CN1674789A - 从卡诺拉油料种子粗粉中提取蛋白 - Google Patents

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Abstract

在卡诺拉或其它油料种子蛋白分离物的存在下，从卡诺拉油料种子粗粉和其它油料种子粗粉中回收蛋白的方法，该方法的改进之处在于其使用的粗粉与常规烘烤粗粉相比，该粗粉已在低于约50℃温度下被空气－除溶剂化。

Description

从卡诺拉油料种子粗粉中提取蛋白
相关申请参考
根据35 USC119(e)，本申请要求于2002年6月21日申请的美国临时专利申请60/390,126和2002年8月8日申请的60/401,782的优先权。
发明领域
本发明涉及从油料种子蛋白中回收蛋白，特别是卡诺拉油料种子蛋白。
背景技术
卡诺拉油料种子被广泛地用于回收其中的卡诺拉油。挤压卡诺拉油料种子以除去绝大部分油类，用热溶剂，通常使用己烷提取残余的粗粉，以回收其余的油类。溶剂提取后的残余粗粉含有残留的己烷，通常被称为“白片(white flake)”，有时也叫做“榨渣(marc)”粗粉。在压碎机处理油料种子粗粉之前，回收粗粉中的溶剂，用于再利用。在溶剂回收过程中，油料种子粗粉经常在一种被称为“烘烤”的工序中被加热到大约120-140℃的较高温度。所获的粗粉称为“烘烤粗粉”或“高温生成粗粉”。
经压碎机处理的残余油料种子粗粉含有大量蛋白质，通常被用作动物饲料。已经存在一些从残余卡诺拉油料种子粗粉中以卡诺拉蛋白分离物的形式回收卡诺拉蛋白质的方法。
在美国专利US 5,844,086和6,005,076(“Murray II”)中(其被转让给该专利受让人，其公开文本被并入本文作为参考)，描述了一种用于从具有显著脂肪含量的油料种子粗粉中分离蛋白分离物的方法，所述油料种子粗粉包括具有这种含量的卡诺拉油料种子粗粉。该方法涉及的步骤包括从油料种子粗粉中溶解蛋白质物质，该步骤还会溶解粗粉中的脂肪，因此还需从所获蛋白质水溶液中除去脂类。该蛋白质水溶液可在脂类去除步骤之前或之后与残余油料种子粗粉分离。然后浓缩该脱脂蛋白质溶液以提高蛋白质浓度，同时维持离子强度基本恒定，之后该浓缩蛋白质溶液可以经过进一步去脂步骤处理。然后稀释该浓缩蛋白质水溶液以促进产生高度聚集的蛋白质分子云状物，形成微胶粒形式的离散蛋白质小滴。该蛋白质微胶粒可沉淀形成聚集的，联合的，稠密的，无定形粘性面筋样蛋白分离物，被称为“蛋白质微胶粒团”或PMM，将其与残留的水相分离并干燥。
该蛋白分离物具有至少大约90wt％的蛋白质含量(由凯氏法或同类方法测定N×6.25)，基本上未变性(由差示扫描量热法测定)并具有低残留脂肪含量。本文所用术语“蛋白质含量”指以干重表示的蛋白分离物中蛋白质的量。使用该方法获得的蛋白分离物产量，按照从油料种子粗粉中提取的、经回收作为干燥蛋白分离物的蛋白质比例而言，通常小于40wt％，典型地约20wt％。
在上述专利中描述的各方法已被进一步发展为修饰和改进的方法，用于从各种蛋白质来源物质中形成蛋白分离物，所述来源物质包括油料种子，如US4,208,323(Murray，IB)所述，该公开文本被并入本文作为参考。在1980年(US4,208 323公开的时候)可得到的油料种子粗粉在Murray II专利的时候并不具有卡诺拉油料种子粗粉的脂肪沾染程度，因此US4,208,323的方法无法根据Murray II方法用这种油料种子粗粉生产具有90wt％蛋白质含量以上的蛋白质物质。在US4,208,323的所有特定实验当中均未描述利用油菜籽(卡诺拉)粗粉作为原材料。
US4,208,323被设计为US4,169,090和4,285,862(Murray IA)(该文献并入本文作为参考)所述方法的一种改进，通过在稀释之前加入浓缩步骤以形成PMM。后一步骤用来改进Murray IA方法20％左右的蛋白分离物产量。
在2001年5月4日申请的共同未决美国专利申请60/288,415，2001年10月5日申请的60/326,987，2001年11月7日申请的60/331,066，2001年11月26日申请的60/333,494，2002年4月24日申请的60/374,801和2002年5月3日申请的10/137,391(WO02/089597)(以上申请均转让给该专利受让人，其公开文本并入本文作为参考)中，描述了生产含有至少大约100wt％蛋白质(N×6.25)的高纯度蛋白分离物的方法。在上述美国专利申请中，蛋白分离物是通过用食品级盐溶液提取油料种子粗粉的方法制备，所获的蛋白质溶液在用色素吸附剂初步处理之后，如果需要可被浓缩到至少大约200g/L的蛋白质含量，浓缩的蛋白质溶液在冷水中稀释以形成蛋白质微胶粒，该蛋白质微胶粒可沉淀形成聚集的，联合的，稠密的，无定形粘性面筋样蛋白分离物，被称为“蛋白质微胶粒团”或PMM，将其与残留的水相分离即可使用或经干燥后使用。
在上述方法的一个具体实施方式中以及如美国专利申请60/326,987，60/331,066，60/333,494，60/374,801和10/137,391所述，来自PMM沉淀步骤的上清液被进一步处理以从湿的PMM和上清液中回收含有干燥蛋白质的蛋白分离物。该方法首先利用超滤膜起始浓缩上清液，并将浓缩上清液与湿的PMM混合，并干燥该混合物。所获的卡诺拉蛋白分离物具有至少大约90wt％，优选至少约100wt％高蛋白纯度(N×6.25)。
在上述方法的另一个具体实施方式和美国专利申请60/331,066，60/333,494，60/374,801和10/137,391中，来自PMM沉淀步骤的上清液被进一步处理以从上清液中回收蛋白。该方法可通过首先利用超滤膜浓缩上清液以及干燥该浓缩物来完成。所获的卡诺拉蛋白分离物具有至少大约90wt％，优选至少大约100wt％的高蛋白质纯度(N×6.25)。
上述美国专利申请中描述的方法基本上是批处理方法。在2001年11月20日申请的共同未决美国专利申请60/331,646，2002年5月30日申请的60/383,809以及2002年11月19日申请的10/298,678(以上专利均转让各专利受让人，且其公开文本被并入本文作为参考)中，描述了制备卡诺拉蛋白分离物的连续方法。与之一致，卡诺拉油料种子粗粉被连续地与盐溶液混合，该混合物通过管子输送，同时从卡诺拉油料种子粗粉中提取蛋白质以形成一种蛋白质水溶液，该蛋白质水溶液持续地与残留的卡诺拉油料种子粗粉分离，该蛋白质水溶液被不断地输送通过一种选择性膜操作，以将该蛋白质水溶液的蛋白质含量提高到至少约200g/L，同时维持离子强度基本上恒定，所获浓缩物蛋白质溶液不断地与冷水混合以促使形成蛋白质微胶粒，该蛋白质微胶粒不断地被沉淀同时上清液不断溢出，直到在沉淀器上积累得到期望数量的PMM。从沉淀器上除去PMM也可以进行干燥。该PMM具有至少大约90wt％(N×6.25)，优选至少大约100wt％的蛋白质含量。
