CN1688347A - 对棘阿米巴具有提高的抗菌功效的组合物 - Google Patents

Abstract

诸如滴眼液和接触镜处理液的眼用组合物，包括聚阳离子物质以提高对原生动物如棘阿米巴的抗菌功效。一类优选的聚阳离子物质是阳离子纤维素衍生物。

Description

对棘阿米巴具有提高的抗菌功效的组合物

技术领域

本发明涉及通过聚阳离子材料来增强抗原生质如棘阿米巴(Acanthamoeba)的抗菌效果的方法和/或组合物，尤其是诸如滴眼液和接触镜处理液的眼用组合物。优选的一类聚阳离子材料是阳离子纤维素衍生物。本发明进一步涉及具有较低的抗菌剂浓度、仍具有足够的防腐和/或消毒功效的眼用组合物，该组合物能够降低由眼用组合物中较高浓度的防腐剂所带来的刺激度。

背景技术

眼组织与细菌如大肠杆菌的接触可以导致各种眼部感染，如由细菌引起的角膜炎。在被细菌污染的眼用溶液直接滴入眼睛时可以导致眼组织与细菌的接触。直接滴入眼睛这样的眼用溶液的例子是滴眼液(例如，为了治疗干眼病)或者接触镜的滴液(例如，为了在佩戴的时侯湿润接触镜)。另外，通过往眼里放被细菌污染的接触镜，眼组织可以与细菌接触。当细菌粘附在接触镜上的时侯，由于细菌可以与眼组织在很长时间内保持接触，眼部感染的危险被增加了。

因为这个原因，眼用组合物，例如滴眼液和接触镜处理液，通常都包含作为防腐剂的抗菌剂，例如，万一溶液被细菌和其它传染性生物体污染，防腐剂抑制此类生物体的生长。对于接触镜处理液，用来给该溶液防腐的抗菌剂也可以在该溶液冲洗或浸泡接触镜的时侯给接触镜消毒。或者，眼用组合物可以不含有防腐剂，但是在这种情况下，组合物被特殊的容器包裹以防止污染容器内的成分，一个例子是单剂包装，其中每一剂量的溶液都被单独包装。

大家知道，多种抗菌剂在眼用组合物中被用作防腐剂。这样的抗菌剂应该具有广普的抗生物活性并且对眼睛没有刺激性。然而，很多抗菌剂具有刺激眼组织的倾向，尤其是在较高浓度的时候。因此，使用尽可能低浓度的抗菌剂来避免眼睛刺激的危险通常是有利的。

通常，棘阿米巴生物体是到处存在的无拘无束的原生动物，它们存在于两种截然不同的形态：滋养体和孢囊。滋养体是自由游动形态(free swimming form)，相对来说容易杀死。该生物体在不利的环境中形成孢囊，产生厚的保护层使其很难被杀死。孢囊形态是生物体的冬眠形态。在良好的环境中该生物体恢复到滋养体。棘阿米巴出现在土壤、空气、游泳池、热浴盆、自来水和接触镜护理产品中。易受诸如棘阿米巴的机会致病菌病原体影响的人包括慢性病的、免疫力受到损害的、怀孕的、糖尿病的、或遭受肝病或酒精中毒的人。免疫力受到损害的人包括得了淋巴瘤、白血病或AIDS的病人，以及那些接受免疫抑制药物治疗，如器官移植的病人。棘阿米巴感染包括粒状阿米巴脑炎和皮肤损伤。

棘阿米巴角膜炎在1974年被首次报道，直到其与佩戴接触镜相关联前一直都保持为稀少的感染病。由棘阿米巴引起的角膜炎是佩戴接触镜的最严重的并发症。由无拘无束的阿米巴棘阿米巴(amoebaAcanthamoeba)引起的棘阿米巴角膜炎可能导致严重的眼睛感染，表现为以频繁的治疗失败为标志的痛苦的长期的临床过程。感染的症状，包括显著的疼痛和在疾病的高级阶段所发生的近中心环形基质渗透的畏光。

棘阿米巴使用细菌和真菌作为食物源。由细菌和真菌引起的接触镜护理体系的联合污染使棘阿米巴在接触镜护理体系中容易生长，从而暗示了联合污染是引起棘阿米巴角膜炎的危险因素。在免疫活性个体中，棘阿米巴引起了威胁视力的被称为棘阿米巴角膜炎的角膜感染。很多棘阿米巴角膜炎患者都佩戴接触镜。目前的治疗包括使用羟乙磺酸双溴丙脒和新霉素、或克霉唑。

在美国，在软性接触镜的佩戴者中，溃疡性角膜炎的发病率已经发现是接触镜佩戴方式的作用。已经发现每年在每天佩戴的病人中有万分之4.1的人受到感染，而每年在长期佩戴的病人中有万分之20.9的人受到感染。因此，在美国大约2千万的接触镜佩戴者中，每年有超过12,000的人受到感染(所有的致病原因)。在接触镜佩戴者中，不考虑镜片的类型，对棘阿米巴角膜炎进行了报道。

由于棘阿米巴在环境中分布广泛，在接触镜贮存盒中也会发现这样的生物体。在经过一小段暴露时间后，棘阿米巴孢囊和滋养体可以粘附在各种类型的接触镜及其相应的贮存盒上。棘阿米巴角膜炎可以从各种源感染，这些源可以包括：污染的自来水、自制盐水、和化学消毒溶液，和轻微的角膜损伤。目前接触镜消毒液抵御棘阿米巴的相对功效的是非常有限的，这就产生了棘阿米巴角膜炎的真正的威胁。

体外试验已经确定了大量的化合物可以对治疗棘阿米巴角膜炎有用，这些化合物包括羟乙磺酸丙氧苯脒、氨基苷新霉素和巴龙霉素、和咪唑衍生米科诺吡咯、克霉唑、酮康唑、和伊曲康唑。Larkin等在Ophthalmology 1992；99：185-191曾经报道过，己基酯双胍对对抗棘阿米巴非常有效。

