CN1671847A - 在植物中获得病原体抗性的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及通过降低NADPH氧化酶的表达、活性或功能，在植物中产生或增强病原体抗性的方法。

Description

在植物中获得病原体抗性的方法

本发明涉及在植物中通过降低NADPH氧化酶表达、活性或功能用于产生或增强病原体抗性的方法。

植物生物技术工作的目标是产生具有有益新特性的植物，例如用于增强农业生产力。植物对病原体的天然防御机制常常是不足的。单真菌病每年导致数十亿美圆的损失。自植物、动物或微生物来源导入外源基因可增强防御性。实例为通过表达苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)内毒素保护免受对通过昆虫摄食的损害(Vaeck等人(1987)Nature 328：33-37)或通过表达大豆几丁质酶保护免受真菌感染(Broglie等人，(1991)Science254：1194-1197)。然而，大部分描述的方法只对单一病原体或狭窄范围的病原体提供抗性。

只存在几种使植物对较广谱病原体具有抗性的方法。系统性获得抗性(SAR)-在多种植物病原体相互作用中的防御机制—可通过应用内源性信号物质如茉莉酸(JA)或水杨酸(SA)进行提供(Ward等人，(1991)Plant Cell 3：1085-1094；Uknes等人(1992)Plant Cell 4(6)：645-656)。通过合成化合物如2，6-二氯异烟酸(INA)或S-甲基苯并(1，2，3)噻二唑-7-硫代羧酸酯(BTH；Bion)可达到相似作用(Friedrich等人(1996)Plant J 10(1)：61-70；Lawton等人(1996)Plant J.10：71-82)。在SAR的情况下具有正调节作用的发病机理相关(PR)蛋白质的表达在一些情况下也可引起病原体抗性。

在大麦中，Mlo基因座描述为对病原体防御的负调节物。Mlo基因的缺失引起对大多数霉病物种的抗性增加，并尤其是为种非特异抗性(Büschges R等人(1997)Cell 88：695-705；Jorgensen JH(1977)Euphytica26：55-62；Lyngkjaer MF等人，(1995)Plant Pathol 44：786-790)。通过常规育种获得的Mlo缺陷大麦变种在农业中已正在进行应用。尽管精耕细作，可能由于隐性的事实，已证实抗性是持久的。对在其它植物中，特别是谷类物种中的Mlo样抗性没有进行描述。已对来自其它谷类物种中的Mlo基因及多种同源物(homolog)进行鉴定并克隆(Büschges R等人(1997)Cell 88：695-705；WO98/04586；Schulze-Lefert P；Vogel J(2000)Trends Plant Sci.5：343-348)。已对用这些基因用于获得病原体抗性的多种方法进行了描述(WO98/04586；WO00/01722；WO99/47552)。缺点是Mlo介导的防御机制包含叶细胞的自发相继死亡(Wolter M等人(1993)Mol Gen Genet 239：122-128)。另一个缺点是Mlo缺陷基因型显示对半活体营养(hemibiotrophic)病原体如(稻瘟病菌(Magnaporte grisea；M.grisea))及禾旋孢腔菌(Cochliobolus sativus(蠕孢菌(Bipolarissorokiniana))的超敏反应(Jarosch B等人(1999)Mol Plant MicrobeInteract 12：508-514；Kumar J等人(2001)Phytopathology 91：127-133)。

将活性氧类(ROS；例如过氧化物(O_2-)、羟基自由基及H₂O₂)的释放归于对植物病原体的反应中有重要的保护功能(Wojtaszek P(1997)Biochem J 322：681-692)。细胞如何产生ROS的多种途径是已知的。在哺乳动物的巨噬细胞中，必需提及的特别是可转移电子到分子氧的酶NADPH氧化酶。在植物中，也已对其同源酶进行了鉴定(Lamb & Dixon(1997)Annu Rev Plant Physiol Plant Mol Biol 48：251)。

已显示在拟南芥菜(Arabidopsis thaliana)NADPH氧化酶的催化亚单位中的突变显示活性氧中间体(ROI)的积累降低。对于超敏反应(HR)，结果是不同的：用无毒力及细菌丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)显示在双重突变体中HR降低，而毒力卵菌寄生霜霉菌(Peronosporaparasitica)显示HR升高。然而，与野生型植物相比，毒力及无毒力丁香假单胞菌菌株的生长均未发生变化(Torres MA等人(2002)Proc Natl AcadSci USA 99：517-522)。同样，通过用生理相关浓度的抑制剂氯化二亚苯基碘(DPI)抑制NADPH氧化酶对病原体性真菌的发育无作用(Hückelhoven R & Kogel KH(1998)Mol Plant Microbe Interact 11：292-300)。吞噬细胞的大麦NADPH氧化酶(pNAox，吞噬细胞NADPH氧化酶的大亚单位gp91phox的同源物)的cDNA片段在基因库登录号：AJ251717)下进行了描述。

本发明的目的是提供用于在植物中防御病原体的新化合物，所述化合物在许多尽可能的不同植物物种，优选在农业中应用的农作物植物中引起对尽可能广泛病原体谱的有效防御。我们已发现通过本发明方法已达到本目。

本发明的第一个方面包括用于在植物中对至少一种病原体产生或增强抗性的方法，所述方法包括以下操作步骤：

a)降低在植物或其组织、器官、部分或细胞中NADPH氧化酶的蛋白质量、活性或功能，及

b)与起始植物相反或相比，选择其中对至少有一种病原体存在抗性或抗性增强的植物。

令人惊讶的是，通过用双链pNAox-dsRNA(“基因沉默”)序列特异RNA干扰方法降低大麦NADPH氧化酶(pNAox)在表皮细胞中的表达，显示Bgh感染后疾病水平显著降低(参考Haustoria的公式进行测定)。这个发现特别令人惊讶，因为与NADPH氧化酶相关的活性氧类(“氧化进发”)的释放一般归于保护性功能。

与Mlo相似，NADPH氧化酶表达的降低介导对多种禾谷类白粉菌大麦专化型(Blumeria graminis f.sp.hordei)分离株的广泛抗性。在瞬时基因沉默实验中，Bgh(吸器发育)的穿透率显著降低35％以上—其强度作用与通过Mlo-dsRNA获得的作用相对应(Schweizer P等人(2000)PlantJ 24：895-903)。在野生型大麦变种Pallas中，大约40％真菌穿透导致吸器的发育，通过导入NADPH氧化酶的双链RNA(pNAox-dsRNA)在NADPA氧化酶表达降低的情况下穿透率只达到大约25％。甚至在病原体敏感野生型变种如Pallas中，只可观察到大约40至50％的穿透率的事实，可归因于一直存在的基础抗性。由于这些发现，可认为酶NADPH氧化酶是用于病原体如Bgh成功穿透入植物细胞的主要元件。此外，此方法优于所有一般通过抗性介导蛋白质的过表达产生的病原体抗性表型的那些方法。可将基因进行关闭使(外源)蛋白质不表达。在理想情况下，只将内源性基因进行了灭活。这对于消费者的认可及接受有值得考虑的优点，所述消费者经常对具有外源蛋白质的植物不相信。本文中的非常特别的优点是应用可诱导启动子用于降低NADPH氧化酶量、活性或功能，例如，在病原体-可诱导启动子情况下，只在需要(即病原体攻击)时使表达成为可能。

原则上，根据本发明所述的方法可应用于所有植物物种，优选应用于NADPH氧化酶或其功能性等同物天然表达的植物。

对于本发明，“植物”表示植物界高等及低等植物的所有属和种。在这个表述中包括成熟植物、种子、枝条及幼苗，及部分、繁殖材料、植物器官、组织、原生质体、愈伤组织及其它培养物，例如来自它们的细胞培养物，及所有给予植物细胞功能性或结构单位的其它型组。成熟植物是指除幼苗外在任何发育阶段的植物。幼苗表示在早期发育阶段的幼小、未成熟植物。“植物”包含所有一年生及多年生单子叶及双子叶植物并以举例的方式但不受限制，包括南瓜属(Cucurbita)、蔷薇属(Rosa)、葡萄属(Vitis)、核桃属(Juglans)、草霉属(Fragaria)、百脉根属(Lotus)、苜蓿属(Medicago)、驴食豆属(Onobrychis)、车轴草属(Trifolium)、胡卢巴属(Trigonella)、豇豆属(Vigna)、柑桔属(Citrus)、亚麻属(Linum)、老鹳草属(Geranium)、木薯属(Manihot)、胡萝卜属(Daucus)、拟南芥属(Arabidopsis)、芸苔属(Brassica)、萝卜属(Raphanus)、白芥属(Sinapis)、颠茄属(Atropa)、辣椒属(Capsicum)、曼佗罗属(Datura)、天仙子属(Hyoscyamus)、番茄属(Lycopersicon)、烟草属(Nicotiana)，太阳花属(Solarium)、碧冬茄属(Petunia)、毛地黄属(Digitalis)、马郁兰属(Majorana)、菊苣属(Cichorium)，向日葵属(Helianthus)、莴苣属(Lactuca)、雀麦属(Bromus)、天门冬属(Asparagus)、金鱼草属(Antirrhinum)、Heterocallis、Nemesis、天竺葵属(Pelargonium)、稷属(Panicum)、狼尾草属(Pennisetum)，毛莨属(Ranunculus)，千里光属(Senecio)、喇叭舌属(Salpiglossis)、黄瓜属(Cucumis)，Browaalia、大豆属(Glycine)、豌豆属(Pisum)、菜豆属(Phaseolus)、黑麦草属(Lolium)、稻属(Oryza)、玉米属(Zea)、燕麦属(Avena)、大麦属(Hordeum)、黑麦属(Secale)、小麦属(Triticum)、高粱属(Sorghum)、云杉属(Picea)及杨属(Populus)。

术语“植物”优选包含单子叶农作物植物，例如谷类物种如小麦、大麦、谷子、黑麦、黑小麦(triticale)、玉米、稻、高粱或燕麦及甘蔗。

术语进一步包含双子叶农作物植物例如，

-芸苔科(Brassicaceae)如油菜、芸苔、水芹、拟南芥菜、卷心菜或芸苔，豆科(Leguminosae)如大豆、苜蓿、豌豆或花生。

-茄科(Solanaceae)如马铃薯、烟草、番茄、茄子或红辣椒，菊科(Asteraceae)如向日葵、万寿菊、莴苣或金盏草，

-葫芦科(Cucurbitaceae)如瓜、南瓜/西葫芦或胡瓜，

及亚麻子、棉花、大麻、三叶草、菠菜、亚麻、辣椒、胡萝卜、甜菜根、萝卜、甜菜、甘薯、黄瓜、花椰菜、绿花椰菜、芦笋、洋葱、大蒜、块根芹菜、草莓、悬钩子、黑霉、菠萝及多种树、灌木、坚果及藤蔓物种。树种优选包含李树、樱桃树、桃树、油桃、杏树、香蕉树、paw paw、芒果树、苹果树、梨树、温柏。

进一步包含的为观赏植物，有用或观赏树、花、切花、灌木或草坪，以举例的方式但不限于蔷薇科(Rosaceae)如玫瑰，杜鹃花科(Ericaceae)如杜鹃花及azaleas，大戟属(Euphorbiaceae)如猩猩木及巴豆，石竹科(Caryophyllaceae)如康乃馨，茄科(Solanaceae)如牵牛花，苦苣台科(Gesneriaceae)如非洲堇、凤仙花科(Balsaminaceae)如勿碰我，兰科(Orchidaceae)如兰花，鸢尾科(Iridaceae)如洋葱(gladioli)、鸢尾、小苍兰及番红花，菊科(Compositae)如金盏草、牻牛儿苗科(Geraniaceae)如天竺葵，百合科(Liliaceae)如龙血树，桑科(Moraceae)如无花果，天南星科(Araceae)如喜林芋属(philodendron)等等。

优选达到本发明目的的为作为食物或饲料进行利用的植物，非常特别优选单子叶属或种，如以上描述的谷类物种。

方法非常特别优选应用于单子叶植物，最优选具有农业上重要性的植物如小麦、燕麦、谷子、大麦、黑麦、玉米、稻子、荞麦、高粱、黑小麦、斯佩尔特小麦(spelt)、亚麻子或甘蔗。

“病原体抗性”表示在病原体感染后，植物的疾病症状降低或减弱。症状可为多方面，但优选包含直接或间接对植物的品质、产量、用作饲料或粮食的适合性有副作用或使农作物播种、种植、收获或加工变的困难。

“赋予”、“存在”、“产生”或“增强”病原体抗性表示在其它方面相同条件下(例如，气候条件、生长条件、病原体物种等等)，与没有应用根据本发明方法的野生型植物(“原初植物”)相比，由于应用根据本发明所述的方法，特定植物种或变种的防御机制对一种或多种病原体的抗性增强。抗性增强证明它自身优选疾病症状表现降低，除上述的不利作用外，疾病症状也包括，例如，病原体进入植物或植物细胞的穿透率或在同一植物或植物细胞上的繁殖率。在本文中，疾病症状优选降低至少10％或至少20％，特别优选至少40％或60％，非常特别优选至少70％或80％并最优选至少90％或95％。

与原初植物相反或进行比较，对至少一种病原体存在或增强抗性的植物而言“选择”表示所有适于识别病原体抗性存在或增强的那些方法。这些可为病原体感染症状(例如，在真菌感染情况下吸器的发育)，但也包括与植物品质、产量、用于作为饲料或粮食等的适合性相关的上述症状。

本发明范围内的“病原体”以举例的方式但不局限于指病毒或类病毒、细菌、真菌、动物害虫例如昆虫或线虫。特别优选的为真菌，如霉菌。然而，可以推定NADPH氧化酶的表达、它的活性或它的功能也引起对其它病原体的抗性。以下病原体可以举例的方式但不受限制进行阐述：

1.真菌病原体及真菌样病原体：

真菌病原体及真菌样病原体(例如管毛生物界(Chromista))优选来自包含根肿菌门(Plasmodiophoramycota)、卵菌门(Oomycota)、子囊菌门(Ascomycota)、壶菌(Chytridiomycetes)、接合菌(Zygomycetes)、担子菌门(Basidiomycota)及半知菌(Deuteromycetes)。在表1和2中提及的病原体及与它们相关的疾病可以举例而非限制的方式提及。

表1：真菌植物疾病

疾病	病原体
		叶锈病	隐匿柄锈菌(Puccinia recondita)
条锈病	条形柄锈菌(P.striiformis)
		白粉病	禾谷类白粉菌(Erysiphe graminis/Blumeriagraminis)
颖苞斑	颖枯壳针胞(Septoria nodorum)
		叶斑	小麦壳针孢(Septoria tritici)
穗镰刀菌病	镰孢种(Fusarium spp.)
		眼斑病	小麦基腐病假尾孢(Pseudocercosporellaherpotrichoides)
黑粉病	黑粉菌种(Ustilago spp.)
		腥黑穗病	小麦网腥黑粉菌(Tilletia caries)
全蚀病	禾顶囊壳菌(Gaeumannomyces graminis)
		炭疽叶枯病炭疽茎腐病	禾生炭疽菌(Colletotrichum graminicola)(有性型：Glomerella graminicola Politis)；塔地囊孢壳菌(Giomerella tucumanensis)(无性型：Glomerella falcatum Went)
曲霉穗及核腐病	黄曲霉(Aspergillus flavus)
		带纹叶及叶鞘斑点	立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kuhn)＝小菌核丝核菌(Rhizoctonia microsclerotia J.Matz)(有性型：瓜亡革菌(Thanatephoruscucumeris))
黑维管束病	局限枝顶孢霉(Acremonium strictum W.Gams)＝顶头孢(Cephalosporium acremonium

	Auct.non Corda)
		黑核腐病	可可双毛孢(Lasiodiplodia theobromae)＝可可球二孢(Botryodiplodia theobromae)
Borde blanco	微皮伞种(Marasmiellus sp.)
		褐斑病(黑斑病、茎腐病)	玉蜀黍节壶菌(Physoderma maydis)
头孢核腐病	局限枝顶孢霉(Acremonium strictum)＝顶头孢(Cephalosporium acremonium)
		芽腐病	菜豆壳球孢
伏革菌属穗腐病	瓜亡革菌(Thanatephorus cucumeris＝笸木伏革菌(Corticium sasakii))
		弯孢霉叶斑	Curvularia clavata、画尾草弯孢(C.eragrostidis)＝斑点弯孢(C.maculans)(有性型：画尾草旋孢腔菌(Cochlioboluseragrostidis)、不等弯孢(Curvulariainaequalis)、中间弯孢(C.intermedia(有性型：Cochliobolus intermedius)、弯孢(Curvularia lunata)(有性型：弯孢(Cochliobolus lunatus)、苍白弯孢(有性型：Cochliobolus pallescens)、Curvulariasenegalensis、C.tuberculata(有性型：Cochliobolus tuberculatus)
亚隔孢壳属叶斑	Didymella exitalis
		色二孢穗腐病及茎腐病	干腐色二孢(Diplodia frumenti)(有性型：Botryosphaeria festucae)
色二孢穗腐病、茎腐病、种子腐病及种子枯萎	玉蜀黍色二孢(Diplodia maydis＝Stenocarpella maydis)
		色二孢叶斑或条纹	大孢色二孢叶(Stenocarpella macrospora＝Diplodialeaf macrospora)

表2：霜霉病

疾病	病原体
		褐纹霜霉	Sclerophthora rayssiae var.zeae
Crazy top霜霉	大孢指疫霉(Sclerophthora macrospora＝Sclerospora macrospora)
		绿穗霜霉病(禾生霜霉病)	禾生指梗霉(Sclerospora graminicola)
爪哇霜霉病	玉蜀黍指梗霉(Peronosclerospora maydis＝Sclerospora maydis)
		菲律宾霜霉病	菲律宾指梗霉(Peronosclerosporaphilippinensis＝Sclerospora philippinensis)
高粱霜霉病	高粱指梗霉(Peronosclerospora sorghi＝Sclerospora sorghi)
		Spontaneum霜霉病	Peronosclerospora spontanea＝Sclerospora spontanea
甘蔗霜霉病	甘蔗指梗霉(Peronosclerospora sacchari＝Sclerospora sacchari)
		干穗腐病(穗轴、核及茎腐病)	稻黑孢(Nigrospora oryzae)(有性型：Khuskia oryzae)
轻微穗腐病	链格孢(Alternaria alternata)＝纤细链格孢(A.tenuis)、灰绿曲霉(Aspergillus glaucus)、黑曲霉(A.niger)、曲霉种(Aspergillus spp.)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)(有性型：Botryotiniafuckeliana)、小克银汉霉种(Cunninghamella sp.)、苍白弯孢(Curvularia pallescens)、具柄矛束孢(Doratomyces stemonitis＝Cephalotrichum stemonitis)、

	大刀镰孢(Fusarium culmorum)、简单节葡孢菌(Gonatobotrys simplex)、Pithomyces maydicus、小孢根霉(Rhizopus microsporus Tiegh.)、葡萄枝根霉(R.stolonifer)＝黑根霉(R.nigricans)、勃龙帚霉(Scopulariopsis brumptii)
		麦角(horse’s tooth)	Claviceps gigantea(无性型：Sphacelia sp.)
眼斑病	玉蜀黍短梗霉(Aureobasidium zeae＝Kabatiella zeae)
		镰孢霉穗及茎腐病	半粘镰孢霉(Fusarium subglutinans)＝串珠镰孢亚粘团变种(F.moniliformevar.subglutinans)
镰孢霉核、根及茎腐病、种子腐病及幼苗枯萎	串珠镰孢(Fusarium moniliforme)(有性型：弗基克罗赤霉(Gibberella fujikuroi))
		镰孢茎腐病、幼苗根腐病	燕麦镰孢(Fusarium avenaceum)(有性型：燕麦赤霉(Gibberella avenacea))
赤霉穗及茎腐病	玉蜀黍赤霉(Gibberella zeae)(无性型：禾本科镰孢(Fusariumgraminearum))
		黑穗腐病	Botryosphaeria zeae＝Physalospora zeae(无性型：Macrophoma zeae)
灰叶斑(尾孢叶斑)	高粱尾孢(Cercospora sorghi)＝高粱尾孢玉蜀黍变种(C.sorghi var.maydis)、玉蜀黍-玉蜀黍尾孢(C.zeae-maydis)
		长孺孢根腐病	Exserohilum pedicellatum＝Helminthosporium pedicellatum(有性型：Setosphaeria pedicellata)

单孢支霉穗腐病(支孢腐病)	芽枝状支孢(Cladosporium cladosporioides)＝芽枝状单孢支霉(Hormodendrumcladosporioides)、C.herbarum(有性型：Mycosphaerella tassiana)
		透斑菌叶斑病	玉蜀黍透斑菌(Hyalothyridium maydis)
晚期枯萎病	玉蜀黍头孢(Cephalosporium maydis)
		轻微叶斑病	链格孢、玉蜀黍壳二孢(Ascochyta maydis)、小麦壳二孢(A.tritici)、A.zeicola、王莲长蠕孢(Bipolaris victoriae)＝Helminthosporium victoriae)(有性型：王莲旋孢腔菌(Cochliobolusvictoriae))、禾旋孢腔菌(C.sativus)(无性型：Bipolaris sorokiniana＝H.sorokinianum＝H.sativum)、黑附球菌(Epicoccum nigrum)、明脐霉(Exserohilum prolatum＝Drechsleraprolata)(有性型：Setosphaeria prolata)、粘囊孢(Graphium penicillioides)、Leptosphaeria maydis、Leptothyrium zeae、Ophiosphaerella herpotricha、(无性型：Scolecosporiella sp.)、Paraphaeosphaeria michotii，Phoma sp.，Septoria zeae，S.zeicola，S.zeina
北方玉米叶枯病(白稻瘟病、冠状茎腐、条纹)	网状球壳菌(Setosphaeria turcica)(无性型：大斑病长蠕孢(Exserohilum turcicum＝Helminthosporium turcicum))
		北方玉米叶枯病长孺孢穗腐病(race 1)	炭色旋孢腔菌(Cochliobolus carbonum)(无性型：炭色长蠕孢(Bipolaris zeicola＝Helminthosporium carbonum)

青霉穗腐病(蓝眼、青霉腐病)	青霉种(Penicillium spp.)、产黄青霉(P.chrysogenum)、扩展青霉(P.expansum)、草酸青霉(P.oxalicum)
		Phaeocytostroma茎腐病及根腐病	Phaeocytostroma ambiguum，＝Phaeocytosporella zeae
Phaeosphaeria叶斑病	Phaeosphaeria maydis＝Sphaerulina maydis
		色二孢穗腐病(Botryosphaeria穗腐病)	Botryosphaeria festucae＝Physalospora zeicola(无性型：干腐色二孢)
紫色叶鞘	半寄生细菌及真菌
		Pyrenochaeta茎腐和根腐病	Phoma terrestris＝Pyrenochaeta terrestris
腐霉根腐病	腐霉属中的种(Pythium spp.)、P.arrhenomanes，禾生腐霉(P.graminicola)
		腐霉茎腐病	瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum)＝巴特勒腐霉(P.butleri L.)
红核病(穗霉、叶及种子腐病)	黑附球菌
		丝核菌穗腐病	玉蜀黍丝核菌(Rhizoctonia zeae)(有性型：Waitea circinata)
丝核菌根腐病及茎腐病	立枯丝核菌、玉蜀黍丝核菌(Rhizoctonia zeae)
		轻微根腐病	链格孢、高粱尾孢、Dictochaeta fertilis、锐顶镰孢(Fusarium acuminatum)(有性型：Gibberella acuminata)、木贼镰孢(F.equiseti)(有性型：G.intricans)、F.oxysporum、F.pallidoroseum、F.poae、F.roseum、G.cyanogena、(无性型：F.sulphureum)，Microdochium bolleyi、毛霉种(Mucor sp.)、Periconia circinata、恶疫霉(Phytophthoracactorum)、德雷疫霉(P.drechsleri)、烟草

	疫霉寄生变种(P.nicotianae var.parasitica)、少根根霉(Rhizopus arrhizus)
		Rostratum叶斑病(长蠕孢叶病、穗及茎腐病)	孔型网状球壳菌(Setosphaeria rostrata)、(无性型：喙状明脐菌(Exserohilumrostratum＝Helminthosporium rostratum)
普通谷类锈病	高粱柄锈菌(Puccinia sorghi)
		南方谷类锈病	多堆柄锈菌(Puccinia polysora)
热带谷类锈病	壳锈菌(Physopella pallescens)、玉蜀黍壳锈菌(P.zeae＝Angiopsora zeae)
		小核菌穗腐病(南方枯萎)	齐整小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc.)(有性型：Athelia rolfsii)
种子腐病-幼苗枯萎	蠕孢菌Bipolaris sorokiniana、B.zeicola＝炭色长蠕孢(Helminthosporium carbonum)玉米色二孢、明脐霉Exserohilum pedicillatum、Exserohilum turcicum＝Helminthosporiumturcicum、燕麦镰孢、大刀镰孢(F.culmorum)、串珠镰孢(F.moniliforme)、玉蜀黍赤霉(Gibberella zeae)(无性型：禾本科镰孢(F.graminearum))、菜豆壳球孢、青霉种、拟茎点霉(Phomopsis sp.)、腐霉种、立枯丝核菌，玉蜀黍丝核菌(R.zeae)、Sclerotium rolfsii、穗霉种(Spicaria sp.)
		壳月孢叶斑病	壳月孢种(Selenophoma sp.)
鞘腐病	禾顶囊壳
		壳腐病	禾漆斑菌(Myrothecium gramineum)
青贮霉	紫红曲(Monascus purpureus)、红色红曲(Mruber)
		普通黑穗病	玉蜀黍黑粉菌(Ustilago zeae)＝玉蜀黍黑粉菌(U.maydis)
黑穗病、false	稻绿核菌(Ustilaginoidea virens)

头黑穗病	丝轴黑粉菌(Sphacelotheca reiliana＝Sporisorium holcisorghi)
		南方谷类叶枯病及茎腐病	异旋孢腔菌(Cochliobolus heterostrophus)(无性型：玉蜀黍蠕孢菌＝玉蜀黍长蠕孢)
南方叶斑病	Stenocarpella macrospora＝大孢色二孢(Diplodia macrospora)
		轻微茎腐病	高粱尾孢、表球镰孢(Fusarium episphaeria)、节状镰孢(F.merismoides)尖镰孢(F.oxysporum)、Schlechtend、早熟禾镰孢(F.poae)、F.roseum、腐皮镰孢(F.solani)(有性型：Nectria haematococca)、三隔镰孢(F.tricinctum)、Mariannaea elegans、毛霉(Mucorsp.)、玉蜀黍褐孢座壳(Rhopographus zeae)、穗霉(Spicaria sp.)
贮藏腐烂	曲霉属中的种(Aspergillus spp.)、青霉属中的种及其它真菌
		焦油斑点病	玉蜀黍黑痣菌(Phyllachora maydis)
木霉穗腐病及根腐病	绿色木霉(Trichoderma viride)＝木素木霉(T.lignorum)有性型：Hypocrea sp.
		白穗腐病、根及茎腐病	Stenocarpella maydis＝玉蜀黍色二孢
黄叶枯病	壳二孢(Ascochyta ischaemi)、玉蜀黍叶点霉(Phyllosticta maydis)(有性型：玉蜀黍-玉蜀黍球腔菌(Mycosphaerella zeae-maydis))
		环纹叶斑病	高粱胶尾孢(Gloeocercospora sorghi)

以下是特别优选的

-根肿菌门如芸苔根肿菌(Plasmodiophora brassicae)(十字花科植物的甘蓝根肿病)、马铃薯粉痂菌(Spongospora subterranea)(洋芋的白痂病)、多粘霉(Polymyxa graminis)(谷类及草的根病)，

-卵菌门如莴苣盘梗霉(Bremia lactucae)(莴苣霜霉病)、在金鱼草(金鱼草霜霉(P.antirrhini))、洋葱(P.destructor)、菠菜(散展霜霉(P.effusa))、大豆(东北霜霉(P.manchurica))、烟草(“青霉”；P.tabacina)、苜蓿及三叶草(车轴草霜霉(P.trifolium))中的霜霉属(Peronospora)(霜霉病)、律草假霜霉(Pseudoperonosporahumuli)(蛇麻花霜霉病)、单轴霉(Plasmopara)(葡萄树霜霉病)(葡萄生单轴霉(P.viticola))及向日葵(霍尔斯单轴霉(P.halstedii))、大孢指疫霉(谷物及草的霜霉病)、腐霉(所有类型植物的种子腐病、幼苗猝倒及根腐病，例如德巴利腐霉(P.debaryanum)引起的甜菜猝倒病)，致病疫霉(Phytophthora infestans)(马铃薯枯萎病、番茄褐腐病等等)、白锈属(Albugo spec)(十字花科植物的白锈病)。

-子囊菌门如白小羊蹄菌(Microdochium nivale)(黑麦及小麦的雪霉病)、禾本科镰孢、大刀镰孢(主要在小麦中的部分穗不育)、尖镰孢(番茄的镰孢枯萎)、禾谷类白粉菌(大麦(大麦专化型)及小麦(小麦专化型)的白粉病)、豌豆白粉菌(Erysiphe pisi)(豌豆的白粉病)、Nectriagalligena(果树的Nectria canker)、葡萄钩丝壳(Uncinula necator)(葡萄树白粉病)、维管束假盘菌(Pseudopeziza tracheiphila)(葡萄树红热病)、麦角菌(Claviceps purpurea)(例如，黑麦及草的麦角症)、禾顶囊壳(小麦、黑麦及其它草的全蚀斑病(Take-All))、稻瘟病菌(稻瘟病)、麦类核腔菌(Pyrenophora graminea)(大麦叶条纹)、圆核腔菌(Pyrenophora teres)(大麦网斑病)、假麦草核腔菌(Pyrenophora tritici-repentis)(小麦叶枯病)、苹果黑星菌(Venturiainaequalis)(苹果斑点病)、核盘菌(Sclerotinia sclerotium)(茎断、茎腐)、苜蓿假盘菌(Pseudopeziza medicaginis)(苜蓿、白三叶草及红三叶草的叶斑病)。

-担子菌如肉孢核瑚菌(Typhula incarnata)(大麦、黑麦、小麦的核瑚菌病)、玉蜀黍黑粉菌(玉米的黑粉病)、裸黑粉菌(Ustilago nuda)(大麦散黑穗病)、小麦散黑粉菌(Ustilago tritici)(小麦、斯佩尔特小麦的散黑穗病)、燕麦散黑粉菌(Ustilago avenae)(燕麦散黑穗病)、立枯丝核菌(马铃薯的立枯丝核菌根腐病)、轴黑粉菌属中的某些种(Sphacelotheca spp.)(高粱的丝黑穗病)、亚麻栅锈菌(Melampsoralini)(亚麻锈病)、禾柄锈菌(小麦、大麦、黑麦、燕麦的茎锈病)、隐匿柄锈菌(小麦叶锈病)、Puccinia dispersa(黑麦褐锈病)、大麦柄锈菌(Puccinia hordei)(大麦叶锈病)、禾冠柄锈菌(Pucciniacoronata)(燕麦顶锈病)、条形柄锈菌(小麦、大麦、黑麦及许多草的黄锈病)、疣顶单胞锈菌(Uromyces appendiculatus)(大豆的褐锈病)、齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)(许多植物的根及茎腐病)。

-半知菌如小麦(小麦壳针孢)的颖枯壳针孢(颖斑枯病)、小麦基腐病假尾孢(小麦、大麦、黑麦的眼斑病)、黑麦喙孢(Rhynchosporium secalis)(黑麦及大麦的叶斑病)、茄链格孢(Alternaria solani)(马铃薯、番茄的早疫病)、甜菜茎点霉(Phoma betae)(甜菜上的黑点)、甜菜生尾孢(Cercospora beticola)(甜菜的叶斑)、芸苔链格孢(Alternariabrassicae)(油菜、卷心菜及其它十字花科植物的黑斑病)、大丽花轮枝孢(Verticillium dahliae)(黄萎病)、豆刺盘孢(Colletotrichumlindemuthianum)(大豆炭疽病)、黑胫茎点霉(Phoma lingam)(卷心菜及油菜的黑点)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)(葡萄藤、草莓、番茄、蛇麻花等等的灰霉)。

最优选的为致病疫霉(马铃薯枯萎病、番茄等等的褐腐病)、雪腐微结节菌(Microdochium nivale)(以前称为雪腐镰孢(Fusarium nivale)；黑麦及小麦的雪霉病)、禾本科镰孢、大刀镰孢(小麦部分穗不育)、尖镰孢(番茄的镰孢枯萎)、禾谷类白粉菌(大麦(大麦专化型)及小麦(小麦专化型))的白粉病)、稻瘟病菌(稻瘟病)、核盘菌(茎断、茎腐)、颖枯壳针孢及小麦壳针孢(小麦颖孢斑点)、芸苔链格孢(油菜、卷心菜及其它十字花科的黑斑病)、黑胫茎点霉(卷心菜及油菜的黑点)。

2.细菌病原体：

在表3中阐述的与它们相关的所有病原体及疾病，可以举例的方式但不受限制进行阐述。

表3：细菌疾病

疾病	病原体
		细菌叶枯病及茎腐病	燕麦假单胞菌燕麦亚种(Pseudomonas avenaesubsp.Avenae)
细菌叶斑病	野油菜黄单胞菌绒毛草致病变种(Xanthomonas campestris pv.Holcicola)
		细菌茎腐病	溶解肠杆菌(Enterobacter dissolvens)＝溶解欧文氏菌(Erwinia dissolvens)
细菌茎及顶腐病	胡萝卜软腐欧文氏菌软腐亚种(Erwiniacarotovora subsp.Carotovora)、菊欧文氏菌玉米致病变种(Erwinia chrysanthemi pv.Zeae)
		细菌条纹病	须亡草假单胞菌(Pseudomonasandropogonis)
巧克力斑点	丁香假单胞菌晕斑病变种(Pseudomonassyringae pv.coronafaciens)
		Goss’s细菌枯萎病(叶斑及枯萎)	密执安棍状杆菌内布拉斯加亚种(Clavibactermichiganensis subsp.Nebraskensis)＝密执安棒杆菌内布拉斯加变种(Corynebacteriummichiganense pv.nebraskense)
绒毛草斑点	丁香假单胞菌丁香致病变种
		紫叶鞘	半寄生性细菌
种子腐病-幼苗枯萎	枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)
		Stewart病(细菌性枯萎)	斯氏泛菌(Pantoea stewartii)＝斯氏欧文氏菌(Erwinia stewartii)
谷物矮化(achapparramiento，玉米矮化，Mesa Central或RioGrande玉米矮化)	孔氏螺原体(Spiroplasma kunkelii)

非常特别优选的为以下病原性细菌：

马铃薯坏腐棒状杆菌(Corynebacterium sepedonicum)(马铃薯细菌性环腐病)、胡萝卜软腐欧文氏菌(马铃薯细菌性软腐)、解淀粉欧文氏菌(Erwinia amylovora)(对梨、苹果、quince引起火疫病)、疮痂病链霉菌(Streptomyces scabies)(马铃薯疮痂病)、丁香假单胞菌烟草致病变种(烟草黑热)、丁香假单胞菌菜豆致病变种(菜豆油点)、丁香假单胞菌番茄致病变种(番茄细菌性斑)、野油菜黄单胞菌棉花致病变种(Xanthomonascampestris pv.malvacearum)(棉花细菌性枯萎)及野油菜黄胞菌稻致病变种(水稻及其它草的细菌性叶枯病)。

3.病毒病原体：

“病毒病原体”包括所有植物病毒例如烟草或黄瓜花叶病毒、环斑病毒、坏死病毒、玉米矮缩花叶病毒等等。

与它们相关的病原体及疾病在表4中可以举例而非限制性的方式提及。

表4：病毒性疾病

疾病	病原体
		美洲小麦条纹(小麦条纹花叶)	美洲小麦条纹花叶病毒(AWSMV)
大麦条斑花叶	大麦条斑花叶病毒(BSMV)
		大麦黄矮	大麦黄矮病毒(BYDV)
雀麦草花叶	雀麦草花叶病毒(BMV)
		谷物萎黄色斑	谷物萎黄色斑病毒(CCMV)
谷物褪绿脉带(巴西玉米花叶)	谷物裉绿脉带病毒(Corn chlorotic veinbanding virus CCVBV)
		谷物致死性坏死	玉米褪绿斑驳病毒(MCMV)与玉米矮缩花叶病毒(MDMV)A或B或小麦条斑花叶病毒(WSMV)的病毒复合体
黄瓜花叶	黄瓜花叶病毒(CMV)

狗牙根褪绿条斑	狗牙根褪绿条斑病毒(CCSV)
		约翰逊草花叶	约翰逊草花叶病毒(JGMV)
玉米丛矮	类菌原体(MLO)相关的
		玉米褪绿矮化	玉米褪绿矮缩病毒(MCDV)
玉米褪绿斑驳	玉米褪绿斑驳病毒(MCMV)
		玉米矮化花叶	玉米矮化花叶病毒(MDMV)A、D、E及F株
玉米叶斑	玉米叶斑病毒(MLFV)
		玉米线	玉米线病毒(MLV)
玉米花叶(谷物叶条纹，enanismo rayado)	玉米花叶病毒(MMV)
		玉米斑驳和褪绿矮化	玉米斑驳和褪绿矮化病毒
玉米透明环斑	玉米透明环斑病毒(MPRV)
		玉米raya gruesa	玉米raya gruesa virus(MRGV)
玉米雷亚朵非纳病(细条纹病)	玉米雷亚朵非纳病毒(MRFV)
		玉米红叶和红条纹	柔膜体
玉米红条纹	玉米红条纹病毒(MRSV)
		玉米环斑点	玉米环斑点病毒(MRMV)
玉米rio IV	玉米rio cuarto virus(MRCV)
		玉米粗缩(nanismoruvido)	玉米粗缩病毒(MRDV)(谷物分蘖病病毒)
玉米不育矮化	玉米不育矮化病毒(大麦黄化条纹病毒株)
		玉米条纹	玉米条纹病毒(MSV)
玉米条纹(玉米褪绿条纹，玉米白条)	玉米条纹叶枯病毒
		玉米矮化	玉米矮化病毒
玉米雄花穗败育	玉米雄花穗败育病毒(MTAV)
		玉米叶脉突起	玉米叶脉突起病毒(MVEV)
玉米袋鼠耳	玉米袋鼠耳病毒(MWEV)

玉米白叶	玉米白叶病毒
		玉米白线花叶	玉米白线花叶病毒(MWLMV)
小米红叶	小米红叶病毒(MRLV)
		北方谷物花叶	北方谷物花叶病毒(NCMV)
燕麦假玫瑰花(zakuklivanie)	燕麦假玫瑰花病毒
		燕麦不育矮缩	燕麦不育矮缩病毒(OSDV)
水稻黑条纹矮缩	水稻黑条纹矮缩病毒(RBSDV)
		水稻条纹	水稻条纹病毒(RSV)
高粱花叶	高粱花叶病毒(SrMV)(也称：甘蔗花叶病毒(SCMV)H、I及M株)
		甘蔗斐济病	甘蔗斐济病病毒(FDV)
甘蔗花叶	甘蔗花叶病毒(SCMV)A、B、D、E、SC、BC、Sabi及MB(以前称MDMV-B)株
		小麦斑点花叶	小麦斑点花叶病毒(WSMV)

4.动物害虫

4.1昆虫病原体：

昆虫例如甲虫，毛虫虱或螨可以举例的方式但不受限制进行阐述。优选为鞘翅目、双翅目、膜翅目、鳞翅目、食毛目、同翅目、半翅目、直翅目、缨翅目、革翅目、等翅目、虱目、蚤目、毛翅目等等属的昆虫。特别优选的为鞘翅目及鳞翅目昆虫例如欧洲玉米螟(ECB)、Diabrotica barberi(“北方玉米切根虫”)、Diabrotica undecimpunctata(“南方玉米切根虫”)、Diabrotica virgifera(“西方玉米切根虫”)、Agrotis ipsilon(“黑切根虫”)、Crymodes devastator(“玻璃状切根虫”)、Feltia ducens(“微黑切根虫”)，Agrotis gladiaria(“粘土状后背的(claybacked)切根虫”)、梳状叩头虫(Melanotus spp.)、Aeolus mellillus(“金针虫”)、Aeolus mancus(“小麦金针虫”)、Horistonotus uhlerii(“砂地金针虫”)、Sphenophorusmaidis(“玉米长喙象”)、Sphenophorus zeae(“牛草长喙象”)、Sphenophorusparvulus(“牧草长喙象”)、Sphenophorus callosus(“南方玉米长喙象”)、食叶鳃金龟属中的种(Phyllogphaga spp.)(“白蛴螬”)、Anuraphismaidiradicis(“谷物根蚜”)、Delia platura(“灰地种蝇”)、Colaspis brunnea(“葡萄肖叶甲”)、Stenolophus lecontei(“玉米深褐步甲”)和Cliviniaimpressifrons(“玉米籽细步甲”)。