在这些在先的美国专利申请中所述实验是在商品化可得到的油料种子粗粉基础上进行，该粗粉已经在常规的除溶剂装置-烘烤操作中去除了溶剂。利用这些物质作为该油料种子粗粉生产油料种子蛋白分离物可能是由于高温脱溶剂操作导致的蛋白质变性作用，可以提取到油料种子中约30wt％以下的蛋白质。
发明概述
目前惊人地发现：如果使用已在室温下除溶剂的粗粉进行提取，可较大地提高从卡诺拉油料种子蛋白质粗粉中提取的蛋白质量。从粗粉中提取更多蛋白的能力会改善该方法的整体经济效益。另外还可获得质量提高了的产物。
本发明一个方面提供了制备蛋白分离物的方法，其包含(a)压榨油料种子以形成油及其油料种子粗粉，(b)溶剂提取该油料种子粗粉以回收其中的残余油，(c)在低于约50℃温度下从被提取油料种子粗粉中除去溶剂以提供除溶剂的油料种子粗粉，(d)提取该除溶剂油料种子粗粉以
促使在该除溶剂油料种子粗粉中的蛋白质的溶解作用并形成具有约5到6.8pH的一种蛋白质水溶液，
(e)将残余油料种子粗粉与该蛋白质水溶液分离，
(f)利用选择性膜技术提高该蛋白质水溶液的浓度，同时维持该离子强度基本上恒定，以得到浓缩的蛋白质溶液，(g)用约15℃以下的冷水稀释该浓缩的蛋白质溶液，以促使在水相中形成离散的蛋白质颗粒，至少部分该蛋白质颗粒是微胶粒的形式，(h)沉淀该蛋白质微胶粒以形成一种无定形的，粘性的，凝胶状的，面筋样蛋白质微胶粒团，并且(i)从上清液中回收该蛋白质微胶粒团，该蛋白质微胶粒团具有以干重(N×6.25)计至少约90wt％的蛋白质含量。
本发明使用已在约50℃以下优选在大约15到约30℃的适当温度下除溶剂的白片或榨渣粗粉。风干粗粉或真空去除均可完成除溶剂过程。
蛋白质可通过批量法，半批量法或者连续方法从环境温度下除溶剂的粗粉中提取并回收，大致如同上述美国专利申请所述。
根据本文方法生产的蛋白分离物可用于常规的蛋白分离物应用，诸如加工食品的蛋白质营养强化，油的乳化，烤制食品的成型以及产品中截留气体的起泡剂。另外，该蛋清分离物可形成蛋白质纤维，能用于肉类类似物，可以在以蛋清作为结合剂的食品中用作蛋清取代物或补充剂。卡诺拉蛋白分离物可以用作营养添加剂。卡诺拉蛋白分离物的其它应用包括在宠畜食物，动物饲料以及工业和化妆品应用和个人护理产品中的应用。
附图说明
图1到3是利用0.05M NaCl(图1)和0.10M NaCl(图2)以及在60℃无盐条件下(图3)卡诺拉油料种子粗粉提取物的高效液相色谱图，该粗粉已在室温下被空气除溶剂化。
发明概述
本发明方法利用油料种子，特别是卡诺拉油料种子，但是该方法还可应用于其它油料种子，例如大豆，传统的油菜籽，传统的亚麻，linola，向日葵以及芥子油料种子粗粉。本文特别描述了卡诺拉油料种子粗粉。
洗涤该油料种子以回收其中的油类。分离油类后，用热溶剂，通常使用己烷提取残留的粗粉，以从粗粉中回收残留的油类。然后根据本发明，在约50℃以下优选在约15-约30℃的温度下将所获的粗粉除溶剂。已经发现通过用这样的方式除溶剂能显著地提高从粗粉中提取蛋白质的量。
如此加工的油料种子粗粉可如Murray I或II专利所述处理，以从油料种子粗粉中回收蛋白分离物，其细节已在其中描述。优选地，利用上述共同未决美国专利申请60/288,415，60/326 987，60/331,066，60 333,494，60/372,165，60/374,801和10/137,391(WO02/089567)所述方法，藉此获得了提高产量的干燥蛋白分离物，所述产量是按照从油料种子粗粉中提取的、作为蛋白分离物回收的蛋白质比例而言的，并可获得高蛋白含量的蛋白分离物，根据如凯氏定氮法测定的氮(N)的百分比并乘以6.25的系数，通常含量为至少约100wt％。或者可利用上述美国申请60/331,646，60/383,809和10/298,678所述的连续方法。这些应用于卡诺拉蛋白分离物的优选方法的详细描述如下。
很明显可通过各种能够从油料种子粗粉中回收蛋白分离物的设备处理油料种子以从油料种子粗粉回收蛋白分离物。或者，该操作可以与单个设备结合。
卡诺拉蛋白分离物分离方法的初始步骤包括从卡诺拉油料种子粗粉中溶解蛋白质物质。从卡诺拉籽粗粉中回收的蛋白质物质可能是卡诺拉籽或其它油料种子中天然存在的蛋白质，或者该蛋白质物质可以是经遗传修饰但是仍具有天然蛋白质的特征疏水性和极性特性的蛋白质。卡诺拉油料种子又名油菜籽或者油料种子油菜。
利用食品级盐溶液可以最有效地完成蛋白质的溶解作用，因为盐的存在会增强去除油料种子粗粉中的可溶性蛋白质。如果卡诺拉蛋白分离物被预定用于非食物应用，则可以使用非食品级化学品。所述食品级盐通常是氯化钠，当然还可使用其它盐，例如氯化钾。该食品级盐溶液具有至少约0.10，优选至少约0.15的离子强度，以便对大量蛋白质发挥作用使其溶解。当盐溶液的离子强度增强时，油料种子粗粉中蛋白质的溶解度也开始增强，直到达到最大值。随后的任何离子强度增加都不会提高溶解蛋白质的总数。导致最大蛋白质溶解作用的食品级盐溶液的离子强度根据所用盐和所选定的油料种子粗粉而变化。
由于增强离子强度沉淀蛋白质需要更大的稀释度，所以通常优选采用小于约0.8更优选约0.15-约0.6的离子强度值。
在批处理法中，蛋白质的盐溶作用在至少约5到优选高达约35℃的温度下进行，优选伴有搅动，以减少溶解时间，该时间通常约10-约60分钟。优选进行溶解作用以便基本上提取出油料种子粗粉中最大数量的蛋白质。
温度下限选择约5℃，因为低于该温度时溶解作用非常缓慢，无法实行，而适宜温度的上限选择约35℃，因为在批量处理模式中较高的温度水平使得该方法很不经济。
在连续方法中，对卡诺拉油料种子粗粉进行的蛋白质提取可按照任何从卡诺拉油料种子粗粉中连续提取蛋白质的方式进行。在一个具体实施方式中，根据本文所述参数，卡诺拉油料种子粗粉不断地与盐溶液混合，并且该混合物以一定的流速通过具有一定长度的管子或者导管输送，所述流速可以保证一定的停留时间，该停留时间足以获得期望的提取物。在这种连续方法中，盐溶步骤被迅速进行，最多约10分钟，优选进行的溶解作用可以从卡诺拉油料种子粗粉中基本上提取出最大量的蛋白质。连续方法中的溶解作用优选在高温进行，优选约35℃以上，通常高达约65℃或更高。
所述液态食品级盐溶液和卡诺拉油料种子粗粉具有约5-约6.8的天然pH值，以便形成微胶粒状蛋白分离物，如下面的详细描述。