因此，开发能够有效对抗棘阿米巴的接触镜溶液具有非常关键的重要性。

本发明也涉及抑制微生物感染的组合物。微生物包括寄生虫，例如卡氏棘阿米巴，柯氏棘阿米巴，A.hatchetti，A.polyphagia，A.rhysodes，痢疾内变形虫，贾第鞭毛虫，利什曼原虫，以及克氏锥虫和细菌，如细菌铜绿假单胞菌。

Rupp等的美国专利第5,382,599号中，公开了多种多价阳离子螯合剂，例如EDTA，在抑制原生动物的生长方面是本质有效的，所述原生动物包括诸如棘阿米巴的阿米巴。抑制原生动物生长的有效量的螯合剂被直接加入到眼镜护理产品如接触镜护理液中。

Heiler的美国专利第6,323,165号公开了用来阻止在亲水性接触镜上沉积蛋白质的组合物和方法。上述的组合物包含聚季氨盐聚合物，这些聚合物有选择地结合到镜片上并阻止此类沉积。

Hu等的美国专利第6,274,133号公开了用来处理佩戴在眼睛中的硅氧烷水凝胶接触镜的组合物。该眼用溶液包括结合到镜片上的阳离子纤维素聚合物，该聚合物防止油脂、蛋白质和其它物质堆积到镜片上，尤其是在长期佩戴的期间。

Ellis等的美国专利第4,168,112公号开了尤其适合于刚性气体可透过(RGP)镜片的接触镜溶液，该溶液中含有阳离子聚合物，这些聚合物在接触镜表面涂覆或形成亲水性聚电解质络合物。Ellis教导了一种通过一开始就尽力防止蛋白质粘附到接触镜表面以解决蛋白质沉积物的问题的方法。这样的络合物表现为被认为是提高可湿性、亲水特性和/或镜片的舒适性，同时降低了粘蛋白粘附到镜片表面的倾向的水凝胶“垫子”。

Smith等的美国专利第4,443,429号公开了一种商业上被称为Merquat^TM100(即具有约10,000至约1,000,000的分子量)的二甲基二烯丙基氯化铵均聚物的接触镜消毒溶液。在此所叙述的消毒溶液的浓度优选为约0.0004重量％至约0.02重量％(4ppm至200ppm)。

WO02/34308公开了通过将阳离子多糖结合到医学设置如接触镜的表面来抑制细菌粘附到该装置的表面上。

此外，尽管对阿米巴角膜炎有很多的关注，目前，还没有ISO标准规则或指导方针来规定对市场上的眼用溶液提出明确的功效(％log缩减量(reduction))。

因而，为了减少棘阿米巴角膜炎和其它由于原生动物的出现而引起的眼科病变的发病率，仍然需要另外的方法和/或组合物，如眼用溶液，来抑制原生动物的生长，例如在诸如接触镜、接触镜溶液和接触镜盒的眼部护理产品里面或上面的原生动物，例如棘阿米巴。

需要提供一种安全的、方便和经济使用的并对眼组织没有刺激的具有增强的抗菌防腐功效的眼用组合物。本发明目的在于克服在该技术中遇到的问题。

发明内容

本发明进一步涉及包括眼用溶液的方法和/或组合物，该眼用溶液以滴的形式存在，并且可以包括在眼睛里表现出很长的持续时间的阳离子纤维素聚合物。

本发明涉及包含用来增强对诸如棘阿米巴的原生动物的抗菌功效的聚阳离子的方法和/或组合物。本发明进一步涉及在很宽的pH范围(能达到7)内具有较低浓度的抗菌剂的新配方，其可以减少组合物如滴眼液或其它滴入眼睛内的溶液中较高浓度抗菌剂所引起的刺激程度。

优选地，本发明涉及包括含有用来增强对棘阿米巴的抗菌效果的阳离子纤维素材料的眼用溶液的方法和/或组合物。

本发明还涉及一种杀阿米巴的接触镜溶液，其包括在水溶液中的聚阳离子材料。

具体实施方式

依照本发明所用的，术语“眼用组合物”表示为了应用于眼睛所设计的组合物，或为处理与眼睛接触放置的医学装置如接触镜而设计的组合物。眼用组合物具体地包括用于直接滴入眼睛的组合物，包括诸如用来润湿干燥眼睛的滴眼液和为了诸如在佩戴时再润湿接触镜而直接滴入眼睛内的接触镜处理溶液。眼用组合物还包括间接注入眼睛里的组合物，例如在接触镜放入眼内之前用来对其浸渍的接触镜处理液。

术语“防腐剂”或相似的术语表示眼用组合物中包含的用于抑制产品中微生物生长从而有助于使该组合物保持无菌状态的试剂。术语“抗菌剂”表示提供抗菌功效的特定的活化剂。术语“消毒剂”或类似的术语表示具有能够在四个小时内将负载于接触镜上的微生物的量降低两对数级，更优选在一个小时内降低一对数级的效果的试剂。最优选，消毒量是当在推荐的湿透时间(FDA化学消毒功效试验(Chemical Disinfection Efficacy Test)-July，1985接触镜溶液指导方针草案(Contact Lens Solution Draft Guidelines))使用时，能够除去在接触镜上的微生物负载的量。

在接触镜处理溶液的情况下，本发明的方法和/或组合物可应用于常规的接触镜范畴：(1)由丙烯酸酯类聚合形成的硬性镜片，如聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)形成的，(2)由硅氧烷丙烯酸酯和氟硅氧烷甲基丙烯酸酯形成的刚性可透气性(RGP)镜片，(3)软性水凝胶镜片，和(4)非水凝胶弹性体镜片。