其它可提及的昆虫为：甲角负泥虫(Oulema melanopus)、欧洲麦秆蝇(Oscinella frit)、金针虫(Agrotis lineatus)及蚜虫(例如燕麦粒蚜虫Rhopalosiphum padi、黑莓蚜虫Sitobion avenae)。

4.2线虫

与它们相关的病原体及疾病在表6中以举例而非限制的方式提及。

表6：寄生线虫

疾病	病原性线虫
		锥线虫病	锥线虫(Dolichodorus spp.)、异头锥线虫(D.heterocephalus)
球茎和茎线虫病；欧洲	鳞球茎茎线虫(Ditylenchus dipsaci)
		穿孔线虫病	香蕉穿孔线虫(Radopholus similis)
胞囊线虫病	燕麦胞囊线虫(Heterodera avenae)、玉米胞囊线虫(H.zeae)、墨西哥玉米胞囊线虫(Punctodera chalcoensis)
		剑线虫病	Xiphinema spp.，美洲剑线虫(X.americanum)、地中海剑线虫(X.mediterraneum)
伪根结线虫病	背侧珍珠线虫(Nacobbus dorsalis)
		纽带线虫病，哥伦比亚	哥伦比亚纽带线虫(Hoplolaimus columbus)
纽带线虫病	纽带线虫属的种(Hoplolaimus spp.)，帽状纽带线虫(H.galeatus)
		侵蚀	短体线虫属中的种(Pratylenchus spp.)，最短尾短体线虫(P.brachyurus)、刻痕短体线虫

	(P.crenatus)、六纹短体线虫(P.hexincisus)、疏忽短体线虫(P.neglectus)、穿刺短体线虫(P.penetrans)、斯克里布纳短体线虫(P.scribneri)、索恩短体线虫(P.thornei)、玉米短体线虫(P.zeae)
		针线虫病	长针线虫属中的种(Longidorus spp.)，短环长针线虫(L.breviannulatus)
环线虫病	小环线虫属中的种(Criconemella spp.)，C.ornata
		根结病	根结线虫属中的种(Meloidogyne spp.)，奇氏根结线虫(M.chitwoodi)、M.incognita、爪哇根结线虫(M.javanica)
螺旋线虫病	螺旋线虫属中的种(Helicotylenchus spp.)
		刺线虫病	刺线虫属中的种(Belonolaimus spp.)，长尾刺线虫(B.longicaudatus)
毛刺线虫病	类毛刺线虫属中的种(Paratrichodorus spp.)，大类毛刺线虫(P.christiei)、较小类毛刺线虫(P.minor)、锐利矮化线虫(Quinisulciusacutus)、毛刺线虫属中的种(Trichodorusspp.)
		矮化线虫病	不定矮化线虫(Tylenchorhynchus dubius)

非常特别优选的为马铃薯金线虫(Globodera rostochiensis)及马铃薯白线虫(G.pallida)(马铃薯、番茄及其它茄科的胞囊线虫)、甜菜胞囊线虫(Heterodera schachtii)(糖甜菜及饲用甜菜、油菜籽、卷心菜等的甜菜线虫)、燕麦胞囊线虫(燕麦及其它谷类物种的谷类胞囊线虫)、鳞球茎茎线虫(茎或球茎线虫，黑麦、燕麦、玉米、三叶草、烟草、甜菜的茎线虫)、Anguina tritici(小麦粒线虫(斯佩尔特小麦、黑麦)、北方根结线虫(Meloidogyne hapla)(胡萝卜、黄瓜、莴苣、番茄、马铃薯、甜菜、苜蓿的根结线虫)。

真菌或病毒病原体的优选单个变种的实例以下：

1.大麦：

真菌、细菌及病毒病原体：禾柄锈菌大麦专化型(大麦茎锈病)、禾谷类白粉菌大麦专化型(大麦白粉病)、大麦黄化矮病毒(BYDV)、病原性昆虫/线虫：Ostrinia nubilalis(欧洲玉米螟)、Agrotis ipsilon(黑切根虫)；Schizaphis graminum(麦二岔蚜)；Blissus leucopterusleucopterus(麦长蝽)；Acrosternum hilare(喜绿蝽)；Euschistus servus(扁盾蝽)；Deliaplatura(玉米种蝇)；Mayetiola destructor(小麦瘿蚊)；Petrobia latens(麦岩螨)。

2.大豆：

真菌、细菌或病毒病原体：大雄疫霉威氏大豆变种(Phytophthoramegasperma fsp.Glycinea)、菜豆壳球孢、立枯丝核菌、核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)、尖镰孢、菜豆间座壳大豆变种(Diaporthephaseolorum var.sojae)(大豆拟茎点霉(Phomopsis sojae))、菜豆间座壳caulivora变种(Diaporthe phaseolorum var.caulivora)、齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)、菊池尾孢(Cercospora kikuchii)、大豆尾孢(Cercospora sojina)、东北霜霉、束状刺盘孢(Colletotrichumdematium)(平头刺盘孢(Colletotrichum truncatum))、山扁豆生棒孢(Corynespora cassiicola)、大豆壳针孢(Septoria glycines)、大豆生叶点霉(Phyllosticta sojicola)链格孢、丁香假单胞菌威氏大豆变种、野油菜黄单胞菌菜豆致病变种、Microsphaera diffussa、半裸镰孢(Fusarium semitectum)、Phialophora gregata、大豆花叶病毒、大豆小丛壳(Glomerella glycines)、烟草环斑病病毒、烟草线条病毒、Phakopsorapachyrhizi、瓜果腐霉、终极腐霉(Pythium ultimum)、德巴利腐霉、番茄斑萎病毒、大豆胞囊线虫(Heterodera glycines)、腐皮镰孢(Fusarium solani)。

病原性昆虫/线虫：Pseudoplusia includens(大豆尺夜蛾)；Anticarsiagemmatalis(黎豆夜蛾)；Plathypena scabra(苜蓿绿夜蛾)；Ostrinianubilalis(欧洲玉米螟)；Agrotis ipsilon(黑切根虫)；Spodoptera exigua(甜菜夜蛾)；Heliothis virescens(棉卷叶蛾)；Helicoverpa zea(美洲棉铃虫)；Epilachna varivestis(墨西哥豆甲)；Myzus persicae(桃赤蚜)；Empoasca fabae(马铃薯小叶蝉)；Acrosternum hilare(喜绿蝽)；Melanoplus femurrubrum(赤腿蚱蜢)；Melanoplus differentialis(长额负蝗)；Hylemya platura(玉米种蝇)；Sericothrips variabilis(大豆蓟马)；Thrips tabaci(洋葱蓟马)；Tetranychus turkestani(土耳其斯坦叶螨)；Tetranychus urticae(二斑叶螨).

3.芸苔：

真菌、细菌或病毒病原体：白锈菌(Albugo candida)、芸苔链格孢(Alternaria brassicae)、Leptosphaeria maculans、立枯丝核菌、核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)、芸苔生球腔菌(Mycosphaerellabrassiccola)、终极腐霉(Pythium ultimum)、寄生霜霉、粉红镰孢(Fusarium roseum)、链格孢。

4.苜蓿：

真菌、细菌或病毒病原体：密执安棍状杆菌诡谲亚种(Clavibactermichiganense subsp.Insidiosum)、终极腐霉、畸雌腐霉(Pythiumirregulare)、华丽腐霉(Pythium splendens)、德巴利腐霉、瓜果腐霉、大雄疫霉、车轴草霜霉、Phoma medicaginis var.medicaginis、苜蓿尾孢(Cercospora medicaginis)、苜蓿假盘菌(Pseudopezizamedicaginis)、Leptotrochila medicaginis、镰孢、野油菜黄单胞菌苜蓿致病变种、根腐丝囊霉(Aphanomyces euteiches)、Stemphyliumherbarum、Stemphylium alfalfae。

5.小麦：

真菌、细菌或病毒病原体：丁香假单胞菌atrofaciens变种、冰草条黑粉菌(Urocystis agropyri)、野油菜黄单胞菌大麦致病变种、丁香假单胞菌丁香致病变种、链格孢、多主枝孢(Cladosporium herbarum)、禾本科镰孢、燕麦镰孢、大刀镰孢、小麦散黑粉菌(Ustilago tritici)、小麦壳二孢(Ascochyta tritici)、禾生头孢(Cephalosporiumgramineum)、禾生刺盘孢(Collotetrichum graminicola)、小麦禾白粉菌、小麦禾柄锈菌(Puccinia graminis)、小麦隐匿柄锈菌、条形柄锈菌、偃麦草核腔菌(Pyrenophora tritici-repentis)、颖枯壳针孢、小麦壳针孢、燕麦壳针孢(Septoria avenae)、小麦基腐病假尾孢、立枯丝核菌、谷类丝核菌(Rhizoctonia cerealis)、禾顶囊壳小麦变种、瓜果腐霉、终极腐霉、蠕孢菌(Bipolaris sorokiniana)、大麦黄矮病毒、雀麦草花叶病毒、土传小麦花叶病毒、小麦线条花叶病毒、小麦梭斑病毒、美洲小麦条点花叶病毒、麦角菌(Claviceps purpurea)、小麦腥黑粉菌(Tilletia tritici)、光滑黑粉菌(Tilletia laevis)、小麦黑粉菌(Ustilago tritici)、印度腥黑粉菌(Tilletia indica)、立枯丝核菌、Pythium arrhenomannes、禾生腐霉(Pythium gramicola)、瓜果腐霉、高原病毒(High Plains Virus)、欧洲小麦线条病毒、小麦禾柄锈菌(小麦茎锈病)、禾谷类白粉菌小麦专化型(小麦白粉病)。

病原性昆虫/线虫：Pseudaletia unipunctata(行军虫)；Spodopterafrugiperda(秋夜蛾)；Elasmopalpus lignosellus(小玉米秸蛀心虫)；Agrotis orthogonia(西部切根虫)；Elasmopalpus Zignosellus(小玉米秸蛀心虫)；Oulema melanopus(橙足负泥虫)；Hypera punctata(车轴草叶象甲)；Diabrotica undecimpunctata howardi(南方玉米切根虫)；俄小麦蚜；Schizaphis graminum(麦二岔蚜)；Macrosiphum avenae(英谷物蚜)；Melanoplus femurrubrum(赤腿蚱蜢)；Melanoplusdifferentialis(长额负蝗)；Melanoplus sanguinipes(迁徒蚱蜢)；Mayetiola destructor(小麦瘿蚊)；Sitodiplosis mosellana(麦红吸浆虫)；Meromyza americana(小麦秆蝇)；Hylemya coarctata(小麦鳞茎蚊)；Frankliniella fusca(烟草蓟马)；Cephus cinctus(小麦秆叶蜂)；Aceriatulipae(郁金香瘤瘿螨).

6.向日葵：

真菌、细菌或病毒病原体：Plasmophora halstedii、核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum)、翠菊黄萎病菌(Aster Yellows)、向日葵壳针孢(Septoriahelianthi)、向日葵拟茎点霉(Phomopsis helianthi)、向日葵链格孢(Alternaria helianthi)、百日草链格孢(Alternaria zinniae)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、Phoma macdonaldii、菜豆壳球孢、二孢白粉菌(Erysiphe cichoracearum)、稻根霉(Rhizopus oryzae)、少根根霉、匍枝根酶(Rhizopus stolonifer)、向日葵柄锈菌(Pucciniahelianthi)、大丽花轮枝孢(Verticillium dahliae)、胡萝卜软腐病欧文氏菌Carotovora致病变种、顶头孢(Cephalosporium acremonium)、隐地疫霉(Phytophthora cryptogea)、婆罗门参白锈(Albugotragopogonis)。

病原性昆虫/线虫：Suleima helianthana(向日葵芽小卷叶蛾)；Homoeosoma electellum(向日葵卷叶蛾)；zygogramma exclamationis(向日葵甲虫)；Bothyrus gibbosus(胡萝卜金龟)；Neolasiopteramurtfeldtiana(向日葵籽瘿蚊).

7.玉米：

真菌、细菌或病毒病原体：串珠镰孢亚粘团变种、斯氏欧文氏菌、串珠镰孢、玉米赤霉(禾本科镰孢)、Stenocarpella maydi(玉米色二孢)、畸雌腐霉、德巴利腐霉、禾生腐霉(Pythium graminicola)、华丽腐霉、终极腐霉、瓜果腐霉、黄曲霉、玉米蠕孢菌0，T(Cochliobolusheterostrophus)、炭色长蠕孢I，II & III(Cochliobolus carbonum)、大斑凸脐蠕孢(Exserohilum turcicum)I，II & III、小梗长蠕孢(Helminthosporium pedicellatum)、玉蜀黍节壶菌、玉蜀黍叶点霉(Phyllosticta maydis)、玉蜀黍球梗孢(Kabatiella maydis)、高粱尾孢(Cercospora sorghi)、玉蜀黍黑粉菌、高粱柄锈菌、多堆柄锈菌、菜豆壳球孢、草酸青霉菌、稻黑孢(Nigrospora oryzae)、多主枝孢(Cladosporium herbarum)、弯孢(Curvularia lunata)、不等弯孢、苍白弯孢、密执安棒状杆菌内布拉斯加亚种、绿色木霉(Trichoderma viride)、玉米矮花叶病毒A&B、小麦线条花叶病毒、玉米褪绿矮缩病毒、高粱麦角(Claviceps sorghi)、燕麦假单胞菌(Pseudonomas avenae)、菊欧文氏菌玉米致病变种、胡萝卜软腐病欧文氏菌、Cornstunt spiroplasma、大孢色二孢(Diplodiamacrospora)、大孢指疫霉(Sclerophthora macrospora)、高粱指霜霉(Peronosclerospora sorghi)、菲律宾指霜霉(Peronosclerosporaphilippinesis)、玉蜀黍指霜霉(Peronosclerospora maydis)、甘蔗指霜霉(Peronosclerospora sacchari)、Spacelotheca reiliana、玉蜀黍壳锈菌(Physopella zeae)、玉蜀黍头孢、顶头孢(Caphalosporiumacremonium)、玉米褪绿斑点病毒、高原病毒、玉米花叶病毒、玉米雷亚朵非纳病毒、玉米线条病毒(MSV)、玉米条纹叶枯病毒、玉米粗矮病毒。

病原性昆虫/线虫：Ostrinia nubilalis(欧洲玉米螟)；Agrotis ipsilon(黑切根虫)；美洲棉铃虫；Spodoptera frugiperda(秋夜蛾)；Diatraeagrandiosella(西南玉米螟)；Elasmopalpus lignosellus(小玉米秸蛀心虫)；Diatraea saccharalis(蔗螟)；Diabrotica virgifera(西部玉米根虫)；Diabrotica longicornis barberi(北部玉米根虫)；Diabroticaundecimpunctata howardi(南部玉米根虫)；梳爪叩头虫属的种(金针虫)；Cyclocephala borealis(北部臭金龟子；蛴螬)；Cyclocephalaimmaculata(南部臭金龟子；蛴螬)；Popillia japonica(日本甲虫)；Chaetocnema pulicaria(玉米跳甲)；Sphenophorus maidis(玉米谷象)；Rhopalosiphum maidis(玉米叶蚜)；Anuraphis maidiradicis(玉米根蚜)；Blissus leucopterus leucopterus(麦长蝽)；Melanoplusfemurrubrum(赤腿蚱蜢)；Melanoplus sanguinipes(迁徒蚱蜢)；Hylemva platura(玉米种蝇)；Agromyza parvicornis(玉米斑潜蝇)；Anaphothrips obscrurus(美洲锥尾蓟马)；Solenopsis milesta(窃蚁)；Tetranychus urticae(二斑叶螨)。

8.高粱：

真菌、细菌或病毒病原体：大斑凸脐蠕孢、禾生刺盘孢(Glomerellagraminicola)、高粱尾孢(Cercospora sorghi)、高粱胶尾孢、高梁壳二孢(Ascochyta sorghina)、丁香假单胞菌丁香致病变种、野油菜黄单胞菌绒毛草致病变种、须芒草假单胞菌(Pseudomonasandropogonis)、紫病锈菌(Puccinia purpurea)、菜豆壳球孢、Perconiacircinata、串珠镰孢、链格孢、高梁蠕孢菌(Bipolaris sorghicola)、高粱生长孺孢(Helminthosporium sorghicola)、弯孢、Phoma insidiosa、燕麦假单胞菌(Pseudomonas alboprecipitans)、高粱座枝孢(Ramulispora sorghi)、高粱生座枝孢(Ramulispora sorghicola)、甘蔗黑痣菌(Phyllachara sacchari)、Sporisorium reilianum(丝轴黑粉菌)、高粱轴黑粉菌(Sphacelotheca cruenta)、Sporisorium sorghi、甘蔗花叶H、玉米矮花叶病毒A&B、高粱麦角(Claviceps sorghi)、立枯丝核菌、局限枝顶孢霉、大孢指疫霉、高粱指霜霉、菲律宾指霜霉、禾生指梗霉、禾本科镰孢、尖镰孢、Pythium arrhenomanes、禾生腐霉。

病原性昆虫/线虫：Chilo partellus(高梁蛀虫)；Spodoptera frugiperda(秋夜蛾)；美洲棉铃虫；Elasmopalpus lignosellus(小玉米秸蛀心虫)；Feltia subterranea(粗肤地老虑)；Phyllophaga crinita(蛴螬)；拟步甲属(Eleodes)、Conoderus属和天牛属(Aeolus)中的种(金针虫)；Oulemamelanopus(橙足负泥虫)；Chaetocnema pulicaria(玉米跳甲)；Sphenophorus maidis(玉米谷象)；Rhopalosiphum maidis(玉米叶蚜)；Sipha flava(蔗黄伪毛蚜)；Blissus leucopterus leucopterus(麦长蝽)；Contarinia sorghicola(高梁瘿蚊)；Tetranychus cinnabarinus(朱砂叶螨)；Tetranychus urticae(二斑叶螨).

9.棉花

病原性昆虫/线虫：棉卷叶蛾；美洲棉铃虫；Spodoptera exigua(甜菜夜蛾)；Pectinophora gossypiella(棉红铃虫)；Anthonomus grandisgrandis(棉铃象虫甲)；Aphis gossypii(蝗蚜)；Pseudatomoscelis seriatus(棉跳盲蝽)；Trialeurodes abutilonea(结翅粉虱)；Lygus lineolaris(牧草盲蝽)；Melanoplus femurrubrum(赤腿蚱蜢)；Melanoplusdifferentialis(长额负蝗)；Thrips tabaci(洋葱蓟马)；Franklinkiellafusca(烟草蓟马)；Tetranychus cinnabarinus(朱砂叶螨)；Tetranychusurticae(二斑叶螨).

10.水稻：

病原性昆虫/线虫：Diatraea saccharalis(甘蔗蛀心虫)；Spodopterafrugiperda(秋夜蛾)；美洲棉铃虫；Colaspis brunnea(葡萄肖叶甲)；Lissorhoptrus oryzophilus(稻象甲)；Sitophilus oryzae(米象)；Nephotettix nigropictus(黑尾叶蝉)；Blissus leucopterus leucopterus(麦长蝽)；Acrosternum hilare(喜绿蝽)。

11.油菜籽：

病原性昆虫/线虫：Brevicoryne brassicae(卷心菜蚜虫)；Phyilotretacruciferae(跳甲)。Mamestra conjugrata(披肩粘虫)；Plutellaxylostella(菱形斑纹蛾)；Delia ssp.(根蛆)。

在本发明中，“NADPH氧化酶”表示本质特征为通过单电子转移，能将分子氧(O₂)转换为超氧化物(O_2-)的所有酶。优选通过EC类E.C.1.23.45.3描述的那些酶。在本文中，NADPH氧化酶可由相同或不同的一种或多种多肽组成。

优选的，NADPH氧化酶为黄细胞色素蛋白质并包含作为辅基的细胞色素b和/或FAD单元。NADPH氧化酶可由α1β1异二聚体组成，β亚单位为黄细胞色素的功能性亚单位，所述β亚单位作为糖蛋白，可包含电子转运组分(包含NADPH及FAD的亲水胞质C-末端结构域，及包含络合两个组氨酸的血红素辅基的推定跨膜α螺旋的4至6个N末端)。α亚单位可包含能结合NADPH氧化酶的潜在胞质、活化因子的C末端脯氨酸丰富序列。通过结合胞质phox蛋白质(例如p47-phox、p67-phox、p40-phox)及GTP结合蛋白质p21rac发生活化。

熟练技术人员对来自植物生物体的NADPH氧化酶是熟悉的(TorresMA等人(1998)Plant J 14：365-370，等等)。以举例但不受限的方式提及的序列为以下基因库登录号：AJ251717(大麦(Hordeum vulgare))、AP003560(稻日本变种((Oryza sativa var.japonica))、AJ320505(烟草(Nicotiana tabacum))、AB050660(马铃薯(Solanum tuberosum))、AF088276(番茄(Lycopersicon esculentum))、AB008111(拟南芥菜；Atrboh F)、AF055357(拟南芥菜；RbohD)、AJ309006(烟草；rboh)、AP003271(稻日本变种)、AF055355(拟南芥菜；RbohC)、AF055353(拟南芥菜；RbohA)。特别优选包含如在SEQ ID：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20或22所示序列的NADPH氧化酶。

来自与本发明公开NADPH氧化酶序列同源的其它植物的序列例如，可通过数据库搜索或通过用NADPH氧化酶序列作为搜索序列或探针筛选基因文库易于找到。可提及的实例为有以下基因库登录号的序列：CAC51517.1、AJ251717、T03973、BAB68079.1、AP003560、T02024、CAC87256.1、AJ320505、BAB70750.1、AB050660、AF088276_1、NP_564821.1、NM_105079、T00265 AC007764_16、NP_192862.1、NM_117194、AF147783_1、AAM28891.1、AF506374、CAC84140.1、AJ309006、T51804、NP_199602.1、NM_124165、BAB89740.1、AP003271、AAC39477.1、AF055355、NP_199919.1、NM_124485、AAC39475.1、AF055353、NP_196356.1、NM_120821、NP_194239.1、NM_118641、BAB08369.1、AB015475、AAC39478.1、AF055356、AC069143_9、NP_173357.1、NM_101781、NP_172383.1、NM_100780、AAB70398.1、AC000106、AAC39476.1、AF055354、BAB70751.1、AB050661、BAB63664.1、AP003275、AAD24966.1、AF109150。

NADPH氧化酶的多肽序列特别优选包含选自以下序列基序的至少一个序列基序：

i)AL(K/R)GL(K/R)

ii)DK(N/D)XDG(R/K)(I/L/V)(T/N)E

iii)LSASAN

iv)IMEELDP

v)K(F/L)NMA(I/L)(I/V)LXPVCRN

vi)(E/Q)WHPFSIT

vii)S(A/S)PXDD(Q/Y)(L/I)S(L/V)H(V/I/L)R

viii)DGPYG(S/A)PAGDY

ix)L(I/V)GLGIGATP

x)FYWVTREQGSF

xi)GVFYCG

肽序列非常特别优选包含选自序列基序i)、ii)、iii)、iv)、v)、vi)、vii)、viii)、ix)、x)及xi)的至少2或3个，非常特别优选至少4或5个，最优选所有序列基序。(括号内的字母表示在这个位置可能的备选氨基酸，例如(V/I)表示在这个位置可能为缬氨酸或异亮氨酸)。

NADPH氧化酶也意指对于NADPH氧化酶活性所必需的NADPH氧化酶复合体的任何其它单位。

“蛋白质量”表示NADPH氧化酶多肽在生物体、组织、细胞或细胞区室中的量。蛋白质量的“降低”表示—例如通过以下文中描述的方法之一—在其它方面相同条件下(例如，培养条件、植物年龄等等)，与没有应用这个方法的同一属及种的野生型相比，NADPH氧化酶在生物体、组织、细胞或细胞区室中的量降低。在本文中，降低达到至少10％，优选至少10％或至少20％，特别优选至少40％或60％，非常特别优选至少70％或80％，最优选至少90％或95％。

“活性”表示NADPH氧化酶将分子氧(O₂)转换为过氧化物(O_2-)的能力。活性的“降低”表示—例如通过以下文中描述的方法之一—在其它方面相同条件下(例如，培养条件，植物年龄等等)，与没有应用这个方法的同一属及种的野生型相比，NADPH氧化酶蛋白质在生物体、组织、细胞或细胞区室中的总活性降低。在本文中，降低达到至少10％，优选至少10％或至少20％，特别优选至少40％或60％，非常特别优选至少70％或80％，最优选至少90％或95％。

“功能”优选表示NADPH氧化酶在生物体、组织、细胞或细胞区室中的底物结合能力。适当的底物为低分子量化合物如NADPH或FAD，也为与NADPH氧化酶相互作用的蛋白质分子。

功能“降低”表示—例如通过以下文中描述的方法之一—在其它方面相同条件下(例如，培养条件，植物年龄等等)，与没有应用这个方法的同一属及种的野生型相比，例如，在生物体、组织、细胞或细胞区室中NADPH氧化酶对于至少一种底物的结合能力或结合强度在量上的降低。“降低”也理解表示为例如，如通过kcat/Km值表达的，底物特异性的变化。在本文中，降低达到至少10％，优选至少10％或至少20％，特别优选至少40％或60％，非常特别优选至少70％或80％，最优选至少90％或95％。结合NADPH氧化酶的结合分子可例如通过酵母双杂交系统以熟练技术人员熟悉的方式进行确定。

用于确定蛋白质量、NADPH氧化酶活性或底物结合能力的方法是熟练技术人员已知的。例如，可测定NADPH依赖的O_2-或H₂O₂的产生，其中所述产生可被DPI抑制(例如通过四唑硝基蓝[NBT]或细胞色素c还原)。蛋白质量可例如，用适当抗体的免疫学方法进行确定。对适当的方法进行了描述(Yu L等人(1999)Blood 94(7)：2497-504；Doke N(1983a)Physiol Plant Pathol 23：345-357；Levine A等人(1994)Cell 79：583-593；Tenhaken R等人(1995)Proc Nat Acad Sci USA 92：4158-4163；Sagi M& Fluhr R.(2001)Plant Physiol 126(3)：1281-90；Hückelhoven R & KogelKH(1998)Mol Plant Microbe Interact 11：292-300；及以上论文引用的参考文献)。

NADPH氧化酶蛋白质的“功能等同物”优选表示衍生自包含如在SEQID NO：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20或22所示多肽序列的NADPH氧化酶或与上述多肽序列同源并具有相同本质特征的NADPH氧化酶的序列。

在本文中，与包含如SEQ ID NO：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20或22所示的多肽序列的NADPH氧化酶之一降低时获得的值比较，病原体抗性的功效可向上及向下离散。优选的功能等同物为，病原体抗性的功效与来自通过降低包含如在SEQ ID NO：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20或22描述多肽序列的NADPH氧化酶获得的比较值的差异不多于50％，优选25％，特别优选10％，所述病原体抗性的功效通过例如对病原体(吸器的发育)穿透功效进行测定。特别优选的为这样的序列，其降低酶活性的结果使对病原体抗性的功效在量上超过比较值大于50％，优选100％，特别优选500％，非常特别优选1000％，所述比较值通过包含如SEQ ID NO：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20或22中显示的多肽序列的NAPDH氧化酶之一的降低获得。

比较优选在类似条件下进行。“类似条件”表示欲进行比较的实验之间所有构架条件如培养或生长条件、测定条件(如缓冲液、温度、底物、病原体浓度等等)保持相同并且只在欲进行比较的NAPDH氧化酶序列、它们的来源生物体及根据需要为病原体不同。当选择用于比较的病原体时，考虑到种特异性，用于比较的欲进行选择的病原体为与对应于其它病原体最相似的病原体。

特别地，“功能等同物”是指对这样的NAPDH氧化酶进行天然或人工突变并来自继续具有本质相同特征的其它植物的同源多肽，所述NAPDH氧化酶包含如SEQ ID NO：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20或22中显示的多肽序列。以上描述的优选植物的同源多肽是优选的。来自与本发明范围内公开的NAPDH氧化酶序列同源的来自其它植物(例如拟南芥菜)的序列例如通过数据库搜索或用NADPH氧化酶序列作为搜索序列或探针筛选基因文库可易于找到。这些序列以举例的方式与它们的基因库登录号一起在以上进行了详细说明。

突变包含一个或多个氨基酸残基的替代、添加、缺失、倒位或插入。因此，本发明也包含这样的多肽，所述多肽例如通过修饰包含如SEQ IDNO：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20或22显示的多肽序列获得。

两个核酸序列之间的同源性可以理解为是指两个核酸序列的同一性，每种情况下全序列长度通过借助于程序GAP运算法(威斯康辛软件包10.0版，威斯康辛大学，遗传计算机组(GCG)，Madison，美国)比较进行计算，所述程序设置了以下参数：

缺口权重：50            长度权重：3

平均匹配：10            平均误配：0

例如与序列SEQ ID NO：1在核酸水平有至少80％同源性的序列理解为表示用以上参数组通过以上程序运算法与序列SEQ ID NO：1比较，具有至少80％同源性的序列。

两个多肽之间的同源性理解为表示两个氨基酸序列的同一性，在每种情况下全序列长度的同一性通过借助于程序GAP运算法(Wisconsin软件包10.0版，Wisconsin大学，遗传计算机组(GCG)，Madison，美国；Altschul等人(1997)Nucleic Acids Res.25：3389)比较进行计算。所述程序设置了以下参数：

缺口权重：8             长度权重：2

平均匹配：2,912         平均误配：-2,003

例如与序列SEQ ID NO：2在蛋白质水平有至少80％同源性的序列理解为表示用以上参数组通过以上程序运算法与序列SEQ ID NO：2比较，具有至少80％同源性的序列。

衍生自包含如SEQ ID NO：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20或22显示的多肽序列的NADPH氧化酶的功能等同物通过替代、插入或缺失与包含如SEQ ID NO：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20或22显示的多肽序列的多肽具有至少50％，优选至少70％，通过优选至少90％，特别优选至少95％，非常特别优选至少98％同源性并与上述序列的相同本质特征相区别。

通过替代、插入或缺失衍生自包含如SEQ ID NO：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19或21显示的核酸序列的NADPH氧化酶的功能等同物与如SEQ ID NO：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19或21显示的根据本发明的核酸之一具有至少50％，优选至少70％，通过优选至少90％，特别优选至少95％，非常特别优选至少98％同源性并编码与包含如SEQID NO：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20或22显示序列的多肽有相同本质特征。

并且，用在SEQ ID NO：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19或21下描述的核酸序列或这些核酸序列中的部分作为探针，筛选其它物种，优选植物物种是熟练技术人员已知的用于在其它物种中鉴定同源物(homologs)的方法，所述植物物种作为用于转化的适当宿主的cDNA文库或基因组文库在以下进一步进行阐述。在本文中，来自如SEQ ID NO：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19或21中显示的核酸序列的探针长度至少20bp，优选至少50bp，特别优选至少100bp，非常特别优选至少200bp，最优选至少400bp。与在SEQ ID NO：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19或21下描述的序列互补的DNA链也可用于筛选文库。

功能等同物包含在标准条件下与在SEQ ID NO：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19或21下所述NAPDH氧化酶的核酸序列杂交的DNA序列，与其互补或其一部分互补的核酸序列，并且作为完整的序列编码与包含如SEQ ID NO：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20或22显示序列的多肽有相同本质特征的蛋白质。

“标准杂交条件”在广义上进行理解并表示严格或低严格杂交条件。此类杂交条件尤其通过Sambrook J，Fritsch EF，Maniatis T等人，在Molecular Cloning(实验室手册)，第2版，Cold Spring Harbor Laboratory出版社，1989，第9.31-9.57页一书中或在Current Protocols in MolecularBiology，John Wiley & Sons，N.Y.(1989)，6.3.1-6.3.6一书中进行了描述。

例如，洗涤步骤期间的条件可选自通过低严格条件(大约2X SSC于50℃)及高严格条件(大约0.2X SSC于50℃，优选于65℃)(20X SSC：0.3M柠檬酸钠，3M NaCl，pH7.0)限定的条件范围。此外，洗涤步骤期间的温度可自于室温，大约22℃的低严格条件升高到于大约65℃的高严格条件。盐浓度及温度这两个参数可同时发生变化，或两个参数之一可保持不变而只有另一个发生变化。也可在杂交期间应用变性剂，例如甲酰胺或SDS。在存在50％甲酰胺时，杂交优选于42℃实施。一些用于杂交及洗涤步骤条件的实例在以下文中进行显示：

(1)例如，杂交条件可选自以下条件：

a)4X SSC于65℃(任选-100μg/ml经变性片段化鱼精DNA)

b)6X SSC于45℃(任选-100μg/ml经变性片段化鱼精DNA)

c)6X SSC，0.5％SDS，50％甲酰胺于42℃(任选-100μg/ml经变性片段化鱼精DNA)

d)4X SSC，50％甲酰胺于42℃(任选-100μg/ml经变性片段化鱼精DNA)

e)2X或4X SSC于50℃(低严格条件)，

f)30至40％甲酰胺，2X或4X SSC于42℃(低严格条件)

(2)例如，洗涤步骤可选自以下条件：

a)0.015M NaCl/0.0015M柠檬酸钠/0.1％ SDS于50℃。

b)0.1X SSC于65℃。

c)0.1X SSC，0.5％ SDS于68℃。

d)0.1X SSC，0.5％ SDS，50％甲酰按于42℃。

e)0.2X SSC，0.1％ SDS于42℃。

f)2X SSC于65℃(低严格条件)。

NADPH氧化酶蛋白质、NADPH氧化酶活性或NADPH氧化酶功能的降低可以多种方式进行。

与NADPH氧化酶，NADPH氧化酶活性或NADPH氧化酶功能相关的“降低”或“用以降低”在广义上进行解释并包含在植物或衍生自其部分、组织、器官、细胞或种子中NAPDH氧化酶的功能性部分或基本上完全阻止或阻断(由于多种细胞-生物学机制)。用于本发明目的的降低也包含NADPH氧化酶的量降低到基本上完全不存在NAPDH氧化酶(即缺乏NADPH氧化酶活性或NADPH氧化酶功能的可检测性，或缺乏NADPH氧化酶蛋白质的免疫学可检测性)。在本文中，可降低NADPH氧化酶的一个或多个基本单位。在本文中，在细胞或生物体中某NADPH氧化酶的表达或NADPH氧化酶活性或NADPH氧化酶功能可降低优选大于50％，特别优选大于80％，非常特别优选大于90％。

根据本发明包含了用于降低NADPH氧化酶蛋白质表达、NADPH氧化酶活性或NADPH氧化酶功能的多种策略。以举例但不受限的方式提及的策略为：

a)导入双链NADPH氧化酶RNA核酸序列(NAox-dsRNA)或确保其表达的表达盒；

b)导入NADPH氧化酶反义核酸序列或确保其表达的表达盒。包括直接针对NADPH氧化酶基因(即，基因组DNA序列)或NADPH氧化酶基因转录物(即，RNA序列)反义核酸序列的方法。也包含α-异头核酸序列。

c)导入与核酶组合的NADPH氧化酶反义核酸序列或确保其表达的表达盒。

d)导入用于诱导共抑制的NADPH氧化酶有义核酸序列或确保它们表达的表达盒。

e)导入针对NADPH氧化酶基因、RNA或蛋白质的DNA结合因子或蛋白质结合因子或确保它们表达的表达盒。

f)导入病毒核酸序列及引起NADPH氧化酶RNA降解的表达构建体或确保它们表达的表达盒。

g)导入用于诱导在内源性NADPH氧化酶基因处同源重组的构建体，例如用于产生敲除突变体。

h)在内源性NADPH氧化酶基因内导入突变用于产生功能缺失(例如产生终止密码，读框移位等等)。

在这里，每个及这些方法中的每一个可在本发明意义上引起NADPH氧化酶表达、NADPH氧化酶活性或NADPH氧化酶功能的降低。组合应用也是可行的。额外的方法是熟练技术人员已知的并可包含阻止或阻碍NADPH氧化酶蛋白质的加工、NADPH氧化酶蛋白质或它的mRNA的转运、抑制核糖体的附着，抑制RNA剪接，诱导NADPH氧化酶RNA降解酶和/或抑制翻译延长或终止。

优选的单个方法在以下文中进行简要描述：

a)导入双链NADPH氧化酶RNA核酸序列(NAox-dsRNA)

通过双链RNA调节基因的方法(双链RNA干扰；dsRNAi)在动物及植物生物体中已进行多次描述(例如Matzke MA等人(2000)Plant MolBiol 43：401-415；Fire A等人(1998)Nature 391：806-811；WO 99/32619；WO 99/53050；WO 00/68374；WO 00/44914；WO 00/44895；WO 00/49035；WO 00/63364)。在以上谈及的参考文献中清楚地描述了其过程及方法。有效的基因抑制也可在瞬时表达情况下或瞬时表达后例如，作为生物转化的结果进行显示(Schweizer P等人(2000)Plant J 2000 24：895-903)。dsRNAi方法是基于同时导入基因转录物的互补链及其对应链引起所述基因表达的高效抑制。所产生的表型与相应的敲除突变体非常相似(Waterhouse PM等人(1998)Proc Natl Acad Sci USA 95：13959-64)。

当降低NADPH氧化酶表达时，证明dsRNAi方法特别有效及有益。如在WO 99/32619等等中描述的，dsRNAi方法显著优于传统的反义方法。

因此，本发明的又一方面涉及这样的双链RNA分子(dsRNA分子)，当导入到植物(或衍生自植物的细胞、器官或种子)时，所述双链RNA分子引起NADPH氧化酶降低。

用于降低NADPH氧化酶蛋白质表达的双链RNA分子包含

a)包含至少一个核苷酸序列的有义RNA链，其与至少部分NADPH氧化酶核酸序列基本相同，及

b)反义RNA链，所述反义RNA链基本优选完全与a)的RNA有义链互补。

在又一优选的实施方案中，用于降低NADPH氧化酶蛋白质表达的双链RNA分子包含

a)包含至少一个核苷酸序列的有义RNA链，其与编码NADPH氧化酶蛋白质的核酸序列的有义RNA转录物至少部分基本相同，及

b)反义RNA链，所述反义RNA链基本优选完全与a)的RNA有义链互补。

关于双链RNA分子，NADPH氧化酶核酸序列优选表示包含如SEQ IDNO：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19或21中显示的序列。

“基本相同”表示与NADPH氧化酶靶序列或功能等同的靶序列相比，dsRNA序列也可具有插入、缺失及个别点突变，但仍引起表达的有效降低。优选地，如以上定义的抑制性dsRNA有义链与至少部分编码NADPH氧化酶或其功能等同物的核酸序列的有义RNA转录物之间(或编码NAPDH氧化酶蛋白质或其功能等同物的核酸序列互补链的反义链之间)的同源性达到至少75％，优选至少80％，非常特别优选至少90％，最优选100％。

部分节段的长度达到至少10个碱基，优选至少25个碱基，特别优选至少50个碱基，非常特别优选至少100个碱基，最优选至少200个碱基或至少300个碱基。

备选地，“基本相同的”dsRNA也可定义为能与部分贮存蛋白基因转录物杂交的核酸序列(例如在400mM NaCl，40mM PIPES pH6.4，1mMEDTA于50℃或70℃进行12至16小时)。

“基本互补”表示与有义RNA链互补物相比，反义RNA链也可具有插入、缺失及个别点突变。优选的，反义RNA链与有义RNA链互补物之间的同源性达到至少80％，优选至少90％，非常特别优选95％，最优选100％。