在所述pH范围的极限端点及其附近，蛋白分离物的生成仅有部分通过微胶粒途径发生，其产量低于从该pH范围内的其它数值相应获得的产量。因此，优选约5.3-约6.2的pH值。
食品级盐溶液的pH可调整到约5-6.8范围内的任意所需值，以便在提取步骤中应用任何合宜的食品级酸，通常为盐酸，或者食品级碱，通常为氢氧化钠，可根据需要进行。如果卡诺拉蛋白分离物被预定用于非食物应用，则可以使用非食品级化学品。
溶解步骤过程中食品级盐溶液中的油料种子粗粉浓度可在很大程度上不同。一般的浓度值大约为5-15％w/v。
用盐水溶液进行的蛋白质提取步骤会额外地溶解存在于卡诺拉粗粉中的脂肪，那么会导致在水相中存在脂肪。
源于提取步骤的蛋白质溶液通常大约具有约5-约40g/L的蛋白质浓度，优选约10-约30g/L的蛋白质浓度。
然后源于提取步骤的水相可通过任何适当的方式与残留的卡诺拉粗粉分离，例如采用真空过滤，然后离心和/或过滤以除去残留的粗粉。分离的残余粗粉可被干燥待用。
将分离的蛋白质水溶液与粉状活性炭或者其它色素吸附剂混合，并随后通过过滤方便地去除吸附剂以得到蛋白质溶液，这样可改善最终的卡诺拉蛋白分离物的颜色以获得深黄色较少、更浅色的颜色。在浓缩之前或之后进行的如下所述的分离蛋白质水溶液的渗滤过程也可用于去除色素。
这种色素去除步骤可在任何适当的条件下进行，通常在分离蛋白质水溶液的环境温度下，可采用任何适当的色素吸附剂。如果是粉状活性炭，大约采用约0.025％-约5％w/v的量，优选约0.05％-约2％w/v。
如果卡诺拉籽粗粉含有大量脂肪，如上述美国专利5,844,086和6,005,076所述，那么可将其中描述的脱脂步骤可应用于分离的蛋白质水溶液以及下述的浓缩蛋白质水溶液。当进行色泽改良步骤时，可在第一个脱脂步骤之后进行该步骤。
作为用液态食品级盐溶液提取油料种子粗粉的一种替代手段，这种提取可仅仅利用水进行，尽管单独利用水从油料种子粗粉中提取到的蛋白质少于用液态食品级盐溶液提取。当采用这种替换手段时，可在残余油料种子粗粉分离过程后以上面讨论的浓度向蛋白质溶液中加入食品级盐，以便在如下所述的浓缩步骤过程中维持溶液中的蛋白质。当进行脱色步骤和/或第一个去脂步骤时，通常在这种操作完成之后添加食品级盐。
另一个备选方法是在约6.8以上、通常高达约9.8的相对较高pH值下用食品级盐溶液提取油料种子粗粉。可利用任何适当的食品级碱例如液态氢氧化钠溶液将食品级盐溶液的pH调整到碱性值。当采用这种备选方法时，源于油料种子粗粉提取步骤的水相可通过任何适当的方式与残留的卡诺拉粗粉分离，例如采用真空过滤，然后离心和/或过滤以除去残留的粗粉。分离的残余粗粉可被干燥待用。
然后如下所述，在进行下一步方法之前，将来自高pH提取步骤的蛋白质水溶液的pH如上所述调整到约5-约6.8的范围内，优选约5.3-约6.2。这种pH的调整可利用任何适当的食品级酸进行，例如盐酸。
然后浓缩蛋白质水溶液以提高其蛋白质浓度同时维持其离子强度基本上恒定。这种浓缩通常用于获得具有至少约200g/L，优选至少约250g/L的浓缩蛋白质溶液。
该浓缩步骤可通过任何符合批量法或连续操作法的适当方式进行，例如采用任何适当的选择性膜技术，如超滤作用或渗滤法，考虑到不同薄膜物质和结构，采用具有适当分子量截流特性(例如约3000-约50,000道尔顿)的薄膜，如中空的纤维薄膜或盘旋缠绕薄膜，并且对连续操作而言，应度量其尺寸以便在蛋白质水溶液通过该薄膜时获得期望的浓度。
浓缩步骤可在任何适当的温度下进行一段时间以获得期望的浓缩度，通常约20℃-约60℃。所用的温度及其他条件在一定程度上取决于为获得浓缩所用的薄膜设备和溶液的期望蛋白质浓度。
就提取蛋白质的比例而言(其中所述蛋白质为回收的干燥蛋白分离物)，在该步骤中蛋白质溶液浓缩到高于约200g/L浓度的浓缩过程不仅会将该方法产量提高到约40％以上水平，优选约80％以上，而且还会降低干燥之后的最终蛋白分离物的盐浓度。在分离物的应用中，控制分离物盐浓度的能力很重要，其中盐浓度的变动在特定食物应用中会影响功能性和感官特性。
众所周知，超滤作用和类似的选择性膜技术可容许低分子量种类从其中通过，而不容许较高分子量种类通过。低分子量种类不仅包括食品级盐的离子形式，还包括从源材料提取的低分子量物质，例如碳水化合物，色素和抗营养因子，以及任何低分子量形式的蛋白质。通常考虑到不同薄膜物质和结构，薄膜截流分子量的选择会确保滞留溶液中显著比例的蛋白质，同时容许污染物通过。
根据浓缩步骤中所用的温度，浓缩蛋白质溶液可被加热到至少约20℃到约60℃的温度，优选约25℃到约40℃，以减少浓缩蛋白质溶液的粘性，促进完成随后的稀释步骤和微胶粒形成过程。浓缩蛋白质溶液不应加热到某个温度值以上，在该温度下，浓缩蛋白质溶液在冷水稀释时不能生成微胶粒。如果需要的话，浓缩的蛋白质溶液可接受下一步脱脂操作，如上述美国专利5,844,086和6,005,076所述。
然后，将浓缩蛋白质溶液与获得期望稀释度所需体积的冷水相混合，稀释来自浓缩步骤以及任选的脱脂步骤的浓缩蛋白质溶液，以形成微胶粒。根据期望通过微胶粒途径获得的卡诺拉蛋白质比例以及来自上清液的卡诺拉蛋白质的比例，浓缩蛋白质溶液的稀释度可有所不同。通常稀释水平越高，水相中残留的卡诺拉蛋白质比例越大。
当期望通过微胶粒途径获得最大比例的蛋白质时，浓缩蛋白质溶液要被稀释约15倍或更低，优选约10倍或更低。
与浓缩蛋白质溶液相混合的冷水应具有低于约15℃的温度，通常约3℃-约15℃，优选低于约10℃，因为使用该稀释系数时用这些更低的温度能获得更高产量的蛋白质微胶粒形式的蛋白分离物。
在批量法操作中，一批浓缩蛋白质溶液被加入到期望体积的静止冷水中，如上所述。浓缩蛋白质溶液的稀释作用以及因此引起的离子强度下降会导致产生高度联合的蛋白质分子云状物，形成微胶粒形式的离散蛋白质小滴。在批处理方法中，促使蛋白质微胶粒沉淀到冷水中以形成聚集的，联合的，稠密无定形粘性面筋样蛋白质微胶粒团PMM。可通过例如离心促进该沉淀过程。这种诱导的沉淀可降低蛋白质微胶粒团中的液体含量，从而将通常约70％到约95％重量的含水量降低到微胶粒团总质量的约50％到约80％重量。用这种方法降低微胶粒团的含水量还会降低微胶粒团的吸收含盐量，继而降低干燥分离物的含盐量。
或者，可如下所述持续地进行稀释处理：不断将浓缩蛋白质溶液流通过T形管，同时稀释水被送到T形管的另一个进口，使其在管中混合。该稀释水以足以获得期望稀释度的速度被输入该T形管。
浓缩蛋白质溶液和管中稀释水的混合会促使生成蛋白质微胶粒，该混合物被连续地从T形管的出口运送到沉淀器中，当该沉淀器被充满时，上清液可从其中溢出。优选将混合物以使液体内湍流最小化的方式输入该沉淀器的液体中。