例如，软性水凝胶接触镜由水凝胶聚合材料制成，水凝胶被定义为在平衡状态下含有水的交联聚合物体系。通常，水凝胶表现出很好的生物相容性，即在生物组织内是生物或生化相容的，而不产生有毒的、有害的或免疫学反应。代表性的常规水凝胶接触镜材料是通过聚合包括至少一种亲水性单体的单体混合物而制成的，亲水性单体例如为(甲基)丙烯酸、甲基丙烯酸2-羟乙酯(HEMA)、甲基丙烯酸甘油酯、N，N-二甲基丙烯酰胺和N-乙烯基吡咯烷酮(NVP)。在硅氧烷水凝胶的情况下，除亲水性单体外，制备共聚物的单体进一步包括含硅氧烷的单体。通常，单体混合物将包括交联单体，即具有至少2个可聚合基团的单体，例如乙二醇二甲基丙烯酸酯，四甘醇二甲基丙烯酸酯，和甲基丙烯酰氧乙基乙烯基碳酸酯。作为替换，含有硅氧烷的单体或亲水性单体可以起到交联剂的作用。

本发明进一步涉及包括眼用溶液的方法和/或组合物，该眼用溶液以滴的形式存在，并且可以包括在眼睛里表现出很长的持续时间的阳离子纤维素聚合物。

本发明还可以用作含有此类物质的接触镜清洁、消毒或调节组合物的成分。因此，下面对适合并且适宜使用的、并且由本发明的具体应用所需要的特性所决定的物质成分的实例进行了描述。

在原生动物细胞中，尤其在棘阿米巴细胞中，多价阳离子如钙、镁、铁、锰和锌用作新陈代谢所必需的酶的协同因子。这些多价阳离子也通过影响环境张力来影响滋养体的功能和结构。在文献中已经记载了钙和镁对棘阿米巴的孢囊形成是非常必要的。参见Neff等的“在棘阿米巴中同步形成孢囊的诱导(区别)”(″Induction ofSynchronousEncystment(Differentiation)in Acanthamoeba″)，细胞生物学方法(Methods in Cell Physiology)，vol.1，ch.4，pp.55-83(D.M.Prescott，ed.，学术出版社，纽约1977)。钙盐也被显示能够影响棘阿米巴阿米巴样运动和吸附。

从而，申请人发现使用含有多价阳离子螯合基团的聚合物有效地抑制了原生动物细胞功能，尤其是需要此类阳离子的细胞生长。在这里所用的“多价阳离子螯合聚合物”是包括至少一部分能够与具有至少2价的正电荷形成配价键的聚合物。这样的阳离子包括，例如Ca²⁺，Mg²⁺，Fe²⁺，Fe³⁺，Mn²⁺，Zn²⁺，Cu²⁺和Ni²⁺。包含两种或多种这样的基团的组合的聚合物也被包括在该术语的范围内。

在本发明中所使用的，多价阳离子螯合聚合物“有效抑制”原生动物的生长，如果将含有已知的初始数量的原生动物的溶液暴露于该聚合物至少7天的时间，就会导致原生动物的数量恒定或被减少。抑制原生动物的生长，尤其包括防止原生动物的脱囊。

本发明对抑制原生动物的生长是有效的，这些原生动物包括，但不局限于，棘阿米巴，例如，A.polyphaga，卡氏棘阿米巴，A.lenticulata，A.hatchetti，A.astronyxis，柯氏棘阿米巴和A.Rhysodes。本发明对抑制其它的原生动物如耐格虫属阿米巴(amoebae of the genusNaegleria)的生长也是有效的。

除原生动物外的很多其它的眼病原体的生长需要一种或多种前述的多价阳离子。参见，例如，Griffin，D.，真菌生理学(John Wiley&Sons，Inc.1981)，p.138(真菌的主要矿物质营养)；Gottschalk，G.，细菌代谢(Springer-Verlag纽约，Inc.1979，1986)pp.1-3(细菌营养必需的矿物质)。因此，该发明的组合物物质能够抑制有害的细菌和真菌以及原生动物的生长。通过本发明，可以抑制其生长的示例性的眼病原体包括绿铜假单胞菌(P.aerugitzosa)，白色念珠菌(C.albicans)和粘质沙雷氏菌(S.marcescens)。

该组合物包括聚阳离子材料。术语“聚阳离子”材料表示在同一个分子中具有多重阳离子部分如季氨基的材料。很多聚阳离子材料自身对很广谱型的微生物并没有足以充分地保护眼用组合物足够抗生物活性，但是令人惊讶的是，已经发现当和常规的主抗菌剂一起使用的时侯，聚阳离子材料可以增强对大肠杆菌的防腐效果。说明性的聚阳离子材料包括阳离子多糖、阳离子蛋白质、阳离子聚核苷酸、阳离子糖蛋白、阳离子葡糖胺聚糖、和紫罗烯聚合物，它们在同一个分子中具有多重阳离子分子。应该明白聚阳离子材料与主抗菌剂是截然不同的，并且是相互排除的。换句话说，一些主抗菌剂包括多重阳离子基；如果一种组合物包括这样的主抗菌剂，那么它将包括一种附加的，单独的聚阳离子材料来增强防腐效果。

通常，适合用于本发明的聚季铵盐聚合物是公知的聚合物种类，这些聚合物中的很多改变是市场上可以得到的。该聚季铵盐聚合物，优选包括眼科学上适宜的阴离子有机或无机平衡离子。优选的平衡离子可以包括，但不限于氟离子、氯离子、溴离子等等。

例如，基于本发明的教导，被命名为Polyquaternium-2至Polyquaternium-44(CTFA国际化妆品成分词典)的聚季铵盐包括大量可以应用于本发明的物质。对本领域的技术人员来说，制备这样的物质的聚合的技术同样是公知的，对这些技术的很多修改与商业上的操作是相似的。