编码NADPH氧化酶蛋白质或其功能等同物的核酸序列的“部分有义RNA转录物”表示转录自编码NADPH氧化酶蛋白质或其功能性等同物的核酸序列的RNA或mRNA片段，优选NADPH氧化酶基因的RNA或mRNA片段。在这里，片段优选序列长度具有至少20个碱基，优选至少50个碱基，特别优选至少100个碱基，非常特别优选至少200个碱基，最优选至少500个碱基。也包含全长的经转录RNA或mRNA。

也包含本发明所述的方法中用于在植物中产生病原体抗性的根据本发明的dsRNA分子的用途。

dsRNA可由一条或多条聚合的核苷酸链组成。此外，可存在对糖-磷酸骨架及核苷这两者的修饰。例如，天然RNA的磷酸二酯键可以它们包含至少一个氮或硫杂原子的方式进行修饰。碱基可以例如将腺苷脱氨酶的活性进行限制的方式进行修饰。这些及进一步修饰在下文用于稳定反义RNA的方法中进行描述。

为了达到相同目的，当然，向细胞或生物体中导入多种dsRNA分子是可能的，所述dsRNA分子每个包含以上定义的核苷酸序列节段的一种。

dsRNA可通过酶进行产生，或完全或部分通过化学合成产生。

双链dsRNA结构可自两个互补的、分离的RNA链起始，或优选地自单一的、自动互补RNA链起始进行形成。

在单一的、自动互补链的情况时，有义及反义序列可通过连接序列(接头)进行连接并形成例如发夹结构。优选地，连接序列可为内含子，所述内含子在合成dsRNA后被剪切掉。

编码dsRNA的核酸序列可包含额外元件例如转录终止信号或多聚腺苷酸化信号。

如果dsRNA的两条链在细胞或植物中进行组合，这可以多种方式发生，例如：

a)用包含两种表达盒的载体转化细胞或植物，

b)用两个载体共转染细胞或植物，所述两个载体的一个包含有有义链的表达盒及另一个包含有反义链的表达盒，

c)杂交两个植物，所述植物中的每个用载体进行转化，所述载体的一个包含有有义链的表达盒及另一个包含有反义链的表达盒。

RNA双链体的形成可在细胞外或在同一细胞内进行起始。如在WO 99/53050中，dsRNA也可包含通过接头(例如内含子)连接的有义及反义链的发夹结构。优选自身互补dsRNA结构，因为它们只需要构建体的表达并包含总是等摩尔比值的互补链。

优选将编码dsRNA反义或有义链的表达盒或dsRNA的自身互补链插入到载体中，并用以下文中描述的方法，稳定(例如用选择标记)插入到植物基因组中以确保dsRNA的持续表达。

用至少每个细胞一个拷贝的量将dsRNA进行导入是可能的。根据需要，较大量(例如，每个细胞至少5、10、100、500或1000个拷贝)可引起更有效的降低。

如已描述的，为引起NADPH氧化酶表达的有效降低，dsRNA及NADPH氧化酶基因转录物或其功能等同基因的基因转录物之间的100％序列同一性不是必须要求的。因此，耐受如作为基因突变、多态性或进化趋异的结果存在的序列离散的方法是有优越性的。用源自一种生物体NADPH氧化酶序列而产生的dsRNA，例如，因此可能抑制在另一生物体中NAPDH氧化酶表达。来自水稻、玉米及大麦的NADPH氧化酶之间的高度序列同源性得到这个蛋白质在植物中高度保守的结论，因此dsRNA的表达在其它植物物种中也可能具有有益作用，所述dsRNA衍生自包含如在SEQ ID NO：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19或21中显示NADPH氧化酶序列之一。

由于个体NADPH氧化酶蛋白质及它们功能等同物之间的高度同源性，用起始自一种生物体的特异NADPH氧化酶序列产生的单一dsRNA，其抑制其它同源NADPH氧化酶蛋白质和/或同一生物体中它们的功能等同物的表达或在其它相关物种中NAPDH氧化酶蛋白质的表达也是可能的。为达到这个目的，dsRNA优选包含对应于保守区的NADPH氧化酶基因转录物的序列区。所述保守区可自序列比对中易于推导出。

dsRNA可在体内或体外进行合成。为此目的，可将编码dsRNA的DNA序列导入到表达盒中，所述表达盒在至少一个基因控制元件(例如启动子、增强子、沉默子、剪接供体或受体、多腺苷酸化信号)控制下。适当的有益构建体在以下文中进行了描述。多腺苷酸化不是必需的，用于起始翻译的元件也不必存在。

dsRNA可用化学或酶的方法进行合成。为此目的，可用细胞RNA聚合酶或噬菌体RNA聚合酶(例如T3、T7或SP6 RNA聚合酶)。对用于RNA体外表达的此类方法进行了描述(WO 97/32016、US 5,593,874、US 5,698,425、US 5,712,135、US 5,789,214、US 5,804,693)。体外通过化学或酶的方法合成的dsRNA在导入到细胞、组织或生物体前，例如可进行提取、沉淀、电泳、层析或这些方法的组合从而自反应混合物中完全或部分分离。dsRNA可直接导入到细胞中或通过细胞外应用(例如导入到细胞间隙)。

然而，植物优选用引起dsRNA表达的表达构建体进行稳定转化。适当的方法在以下文中进行描述。

b)导入NADPH氧化酶反义核酸序列

对通过反义技术阻止其mRNA的积累用于抑制特定蛋白质的方法已进行了多次描述，在植物中也进行了多次描述(Sheehy等人(1988)ProcNatl Acad Sci USA 85：8805-8809；US 4,801,340；Mol JN等人(1990)FEBS Lett 268(2)：427-430)。反义核酸分子与编码欲抑制的NADPH氧化酶靶蛋白的细胞mRNA和/或基因组DNA杂交或结合，所述杂交或结合抑制了靶蛋白的转录和/或翻译。在传统方式中通过稳定双链体的形成，或关于基因组DNA通过反义核酸分子与基因组DNA双链体的结合发生杂交，所述反义核酸分子与基因组DNA双链体的结合为通过在DNA螺旋的大沟特异相互作用。

遵循Watson-Crick碱基配对规律，适于降低NADPH氧化酶蛋白质的反义核酸序列可用编码这个蛋白质的核酸序列进行衍生，所述核酸序列例如包含如在SEQ ID NO：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19或21中显示序列的核酸序列。反义核酸序列可与所述蛋白质的所有经转录mRNA互补，可限于编码区或可只由一个寡核苷酸组成，所述寡核苷酸与mRNA的编码或非编码序列的一部分互补。因此，寡核苷酸可，例如与包含用于所述蛋白质的翻译起始区互补。反义核酸序列长度可为例如5、10、15、20、25、30、35、40、45或50个核苷酸，但也可更长并包含至少100、200、500、1000、2000或5000个核苷酸。反义核酸序列可用熟练技术人员已知的方法进行重组表达或通过化学或酶的方法进行合成。关于化学合成，可用天然或经修饰核苷酸。经修饰核苷酸可增强反义核酸序列的生物化学稳定性并可导致反义核酸序列及有义靶序列形成双链体的物理稳定性的增强。可用的核苷酸为，例如硫代磷酸衍生物及经吖啶取代核苷酸如5-氟尿嘧啶、5-溴尿嘧啶、5-氯尿嘧啶、5-碘尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、4-乙酰胞嘧啶、5-(羧基羟基甲基)尿嘧啶、5-羧基甲基氨基甲基-2-硫尿苷、5-羧基甲基氨基甲基尿嘧啶、双氢尿嘧啶、β-D-半乳糖基queosine、次黄苷、N6-异戊烯腺嘌呤、1-甲基鸟嘌呤、1-甲基次黄苷、2，2-二甲基鸟嘌呤、2-甲基腺嘌呤、2-甲基鸟嘌呤、3-甲基胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶、N6-腺嘌呤、7-甲基鸟嘌呤、5-甲基氨基甲基尿嘧啶、5-甲氧基氨基甲基-2-硫尿嘧啶、β-D-甘露糖基queosine、5-甲氧基羧基甲基尿嘧啶、5-甲氧基尿嘧啶、2-甲硫基-N6-异戊烯腺嘌呤、尿嘧啶-5-氧基乙酸、假尿嘧啶、queosine，2-硫代胞嘧啶、5-甲基-2-硫脲嘧啶、2-硫脲嘧啶、4-硫脲嘧啶、5-甲基尿嘧啶、尿嘧啶-5-氧乙酸甲基酯、尿嘧啶-5-氧乙酸、5-甲基-2-硫脲嘧啶、3-(3-氨基-3-N-2-羧基丙基)尿嘧啶及2，6-二氨基嘌呤。

在又一优选的实施方案中，NADPH氧化酶蛋白质的表达可通过这样的核酸序列进行抑制，以至降低NADPH氧化酶基因的转录，所述核酸序列与NADPH氧化酶基因调节区(例如NADPH氧化酶启动子和/或增强子)互补并与其中的DNA双螺旋形成三螺旋结构。对适当的方法进行了描述(Helene C(1991)Anticancer Drug Res 6(6)：569-84；Helene C等人(1992)Ann NY Acad Sci 660：27-36；Maher LJ(1992)Bioassays 14(12)：807-815)。

在又一实施方案中，反义核酸分子可为α-异头核酸。此种α-异头核酸分子与互补RNA形成特异双链杂交体，与常规β-核酸相反，其中的两条链互相平行(Gautier C等人(1987)Nucleic Acids Res 15：6625-6641)。反义核酸分子也可进一步包含2’-O-甲基核糖核苷酸(Inoue等人(1987)Nucleic Acids Res 15：6131-6148)或嵌合RNA-DNA类似物(IRoue等人(1987)FEBS Lett 215：327-330)。

c)与核酶组合导入NADPH氧化酶反义核酸序列

以上描述的反义策略可有益地与核酶方法进行联合。催化性RNA分子或核酶可适合于任何靶RNA并在特异位点切割磷酸二酯主链，藉此将靶DNA进行功能性灭活(Tanner NK(1999)FEMS Microbiol Rev 23(3)：257-275)。因此核酶自身没有被修饰，但能以类似的方式进一步切割靶RNA分子，藉此它获得了酶的特性。核酶序列整合到反义RNA中赋予这些反义RNA酶样RNA切割特性并因此增强了它们在灭活靶RNA中的效率。适当的核酶反义RNA分子的制备及应用例如Haseloff等人(1988)Nature 334：585-591的描述。

以这种方式，核酶(例如锤头状核酶；Haselhoff和Gerlach(1988)Nature 334：585-591)可用于催化性切割欲进行抑制的酶—例如NADPH氧化酶—的mRNA并防止转录。核酶技术可增强反义策略的效率。用于降低某些蛋白质的核酶表达的方法在(EP 0 291 533、EP 0 321 201、EP 0 360 257)中进行了描述。在植物细胞中对核酶表达也进行了描述(Steinecke P等人(1992)EMBO J 11(4)：1525-1530；de Feyter R等人(1996)Mol Gen Genet.250(3)：329-338)。适当的靶序列及核酶可例如通过“Steinecke P，Ribozymes，Methods in Cell Biology 50，Galbraith等人编辑，Academic出版社，Inc(1995)，第449-460页”描述的，计算核酶RNA及靶RNA的二级结构，及通过它们的相互作用(Bayley CC等人(1992)Plant Mol Biol.18(2)：353-361；Lloyd AM及Davis RW等人(1994)Mol Gen Genet.242(6)：653-657)进行确定。例如，构建四膜虫L-19 IVS RNA衍生物是可能的，所述四膜虫L-19 IVS RNA衍生物具有欲进行抑制的NADPH氧化酶蛋白质mRNA的互补区。(也参见US 4,987,071及US 5,116,742)。备选地，此类核酶也可用筛选方法自各种核酶文库进行鉴定(Bartel D和Szostak JW(1993)Science 261：1411-1418)。

d)导入NADPH氧化酶有义核酸序列用于诱导共抑制

NADPH氧化酶核酸序列有义方向的表达可导致相应的同源性内源基因的共抑制。与内源性基因有同源性的有义RNA的表达可降低或关闭内源基因的表达，这与反义方法描述的作用相似(Jorgensen等人(1996)Plant Mol Biol 31(5)：957-973；Goring等人(1991)Proc Natl Acad SciUSA 88：1770-1774；Smith等人(1990)Mol Gen Genet 224：447-481；Napoli等人(1990)Plant Cell 2：279-289；Van der Krol等人(1990)PlantCell 2：291-99)。在这里，经导入的构建体可完全或只部分代表欲进行降低的同源性基因。翻译的可能性是不需要的。应用于植物的此种技术例如通过Napoli等人(1990)The Plant Cell 2：279-289及在US 5,034,323中进行了描述。

优选地，用这样的序列进行共抑制，所述序列与编码ANDPH氧化酶蛋白质或其功能性等同物的核酸序列至少一部分本质相同，所述核酸序列例如包含如SEQ ID NO：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19或21显示序列的核酸序列。

e)导入针对NADPH氧化酶基因、RNA或蛋白质的DNA或蛋白质结合因子

NADPH氧化酶基因表达的降低用特异DNA结合因子，例如用锌指转录因子类型的因子进行也是可能的。这些因子与内源性靶基因的基因组序列，优选调节区的序列退火，并且引起内源性基因的抑制。此种方法的应用使降低内源性NADPH氧化酶基因的表达而不必重组操作NADPH氧化酶的序列成为可能。对用于产生适当因子的适当方法进行了描述(Dreier B等人(2001)J Biol Chem 276(31)：29466-78；Dreier B等人(2000)JMol Biol 303(4)：489-502；Beerli RR等人(2000)Proc Natl AcadSci USA 97(4)：1495-1500；Beerli RR等人(2000)J Biol Chem 275(42)：32617-32627；Segal DJ和Barbas CF 3rd(2000)Curr Opin Chem Biol 4(1)：34-39；Kang JS和Kim JS(2000)J Biol Chem 275(12)：8742-8748；Beerli RR等人(1998)Proc Natl Acad Sci USA 95(25)：14628-14633；Kim JS等人(1997)  Proc Natl Acad Sci USA 94(8)：3616-3620；KlugA(1999)J Mol Biol 293(2)215-218；Tsai SY等人(1998)Adv Drug DelivRev 30(1-3)：23-31；Mapp AK等人(2000)Proc Natl Acad Sci USA 97(8)：3930-3935；Sharrocks AD等人(1997)Int J Biochem Cell Biol 29(12)1371-1387；Zhang L等人(2000)J Biol Chem 275(43)：33850-33860)。

此类因子可用NADPH氧化酶基因的任何目的部分进行选择。优选地，该片段位于启动子区。然而，对于基因抑制，也可位于编码外显子或内含子区。对于熟练技术人员通过来自基因文库或起始自基因库中基因不存在的NADPH氧化酶cDNA的数据搜索，通过选择用于对应基因组克隆的基因组文库可获得对应的节段。此目的需要的方法是熟练技术人员已知的。

此外，将抑制NADPH氧化酶靶蛋白质自身的因子导入到细胞中是可能的。蛋白质结合因子可为，例如aptamers(Famulok M和Mayer G(1999)Curr Top Microbiol Immunol 243：123-36)或抗体或抗体片段或单链抗体。对获得这些因子的方式已进行描述并是熟练技术人员已知的。例如，利用细胞质scFv抗体在经遗传修饰的烟草植物中调节植物色素A蛋白质的活性(Owen M等人(1992)Biotechnology(NY)10(7)：790-794；FrankenE等人(1997)Curr Opin Biotechnol 8(4)：411-416；Whitelam(1996)Trend Plant Sci 1：286-272)。

基因表达也可通过适当的低分子量合成化合物例如聚酰胺类进行抑制(Dervan PB和Bürli RW(1999)Current Opinion in Chemical Biology 3：688-693；Gottesfeld JM等人(2000)Gene Expr 9(1-2)：77-91)。这些寡聚物由3-(二甲氨基)丙胺、N-甲基-3-羟基吡咯、N-甲基咪唑及N-甲基吡咯组成并且以它们在大沟中序列特异性的结合并抑制位于其中的基因序列表达的方式可适于双链DNA的任何部分。对适当的方法进行了描述(尤其参见Bremer RE等人(2001)Bioorg Med Chem.9(8)：2093-103；Ansari AZ等人(2001)Chem Biol.8(6)：583-92；Gottesfeld JM等人(2001)J Mol Biol.309(3)：615-29：Wurtz NR等人(2001)Org Lett3(8)1201-3；Wang CC等人(2001)Bioorg Med Chem 9(3)：653-7；Urbach AR和Dervan PB(2001)Proc Natl Acad Sci USA 98(8)：4343-8；Chiang SY等人(2000)J Biol Chem.275(32)：24246-54)。

f)导入引起NADPH氧化酶RNA降解的病毒核酸序列及表达构建体

NADPH氧化酶表达降低可通过植物借助于病毒表达系统(扩增子)，诱导特异NADPH氧化酶RNA降解有效产生(Angell，SM等人(1999)Plant J.20(3)：357-362)。此类系统也称为“VIGS”(经病毒诱导的基因沉默)，用病毒载体将与欲进行抑制的转录物同源的核酸序列导入植物中。然后可能通过植物抗病毒的防御机制停止转录。对适当的技术及方法进行了描述(Ratcliff F等人(2001)Plant J 25(2)：237-45；Fagard M和Vaucheret H(2000)Plant Mol Biol 43(2-3)：285-93；AnandalakshmiR等人(1998)Proc Natl Acad Sci USA 95(22)：13079-84；Ruiz MT(1998)Plant Cell 10(6)：937-46)。

g)导入构建体用于诱导内源性NADPH氧化酶基因的同源重组，例如用于产生敲除突变体

为产生具有降低NADPH氧化酶活性的同源重组生物体，例如用包含至少部分这样的内源性NADPH氧化酶基因的核酸构建体，所述内源性NADPH氧化酶基因通过以功能性降低或完全无效的方式缺失、添加或替代至少一个核苷酸进行修饰。修饰也可影响基因的调节元件(例如启动子)以至编码序列保持不变，但不发生表达(转录和/或翻译)或表达降低。

关于常规的同源重组，经修饰区的5’及3’端侧翼为必需具有足够长度用于可能重组的其它核酸序列。按规定，长度在几百个碱基至几千个碱基的范围内(Thomas KR和Capecchi MR(1987)Cell 51：503；Strepp等人(1998)Proc Natl Acad Sci USA 95(8)：4368-4373)。对于同源重组，宿主生物体例如植物用以下文中描述的方法用重组构建体进行转化，并且进行成功重组的克隆例如用抗生素或杀草剂抗性进行选择。

同源重组在高等真核生物，特别是植物中是相对稀有发生的事件。随机整合到宿主基因组中占主要方面。去除经随机整合序列并因此富集正确同源重组细胞克隆的可能性在于如US 6,110,736中描述的用序列特异重组系统，通过所述同源重组系统可将非特异整合序列进行缺失，这有助于选择通过同源重组进行成功整合的事件。可应用多种序列特异重组系统，可提及的实例为噬菌体P1的Cre/lox系统、酵母的FLP/FRT系统、噬菌体Mu的Gin重组酶、来自大肠杆菌(E.coli)的Pin重组酶及质粒pSR1的R/RS系统。优选的为噬菌体P1 Cre/lox及酵母FLP/FRT系统。FLP/FRT及cre/lox重组酶系统已在植物系统中进行应用(Odell等人(1990)MolGen Genet 223：369-378)。

h)将突变导入到内源性NADPH氧化酶基因用于产生功能丢失(例如产生终止密码、读框移位等等)

用于降低NADPH氧化酶活性的其它适当方法为将无义突变导入到内源性NADPH氧化酶基因中，例如通过将RNA/DNA寡核苷酸导入到植物中(Zhu等人(2000)Nat Biotechnol 18(5)：555-558)及例如借助于T-DNA诱变(Koncz等人(1992)Plant Mol Biol 20(5)：963-976)及ENU(N-乙基-N-亚硝基脲)诱变或同源重组(Hohn B和Puchta(1999)H Proc Natl Acad Sci USA 96：8321-8323)产生敲除突变体。点突变也可通过的DNA-RNA杂交体(Cole-Strauss等人(1999)Nucl Acids Res 27(5)：1323-1330；Kmiec(1999)Gene Therapy American Scientist 87(3)：240-247)产生，所述DNA-RNA杂交体也已知为嵌合修复术(chimeraplasty)。

通过有义RNA及VIGS(经病毒诱导基因沉默)共抑制的dsRNAi方法也可称为转录后基因沉默(PTGS)。由于欲进行抑制的内源性基因与经转基因表达的有义或dsRNA核酸序列之间(或内源性基因与它们各自显性抑制的(dominant negative)变体之间)的同源性要求比例如传统反义方法低，PTGS方法(包括用显性抑制的NADPH氧化酶变体)对NADPH氧化酶功能或活性的降低特别有益。适当的同源性标准在dsRNAi方法的描述中进行阐述并一般用于PTGS方法及显性抑制方法。由于来自玉米、水稻及大麦的NADPH氧化酶蛋白质之间的高度同源性，可推导出植物中这些蛋白质的高度保守性。因此，用来自大麦、玉米或水稻的NADPH氧化酶核酸序列，也可在其它物种中有效地抑制同源性NADPHA氧化酶蛋白质的表达，而不必在这些物种中分离及结构性阐述NADPH氧化酶同源物。这在相当程度上降低了相关的工作量。同样，推断也可用来自水稻、玉米或大麦的NADPH氧化酶蛋白质的显性抑制变体在其它植物物种中有效降低或抑制其同源物的功能/活性。

直接或间接引起NADPH氧化酶蛋白质的蛋白质量、RNA量、基因活性或蛋白质活性降低的所有物质及化合物可在下文的术语“抗NADPH氧化酶”化合物中一起进行分组。术语“抗NADPH氧化酶”化合物清楚地包括以上描述方法中应用的核酸序列、肽、蛋白质或其它因子。

为了达到本发明的目的，“导入”包含适于直接或间接将抗NADPH氧化酶化合物导入到植物或其细胞、区室、组织、器官或种子中或在其中将其产生的所有方法。包括直接及间接方法。导入可导致抗NADPH氧化酶化合物(例如dsRNA)瞬时存在或稳定存在。

根据经以上描述方法的不同特性，抗NADPH氧化酶化合物可直接发挥它们的功能(例如通过插入内源性NADPH氧化酶基因)。然而，也可在转录成RNA后(例如关于反义方法)或转录并翻译成蛋白质后(例如结合因子)间接发挥功能。根据本发明均包括直接及间接作用于抗NADPH氧化酶的化合物。

“导入”包含例如转染、转导或转化的方法。

因此，例如，抗NADPH氧化酶化合物也包含引起例如NADPH氧化酶dsRNA或NADPH氧化酶反义RNA的表达(即转录，根据需要，翻译)的重组表达构建体，所述表达优选在植物或其部分、组织、器官或种子中。

在所述表达构建体中，其表达(转录及根据需要，翻译)产生抗NADPH氧化酶化合物的核酸分子优选与至少一个基因调控元件(例如启动子)功能性连接，所述基因调控元件确保在生物体中优选在植物中表达。如果表达构建体直接导入到植物中并且抗NADPH氧化酶化合物(例如NADPH氧化酶dsRNA)在植物体中产生，则优选植物特异的基因调控元件(例如启动子)。然而，抗NADPH氧化酶化合物也可在其它生物体或在体外产生并然后导入到植物中(如实施例6及7描述的)。在这里，优选的控制元件为原核或真核基因调控元件(例如启动子)，原核或真核基因调控元件允许在各种情况下用于所述经选择生物体的表达。

功能性连接理解为表示，例如，启动子与欲进行表达的核酸序列(例如抗NAox化合物)及根据需要另外的调节元件如终止子的依次排列，根据核酸排列成有义或反义RNA在核酸序列进行重组表达时，以每个调节元件可实行它功能的方式进行。为此，化学意义上的直接连接不是必需要求的。基因调控序列例如增强子序列也可对来自远离位置或对其它DNA分子靶序列发挥功能。优选的排列为欲进行重组表达的核酸序列位于作为启动子的序列后，以使两个序列互相共价连接。

在这里，启动子序列与欲进行重组表达的核酸序列之间的距离低于200个碱基对，特别优选低于100个碱基对，非常特别优选低于50个碱基对。

功能性连接及表达盒可通过例如在Maniatis T，Fritsch EF和Sambrook J(1989)Molecular Cloning：A Laboratory Manual，ColdSpring Harbor Laboratory，Cold Spring Harbor(NY)一书中，在SilhavyTJ，Berman ML和Enquist LW(1984)Experiments with Gene Fusions，Cold Spring Harbor Laboratory，Cold Spring Harbor(NY)一书中，在Ausubel FM等人(1987)Current Protocols in Molecular Biology，GreenePublishing Assoc.及Wiley Interscience一书中及在Gelvin等人(1990)PlantMolecular Biology Manual一书中描述的，通过常规重组及克隆技术进行产生。然而，例如，可作为具有用于限制性酶特异切割位点的接头或作为信号肽的额外序列也可位于两个序列之间。序列的插入也可导致融合蛋白质的表达。优选的，由启动子及欲进行表达的核酸序列连接组成的表达盒，可以经载体整合形式存在并例如，通过转化插入到植物基因组中存在。

然而，表达盒也可指这样的构建体，其中启动子位于内源性NADPH氧化酶基因后，例如，通过同源重组并且根据本发明，NADPH氧化酶蛋白质的降低是通过表达反义NADPH氧化酶RNA引起的。同样地，反义NADPH氧化酶化合物(例如编码NADPH氧化酶dsRNA或NADPH氧化酶反义RNA的核酸化合物)以发生同样作用的方式，也置于内源性启动子后。两种方法均产生本发明意义上的表达盒。

术语植物特异启动子理解为表示，原则上，能调节基因，特别是外源基因在植物或植物部分、植物细胞、植物组织或植物培养物中表达的任何启动子。在这里，例如，表达可为组成型、诱导型或发育依赖型的。

以下是优选的：

a)组成型启动子

优选的载体为使在植物中组成型表达成为可能的载体(Benfey等人(1989)EMBO J 8：2195-2202)。“组成型”启动子理解为表示在植物发育的相当长时期，优选植物发育的所有时期很多组织，优选所有组织中确保表达的启动子。特别优选应用的为植物启动子或衍生自植物病毒的启动子。特别优选的为CaMV花椰菜花叶病毒35S转录物启动子(Franck等人(1980)Cell 21：285-294；Odell等人(1985)Nature 313：810-812；Shewmaker等人(1985)Virology 140：281-288；Gardner等人(1986)Plant Mol Biol 6：221-228)或19S CaMV启动子(US 5,352,605；WO 84/02913；Benfey等人(1989)EMBO J 8：2195-2202)。另一个适当的构成型启动子为核酮糖二磷酸羧化酶(Rubisco)小亚单位(SSU)启动子(US 4,962,028)、豆球蛋白B启动子(基因库登录号X03677)、农杆菌(Agrobacterium)胭脂氨酸合酶启动子、TR双元启动子、农杆菌OCS(章鱼碱合酶)启动子、遍在蛋白启动子(Holtorf S等人(1995)PlantMol Biol 29：637-649)、遍在蛋白1启动子(Christensen等人(1992)Plant Mol Biol 18：675-689；Bruce等人(1989)Proc Natl Acad Sci USA 86：9692-9696)、Smas启动子、桂醇脱氢酶启动子(US 5,683,439)、ATPase亚单位启动子或来自小麦富含脯氨酸蛋白质启动子(WO 91/13991)及熟练技术人员已知的在植物中组成型表达的其它基因启动子。特别优选的组成型启动子为来自拟南芥菜(A.thaliana)的腈水解酶1(nit1)基因启动子(基因库登录号Y07648.2，核苷酸2456-4340，Hillebrand等人(1996)Gene 170：197-200)。

b)组织特异性启动子

优选的为对于花药、子房、花、叶、茎、根及种子具有特异性的其它启动子。

种子特异启动子包含，例如菜豆蛋白启动子(US5,504,200；Bustos MM等人(1989)Plant Cell 1(9)：839-53)、2S白蛋白启动子(Joseffson LG等人(1987)J Biol Chem 262：12196-12201)、豆球蛋白启动子(ShirsatA等人(1989)Mol Gen Genet 215(2)：326-331)、USP(未知种子蛋白)启动子(Bumlein H等人(1991)Mol Gen Genet 225(3)：459-467)、napin启动子(US 5,608,152；Stalberg K等人(1996)L Planta 199：515-519)、蔗糖结合蛋白启动子(WO00/26388)、豆球蛋白B4启动子(LeB4；Bumlein H等人(1991)Mol Gen Genet 225：121-128；Bumlein H等人(1992)Plant J 2(2)：233-239；Fiedler U等人(1995)Biotechnology(NY)13(10)：1090f)、Arabidopsis油质蛋白启动子(WO 98/45461)、芸苔Bce4启动子(WO91/13980)。其它适当的种子特异启动子为编码高分子量麦谷蛋白(HMWG)、麦溶醇蛋白、分支酶、ADP葡萄糖焦磷酸酶(AGPase)或淀粉合酶基因的启动子。此外优选的启动子为允许在单子叶植物如玉米、大麦、小麦、黑麦、水稻等等中种子特异表达的启动子。以下可有益的进行应用：lpt2或lpt1基因启动子(WO95/15389、WO95/23230)或如WO99/16890中描述的启动子(大麦醇溶蛋白基因、谷蛋白基因、oryzin基因、水稻种子储存蛋白(prolamin)基因、麦溶醇蛋白基因、谷蛋白基因、玉米醇溶蛋白基因、kasirin基因或黑麦碱基因启动子)。

茎、贮藏根或根特异启动子包含，例如I类patatin启动子(B33)、马铃薯组织蛋白酶D抑制剂启动子。

叶特异启动子包含马铃薯胞质FBPase启动子(WO97/05900)、核酮糖二磷酸羧化酶(核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶)SSU(小亚单位)启动子或来自马铃薯的ST-LSI启动子(Stockhaus等人(1989)EMBO J 8：2445-2451)。非常特别优选的为表皮特异启动子例如，OXLP基因(草酸盐氧化酶样蛋白)启动子(Wei等人(1998)Plant Mol Biol 36：101-112)。

花特异启动子包含，例如八氢番茄红素合酶启动子(WO92/16635)或P-rr基因启动子(WO98/22593)。

花药特异启动子包含，例如5126启动子(US5,689,049、US5,689,051)、glob-l启动子及γ-玉米醇溶蛋白启动子。

c)化学诱导型启动子

表达盒也可包含化学诱导型启动子(综述文章：Gatz等人(1997)AnnuRev Plant Physiol Plant Mol Biol 48：89-108)，通过化学诱导型启动子在植物中外源基因在特定时间点的表达可及时得到控制。可谈及的实例为PRP1启动子(Ward等人(1993)Plant Mol Biol 22：361-366)、唾液酸诱导型启动子(WO95/19443)、苯磺胺诱导型启动子(EP 0 388 186)、四环素诱导型启动子(Gatz等人(1992)Plant J 2：397-404)、脱落酸诱导型启动子(EP 0 335 528)或乙醇或环己酮诱导型启动子(WO 93/21334)。

d)应激或病原体诱导型启动子

其它优选的启动子为通过生物或非生物应激诱导的启动子如来自马铃薯的PRP1基因的病原体诱导型启动子(或gst1启动子)(WO 96/28561；Ward等人(1993)Plant Mol Biol 22：361-366)、番茄高温诱导型hsp70或hsp80启动子(US 5,187,267)、马铃薯低温诱导型α-淀粉酶启动子(WO96/12814)或光诱导型PPDK启动子。其它病原体诱导型启动子包含亚麻Fis1启动子(WO 96/34949)、Vst1启动子(Schubert等人(1997)PlantMol Biol 34：417-426及烟草EAS4倍半萜环化酶启动子(US 6,100,451)。

病原体诱导型启动子进一步包含作为病原体感染结果而诱导的基因启动子，所述基因例如PR蛋白质、SAR蛋白质、β-1，3-葡聚糖酶、壳多糖酶的基因等等(例如Redolfi等人(1983)Neth J Plant Pathol 89：245-254；Uknes等人(1992)Plant Cell 4：645-656；Van Loon(1985)Plant Mol Viral4：111-116；Marineau等人(1987)Plant Mol Biol 9：335-342；Matton等人(1987)Molecular Plant-Microbe Interactions 2：325-342；Somssich等人(1986)Proc Natl Acad Sci USA 83：2427-2430；Somssich等人(1988)Mol Gen Genetics 2：93-98；Chen等人(1996)Plant J 10：955-966；Zhang和Sing(1994)Proc Natl Acad Sci USA 91：2507-2511；Warner等人(1993)Plant J 3：191-201；Siebertz等人(1989)Plant Cell 1：961-968(1989)。

也包含创伤诱导型启动子如pinII基因启动子(EP-A 0 375 091；Ryan(1990)Ann Rev Phytopath 28：425-449；Duan等人(1996)Nat Biotech14：494-498)、wun1及wun2基因启动子(US 5,428,148)、win1及win2基因启动子(Stanford等人(1989)Mol Gen Genet 215：200-208)、系统素基因启动子(McGurl等人(1992)Science 225：1570-1573)、WIP1基因启动子(Rohmeier等人(1993)Plant Mol Biol 22：783-792；Eckelkamp等人(1993)FEBS Letters 323：73-76)、MPI基因启动子(Corderok等人(1994)Plant J 6(2)：141-150)等等。

其它病原体诱导型启动子的来源为PR基因家族。这些启动子的一系列元件证明是有益的。因此，PR-2d启动子的-364至-288区介导水杨酸特异性(Buchel等人(1996)Plant Mol Biol 30，493-504)。5’-TCATCTTCTT-3’序列在大麦β-1，3-葡聚糖酶启动子及在30个以上其它经应激诱导基因重复存在。在烟草中，该区与通过水杨酸而增加的核蛋白质结合。来自烟草及拟南芥(Arabidopsis)的PR-1启动子(EP-A 0 332 104、WO 98/03536)同样适于病原体诱导型启动子。由于特别的为经病原体诱导的，优选的为来自大麦(Schweizer等人(1997)Plant Physiol 114：79-88)及小麦(Rebmann等人(1991)Plant Mol Biol 16：329-331)的酸性PR-5(aPR5)启动子。在病原体攻击后约4至6小时，PR5蛋白质积聚并显示只有非常少的背景表达(WO 99/66057)。用于达到增强经病原体诱导特异性的方法为产生来自病原体反应元件组合的合成启动子(Rushton等人(2002)Plant Cell 14，749-762；WO 00/01830；WO 99/66057)。其它来自不同物种的病原体诱导型启动子是熟练技术人员已知的(EP-A 1 165 794；EP-A1 062 356；EP-A 1 041 148；EP-A 1 032 684)。

e)发育依赖启动子

其它适当启动子为，例如果实成熟特异启动子例如番茄果实成熟特异启动子(WO 94/21794、EP 409 625)。由于单独的组织发育本身是发育依赖方式的，发育依赖启动子部分包含组织特异启动子。

特别优选的为组成型启动子及也特别优选叶和/或茎特异、病原体诱导型及表皮特异性启动子，病原体诱导型及表皮特异性启动子为最优选的。

此外，启动子可与欲进行表达的核酸序列功能性连接，所述启动子使在其它植物组织或在其它生物体例如大肠杆菌中表达成为可能。原则上，适当的植物启动子为所有以上描述的启动子。

存在于根据本发明表达盒的核酸序列可与除启动子外的其它基因调控序列连可操纵的连接。术语“基因调控序列”在广义上进行理解并指的是对根据本发明表达盒的产生或功能有作用的所有序列。例如，基因调控序列修饰原核生物或真核生物体的转录及翻译。优选地，根据本发明的表达盒包含对于胚芽上皮和/或花具有特异性的位于欲重组表达的所述核酸序列的5’-上游的启动子，及作为进一步基因调控序列的3’-下游终止序列，并且，根据需要，还包含与欲进行重组表达的核酸序列功能性连接的其他常见调控元件。

基因调控序列也包含其它启动子、启动子元件或小启动子，所有所述调控序列可修饰表达特性。因此，例如，由于基因调控序列，组织特异性表达又可依赖于某些应激因子。例如对于水应激、脱落酸(Lam E和ChuaNH(1991)J Biol Chem 266(26)：17131-17135)及热应激(Schoffl F等人(1989)Mol Gen Genetics 217(2-3)：246-53)对此类元件进行了描述。

原则上，所有天然启动子与它们的调节序列(如以上阐述的序列)一起可用于根据本发明所述的方法。此外，合成启动子也可有益的进行应用。

此外基因调控序列也包含基因的5’-非翻译区、内含子或非编码3’-区，如肌动蛋白-1内含子或Adh1-S内含子1、2及6(一般性参考文献：The Maize Handbook，第116章，Freeling和Walbot编辑，Springer，纽约(1994))。已经证实它们在基因表达调节中起重要作用。因此，已经证实5’-非翻译序列可增强外源基因的瞬时表达。可进行谈及的翻译增强子的实例为烟草花叶病毒5’前导序列(Gallie等人(1987)Nucl Acids Res 15：8693-8711)等等。此外，它们可促进组织特异性(Rouster J等人(1998)Plant J 15：435-440)。

表达盒可有益的包含一个或多个已知的与启动子功能性连接的增强子序列，这样使核酸序列的重组表达增强成为可能。其它有益序列，如其它调控元件或终止子，也可插入到欲进行表达核酸序列的3’端。一个或多个拷贝的欲进行重组表达的核酸序列可存在于基因构建体中。

适于作为调控序列的多腺苷酸化信号为植物多腺苷酸化信号，优选基本上对应于来自根癌农杆菌(Agrobacterium tumefacien)的T-DNA多腺苷酸化信号，特别是Ti质粒pTiACHS T-DNA的基因3(章鱼碱合酶)(Gielen等人(1984)EMBO J 3：835等序列)或其功能等同物。特别适当的终止序列的实例为OCS(章鱼碱合酶)终止子及NOS(胭脂碱合酶)终止子。

调控序列进一步理解为使同源重组或插入到宿主生物体基因组或允许自基因组去除成为可能的序列。在同源重组时，例如特定基因的天然启动子可交换为对胚芽上皮和/或花具有特异性的启动子。方法如cre/lox技术，根据需要可诱导，允许自宿主生物体基因组组织特异去除表达盒(Sauer B(1998)Methods.14(4)：381-92)。在这里，将某些侧翼序列(lox序列)加入到靶基因中，所述侧翼序列后来通过cre重组酶去除成为可能。