在连续方法中，让蛋白质微胶粒沉淀到沉淀器中以形成聚集的，联合的，稠密无定形粘性面筋样蛋白质微胶粒团(PMM)，持续该方法直到在沉淀器的底部积累到期望量的PMM，然后从沉淀器中移走累积的PMM。
将蛋白质溶液浓缩到至少约200g/L蛋白质含量的工艺的各参数组合以及采用小于约15的稀释倍数，相较于使用在上述美国专利申请中所述的任何已知现有技术蛋白分离物形成方法，会得到更高的产量(就以从原始粗粉中提取的蛋白质微胶粒团形式的蛋白质回收率而言)，通常是显著提高的产量，以及(就蛋白质含量而言)大量更纯的分离物。
通过从沉淀物倾析残余水相或离心的方法将沉淀分离物与残留的水相或上清液分离。PMM能以湿润的形式使用，也可通过任何适当的技术干燥为干燥形式，例如喷雾干燥，冷冻干燥或真空滚筒式干燥。该干燥PMM具有多于约90wt％蛋白质的高蛋白含量，优选至少约100wt％(由凯氏法测定N×6.25)，且基本上未变性(由差示扫描量热法测定)。来自脂肪油料种子粗粉的干燥PMM同时具有低残留脂肪含量，当使用上述美国专利5,844,086和6,005,076的方法时，脂肪含量可以低于约1wt％。
来自PMM生成和沉淀步骤的上清液含有大量在稀释步骤中未被沉淀的卡诺拉蛋白质，然后加工该上清液以回收其中的卡诺拉蛋白分离物。去除PMM后，浓缩来自稀释步骤的上清液以增强其中的蛋白质浓度。可使用任何适当的选择性膜技术进行这种浓缩，例如超滤作用，使用带有适当分子量截流但可通过低分子量种类的薄膜，包括可以使从蛋白质源材料提取的食品级盐及其他非蛋白质低分子量物质通过同时留住溶液中的卡诺拉蛋白质的薄膜。考虑到不同薄膜物质和结构，可以使用具有约3000到10,000道尔顿分子量截流的超滤膜。用这种方法浓缩上清液还可以减少干燥回收蛋白质所需的液体体积。上清液通常在干燥之前被浓缩到约100到约400g/L蛋白质浓度，优选约200到约300g/L。这种浓缩处理可以批量处理模式或连续操作模式进行，如上所述，用于蛋白质溶液浓缩步骤。
浓缩的上清液可通过任何适当的技术干燥为干燥形式，例如喷雾干燥，冷冻干燥或真空滚筒式干燥，以获得下一步的卡诺拉蛋白分离物。这种下一步的卡诺拉蛋白分离物具有多于约90wt％蛋白质的高蛋白含量，优选至少约100wt％(由凯氏法测定N×6.25)，且基本上未变性(由差示扫描量热法测定)。
如果需要，可以在干燥所述混合的蛋白质流之前，通过任何适当的技术将至少一部分湿润的PMM与至少一部分浓缩的上清液混合，以获得发明的混合卡诺拉蛋白分离物组合物。可以选择所述共同混合蛋白质的相对比例，以得到具有期望的2S/7S/12S蛋白质分布的卡诺拉蛋白分离物组合物。或者，可以任何期望的比例混合干燥的蛋白分离物，用于在混合物中获得期望的特定2S/7S/12S蛋白质分布。该混合的卡诺拉蛋白分离物组合物具有多于约90wt％的高蛋白含量，优选至少约100wt％(以N×6.25的方式计算)，并且基本上未变性(以差示扫描量热法的方式测定)。
在另一个备选方法中仅将一部分浓缩的上清液与部分PMM混合并且干燥所获的混合物，其余的浓缩上清液可以如任何其余的PMM一样进行干燥。接下来，还可以将干燥的PMM与干燥的上清液以任何期望的相对比例干法混合，如上所述。
通过用这样的方式操作，可以回收大量各种形式的卡诺拉蛋白分离物，即干燥的PMM，干燥的上清液及各种重量比PMM和上清液的干拌混合物形式，所述重量比通常为约5∶95到约95∶5重量，其可满足获得不同功能与营养特性的需要。
作为用冷水稀释浓缩蛋白质溶液以及对所获沉淀物和上清液进行上述加工的一种替代手段，可以通过透析浓缩蛋白质溶液以减少其含盐量的方法从浓缩蛋白质溶液中回收蛋白质。浓缩蛋白质溶液含盐量的降低会导致在透析容器中生成蛋白质微胶粒。透析后，可以使蛋白质微胶粒沉淀，收集并干燥，如上所述。可以如上所述进行加工来自蛋白质微胶粒沉淀步骤的上清液，以回收其中另外的蛋白质。或者，可以直接干燥透析容器的内容物。当期望得到少量实验室规模的蛋白质时，后一备选方法较为有益。
实施例
实施例1：
该实施例举例说明了本发明的方法。
在环境温度(或室温(RT))，55℃，60℃，65℃条件下，将75g已在环境温度下(20℃)被空气除溶剂的卡诺拉油料种子粗粉样品加入到500ml 0.15M NaCl溶液中，搅动30分钟同时维持溶液温度基本上恒定，以获得蛋白质水溶液。在5，10，15，20和30分钟时取样蛋白质水溶液的样品，用于分析。将余下的粗粉以10,000xg离心5分钟而分离并冷冻干燥。
测定这些实验中获得的各种蛋白质水溶液的蛋白质浓度，结果如下面表I所示：
表I.提取物中的蛋白浓度(wt％)
  提取时间(min)     RT*     55℃     60℃     65℃
  5     2.97     3.33     3.33     3.37
  10     3.21     3.39     3.52     3.40
  15     3.22     3.47     3.59     3.41
  20     3.21     3.51     3.53     3.39
  30     3.17     3.46     3.63     3.14
*室温(20℃)
从这些数据可以看到，高温下进行的提取比在室温下进行的更快。就提取最大量的蛋白质浓度而言，在高温下提取过程可在5分钟之内达到平衡，而在室温下的提取通常需要10分钟。当提取温度从室温上升到60℃时，提取物的蛋白质浓度增加了10％以上，进一步的升温则导致提取能力轻微降低。
根据表I所列的蛋白质浓度数据，计算蛋白质的提取能力，结果列于下面表II：
表II.在不同温度下的蛋白质提取能力*
    温度(℃)     提出能力(wt％)
    RT     50.1
    55     54.0
    60     55.9
    65     53.9
*定义为提取蛋白质的量在粗粉中蛋白质总量中所占的百分比
由这些数据可以看出：所有测试温度下卡诺拉油料种子粗粉的蛋白质提取能力均高于50wt％，与商品化烘烤卡诺拉油料种子粗粉最大30wt％的蛋白质提取能力相比，具有相当可观的改良。
实施例2：
该实施例介绍某些参数对蛋白质提取能力的影响。
在第一套实验中，在室温下(20℃)将50g(a)已在环境温度(20℃)被空气除溶剂的卡诺拉油料种子粗粉或(b)已通过常规烘烤除溶剂(烘烤商品化粗粉)的商品化卡诺拉油料种子粗粉样品加入到500mL 0.05M或0.10M NaCl溶液中，搅拌15分钟。以5000xg离心该浆液10分钟以去除余下的粗粉。