通常，适合用于本发明的聚季铵盐聚合物具有大约5,000-5,000,000的平均分子量，优选约10,000-500,000，最优选约20,000-200,000。一种优选的聚阳离子物质是阳离子多糖，尤其是阳离子纤维素的衍生物。具体的例子包括含有N，N-二甲基氨基乙基(被质子化或季氨化的)的纤维素聚合物和含有N，N-二甲基氨基-2-羟基丙基(被质子化或季氨化的)的纤维素聚合物。阳离子纤维素聚合物可以市场上买到或者可以通过本领域中已知的方法制备。作为一个例子，含季氮的乙氧基化糖苷可以通过羟乙基纤维素和三甲铵取代的环氧化物反应制得。

各种优选的阳离子纤维素聚合物是可以从市场上买到的，例如可以使用CTFA(化妆品，化装用品和香精协会)命名的Polyquaterium-10水溶性聚合物。这样的聚合物可以以商标UCAREPolymer从美国的N.J.，Edison，Amerchol公司买到。这些聚合物在纤维素聚合物链上含有季氨化的N，N-二甲基氨基基团。合适的阳离子纤维素物质具有下面的分子式：

其中R₁、R₂和R₃选自于H、C₁-C₂₀羧酸的衍生物、C₁-C₂₀烷基、C₁至C₃一羟基和二羟基烷醇、羟乙基、羟丙基、环氧乙烷基团、环氧丙烷基团、苯基、″Z″基团和它们的结合。R₁、R₂和R3中至少一个是Z基。

所述“Z”基团是：

其中：R′，R″和R可以是H，CH₃，C₂H₅，CH₂CH₂OH和CH₂CH(OH)CH₂OH

x＝0-5，y＝0-4，和z＝0-5

X＝Cl^-，Br^-，I^-，HSO₄ ^-，CHSO₄ ^-，H₂PO₄ ^-，NO₃ ^-

下面概述了各种可以从市场上买到的UCAREPolyquaterium-10的级别：

	JR-125	JR-400	JR-30M
				布氏粘度，25℃，厘泊，2.0重量％(1.7-2.2)水溶液氮百分	110-120cps	400-440cps	12,000-13,000cps

在滴眼液里，阳离子多糖提供了作为有效润湿干燥眼睛的活性剂的附加优点。不想受到理论的束缚，聚合物在粘附到眼睛的粘膜组织后，反过来，通过补充粘液素和/或通过帮助在眼睛表面上粘附和保持粘液素来促进眼睛里的粘液素。粘液素是用基于葡萄糖胺部分高度糖基化的蛋白质。粘液素被显示为是由囊分泌的并且被泻在眼睛结膜上皮的表面上。参见，例如，Greiner等的“接触镜佩戴者的结膜上皮细胞中的粘液分泌囊”(″Mucus Secretory Vesicles in ConjunctivalEpithelial Cells of Wearers of Contact Lenses，″)眼科学公文(Archivesof Ophthalmology)，第98卷，第1843-1846页(1980)。粘液素提供了润滑作用另外又吸引和保存湿气以及润滑用的脂肪质物质。

如所提及的，除阳离子多糖外其它的聚阳离子物质可以被用于本发明中。这些例子包括：聚季铵盐-28，基于乙烯基吡咯烷酮和二甲基氨基丙基丙烯酰胺单体(从美国新泽西的GAF Chemicals，Wayne，以商标Gafquat HS-100可以购得)的聚季铵盐；海美溴铵，一种N，N，N′，N′-四甲基己二胺和亚丙基二溴的聚合物；羟丙基瓜尔胶氯化三铵，瓜尔胶的季铵衍生物〔可以从美国马萨诸塞州Westborough的Carbomer公司购得〕；乙烯基己内酰胺/PVP/二甲基氨基乙基甲基丙烯酸酯的共聚物(例如那些可以以商标Gaffix VC-713从美国新泽西的Wayne，GAF Chemicals购得的)。

其它的例子是含有季胺官能化重复单元的聚合物，其中季胺官能化重复单元被定义为每个包含一个季胺基团的重复单元，其中，带正电的氮原子与四个基团(没有氢原子)共价键合，并且与一个带负电的平衡离子如氯键合。

本发明中所用的术语“适度带电的聚季铵盐聚合物”，可以指示聚合物包括不多于约45摩尔％的纯季胺官能化重复单元，其中纯季胺官能化重复单元的摩尔百分数是聚合物中季胺官能化(带正电)重复单元减去阴离子(带负电)重复单元的摩尔百分数。

合适的季胺官能化重复单元还包括在那些由缩聚反应形成的聚合紫罗烯及其相似物中所发现的单元，在这样的重复单元中，季胺的氮是构成聚合物的主链所必需的，并且位于亚烷基、氧亚烷基或其它链段之间。

季胺官能化重复单元也可以通过诸如使用如1，4-二氯-2-丁烯强烷基化剂，以一种反应产物或两种或更多的化合物而被获得，例如，该强烷基化剂可以与1，4-双[二甲氨基]-2-丁烯和三乙醇胺反应来制备聚合的聚季铵盐化合物。季胺官能化重复单元也可以从其它的聚合物制得，如通过三甲基氨取代的环氧化物与羟乙基纤维素的羟基反应制得。

季胺官能化重复单元中的氮可以是饱和的或不饱和的杂环的一部分，最优选的杂环是五或六元环。最优选，该聚季铵盐聚合物是乙烯基咪唑鎓盐或二甲基二烯丙基铵盐的共聚物。可达90％，优选40％-90％摩尔的不具有季胺官能团的共聚相容共聚单体可以与季胺官能化共聚单体共聚合。合适的单体包括，但不局限于乙烯基吡咯烷酮，丙烯酸，甲基丙烯酸烷基酯，酰胺和胺，例如，丙烯酰胺和N，N-二烷基氨烷基丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯，羟乙基纤维素，以及它们的共聚合相容混合物。优选的烷基具有1至6个碳原子。最优选，烷基是甲基，乙基，和/或丁基。