衍生自它们的表达盒及载体可包含额外功能性元件。术语功能性元件在广义上理解并指的是对根据本发明的表达盒、载体或转基因生物体的产生、扩增或功能有作用的所有元件。以下可通过举例的方式，但不受限制进行阐述：

a)对代谢抑制剂(如2-脱氧葡糖-6-磷酸盐(WO 98/45456))、抗生素、杀生物剂，优选除草剂如卡那霉素、G418、博来霉素、潮霉素或膦丝霉素等等具有抗性的选择标记。特别优选的选择标记为对除草剂具有抗性的选择标记。可进行阐述的实例为：编码膦丝霉素乙酰转移酶(PAT)及灭活谷氨酰胺合酶抑制剂(bar及pat基因)、对草甘磷(N-(膦酰基甲基)甘氨酸)有抗性的5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸盐合酶基因(EPSP合酶基因)、编码草甘磷降解酶(草甘磷氧化还原)的gox基因、deh基因(编码灭活茅草枯的脱卤素酶)、黄酰脲及咪唑啉酮灭活乙酰乳酸合酶，及编码溴草腈降解腈水解酶的bxn基因、对抗生素apectinomycin有抗性的aasa基因、对链霉素有抗性的链霉素磷酸转移酶(spt)基因、对卡那霉素或遗传霉素有抗性的新霉素磷酸转移酶(nptII)基因、介导潮霉素抗性的潮霉素磷酸转移酶(hpt)基因、对磺酰脲除草剂(例如例如有S4和/或Hra突变的经突变ALS变体)具有抗性的乙酰乳酸合酶基因(ALS)。

b)编码易于可计量蛋白质的报道基因及，通过它们的颜色或酶活性使评估转化率、表达位点或表达时间成为可能。在文中非常特别优选的为报道蛋白质(Schenborn E，Groskreutz D.Mol Biotechnol.1999；13(1)：29-44)如绿色荧光蛋白(GFP)(Sheen等人(1995)Plant Journal8(5)：777-784；Haseloff等人(1997)Proc Natl Acad Sci USA 94(6)：2122-2127；Reichel等人(1996)Proc Natl Acad Sci USA 93(12)：5888-5893；Tian等人(1997)Plant Cell Rep 16：267-271；WO 97/41228；Chui WL等人(1996)Curr Biol 6：325-330；Leffel SM等人(1997)Biotechniques.23(5)912-8)、氯霉素转移酶、萤光素酶(Ow等人(1986)Science 234：856-859；Millar等人(1992)PlantMol Biol Rep 10：324-414)、aequoringen(Prasher等人(1985)BiochemBiophys Res Commun 126(3)：1259-1268)、β-半乳糖苷酶、R-基因座基因(在植物组织中编码调节花色素苷色素(红色)产生的蛋白质并因此使直接分析启动子活性而不添加额外佐剂或显色底物成为可能；Dellaporta等人，染色体结构和功能：新概念的冲击，第18届Stadler遗传专题研讨会，11：263-282，1988中)，β-半乳糖苷酶是非常特别优选的(Jefferson等人，EMBO J.1987，6，3901-3907)。

c)确保根据本发明的表达盒或载体在例如大肠杆菌扩增的复制起始区。可谈及的实例为ORI(DNA复制起始区)pBR322 ori或P15A ori(Sambrook等人：Molecular Cloning.A Laboratory Manual，第2版，Cold Spring Harbor Laboratory出版社，Cold Spring Harbor，NY，1989)。

d)经农杆菌介导的植物转化必需的元件例如，T-DNA或vir区的右或左边界。

将根据本发明的表达盒导入到生物体或其细胞、组织、器官、部分或种子(优选导入到植物或植物细胞、组织、器官、部分或种子)可用包含表达盒的载体有益地完成。通过适当的限制性切割位点可将表达盒导入到载体(例如质粒载体)中。形成的质粒首先导入到大肠杆菌中。将正确转化的大肠杆菌进行选择、生长并通过熟练技术人员熟悉的方法获得重组质粒。限制性分析及测序可用于验证克隆步骤。

载体的实例可为质粒、粘粒、噬菌体、病毒或农杆菌。在有益的实施方案中，表达盒通过质粒载体进行导入。优选的载体为使表达盒稳定整合到宿主基因组中的载体。

经转化生物体(或经转化细胞或组织)的增殖需要将所述DNA、RNA或蛋白质导入到对应的宿主细胞。

可获得多种方法用于此过程，所述过程称为转化(或转导或转染)(Keown等人(1990)Methods in Enzymology 185：527-537)。例如，通过微注射或用经DNA包裹微粒轰击将DNA或RNA直接导入。并且，也将细胞进行化学透化处理，例如用聚乙二醇处理以便DNA通过扩散进入细胞。也可通过与其它DNA包含单元如微细胞、细胞、溶酶体或脂质体的原生质体融合将DNA导入。另一个导入DNA的适当方法为电穿孔，细胞通过电脉冲可逆地进行透化。对适当的方法已进行了描述(例如通过Bilang等人(1991)Gene 100：247-250；Scheid等人(1991)Mol Gen Genet228：104-112；Guerche等人(1987)Plant Science 52：111-116；Neuhause等人(1987)Theor Appl Genet 75：30-36；Klein等人(1987)Nature 327：70-73；Howell等人(1980)Science 208：1265；Horsch等人(1985)Science227：1229-1231；DeBlock等人(1989)Plant Physiology 91：694-701；Methods for Plant Molecular Biology(Weissbach和Weissbach编辑)Academic Press Inc.(1988)；及Methods in Plant Molecular Biology(Schuler和Zielinski编辑Academic Press Inc.(1989))。

在植物中，以上描述的自植物组织或植物细胞转化及再生植物的方法用于瞬时或稳定转化。适当的方法为通过经聚乙二醇诱导DNA摄取的特定原生质体转化、用基因枪的生物弹射击(biolistic)方法、已知为粒子轰击方法、电穿孔、干胚芽在DNA包含溶液中孵育及显微注射。

除了这些“直接”转化技术外，转化也可通过根癌农杆菌或发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)的细菌感染进行完成。农杆菌介导的转化最好适于双子叶植物细胞。例如通过Horsch RB等人(1985)Science 225：1229f对此方法进行了描述。

当应用农杆菌时，表达盒必需整合到特异性质粒，或整合到穿梭或中间载体或整合到双元载体中。如果Ti或Ri质粒用于转化，Ti或Ri质粒T-DNA的至少右边界，但大多数情况下右边界及左边界与欲进行导入的转基因表达构建体以侧翼区的形式连接。

优选应用双元载体。双元载体均能在大肠杆菌及农杆菌中复制。作为规则，它们包含用于选择经转化植物(参见以上内容)的选择标记基因及侧翼为右及左T-DNA边界序列的接头或多接头。它们可直接转化到农杆菌中(Holsters等人(1978)Mol Gen Genet 163：181-187)。除了T-DNA区外，它们可另外包含如用于选择经转化大肠杆菌或农杆菌的选择标记基因(例如nptIII基因)的元件。在这种情况下作为宿主生物体的农杆菌应已包含具有vir区的质粒。需要具有vir区的质粒用于将T-DNA转移到植物细胞中。以这种方式转化的农杆菌可用于转化植物细胞。用于转化植物细胞的T-DNA的用途已进行了研究及详细描述(EP 120 516；Hoekema，在The Binary Plant Vector System，Offsetdrukkerij Kanters B.V.，Alblasserdam，第V章；An等人(1985)EMBO J 4：277-287)。多种双元载体是已知的，一些是商业上可获得的如pBI101.2或pBIN19(ClontechLaboratories，Inc.美国)。

对适于在植物中表达的其它启动子进行了描述(Rogers等人(1987)Meth in Enzymol 153：253-277；Schardl等人(1987)Gene 61：1-11；Berger等人(1989)Proc Natl Acad Sci USA 86：8402-8406)。

直接转化技术适于任何生物体及细胞类型。

在将DNA或RNA注射或电穿孔入植物细胞的情况下，应用的质粒不需符合任何特定要求。可应用简单质粒如pUC系列。如果整株植物自经转化细胞进行再生，额外可选择标记基因位于质粒上是有益处的。

经稳定转化细胞，即包含整合到宿主细胞DNA的经导入DNA的转化细胞，当可选择标记为导入DNA的部分时可自未转化细胞中进行选择。可作为标记的基因的实例为对杀生物剂(例如抗生素、除草剂或代谢抑制剂如2-脱氧葡糖-6-磷酸WO 98/45456)有抗性的基因(参见以上内容)。表达此类标记基因的经转化细胞在杀死未转化野生型的对应浓度的抗生素或除草剂存在的条件下存活。实例在以上谈及并优选包含对除草剂膦丝霉素有抗性的bar基因(Rathore KS等人(1993)Plant Mol Biol 21(5)：871-884)、对卡那霉素有抗性的nptII基因、对潮霉素有抗性的hpt基因或对除草剂草甘磷有抗性的EPSP基因。选择标记允许自未转化细胞中选择经转化细胞(McCormick等人(1986)Plant Cell Reports 5：81-84)。获得的植物可按常规方式进行繁殖及杂交。应生长两代或多代以确保基因组整合是稳定及遗传的。

对以上谈及的方法进行了描述，例如在SD Kung和R Wu编辑，Transgenic Plants第1卷，Engineering and Utilization，Academic Press一书中Jenes B等人(1993)，基因转移技术，128-143页，以及在Potrykus(1991)Annu Rev Plant Physiol Plant Molec Biol 42：205-225。优选将欲进行表达的构建体克隆到载体中，所述载体例如pBin19适用于转化根癌农杆菌(Bevan等人(1984)Nucl Acids Res 12：8711f)。

经转化植物细胞一产生，用熟练技术人员已知的方法就可获得整株植物。例如，将愈伤组织培养物用作起始材料。用已知的方式，茎及根的发育可自这个尚未分化的细胞生物质进行诱导。获得的茎可种植在室外并进行育种。

熟练技术人员熟悉自植物细胞及植物部分再生完整植物的此类方法。对此类方法例如，通过Fennell等人(1992)Plant Cell Rep.11：567-570；Stoeger等人(1995)Plant Cell Rep.14：273-278；Jahne等人(1994)TheorAppl Genet 89：525-533进行了描述。

根据本发明所述的方法可有益的与其它方法进行组合，所述其它方法引起病原体抗性(例如对昆虫、真菌、细菌、线虫等等)、应激抗性或植物特性的其它改进。实例在Dunwell JM，改良作物的转基因方法，J ExpBot.2000；51 Spec No；第487-96页等等中提及。

例如，关于核酸序列、包含所述核酸序列的表达盒或载体或用所述核酸序列转化的生物体、表达盒或载体，“转基因”表示所有通过重组方法产生的所有构建体，其中

a)NADPH氧化酶核酸序列，或

b)与NADPH氧化酶核酸序列功能性连接的基因调控序列，例如启动子或

c)(a)及(b)

不位于它们的天然遗传环境中或通过重组方法已进行修饰，修饰的实例为替代、添加、缺失、倒位或插入一个或多个核苷酸残基。天然遗传环境指的是来源生物体的天然染色体基因座，或存在于基因组文库。对于基因组文库，核酸序列的天然遗传环境优选至少部分保留。环境在核酸序列侧翼的至少一侧并具有序列长度至少为50bp，优选至少500bp，特别优选至少1000bp，非常特别优选至少5000bp。当天然存在的组合通过非天然的人工(“人工”)方法如例如诱变处理进行修饰时，天然存在表达盒—例如NADPH氧化酶启动子及对应的NADPH氧化酶基因的天然存在组合成为转基因表达盒。对适当的方法进行了描述(US 5,565,350；WO 00/15815；也参见以上内容)。

本发明的另一方面涉及用至少一个核苷酸序列转化的转基因生物体、根据本发明的表达盒或载体，并涉及细胞、细胞培养物、组织、部分—如对于植物生物体、叶、根等等—或衍生自此类生物体的繁殖材料。生物体在广义上进行理解并表示原核及真核生物体，优选细菌、酵母、真菌、动物及植物生物体。

以下是优选的：

a)真菌如曲霉属、假囊酵母属(Eremothecium)、木霉属(Trichoderma)、阿舒囊霉属(Ashbya)、链孢霉属(Neurospora)、镰孢属、白僵菌属(Beauveria)或在Indian Chem Eng.B部分第37卷，第1、2期(1995)第15页表6中描述的其它真菌。特别优选的为丝状半子囊菌棉阿舒囊霉(Ashbya gossypi)或阿舒假囊酵母(Eremothecium ashbyii)。

b)酵母如念珠菌(Candida)、酵母菌(Saccharomyces)、汉森(Hansenula)或毕赤(Pichia)酵母，其中酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)(ATCC登录号201178)是特别优选的，

c)根据上述用于“植物”定义的植物，

d)脊椎动物及无脊椎动物。特别优选的脊椎动物为非人哺乳动物如犬、猫、绵羊、山羊、鸡、小鼠、大鼠、牛或马。优选的动物细胞包含CHO、COS、HEK293细胞。优选的无脊椎动物包含昆虫细胞如果蝇S2及灰翅夜蛾属(Spodoptera)Sf9或Sf21细胞，

e)原核生物体如革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌如醋酸杆菌(Acetobacter)、葡萄糖杆菌(Gluconobacter)、棒状杆菌(Corynebacterium)、短杆菌(Brevibacterium)、芽孢杆菌(Bacillus)、梭状芽孢杆菌(Clostridium)、蓝细菌(Cyanobacter)、埃希杆菌(Escherichia)(特别是大肠杆菌)、沙雷氏菌(Serratia)、葡萄球菌(Staphylococcus)、产气杆菌(Aerobacter)、产碱杆菌(Alcaligenes)、青霉菌(Penicillium)或克雷博氏菌(Klebsiella)。

优选作为转基因生物体的宿主或原初生物体为根据上述定义的特定植物。本发明范围内包括的为植物界高等或低等的所有属或种。此外包括的为成熟植物、种子、茎及幼苗及衍生自它们的部分、繁殖材料及培养物，例如细胞培养物。成熟植物表示除幼苗阶段外处于任何发育阶段的植物。幼苗表示处于早期发育阶段的幼小未成熟植物。可应用特别优选作为宿主生物体的植物，所述植物为可应用根据本发明方法的植物，所述根据本发明所述的方法为根据上述标准用于获得病原体抗性的方法。非常特别优选的为单子叶植物如小麦、燕麦、谷子、大麦、黑麦、玉米、水稻、玉米、荞麦、高粱、黑小麦、斯佩耳特小麦、亚麻子、甘蔗，及双子叶植物如油菜、芸苔、水芹、芸苔、拟南芥、卷心菜、大豆、苜蓿、豌豆、豆科植物、花生、马铃薯、烟草、番茄、茄子、辣椒、向日葵、万寿菊、莴苣、金展草、瓜、南瓜/西葫芦或胡瓜。

转基因生物体可用上述用于转化或转染生物体的方法进行产生。

本发明的又一方面涉及根据本发明所述的生物体的用途及细胞培养物部分—如例如对于转基因植物生物体根、叶等等—及转基因繁殖材料如衍生自这些生物体的种子或果实用于产生粮食、饲料、药物或精细化学品的用途。

此外优选的为用于在宿主生物体中重组产生药物或精细化学品的方法，宿主生物体用经以上描述表达盒之一进行转化并且该表达盒包含一个或多个结构基因，所述结构基因编码目的精细化学品或催化目的精细化学品的生物合成。将经转化宿主生物体进行培养，并且将目的精细化学品自培养基中进行分离。该方法可广泛用于精细化学品如酶、维生素、氨基酸、糖、脂肪酸、天然及合成调味剂、芳香物质及着色剂。特别优选的为生育酚及生育三烯酸的产生及类萝卜素的产生。培养经转化宿主生物体及自宿主生物体或自培养基中的分离，用熟练技术人员已知的方法进行。药物例如抗体或疫苗的产生，通过Hood EE，Jilka JM(1999)Curr OpinBiotechnol 10(4)：382-6；Ma JK，Vine ND(1999)Curr Top MicrobiolImmunol 236：275-92进行了描述。

序列

1.SEQ ID NO：1编码大麦(Hordeum vulgare)NADPH氧化酶的核酸序列。

2.SEQ ID NO：2编码大麦NADPH氧化酶的氨基酸序列。

3.SEQ ID NO：3编码水稻(Oryza sativa var.japonica)NADPH氧化酶的核酸序列。

4.SEQ ID NO：4编码水稻(Oryza sativa var.japonica)NADPH氧化酶的氨基酸序列。

5.SEQ ID NO：5编码烟草(Nicotiana tabacum)NADPH氧化酶的核酸序列

6.SEQ ID NO：6编码烟草)NADPH氧化酶的氨基酸序列

7.SEQ ID NO：7编码马铃薯(Solanum tuberosum)NADPH氧化酶的核酸序列

8.SEQ ID NO：8编码马铃薯NADPH氧化酶的氨基酸序列

9.SEQ ID NO：9编码番茄(Lycopersicon esculentum)NADPH氧化酶的核酸序列

10.SEQ ID NO：10编码番茄NADPH氧化酶的氨基酸序列

11.SEQ ID NO：11编码南方拟南芥菜(aus Arabidopsis thaliana)(RbohF)NADPH氧化酶的核酸序列

12.SEQ ID NO：12编码南方拟南芥菜(RbohF)NADPH氧化酶的氨基酸序列

13.SEQ ID NO：13编码拟南芥菜(Arabidopsis thaliana)(RbohD)NADPH氧化酶的核酸序列

14.SEQ ID NO：14编码拟南芥菜(RbohD)NADPH氧化酶的氨基酸序列

15.SEQ ID NO：15编码烟草(rboh)NADPH氧化酶的核酸序列

16.SEQ ID NO：16编码烟草(rboh)NADPH氧化酶的氨基酸序列

17.SEQ ID NO：17编码水稻(Oryza sativa var.japonica)NADPH氧化酶的核酸序列

18.SEQ ID NO：18编码水稻(Oryza sativa var.japonica)NADPH氧化酶的氨基酸序列

19.SEQ ID NO：19编码拟南芥菜(RbohC)NADPH氧化酶的核酸序列

20.SEQ ID NO：20编码拟南芥菜(RbohC)NADPH氧化酶的氨基酸序列

21.SEQ ID NO：21编码拟南芥菜(RbohA)NADPH氧化酶的核酸序列

22.SEQ ID NO：22编码拟南芥菜(RbohA)NADPH氧化酶的氨基酸序列

23.SEQ ID NO：23寡核苷酸引物5’NAOX

              5’-GARCAAGGCTCTTTTGATTG-3’

24.SEQ ID NO：24寡核苷酸引物3’Naox

              5’-GAAATGCTCCTTATGGAATTC-3’

附图

图1：用pNAox-dsRNA进行RNA干扰降低大麦中大麦BghA6白粉病的穿透率

在用来自大麦cv Pallas的Bgh接种的五个单独实验中对相对穿透率(RPE)进行确定。将RPE计算为经pNAox-dsRNA转化细胞的穿透率与经对照-dsRNA转化细胞的穿透率之间的差异(在这里：平均穿透率为38.74％)。RPE百分率(％RPE)自RPE减1并乘以100进行计算

％RPE＝100*(RPE-1)

对于每种情况下一个独立实验，当评估至少100个相互作用位点时，柱(1)至(5)代表％RPE(即自对照的平均穿透率的穿透率离散性)。柱(m)代表实验的平均％RPE。误差条表示标准误。

“对照dsRNA”代表用对照dsRNA进行的平行实验。“pNAox”dsRNA代表用大麦NADPH氧化酶dsRNA进行的实验。

在用pNAox-dsRNA进行轰击的细胞中，与用对照dsRNA(TR：人甲状腺受体dsRNA)轰击的细胞湘比，％RPE显著(显著性p＝0.0054)降低。

实施例

一般方法：

寡核苷酸的化学合成可例如通过磷酰亚胺(phosphoamidite)法的已知方式进行(Voet，Voet，第2版，Wiley出版社，纽约，第896-897页)。克隆步骤在本发明的范围内进行，例如限制性酶切、琼脂糖凝胶电泳、DNA片段的纯化、核酸转移到硝酸纤维膜及尼龙膜、DNA片段结合、大肠杆菌细胞的转化、细菌培养、噬菌体增殖及重组DNA的序列分析，通过Sambrook等人(1989)Cold Spring Harbor Laboratory出版社；ISBN0-87969-309-6描述的方法进行。重组DNA分子根据Sanger方法(Sanger等人(1977)Proc Natl Acad Sci USA 74：5463-5467)用来自MWG Licor的激光荧光DNA测序仪进行测序。

实施例1：植物、病原体及接种

Pallas变种由丹麦哥本哈根皇家兽医及农业大学植物病理学系LisaMunk提供。对它的产生进行了描述( P等人(1986)Crop Sci 26：903-907)。

除了另有说明外，将在湿滤纸上于暗处进行预发芽12至36小时的种子每孔5粒置于P类型Fruhstorfer土壤的方形罐(8×8cm)边缘，用土壤覆盖并规律的用自来水浇灌。所有植物在经控制环境橱或环境箱中生长5至8天，所述经控制环境的橱或环境箱为16至18℃，50至60％相对大气湿度及16小时光照/8小时黑暗光周期为3000或5000勒克斯(光子通量密度50或60μmols-¹m-²)并在幼苗阶段期间在实验中应用。在实验中对完全发育的子叶进行处理。

进行瞬时转染前，植物在经控制环境橱或环境箱中生长，所述经控制环境的橱或箱为24℃的日间温度，20℃夜间温度，50至60％相对大气湿度及3000勒克斯的16小时光照/8小时黑暗光周期。

禾谷类白粉菌大麦专化型Em.Marchal race A6(Wiberg A(1974)Hereditas 77：89-148)(BghA6)用于接种大麦。真菌是自JLU Gieβen的生物统计学系提供的。接种物在经控制环境橱或环境箱中如以上描述的用于植物的相同条件下进行繁殖，通过以密度为100个分生孢子/平方毫米将感染材料的分生孢子转移到规律生长的7日龄大麦植物cv.GoldenPromise中。

通过在接种塔内以大约100个分生孢子/平方毫米(除了特别注明外)自经感染植物抖落分生孢子，从而对7日龄幼苗进行BghA6接种。

实施例2；大麦pNAox cDNA序列的克隆

用于分离HvpNAox cDNA所需的cDNA片段、其克隆、测序及探针的产生通过用“一步RT-PCR试剂盒”(Life Technologies，Karlsruhe，德国，或Qiagen，Hilden，德国)获得。为此目的，将来自大麦幼苗的总RNA用作模板。RNA分离自发芽后3、5及7天的Pallas。此外，RNA自Pallas分离，并自发芽后第7天在用BghA6接种后1、2及5天的mlo5、Mlg或Mla12回交系分离。用衍生自水稻及拟南芥菜的gp91phox同源物(基因库登录号：X93301和AB008111)保守区的引物进行RT-PCR。5’NAOX：5’-GARCAAGGCTCTTTTGATTG-3’(SEQ ID NO：23)及3’Naox：5’GAAATGCTCCTTATGGAATTC 3’(SEQ ID NO：24)

每种情况下，1000ng总DNA，0.4mM dNTPs，每种情况下0.6mMOPN-1及OPN-2引物，10μl RNase抑制剂及1x RT缓冲液中1μl酶混合物(一步RT-PCR试剂盒，Qiagen，Hilden)用于反应。

应用以下温度程序(PTC-100TM model 96V；MJ Research；Inc.；Watertown；马萨诸塞州)：

于50℃，30分钟进行1个循环

于94℃，150秒进行1个循环

94℃45秒，55℃1分钟及72℃2分钟进行30个循环

72℃7分钟进行1个循环

PCR产物通过2％w/v琼脂糖凝胶电泳进行分离。这得到编码大麦NADPH氧化酶可读框部分的378bp RT-PCR产物(SEQ ID NO：1)。对应的cDNA自琼脂糖凝胶进行分离并通过T-突出端连接克隆入pGEM-T载体(Promega，Mannheim，德国)。cDNAs用“热测序酶经荧光标记引物循环测序试剂盒”(Amersham，Freiburg，德国)自质粒DNA进行测序。将构建体命名为pGEM-T-pNAox。

实施例3：pNAox dsRNA的体外合成

用于体外RNA转录的质粒在所插入核酸序列的两侧分别包含T7及SP6启动子，使有义RNA及反义RNA的合成成为可能。质粒可用适当的限制性酶(ApaI用于SP6聚合酶及PstI用于T7聚合酶)进行线性化，以确保经插入核酸序列的正确转录及以防止通读到载体序列。为此目的，每种情况下，10μgpGEM-T-pNAox质粒DNA用ApaI进行切割用于SP6聚合酶并用PstI切割用于T7聚合酶。经切割质粒用200μl水中含等量体积的酚/氯仿/异戊醇进行提取，转移到新Eppendorf管(无RNAse)并于20 000g离心5分钟。180μl质粒溶液用420μl乙醇进行处理，置于冰上并随后通过于-4℃，20 000g离心30分钟进行沉淀。将沉淀物用10μl TE缓冲液进行悬浮。所述沉淀物分别直接用于T7-RNA聚合酶的体外转录。RNA聚合酶获自Roche Molecular Biology，Mannheim，德国。

每种转录混合物在40μl体积中包含以下物质：

2μl线性化质粒DNA(1∝g)

2μl NTPs(25mM)(1.25mM每种NTP)

4μl 10x反应缓冲液(Roche Molecular Biology)，

1μl RNAsin RNAsin(27个单位；Roche Molecular Biology)，

2μl RNA聚合酶(40个单位)

29μl DEPC水

于37℃孵育2小时后，在每种情况下将来自转录有义及反义链的一些反应混合物进行混合，于95℃变性5分钟，然后通过冷却30分钟至最终温度37℃互相杂交(退火)。备选地，有义及反义链混合物也可在退火后于-20℃冷却30分钟。在变性及杂交期间形成的蛋白质沉淀物通过于20 800g简短离心进行去除，将上清直接用于包裹钨颗粒(参见下文)。每种情况下，1μl每条RNA链及1μl dsRNA在非变性琼脂糖凝胶上进行分离用于分析。与单一链相比，带移向较高分子量处表明为成功的杂交。

4μl dsRNA用乙醇(加入6μl水、1μl 3M乙酸钠溶液及25μl乙醇，并于20 000g及4℃至少离心5分钟)进行沉淀并在500μl水中重新悬浮。测定230及300nm之间的吸收谱或确定在280及260nm的吸光度以确定dsRNA的纯度及浓度。原则上，获得80至100μg OD260/OD280比率为1.80至1.95的dsRNA。如果需要，可用DNaseI进行消化，但这对后来结果没有本质影响。

人甲状腺受体dsRNA(原初载体pT7betaSal(Norman C等人(1988)Cell 55(6)：989-1003)由德国，Gieβen，遗传学系Baniahmad博士提供，在基因库登录号NM-000461下描述的插入片段序列作为对照dsRNA。质粒用PvuII进行消化以产生有义RNA及用HindIII进行消化以产生反义RNA，然后将RNA用T7或SP6 RNA聚合酶进行转录。用于产生对照dsRNA的各过程步骤用类似于经以上描述的用于pNAox-dsRNA的过程步骤进行。

实施例4：瞬时转化、RNAi及真菌病原体发育的评估

大麦cv Pallas叶节用pNAox dsRNA与GFP表达载体一起进行转化。然后叶用Bgh进行接种并且在48小时后通过光学显微镜及荧光显微镜对结果进行分析。对GFP表达细胞的穿透性通过检测活细胞中的吸器进行评估并精确评估这些细胞中的真菌发育。在所有五个实验中，与用外源对照dsRNA(人甲状腺激素受体dsRNA，TR)轰击的细胞相比，用pNAoxdsRNA轰击大麦cv Pallas成功导致被Bgh穿透的细胞数降低。pNAoxdsRNA的抗性诱导作用导致Bgh穿透效率平均降低达35％(图4)。

已经描述的用于生物导入dsRNA至大麦叶的上皮细胞的方法用于瞬时转化(Schweizer P等人(1999)Mol Plant Microbe Interact 12：647-54；Schweizer P等人(2000)Plant J 2000 24：895-903)。直径为1.1μm的钨颗粒(颗粒密度为25mg/ml)用dsRNA(制备参见以上内容)与载体pGFP(GFP处于CaMV 35S启动子控制下)质粒DNA一起进行包裹作为转录标记。为此目的，以下量的dsRNA及报道质粒用于每次包裹：1μgpGFP及2μg dsRNA。双链RNA通过有义及反义RNA的体外退火进行合成(参见以上内容)。

为制备微载体，55mg钨颗粒(M17，直径1.1μm；Bio-Rad，慕尼黑)用1ml高压灭菌蒸馏水洗涤两次并用1ml无水乙醇洗涤一次，进行干燥并用1ml 50％强度甘油(大约50mg/ml贮液)悬浮。溶液用50％甘油进行稀释到25mg/ml，用前仔细混匀并在超声浴中悬浮。为包裹微载体，每次1μg质粒、2μg dsRNA(1μl)、12.5μl钨颗粒悬液(25mg/ml)、12.5μl 1M Ca(NO₃)₂溶液(pH10)在经常混匀下进行逐滴混合，于室温静置10分钟，简短离心并将20μl上清进行去除。将与钨颗粒一起的剩余物进行重新悬浮(超声浴)并用于实验。

用大约4cm长的大麦第一叶节。将组织置于添加20μg/ml苯并咪唑的0.5％ Phytagar(GibcoBRL^TM Life Technologies^TM，Karlsruhe)培养皿(直径6.5cm)中，并在离子轰击前，将边缘用具有尺寸为2.2cm×2.3cm的长方形开口的模板进行覆盖。将培养皿一个接一个置于真空箱底部(Schweizer P等人(1999)Mol Plant Microbe Interact 12：647-54)，在上面的带孔板上插入尼龙过滤网(过滤网大小为0.2mm，Millipore，Eschborn)作为扩散器(底部以上5cm，微载体下11cm，参见下文)以散开颗粒块放慢颗粒流速。每次用5.8μl DNA包裹的钨颗粒装到吸附在箱顶部的微载体上(塑料无菌漏斗架，13mm，Gelman Sciences，Swinney，英国)(微载体，参见下文)。用隔膜真空泵(Vacuubrand，Wertheim)将箱内的压力降到0.9巴。并且钨颗粒在9巴氦气压力下的植物组织表面着火。然后立即将箱进行充气。为标记经转化细胞，叶用质粒进行轰击(pGFP；基于pUC18的载体，具有经插入GFP基因的CaMV 35S启动子/终止子盒；Schweizer P等人(1999)Mol Plant Microbe Interact 12：647-54；由德国，Gatersleben，植物遗传学IPK系，P.Schweizer博士提供)。每次将不同的质粒用于轰击，微载体预先用水进行仔细清洁。轰击后用轻微打开的培养皿于室温及有日光的条件下孵育四小时后，叶与大麦白粉病的100个分生孢子/平方毫米(race A6)进行孵育并在同样条件下继续孵育40至48小时。

叶节用颗粒流量枪用经包裹颗粒进行轰击。每次用312μg钨颗粒。轰击后4小时，叶用禾谷类白粉菌大麦专化型(race A6)进行接种并再经过40小时后评估感染症状。结果(如用成熟吸器攻击细胞的百分率定义的穿透率及通过荧光及光学显微镜对继发延长菌丝进行分析。用100个分生孢子/平方毫米接种得到经转化细胞的大约50％的感染率。至少100个相互作用位点用于每个分别实验的评估。经转化(GFP表达的)细胞在蓝光激发下进行鉴定。经转化细胞区分出三个不同类别：

1.包含易于识别吸器的经穿透细胞。具有一个以上吸器的细胞认为是一个细胞。

2.虽然被真菌附着器攻击但不包含吸器的细胞。被Bgh攻击一次以上但不包含吸器的细胞，认为是一个细胞。

3.没有被Bgh感染的细胞。

气孔细胞及卫细胞排除在评估之外。Bgh的表面结构通过光学显微镜或用0.1％荧光钙(Calcofluor)(在水中的w/v)将真菌荧光染色30秒进行分析。真菌的发育经荧光钙染色后通过荧光显微镜易于进行评估。在经pNAox-dsRNA转化细胞中，真菌发育成初级及附着芽管，但没有发育成吸器。吸器的发育是二级菌丝发育的条件。

相对穿透率(RPE)通过经转化细胞(用pNAox或对照dsRNA转化)的穿透率与未转化细胞的穿透率之间的差异进行计算(在这里：平均穿透率为38.74％)。RPE百分率(％RPE)自RPE减1并乘以100进行计算。

％RPE＝100*(RPE-1)

％RPE值(对照的平均穿透率的离散性)用于确定用pNAox-dsRNA转染细胞的易感性(图4)。

对于对照dsRNA，五个不同实验显示在关于Bgh的穿透率方面用对照dsRNA及水转染之间没有差异。

为排除dsRNA的作用及经攻击细胞的转化率或存活率，将对照实验及pNAox-dsRNA实验中GFP表达细胞的数目进行了比较。pNAox-dsRNA对经攻击GFP表达细胞的总数或数目没有影响。

实施例5：用氯化二亚苯基碘对NADPH氧化酶的抑制

结果通过用NADPH氧化酶抑制剂氯化二亚苯基碘(DPI)的进一步实验得到验证(表1)。一般而言，实验通过如Hückelhoven及Kogel，1998描述的进行。

表1：Pallas中DPI对病原体的防御作用^a

相互作用类型	相互作用(％±标准误)
			对照b	200μM DPIc
	穿透性非穿透性HR(超敏反应)	68.25±9.924.25±6.37.5±3.7			16.25±0.567.5±9.516.25±9.3

a用病原体接种后12小时进行DPI处理并在接种后36小时进行评估。

b用10mM磷酸钾缓冲液，pH7.8作为对照，DMSO含量如在DPI处理中的含量。

c DPI溶解于10mM磷酸钾缓冲液，pH7.8中，其来自于DMSO中的10mg/ml DPI贮液。

                           序列表

<110>巴斯福植物科学有限公司

<120>在植物中获得病原体抗性的方法

<130>AE20020416

<140>

<141>

<160>24

<170>PatentIn版本2.1

<210>1

<211>337

<212>DNA

<213>大麦(Hordeum vulgare)

<220>

<221>CDS

<222>(2)..(337)

<223>编码NADPH氧化酶(片段)

<400>1

g ttt aaa gga atc atg aat gag att gct gaa cta gat caa agg aat atc 49

  Phe Lys Gly Ile Met Asn Glu Ile Ala Glu Leu Asp Gln Arg Asn Ile

    1               5                  10                  15

att gag atg cac aac tat ctc aca agt gtt tat gag gaa ggg gat gct   97

Ile Glu Met His Asn Tyr Leu Thr Ser Val Tyr Glu Glu Gly Asp Ala

             20                  25                  30

cgg tca gca ctc atc aca atg ctg caa gct ctc aac cat gcc aag aat   145

Arg Ser Ala Leu Ile Thr Met Leu Gln Ala Leu Asn His Ala Lys Asn

         35                  40                  45

ggt gtc gat gta gtg tct ggm act cga gtc cgg aca cat ttt gca aga   193

Gly Val Asp Val Val Ser Xaa Thr Arg Val Arg Thr His Phe Ala Arg

     50                  55                  60

cca aat ttt aag agg gtg ctg tct aag gta gcc gcc aaa cat cct tat   241

Pro Asn Phe Lys Arg Val Leu Ser Lys Val Ala Ala Lys His Pro Tyr

 65                  70                  75                  80

gcc aag ata gga gtg ttc tat tgc gga gct cca gtt ctg gcg cag gaa   289

Ala Lys Ile Gly Val Phe Tyr Cys Gly Ala Pro Val Leu Ala Gln Glu

                 85                  90                  95

cta agc aac ctt tgc cat gag ttc aat ggc aaa tgc acg aca aaa ttc   337

Leu Ser Asn Leu Cys His Glu Phe Asn Gly Lys Cys Thr Thr Lys Phe

            100                 105                 110

<210>2

<211>112

<212>PRT

<213>大麦

<400>2

Phe Lys Gly Ile Met Asn Glu Ile Ala Glu Leu Asp Gln Arg Asn Ile

  1               5                  10                  15

Ile Glu Met His Asn Tyr Leu Thr Ser Val Tyr Glu Glu Gly Asp Ala

             20                  25                  30

Arg Ser Ala Leu Ile Thr Met Leu Gln Ala Leu Asn His Ala Lys Asn

         35                  40                  45

Gly Val Asp Val Val Ser Xaa Thr Arg Val Arg Thr His Phe Ala Arg

     50                  55                  60

Pro Asn Phe Lys Arg Val Leu Ser Lys Val Ala Ala Lys His Pro Tyr

 65                  70                  75                  80

Ala Lys Ile Gly Val Phe Tyr Cys Gly Ala Pro Val Leu Ala Gln Glu

                 85                  90                  95

Leu Ser Asn Leu Cys His Glu Phe Asn Gly Lys Cys Thr Thr Lys Phe

            100                 105                 110

<210>3

<211>2832

<212>DNA

<213>水稻(Oryza sativa)

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(2829)

<223>编码NADPH氧化酶

<400>3

atg agg ggc ggc gcc tcc tcg gga ccc cag cga tgg ggc tcg gcg ggg   48

Met Arg Gly Gly Ala Ser Ser Gly Pro Gln Arg Trp Gly Ser Ala Gly

  1               5                  10                  15

acg aca ccg cgg tcg ctg agc acg ggc tcg tcg ccg cgc ggg tcc gac   96

Thr Thr Pro Arg Ser Leu Ser Thr Gly Ser Ser Pro Arg Gly Ser Asp

             20                  25                  30

gac cgg agc tcc gac gac ggg gag gag ctg gtc gag gtc acg ctc gac   144

Asp Arg Ser Ser Asp Asp Gly Glu Glu Leu Val Glu Val Thr Leu Asp

         35                  40                  45

ctg cag gac gac gac acc att gtg ctt cgg agc gtc gag ccc gcg gcg   192

Leu Gln Asp Asp Asp Thr Ile Val Leu Arg Ser Val Glu Pro Ala Ala

     50                  55                  60

gcg gcg gcg gcg ggg gtg ggg gcg ggg gcg ggg gcg gcg tcg gcg cgg   240

Ala Ala Ala Ala Gly Val Gly Ala Gly Ala Gly Ala Ala Ser Ala Arg

 65                  70                  75                  80

ggg gag ctc acg ggt ggc ccg tcg tcg tcg tcg tcg cgg tcg agg tcg   288

Gly Glu Leu Thr Gly Gly Pro Ser Ser Ser Ser Ser Arg Ser Arg Ser

                 85                  90                  95

ccg tcg atc cgg agg agc tcg tcg cac cgg ctg ctg cag ttc tcg cag   336

Pro Ser Ile Arg Arg Ser Ser Ser His Arg Leu Leu Gln Phe Ser Gln

            100                 105                 110

gag ctc aag gcg gag gcc atg gcc cgg gcg cgg cag ttc tcg cag gac   384

Glu Leu Lys Ala Glu Ala Met Ala Arg Ala Arg Gln Phe Ser Gln Asp

        115                 120                 125

ctg acc aag cgg ttc ggc cgc agc cac agc cgc agc gaa gcg cag gcg   432

Leu Thr Lys Arg Phe Gly Arg Ser His Ser Arg Ser Glu Ala Gln Ala

    130                 135                 140

ccg tcg ggc ctc gag tcc gcg ctc gcc gcc cgc gcc gcg cgg cgg cag   480

Pro Ser Gly Leu Glu Ser Ala Leu Ala Ala Arg Ala Ala Arg Arg Gln

145                 150                 155                 160

cgc gcg cag ctc gac cgc aca cgc tcc ggc gcc cac aag gcg ctc cgc   528

Arg Ala Gln Leu Asp Arg Thr Arg Ser Gly Ala His Lys Ala Leu Arg

                165                 170                 175

ggc ctc cgc ttc atc agc agc aac aag gcc aac aac gcc tgg atg gag   576

Gly Leu Arg Phe Ile Ser Ser Asn Lys Ala Asn Asn Ala Trp Met Glu

            180                 185                 190

gtg cag gcc aac ttc gac cgc ctc gcc cgc gac ggc tac ctc tcc cgc   624

Val Gln Ala Asn Phe Asp Arg Leu Ala Arg Asp Gly Tyr Leu Ser Arg

        195                 200                 205

tcc gac ttc gcc gaa tgc atc ggg atg acg gaa tcg aag gag ttc gcg   672

Ser Asp Phe Ala Glu Cys Ile Gly Met Thr Glu Ser Lys Glu Phe Ala

    210                 215                 220

ctc gag ctg ttc gac acg ctg agc cgg cga cga cag atg aag gtg gac   720

Leu Glu Leu Phe Asp Thr Leu Ser Arg Arg Arg Gln Met Lys Val Asp

225                 230                 235                 240

acg att aac aag gat gaa ctc cgc gag atc tgg cag cag atc acc gat   768

Thr Ile Asn Lys Asp Glu Leu Arg Glu Ile Trp Gln Gln Ile Thr Asp

                245                 250                 255

aac agc ttc gac tcc cgt ctc caa atc ttc ttc gaa atg gtg gat aag   816

Asn Ser Phe Asp Ser Arg Leu Gln Ile Phe Phe Glu Met Val Asp Lys

            260                 265                 270

aac gcg gac ggc cgg att acg gag gcg gag gtg aaa gag att att atg   864

Asn Ala Asp Gly Arg Ile Thr Glu Ala Glu Val Lys Glu Ile Ile Met

        275                 280                 285

ttg agc gcg tct gcc aat aaa ctg tcg agg ctt aag gag caa gca gaa   912

Leu Ser Ala Ser Ala Asn Lys Leu Ser Arg Leu Lys Glu Gln Ala Glu

    290                 295                 300

gag tac gcc gct ttg atc atg gag gag ctt gat cct gaa ggg ctc ggc   960

Glu Tyr Ala Ala Leu Ile Met Glu Glu Leu Asp Pro Glu Gly Leu Gly

305                 310                 315                 320

tac att gag cta tgg caa ttg gag aca ctt ctg ttg cag aaa gat acc   1008

Tyr Ile Glu Leu Trp Gln Leu Glu Thr Leu Leu Leu Gln Lys Asp Thr

                325                 330                 335

tat atg aac tat agt cag gcc ctt agt tac aca agc caa gca ctg agc   1056

Tyr Met Asn Tyr Ser Gln Ala Leu Ser Tyr Thr Ser Gln Ala Leu Ser

            340                 345                 350

cag aat ctt gca ggg cta agg aag aag agt tca atc cgc aaa ata agc   1104

Gln Asn Leu Ala Gly Leu Arg Lys Lys Ser Ser Ile Arg Lys Ile Ser

        355                 360                 365

acc tct tta agc tac tat ttc gag gac aac tgg aaa cgt tta tgg gtg   1152

Thr Ser Leu Ser Tyr Tyr Phe Glu Asp Asn Trp Lys Arg Leu Trp Val

    370                 375                 380

ctt gca ttg tgg att ggg ata atg gct gga ctg ttc acc tgg aaa ttc   1200

Leu Ala Leu Trp Ile Gly Ile Met Ala Gly Leu Phe Thr Trp Lys Phe

385                 390                 395                 400

atg cag tat cgt aac cga tat gtc ttt gat gtg atg ggc tac tgt gtc   1248

Met Gln Tyr Arg Asn Arg Tyr Val Phe Asp Val Met Gly Tyr Cys Val

                405                 410                 415

aca aca gca aaa gga gct gct gaa acc cta aag ctg aat atg gca att   1296

Thr Thr Ala Lys Gly Ala Ala Glu Thr Leu Lys Leu Asn Met Ala Ile

            420                 425                 430

atc ctc ctg cca gta tgc cgt aac acc att act tgg ttg cga agt aca   1344

Ile Leu Leu Pro Val Cys Arg Asn Thr Ile Thr Trp Leu Arg Ser Thr

        435                 440                 445

agg gct gca cgg gca cta cct ttt gat gac aac atc aac ttc cac aag   1392

Arg Ala Ala Arg Ala Leu Pro Phe Asp Asp Asn Ile Asn Phe His Lys

    450                 455                 460

act att gca gca gca att gtg gtt ggt ata atc ctc cat gca ggg aac   1440

Thr Ile Ala Ala Ala Ile Val Val Gly Ile Ile Leu His Ala Gly Asn

465                 470                 475                 480

cac ctt gta tgc gat ttt cca cgg tta ata aaa tca tca gat gag aag   1488

His Leu Val Cys Asp Phe Pro Arg Leu Ile Lys Ser Ser Asp Glu Lys

                485                 490                 495

tat gct cct ttg ggc cag tat ttt ggg gaa ata aag cca aca tat ttt   1536

Tyr Ala Pro Leu Gly Gln Tyr Phe Gly Glu Ile Lys Pro Thr Tyr Phe

            500                 505                 510

aca ttg gtc aaa gga gtg gag ggc atc act ggg gta atc atg gtt gta   1584

Thr Leu Val Lys Gly Val Glu Gly Ile Thr Gly Val Ile Met Val Val

        515                 520                 525

tgc atg ata att gct ttt act cta gca acc cgg tgg ttc cgc cgt agc   1632

Cys Met Ile Ile Ala Phe Thr Leu Ala Thr Arg Trp Phe Arg Arg Ser

    530                 535                 540

ttg gtt aag ctt cca agg cca ttt gac aaa ctg act ggc ttc aat gcc   1680

Leu Val Lys Leu Pro Arg Pro Phe Asp Lys Leu Thr Gly Phe Asn Ala

545                 550                 555                 560

ttt tgg tat tct cat cat ctg ttc atc att gtg tat atc gcg ctc att   1728

Phe Trp Tyr Ser His His Leu Phe Ile Ile Val Tyr Ile Ala Leu Ile

                565                 570                 575

gtt cat gga gag tgt cta tac ctt att cat gtc tgg tac aga aga acg   1776

Val His Gly Glu Cys Leu Tyr Leu Ile His Val Trp Tyr Arg Arg Thr

            580                 585                 590

aca tgg atg tat ctt tca gtg cct gtt tgc ttg tat gta ggg gag agg   1824

Thr Trp Met Tyr Leu Ser Val Pro Val Cys Leu Tyr Val Gly Glu Arg

        595                 600                 605

att cta agg ttc ttc agg tct ggc agt tat tct gtc cgg cta ttg aag   1872

Ile Leu Arg Phe Phe Arg Ser Gly Ser Tyr Ser Val Arg Leu Leu Lys

    610                 615                 620

gtg gcc ata tat cca ggt aat gtt ttg aca ctg caa atg tcc aag cct   1920

Val Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Val Leu Thr Leu Gln Met Ser Lys Pro