在第二套实验中，首先将500mL无盐的水在电热板搅拌器上加热到60℃，然后加入50g(a)已在环境温度(20℃)被空气除溶剂的卡诺拉油料种子粗粉或(b)已通过常规烘烤除溶剂(烘烤商品化粗粉)的商品化卡诺拉油料种子粗粉，搅拌15分钟，同时维持该温度。以5000xg离心来自剩余粗粉的提取物10分钟。
测定这些实验中所获的各种蛋白质水溶液的蛋白质浓度，结果列于下面表V。
TABLE V.提取物中的蛋白质浓度(wt％)
  0.05M盐溶液    0.10M盐溶液    60℃水
环境温度除溶剂粗粉   2.09     2.04    1.38
烘烤的商业粗粉   0.75     0.85    0.60
根据表V的蛋白质浓度数据计算粗粉的蛋白质提取能力，将该数据列于表VI：
       TABLE VI.蛋白质提取能力(wt％)*
  0.05M盐溶液   0.10M盐溶液  60℃水
环境温度除溶剂粗粉   49.6   48.4   32.7
烘烤的商业粗粉   17.0   20.0   14.0
*定义为蛋白质提取物的量在粗粉蛋白质总量中所占百分比数。
表VI显示两个盐浓度下榨渣粗粉的蛋白质提取能力与在室温下15wt％粗粉和0.15M盐浓度的类似(参见以上表II)。0.05M NaCl条件下的榨渣粗粉蛋白质提取程度与0.10M NaCl的条件类似。在不加入盐的情况下，高温的蛋白质提取能力比在室温下使用0.05和0.10M盐更低。但是无论在任何条件下，蛋白质提取能力和蛋白质浓度都显著地高于烘烤商品化粗粉。
用与上述室温实验同样的方法实行第三套实验，但是盐浓度为0.01M，0.02M，0.03M，0.04M和0.05M。分别测定提取物的蛋白质提取能力，结果列于下面VII：
表VII.低盐浓度下榨渣粗粉的蛋白质提取能力
    盐浓度(M)     蛋白提取能力(wt％)
    0.05     49.6
    0.04     43.4
    0.03     38.8
    0.02     40.3
    0.01     38.5
自表VII所列数据可以看出，在0.04M和0.05M的盐浓度之间观察到蛋白质提取能力大幅下降，表明为在提取物溶液中获得高蛋白质产量，盐浓度的最小值应为0.05M。
使用含有亲水性键合硅石刚性支持介质的30cm BioSep S3000空间排阻层析(SEC)柱，其为5微米直径，290 Angstrom孔径大小，能够分离5,000到700,000道尔顿大小的球状蛋白质，以1.0mL/min的洗脱流速，将蛋白来源的标准物通过Varian高压液相色谱柱(HPLC)，于A280nm下测量，测定每种组分的滞留时间(RT)。该BioRad标准物蛋白质覆盖了17,000道尔顿(肌球蛋白)到670,000道尔顿(甲状腺球蛋白)的范围，加入维生素B12作为1,350道尔顿的低分子量标记。以1.0mL/min的洗脱速度，在280nm下测量每种组分。调整了pH并含有叠氮化钠作为抗菌剂的盐溶液被用作柱溶剂，用于溶解干燥的样品。紫外线检测之后弃去洗脱液，每次运行仅需要25到50微升样品。HPLC Prostar系统可自动地计算滞留时间和峰面积，并打印汇总报表。
如该实施例所述制备的提取物样品通过各柱。将峰面积值转换成各峰的百分比。计算每次运行得到的各峰均，然后分别重新计算三个主要蛋白质组分，12S，7S和2S。所获结果如图1到3的图解数据所示。
各色谱图显示出代表7S卡诺拉蛋白质组分的显著峰以及12S卡诺拉蛋白质组分的少量折曲。2S卡诺拉蛋白质组分峰位于提取物其它组分的各峰之间。未能准确地鉴定色谱图较低分子量末端的各峰，但是可能相应于非蛋白质含氮化合物，例如短肽以及游离氨基酸，和其它粗粉组分，例如酚类化合物，葡糖异硫氰酸盐以及植酸盐。
实施例3：
该实施例进一步举例说明使用空气除溶剂化的卡诺拉油料种子粗粉制备卡诺拉蛋白分离物。
在17.6℃将160公斤已在20℃被空气除溶剂的榨渣卡诺拉粗粉加入到1602L 0.15M的NaCl中，搅动30分钟以获得具有21.4g/L蛋白质含量的蛋白质水溶液。15分钟的提取时间之后加入0.05wt％的抗坏血酸。蛋白质在被提取粗粉中的百分比为51.6％。
去除残留的卡诺拉粗粉并在真空过带洗涤。离心澄清所获的蛋白质溶液并过滤，生成1270L澄清的、具有16.2g/L蛋白质含量的蛋白质溶液。
使用5000道尔顿分子量截流薄膜，在超滤系统中将1270L蛋白质提取溶液减少到71L体积。然后使用5000道尔顿分子量截流薄膜，用5000L(5个滞留体积)含有0.05wt％抗坏血酸的0.15M盐溶液，在渗滤系统中将蛋白质提取溶液渗滤到31L的最终体积，此时其蛋白质含量为226g/L。将滞留物在60℃下巴氏杀菌10分钟。
将浓缩及渗滤过的溶液分别分成30L，30L和8L的三批。第一批在30℃下以1∶15的比例稀释成450L 4℃下过滤过的水中。立即形成了蛋白质微胶粒的白色云状物，并沉淀。去除上面的稀释水。对第二和第三批重复该方法。从容器底部除去沉淀的粘稠粘性物(PMM)。发现所述干燥的蛋白质具有102.4wt％的蛋白质含量(N×6.25)d.b.(使用Leco FP 328 Nitrogen Determinator测定氮值百分比)。该产品被命名BW-AA020-C17-03A-C300。
使用5000道尔顿分子量截流薄膜，在超滤系统中将988L来自蛋白质微胶粒化作用的上清液浓缩到38L。然后使用5000道尔顿分子量截流薄膜，用130L(4个滞留体积)的水，在渗滤系统中将浓缩的上清液渗滤到38L的终体积，此时蛋白质含量为194g/L。
将所述浓缩并渗滤过的溶液稀释到可泵送的粘稠性，然后喷雾干燥。发现该干燥的蛋白质具有9 7.6wt％的蛋白质含量(N×6.25)d.b.。该产品被命名BW-AA020-C17-03A-C200。
公开文本概述
概括地说，本发明提供一种改善的方法，用于从油料种子粗粉中制备油料种子蛋白分离物，其使用一种环境温度除溶剂化的粗粉，用于从粗粉中获得更高的提取度，产生经济效益。可在本发明范围内进行一些改进。

Claims (50)

1.制备蛋白分离物的方法，其包含
(a)压榨油料种子以形成油及油料种子粗粉，
(b)溶剂提取该油料种子粗粉以回收其中残余的油，
(c)在低于约50℃温度下从被提取油料种子粗粉中除去溶剂以提供除溶剂的油料种子粗粉，
(d)提取该除溶剂油料种子粗粉以促使在该除溶剂油料种子粗粉中的蛋白质的溶解作用并形成具有约5到6.8pH的蛋白质水溶液，
(e)将残余油料种子粗粉与该蛋白质水溶液分离，
(f)利用选择性膜技术提高该蛋白质水溶液的蛋白质浓度同时维持该离子强度基本上恒定，以得到浓缩的蛋白质溶液，