适合用作本发明中聚阳离子物质的具体的聚季铵盐聚合物可以包括但不局限于季胺官能化重复单元是衍生于下面种类的单体的共聚物，这些单体是N，N-二甲基-N-乙基-氨乙基丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯，2-甲基丙烯酰氧乙基三甲基铵，N-(3-甲基丙烯酰氨基丙基)-N，N，N-三甲基铵，1-乙烯基和3-甲基-1-乙烯基咪唑，N-(3-丙烯酰氨基-3-甲基丁基)-N，N，N-三甲基铵，N-(3-甲基丙烯酰氧基-2-羟丙基)-N，N，N-三甲基铵，二烯丙基二甲基铵，二烯丙基二乙基铵，乙烯基苄基三甲基铵，它们的卤化物或其它的盐的形式，以及它们的衍生物，例如，涉及取代，加成，或除去烷基，优选具有1-6个碳原子。

聚季铵盐共聚物的具体实例是Luviquat^TMFC370聚合物(CTFA国际化妆品成分字典命名的Polyquaternium-16，可以从德国路德维希港的BASF购得)，它是一种共聚单体的聚合产物，这种共聚单体混合物中70％为乙烯基吡咯烷酮，30％为乙烯基咪唑鎓甲氯化物，可以以在水中具有约40％固体成分的组合物购得。

聚阳离子成分可以以占该组合物约0.001至约10重量％使用于该组合物中，优选大约0.005至约5重量％，尤其优选0.01至约1重量％。

如所提及的，该组合物通常包括一种主抗菌剂。适合用于本发明的抗菌剂包括通过与微生物有机体的化学的或生化交互作用而得到其抗菌活性的化学制品。这些试剂可以被单独或结合使用。

尤其优选的抗菌剂是山梨酸(0.15％)。其它已知的抗菌剂包括已知的有机含氮剂，如双胍。双胍包括双胍啶(alexidine)、双氯苯双胍己烷、环己双胍的游离碱或盐以及它们的聚合物和/或前述物质的结合。双胍盐代表性地为葡萄糖酸盐，硝酸盐，醋酸盐，磷酸盐，硫酸盐，氯化物等等。优选的双胍是环己双胍，其可以从德国Wihnington的Zeneca以Cosmocil^TM CQ的商标购得。通常，也被称之为聚环己双胍(pHMB)和聚氨基丙基双胍(PAPB)的环己双胍具有可达约100,000的分子量。然而另外一种已知的主抗菌剂的例子是可以以Polyquaternium-1购得的各种物质。

主抗菌剂的量可以根据所使用的具体的试剂而改变。对于前面所提及的有机含氮试剂，典型地，这样的试剂的浓度范围为约0.00001至约0.5％重量百分比，更优选，约0.00003％至约0.05％质量百分数。对于山梨酸，可能需要更高的量，典型地为0.01-1重量百分数，更优选0.1-0.5重量百分数。优选，抗菌剂是以至少部分地降低所使用的配方中的微生物的数量的量使用。如果需要，抗菌剂可以以消毒量被使用，这将将微生物的生物载荷在四个小时内降低至少两对数级，并且优选在一小时内降低一对数级。最优选，消毒量是在使用的状态下，在推荐的湿透时间内除去接触镜上的微生物负荷的量。(FDA化学消毒功效试验(Chemical Disinfection Efficacy Test)7月，1985接触镜溶液指导方针草案(Contact Lens Solution Draft Guidelines))

除上面描述的活性成分外本，发明所使用的水溶液可以包含一种或多种通常出现在眼用溶液中的其它组分，例如，张力调节剂，缓冲剂，螯合剂，pH调节剂，粘度改性剂和缓和剂等，它们帮助眼用组合物使使用者更加舒适和/或使得它们的预期的效用更加有效。

典型地是，本发明的水溶液用张力剂调节到接近正常泪液的张力(大约与0.9％的氯化钠溶液或2.8％甘油溶液相当)。通过单独使用的或与其它调节剂组合使用的生理盐水，该溶液被制成是基本上等渗压的。眼用组合物优选具有约225mOsm/kg至400mOsm/kg的渗克分子浓度，更优选，280mOsm/kg至320mOsm/kg。

为了螯合或结合金属离子，该组合物可以包含螯合或多价螯合剂，否则这些金属离子会与镜片和/或蛋白质沉淀物反应，并且聚积在该镜片上。这样的优选物质的例子可以包括，但不局限于乙二胺四乙酸(EDTA)和它的盐(二钠)，它们通常以约0.01重量％至约0.2重量％的范围内的量加入。

用于本发明的组合物，例如水溶液，可以被表达为接触镜调理液或滴眼液并可以被装在以从1ml至30ml大小的很宽范围内的小体积的容器出售。这些容器可以由HDPE(高密度聚乙烯)，LDPE(低密度聚乙烯)，聚丙烯，聚(对苯二甲酸乙二酯)等等制成。对于滴眼液，具有常规的分配盖的柔性瓶子尤其适合用于本发明。本发明的滴眼液制品是通过如所需要的量滴入眼内如约一(1)或三(3)滴而被使用的。

本发明的溶液和/或组合物的pH值可以被保持在5.0至8.0的范围内，优选约6.0至8.0，，更优选约6.5至7.8，最优选pH大于或等于7；可以加入合适的缓冲剂，例如，硼酸盐，柠檬酸盐，重碳酸盐，三(羟甲基)氨基甲烷(TRIS-基)和各种混合的磷酸盐缓冲剂(可以包括Na₂HPO₄，NaH₂PO₄和KH₂PO₄的组合)以及它们的混合物。当主抗菌剂是PAPB的时候，优选硼酸盐缓冲剂。通常，缓冲剂以约0.05至2.5重量百分数范围内的量使用，优选为0.1至1.5重量百分数。