625                 630                 635                 640

ccc acg ttc cgt tac aag agt gga caa tat atg ttt gtt caa tgt cca   1968

Pro Thr Phe Arg Tyr Lys Ser Gly Gln Tyr Met Phe Val Gln Cys Pro

                645                 650                 655

gca gtg tct ccc ttt gaa tgg cat ccc ttc tca att act tca gca cct   2016

Ala Val Ser Pro Phe Glu Trp His Pro Phe Ser Ile Thr Ser Ala Pro

            660                 665                 670

ggg gat gac tac ctc agc att cat gtt cga caa ctt ggt gat tgg aca   2064

Gly Asp Asp Tyr Leu Ser Ile His Val Arg Gln Leu Gly Asp Trp Thr

        675                 680                 685

cga gaa ctc aag aga gta ttt gct gca gct tgt gag ccc cca gcg ggt   2112

Arg Glu Leu Lys Arg Val Phe Ala Ala Ala Cys Glu Pro Pro Ala Gly

    690                 695                 700

ggt aaa agc ggc ctt ctt agg gca gat gag aca act aag aaa atc tta   2160

Gly Lys Ser Gly Leu Leu Arg Ala Asp Glu Thr Thr Lys Lys Ile Leu

705                 710                 715                 720

ccc aag ctt ctg att gat gga ccg tat ggt tct cct gct cag gat tac   2208

Pro Lys Leu Leu Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ser Pro Ala Gln Asp Tyr

                725                 730                 735

agc aag tat gat gtt tta tta ctt gtt gga tta gga att ggt gcg aca   2256

Ser Lys Tyr Asp Val Leu Leu Leu Val Gly Leu Gly Ile Gly Ala Thr

            740                 745                 750

ccc ttt att agc ata tta aaa gat ctt ctg aat aac atc atc aaa atg   2304

Pro Phe Ile Ser Ile Leu Lys Asp Leu Leu Asn Asn Ile Ile Lys Met

        755                 760                 765

gag gaa gag gag gat gct tct act gat ctt tat cca cca atg ggt cgg   2352

Glu Glu Glu Glu Asp Ala Ser Thr Asp Leu Tyr Pro Pro Met Gly Arg

    770                 775                 780

aat aag cca cat gtt gat ctg ggc aca ctt atg acg att acc tca aga   2400

Asn Lys Pro His Val Asp Leu Gly Thr Leu Met Thr Ile Thr Ser Arg

785                 790                 795                 800

cca aag aag atc ttg aag acc aca aat gct tac ttt tac tgg gtg aca   2448

Pro Lys Lys Ile Leu Lys Thr Thr Asn Ala Tyr Phe Tyr Trp Val Thr

                805                 810                 815

cgt gag caa ggc tct ttt gat tgg ttc aaa gga gtc atg aat gaa att   2496

Arg Glu Gln Gly Ser Phe Asp Trp Phe Lys Gly Val Met Asn Glu Ile

            820                 825                 830

gct gac ttg gat caa agg aat atc att gag atg cac aac tac cta aca   2544

Ala Asp Leu Asp Gln Arg Asn Ile Ile Glu Met His Asn Tyr Leu Thr

        835                 840                 845

agc gtc tat gag gag ggg gat gcc agg tca gca ctc atc acc atg ctc   2592

Ser Val Tyr Glu Glu Gly Asp Ala Arg Ser Ala Leu Ile Thr Met Leu

    850                 855                 860

caa gct ctg aac cat gcc aag aat gga gtt gat att gtc tct ggg aca   2640

Gln Ala Leu Asn His Ala Lys Asn Gly Val Asp Ile Val Ser Gly Thr

865                 870                 875                 880

aaa gtc cgg aca cat ttt gca cga cca aat tgg aga aag gtc ctt tct   2688

Lys Val Arg Thr His Phe Ala Arg Pro Asn Trp Arg Lys Val Leu Ser

                885                 890                 895

aaa att tcc tcc aag cat cca tat gcc aaa ata ggt gta ttc tac tgt   2736

Lys Ile Ser Ser Lys His Pro Tyr Ala Lys Ile Gly Val Phe Tyr Cys

            900                 905                 910

gga gct cca gtc ctg gca caa gaa cta agc aaa ctt tgc cat gaa ttc   2784

Gly Ala Pro Val Leu Ala Gln Glu Leu Ser Lys Leu Cys His Glu Phe

        915                 920                 925

aac ggg aaa tgc aca acg aag ttc gaa ttc cat aag gag cat ttc tga   2832

Asn Gly Lys Cys Thr Thr Lys Phe Glu Phe His Lys Glu His Phe

    930                 935                 940

<210>4

<211>943

<212>PRT

<213>水稻

<400>4

Met Arg Gly Gly Ala Ser Ser Gly Pro Gln Arg Trp Gly Ser Ala Gly

  1               5                  10                  15

Thr Thr Pro Arg Ser Leu Ser Thr Gly Ser Ser Pro Arg Gly Ser Asp

             20                  25                  30

Asp Arg Ser Ser Asp Asp Gly Glu Glu Leu Val Glu Val Thr Leu Asp

         35                  40                  45

Leu Gln Asp Asp Asp Thr Ile Val Leu Arg Ser Val Glu Pro Ala Ala

     50                  55                  60

Ala Ala Ala Ala Gly Val Gly Ala Gly Ala Gly Ala Ala Ser Ala Arg

 65                  70                  75                  80

Gly Glu Leu Thr Gly Gly Pro Ser Ser Ser Ser Ser Arg Ser Arg Ser

                 85                  90                  95

Pro Ser Ile Arg Arg Ser Ser Ser His Arg Leu Leu Gln Phe Ser Gln

            100                 105                 110

Glu Leu Lys Ala Glu Ala Met Ala Arg Ala Arg Gln Phe Ser Gln Asp

        115                 120                 125

Leu Thr Lys Arg Phe Gly Arg Ser His Ser Arg Ser Glu Ala Gln Ala

    130                 135                 140

Pro Ser Gly Leu Glu Ser Ala Leu Ala Ala Arg Ala Ala Arg Arg Gln

145                 150                 155                 160

Arg Ala Gln Leu Asp Arg Thr Arg Ser Gly Ala His Lys Ala Leu Arg

                165                 170                 175

Gly Leu Arg Phe Ile Ser Ser Asn Lys Ala Asn Asn Ala Trp Met Glu

            180                 185                 190

Val Gln Ala Asn Phe Asp Arg Leu Ala Arg Asp Gly Tyr Leu Ser Arg

        195                 200                 205

Ser Asp Phe Ala Glu Cys Ile Gly Met Thr Glu Ser Lys Glu Phe Ala

    210                 215                 220

Leu Glu Leu Phe Asp Thr Leu Ser Arg Arg Arg Gln Met Lys Val Asp

225                 230                 235                 240

Thr Ile Asn Lys Asp Glu Leu Arg Glu Ile Trp Gln Gln Ile Thr Asp

                245                 250                 255

Asn Ser Phe Asp Ser Arg Leu Gln Ile Phe Phe Glu Met Val Asp Lys

            260                 265                 270

Asn Ala Asp Gly Arg Ile Thr Glu Ala Glu Val Lys Glu Ile Ile Met

        275                 280                 285

Leu Ser Ala Ser Ala Asn Lys Leu Ser Arg Leu Lys Glu Gln Ala Glu

    290                 295                 300

Glu Tyr Ala Ala Leu Ile Met Glu Glu Leu Asp Pro Glu Gly Leu Gly

305                 310                 315                 320

Tyr Ile Glu Leu Trp Gln Leu Glu Thr Leu Leu Leu Gln Lys Asp Thr

                325                 330                 335

Tyr Met Asn Tyr Ser Gln Ala Leu Ser Tyr Thr Ser Gln Ala Leu Ser

            340                 345                 350

Gln Asn Leu Ala Gly Leu Arg Lys Lys Ser Ser Ile Arg Lys Ile Ser

        355                 360                 365

Thr Ser Leu Ser Tyr Tyr Phe Glu Asp Asn Trp Lys Arg Leu Trp Val

    370                 375                 380

Leu Ala Leu Trp Ile Gly Ile Met Ala Gly Leu Phe Thr Trp Lys Phe

385                 390                 395                400

Met Gln Tyr Arg Asn Arg Tyr Val Phe Asp Val Met Gly Tyr Cys Val

                405                 410                 415

Thr Thr Ala Lys Gly Ala Ala Glu Thr Leu Lys Leu Asn Met Ala Ile

            420                 425                 430

Ile Leu Leu Pro Val Cys Arg Asn Thr Ile Thr Trp Leu Arg Ser Thr

        435                 440                 445

Arg Ala Ala Arg Ala Leu Pro Phe Asp Asp Asn Ile Asn Phe His Lys

    450                 455                 460

Thr Ile Ala Ala Ala Ile Val Val Gly Ile Ile Leu His Ala Gly Asn

465                 470                 475                 480

His Leu Val Cys Asp Phe Pro Arg Leu Ile Lys Ser Ser Asp Glu Lys

                485                 490                 495

Tyr Ala Pro Leu Gly Gln Tyr Phe Gly Glu Ile Lys Pro Thr Tyr Phe

            500                 505                 510

Thr Leu Val Lys Gly Val Glu Gly Ile Thr Gly Val Ile Met Val Val

        515                 520                 525

Cys Met Ile Ile Ala Phe Thr Leu Ala Thr Arg Trp Phe Arg Arg Ser

    530                 535                 540

Leu Val Lys Leu Pro Arg Pro Phe Asp Lys Leu Thr Gly Phe Asn Ala

545                 550                 555                 560

Phe Trp Tyr Ser His His Leu Phe Ile Ile Val Tyr Ile Ala Leu Ile

                565                 570                 575

Val His Gly Glu Cys Leu Tyr Leu Ile His Val Trp Tyr Arg Arg Thr

            580                 585                 590

Thr Trp Met Tyr Leu Ser Val Pro Val Cys Leu Tyr Val Gly Glu Arg

        595                 600                 605

Ile Leu Arg Phe Phe Arg Ser Gly Ser Tyr Ser Val Arg Leu Leu Lys

    610                 615                 620

Val Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Val Leu Thr Leu Gln Met Ser Lys Pro

625                 630                 635                 640

Pro Thr Phe Arg Tyr Lys Ser Gly Gln Tyr Met Phe Val Gln Cys Pro

                645                 650                 655

Ala Val Ser Pro Phe Glu Trp His Pro Phe Ser Ile Thr Ser Ala Pro

            660                 665                 670

Gly Asp Asp Tyr Leu Ser Ile His Val Arg Gln Leu Gly Asp Trp Thr

        675                 680                 685

Arg Glu Leu Lys Arg Val Phe Ala Ala Ala Cys Glu Pro Pro Ala Gly

    690                 695                 700

Gly Lys Ser Gly Leu Leu Arg Ala Asp Glu Thr Thr Lys Lys Ile Leu

705                 710                 715                 720

Pro Lys Leu Leu Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ser Pro Ala Gln Asp Tyr

                725                 730                 735

Ser Lys Tyr Asp Val Leu Leu Leu Val Gly Leu Gly Ile Gly Ala Thr

            740                 745                 750

Pro Phe Ile Ser Ile Leu Lys Asp Leu Leu Asn Asn Ile Ile Lys Met

        755                 760                 765

Glu Glu Glu Glu Asp Ala Ser Thr Asp Leu Tyr Pro Pro Met Gly Arg

    770                 775                 780

Asn Lys Pro His Val Asp Leu Gly Thr Leu Met Thr Ile Thr Ser Arg

785                 790                 795                 800

Pro Lys Lys Ile Leu Lys Thr Thr Asn Ala Tyr Phe Tyr Trp Val Thr

                805                 810                 815

Arg Glu Gln Gly Ser Phe Asp Trp Phe Lys Gly Val Met Asn Glu Ile

            820                 825                 830

Ala Asp Leu Asp Gln Arg Asn Ile Ile Glu Met His Asn Tyr Leu Thr

        835                 840                 845

Ser Val Tyr Glu Glu Gly Asp Ala Arg Ser Ala Leu Ile Thr Met Leu

    850                 855                 860

Gln Ala Leu Asn His Ala Lys Asn Gly Val Asp Ile Val Ser Gly Thr

865                 870                 875                 880

Lys Val Arg Thr His Phe Ala Arg Pro Asn Trp Arg Lys Val Leu Ser

                885                 890                 895

Lys Ile Ser Ser Lys His Pro Tyr Ala Lys Ile Gly Val Phe Tyr Cys

            900                 905                 910

Gly Ala Pro Val Leu Ala Gln Glu Leu Ser Lys Leu Cys His Glu Phe

        915                 920                 925

Asn Gly Lys Cys Thr Thr Lys Phe Glu Phe His Lys Glu His Phe

    930                 935                 940

<210>5

<211>2889

<212>DNA

<213>烟草(Nicotiana tabacum)

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(2886)

<223>编码NADPH氧化酶

<400>5

atg agg ggt tta cct ggg cat gaa cgc cgg tgg aca tcc gat acg gta   48

Met Arg Gly Leu Pro Gly His Glu Arg Arg Trp Thr Ser Asp Thr Val

  1               5                  10                  15

tct tcc gac aag gat ttt agt ggt gaa tta tcg ccg gga gct gat tcc   96

Ser Ser Asp Lys Asp Phe Ser Gly Glu Leu Ser Pro Gly Ala Asp Ser

             20                  25                  30

ggc tat aat tcc ggt ttt gct tcc gag gag ttt gtt gaa gtc acg ctt   144

Gly Tyr Asn Ser Gly Phe Ala Ser Glu Glu Phe Val Glu Val Thr Leu

         35                  40                  45

gat ctt cag gat gat gat acc att att cta cgg agc gtt gaa ccg gct   192

Asp Leu Gln Asp Asp Asp Thr Ile Ile Leu Arg Ser Val Glu Pro Ala

     50                  55                  60

act gtg att aac att gac gct cct gat ctt ccc gcc gga gtc ggt att   240

Thr Val Ile Asn Ile Asp Ala Pro Asp Leu Pro Ala Gly Val Gly Ile

 65                  70                  75                  80

tcc gga gtt tca att gaa act ccg acg tca gca tcg gtg tcg gaa tct   288

Ser Gly Val Ser Ile Glu Thr Pro Thr Ser Ala Ser Val Ser Glu Ser

                 85                  90                  95

cga tcg ccg acg atc cgc cgg agt tca tct agt aaa ctt cgt cag ttt   336

Arg Ser Pro Thr Ile Arg Arg Ser Ser Ser Ser Lys Leu Arg Gln Phe

            100                 105                 110

tca cag gag ttg aaa gct gag gcg gtt gcg aaa gcg agg cag ttt tca   384

Ser Gln Glu Leu Lys Ala Glu Ala Val Ala Lys Ala Arg Gln Phe Ser

        115                 120                 125

caa gag ctg aag gcg gag tta agg aga ttc tca tgg agc cat ggg cat   432

Gln Glu Leu Lys Ala Glu Leu Arg Arg Phe Ser Trp Ser His Gly His

    130                 135                 140

gcg tct cgc gcg ttt tcg ccc tcg tcg ttt ttt caa aac gcc gtc gtt   480

Ala Ser Arg Ala Phe Ser Pro Ser Ser Phe Phe Gln Asn Ala Val Val

145                 150                 155                 160

gga aca ggt aac ggc gtg gac tcg gct tta gcg gca cgt gca tta cgt   528

Gly Thr Gly Asn Gly Val Asp Ser Ala Leu Ala Ala Arg Ala Leu Arg

                165                 170                 175

cgg caa cgc gcg cag ctt gat cgg act cgt tcc agc gcc cat aga gct   576

Arg Gln Arg Ala Gln Leu Asp Arg Thr Arg Ser Ser Ala His Arg Ala

            180                 185                 190

ctt cgt aga ctc aaa ttc att agc aat aac aaa acc aat gga tgg aat   624

Leu Arg Arg Leu Lys Phe Ile Ser Asn Asn Lys Thr Asn Gly Trp Asn

        195                 200                 205

gaa gtt gaa aac aat ttc tca aag ctc gct aaa gac ggt tat ctt tac   672

Glu Val Glu Asn Asn Phe Ser Lys Leu Ala Lys Asp Gly Tyr Leu Tyr

    210                 215                 220

cgt tcc gat ttc gca caa tgc ata ggt atg aag gat tcg aag gaa ttt   720

Arg Ser Asp Phe Ala Gln Cys Ile Gly Met Lys Asp Ser Lys Glu Phe

225                 230                 235                 240

gca ttg gaa tta ttt gat gct ttg agt aga aga aga aga tta aag gtt   768

Ala Leu Glu Leu Phe Asp Ala Leu Ser Arg Arg Arg Arg Leu Lys Val

                245                 250                 255

gat aaa att agc aag gag gaa ttg tat gag tac tgg tct caa atc acc   816

Asp Lys Ile Ser Lys Glu Glu Leu Tyr Glu Tyr Trp Ser Gln Ile Thr

            260                 265                 270

gat cag agt ttc gat tct cgg ctt cag atc tcc ttc gac atg gtg gac   864

Asp Gln Ser Phe Asp Ser Arg Leu Gln Ile Ser Phe Asp Met Val Asp

        275                 280                 285

aag aat gaa gat ggt cga att gct gaa gag gaa gta aaa gag atc atc   912

Lys Asn Glu Asp Gly Arg Ile Ala Glu Glu Glu Val Lys Glu Ile Ile

    290                 295                 300

atg cta agt gca tct gca aac aag tta tca aga tta aaa gaa caa gca   960

Met Leu Ser Ala Ser Ala Asn Lys Leu Ser Arg Leu Lys Glu Gln Ala

305                 310                 315                 320

gag gag tat gca gct tta atc atg gaa gaa tta gat cct gaa aga ctc   1008

Glu Glu Tyr Ala Ala Leu Ile Met Glu Glu Leu Asp Pro Glu Arg Leu

                325                 330                 335

ggc tac att gag cta tgg cag ctg gaa aca ctt ctc ctc caa aag gac   1056

Gly Tyr Ile Glu Leu Trp Gln Leu Glu Thr Leu Leu Leu Gln Lys Asp

            340                 345                 350

act tac ctc aac tac agt caa gca cta agt tac acg agc caa gcc ttg   1104

Thr Tyr Leu Asn Tyr Ser Gln Ala Leu Ser Tyr Thr Ser Gln Ala Leu

        355                 360                 365

agc caa aac ctt cac gga tta agg aag aaa agc cca ata aaa aga atg   1152

Ser Gln Asn Leu His Gly Leu Arg Lys Lys Ser Pro Ile Lys Arg Met

    370                 375                 380

agc aca aaa ctt gtc tat tca ttg caa gaa aac tgg aag aga att tgg   1200

Ser Thr Lys Leu Val Tyr Ser Leu Gln Glu Asn Trp Lys Arg Ile Trp

385                 390                 395                 400

gtt ctc act tta tgg att ttg ata atg att ggg ctt ttt ctt tgg aag   1248

Val Leu Thr Leu Trp Ile Leu Ile Met Ile Gly Leu Phe Leu Trp Lys

                405                 410                 415

ttc tat cag tac aaa aac aag agt gca ttc cgt gtc atg ggt tat tgc   1296

Phe Tyr Gln Tyr Lys Asn Lys Ser Ala Phe Arg Val Met Gly Tyr Cys

            420                 425                 430

ctt gtc acg gct aag ggc gct gct gag act ctc aag ttc aac atg gct   1344

Leu Val Thr Ala Lys Gly Ala Ala Glu Thr Leu Lys Phe Asn Met Ala

        435                 440                 445

ctt ata tta ttg cca gta tgc aga aac act att aca tgg ctc agg tcc   1392

Leu Ile Leu Leu Pro Val Cys Arg Asn Thr Ile Thr Trp Leu Arg Ser

    450                 455                 460

acc aag ttg agc cat ttt gta ccc ttt gac gac aac atc aac ttt cac   1440

Thr Lys Leu Ser His Phe Val Pro Phe Asp Asp Asn Ile Asn Phe His

465                 470                 475                 480

aag act gtc gct gca gcc att gtc act ggt atc ata ctc cat gct ggt   1488

Lys Thr Val Ala Ala Ala Ile Val Thr Gly Ile Ile Leu His Ala Gly

                485                 490                 495

aac cat ctt gta tgt gat ttc cca agg ctt ata cat gca gat gat caa   1536

Asn His Leu Val Cys Asp Phe Pro Arg Leu Ile His Ala Asp Asp Gln

            500                 505                 510

gat tat caa agt ttt ttg tcg aat gat ttt ggc caa agt aag cct gga   1584

Asp Tyr Gln Ser Phe Leu Ser Asn Asp Phe Gly Gln Ser Lys Pro Gly

        515                 520                 525

tac ata gac ctt gtt aaa gga gtt gag ggt gtg acg gga ata ata atg   1632

Tyr Ile Asp Leu Val Lys Gly Val Glu Gly Val Thr Gly Ile Ile Met

    530                 535                 540

gta atc ctt atg gcc att gct ttc act ctt gct aca cga tgg ttt aga   1680

Val Ile Leu Met Ala Ile Ala Phe Thr Leu Ala Thr Arg Trp Phe Arg

545                 550                 555                 560

cgg agc ctc att aag ttg ccc aaa cct ttt gat aga ctc act ggc ttc   1728

Arg Ser Leu Ile Lys Leu Pro Lys Pro Phe Asp Arg Leu Thr Gly Phe

                565                 570                 575

aat gca ttc tgg tat tca cac cac ctt ctt gtc att gtc tac atc cta   1776

Asn Ala Phe Trp Tyr Ser His His Leu Leu Val Ile Val Tyr Ile Leu

            580                 585                 590

ctg atc atc cat ggc acg ttc ctc ttc ctt gtg cat aaa tgg tac tcc   1824

Leu Ile Ile His Gly Thr Phe Leu Phe Leu Val His Lys Trp Tyr Ser

        595                 600                 605

aag acg acg tgg atg tat cta gca gtt cct gtg ctt ctc tac gca ggg   1872

Lys Thr Thr Trp Met Tyr Leu Ala Val Pro Val Leu Leu Tyr Ala Gly

    610                 615                 620

gaa aga act ctt aga ttc ttc cgg tca ggc ttg tac act gtc cgg ctt   1920

Glu Arg Thr Leu Arg Phe Phe Arg Ser Gly Leu Tyr Thr Val Arg Leu

625                 630                 635                 640

ctg aaa gta gca ata tat cct gga aat gtc ctc act cta caa atg tct   1968

Leu Lys Val Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Val Leu Thr Leu Gln Met Ser

                645                 650                 655

aag cct cct caa ttt cga tac aaa agt gga caa tat atg ttt gtc cag   2016

Lys Pro Pro Gln Phe Arg Tyr Lys Ser Gly Gln Tyr Met Phe Val Gln

            660                 665                 670

tgt cca gct gtt tct cca ttc gag tgg cat cca ttt tcc att act tca   2064

Cys Pro Ala Val Ser Pro Phe Glu Trp His Pro Phe Ser Ile Thr Ser

        675                 680                 685

gct cct ggg gat gac tac ttg agc att cac atc cgg caa ctt ggt gac   2112

Ala Pro Gly Asp Asp Tyr Leu Ser Ile His Ile Arg Gln Leu Gly Asp

    690                 695                 700

tgg act caa gaa ctc aag cgg gtc ttt tct gag gct tgc gag cgg cca   2160

Trp Thr Gln Glu Leu Lys Arg Val Phe Ser Glu Ala Cys Glu Arg Pro

705                 710                 715                 720

gag gct gga aag agt ggc ctg ctc aga gct gac gaa aac act aag aaa   2208

Glu Ala Gly Lys Ser Gly Leu Leu Arg Ala Asp Glu Asn Thr Lys Lys

                725                 730                 735

agt ttg cca aag cta tta ata gat gga cct tac gga gct cca gca caa   2256

Ser Leu Pro Lys Leu Leu Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gln

            740                 745                 750

gat tac cga aaa tat gat gtc ttg ctg ctt gtt ggt ctt ggc att gga   2304

Asp Tyr Arg Lys Tyr Asp Val Leu Leu Leu Val Gly Leu Gly Ile Gly

        755                 760                 765

gca acg ccg ttc ata agt atc ctg aaa gac ttg ctc gtt aac atc gtg   2352

Ala Thr Pro Phe Ile Ser Ile Leu Lys Asp Leu Leu Val Asn Ile Val

    770                 775                 780

aaa atg gag gag caa gca gat tta gcc tca gat ttc agt ggg aac tca   2400

Lys Met Glu Glu Gln Ala Asp Leu Ala Ser Asp Phe Ser Gly Asn Ser

785                 790                 795                 800

gac atg agc gtt gcg aca agt gaa caa cca gct ctc aac aag att tct   2448

Asp Met Ser Val Ala Thr Ser Glu Gln Pro Ala Leu Asn Lys Ile Ser

                805                 810                 815

ctg aaa agg aga aag agc act cta aga acc aca aat gca tat ttt tat   2496

Leu Lys Arg Arg Lys Ser Thr Leu Arg Thr Thr Asn Ala Tyr Phe Tyr

            820                 825                 830

tgg gtg acc cgg gag caa gga tca ttt gat tgg ttc aaa ggc gtt atg   2544

Trp Val Thr Arg Glu Gln Gly Ser Phe Asp Trp Phe Lys Gly Val Met

        835                 840                 845

aac gaa gtg gct gaa ctt gat caa agg ggg gtc atc gag atg cat aac   2592

Asn Glu Val Ala Glu Leu Asp Gln Arg Gly Val Ile Glu Met His Asn

    850                 855                 860

tac ttg acg agt gtt tat gag gaa ggg gat gct cgt tca gct ctc att   2640

Tyr Leu Thr Ser Val Tyr Glu Glu Gly Asp Ala Arg Ser Ala Leu Ile

865                 870                 875                 880

acc atg gtc cag gca ctt aac cat gct aag aat ggg gtt gat att gta   2688

Thr Met Val Gln Ala Leu Asn His Ala Lys Asn Gly Val Asp Ile Val

                885                 890                 895

tca ggc acc agg gtg agg aca cat ttt gct agg cca aat tgg aag aaa   2736

Ser Gly Thr Arg Val Arg Thr His Phe Ala Arg Pro Asn Trp Lys Lys

            900                 905                 910

gta ttt tcc aag acc tta acc aag cat gca aat gca aga ata ggg gtt   2784

Val Phe Ser Lys Thr Leu Thr Lys His Ala Asn Ala Arg Ile Gly Val

        915                 920                 925

ttc tac tgt ggt gca ccc gta tta gca aaa gaa ctc agc aaa ctc tgc   2832

Phe Tyr Cys Gly Ala Pro Val Leu Ala Lys Glu Leu Ser Lys Leu Cys

    930                 935                 940

aaa gag tat aat caa aag ggt gca aca aag ttc gag ttt cac aaa gaa   2880

Lys Glu Tyr Asn Gln Lys Gly Ala Thr Lys Phe Glu Phe His Lys Glu

945                 950                 955                 960

cat ttt tag                                                       2889

His Phe

<210>6

<211>962

<212>PRT

<213>烟草

<400>6

Met Arg Gly Leu Pro Gly His Glu Arg Arg Trp Thr Ser Asp Thr Val

  1               5                  10                  15

Ser Ser Asp Lys Asp Phe Ser Gly Glu Leu Ser Pro Gly Ala Asp Ser

             20                  25                  30

Gly Tyr Asn Ser Gly Phe Ala Ser Glu Glu Phe Val Glu Val Thr Leu

         35                  40                  45

Asp Leu Gln Asp Asp Asp Thr Ile Ile Leu Arg Ser Val Glu Pro Ala

     50                  55                  60

Thr Val Ile Asn Ile Asp Ala Pro Asp Leu Pro Ala Gly Val Gly Ile

 65                  70                  75                  80

Ser Gly Val Ser Ile Glu Thr Pro Thr Ser Ala Ser Val Ser Glu Ser

                 85                  90                  95

Arg Ser Pro Thr Ile Arg Arg Ser Ser Ser Ser Lys Leu Arg Gln Phe

            100                 105                 110

Ser Gln Glu Leu Lys Ala Glu Ala Val Ala Lys Ala Arg Gln Phe Ser

        115                 120                 125

Gln Glu Leu Lys Ala Glu Leu Arg Arg Phe Ser Trp Ser His Gly His

    130                 135                 140

Ala Ser Arg Ala Phe Ser Pro Ser Ser Phe Phe Gln Asn Ala Val Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Gly Asn Gly Val Asp Ser Ala Leu Ala Ala Arg Ala Leu Arg

                165                 170                 175

Arg Gln Arg Ala Gln Leu Asp Arg Thr Arg Ser Ser Ala His Arg Ala

            180                 185                 190

Leu Arg Arg Leu Lys Phe Ile Ser Asn Asn Lys Thr Asn Gly Trp Asn

        195                 200                 205

Glu Val Glu Asn Asn Phe Ser Lys Leu Ala Lys Asp Gly Tyr Leu Tyr

    210                 215                 220

Arg Ser Asp Phe Ala Gln Cys Ile Gly Met Lys Asp Ser Lys Glu Phe

225                 230                 235                 240

Ala Leu Glu Leu Phe Asp Ala Leu Ser Arg Arg Arg Arg Leu Lys Val

                245                 250                 255

Asp Lys Ile Ser Lys Glu Glu Leu Tyr Glu Tyr Trp Ser Gln Ile Thr

            260                 265                 270

Asp Gln Ser Phe Asp Ser Arg Leu Gln Ile Ser Phe Asp Met Val Asp

        275                 280                 285

Lys Asn Glu Asp Gly Arg Ile Ala Glu Glu Glu Val Lys Glu Ile Ile

    290                 295                 300

Met Leu Ser Ala Ser Ala Asn Lys Leu Ser Arg Leu Lys Glu Gln Ala

305                 310                 315                 320

Glu Glu Tyr Ala Ala Leu Ile Met Glu Glu Leu Asp Pro Glu Arg Leu

                325                 330                 335

Gly Tyr Ile Glu Leu Trp Gln Leu Glu Thr Leu Leu Leu Gln Lys Asp

            340                 345                 350

Thr Tyr Leu Asn Tyr Ser Gln Ala Leu Ser Tyr Thr Ser Gln Ala Leu

        355                 360                 365

Ser Gln Asn Leu His Gly Leu Arg Lys Lys Ser Pro Ile Lys Arg Met

    370                 375                 380

Ser Thr Lys Leu Val Tyr Ser Leu Gln Glu Asn Trp Lys Arg Ile Trp

385                 390                 395                 400

Val Leu Thr Leu Trp Ile Leu Ile Met Ile Gly Leu Phe Leu Trp Lys

                405                 410                 415

Phe Tyr Gln Tyr Lys Asn Lys Ser Ala Phe Arg Val Met Gly Tyr Cys

            420                 425                 430

Leu Val Thr Ala Lys Gly Ala Ala Glu Thr Leu Lys Phe Asn Met Ala

        435                 440                 445

Leu Ile Leu Leu Pro Val Cys Arg Asn Thr Ile Thr Trp Leu Arg Ser

    450                 455                 460

Thr Lys Leu Ser His Phe Val Pro Phe Asp Asp Asn Ile Asn Phe His

465                 470                 475                 480

Lys Thr Val Ala Ala Ala Ile Val Thr Gly Ile Ile Leu His Ala Gly

                485                 490                 495

Asn His Leu Val Cys Asp Phe Pro Arg Leu Ile His Ala Asp Asp Gln

            500                 505                 510

Asp Tyr Gln Ser Phe Leu Ser Asn Asp Phe Gly Gln Ser Lys Pro Gly

        515                 520                 525

Tyr Ile Asp Leu Val Lys Gly Val Glu Gly Val Thr Gly Ile Ile Met

    530                 535                 540

Val Ile Leu Met Ala Ile Ala Phe Thr Leu Ala Thr Arg Trp Phe Arg

545                 550                 555                 560

Arg Ser Leu Ile Lys Leu Pro Lys Pro Phe Asp Arg Leu Thr Gly Phe

                565                 570                 575

Asn Ala Phe Trp Tyr Ser His His Leu Leu Val Ile Val Tyr Ile Leu

            580                 585                 590

Leu Ile Ile His Gly Thr Phe Leu Phe Leu Val His Lys Trp Tyr Ser

        595                 600                 605

Lys Thr Thr Trp Met Tyr Leu Ala Val Pro Val Leu Leu Tyr Ala Gly

    610                 615                 620

Glu Arg Thr Leu Arg Phe Phe Arg Ser Gly Leu Tyr Thr Val Arg Leu

625                 630                 635                 640

Leu Lys Val Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Val Leu Thr Leu Gln Met Ser

                645                 650                 655

Lys Pro Pro Gln Phe Arg Tyr Lys Ser Gly Gln Tyr Met Phe Val Gln

            660                 665                 670

Cys Pro Ala Val Ser Pro Phe Glu Trp His Pro Phe Ser Ile Thr Ser

        675                 680                 685

Ala Pro Gly Asp Asp Tyr Leu Ser Ile His Ile Arg Gln Leu Gly Asp

    690                 695                 700

Trp Thr Gln Glu Leu Lys Arg Val Phe Ser Glu Ala Cys Glu Arg Pro

705                 710                 715                 720

Glu Ala Gly Lys Ser Gly Leu Leu Arg Ala Asp Glu Asn Thr Lys Lys

                725                 730                 735

Ser Leu Pro Lys Leu Leu Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gln

            740                 745                 750

Asp Tyr Arg Lys Tyr Asp Val Leu Leu Leu Val Gly Leu Gly Ile Gly

        755                 760                 765

Ala Thr Pro Phe Ile Ser Ile Leu Lys Asp Leu Leu Val Asn Ile Val

    770                 775                 780

Lys Met Glu Glu Gln Ala Asp Leu Ala Ser Asp Phe Ser Gly Asn Ser

785                 790                 795                 800

Asp Met Ser Val Ala Thr Ser Glu Gln Pro Ala Leu Asn Lys Ile Ser

                805                 810                 815

Leu Lys Arg Arg Lys Ser Thr Leu Arg Thr Thr Asn Ala Tyr Phe Tyr

            820                 825                 830

Trp Val Thr Arg Glu Gln Gly Ser Phe Asp Trp Phe Lys Gly Val Met

        835                 840                 845

Asn Glu Val Ala Glu Leu Asp Gln Arg Gly Val Ile Glu Met His Asn

    850                 855                 860

Tyr Leu Thr Ser Val Tyr Glu Glu Gly Asp Ala Arg Ser Ala Leu Ile

865                 870                 875                 880

Thr Met Val Gln Ala Leu Asn His Ala Lys Asn Gly Val Asp Ile Val

                885                 890                 895

Ser Gly Thr Arg Val Arg Thr His Phe Ala Arg Pro Asn Trp Lys Lys

            900                 905                 910

Val Phe Ser Lys Thr Leu Thr Lys His Ala Asn Ala Arg Ile Gly Val

        915                 920                 925

Phe Tyr Cys Gly Ala Pro Val Leu Ala Lys Glu Leu Ser Lys Leu Cys

    930                 935                 940

Lys Glu Tyr Asn Gln Lys Gly Ala Thr Lys Phe Glu Phe His Lys Glu

945                 950                 955                 960

His Phe

<210>7

<211>3733

<212>DNA

<213>马铃薯(Solanum tuberosum)

<220>

<221>CDS

<222>(92)..(2980)