(g)用约15℃以下的冷水稀释该浓缩的蛋白质溶液，以促使在水相中形成离散的蛋白质颗粒，所述蛋白质颗粒至少部分是微胶粒的形式，
(h)沉淀该蛋白质微胶粒以形成一种无定形的，粘性的，凝胶状面筋样蛋白质微胶粒团，并且
(i)从上清液中回收该蛋白质微胶粒团，该蛋白质微胶粒团具有以干重(N×6.25)计，蛋白质含量为至少约90wt％。
2.权利要求1的方法，其中步骤(d)到(i)以批处理的操作模式进行。
3.权利要求1的方法，其中步骤(d)到(i)以半连续的操作模式进行。
4.权利要求1的方法，其中步骤(d)到(i)以连续的操作模式进行。
5.权利要求2的方法，其中对油料种子粗粉进行的提取使用具有至少约0.10离子强度以及约5到约6.8pH的盐水溶液进行，所述盐水溶液具有约5到约40g/L的蛋白质浓度。
6.权利要求5的方法，其中所述盐溶液具有约0.15到约0.6的离子强度。
7.权利要求5的方法，其中所述盐溶液具有约5.3到约6.2的pH。
8.权利要求5的方法，其中对油料种子粗粉的提取是通过搅动所述盐水溶液约10到约30分钟来进行的。
9.权利要求8的方法，其中在所述提取步骤中油料种子粗粉在盐水溶液中的浓度为约5到约15％w/v。
10.权利要求5的方法，其中来自提取步骤的蛋白质水溶液具有约10到约30g/L的浓度。
11.权利要求3的方法，其中所述提取步骤如下：
(i)在约5到约65℃的温度下，使油料种子粗粉不断地与具有至少约0.10离子强度以及约5到约6.8的盐水溶液混合，以及
(ii)在长达10min的时间内，所述混合物通过管子输送，同时从油料种子粗粉中提取蛋白质以形成具有约5到约40g/L蛋白质含量的蛋白质水溶液。
12.权利要求11的方法，其中所述盐溶液具有约0.15到约0.8的离子强度。
13.权利要求11的方法，其中所述盐溶液具有约5.3-约6.2的pH。
14.权利要求11的方法，其中在所述混合步骤中油料种子粗粉在盐水溶液中的浓度为约5到约15％w/v。
15.权利要求11的方法，其中所述温度至少为约35℃。
16.权利要求11的方法，其中所述蛋白质水溶液具有约10到约30g/L的蛋白质含量。
17.权利要求1的方法，其中对油料种子粗粉的提取使用具有至少约0.10离子强度以及pH约3到约5或约6.8到约9.9的盐水溶液进行，从残余油料种子粗粉中分离蛋白质水溶液后，将蛋白质水溶液的pH调整为约5到约6.8。
18.权利要求17的方法，其中所述盐溶液具有约0.15到约0.6的离子强度。
19.权利要求17的方法，其中蛋白质水溶液的pH调整为5.3到约6.2。
20.权利要求1的方法，其中所述油料种子粗粉为卡诺拉油料种子粗粉并且在从残留卡诺拉籽粗粉中分离蛋白质水溶液后，对蛋白质水溶液进行色素去除步骤。
21.权利要求20的方法，其中所述色素去除步骤是通过渗滤蛋白质水溶液。
22.权利要求20的方法，其中所述色素去除步骤是将色素吸附剂与蛋白质水溶液混合，随后从蛋白质水溶液中去除色素吸附剂。
23.权利要求22的方法，其中所述色素吸附剂是粉末状活性炭。
24.权利要求1的方法，其中所述的油料种子粗粉用水提取，并且随后将盐加入所获的蛋白质水溶液中，以提供具有至少约0.10离子强度的蛋白质水溶液。
25.权利要求1的方法，其中所述浓缩步骤是通过超滤作用进行，以生成具有至少约200g/L蛋白质含量的浓缩蛋白质溶液。
26.权利要求25的方法，其中进行所述浓缩步骤以生成具有至少约250g/L蛋白质含量的浓缩蛋白质溶液。
27.权利要求25的方法，其中所述浓缩蛋白质溶液被加热到至少约20℃的温度，以降低浓缩蛋白质溶液的粘性，然而该温度不能超过使浓缩蛋白质溶液不能进行微胶粒化作用的温度。
28.权利要求27的方法，其中所述浓缩蛋白质溶液被加热到约25℃到约40℃的温度。
29.权利要求2的方法，其中通过将浓缩蛋白质溶液加入到为获得期望稀释度所需体积的水中，将所述浓缩蛋白质溶液稀释约15倍或更低。
30.权利要求29的方法，其中所述水具有低于约10℃的温度。
31.权利要求30的方法，其中所述浓缩蛋白质溶液被稀释约10倍或更低。
32.权利要求3的方法，其中将浓缩蛋白质溶液与冷水持续混合，获得约15倍或更低倍数的浓缩蛋白质溶液稀释物。
33.权利要求32的方法，其中所述冷水具有低于约10℃的温度。
34.权利要求33的方法，其中所述稀释倍数约为10倍或更低。
35.权利要求1的方法，其中将回收的蛋白质微胶粒团干燥成蛋白质粉末。
36.权利要求1的方法，其中回收的蛋白质微胶粒团具有至少约100wt％的蛋白质含量(N×6.25)。
37.权利要求1的方法，其中油料种子粗粉是卡诺拉籽粗粉，并且从中回收蛋白质微胶粒团后，以批量的，半连续或连续模式，加工该上清液，以回收其中另外的大量蛋白分离物。
38.权利要求37的方法，其中是通过将上清液浓缩到约100到约400g/L，优选约200到约300g/L蛋白质浓度，并干燥浓缩上清液从而由上清液中回收所述另外的大量蛋白分离物。
39.权利要求37的方法，其中是通过将上清液浓缩到蛋白质浓度为约100到约400g/L，优选约200到约300g/L，将浓缩的上清液与回收的蛋白质微胶粒团混合，并干燥该混合物从而由上清液中回收所述另外的大量蛋白分离物。
40.权利要求37的方法，其中是通过将上清液浓缩到蛋白质浓度为约100到约400g/L，优选约200到约300g/L，将一部分浓缩的上清液与至少一部分回收的蛋白质微胶粒团混合，并干燥所获混合物而从上清液中回收所述的另外的大量蛋白分离物。
41.权利要求40的方法，其中干燥浓缩上清液的其余部分，并干燥任何残余的回收蛋白质微胶粒团。
42.权利要求1的方法，其中，作为稀释、沉淀及回收步骤的一种备选手段，可透析浓缩的蛋白质溶液以减少其中的含盐量，促使生成蛋白质微胶粒，并从透析的浓缩蛋白质溶液中回收蛋白分离物，所述经透析的浓缩蛋白质溶液具有以干重(N×6.25)计，至少约100wt％的蛋白质含量。
43.权利要求42的方法，其中所述蛋白分离物的回收是通过干燥透析的浓缩蛋白质溶液进行的。
44.权利要求1的方法，其中所述油料种子粗粉是卡诺拉油料种子粗粉。
45.权利要求44的方法，其中所述卡诺拉油料种子粗粉是冷压的卡诺拉油料种子粗粉。
46.权利要求44的方法，其中所述卡诺拉油料种子粗粉来源于未经遗传修饰的卡诺拉油料种子。
47.权利要求1的方法，其中所述油料种子粗粉是油菜籽粗粉。
48.权利要求1的方法，其中所述油料种子粗粉是芥子粉。
49.权利要求1的方法，其中所述溶剂去除步骤是在约15℃到约25℃的温度下进行的。
50.权利要求1的方法，其中所述溶剂去除步骤是通过空气去除剂在真空下进行的。