本发明的组合物可以通过本技术领域中常规使用的多种技术来制备。一种方法包括两阶段混合程序。在第一阶段中，通过在50℃左右用大约30％的蒸馏水混合约30分钟来溶解该聚合物组分(例如阳离子纤维素聚合物)。然后，第一阶段的溶液在大约120℃下被高压灭菌处理30分钟。在第二阶段中，通过搅动将其它的组分，例如碱金属氯化物，多价螯合剂，防腐剂和缓冲剂溶解于约60％的蒸馏水中，接下来加入剩下的蒸馏水。然后，第二阶段的溶液可以通过压力经由0.22微米过滤器而被无菌地加到第一阶段溶液中，接下来将其包装在已灭菌的塑料容器。

适合用于本发明的物质也可以作为清洁、消毒或调理溶液和/或组合物的有用的成分。这样的溶液和/或组合物也可以包括，抗菌剂，表面活性剂，毒性调节剂，缓冲剂及那些已知的用于接触镜调理和/或清洁溶液的成分。Richard等在美国专利5,858,937中教导了用于清洁和/或消毒溶液的合适配方的例子，在这里将其引入作为参考，就如在这里被详细的描述了。优选地，本发明的组合物和/或溶液可以被配制为“多功能溶液”，这意味着这样的组合物和/或溶液可以被用来清洁、化学消毒、存储和冲洗接触镜。多功能溶液优选具有低于75cps的粘度，优选1-50cps，最优选1-25cps，优选的是，在总的组合物中至少有95％容重的水。

根据在它们在各自水溶液中的游离状态，适合用于本发明的表面活性剂被分为阳离子表面活性剂，阴离子表面活性剂，非离子表面活性剂和两性电解质表面活性剂。在它们中，被归类为阳离子表面活性剂的各自表面活性剂，尤其是那些由氨基酸衍生物组成的表面活性剂，例如氨基酸类阳离子表面活性剂，已经被提议作为消毒清洁剂或用于消毒的组分。甘油也可以被包含进来作为本发明的一种成分。适合用于本发明中组合物的甘油表面活性剂包括以商品名″Miranol″所提供的一类物质。另外一种有用的两性表面活性剂的例子是可可酰氨丙基甜菜碱，其可由商业途径从各种来源得到。

鉴于以上所述，从McCutcheon的清洁剂和乳化剂(Detergents andEmulsifier)，北美版，MC出版公司McCutcheon分公司，Glen Rock，N.J.07452，以及CTFA国际化妆品成分手册，由华盛顿特区的TheCosmetic，Toiletry，and Fragrance Association出版，可以很容易地确定各种其它的适合用于该组合物的表面活性剂。

一类具体的表面活性剂是聚丙二醇与环氧乙烷的加聚物(pluronics)和逆聚丙二醇与环氧乙烷的加聚物(reverse pluronics)，它们分别是一系列的ABA和BAB型嵌段共聚物。ABA型嵌段共聚物是由聚(环氧乙烷)-聚(环氧丙烷)-聚(环氧乙烷)部分组成的，BAB嵌段共聚物是由聚(环氧丙烷)-聚(环氧乙烷)-聚(环氧丙烷)段构成的。本质上，该聚(环氧乙烷)(PEO)嵌段是亲水的，然而聚(环氧丙烷)(PPO)嵌段是憎水的。这样的物质可以以商品名Pluoronic从市场上买到。Poloxamers是从不同比率的PEO和PPO得到的。另外一种具体的表面活性剂是可以以商标Tetronic购得的poloxamines，其包括被乙二氨部分连接的PEO和PPO链段。

任选地，一种或多种附加的聚合物或非聚合物的缓和剂可以被结合到上述的成分中。缓和剂已知提供润湿、增水和/或润滑效果，从而导致舒适感的提高。聚合的缓和剂也能够作为水溶性增粘剂。包括在水溶性增粘剂中的是非离子纤维素聚合物，如甲基纤维素，羟乙基纤维素，羟丙基纤维素，和羧甲基纤维素，聚(N-乙烯基吡咯烷酮)，聚(乙烯醇)等。这样的增粘剂或缓和剂可以以约0.01至约5.0重量％的范围或更少的总量使用。合适地，最终配方的粘度是10cps至50cps。也可以加入舒适剂，如甘油或丙二醇。

实施例

对各种多功能接触镜溶液(当接触镜没有被佩戴的时候，用来对其清洁，冲洗，存储和消毒)和接触镜润湿滴剂溶液(当接触镜佩戴在眼睛里的时候，用来对其进行再润湿)对从棘阿米巴角膜炎病理中分离出来的棘阿米巴多主寄生(Acanthamoeba polyphaga(Ros))滋养体和孢囊的活性进行了检测。滋养体被种植和保持在30℃纯种培养基中1。这些被用来通过将滋养体转移到补充了50mM MgCl₂的纯种培养基中，并在30℃摇动7天使其孵化以制备孢囊。使用标准的免疫试验化验1。聚丙烯试管(50ml)与试液老化一晚上；然后将其丢弃并且加入10ml新鲜的溶液。将0.1ml的1×106/ml的滋养体或孢囊加到该溶液中，并在0、4或6小时的时间间隔将等分试样除去，用0.1％的土温80中和，确定活的生物体的数量。对照试验使用1/4强度的林格氏溶液代替试验消毒剂(1/4强度林格氏溶液：NaCl 2.25g/l；KCl 0.105g/l；CaCl₂.6H₂O 0.12g/l；NaHCO₃)。

参考文献：1.Hughes，R.和Kilvington，S.(2001)。A comparisonof hydrogen peroxide contact lens disinfection systems andsolutions against Acanthamoeba polyphaga).AntimicrobialAgents and Chemotherapy)45：20382043；2.Khunkitti，W.，Lloyd，D.，Furr，J.R.，和Russell，A.D.(1998)Acanthamoeba castellanii：growth，encystment，excystment and biocide susceptibility.Journal of Infection 36：43-48。在下面的表格中报道了在四个小时后杀死棘阿米巴的百分数。