<223>编码NADPH氧化酶

<400>7

ggcacgagaa taaccaaaac ttttggtcag gcttctgcag aaaactctgt tttcaacata 60

tatttattta ttgtgctttg atttgggaca a atg agg ggt tta cct ggg cat    112

                                   Met Arg Gly Leu Pro Gly His

                                     1               5

gaa cgc cgg tgg acg tcg gat acg gta tct tcc ggc aag gat tta agt   160

Glu Arg Arg Trp Thr Ser Asp Thr Val Ser Ser Gly Lys Asp Leu Ser

         10                  15                  20

ggt gag tca tcg ccg gga act gat tcc ggg aat att tcc ggt ttt gct   208

Gly Glu Ser Ser Pro Gly Thr Asp Ser Gly Asn Ile Ser Gly Phe Ala

     25                  30                  35

tcc gag gag ttt gtt gaa gtt ata ctt gat ctt cag gat gat gat acg   256

Ser Glu Glu Phe Val Glu Val Ile Leu Asp Leu Gln Asp Asp Asp Thr

 40                  45                  50                  55

att att cta cgg agc gtt gaa ccg gct act gta atc aac att gat gct   304

Ile Ile Leu Arg Ser Val Glu Pro Ala Thr Val Ile Asn Ile Asp Ala

                 60                  65                  70

tct gat cct gct acc gga gtc ggt att ggt gga gta tcg att gaa act   352

Ser Asp Pro Ala Thr Gly Val Gly Ile Gly Gly Val Ser Ile Glu Thr

             75                  80                  85

ccg gcg tcg ctg act tcg acg tcg gga act cga tcg ccg acg atg cgt   400

Pro Ala Ser Leu Thr Ser Thr Ser Gly Thr Arg Ser Pro Thr Met Arg

         90                  95                 100

cgg agt aca tcg aat aaa tta cgt cag ttt tca cag gag ttg aaa gct   448

Arg Ser Thr Ser Asn Lys Leu Arg Gln Phe Ser Gln Glu Leu Lys Ala

    105                 110                 115

gag gct gtc gcg aaa gcg aag cat ttc tcg caa gag ctt aaa gcg gag   496

Glu Ala Val Ala Lys Ala Lys His Phe Ser Gln Glu Leu Lys Ala Glu

120                 125                 130                 135

cta agg aga ttc tca tgg agc cat gga cat gcg tct cgc act ttt tcg   544

Leu Arg Arg Phe Ser Trp Ser His Gly His Ala Ser Arg Thr Phe Ser

                140                 145                 150

ccg gcg tcg ttt ttc caa aac gcc gtc gtc ggt aca ggc aac ggt gta   592

Pro Ala Ser Phe Phe Gln Asn Ala Val Val Gly Thr Gly Asn Gly Val

            155                 160                 165

gat tcg gct tta gca gct cga gca tta cga cgg cag cgc gct cag ctc   640

Asp Ser Ala Leu Ala Ala Arg Ala Leu Arg Arg Gln Arg Ala Gln Leu

        170                 175                 180

gat cgg act cgt tcc agc gct cac aag gct ctt cgt gga ctc aaa ttc   688

Asp Arg Thr Arg Ser Ser Ala His Lys Ala Leu Arg Gly Leu Lys Phe

    185                 190                 195

atc agc aat aac aaa act aac gga tgg aat gaa gtt gaa aac aat ttt   736

Ile Ser Asn Asn Lys Thr Asn Gly Trp Asn Glu Val Glu Asn Asn Phe

200                 205                 210                 215

gct aag ctc gct aaa gac ggt tac ctt tat cgc tcc gat ttc gca caa   784

Ala Lys Leu Ala Lys Asp Gly Tyr Leu Tyr Arg Ser Asp Phe Ala Gln

                220                 225                 230

tgc atc ggt atg aag gat tca aag gaa ttt gca ttg gaa ttg ttt gat   832

Cys Ile Gly Met Lys Asp Ser Lys Glu Phe Ala Leu Glu Leu Phe Asp

            235                 240                 245

gct ttg agt aga aga aga aga ttg aag gtt gat aag att agc aaa gag   880

Ala Leu Ser Arg Arg Arg Arg Leu Lys Val Asp Lys Ile Ser Lys Glu

        250                 255                 260

gaa ttg tat gag tat tgg tct caa atc acc gat cag agt ttc gat tct   928

Glu Leu Tyr Glu Tyr Trp Ser Gln Ile Thr Asp Gln Ser Phe Asp Ser

 265                    270                 275

cgg ctt cag atc ttc ttc gac atg gtg gac aag aat gaa gat ggt cga   976

Arg Leu Gln Ile Phe Phe Asp Met Val Asp Lys Asn Glu Asp Gly Arg

280                 285                 290                 295

att ggt gaa gaa gaa gta aaa gag atc atc atg cta agt gcc tct gca   1024

Ile Gly Glu Glu Glu Val Lys Glu Ile Ile Met Leu Ser Ala Ser Ala

                300                 305                 310

aac aaa tta tca aga tta aaa gaa caa gca gag gag tat gca gct ctg   1072

Asn Lys Leu Ser Arg Leu Lys Glu Gln Ala Glu Glu Tyr Ala Ala Leu

            315                 320                 325

atc atg gaa gaa tta gat cct gaa aga ctt ggc tac att gag cta tgg   1120

Ile Met Glu Glu Leu Asp Pro Glu Arg Leu Gly Tyr Ile Glu Leu Trp

        330                 335                 340

cag ctg gaa acg ctt ctc ctc caa aag gac act tac ctc aac tac agt   1168

Gln Leu Glu Thr Leu Leu Leu Gln Lys Asp Thr Tyr Leu Asn Tyr Ser

    345                 350                 355

caa gca cta agc tac aca agc caa gct ttg agc caa aac ctg caa ggg   1216

Gln Ala Leu Ser Tyr Thr Ser Gln Ala Leu Ser Gln Asn Leu Gln Gly

360                 365                 370                 375

ttg agg aag aga agc cca ata aga aga atg agc aca aaa ctt gtc tat   1264

Leu Arg Lys Arg Ser Pro Ile Arg Arg Met Ser Thr Lys Leu Val Tyr

                380                 385                 390

tca ctg caa gag aat tgg aag aga att tgg gtt ctg gtc ttg tgg att   1312

Ser Leu Gln Glu Asn Trp Lys Arg Ile Trp Val Leu Val Leu Trp Ile

            395                 400                 405

ttg ata atg att gga ctt ttt ctt tgg aag ttc tat ctg tac aaa cag   1360

Leu Ile Met Ile Gly Leu Phe Leu Trp Lys Phe Tyr Leu Tyr Lys Gln

        410                 415                 420

aaa agt gca ttt caa gtt atg ggt tat tgc ctt cta aca gct aag ggt   1408

Lys Ser Ala Phe Gln Val Met Gly Tyr Cys Leu Leu Thr Ala Lys Gly

    425                 430                 435

gct gct gag act cta aag ttc aac atg gct ttg ata ttg ttg cca gtt   1456

Ala Ala Glu Thr Leu Lys Phe Asn Met Ala Leu Ile Leu Leu Pro Val

440                 445                 450                 455

tgc agg aac acc att aca ttc ctc agg tct act aaa ttg agt tgt ttt   1504

Cys Arg Asn Thr Ile Thr Phe Leu Arg Ser Thr Lys Leu Ser Cys Phe

                460                 465                 470

gta ccc ttt gat gac aac atc aac ttc cac aag act gtt gct gca gcc   1552

Val Pro Phe Asp Asp Asn Ile Asn Phe His Lys Thr Val Ala Ala Ala

            475                 480                 485

att gtt act ggt atc ata ctc cat gcc ggt aat cat ctt gta tgt gat   1600

Ile Val Thr Gly Ile Ile Leu His Ala Gly Asn His Leu Val Cys Asp

        490                 495                 500

ttc cca aag ctt ata cat gca aat aat acg aat tat cag aaa tat ttg   1648

Phe Pro Lys Leu Ile His Ala Asn Asn Thr Asn Tyr Gln Lys Tyr Leu

    505                 510                 515

gtg aat gat ttt ggc cca agc cag cct cag tac ata gat ctt gtt aaa   1696

Val Asn Asp Phe Gly Pro Ser Gln Pro Gln Tyr Ile Asp Leu Val Lys

520                 525                 530                 535

gga gtg gag ggt gtg aca gga ata ata atg gta atc ctc atg gcc att   1744

Gly Val Glu Gly Val Thr Gly Ile Ile Met Val Ile Leu Met Ala Ile

                540                 545                 550

gct ttc act ctt gca acg cga tgg ttt agg cgg agc ctc att aag ttt   1792

Ala Phe Thr Leu Ala Thr Arg Trp Phe Arg Arg Ser Leu Ile Lys Phe

            555                 560                 565

ccc aaa cct ttt gat aga ctc act ggt ttc aat gcg ttc tgg tac tcg   1840

Pro Lys Pro Phe Asp Arg Leu Thr Gly Phe Asn Ala Phe Trp Tyr Ser

        570                 575                 580

cac cac ctt ctc atc att gtc tac atc gta ctg atc atc cat ggc aca   1888

His His Leu Leu Ile Ile Val Tyr Ile Val Leu Ile Ile His Gly Thr

    585                 590                 595

ttc ctc tac ctt gtg cat aac tgg tac tcc aaa acg aca tgg atg tat   1936

Phe Leu Tyr Leu Val His Asn Trp Tyr Ser Lys Thr Thr Trp Met Tyr

600                 605                 610                 615

cta gca gtt cct gta ctt ctc tac gca ggg gaa aga act ctt aga ttc   1984

Leu Ala Val Pro Val Leu Leu Tyr Ala Gly Glu Arg Thr Leu Arg Phe

                620                 625                 630

ttc cga tca ggc tta tat aca gtc cgg ctt cta aaa gta gca ata tat   2032

Phe Arg Ser Gly Leu Tyr Thr Val Arg Leu Leu Lys Val Ala Ile Tyr

            635                 640                 645

cct gga aat gtc ctt act ctg caa atg tct aag cct ccg caa ttt cga   2080

Pro Gly Asn Val Leu Thr Leu Gln Met Ser Lys Pro Pro Gln Phe Arg

        650                 655                 660

tac aag agt gga caa tat atg ttt gtc cag tgt cca gct gtt tct cca   2128

Tyr Lys Ser Gly Gln Tyr Met Phe Val Gln Cys Pro Ala Val Ser Pro

    665                 670                 675

ttc gag tgg cat cca ttt tcc att act tca gct cct ggg gat gac tac   2176

Phe Glu Trp His Pro Phe Ser Ile Thr Ser Ala Pro Gly Asp Asp Tyr

680                 685                 690                 695

ttg agc att cat atc cga caa ctt ggt gac tgg act caa gaa ctc aag   2224

Leu Ser Ile His Ile Arg Gln Leu Gly Asp Trp Thr Gln Glu Leu Lys

                700                 705                 710

cgg gtg ttt tcc gag gct tgc gag cag cca gag gct gga aag agt ggc   2272

Arg Val Phe Ser Glu Ala Cys Glu Gln Pro Glu Ala Gly Lys Ser Gly

            715                 720                 725

ctg ctc aga gct gac gaa aac acc aaa aca agt ttg cca aag cta ttg   2320

Leu Leu Arg Ala Asp Glu Asn Thr Lys Thr Ser Leu Pro Lys Leu Leu

        730                 735                 740

ata gat gga cct tat gga gct cca gca caa gat tac cga aag tat gat   2368

Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gln Asp Tyr Arg Lys Tyr Asp

    745                 750                 755

gtc tta ctg ctt gtt ggt ctt ggc att gga gca act ccc ttt ata agt   2416

Val Leu Leu Leu Val Gly Leu Gly Ile Gly Ala Thr Pro Phe Ile Ser

760                 765                 770                 775

atc ctg aaa gac ttg ctc aaa aac atc gtc aca atg gag gag caa gca   2464

Ile Leu Lys Asp Leu Leu Lys Asn Ile Val Thr Met Glu Glu Gln Ala

                780                 785                 790

gat tta gtc tcg gat ttt tca ggg aac tca gac atg agc gct gca aca   2512

Asp Leu Val Ser Asp Phe Ser Gly Asn Ser Asp Met Ser Ala Ala Thr

            795                 800                 805

agt gaa caa cca gct ctc aac aag att tct cca aaa aag aga aag agt   2560

Ser Glu Gln Pro Ala Leu Asn Lys Ile Ser Pro Lys Lys Arg Lys Ser

        810                 815                 820

act cta aaa acc aca aat gca tat ttt tat tgg gtg acc cgg gag caa   2608

Thr Leu Lys Thr Thr Asn Ala Tyr Phe Tyr Trp Val Thr Arg Glu Gln

    825                 830                 835

gga tca ttt gat tgg ttc aaa ggt gtt atg aac gaa gtg gct gaa ctt   2656

Gly Ser Phe Asp Trp Phe Lys Gly Val Met Asn Glu Val Ala Glu Leu

840                 845                 850                 855

gat caa agg ggg gtc atc gag atg cat aac tac tta acg agt gtt tat   2704

Asp Gln Arg Gly Val Ile Glu Met His Asn Tyr Leu Thr Ser Val Tyr

                860                 865                 870

gag gaa ggg gat gca cgt tca gct ctc att acc atg gtc cag gcg ctt   2752

Glu Glu Gly Asp Ala Arg Ser Ala Leu Ile Thr Met Val Gln Ala Leu

            875                 880                 885

aac cat gct aag aat ggg gtt gat att gta tca ggc acc agt gtg agg   2800

Asn His Ala Lys Asn Gly Val Asp Ile Val Ser Gly Thr Ser Val Arg

        890                 895                 900

aca cat ttt gcc aga ccg aat tgg agg aaa gta ttt tcc aag acc tta   2848

Thr His Phe Ala Arg Pro Asn Trp Arg Lys Val Phe Ser Lys Thr Leu

    905                 910                 915

acc aag cat gca aat gca aga ata gga gtt ttc tac tgc ggt gca ccc   2896

Thr Lys His Ala Asn Ala Arg Ile Gly Val Phe Tyr Cys Gly Ala Pro

920                 925                 930                 935

ata tta gct aaa gaa ctc agc aaa ctc tgc aaa gag ttt aac caa aag   2944

Ile Leu Ala Lys Glu Leu Ser Lys Leu Cys Lys Glu Phe Asn Gln Lys

                940                 945                 950

ggc aca acg aag ttc gag ttt cac aaa gaa cat ttt tagaaggccc        2990

Gly Thr Thr Lys Phe Glu Phe His Lys Glu His Phe

            955                 960

tggagtacaa ttaatcttgc atcaacggta cacacatcgg taaaccagta tttaccacat 3050

ctatctttgg tacctgattt gatgattcta ctgaagacat aacattagta aggaataagt 3110

cagagacaaa ttgtacataa taggaggaag cacatttaca gagaaaatac ataccaatat 3170

gatatgtgta taggttttgt atattcagtc atctgttatc acataccaaa cttcagaact 3230

ccaaaaggga gactctgctt tggtctgatg gcttagaata tgggagggaa aaaaagacga 3290

caattgaatg gtcacgatac acatgaagaa tgagaatatt gggaaacagc taataagaag 3350

ttgaccttct tgataaagaa acactatgaa aatggcaagc atgaaaggac agacaatcat 3410

ggcttggatg gggaaaacaa aatacaattt tgaaagaaga agataatatt agtaggagta 3470

gtgggggact gatagctttg ttggtggaac ttataatggg gctaagggaa tccttccaaa 3530

aaatgtctat gtagtaacta ctttttcttt tgctttgtga gtattttttg gggtatttta 3590

atatactact tattagataa gaggatagaa aatacgtgta tatgcaattc ttattagtaa 3650

agtttatctg tagtagttct ttaatctgga gaaaggtact atcaaaggaa atatctcatc 3710

gaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaa                                         3733

<210>8

<211>963

<212>PRT

<213>马铃薯

<400>8

Met Arg Gly Leu Pro Gly His Glu Arg Arg Trp Thr Ser Asp Thr Val

  1               5                  10                  15

Ser Ser Gly Lys Asp Leu Ser Gly Glu Ser Ser Pro Gly Thr Asp Ser

             20                  25                  30

Gly Asn Ile Ser Gly Phe Ala Ser Glu Glu Phe Val Glu Val Ile Leu

         35                  40                  45

Asp Leu Gln Asp Asp Asp Thr Ile Ile Leu Arg Ser Val Glu Pro Ala

     50                  55                  60

Thr Val Ile Asn Ile Asp Ala Ser Asp Pro Ala Thr Gly Val Gly Ile

 65                  70                  75                  80

Gly Gly Val Ser Ile Glu Thr Pro Ala Ser Leu Thr Ser Thr Ser Gly

                 85                  90                  95

Thr Arg Ser Pro Thr Met Arg Arg Ser Thr Ser Asn Lys Leu Arg Gln

            100                 105                 110

Phe Ser Gln Glu Leu Lys Ala Glu Ala Val Ala Lys Ala Lys His Phe

        115                 120                 125

Ser Gln Glu Leu Lys Ala Glu Leu Arg Arg Phe Ser Trp Ser His Gly

    130                 135                 140

His Ala Ser Arg Thr Phe Ser Pro Ala Ser Phe Phe Gln Asn Ala Val

145                 150                 155                 160

Val Gly Thr Gly Asn Gly Val Asp Ser Ala Leu Ala Ala Arg Ala Leu

                165                 170                 175

Arg Arg Gln Arg Ala Gln Leu Asp Arg Thr Arg Ser Ser Ala His Lys

            180                 185                 190

Ala Leu Arg Gly Leu Lys Phe Ile Ser Asn Asn Lys Thr Asn Gly Trp

        195                 200                 205

Asn Glu Val Glu Asn Asn Phe Ala Lys Leu Ala Lys Asp Gly Tyr Leu

    210                 215                 220

Tyr Arg Ser Asp Phe Ala Gln Cys Ile Gly Met Lys Asp Ser Lys Glu

225                 230                 235                 240

Phe Ala Leu Glu Leu Phe Asp Ala Leu Ser Arg Arg Arg Arg Leu Lys

                245                 250                 255

Val Asp Lys Ile Ser Lys Glu Glu Leu Tyr Glu Tyr Trp Ser Gln Ile

            260                 265                 270

Thr Asp Gln Ser Phe Asp Ser Arg Leu Gln Ile Phe Phe Asp Met Val

        275                 280                 285

Asp Lys Asn Glu Asp Gly Arg Ile Gly Glu Glu Glu Val Lys Glu Ile

    290                 295                 300

Ile Met Leu Ser Ala Ser Ala Asn Lys Leu Ser Arg Leu Lys Glu Gln

305                 310                 315                 320

Ala Glu Glu Tyr Ala Ala Leu Ile Met Glu Glu Leu Asp Pro Glu Arg

                325                 330                 335

Leu Gly Tyr Ile Glu Leu Trp Gln Leu Glu Thr Leu Leu Leu Gln Lys

            340                 345                 350

Asp Thr Tyr Leu Asn Tyr Ser Gln Ala Leu Ser Tyr Thr Ser Gln Ala

        355                 360                 365

Leu Ser Gln Asn Leu Gln Gly Leu Arg Lys Arg Ser Pro Ile Arg Arg

    370                 375                 380

Met Ser Thr Lys Leu Val Tyr Ser Leu Gln Glu Asn Trp Lys Arg Ile

385                 390                 395                 400

Trp Val Leu Val Leu Trp Ile Leu Ile Met Ile Gly Leu Phe Leu Trp

                405                 410                 415

Lys Phe Tyr Leu Tyr Lys Gln Lys Ser Ala Phe Gln Val Met Gly Tyr

            420                 425                 430

Cys Leu Leu Thr Ala Lys Gly Ala Ala Glu Thr Leu Lys Phe Asn Met

        435                 440                 445

Ala Leu Ile Leu Leu Pro Val Cys Arg Asn Thr Ile Thr Phe Leu Arg

    450                 455                 460

Ser Thr Lys Leu Ser Cys Phe Val Pro Phe Asp Asp Asn Ile Asn Phe

465                 470                 475                 480

His Lys Thr Val Ala Ala Ala Ile Val Thr Gly Ile Ile Leu His Ala

                485                 490                 495

Gly Asn His Leu Val Cys Asp Phe Pro Lys Leu Ile His Ala Asn Asn

            500                 505                 510

Thr Asn Tyr Gln Lys Tyr Leu Val Asn Asp Phe Gly Pro Ser Gln Pro

        515                 520                 525

Gln Tyr Ile Asp Leu Val Lys Gly Val Glu Gly Val Thr Gly Ile Ile

    530                 535                 540

Met Val Ile Leu Met Ala Ile Ala Phe Thr Leu Ala Thr Arg Trp Phe

545                 550                 555                 560

Arg Arg Ser Leu Ile Lys Phe Pro Lys Pro Phe Asp Arg Leu Thr Gly

                565                 570                 575

Phe Asn Ala Phe Trp Tyr Ser His His Leu Leu Ile Ile Val Tyr Ile

            580                 585                 590

Val Leu Ile Ile His Gly Thr Phe Leu Tyr Leu Val His Asn Trp Tyr

        595                 600                 605

Ser Lys Thr Thr Trp Met Tyr Leu Ala Val Pro Val Leu Leu Tyr Ala

    610                 615                 620

Gly Glu Arg Thr Leu Arg Phe Phe Arg Ser Gly Leu Tyr Thr Val Arg

625                 630                 635                 640

Leu Leu Lys Val Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Val Leu Thr Leu Gln Met

                645                 650                 655

Ser Lys Pro Pro Gln Phe Arg Tyr Lys Ser Gly Gln Tyr Met Phe Val

            660                 665                 670

Gln Cys Pro Ala Val Ser Pro Phe Glu Trp His Pro Phe Ser Ile Thr

        675                 680                 685

Ser Ala Pro Gly Asp Asp Tyr Leu Ser Ile His Ile Arg Gln Leu Gly

    690                 695                 700

Asp Trp Thr Gln Glu Leu Lys Arg Val Phe Ser Glu Ala Cys Glu Gln

705                 710                 715                 720

Pro Glu Ala Gly Lys Ser Gly Leu Leu Arg Ala Asp Glu Asn Thr Lys

                725                 730                 735

Thr Ser Leu Pro Lys Leu Leu Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala

            740                 745                 750

Gln Asp Tyr Arg Lys Tyr Asp Val Leu Leu Leu Val Gly Leu Gly Ile

        755                 760                 765

Gly Ala Thr Pro Phe Ile Ser Ile Leu Lys Asp Leu Leu Lys Asn Ile

    770                 775                 780

Val Thr Met Glu Glu Gln Ala Asp Leu Val Ser Asp Phe Ser Gly Asn

785                 790                 795                 800

Ser Asp Met Ser Ala Ala Thr Ser Glu Gln Pro Ala Leu Asn Lys Ile

                805                 810                 815

Ser Pro Lys Lys Arg Lys Ser Thr Leu Lys Thr Thr Asn Ala Tyr Phe

            820                 825                 830

Tyr Trp Val Thr Arg Glu Gln Gly Ser Phe Asp Trp Phe Lys Gly Val

        835                 840                 845

Met Asn Glu Val Ala Glu Leu Asp Gln Arg Gly Val Ile Glu Met His

    850                 855                 860

Asn Tyr Leu Thr Ser Val Tyr Glu Glu Gly Asp Ala Arg Ser Ala Leu

865                 870                 875                 880

Ile Thr Met Val Gln Ala Leu Asn His Ala Lys Asn Gly Val Asp Ile

                885                 890                 895

Val Ser Gly Thr Ser Val Arg Thr His Phe Ala Arg Pro Asn Trp Arg

            900                 905                 910

Lys Val Phe Ser Lys Thr Leu Thr Lys His Ala Asn Ala Arg Ile Gly

        915                 920                 925

Val Phe Tyr Cys Gly Ala Pro Ile Leu Ala Lys Glu Leu Ser Lys Leu

    930                 935                 940

Cys Lys Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Thr Lys Phe Glu Phe His Lys

945                 950                 955                 960

Glu His Phe

<210>9

<211>3316

<212>DNA

<213>番茄(Lycopersicon esculentum)

<220>

<221>CDS

<222>(146)..(3112)

<223>编码NADPH氧化酶

<400>9

cgccactcgt gccgaattcg gcacgaggct ctgaaaaact tttcatacaa agccaatcta 60

tttctctctc tttcttttgg tcaggcttct acagaaaact ctgttttcaa cgtatattta 120

tttattgtca tttgatttgg gacag atg agg ggt tta cct ggg cat gaa cgc   172

                            Met Arg Gly Leu Pro Gly His Glu Arg

                              1               5

cgg tgg acg tcg gat acg gtg tct tcc ggg aag gat tta agt ggt gag   220

Arg Trp Thr Ser Asp Thr Val Ser Ser Gly Lys Asp Leu Ser Gly Glu

 10                  15                  20                  25

tca tcg ccg gga act gat tcc ggg aat att tcc ggt ttt gct tcg gag   268

Ser Ser Pro Gly Thr Asp Ser Gly Asn Ile Ser Gly Phe Ala Ser Glu

                 30                  35                  40

gag ttt gtt gaa gtt ata ctt gat ctt cag gat gat gat acg att att   316

Glu Phe Val Glu Val Ile Leu Asp Leu Gln Asp Asp Asp Thr Ile Ile

             45                  50                  55

tta cgg agc gtt gaa ccg gct act gta atc aac att gat ggt tct gat   364

Leu Arg Ser Val Glu Pro Ala Thr Val Ile Asn Ile Asp Gly Ser Asp

         60                  65                  70

cct gct tcc gga gtc ggt att ggt gga gca tcg att gaa act ccg gcg   412

Pro Ala Ser Gly Val Gly Ile Gly Gly Ala Ser Ile Glu Thr Pro Ala

     75                  80                  85

tcg gtg acg tcg acg tcg gaa act cga tcg ccg atg atg cgt cgg agt   460

Ser Val Thr Ser Thr Ser Glu Thr Arg Ser Pro Met Met Arg Arg Ser

 90                  95                 100                 105

aca tct aat aag ttt cgt cag ttt tca cag gag ttg aaa gct gag gct   508

Thr Ser Asn Lys Phe Arg Gln Phe Ser Gln Glu Leu Lys Ala Glu Ala

                110                 115                 120

gtt gcg aaa gcg aag cat ttc tcg caa gag ctt aaa gcg gag cta agg   556

Val Ala Lys Ala Lys His Phe Ser Gln Glu Leu Lys Ala Glu Leu Arg

            125                 130                 135

aga ttc tca tgg agc cat gga cat gcg tct cgt gct ttt tcg ccg gcg   604

Arg Phe Ser Trp Ser His Gly His Ala Ser Arg Ala Phe Ser Pro Ala

        140                 145                 150

tcg ttt ttc caa aac gct gtc gtc gga aca ggc aac ggt gta gac tcg   652

Ser Phe Phe Gln Asn Ala Val Val Gly Thr Gly Asn Gly Val Asp Ser

    155                 160                 165

gct tta gcg gct cga gca tta cgt cgg cag cgt gct cag ctc gac cgg   700

Ala Leu Ala Ala Arg Ala Leu Arg Arg Gln Arg Ala Gln Leu Asp Arg

170                 175                 180                 185

act cgt tcc agc gca cac aag gct ctt cgt gga ctc aaa ttc atc agc   748

Thr Arg Ser Ser Ala His Lys Ala Leu Arg Gly Leu Lys Phe Ile Ser

                190                 195                 200

aat aac aaa act aac gga tgg aat gaa gtt gaa aac aat ttc gct aag   796

Asn Asn Lys Thr Asn Gly Trp Asn Glu Val Glu Asn Asn Phe Ala Lys

            205                 210                 215

ctc gct aaa gac ggt tac ctt tat cgt tcc gat ttc gca caa tgc atc   844

Leu Ala Lys Asp Gly Tyr Leu Tyr Arg Ser Asp Phe Ala Gln Cys Ile

        220                 225                 230

ggt cag tac tca cgc cgg cga tca cta cag ttt aat tat aga tta att   892

Gly Gln Tyr Ser Arg Arg Arg Ser Leu Gln Phe Asn Tyr Arg Leu Ile

    235                 240                 245

aca tta att ttg att aat tat ttg gtt aaa ggt atg aag gat tca aag   940

Thr Leu Ile Leu Ile Asn Tyr Leu Val Lys Gly Met Lys Asp Ser Lys

250                 255                 260                 265

gaa ttt gcg ttg gaa ttg ttt gat gct tta agt aga aga aga aga ttg   988

Glu Phe Ala Leu Glu Leu Phe Asp Ala Leu Ser Arg Arg Arg Arg Leu

                270                 275                 280

aag gtt gat aag att agc caa gag gaa ttg tat gag tat tgg tct caa   1036

Lys Val Asp Lys Ile Ser Gln Glu Glu Leu Tyr Glu Tyr Trp Ser Gln

            285                 290                 295

atc acc gat cag agt ttc gat tct cgg ctt cag atc ttc ttc gac atg   1084

Ile Thr Asp Gln Ser Phe Asp Ser Arg Leu Gln Ile Phe Phe Asp Met

        300                 305                 310

gtg gac aag aat gaa gat ggt cga att ggt gaa gaa gaa gta aaa gag   1132

Val Asp Lys Asn Glu Asp Gly Arg Ile Gly Glu Glu Glu Val Lys Glu

    315                 320                 325

atc atc atg cta agt gcc tct gca aac aaa tta tca aga tta aaa gaa   1180

Ile Ile Met Leu Ser Ala Ser Ala Asn Lys Leu Ser Arg Leu Lys Glu

330                 335                 340                 345

caa gca gag gag tat gca gct ctg atc atg gaa gaa tta gat cct gaa   1228

Gln Ala Glu Glu Tyr Ala Ala Leu Ile Met Glu Glu Leu Asp Pro Glu

                350                 355                 360

aga ctt ggc tac att gag cta tgg cag ctg gaa aca ctt ctc ctc caa   1276

Arg Leu Gly Tyr Ile Glu Leu Trp Gln Leu Glu Thr Leu Leu Leu Gln

            365                 370                 375

aag gac act tac ctc aac tac agt caa gca cta agc tac aca agc caa   1324

Lys Asp Thr Tyr Leu Asn Tyr Ser Gln Ala Leu Ser Tyr Thr Ser Gln

        380                 385                 390

gct ttg agc caa aat ctg caa ggg ttg agg aag aga agc cca ata aga   1372

Ala Leu Ser Gln Asn Leu Gln Gly Leu Arg Lys Arg Ser Pro Ile Arg

    395                 400                 405

aga atg agc aca aaa ctt gtc tat tca ctg caa gag aat tgg aag aga   1420

Arg Met Ser Thr Lys Leu Val Tyr Ser Leu Gln Glu Asn Trp Lys Arg

410                 415                 420                 425

att tgg gtt ctg gtc ttg tgg att ttg ata atg att gga ctt ttt ctt   1468

Ile Trp Val Leu Val Leu Trp Ile Leu Ile Met Ile Gly Leu Phe Leu

                430                 435                 440

tgg aag ttc tat cag tac aaa cag aaa agt gca ttt caa gtc atg ggt   1516

Trp Lys Phe Tyr Gln Tyr Lys Gln Lys Ser Ala Phe Gln Val Met Gly

            445                 450                 455

tat tgc ctt cta aca gct aag ggt gct gct gag act ctc aag ttc aac   1564

Tyr Cys Leu Leu Thr Ala Lys Gly Ala Ala Glu Thr Leu Lys Phe Asn

        460                 465                 470

atg gct tta ata ttg ttg cca gta tgc agg aac acc att aca ttc ctc   1612

Met Ala Leu Ile Leu Leu Pro Val Cys Arg Asn Thr Ile Thr Phe Leu

    475                 480                 485

agg tct act aaa ttg agc tgt ttt gta ccc ttt gat gac aac ata aac   1660

Arg Ser Thr Lys Leu Ser Cys Phe Val Pro Phe Asp Asp Asn Ile Asn

490                 495                 500                 505

ttt cac aag act gtt gct gca gcc att gtc act ggt atc ata ctc cat   1708

Phe His Lys Thr Val Ala Ala Ala Ile Val Thr Gly Ile Ile Leu His

                510                 515                 520

gcc ggt aat cac ctt gta tgt gat ttc cca aag ctt ata cat gca aat   1756

Ala Gly Asn His Leu Val Cys Asp Phe Pro Lys Leu Ile His Ala Asn

            525                 530                 535

agt acg aat tat cag aaa tat ttg gtg aat gat ttt ggc cca agc cag   1804

Ser Thr Asn Tyr Gln Lys Tyr Leu Val Asn Asp Phe Gly Pro Ser Gln

        540                 545                 550

cct cag tac ata gat ctt gtt aaa gga gtg gag ggt gtg act gga ata   1852

Pro Gln Tyr Ile Asp Leu Val Lys Gly Val Glu Gly Val Thr Gly Ile

    555                 560                 565

gtt atg gta atc ctc atg gcc att gct ttc act ctt gca acg cga tgg   1900

Val Met Val Ile Leu Met Ala Ile Ala Phe Thr Leu Ala Thr Arg Trp

570                 575                 580                 585

ttt agg cgg agc ctc att aag tta ccc aaa cct ttt gat aga ctc act   1948

Phe Arg Arg Ser Leu Ile Lys Leu Pro Lys Pro Phe Asp Arg Leu Thr

                590                 595                 600

ggt ttc aat gcg ttc tgg tac tcg cac cac ctt ctc atc att gtc tac   1996

Gly Phe Asn Ala Phe Trp Tyr Ser His His Leu Leu Ile Ile Val Tyr

            605                 610                 615

atc gta ctg atc atc cat ggc aca ttc ctc tac ctt gtg cat aac tgg   2044

Ile Val Leu Ile Ile His Gly Thr Phe Leu Tyr Leu Val His Asn Trp

        620                 625                 630

tac tcc aaa acg aca tgg atg tat ata gca gtt cct gta ctt ctt tac   2092

Tyr Ser Lys Thr Thr Trp Met Tyr Ile Ala Val Pro Val Leu Leu Tyr

    635                 640                 645

gca ggg gaa aga act ctt aga ttc ttc cga tca ggc tta tac agt gtc   2140

Ala Gly Glu Arg Thr Leu Arg Phe Phe Arg Ser Gly Leu Tyr Ser Val

650                 655                 660                 665

cgg ctt cta aaa gta gca ata tat cct gga aat gtc ctt act ctg caa   2188

Arg Leu Leu Lys Val Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Val Leu Thr Leu Gln

                670                 675                 680

atg tct aag cct ccg caa ttt cga tac aag agt gga cag tat atg ttt   2236

Met Ser Lys Pro Pro Gln Phe Arg Tyr Lys Ser Gly Gln Tyr Met Phe

            685                 690                 695

gtc cag tgt cca gct gtt tct cca ttc gag tgg cat cca ttt tcc att   2284

Val Gln Cys Pro Ala Val Ser Pro Phe Glu Trp His Pro Phe Ser Ile

        700                 705                 710

act tca gct cct ggg gat gac tac ttg agc att cat atc cga caa ctt   2332

Thr Ser Ala Pro Gly Asp Asp Tyr Leu Ser Ile His Ile Arg Gln Leu

    715                 720                 725

ggt gac tgg act caa gaa ctc aag cga gtg ttt tcc gag gct tgc gag   2380

Gly Asp Trp Thr Gln Glu Leu Lys Arg Val Phe Ser Glu Ala Cys Glu

730                 735                 740                 745

cag cca gag gct gga aag agt ggc ctg ctc aga gct gac gaa aac acc   2428

Gln Pro Glu Ala Gly Lys Ser Gly Leu Leu Arg Ala Asp Glu Asn Thr

                750                 755                 760

aaa aca agt ttg cca aag cta tta ata gat gga cct tat gga gct cca   2476

Lys Thr Ser Leu Pro Lys Leu Leu Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ala Pro

            765                 770                 775

gca caa gat tac cgg aag tat gat gtc tta ctg ctt gtt ggt ctt ggc   2524

Ala Gln Asp Tyr Arg Lys Tyr Asp Val Leu Leu Leu Val Gly Leu Gly

        780                 785                 790

att gga gca act ccc ttt ata agt atc ctg aaa gac ttg ctc aaa aac   2572

Ile Gly Ala Thr Pro Phe Ile Ser Ile Leu Lys Asp Leu Leu Lys Asn

    795                 800                 805

atc gtc gca atg gag gag caa gca gat tta gtc tcg gat ttc agt gga   2620

Ile Val Ala Met Glu Glu Gln Ala Asp Leu Val Ser Asp Phe Ser Gly

810                 815                 820                 825

aac tcg gac atg agt gct gca aca agt gaa caa cca gct ctc aac aag   2668

Asn Ser Asp Met Ser Ala Ala Thr Ser Glu Gln Pro Ala Leu Asn Lys

                830                 835                 840

att tct cca aaa aag aga aag agt act cta aaa acc aca aat gca tat   2716

Ile Ser Pro Lys Lys Arg Lys Ser Thr Leu Lys Thr Thr Asn Ala Tyr

            845                 850                 855

ttt tat tgg gtg acc cgg gag caa gga tca ttt gat tgg ttc aaa ggt   2764

Phe Tyr Trp Val Thr Arg Glu Gln Gly Ser Phe Asp Trp Phe Lys Gly

        860                 865                 870

gtt atg aat gaa gtg gct gaa ctt gat caa agg ggt gtc atc gag atg   2812

Val Met Asn Glu Val Ala Glu Leu Asp Gln Arg Gly Val Ile Glu Met

    875                 880                 885

cat aac tac ttg acg agt gtt tat gag gaa ggg gat gca cgt tca gct   2860

His Asn Tyr Leu Thr Ser Val Tyr Glu Glu Gly Asp Ala Arg Ser Ala

890                 895                 900                 905

ctc att acc atg gtc cag gca ctt aac cat gct aag aat ggg gtt gat   2908

Leu Ile Thr Met Val Gln Ala Leu Asn His Ala Lys Asn Gly Val Asp

                910                 915                 920

att gta tca ggc acc agt gtg agg aca cat ttc gcc agg ccg aat tgg   2956

Ile Val Ser Gly Thr Ser Val Arg Thr His Phe Ala Arg Pro Asn Trp

            925                 930                 935

agg aaa gta ttt tcc aag acc tta acc aag cat gca aat gca aga ata   3004

Arg Lys Val Phe Ser Lys Thr Leu Thr Lys His Ala Asn Ala Arg Ile

        940                 945                 950

gga gtt ttc tac tgt ggt gca ccc ata tta gct aaa gaa ctc agc caa   3052

Gly Val Phe Tyr Cys Gly Ala Pro Ile Leu Ala Lys Glu Leu Ser Gln

    955                 960                 965

ctc tgc aaa gag ttt aac caa aag ggc aca aca aag ttc gag ttt cac   3100

Leu Cys Lys Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Thr Lys Phe Glu Phe His

970                 975                 980                 985

aaa gaa cat ttt tagaagggcc tggagtatga ttaatcttgc atcaacggta       3152

Lys Glu His Phe

cacacatcta tcttcggtac cttatttgat tattctactg aagagataac attagtaagg 3212

aataagtcag agataaattg tacataatag ggaagaagac tatttcaaga gaaaatacat 3272

accaataaga tgtgaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaactcgt gccg                  3316

