	0.9922
	小麦赤霉病菌	1.6543x-1.3283	6.6890				0.9865
苹果轮纹病菌				1.6045x-1.224	7.5699	0.9947

试验结果表明，知母提取物对多种不同植物病原真菌菌丝生长均有良好的抑制作用。

生物实施例4：

与国际上广泛使用的用于有机农业的杀菌剂Kocide WP进行了田间对比试验，试验方法同生物实施例2，试验结果如下：

   表3知母杀菌剂对马铃薯晚疫病的田间防效

	知母杀菌剂防效％		KocideWP
				剂型	600倍	800倍	1000倍
乳油	90.5	78.2	92.0％
				油悬浮剂	89.3	68.6	85.0％
水悬浮剂	87.5	66.1	90.9％

乳油：含活性成分60％

油悬浮剂：含活性成分20％

水悬浮剂：含活性成分40％

试验结果表明：本发明杀菌剂与现有杀菌剂相比具有较好的防效。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基本上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (9)

1.知母提取物作为农用杀菌剂防治农作物病害的应用。

2.根据权利要求1的应用，其中，所述的知母提取物主要含有至少一种下列知母提取化合物：芒果甙、异芒果甙、知母皂甙、菝葜皂甙元、知母总多糖。

3.根据权利要求1或2的应用，其中，所述的农作物病害的病原为下列：马铃薯晚疫病菌、番茄晚疫病菌、番茄叶霉病菌、棉花黄萎病菌、小麦根腐病菌、小麦赤霉病菌、玉米大斑病菌、苹果轮纹病菌、番茄灰霉病菌、黄瓜白粉病菌和黄瓜霜霉病菌。

4.根据权利要求3的应用，其中，所述的农作物病害的病原为下列：马铃薯晚疫病菌、番茄晚疫病菌、番茄灰霉病菌、番茄叶霉病菌、棉花黄萎病菌、小麦根腐病菌、小麦赤霉病菌和苹果轮纹病菌。

5.一种农用杀菌剂，其特征在于它含有知母提取物作为活性成分。

6.根据权利要求5所述的杀菌剂，其中，知母提取物主要含有至少一种下列知母提取化合物：芒果甙、异芒果甙、知母皂甙、菝葜皂甙元、知母总多糖。

7.根据权利要求6所述的杀菌剂，其中，知母提取物的含量为0.01-90％。

8.根据权利要求7所述的杀菌剂，其特征在于它的剂型为乳油、可湿性粉剂、油悬浮剂或水悬浮剂。

9.根据权利要求5-8之任一所述的杀菌剂防治马铃薯晚疫病、番茄晚疫病、番茄灰霉病、番茄叶霉病、棉花黄萎病、小麦根腐病、小麦赤霉病和苹果轮纹病的应用。

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