表1-4中的组合物代表多功能接触镜溶液。表4中的组合物代表不需要搓擦步骤从接触镜上清除沉淀物的多功能溶液。表5和6的中的组合物代表当接触镜佩戴在眼睛中的时候，用于再润湿接触镜的接触镜再润湿滴液。表7和8中的组合物代表多功能接触镜溶液。

                                 表1

成分	对比组合物	组合物1	组合物2	组合物3
						％W/W	％W/W	％W/W	％W/W
硼酸	0.8500	0.8500	0.8500	0.8500
					磷酸钠(一元)	0.1500	0.1500	0.1500	0.1500
磷酸钠(二元)	0.3100	0.3100	0.3100	0.3100
					HAP(羟乙磷酸四钠@30％)	0.1000	0.1000	0.1000	0.1000
氯化钠	0.1910	0.1910	0.1910	0.1910
					阳离子纤维素聚合物(Polyquaternium-10-UCARE Polymer JR)	-	0.0200	0.2000	1.0000
pHMB HCl(CosmocilCQ@20％)	1.0ppm	1.0ppm	1.0ppm	1.0ppm
					pH	6.96	6.96	6.95	7.02
渗克分子浓度	264	266	269	269
					％杀死棘阿米巴@4hrs	35％	88％	85％	35％

                                 表2

成分	对比组合物	组合物4	组合物5	组合物6
						％W/W	％W/W	％W/W	％W/W
硼酸	1.1000	1.1000	1.1000	1.1000
					硼酸钠	0.0900	0.0900	0.0900	0.0900
HAP(30％)	0.1000	0.1000	0.1000	0.1000
					氯化钠	0.3500	0.3500	0.3500	0.3500
Polymer JR	-	0.0200	0.2000	1.0000
					pHMB HCl(20％)	1.0ppm	1.0ppm	1.0ppm	1.0ppm
pH	7.17	7.15	7.15	7.15
					渗克分子浓度	287	294	300	269
％杀死棘阿米巴@4hrs	15％	75％	75％	32％

                                       表3

成分	对比组合物	组合物7	组合物8	组合物9
						％W/W	％W/W	％W/W	％W/W
磷酸钠(一元)	0.09625	0.09625	0.09625	0.09625
					磷酸钠(二元)	0.1140	0.1140	0.1140	0.1140
HAP(30％)	0.1000	0.1000	0.1000	0.1000
					氯化钠	0.8010	0.8010	0.8010	0.8010
Polymer JR	-	0.0200	0.2000	1.0000
					pHMB HCl(20％)	1.0ppm	1.0ppm	1.0ppm	1.0ppm
pH	6.94	6.93	6.92	6.94
					渗克分子浓度	286	290	294	＞294
％杀死棘阿米巴@4hrs	10％	11％	20％	7％

                                表4

成分	组合物10	组合物11	组合物12	组合物13	组合物14
							％W/W	％W/W	％W/W	％W/W	％W/W
硼酸	0.8500	0.8500	0.8500	0.8500	0.8500
						磷酸钠(一元)	0.1500	0.1500	0.1500	0.1500	0.1500
磷酸钠(二元)	0.3100	0.3100	0.3100	0.3100	0.3100
						HAP(30％)	0.1000	0.1000	0.1000	0.1000	0.1000
氯化钠	0.2600	0.1917	0.0880	0.2600	0.1917
						Polymer JR	0.0200	0.0200	0.0200	0.0200	0.0200
pHMB HCl(20％)	1.29ppm	1.29ppm	1.29ppm	1.29ppm	1.29ppm
						Poloxamer  F127(Pluronic F127)	2.0000	2.0000	2.0000	3.0000	-
Poloxamine    1107(Tetronic 1107)	1.0000	1.0000	1.0000	-	1.0000
						EDTA	-	-	-	-	-
硼酸钠	-	-	-	-	-
						pH	7.00	7.00	7.02	6.93	6.92
渗克分子浓度	300	282	258	290	294
						ISO Biocidal@4hrs	2.9	3.8	4.0	2.4
％杀死棘阿米巴@4hrs	60％	92％	100％	100％	93％

                   表5

成分	组合物15	对比组合物
				％W/W	％W/W
Tris-碱	0.1210	0.1210
			硼酸钠	0.2198	0.2198
甘油	1.0000	1.0000
			氯化钠	0.2660	0.2660
Tetronic 1107	1.0000	1.0000
			Pluronic F127	2.0000	2.0000
Polymer JR	0.0200	-
			山梨酸	0.2000	0.2000
EDTA	0.2000	0.2000
			pH	6.79	7.09
渗克分子浓度	297	311
			％杀死棘阿米巴@4hrs	75％	7％
PE结果	通过	通过

                                表6

成分	对比组合物	组合物16	组合物17	组合物18	组合物19	组合物20	组合物21	组合物22	组合物23
											％W/W	％W/W	％W/W	％W/W	％W/W	％W/W	％W/W	％W/W	％W/W
Tris-碱	0.1210	0.1210	0.1210	0.1210	0.1210	0.1210	0.1210	0.1210	0.1210
										硼酸钠	0.2198	0.2198	0.2198	0.2198	0.2198	0.2198	0.2198	0.2198	0.2198
甘油	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000
										氯化钠	0.2660	0.2660	0.2660	0.2660	0.2660	0.2660	0.2660	0.2660	0.2660
Tetronic1107	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000
										PluronicF127	2.0000	2.0000	2.0000	2.0000	2.0000	2.0000	2.0000	2.0000	2.0000
Polymer JR	--	0.0010	0.0050	0.0100	0.0200	0.0400	0.1000	0.4000	0.8000
										山梨酸	0.2000	0.2000	0.2000	0.2000	0.2000	0.2000	0.2000	0.2000	0.2000
EDTA	0.2000	0.2000	0.2000	0.2000	0.2000	0.2000	0.2000	0.2000	0.2000
										pH	6.79	6.79	6.79	6.79	6.79	6.79	6.79	6.79	6.79
渗克分子浓度	297	297	297	297	297	297	297	297	297
										％杀死棘阿米巴@4hrs	5.65	47.28	64.33	72.59	75.73	79.29	86.51	88.28	91.09