<210>10

<211>989

<212>PRT

<213>番茄

<400>10

Met Arg Gly Leu Pro Gly His Glu Arg Arg Trp Thr Ser Asp Thr Val

  1               5                  10                  15

Ser Ser Gly Lys Asp Leu Ser Gly Glu Ser Ser Pro Gly Thr Asp Ser

             20                  25                  30

Gly Asn Ile Ser Gly Phe Ala Ser Glu Glu Phe Val Glu Val Ile Leu

         35                  40                  45

Asp Leu Gln Asp Asp Asp Thr Ile Ile Leu Arg Ser Val Glu Pro Ala

     50                  55                  60

Thr Val Ile Asn Ile Asp Gly Ser Asp Pro Ala Ser Gly Val Gly Ile

 65                  70                  75                  80

Gly Gly Ala Ser Ile Glu Thr Pro Ala Ser Val Thr Ser Thr Ser Glu

                 85                  90                  95

Thr Arg Ser Pro Met Met Arg Arg Ser Thr Ser Asn Lys Phe Arg Gln

            100                 105                 110

Phe Ser Gln Glu Leu Lys Ala Glu Ala Val Ala Lys Ala Lys His Phe

        115                 120                 125

Ser Gln Glu Leu Lys Ala Glu Leu Arg Arg Phe Ser Trp Ser His Gly

    130                 135                 140

His Ala Ser Arg Ala Phe Ser Pro Ala Ser Phe Phe Gln Asn Ala Val

145                 150                 155                 160

Val Gly Thr Gly Asn Gly Val Asp Ser Ala Leu Ala Ala Arg Ala Leu

                165                 170                 175

Arg Arg Gln Arg Ala Gln Leu Asp Arg Thr Arg Ser Ser Ala His Lys

            180                 185                 190

Ala Leu Arg Gly Leu Lys Phe Ile Ser Asn Asn Lys Thr Asn Gly Trp

        195                 200                 205

Asn Glu Val Glu Asn Asn Phe Ala Lys Leu Ala Lys Asp Gly Tyr Leu

    210                 215                 220

Tyr Arg Ser Asp Phe Ala Gln Cys Ile Gly Gln Tyr Ser Arg Arg Arg

225                 230                 235                240

Ser Leu Gln Phe Asn Tyr Arg Leu Ile Thr Leu Ile Leu Ile Asn Tyr

                245                 250                 255

Leu Val Lys Gly Met Lys Asp Ser Lys Glu Phe Ala Leu Glu Leu Phe

            260                 265                 270

Asp Ala Leu Ser Arg Arg Arg Arg Leu Lys Val Asp Lys Ile Ser Gln

        275                 280                 285

Glu Glu Leu Tyr Glu Tyr Trp Ser Gln Ile Thr Asp Gln Ser Phe Asp

    290                 295                 300

Ser Arg Leu Gln Ile Phe Phe Asp Met Val Asp Lys Asn Glu Asp Gly

305                 310                 315                 320

Arg Ile Gly Glu Glu Glu Val Lys Glu Ile Ile Met Leu Ser Ala Ser

                325                 330                 335

Ala Asn Lys Leu Ser Arg Leu Lys Glu Gln Ala Glu Glu Tyr Ala Ala

            340                 345                 350

Leu Ile Met Glu Glu Leu Asp Pro Glu Arg Leu Gly Tyr Ile Glu Leu

        355                 360                 365

Trp Gln Leu Glu Thr Leu Leu Leu Gln Lys Asp Thr Tyr Leu Asn Tyr

    370                 375                 380

Ser Gln Ala Leu Ser Tyr Thr Ser Gln Ala Leu Ser Gln Asn Leu Gln

385                 390                 395                 400

Gly Leu Arg Lys Arg Ser Pro Ile Arg Arg Met Ser Thr Lys Leu Val

                405                 410                 415

Tyr Ser Leu Gln Glu Asn Trp Lys Arg Ile Trp Val Leu Val Leu Trp

            420                 425                 430

Ile Leu Ile Met Ile Gly Leu Phe Leu Trp Lys Phe Tyr Gln Tyr Lys

        435                 440                 445

Gln Lys Ser Ala Phe Gln Val Met Gly Tyr Cys Leu Leu Thr Ala Lys

    450                 455                 460

Gly Ala Ala Glu Thr Leu Lys Phe Asn Met Ala Leu Ile Leu Leu Pro

465                 470                 475                 480

Val Cys Arg Asn Thr Ile Thr Phe Leu Arg Ser Thr Lys Leu Ser Cys

                485                 490                 495

Phe Val Pro Phe Asp Asp Asn Ile Asn Phe His Lys Thr Val Ala Ala

            500                 505                 510

Ala Ile Val Thr Gly Ile Ile Leu His Ala Gly Asn His Leu Val Cys

        515                 520                 525

Asp Phe Pro Lys Leu Ile His Ala Asn Ser Thr Asn Tyr Gln Lys Tyr

    530                 535                 540

Leu Val Asn Asp Phe Gly Pro Ser Gln Pro Gln Tyr Ile Asp Leu Val

545                 550                 555                 560

Lys Gly Val Glu Gly Val Thr Gly Ile Val Met Val Ile Leu Met Ala

                565                 570                 575

Ile Ala Phe Thr Leu Ala Thr Arg Trp Phe Arg Arg Ser Leu Ile Lys

            580                 585                 590

Leu Pro Lys Pro Phe Asp Arg Leu Thr Gly Phe Asn Ala Phe Trp Tyr

        595                 600                 605

Ser His His Leu Leu Ile Ile Val Tyr Ile Val Leu Ile Ile His Gly

    610                 615                 620

Thr Phe Leu Tyr Leu Val His Asn Trp Tyr Ser Lys Thr Thr Trp Met

625                 630                 635                 640

Tyr Ile Ala Val Pro Val Leu Leu Tyr Ala Gly Glu Arg Thr Leu Arg

                645                 650                 655

Phe Phe Arg Ser Gly Leu Tyr Ser Val Arg Leu Leu Lys Val Ala Ile

            660                 665                 670

Tyr Pro Gly Asn Val Leu Thr Leu Gln Met Ser Lys Pro Pro Gln Phe

        675                 680                 685

Arg Tyr Lys Ser Gly Gln Tyr Met Phe Val Gln Cys Pro Ala Val Ser

    690                 695                 700

Pro Phe Glu Trp His Pro Phe Ser Ile Thr Ser Ala Pro Gly Asp Asp

705                 710                 715                 720

Tyr Leu Ser Ile His Ile Arg Gln Leu Gly Asp Trp Thr Gln Glu Leu

                725                 730                 735

Lys Arg Val Phe Ser Glu Ala Cys Glu Gln Pro Glu Ala Gly Lys Ser

            740                 745                 750

Gly Leu Leu Arg Ala Asp Glu Asn Thr Lys Thr Ser Leu Pro Lys Leu

        755                 760                 765

Leu Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gln Asp Tyr Arg Lys Tyr

    770                 775                 780

Asp Val Leu Leu Leu Val Gly Leu Gly Ile Gly Ala Thr Pro Phe Ile

785                 790                 795                 800

Ser Ile Leu Lys Asp Leu Leu Lys Asn Ile Val Ala Met Glu Glu Gln

                805                 810                 815

Ala Asp Leu Val Ser Asp Phe Ser Gly Asn Ser Asp Met Ser Ala Ala

            820                 825                 830

Thr Ser Glu Gln Pro Ala Leu Asn Lys Ile Ser Pro Lys Lys Arg Lys

        835                 840                 845

Ser Thr Leu Lys Thr Thr Asn Ala Tyr Phe Tyr Trp Val Thr Arg Glu

    850                 855                 860

Gln Gly Ser Phe Asp Trp Phe Lys Gly Val Met Asn Glu Val Ala Glu

865                 870                 875                 880

Leu Asp Gln Arg Gly Val Ile Glu Met His Asn Tyr Leu Thr Ser Val

                885                 890                 895

Tyr Glu Glu Gly Asp Ala Arg Ser Ala Leu Ile Thr Met Val Gln Ala

            900                 905                 910

Leu Asn His Ala Lys Asn Gly Val Asp Ile Val Ser Gly Thr Ser Val

        915                 920                 925

Arg Thr His Phe Ala Arg Pro Asn Trp Arg Lys Val Phe Ser Lys Thr

    930                 935                 940

Leu Thr Lys His Ala Asn Ala Arg Ile Gly Val Phe Tyr Cys Gly Ala

945                 950                 955                 960

Pro Ile Leu Ala Lys Glu Leu Ser Gln Leu Cys Lys Glu Phe Asn Gln

                965                 970                 975

Lys Gly Thr Thr Lys Phe Glu Phe His Lys Glu His Phe

            980                 985

<210>11

<211>3080

<212>DNA

<213>拟南芥菜(Arabidopsis thaliana)

<220>

<221>CDS

<222>(15)..(2846)

<223>编码NADPH氧化酶

<400>11

ccgactttgg atct atg aaa ccg ttc tca aag aac gat cgg cga cgg tgg   50

                Met Lys Pro Phe Ser Lys Asn Asp Arg Arg Arg Trp

                  1               5                  10

tca ttt gat tca gtt tcc gcc gga aaa acc gcc gtc gga agt gca tca   98

Ser Phe Asp Ser Val Ser Ala Gly Lys Thr Ala Val Gly Ser Ala Ser

         15                  20                  25

act tca ccg gga act gaa tac tcc att aac ggt gat caa gag ttc gtt   146

Thr Ser Pro Gly Thr Glu Tyr Ser Ile Asn Gly Asp Gln Glu Phe Val

     30                  35                  40

gaa gtc aca atc gat ctt caa gac gat gac aca atc gtt ctt cgt agc   194

Glu Val Thr Ile Asp Leu Gln Asp Asp Asp Thr Ile Val Leu Arg Ser

 45                  50                  55                  60

gtc gag cca gca acc gcc att aat gtc atc gga gat atc tcc gac gac   242

Val Glu Pro Ala Thr Ala Ile Asn Val Ile Gly Asp Ile Ser Asp Asp

                 65                  70                  75

aac acc gga ata atg act ccg gtt tcg att tcg aga tct ccg acg atg   290

Asn Thr Gly Ile Met Thr Pro Val Ser Ile Ser Arg Ser Pro Thr Met

             80                  85                  90

aaa cga act tca tct aat cgg ttc cga caa ttc tca caa gag ctt aaa   338

Lys Arg Thr Ser Ser Asn Arg Phe Arg Gln Phe Ser Gln Glu Leu Lys

         95                 100                 105

gcc gaa gct gtg gcg aaa gcg aaa cag tta tct cag gag ttg aaa cga   386

Ala Glu Ala Val Ala Lys Ala Lys Gln Leu Ser Gln Glu Leu Lys Arg

    110                 115                 120

ttc tca tgg tct cgt tct ttc tca ggt aac tta acc act act agt acc   434

Phe Ser Trp Ser Arg Ser Phe Ser Gly Asn Leu Thr Thr Thr Ser Thr

125                 130                 135                 140

gcc gct aat caa agc ggc ggt gct ggt ggt ggt ttg gtg aac tcg gct   482

Ala Ala Asn Gln Ser Gly Gly Ala Gly Gly Gly Leu Val Asn Ser Ala

                145                 150                 155

tta gaa gcg cga gcg ttg cga aag caa cgt gct cag tta gat cgg act   530

Leu Glu Ala Arg Ala Leu Arg Lys Gln Arg Ala Gln Leu Asp Arg Thr

            160                 165                 170

cgg tct agt gct caa aga gct ctt cgt ggt ttg aga ttc att agc aat   578

Arg Ser Ser Ala Gln Arg Ala Leu Arg Gly Leu Arg Phe Ile Ser Asn

        175                 180                 185

aag caa aag aac gtt gat ggt tgg aac gat gtt caa tca aat ttc gaa   626

Lys Gln Lys Asn Val Asp Gly Trp Asn Asp Val Gln Ser Asn Phe Glu

    190                 195                 200

aaa ttc gaa aaa aat ggt tac atc tat cgc tcc gat ttc gct caa tgc   674

Lys Phe Glu Lys Asn Gly Tyr Ile Tyr Arg Ser Asp Phe Ala Gln Cys

205                 210                 215                 220

ata gga atg aaa gat tcg aaa gaa ttt gca ttg gaa ctg ttc gat gca   722

Ile Gly Met Lys Asp Ser Lys Glu Phe Ala Leu Glu Leu Phe Asp Ala

                225                 230                 235

ttg agt aga aga aga aga tta aaa gta gag aaa atc aat cac gat gag   770

Leu Ser Arg Arg Arg Arg Leu Lys Val Glu Lys Ile Asn His Asp Glu

            240                 245                 250

ctt tat gag tat tgg tca caa atc aac gac gag agt ttt gat tct cgt   818

Leu Tyr Glu Tyr Trp Ser Gln Ile Asn Asp Glu Ser Phe Asp Ser Arg

        255                 260                 265

ctc cag atc ttc ttc gac ata gtg gac aag aat gaa gat ggg aga att   866

Leu Gln Ile Phe Phe Asp Ile Val Asp Lys Asn Glu Asp Gly Arg Ile

    270                 275                 280

aca gaa gag gaa gta aaa gag ata ata atg ttg agt gca tct gca aat   914

Thr Glu Glu Glu Val Lys Glu Ile Ile Met Leu Ser Ala Ser Ala Asn

285                 290                 295                 300

aag cta tca aga tta aag gaa caa gca gag gaa tat gca gct ttg att   962

Lys Leu Ser Arg Leu Lys Glu Gln Ala Glu Glu Tyr Ala Ala Leu Ile

                305                 310                 315

atg gaa gag tta gat cct gaa aga ctt ggc tac ata gag cta tgg caa   1010

Met Glu Glu Leu Asp Pro Glu Arg Leu Gly Tyr Ile Glu Leu Trp Gln

            320                 325                 330

cta gag act ttg ctt cta caa aaa gac aca tac ctc aat tac agt caa   1058

Leu Glu Thr Leu Leu Leu Gln Lys Asp Thr Tyr Leu Asn Tyr Ser Gln

        335                 340                 345

gca ttg agc tat acg agc caa gca ttg agc caa aac ctt caa ggg tta   1106

Ala Leu Ser Tyr Thr Ser Gln Ala Leu Ser Gln Asn Leu Gln Gly Leu

    350                 355                 360

agg gga aag agt cga ata cat aga atg agt tcg gat ttc gtc tac att   1154

Arg Gly Lys Ser Arg Ile His Arg Met Ser Ser Asp Phe Val Tyr Ile

365                 370                 375                 380

atg caa gag aat tgg aaa agg ata tgg gtt tta tcc tta tgg atc atg   1202

Met Gln Glu Asn Trp Lys Arg Ile Trp Val Leu Ser Leu Trp Ile Met

                385                 390                 395

atc atg atc gga tta ttc ttg tgg aaa ttc ttc caa tac aag caa aaa   1250

Ile Met Ile Gly Leu Phe Leu Trp Lys Phe Phe Gln Tyr Lys Gln Lys

            400                 405                 410

gat gca ttt cat gtg atg gga tat tgt tta ctc aca gcc aaa gga gca   1298

Asp Ala Phe His Val Met Gly Tyr Cys Leu Leu Thr Ala Lys Gly Ala

        415                 420                 425

gct gaa aca ctt aaa ttc aac atg gct cta ata ctt ttc cca gtt tgc   1346

Ala Glu Thr Leu Lys Phe Asn Met Ala Leu Ile Leu Phe Pro Val Cys

    430                 435                 440

aga aac acc att act tgg ctt aga tcc aca aga ctc tct tac ttc gtt   1394

Arg Asn Thr Ile Thr Trp Leu Arg Ser Thr Arg Leu Ser Tyr Phe Val

445                 450                 455                 460

cct ttt gat gat aat atc aac ttc cac aag aca att gct gga gcc att   1442

Pro Phe Asp Asp Asn Ile Asn Phe His Lys Thr Ile Ala Gly Ala Ile

                465                 470                 475

gta gta gct gtg atc ctt cat att gga gac cat ctt gct tgt gat ttc   1490

Val Val Ala Val Ile Leu His Ile Gly Asp His Leu Ala Cys Asp Phe

            480                 485                 490

cct aga att gtt aga gcc acc gaa tac gat tac aat cgg tat ctg ttt   1538

Pro Arg Ile Val Arg Ala Thr Glu Tyr Asp Tyr Asn Arg Tyr Leu Phe

        495                 500                 505

cat tac ttt caa aca aaa cag cca aca tac ttc gac ctc gtt aag gga   1586

His Tyr Phe Gln Thr Lys Gln Pro Thr Tyr Phe Asp Leu Val Lys Gly

    510                 515                 520

cct gaa gga atc act ggg att tta atg gtc att ttg atg att att tca   1634

Pro Glu Gly Ile Thr Gly Ile Leu Met Val Ile Leu Met Ile Ile Ser

525                 530                 535                 540

ttc aca tta gca aca aga tgg ttt agg cgt aac cta gtc aag ctt cct   1682

Phe Thr Leu Ala Thr Arg Trp Phe Arg Arg Asn Leu Val Lys Leu Pro

                545                 550                 555

aag cca ttt gat cga cta acc ggt ttt aac gcc ttt tgg tat tcg cat   1730

Lys Pro Phe Asp Arg Leu Thr Gly Phe Asn Ala Phe Trp Tyr Ser His

            560                 565                 570

cat ttg ttc gtc att gtt tat atc ttg ctt att ctt cat ggt atc ttc   1778

His Leu Phe Val Ile Val Tyr Ile Leu Leu Ile Leu His Gly Ile Phe

        575                 580                 585

ctc tat ttc gcc aag cct tgg tat gtt cgt acg aca tgg atg tat ctt   1826

Leu Tyr Phe Ala Lys Pro Trp Tyr Val Arg Thr Thr Trp Met Tyr Leu

    590                 595                 600

gca gta cca gtt tta ctc tat ggt gga gaa aga aca ctt agg tac ttc   1874

Ala Val Pro Val Leu Leu Tyr Gly Gly Glu Arg Thr Leu Arg Tyr Phe

605                 610                 615                 620

cgt tct ggt tct tat tcg gtt cga ctg ctt aag gtt gct ata tat cct   1922

Arg Ser Gly Ser Tyr Ser Val Arg Leu Leu Lys Val Ala Ile Tyr Pro

                625                 630                 635

ggt aat gtt cta acg cta caa atg tcg aaa cca act caa ttt cgt tac   1970

Gly Asn Val Leu Thr Leu Gln Met Ser Lys Pro Thr Gln Phe Arg Tyr

            640                 645                 650

aaa agc gga caa tac atg ttt gtc caa tgt cct gcg gtt tcg cca ttc   2018

Lys Ser Gly Gln Tyr Met Phe Val Gln Cys Pro Ala Val Ser Pro Phe

        655                 660                 665

gag tgg cat cca ttc tca att act tcc gca cct gaa gat gat tat atc   2066

Glu Trp His Pro Phe Ser Ile Thr Ser Ala Pro Glu Asp Asp Tyr Ile

    670                 675                 680

agc att cac att aga caa ctt ggt gat tgg act caa gaa ctc aaa aga   2114

Ser Ile His Ile Arg Gln Leu Gly Asp Trp Thr Gln Glu Leu Lys Arg

685                 690                 695                 700

gta ttc tct gaa gtt tgt gag cca ccg gtt ggc ggt aaa agc gga ctt   2162

Val Phe Ser Glu Val Cys Glu Pro Pro Val Gly Gly Lys Ser Gly Leu

                705                 710                 715

ctc aga gcc gac gaa aca aca aag aaa agt ttg cca aag cta ttg ata   2210

Leu Arg Ala Asp Glu Thr Thr Lys Lys Ser Leu Pro Lys Leu Leu Ile

            720                 725                 730

gat gga ccg tac ggt gca cca gca caa gat tat agg aaa tat gat gtt   2258

Asp Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gln Asp Tyr Arg Lys Tyr Asp Val

        735                 740                 745

ctc tta tta gtt ggt ctt ggc att ggt gca act cca ttt atc agt atc   2306

Leu Leu Leu Val Gly Leu Gly Ile Gly Ala Thr Pro Phe Ile Ser Ile

    750                 755                 760

ttg aaa gat ttg ctt aac aac att gtt aaa atg gaa gag cat gcg gat   2354

Leu Lys Asp Leu Leu Asn Asn Ile Val Lys Met Glu Glu His Ala Asp

765                 770                 775                  780

tcg atc tcg gat ttc agt aga tca tca gaa tac agc aca gga agc aac   2402

Ser Ile Ser Asp Phe Ser Arg Ser Ser Glu Tyr Ser Thr Gly Ser Asn

                785                 790                 795

ggt gac acg cca aga cga aag aga ata cta aaa acc aca aat gct tat   2450

Gly Asp Thr Pro Arg Arg Lys Arg Ile Leu Lys Thr Thr Asn Ala Tyr

            800                 805                810

ttc tac tgg gtc aca aga gaa caa ggc tct ttt gat tgg ttc aaa ggt   2498

Phe Tyr Trp Val Thr Arg Glu Gln Gly Ser Phe Asp Trp Phe Lys Gly

        815                 820                 825

gtc atg aac gaa gtt gca gaa ctt gac caa cgg ggt gtg ata gag atg  2546

Val Met Asn Glu Val Ala Glu Leu Asp Gln Arg Gly Val Ile Glu Met

    830                 835                 840

cat aac tat tta aca agt gtg tat gaa gaa ggt gat gct cgt tct gct   2594

His Asn Tyr Leu Thr Ser Val Tyr Glu Glu Gly Asp Ala Arg Ser Ala

845                 850                 855                  860

ctc att aca atg gtt caa gct ctt aat cat gcc aaa aat ggt gtc gac   2642

Leu Ile Thr Met Val Gln Ala Leu Asn His Ala Lys Asn Gly Val Asp

                865                 870                 875

att gtc tct ggc act agg gtc aga aca cac ttt gca aga cct aat tgg   2690

Ile Val Ser Gly Thr Arg Val Arg Thr His Phe Ala Arg Pro Asn Trp

            880                 885                 890

aag aag gtt ctc aca aag cta agt tcc aag cat tgc aat gca aga aca   2738

Lys Lys Val Leu Thr Lys Leu Ser Ser Lys His Cys Asn Ala Arg Thr

        895                 900                 905

gga gtg ttt tat tgc gga gta ccg gtt tta ggg aag gag ctt agc aaa   2786

Gly Val Phe Tyr Cys Gly Val Pro Val Leu Gly Lys Glu Leu Ser Lys

    910                 915                 920

cta tgc aac aca ttc aat caa aaa ggt tca acc aag ttt gaa ttt cac   2834

Leu Cys Asn Thr Phe Asn Gln Lys Gly Ser Thr Lys Phe Glu Phe His

925                 930                 935                 940

aag gag cat ttc taaaagacaa gaaggaagaa gccaaaagcc ctctagattc       2886

Lys Glu His Phe

tttaatatct caaatttagc cacttatagt ataaaggcaa tctcttcact atttaattca 2946

aagtgattaa acgttaacac actgtcaaaa gtgagtgtgt taacgtttag ctccacacgt 3006

tctaggttta tatacaccga ggcatacgtg taaatatacg agacagaaga aattcaaggg 3066

ggtttgatag aagc                                                   3080

<210>12

<211>944

<212>PRT

<213>拟南芥菜

<400>12

Met Lys Pro Phe Ser Lys Asn Asp Arg Arg Arg Trp Ser Phe Asp Ser

  1               5                  10                  15

Val Ser Ala Gly Lys Thr Ala Val Gly Ser Ala Ser Thr Ser Pro Gly

             20                  25                  30

Thr Glu Tyr Ser Ile Asn Gly Asp Gln Glu Phe Val Glu Val Thr Ile

         35                  40                  45

Asp Leu Gln Asp Asp Asp Thr Ile Val Leu Arg Ser Val Glu Pro Ala

     50                  55                  60

Thr Ala Ile Asn Val Ile Gly Asp Ile Ser Asp Asp Asn Thr Gly Ile

 65                  70                  75                  80

Met Thr Pro Val Ser Ile Ser Arg Ser Pro Thr Met Lys Arg Thr Ser

                 85                  90                  95

Ser Asn Arg Phe Arg Gln Phe Ser Gln Glu Leu Lys Ala Glu Ala Val

            100                 105                 110

Ala Lys Ala Lys Gln Leu Ser Gln Glu Leu Lys Arg Phe Ser Trp Ser

        115                 120                 125

Arg Ser Phe Ser Gly Asn Leu Thr Thr Thr Ser Thr Ala Ala Asn Gln

    130                 135                 140

Ser Gly Gly Ala Gly Gly Gly Leu Val Asn Ser Ala Leu Glu Ala Arg

145                 150                 155                 160

Ala Leu Arg Lys Gln Arg Ala Gln Leu Asp Arg Thr Arg Ser Ser Ala

                165                 170                 175

Gln Arg Ala Leu Arg Gly Leu Arg Phe Ile Ser Asn Lys Gln Lys Asn

            180                 185                 190

Val Asp Gly Trp Asn Asp Val Gln Ser Asn Phe Glu Lys Phe Glu Lys

        195                 200                 205

Asn Gly Tyr Ile Tyr Arg Ser Asp Phe Ala Gln Cys Ile Gly Met Lys

    210                 215                 220

Asp Ser Lys Glu Phe Ala Leu Glu Leu Phe Asp Ala Leu Ser Arg Arg

225                 230                 235                 240

Arg Arg Leu Lys Val Glu Lys Ile Asn His Asp Glu Leu Tyr Glu Tyr

                245                 250                 255

Trp Ser Gln Ile Asn Asp Glu Ser Phe Asp Ser Arg Leu Gln Ile Phe

            260                 265                 270

Phe Asp Ile Val Asp Lys Asn Glu Asp Gly Arg Ile Thr Glu Glu Glu

        275                 280                 285

Val Lys Glu Ile Ile Met Leu Ser Ala Ser Ala Asn Lys Leu Ser Arg

    290                 295                 300

Leu Lys Glu Gln Ala Glu Glu Tyr Ala Ala Leu Ile Met Glu Glu Leu

305                 310                 315                 320

Asp Pro Glu Arg Leu Gly Tyr Ile Glu Leu Trp Gln Leu Glu Thr Leu

                325                 330                 335

Leu Leu Gln Lys Asp Thr Tyr Leu Asn Tyr Ser Gln Ala Leu Ser Tyr

            340                 345                 350

Thr Ser Gln Ala Leu Ser Gln Asn Leu Gln Gly Leu Arg Gly Lys Ser

        355                 360                 365

Arg Ile His Arg Met Ser Ser Asp Phe Val Tyr Ile Met Gln Glu Asn

    370                 375                 380

Trp Lys Arg Ile Trp Val Leu Ser Leu Trp Ile Met Ile Met Ile Gly

385                 390                 395                 400

Leu Phe Leu Trp Lys Phe Phe Gln Tyr Lys Gln Lys Asp Ala Phe His

                405                 410                 415

Val Met Gly Tyr Cys Leu Leu Thr Ala Lys Gly Ala Ala Glu Thr Leu

            420                 425                 430

Lys Phe Asn Met Ala Leu Ile Leu Phe Pro Val Cys Arg Asn Thr Ile

        435                 440                 445

Thr Trp Leu Arg Ser Thr Arg Leu Ser Tyr Phe Val Pro Phe Asp Asp

    450                 455                 460

Asn Ile Asn Phe His Lys Thr Ile Ala Gly Ala Ile Val Val Ala Val

465                 470                 475                 480

Ile Leu His Ile Gly Asp His Leu Ala Cys Asp Phe Pro Arg Ile Val

                485                 490                 495

Arg Ala Thr Glu Tyr Asp Tyr Asn Arg Tyr Leu Phe His Tyr Phe Gln

            500                 505                 510

Thr Lys Gln Pro Thr Tyr Phe Asp Leu Val Lys Gly Pro Glu Gly Ile

        515                 520                 525

Thr Gly Ile Leu Met Val Ile Leu Met Ile Ile Ser Phe Thr Leu Ala

    530                 535                 540

Thr Arg Trp Phe Arg Arg Asn Leu Val Lys Leu Pro Lys Pro Phe Asp

545                 550                 555                 560

Arg Leu Thr Gly Phe Asn Ala Phe Trp Tyr Ser His His Leu Phe Val

                565                 570                 575

Ile Val Tyr Ile Leu Leu Ile Leu His Gly Ile Phe Leu Tyr Phe Ala

            580                 585                 590

Lys Pro Trp Tyr Val Arg Thr Thr Trp Met Tyr Leu Ala Val Pro Val

        595                 600                 605

Leu Leu Tyr Gly Gly Glu Arg Thr Leu Arg Tyr Phe Arg Ser Gly Ser

    610                 615                 620

Tyr Ser Val Arg Leu Leu Lys Val Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Val Leu

625                 630                 635                 640

Thr Leu Gln Met Ser Lys Pro Thr Gln Phe Arg Tyr Lys Ser Gly Gln

                645                 650                 655

Tyr Met Phe Val Gln Cys Pro Ala Val Ser Pro Phe Glu Trp His Pro

            660                 665                 670

Phe Ser Ile Thr Ser Ala Pro Glu Asp Asp Tyr Ile Ser Ile His Ile

        675                 680                 685

Arg Gln Leu Gly Asp Trp Thr Gln Glu Leu Lys Arg Val Phe Ser Glu

    690                 695                 700

Val Cys Glu Pro Pro Val Gly Gly Lys Ser Gly Leu Leu Arg Ala Asp

705                 710                 715                 720

Glu Thr Thr Lys Lys Ser Leu Pro Lys Leu Leu Ile Asp Gly Pro Tyr

                725                 730                 735

Gly Ala Pro Ala Gln Asp Tyr Arg Lys Tyr Asp Val Leu Leu Leu Val

            740                 745                 750

Gly Leu Gly Ile Gly Ala Thr Pro Phe Ile Ser Ile Leu Lys Asp Leu

        755                 760                  765

Leu Asn Asn Ile Val Lys Met Glu Glu His Ala Asp Ser Ile Ser Asp

    770                 775                 780

Phe Ser Arg Ser Ser Glu Tyr Ser Thr Gly Ser Asn Gly Asp Thr Pro

785                 790                 795                 800

Arg Arg Lys Arg Ile Leu Lys Thr Thr Asn Ala Tyr Phe Tyr Trp Val

                805                 810                 815

Thr Arg Glu Gln Gly Ser Phe Asp Trp Phe Lys Gly Val Met Asn Glu

            820                 825                 830

Val Ala Glu Leu Asp Gln Arg Gly Val Ile Glu Met His Asn Tyr Leu

        835                 840                 845

Thr Ser Val Tyr Glu Glu Gly Asp Ala Arg Ser Ala Leu Ile Thr Met

    850                 855                 860

Val Gln Ala Leu Asn His Ala Lys Asn Gly Val Asp Ile Val Ser Gly

865                 870                 875                 880

Thr Arg Val Arg Thr His Phe Ala Arg Pro Asn Trp Lys Lys Val Leu

                885                 890                 895

Thr Lys Leu Ser Ser Lys His Cys Asn Ala Arg Thr Gly Val Phe Tyr

            900                 905                 910

Cys Gly Val Pro Val Leu Gly Lys Glu Leu Ser Lys Leu Cys Asn Thr

        915                 920                 925

Phe Asn Gln Lys Gly Ser Thr Lys Phe Glu Phe His Lys Glu His Phe

    930                 935                 940

<210>13

<211>3035

<212>DNA

<213>拟南芥菜

<220>

<221>CDS

<222>(132)..(2894)