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WO (1) WO2004000031A1 (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102333453A (zh) * 2009-02-27 2012-01-25 弗兰霍菲尔运输应用研究公司 由油菜籽制备的蛋白制备物
CN102088866B (zh) * 2008-07-11 2014-08-13 伯康营养科学(Mb)公司 可溶性卡诺拉蛋白质分离物的生产

Families Citing this family (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2316223C2 (ru) * 2001-05-04 2008-02-10 Баркон Ньютрасайнс (Мб) Корп. Производство белкового изолята из семян масличных культур
CA2489505C (en) 2002-06-20 2012-04-10 Burcon Nutrascience (Mb) Corp. Colour reduction in canola protein isolate
US7989017B2 (en) * 2002-10-22 2011-08-02 Burcon Nutrascience (Mb) Corp. Canola protein isolate functionality II
CN101349889B (zh) * 2002-11-13 2012-04-25 希瑞尔技术有限公司 视频全息图和用于重构大物体的视频全息图的装置
AU2005211850B2 (en) * 2004-02-17 2010-11-18 Burcon Nutrascience (Mb) Corp. Preparation of canola protein isolate and use in aquaculture
NZ551476A (en) * 2004-05-07 2009-04-30 Burcon Nutrascience Mb Corp Protein isolation procedures for reducing phytic acid
DE102004031647A1 (de) * 2004-06-28 2006-01-26 Fachhochschule Fulda vertreten durch den Präsidenten Proteinreiches, pflanzliches Lebensmittel und Verfahren zu seiner Herstellung
US7618659B2 (en) * 2005-07-01 2009-11-17 Burcon Nurtrascience (MB) Corp. Production of canola protein
US20070054031A1 (en) * 2005-09-02 2007-03-08 Keshun Liu Methods of extracting, concentrating and fractionating proteins and other chemical components
US20070207254A1 (en) * 2006-03-03 2007-09-06 Specialty Protein Producers, Inc. Methods of separating fat from soy materials and compositions produced therefrom
CA2645333C (en) 2006-03-03 2017-10-10 Specialty Protein Producers, Inc. Methods of separating fat from non-soy plant materials and compositions produced therefrom
AR059728A1 (es) * 2006-03-03 2008-04-23 Specialty Protein Producers In Composiciones de proteinas derivadas de plantas
DE102007047764A1 (de) * 2007-10-04 2009-04-09 Süd-Chemie AG Entfernung unerwünschter Begleitstoffe aus Pflanzenproteinextrakten
US8623445B2 (en) 2008-05-16 2014-01-07 Bio-Extraction Inc. Protein concentrates and isolates, and processes for the production thereof
US8821955B2 (en) 2008-05-16 2014-09-02 Siebte Pmi Verwaltungs Gmbh Protein concentrates and isolates, and processes for the production thereof
ES2543782T3 (es) * 2008-05-16 2015-08-21 Siebte Pmi Verwaltungs Gmbh Concentrados y aislados de proteínas de semillas oleaginosas y procedimientos para la producción de los mismos
US20100036099A1 (en) 2008-07-11 2010-02-11 Martin Schweizer Soluble canola protein isolate production ("nutratein")
CN102202518B (zh) 2008-08-18 2017-08-08 伯康营养科学(Mb)公司 无需热处理生产油菜蛋白分离物
WO2010020039A1 (en) * 2008-08-18 2010-02-25 Burcon Nutrascience (Mb) Corp. Preparation of canola protein isolate from canola oil seeds ("blendertein")