                                  表7

成分	对比组合物	组合物24	组合物25	组合物26	组合物27	组合物28	组合物29	组合物30	组合物31
											％W/W	％W/W	％W/W	％W/W	％W/W	％W/W	％W/W	％W/W	％W/W
硼酸	0.8500	0.8500	0.8500	0.8500	0.8500	0.8500	0.8500	0.8500	0.8500
										磷酸钠(一元)	0.1500	0.1500	0.1500	0.1500	0.1500	0.1500	0.1500	0.1500	0.1500
磷酸钠(二元)	0.3100	0.3100	0.3100	0.3100	0.3100	0.3100	0.3100	0.3100	0.3100
										HAP(30％)	0.1000	0.1000	0.1000	0.1000	0.1000	0.1000	0.1000	0.1000	0.1000
氯化钠	0.1917	0.1917	0.1917	0.1917	0.1917	0.1917	0.1917	0.1917	0.1917
										PolymerJR	--	0.0010	0.0050	0.0100	0.0200	0.0400	0.1000	0.4000	0.8000
pHMBHCl(20％)	0.00779	0.00779	0.00779	0.00779	0.00779	0.00779	0.00779	0.00779	0.00779
										PluronicF127	2.0000	2.0000	2.0000	2.0000	2.0000	2.0000	2.0000	2.0000	2.0000
Tetronic1107	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000	1.0000
										pH	7.00	7.00	7.00	7.00	7.00	7.00	7.00	7.00	7.00
渗克分子浓度	282	282	282	282	282	282	282	282	282
										％杀死棘阿米巴	9.43	51.24	82.00	81.14	87.20	81.33	94.31	90.90	65.62

@4hrs

                                  表8

成分	对比组合物	组合物32	组合物33	组合物34	对比组合物	组合物35	组合物36
									％W/W	％W/W	％W/W	％W/W	％W/W	％W/W	％W/W
硼酸	0.8500	0.8500	0.8500	0.8500	0.8500	0.8500	0.8500
								硼酸钠	0.0900	0.0900	0.0900	0.0900	0.0900	0.0900	0.0900
氯化钠	0.4500	0.4500	0.4500	0.4500	0.4500	0.4500	0.4500
								HAP(30％)	0.1000	0.1000	0.1000	0.1000	0.1000	0.1000	0.1000
聚阳离子/其它组分(当存在时0.02％)	-	GafquatHS-100	海美溴铵	羟丙基瓜尔胶三氯化铵	Gluquat125	GAFFIXVC-713	Polymer-JR
								pHMBHCl(20％)	0.00779	0.00779	0.00779	0.00779	0.00779	0.00779	0.00779
％杀死棘阿米巴	11.43	94.17	99.50	69.05	4.95	64.48	74.67

尽管本发明中详细地描绘和叙述了优选的实施方案，然而对于相关领域的技术人员来说，在不偏离本发明的精神下可以进行各种修改、增加和替代等是显而易见的，因此，这些都被认为落在由后面的权利要求所定义的本发明的范围内。

Claims (18)

1.一种用来提高组合物对棘阿米巴的抗菌效果的方法，其包括，在所述的组合物中包含聚阳离子物质。

2.权利要求1的方法，其中，聚阳离子物质包括带阳离子电荷的聚合物。

3.权利要求2的方法，其中，聚阳离子物质包括阳离子纤维素聚合物。

4.权利要求1的方法，其中所述的组合物包括主抗菌剂，并且聚阳离子物质提高了所述的主抗菌剂对棘阿米巴的抗菌功效。

5.权利要求4的方法，其中聚阳离子物质包括至少一种选自以下组中的物质：阳离子多糖、阳离子蛋白质、阳离子多核苷酸、阳离子糖蛋白、阳离子葡糖胺聚糖和紫罗烯聚合物。

6.权利要求1的方法，其中水溶液是眼用溶液。

7.权利要求1的方法，其中，水溶液进一步包括至少一种选自以下组中的成分：张力调节剂、缓冲剂、螯合剂、pH调节剂、粘度改性剂和治疗剂。

8.权利要求4的方法，其中主抗菌剂包括山梨酸。

9.权利要求4的方法，其中主抗菌剂包括双胍。

10.一种眼用组合物，其包括主抗菌剂和聚阳离子物质的水溶液，其中，所述聚阳离子物质提高了主抗菌剂的抗菌功效。

11.权利要求10的眼用组合物，其中，主抗菌剂提高了对棘阿米巴的抗菌功效。

12.权利要求10的眼用组合物，其中，聚阳离子物质包括阳离子纤维素物质。

13.权利要求10的眼用组合物，其进一步包括至少一种选自以下组中的成分：张力调节剂、缓冲剂、螯合剂、pH调节剂、粘度改性剂和治疗剂。

14.权利要求13的眼用组合物，其具有适合直接滴入眼睛而不刺激眼组织的接触镜再润湿溶液的形式。

15.权利要求13的眼用组合物，其具有对接触镜冲洗、储存、清洁和消毒的多功能接触镜溶液的形式，其中，用所述的溶液冲洗的接触镜适合放置在眼里而不刺激眼组织。

16.一种用来提高接触镜对棘阿米巴的抗菌功效的方法，其包括，使所述的接触镜与包括主抗菌剂和聚阳离子物质的溶液接触。

17.一种用来提高眼用组合物对棘阿米巴的抗菌功效的方法，其包括，在所述的组合物中包含阳离子纤维素物质。

18.一种眼用组合物，其包括主抗菌剂和提高所述主抗菌剂的抗菌功效的聚阳离子物质，其中，所述的组合物比缺少聚阳离子的相似组合物对棘阿米巴具有提高的功效。