NZ591364A (en) 2008-08-19 2013-03-28 Burcon Nutrascience Mb Corp Soluble canola protein isolate production from protein micellar mass
BRPI1012171B1 (pt) 2009-05-14 2019-09-03 Burcon Nutrascience Mb Corp produção de produto de proteína de canola sem tratamento térmico ("c200cac")
WO2011000094A1 (en) * 2009-07-02 2011-01-06 Bioexx Specialty Proteins Ltd. Process for removing organic solvents from a biomass
CA2801536C (en) 2009-11-11 2018-10-23 Bioexx Specialty Proteins Ltd. Protein concentrates and isolates, and processes for the production thereof from macroalgae and/or microalgae
DK2498619T3 (en) 2009-11-11 2017-08-07 Siebte Pmi Verwaltungs Gmbh PROTEIN CONCENTRATES AND ISOLATES, AND PROCEDURES FOR PRODUCING THEREOF FROM SHAKED OIL PREPARATION
US8404884B2 (en) * 2010-03-26 2013-03-26 University Of Saskatchewan Process for the extraction of macromolecules from a biomass using thin stillage
CN104487447B (zh) * 2012-05-31 2018-10-30 新加坡科技研究局 用于降低蛋白制剂领域中的聚集物含量的混合的多官能性金属亲和表面
US10433571B2 (en) 2014-08-27 2019-10-08 Burcon Nutrascience (Mb) Corp. Preparation of soy protein products (“S810”)

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3966986A (en) * 1973-01-26 1976-06-29 Tenco Brooke Bond Limited Method for enhancing tea flavor and product thereof
US3966981A (en) * 1974-11-26 1976-06-29 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Process for removing residual solvents
US4285862A (en) * 1976-09-30 1981-08-25 General Foods, Limited Protein isolate product
CA1028552A (en) 1976-09-30 1978-03-28 Edward D. Murray Protein product and process for preparing same
US4169981A (en) * 1977-01-31 1979-10-02 White Eugene F Strand responsive electrical switch
CA1099576A (en) * 1978-03-23 1981-04-21 Chester D. Myers Improved process for isolation of proteins
US4496599A (en) * 1983-03-10 1985-01-29 Cornell Research Foundation, Inc. Process for producing defatted and debittered soybean meal
US5254673A (en) * 1991-12-26 1993-10-19 Opta Food Ingredients, Inc. Purification of zein from corn gluten meal
JP3213453B2 (ja) * 1993-09-27 2001-10-02 明治乳業株式会社 ホエー中の脂肪球皮膜物質からの塩類の除去方法及び各種成分の分離方法
US5844086A (en) * 1996-01-31 1998-12-01 Stilts Corporation Oil seed protein extraction
CN1220094A (zh) * 1997-12-16 1999-06-23 樊彩霞 一种亚麻籽综合利用方法
DK1282361T3 (da) * 2000-05-15 2007-01-08 Univ Saskatchewan Fraktionering og behandling af oliefrösskrå

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102088866B (zh) * 2008-07-11 2014-08-13 伯康营养科学(Mb)公司 可溶性卡诺拉蛋白质分离物的生产
CN102333453A (zh) * 2009-02-27 2012-01-25 弗兰霍菲尔运输应用研究公司 由油菜籽制备的蛋白制备物
US9351514B2 (en) 2009-02-27 2016-05-31 Fraunhofer-Gesellschaft Zur Forderung Der Angewandten Forschung E.V. Protein preparation produced from rape seeds

Also Published As

Publication number Publication date
US20040049013A1 (en) 2004-03-11
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