<223>编码NADPH氧化酶

<400>13

tcaaacacct tttgagagcg gttatttttt ctctatcaac taatacagta accttacggg 60

tgtttatttg tatagatctc tgtggttttc ttggccaact ctagtgagat ctttttcgtt 120

tctcgaattc g atg aaa atg aga cga ggc aat tca agt aac gac cat gaa  170

             Met Lys Met Arg Arg Gly Asn Ser Ser Asn Asp His Glu

               1               5                  10

ctt ggg att cta cga gga gct aac tcg gac acc aac tcg gac acg gag   218

Leu Gly Ile Leu Arg Gly Ala Asn Ser Asp Thr Asn Ser Asp Thr Glu

     15                  20                  25

agc atc gct agc gac cgt ggt gcc ttt agc ggt ccg ctt ggc cgg cct   266

Ser Ile Ala Ser Asp Arg Gly Ala Phe Ser Gly Pro Leu Gly Arg Pro

 30                  35                  40                  45

aaa cgt gcg tcc aag aaa aac gca aga ttc gcc gac gat ctt ccc aag   314

Lys Arg Ala Ser Lys Lys Asn Ala Arg Phe Ala Asp Asp Leu Pro Lys

                 50                  55                  60

aga agc aat agt gtt gct ggc ggc cgt ggt gat gac gat gag tac gtg   362

Arg Ser Asn Ser Val Ala Gly Gly Arg Gly Asp Asp Asp Glu Tyr Val

             65                  70                  75

gag atc acg cta gac atc agg gac gac tcg gtg gcc gtc cat agt gtc   410

Glu Ile Thr Leu Asp Ile Arg Asp Asp Ser Val Ala Val His Ser Val

         80                  85                  90

caa caa gca gct gga ggt gga ggc cac ctg gag gac ccg gag cta gcc   458

Gln Gln Ala Ala Gly Gly Gly Gly His Leu Glu Asp Pro Glu Leu Ala

     95                 100                 105

ctt ctt acg aag aag act ctc gag agc agc ctc aac aac acc acc tcc   506

Leu Leu Thr Lys Lys Thr Leu Glu Ser Ser Leu Asn Asn Thr Thr Ser

110                 115                 120                 125

tta tct ttc ttc cga agc acc tcc tca cgc atc aag aac gcc tcc cgc   554

Leu Ser Phe Phe Arg Ser Thr Ser Ser Arg Ile Lys Asn Ala Ser Arg

                130                 135                 140

gag ctc cgc cgc gtg ttc tct aga cgt ccc tcc ccg gcc gtg cgg cgg   602

Glu Leu Arg Arg Val Phe Ser Arg Arg Pro Ser Pro Ala Val Arg Arg

            145                 150                 155

ttt gac cgc acg agc tcc gcg gcc atc cac gca ctc aaa ggt ctc aag   650

Phe Asp Arg Thr Ser Ser Ala Ala Ile His Ala Leu Lys Gly Leu Lys

        160                 165                 170

ttc att gcc acc aag acg gcc gca tgg ccg gcc gtc gac caa cgt ttc   698

Phe Ile Ala Thr Lys Thr Ala Ala Trp Pro Ala Val Asp Gln Arg Phe

    175                 180                 185

gat aaa ctc tcc gct gat tcc aac ggc ctc tta ctc tct gcc aag ttt   746

Asp Lys Leu Ser Ala Asp Ser Asn Gly Leu Leu Leu Ser Ala Lys Phe

190                 195                 200                 205

tgg gaa tgc tta gga atg aat aag gaa tct aaa gac ttc gct gac cag   794

Trp Glu Cys Leu Gly Met Asn Lys Glu Ser Lys Asp Phe Ala Asp Gln

                210                 215                 220

ctc ttt aga gca tta gct cgc cgg aat aac gtc tcc ggc gat gca atc   842

Leu Phe Arg Ala Leu Ala Arg Arg Asn Asn Val Ser Gly Asp Ala Ile

            225                 230                 235

aca aag gaa cag ctt agg ata ttc tgg gaa cag atc tca gac gaa agc   890

Thr Lys Glu Gln Leu Arg Ile Phe Trp Glu Gln Ile Ser Asp Glu Ser

        240                 245                 250

ttt gat gcc aaa ctc caa gtc ttt ttt gac atg gtg gac aaa gat gaa   938

Phe Asp Ala Lys Leu Gln Val Phe Phe Asp Met Val Asp Lys Asp Glu

    255                 260                 265

gat ggg cga gta aca gaa gaa gag gtg gct gag att att agt ctt agt   986

Asp Gly Arg Val Thr Glu Glu Glu Val Ala Glu Ile Ile Ser Leu Ser

270                 275                 280                 285

gct tct gca aac aag ctc tca aat att caa aag caa gcc aaa gaa tat   1034

Ala Ser Ala Asn Lys Leu Ser Asn Ile Gln Lys Gln Ala Lys Glu Tyr

                290                 295                 300

gcg gca ctg ata atg gaa gag ttg gac cca gac aat gct ggg ttt att   1082

Ala Ala Leu Ile Met Glu Glu Leu Asp Pro Asp Asn Ala Gly Phe Ile

            305                 310                 315

atg atc gaa aac ttg gaa atg ttg cta tta caa gca ccg aac cag tcg   1130

Met Ile Glu Asn Leu Glu Met Leu Leu Leu Gln Ala Pro Asn Gln Ser

        320                 325                 330

gtg cgg atg gga gac agc agg ata ctt agt cag atg tta agt cag aag   1178

Val Arg Met Gly Asp Ser Arg Ile Leu Ser Gln Met Leu Ser Gln Lys

    335                 340                 345

ctt aga ccg gca aaa gag agc aac cct tta ttg aga tgg tcg gag aaa   1226

Leu Arg Pro Ala Lys Glu Ser Asn Pro Leu Leu Arg Trp Ser Glu Lys

350                 355                 360                 365

atc aaa tat ttc ata ctt gat aat tgg cag aga tta tgg atc atg atg   1274

Ile Lys Tyr Phe Ile Leu Asp Asn Trp Gln Arg Leu Trp Ile Met Met

                370                 375                 380

tta tgg ctt ggc atc tgt ggt ggc ctc ttt act tat aaa ttc att cag   1322

Leu Trp Leu Gly Ile Cys Gly Gly Leu Phe Thr Tyr Lys Phe Ile Gln

            385                 390                 395

tac aag aac aaa gct gcc tat ggt gtg atg ggt tat tgt gtt tgt gtc   1370

Tyr Lys Asn Lys Ala Ala Tyr Gly Val Met Gly Tyr Cys Val Cys Val

        400                 405                 410

gcc aaa gga ggc gcc gag act ctc aaa ttc aac atg gct ctc ata ttg   1418

Ala Lys Gly Gly Ala Glu Thr Leu Lys Phe Asn Met Ala Leu Ile Leu

    415                 420                 425

ttg cct gtt tgt cga aac acc atc act tgg ctt agg aac aag acc aag   1466

Leu Pro Val Cys Arg Asn Thr Ile Thr Trp Leu Arg Asn Lys Thr Lys

430                 435                 440                 445

ctt ggt act gtc gtt cct ttt gat gat agt ctt aac ttc cac aag gtt   1514

Leu Gly Thr Val Val Pro Phe Asp Asp Ser Leu Asn Phe His Lys Val

                450                 455                 460

att gca agc ggg ata gtc gtc ggt gtt ttg ctc cat gcg ggt gcc cat   1562

Ile Ala Ser Gly Ile Val Val Gly Val Leu Leu His Ala Gly Ala His

            465                 470                 475

tta acg tgt gat ttt cca cgt tta att gcc gcg gat gag gac acc tat   1610

Leu Thr Cys Asp Phe Pro Arg Leu Ile Ala Ala Asp Glu Asp Thr Tyr

        480                 485                 490

gag ccg atg gaa aaa tac ttt ggg gat caa ccg act agc tac tgg tgg   1658

Glu Pro Met Glu Lys Tyr Phe Gly Asp Gln Pro Thr Ser Tyr Trp Trp

    495                 500                 505

ttt gtg aaa gga gtg gaa gga tgg act ggc att gtg atg gtt gtg cta   1706

Phe Val Lys Gly Val Glu Gly Trp Thr Gly Ile Val Met Val Val Leu

510                 515                 520                 525

atg gct ata gcc ttt aca ctc gct acg cct tgg ttc cga cgt aac aag   1754

Met Ala Ile Ala Phe Thr Leu Ala Thr Pro Trp Phe Arg Arg Asn Lys

                530                 535                 540

ctt aac tta cct aac ttc ctc aag aag ctt acc ggt ttc aac gcc ttt   1802

Leu Asn Leu Pro Asn Phe Leu Lys Lys Leu Thr Gly Phe Asn Ala Phe

            545                 550                 555

tgg tac acc cac cat ttg ttc atc att gtt tat gct ctt ctc att gtc   1850

Trp Tyr Thr His His Leu Phe Ile Ile Val Tyr Ala Leu Leu Ile Val

        560                 565                 570

cat ggt atc aag ctc tac ctc aca aag att tgg tat cag aag acg aca   1898

His Gly Ile Lys Leu Tyr Leu Thr Lys Ile Trp Tyr Gln Lys Thr Thr

    575                 580                 585

tgg atg tat ctt gct gta ccc atc ctt cta tat gca tct gag agg ctg   1946

Trp Met Tyr Leu Ala Val Pro Ile Leu Leu Tyr Ala Ser Glu Arg Leu

590                 595                 600                 605

ctc cgt gct ttc aga tca agc atc aaa ccg gtt aag atg atc aag gtg   1994

Leu Arg Ala Phe Arg Ser Ser Ile Lys Pro Val Lys Met Ile Lys Val

                610                 615                 620

gct gtt tac ccc ggg aac gtg ttg tct cta cac atg acg aag cca caa   2042

Ala Val Tyr Pro Gly Asn Val Leu Ser Leu His Met Thr Lys Pro Gln

            625                 630                 635

gga ttc aaa tac aaa agt gga cag ttc atg ttg gtg aac tgc cga gcc   2090

Gly Phe Lys Tyr Lys Ser Gly Gln Phe Met Leu Val Asn Cys Arg Ala

        640                 645                 650

gta tct cca ttc gaa tgg cat cct ttc tca atc aca tca gct ccc gga   2138

Val Ser Pro Phe Glu Trp His Pro Phe Ser Ile Thr Ser Ala Pro Gly

    655                 660                 665

gac gat tac ctg agc gta cat atc cgc act ctc ggt gac tgg aca cgt   2186

Asp Asp Tyr Leu Ser Val His Ile Arg Thr Leu Gly Asp Trp Thr Arg

670                 675                 680                 685

aag ctc agg acc gtt ttc tcc gag gtt tgc aaa cct cct acc gcc ggt   2234

Lys Leu Arg Thr Val Phe Ser Glu Val Cys Lys Pro Pro Thr Ala Gly

                690                 695                 700

aaa agc ggt ctt ctc cga gca gac gga gga gat gga aac ctc ccg ttc   2282

Lys Ser Gly Leu Leu Arg Ala Asp Gly Gly Asp Gly Asn Leu Pro Phe

            705                 710                 715

ccg aag gtc ctt atc gac ggt cca tac ggt gct ccc gca caa gac tac   2330

Pro Lys Val Leu Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gln Asp Tyr

        720                 725                 730

aag aaa tac gac gtg gta ctc ctc gta ggt ctc ggc att gga gcc acg   2378

Lys Lys Tyr Asp Val Val Leu Leu Val Gly Leu Gly Ile Gly Ala Thr

    735                 740                 745

cct atg atc agt atc ctt aag gac atc atc aac aac atg aaa ggt cct   2426

Pro Met Ile Ser Ile Leu Lys Asp Ile Ile Asn Asn Met Lys Gly Pro

750                 755                 760                 765

gac cgc gac agc gac att gag aac aat aac agt aac aac aat agt aaa   2474

Asp Arg Asp Ser Asp Ile Glu Asn Asn Asn Ser Asn Asn Asn Ser Lys

                770                 775                 780

ggg ttt aag aca agg aaa gct tat ttc tac tgg gtg act agg gaa caa   2522

Gly Phe Lys Thr Arg Lys Ala Tyr Phe Tyr Trp Val Thr Arg Glu Gln

            785                 790                 795

gga tca ttc gag tgg ttc aag gga ata atg gac gag att tcg gag tta   2570

Gly Ser Phe Glu Trp Phe Lys Gly Ile Met Asp Glu Ile Ser Glu Leu

        800                 805                 810

gac gag gaa gga atc atc gag ctt cac aat tat tgc acg agt gtg tac   2618

Asp Glu Glu Gly Ile Ile Glu Leu His Asn Tyr Cys Thr Ser Val Tyr

    815                 820                 825

gag gaa ggt gat gca aga gtg gct ctc att gcc atg ctt cag tcg ttg   2666

Glu Glu Gly Asp Ala Arg Val Ala Leu Ile Ala Met Leu Gln Ser Leu

830                 835                 840                 845

caa cac gct aag aac ggt gtg gat gtt gtg tcg ggt aca cgt gtc aag   2714

Gln His Ala Lys Asn Gly Val Asp Val Val Ser Gly Thr Arg Val Lys

                850                 855                 860

tcc cac ttc gct aaa cct aac tgg aga caa gtc tac aag aag atc gct   2762

Ser His Phe Ala Lys Pro Asn Trp Arg Gln Val Tyr Lys Lys Ile Ala

            865                 870                 875

gtt caa cat ccc ggc aaa aga ata gga gtc ttc tac tgt gga atg cca   2810

Val Gln His Pro Gly Lys Arg Ile Gly Val Phe Tyr Cys Gly Met Pro

        880                 885                 890

gga atg ata aag gaa tta aaa aat cta gct ttg gat ttt tct cga aag   2858

Gly Met Ile Lys Glu Leu Lys Asn Leu Ala Leu Asp Phe Ser Arg Lys

    895                 900                 905

aca act acc aag ttt gac ttc cac aaa gag aac ttc tagattaatt        2904

Thr Thr Thr Lys Phe Asp Phe His Lys Glu Asn Phe

910                 915                 920

atatacgttg tagaaaaata aaacaagaaa caactataca aataaatatt tattttaaat 2964

tcttttcatt ttatgtaaaa ttatctgagt tatctttttt tgttaaaaaa aaaaaaaaaa 3024

aaaaaaaaaa a                                                      3035

<210>14

<211>921

<212>PRT

<213>拟南芥菜

<400>14

Met Lys Met Arg Arg Gly Asn Ser Ser Asn Asp His Glu Leu Gly Ile

  1               5                  10                  15

Leu Arg Gly Ala Asn Ser Asp Thr Asn Ser Asp Thr Glu Ser Ile Ala

             20                  25                  30

Ser Asp Arg Gly Ala Phe Ser Gly Pro Leu Gly Arg Pro Lys Arg Ala

         35                  40                  45

Ser Lys Lys Asn Ala Arg Phe Ala Asp Asp Leu Pro Lys Arg Ser Asn

     50                  55                  60

Ser Val Ala Gly Gly Arg Gly Asp Asp Asp Glu Tyr Val Glu Ile Thr

 65                  70                  75                  80

Leu Asp Ile Arg Asp Asp Ser Val Ala Val His Ser Val Gln Gln Ala

                 85                  90                  95

Ala Gly Gly Gly Gly His Leu Glu Asp Pro Glu Leu Ala Leu Leu Thr

            100                 105                 110

Lys Lys Thr Leu Glu Ser Ser Leu Asn Asn Thr Thr Ser Leu Ser Phe

        115                 120                 125

Phe Arg Ser Thr Ser Ser Arg Ile Lys Asn Ala Ser Arg Glu Leu Arg

    130                 135                 140

Arg Val Phe Ser Arg Arg Pro Ser Pro Ala Val Arg Arg Phe Asp Arg

145                 150                 155                 160

Thr Ser Ser Ala Ala Ile His Ala Leu Lys Gly Leu Lys Phe Ile Ala

                165                 170                 175

Thr Lys Thr Ala Ala Trp Pro Ala Val Asp Gln Arg Phe Asp Lys Leu

            180                 185                 190

Ser Ala Asp Ser Asn Gly Leu Leu Leu Ser Ala Lys Phe Trp Glu Cys

        195                 200                 205

Leu Gly Met Asn Lys Glu Ser Lys Asp Phe Ala Asp Gln Leu Phe Arg

    210                 215                 220

Ala Leu Ala Arg Arg Asn Asn Val Ser Gly Asp Ala Ile Thr Lys Glu

225                 230                 235                 240

Gln Leu Arg Ile Phe Trp Glu Gln Ile Ser Asp Glu Ser Phe Asp Ala

                245                 250                 255

Lys Leu Gln Val Phe Phe Asp Met Val Asp Lys Asp Glu Asp Gly Arg

            260                 265                 270

Val Thr Glu Glu Glu Val Ala Glu Ile Ile Ser Leu Ser Ala Ser Ala

        275                 280                 285

Asn Lys Leu Ser Asn Ile Gln Lys Gln Ala Lys Glu Tyr Ala Ala Leu

    290                 295                 300

Ile Met Glu Glu Leu Asp Pro Asp Asn Ala Gly Phe Ile Met Ile Glu

305                 310                 315                 320

Asn Leu Glu Met Leu Leu Leu Gln Ala Pro Asn Gln Ser Val Arg Met

                325                 330                 335

Gly Asp Ser Arg Ile Leu Ser Gln Met Leu Ser Gln Lys Leu Arg Pro

            340                 345                 350

Ala Lys Glu Ser Asn Pro Leu Leu Arg Trp Ser Glu Lys Ile Lys Tyr

        355                 360                 365

Phe Ile Leu Asp Asn Trp Gln Arg Leu Trp Ile Met Met Leu Trp Leu

    370                 375                 380

Gly Ile Cys Gly Gly Leu Phe Thr Tyr Lys Phe Ile Gln Tyr Lys Asn

385                 390                 395                 400

Lys Ala Ala Tyr Gly Val Met Gly Tyr Cys Val Cys Val Ala Lys Gly

                405                 410                 415

Gly Ala Glu Thr Leu Lys Phe Asn Met Ala Leu Ile Leu Leu Pro Val

            420                 425                 430

Cys Arg Asn Thr Ile Thr Trp Leu Arg Asn Lys Thr Lys Leu Gly Thr

        435                 440                 445

Val Val Pro Phe Asp Asp Ser Leu Asn Phe His Lys Val Ile Ala Ser

    450                 455                 460

Gly Ile Val Val Gly Val Leu Leu His Ala Gly Ala His Leu Thr Cys

465                 470                 475                 480

Asp Phe Pro Arg Leu Ile Ala Ala Asp Glu Asp Thr Tyr Glu Pro Met

                485                 490                 495

Glu Lys Tyr Phe Gly Asp Gln Pro Thr Ser Tyr Trp Trp Phe Val Lys

            500                 505                 510

Gly Val Glu Gly Trp Thr Gly Ile Val Met Val Val Leu Met Ala Ile

        515                 520                 525

Ala Phe Thr Leu Ala Thr Pro Trp Phe Arg Arg Asn Lys Leu Asn Leu

    530                 535                 540

Pro Asn Phe Leu Lys Lys Leu Thr Gly Phe Asn Ala Phe Trp Tyr Thr

545                 550                 555                 560

His His Leu Phe Ile Ile Val Tyr Ala Leu Leu Ile Val His Gly Ile

                565                 570                 575

Lys Leu Tyr Leu Thr Lys Ile Trp Tyr Gln Lys Thr Thr Trp Met Tyr

            580                 585                 590

Leu Ala Val Pro Ile Leu Leu Tyr Ala Ser Glu Arg Leu Leu Arg Ala

        595                 600                 605

Phe Arg Ser Ser Ile Lys Pro Val Lys Met Ile Lys Val Ala Val Tyr

    610                 615                 620

Pro Gly Asn Val Leu Ser Leu His Met Thr Lys Pro Gln Gly Phe Lys

625                 630                 635                 640

Tyr Lys Ser Gly Gln Phe Met Leu Val Asn Cys Arg Ala Val Ser Pro

                645                 650                 655

Phe Glu Trp His Pro Phe Ser Ile Thr Ser Ala Pro Gly Asp Asp Tyr

            660                 665                 670

Leu Ser Val His Ile Arg Thr Leu Gly Asp Trp Thr Arg Lys Leu Arg

        675                 680                 685

Thr Val Phe Ser Glu Val Cys Lys Pro Pro Thr Ala Gly Lys Ser Gly

    690                 695                 700

Leu Leu Arg Ala Asp Gly Gly Asp Gly Asn Leu Pro Phe Pro Lys Val

705                 710                 715                 720

Leu Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gln Asp Tyr Lys Lys Tyr

                725                 730                 735

Asp Val Val Leu Leu Val Gly Leu Gly Ile Gly Ala Thr Pro Met Ile

            740                 745                 750

Ser Ile Leu Lys Asp Ile Ile Asn Asn Met Lys Gly Pro Asp Arg Asp

        755                 760                 765

Ser Asp Ile Glu Asn Asn Asn Ser Asn Asn Asn Ser Lys Gly Phe Lys

    770                 775                 780

Thr Arg Lys Ala Tyr Phe Tyr Trp Val Thr Arg Glu Gln Gly Ser Phe

785                 790                 795                 800

Glu Trp Phe Lys Gly Ile Met Asp Glu Ile Ser Glu Leu Asp Glu Glu

                805                 810                 815

Gly Ile Ile Glu Leu His Asn Tyr Cys Thr Ser Val Tyr Glu Glu Gly

            820                 825                 830

Asp Ala Arg Val Ala Leu Ile Ala Met Leu Gln Ser Leu Gln His Ala

        835                 840                 845

Lys Asn Gly Val Asp Val Val Ser Gly Thr Arg Val Lys Ser His Phe

    850                 855                 860

Ala Lys Pro Asn Trp Arg Gln Val Tyr Lys Lys Ile Ala Val Gln His

865                 870                 875                 880

Pro Gly Lys Arg Ile Gly Val Phe Tyr Cys Gly Met Pro Gly Met Ile

                885                 890                 895

Lys Glu Leu Lys Asn Leu Ala Leu Asp Phe Ser Arg Lys Thr Thr Thr

            900                 905                 910

Lys Phe Asp Phe His Lys Glu Asn Phe

        915                 920

<210>15

<211>3338

<212>DNA

<213>烟草

<220>

<221>CDS

<222>(313)..(3129)

<223>编码NADPH氧化酶

<400>15

ggcacgagaa aatccccaat cttttatttg tttattaaaa ttagtacgcc aagaaagaaa 60

gaaagaaaga cagaaagact cggtcttctt tcttctcttg gtctgaaact ccaaaataga 120

ataccaatta ttaatctttt gtcatctttt tccttctcgc gttcatatat actggaatat 180

acatcttttt ttcaacctat cttctttcat tttcaagaat tcgggttcca taaatagtag 240

gttcactact tttatttcaa cctccttaaa gtttattcat tcatattttt tctcaaagaa 300

aaaactatag aa atg caa aat tcg gaa aat cat cat ccg cac cac cag cac 351

              Met Gln Asn Ser Glu Asn His His Pro His His Gln His

                1               5                  10

cac cat tcg gac aca gag ata att gga aat gat aga gcg tcg tac agt   399

His His Ser Asp Thr Glu Ile Ile Gly Asn Asp Arg Ala Ser Tyr Ser

     15                  20                  25

ggt ccg tta agc gga ccg tta aac aaa cga ggc ggc aaa aag agt gcg   447

Gly Pro Leu Ser Gly Pro Leu Asn Lys Arg Gly Gly Lys Lys Ser Ala

 30                  35                  40                  45

aga ttt aac att cct gaa tct acc gac atc gga acc agt gtc gga acc   495

Arg Phe Asn Ile Pro Glu Ser Thr Asp Ile Gly Thr Ser Val Gly Thr

                 50                  55                  60

ggc ggc aag tcc aat gat gat gcg tac gtt gaa atc act ctc gat gtc   543

Gly Gly Lys Ser Asn Asp Asp Ala Tyr Val Glu Ile Thr Leu Asp Val

             65                  70                  75

cgc gaa gat tcc gte gct gtc cac agt gtc aaa act gcc ggc ggt gat   591

Arg Glu Asp Ser Val Ala Val His Ser Val Lys Thr Ala Gly Gly Asp

         80                  85                  90

gac gtg gaa gat ccc gag ctg gct tta ttg gct aaa ggc tta gag aag   639

Asp Val Glu Asp Pro Glu Leu Ala Leu Leu Ala Lys Gly Leu Glu Lys

     95                 100                 105

aag tcc act tta gga tct tca ctt gtt cga aat gct tcg tct aga att   687

Lys Ser Thr Leu Gly Ser Ser Leu Val Arg Asn Ala Ser Ser Arg Ile

110                 115                 120                 125

cgg caa gtg tca caa gag ctc agg cgt ttg gct tcc tta aat aaa cgc   735

Arg Gln Val Ser Gln Glu Leu Arg Arg Leu Ala Ser Leu Asn Lys Arg

                130                 135                 140

cca att cct act gga agg ttc gac agg aat aaa tca gct gct gct cat   783

Pro Ile Pro Thr Gly Arg Phe Asp Arg Asn Lys Ser Ala Ala Ala His

            145                 150                 155

gct ctt aaa ggt ctc aag ttt att agt aag acc gac ggc ggc gct ggt   831

Ala Leu Lys Gly Leu Lys Phe Ile Ser Lys Thr Asp Gly Gly Ala Gly

        160                 165                 170

tgg gcc gcc gtc gag aag cgg ttc gat gag att act gct tct act act   879

Trp Ala Ala Val Glu Lys Arg Phe Asp Glu Ile Thr Ala Ser Thr Thr

    175                 180                 185

ggt ttg ctt cct cgt gcc aaa ttt gga gaa tgt ata ggt atg aat aag   927

Gly Leu Leu Pro Arg Ala Lys Phe Gly Glu Cys Ile Gly Met Asn Lys

190                 195                 200                 205

gag tct aag gaa ttt gct gtt gag cta tat gat gcg cta gct cgg agg   975

Glu Ser Lys Glu Phe Ala Val Glu Leu Tyr Asp Ala Leu Ala Arg Arg

                210                 215                 220

aga aac att aca act gat tcc att aac aaa gca cag ctc aaa gag ttc   1023

Arg Asn Ile Thr Thr Asp Ser Ile Asn Lys Ala Gln Leu Lys Glu Phe

            225                 230                 235

tgg gac caa gtg gct gac caa agt ttt gat tct cgc ctt caa aca ttt   1071

Trp Asp Gln Val Ala Asp Gln Ser Phe Asp Ser Arg Leu Gln Thr Phe

        240                 245                 250

ttt gac atg gtt gat aaa gat gct gat ggt aga att aca gaa gaa gaa   1119

Phe Asp Met Val Asp Lys Asp Ala Asp Gly Arg Ile Thr Glu Glu Glu

    255                 260                 265

gtc aga gag att ata ggc ctt agc gcg tcg gcc aac agg ctg tca aca   1167

Val Arg Glu Ile Ile Gly Leu Ser Ala Ser Ala Asn Arg Leu Ser Thr

270                 275                 280                 285

atc cag aaa caa gct gat gaa tac gca gca atg atc atg gaa gag ttg   1215

Ile Gln Lys Gln Ala Asp Glu Tyr Ala Ala Met Ile Met Glu Glu Leu

                290                 295                 300

gat cct aac aac ctc gga tac att atg att gag aac ttg gaa atg ctt   1263

Asp Pro Asn Asn Leu Gly Tyr Ile Met Ile Glu Asn Leu Glu Met Leu

            305                 310                 315

tta ctg caa gca cca aat caa tca gtg caa aga gga ggc gaa agt cgg   1311

Leu Leu Gln Ala Pro Asn Gln Ser Val Gln Arg Gly Gly Glu Ser Arg

        320                 325                 330

aac ttg agt caa atg cta agt caa aaa cta aag cat aca caa gag aga   1359

Asn Leu Ser Gln Met Leu Ser Gln Lys Leu Lys His Thr Gln Glu Arg

    335                 340                 345

aat cca ata gta aga tgg tac aag agt ttc atg tac ttt ttg ctg gat   1407

Asn Pro Ile Val Arg Trp Tyr Lys Ser Phe Met Tyr Phe Leu Leu Asp

350                 355                 360                 365

aat tgg caa aga gtt tgg gta ttg tta ctg tgg att gga att atg gct   1455

Asn Trp Gln Arg Val Trp Val Leu Leu Leu Trp Ile Gly Ile Met Ala

                370                 375                 380

ggt cta ttt aca tgg aaa tat ata cag tat aaa gaa aaa gct gca tat   1503

Gly Leu Phe Thr Trp Lys Tyr Ile Gln Tyr Lys Glu Lys Ala Ala Tyr

            385                 390                 395

aaa gtc atg ggt ccc tgt gtg tgt ttt gcc aaa ggt gct gct gaa aca   1551

Lys Val Met Gly Pro Cys Val Cys Phe Ala Lys Gly Ala Ala Glu Thr

        400                 405                 410

ctc aag ctc aac atg gca att att tta ttt ccg gtt tgc aga aac acg   1599

Leu Lys Leu Asn Met Ala Ile Ile Leu Phe Pro Val Cys Arg Asn Thr

    415                 420                 425

atc aca tgg ctt cga aat aag acc aga tta ggt gct gct gtt cct ttt   1647

Ile Thr Trp Leu Arg Asn Lys Thr Arg Leu Gly Ala Ala Val Pro Phe

430                 435                 440                 445

gat gat aac ctt aat ttt cac aaa gtg ata gca gtg gca att gct ctt   1695

Asp Asp Asn Leu Asn Phe His Lys Val Ile Ala Val Ala Ile Ala Leu

                450                 455                 460

ggg gtt gga ata cac gga cta tct cac ttg aca tgt gat ttt cct cgg   1743

Gly Val Gly Ile His Gly Leu Ser His Leu Thr Cys Asp Phe Pro Arg

            465                 470                 475

ctt tta aat gct agt gaa gaa gaa tat gaa cca atg aag tac tat ttt   1791

Leu Leu Asn Ala Ser Glu Glu Glu Tyr Glu Pro Met Lys Tyr Tyr Phe

        480                 485                 490

gga gat cag cca gaa agc tat tgg tgg ttt ata aaa gga gta gaa ggg   1839

Gly Asp Gln Pro Glu Ser Tyr Trp Trp Phe Ile Lys Gly Val Glu Gly

    495                 500                 505

gta act gga att ata atg gtg gtt tta atg gca ata gca ttt act cta   1887

Val Thr Gly Ile Ile Met Val Val Leu Met Ala Ile Ala Phe Thr Leu

510                 515                 520                 525

gca acc cca tgg ttt aga agg aat aga gtt agt ttg cca aaa cca ttt   1935

Ala Thr Pro Trp Phe Arg Arg Asn Arg Val Ser Leu Pro Lys Pro Phe

                530                 535                 540

cac aaa ctc act gga tnt aat gcc ttt tgg tac tct cac cat ctc ttt   1983

His Lys Leu Thr Gly Xaa Asn Ala Phe Trp Tyr Ser His His Leu Phe

            545                 550                 555

gtt atc gtc tac act ctg ttc att gtg cat ggt gaa aag cta tac att   2031

Val Ile Val Tyr Thr Leu Phe Ile Val His Gly Glu Lys Leu Tyr Ile

        560                 565                 570

acc aaa gat tgg tac aag aga acc gac atg gat gta ctt tta act atc   2079

Thr Lys Asp Trp Tyr Lys Arg Thr Asp Met Asp Val Leu Leu Thr Ile

    575                 580                 585

cca atc ata ctc tat gct agt gaa agg ttg att agg gca ttc agg tca   2127

Pro Ile Ile Leu Tyr Ala Ser Glu Arg Leu Ile Arg Ala Phe Arg Ser

590                 595                 600                 605

agc att aaa gct gtt aag att ttg aag gtg gca gta tat cca gga aat   2175

Ser Ile Lys Ala Val Lys Ile Leu Lys Val Ala Val Tyr Pro Gly Asn

                610                 615                 620

gtg ttg gca ctt cac atg tca aaa cca cag ggc tac aaa tac aaa agt   2223

Val Leu Ala Leu His Met Ser Lys Pro Gln Gly Tyr Lys Tyr Lys Ser

            625                 630                  635

ggg caa tac atg ttt gtc aac tgt gct gca gtt tct cca ttt gag tgg   2271

Gly Gln Tyr Met Phe Val Asn Cys Ala Ala Val Ser Pro Phe Glu Trp

        640                 645                 650

cat cca ttt tca att act tcg gcc cca gga gat gac tat ctc agt gtc   2319

His Pro Phe Ser Ile Thr Ser Ala Pro Gly Asp Asp Tyr Leu Ser Val

    655                 660                 665

cat att cga act ctt ggt gat tgg acc agg caa ctt aaa act gtt ttc   2367

His Ile Arg Thr Leu Gly Asp Trp Thr Arg Gln Leu Lys Thr Val Phe

670                 675                 680                 685

tcc gag gtt tgc cag cca cca cct aat gga aaa agt gga ctc ctc aga   2415

Ser Glu Val Cys Gln Pro Pro Pro Asn Gly Lys Ser Gly Leu Leu Arg

                690                 695                 700

gct gac tac ttg caa gga gag aat aat cct aat ttc cca agg gtg tta   2463

Ala Asp Tyr Leu Gln Gly Glu Asn Asn Pro Asn Phe Pro Arg Val Leu

            705                 710                 715

ata gat gga cca tat gga gca cca gca caa gac tac aag aaa tat gag   2511

Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gln Asp Tyr Lys Lys Tyr Glu

        720                 725                 730

gtg gtt ttg ttg gta ggt ctt gga att gga gct aca cca atg atc agt   2559

Val Val Leu Leu Val Gly Leu Gly Ile Gly Ala Thr Pro Met Ile Ser

    735                 740                 745

att gtt aaa gac att gtc aac aac atg aag gca atg gac gaa gaa gaa   2607

Ile Val Lys Asp Ile Val Asn Asn Met Lys Ala Met Asp Glu Glu Glu

750                 755                 760                 765

aat tcc ttg gaa gat gga cac aat aat aat atg gca cca aat tct agc   2655

Asn Ser Leu Glu Asp Gly His Asn Asn Asn Met Ala Pro Asn Ser Ser

                770                 775                 780

ccc aat att gca aaa aat aag ggt aat aaa tca ggt tca gca agt gga   2703

Pro Asn Ile Ala Lys Asn Lys Gly Asn Lys Ser Gly Ser Ala Ser Gly

            785                 790                 795

gga aat aat ttc aat aca agg aga gca tat ttc tat tgg gtt act aga   2751

Gly Asn Asn Phe Asn Thr Arg Arg Ala Tyr Phe Tyr Trp Val Thr Arg

        800                 805                 810

gaa caa ggt tca ttt gat tgg ttc aaa ggt ata atg aat gaa gct gct   2799

Glu Gln Gly Ser Phe Asp Trp Phe Lys Gly Ile Met Asn Glu Ala Ala

    815                 820                 825

gaa atg gac cat aag gga gta att gaa atg cat aat tat tgt act agt   2847

Glu Met Asp His Lys Gly Val Ile Glu Met His Asn Tyr Cys Thr Ser

830                 835                 840                 845

gtt tat gaa gaa ggt gat gct cgt tct gct ctt att act atg ctt cag   2895

Val Tyr Glu Glu Gly Asp Ala Arg Ser Ala Leu Ile Thr Met Leu Gln

                850                 855                 860

tct ctt cac cat gcc aaa aat ggt gtt gac att gtc tct ggc acc aga   2943

Ser Leu His His Ala Lys Asn Gly Val Asp Ile Val Ser Gly Thr Arg

            865                 870                 875

gtt aag tca cat ttt gct aaa cct aat tgg cgt aat gtc tac aaa cgc   2991

Val Lys Ser His Phe Ala Lys Pro Asn Trp Arg Asn Val Tyr Lys Arg

        880                 885                 890

att gct ctc aac cac cct gag gct aaa gtt ggg gtc ttc tat tgt ggg   3039

Ile Ala Leu Asn His Pro Glu Ala Lys Val Gly Val Phe Tyr Cys Gly

    895                 900                 905

gca cca gca ctg acc aaa gaa cta aga caa cac gcc ttg gat ttt tca   3087

Ala Pro Ala Leu Thr Lys Glu Leu Arg Gln His Ala Leu Asp Phe Ser

910                 915                 920                 925

cac aag aca tct acc aag ttt gat ttc cat aaa gaa aat ttt           3129

His Lys Thr Ser Thr Lys Phe Asp Phe His Lys Glu Asn Phe

                930                 935

tgagcaaaga atagaccatt aagcagagca ttaaaatttc atcaaaacag ctaaggacac 3189

aggttgtttt atagaagtct accaactctc cctattgtgt acagataatg ttgcacttca 3249

agttgatata tagttgtggt tgtgatgcta gtatattaca aaataataag attattttta 3309

tttgtagtaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaa                                   3338

<210>16

<211>939

<212>PRT

<213>烟草

<400>16

Met Gln Asn Ser Glu Asn His His Pro His His Gln His His His Ser

  1               5                  10                  15

Asp Thr Glu Ile Ile Gly Asn Asp Arg Ala Ser Tyr Ser Gly Pro Leu

             20                  25                  30

Ser Gly Pro Leu Asn Lys Arg Gly Gly Lys Lys Ser Ala Arg Phe Asn

         35                  40                  45

Ile Pro Glu Ser Thr Asp Ile Gly Thr Ser Val Gly Thr Gly Gly Lys

     50                  55                  60

Ser Asn Asp Asp Ala Tyr Val Glu Ile Thr Leu Asp Val Arg Glu Asp

 65                  70                  75                  80

Ser Val Ala Val His Ser Val Lys Thr Ala Gly Gly Asp Asp Val Glu

                 85                  90                  95

Asp Pro Glu Leu Ala Leu Leu Ala Lys Gly Leu Glu Lys Lys Ser Thr

            100                 105                 110

Leu Gly Ser Ser Leu Val Arg Asn Ala Ser Ser Arg Ile Arg Gln Val

        115                 120                 125

Ser Gln Glu Leu Arg Arg Leu Ala Ser Leu Asn Lys Arg Pro Ile Pro

    130                 135                 140

Thr Gly Arg Phe Asp Arg Asn Lys Ser Ala Ala Ala His Ala Leu Lys

145                 150                 155                 160

Gly Leu Lys Phe Ile Ser Lys Thr Asp Gly Gly Ala Gly Trp Ala Ala

                165                 170                 175

Val Glu Lys Arg Phe Asp Glu Ile Thr Ala Ser Thr Thr Gly Leu Leu

            180                 185                 190

Pro Arg Ala Lys Phe Gly Glu Cys Ile Gly Met Asn Lys Glu Ser Lys

        195                 200                 205

Glu Phe Ala Val Glu Leu Tyr Asp Ala Leu Ala Arg Arg Arg Asn Ile

    210                 215                 220

Thr Thr Asp Ser Ile Asn Lys Ala Gln Leu Lys Glu Phe Trp Asp Gln

225                 230                 235                 240

Val Ala Asp Gln Ser Phe Asp Ser Arg Leu Gln Thr Phe Phe Asp Met

                245                 250                 255

Val Asp Lys Asp Ala Asp Gly Arg Ile Thr Glu Glu Glu Val Arg Glu

            260                 265                 270

Ile Ile Gly Leu Ser Ala Ser Ala Asn Arg Leu Ser Thr Ile Gln Lys

        275                 280                 285

Gln Ala Asp Glu Tyr Ala Ala Met Ile Met Glu Glu Leu Asp Pro Asn

    290                 295                 300

Asn Leu Gly Tyr Ile Met Ile Glu Asn Leu Glu Met Leu Leu Leu Gln

305                 310                 315                 320

Ala Pro Asn Gln Ser Val Gln Arg Gly Gly Glu Ser Arg Asn Leu Ser

                325                 330                 335

Gln Met Leu Ser Gln Lys Leu Lys His Thr Gln Glu Arg Asn Pro Ile

            340                 345                 350

Val Arg Trp Tyr Lys Ser Phe Met Tyr Phe Leu Leu Asp Asn Trp Gln

        355                 360                 365

Arg Val Trp Val Leu Leu Leu Trp Ile Gly Ile Met Ala Gly Leu Phe

    370                 375                 380

Thr Trp Lys Tyr Ile Gln Tyr Lys Glu Lys Ala Ala Tyr Lys Val Met

385                 390                 395                 400

Gly Pro Cys Val Cys Phe Ala Lys Gly Ala Ala Glu Thr Leu Lys Leu

                405                 410                 415

Asn Met Ala Ile Ile Leu Phe Pro Val Cys Arg Asn Thr Ile Thr Trp

            420                 425                 430

Leu Arg Asn Lys Thr Arg Leu Gly Ala Ala Val Pro Phe Asp Asp Asn

        435                 440                 445

Leu Asn Phe His Lys Val Ile Ala Val Ala Ile Ala Leu Gly Val Gly

    450                 455                 460

Ile His Gly Leu Ser His Leu Thr Cys Asp Phe Pro Arg Leu Leu Asn

465                 470                 475                 480

Ala Ser Glu Glu Glu Tyr Glu Pro Met Lys Tyr Tyr Phe Gly Asp Gln

                485                 490                 495

Pro Glu Ser Tyr Trp Trp Phe Ile Lys Gly Val Glu Gly Val Thr Gly

            500                 505                 510

Ile Ile Met Val Val Leu Met Ala Ile Ala Phe Thr Leu Ala Thr Pro

        515                 520                 525

Trp Phe Arg Arg Asn Arg Val Ser Leu Pro Lys Pro Phe His Lys Leu

    530                 535                 540

Thr Gly Xaa Asn Ala Phe Trp Tyr Ser His His Leu Phe Val Ile Val

545                 550                 555                 560

Tyr Thr Leu Phe Ile Val His Gly Glu Lys Leu Tyr Ile Thr Lys Asp

                565                 570                 575

Trp Tyr Lys Arg Thr Asp Met Asp Val Leu Leu Thr Ile Pro Ile Ile

            580                 585                 590

Leu Tyr Ala Ser Glu Arg Leu Ile Arg Ala Phe Arg Ser Ser Ile Lys

        595                 600                 605

Ala Val Lys Ile Leu Lys Val Ala Val Tyr Pro Gly Asn Val Leu Ala

    610                 615                 620

Leu His Met Ser Lys Pro Gln Gly Tyr Lys Tyr Lys Ser Gly Gln Tyr

625                 630                 635                 640

Met Phe Val Asn Cys Ala Ala Val Ser Pro Phe Glu Trp His Pro Phe

                645                 650                 655

Ser Ile Thr Ser Ala Pro Gly Asp Asp Tyr Leu Ser Val His Ile Arg

            660                 665                 670

Thr Leu Gly Asp Trp Thr Arg Gln Leu Lys Thr Val Phe Ser Glu Val

        675                 680                 685

Cys Gln Pro Pro Pro Asn Gly Lys Ser Gly Leu Leu Arg Ala Asp Tyr

    690                 695                 700

Leu Gln Gly Glu Asn Asn Pro Asn Phe Pro Arg Val Leu Ile Asp Gly

705                 710                 715                 720

Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gln Asp Tyr Lys Lys Tyr Glu Val Val Leu

                725                 730                 735

Leu Val Gly Leu Gly Ile Gly Ala Thr Pro Met Ile Ser Ile Val Lys

            740                 745                 750

Asp Ile Val Asn Asn Met Lys Ala Met Asp Glu Glu Glu Asn Ser Leu

        755                 760                 765

Glu Asp Gly His Asn Asn Asn Met Ala Pro Asn Ser Ser Pro Asn Ile

    770                 775                 780

Ala Lys Asn Lys Gly Asn Lys Ser Gly Ser Ala Ser Gly Gly Asn Asn

785                 790                 795                 800

Phe Asn Thr Arg Arg Ala Tyr Phe Tyr Trp Val Thr Arg Glu Gln Gly

                805                 810                 815

Ser Phe Asp Trp Phe Lys Gly Ile Met Asn Glu Ala Ala Glu Met Asp

            820                 825                 830

His Lys Gly Val Ile Glu Met His Asn Tyr Cys Thr Ser Val Tyr Glu

        835                 840                 845

Glu Gly Asp Ala Arg Ser Ala Leu Ile Thr Met Leu Gln Ser Leu His

    850                 855                 860

His Ala Lys Asn Gly Val Asp Ile Val Ser Gly Thr Arg Val Lys Ser

865                 870                 875                 880

His Phe Ala Lys Pro Asn Trp Arg Asn Val Tyr Lys Arg Ile Ala Leu

                885                 890                 895

Asn His Pro Glu Ala Lys Val Gly Val Phe Tyr Cys Gly Ala Pro Ala

            900                 905                 910

Leu Thr Lys Glu Leu Arg Gln His Ala Leu Asp Phe Ser His Lys Thr

        915                 920                 925

Ser Thr Lys Phe Asp Phe His Lys Glu Asn Phe

    930                 935

<210>17

<211>2532

<212>DNA

<213>水稻

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(2529)

<223>编码NADPH氧化酶

<400>17

atg gcg tcg ccg tac gac cac cag tcg ccg cat gcg cag cac ccg tcg   48

Met Ala Ser Pro Tyr Asp His Gln Ser Pro His Ala Gln His Pro Ser

  1               5                  10                  15

ggg ttg ccg agg ccg ccg ggg gcg ggg gcg ggt gcg gcg gcg ggc ggg   96

Gly Leu Pro Arg Pro Pro Gly Ala Gly Ala Gly Ala Ala Ala Gly Gly

             20                  25                  30

ttc gcg cgg ggg ctg atg aag cag ccg tcg cgg ctg gcg tcc ggg gtg   144

Phe Ala Arg Gly Leu Met Lys Gln Pro Ser Arg Leu Ala Ser Gly Val

         35                  40                  45

agg cag ttc gcg tcg agg gtg tcg atg aag gtg ccg gag ggg gtg ggg   192

Arg Gln Phe Ala Ser Arg Val Ser Met Lys Val Pro Glu Gly Val Gly

     50                  55                  60

ggg atg cgg ccc ggt ggc ggg agg atg acg cgg atg cag tcc agc gcg   240

Gly Met Arg Pro Gly Gly Gly Arg Met Thr Arg Met Gln Ser Ser Ala

 65                  70                  75                  80

cag gtg ggg ctc cgg ggg ctc cgc ttc ctc gac aag acg tcc ggc ggg   288

Gln Val Gly Leu Arg Gly Leu Arg Phe Leu Asp Lys Thr Ser Gly Gly

                 85                  90                  95

aag gag ggg tgg aag tcc gtc gag cgc cgc ttc gac gag atg aac cgc   336

Lys Glu Gly Trp Lys Ser Val Glu Arg Arg Phe Asp Glu Met Asn Arg

            100                 105                 110

aac ggc cgc ctc ccc aag gag agc ttc ggc aag tgc atc ggc atg ggg   384

Asn Gly Arg Leu Pro Lys Glu Ser Phe Gly Lys Cys Ile Gly Met Gly

        115                 120                 125

gac tcc aag gag ttc gcc ggc gag ctg ttc gtg gcg ctg gcg cgg cgg   432

Asp Ser Lys Glu Phe Ala Gly Glu Leu Phe Val Ala Leu Ala Arg Arg

    130                 135                 140

agg aac ctg gag ccg gag gac ggc atc acc aag gag cag ctc aag gag   480

Arg Asn Leu Glu Pro Glu Asp Gly Ile Thr Lys Glu Gln Leu Lys Glu

145                 150                 155                160

ttc tgg gag gag atg acc gac cag aac ttc gac tcg cgg ctt cgc att   528

Phe Trp Glu Glu Met Thr Asp Gln Asn Phe Asp Ser Arg Leu Arg Ile

                165                 170                 175

ttc ttt gac atg tgc gac aag aat ggc gat ggg atg ctc acg gaa gat   576

Phe Phe Asp Met Cys Asp Lys Asn Gly Asp Gly Met Leu Thr Glu Asp

            180                 185                 190

gag gtc aag gag gtt att ata ctg agt gcg tcg gcg aac aag ctg gcg   624

Glu Val Lys Glu Val Ile Ile Leu Ser Ala Ser Ala Asn Lys Leu Ala

        195                 200                 205

aag ctg aag gga cac gcg gcg acg tac gcg tcg ctg atc atg gag gag   672

Lys Leu Lys Gly His Ala Ala Thr Tyr Ala Ser Leu Ile Met Glu Glu

    210                 215                 220

ctg gac ccg gac gac cgc ggg tac atc gag atc tgg cag ctg gag acg   720

Leu Asp Pro Asp Asp Arg Gly Tyr Ile Glu Ile Trp Gln Leu Glu Thr

225                 230                 235                 240

ctg ctg cgc ggc atg gtg agc gcg cag gcg gcg ccg gag aag atg aag   768

Leu Leu Arg Gly Met Val Ser Ala Gln Ala Ala Pro Glu Lys Met Lys

                245                 250                 255

cgg acg acg tcg agc ctc gcg agg acg atg atc ccg tcg cgg tac cgg   816

Arg Thr Thr Ser Ser Leu Ala Arg Thr Met Ile Pro Ser Arg Tyr Arg

            260                 265                 270

agc ccg ctg aag cgg cac gtg tcc agg acg gtg gac ttc gtg cac gag   864

Ser Pro Leu Lys Arg His Val Ser Arg Thr Val Asp Phe Val His Glu

        275                 280                 285

aac tgg aag cgg atc tgg ctc gtc gcg ctg tgg ctc gcc gtc aac gtc   912

Asn Trp Lys Arg Ile Trp Leu Val Ala Leu Trp Leu Ala Val Asn Val

    290                 295                 300

ggc ctc ttc gcc tac aag ttc gag cag tac gag cgg cgc gcc gcg ttc   960

Gly Leu Phe Ala Tyr Lys Phe Glu Gln Tyr Glu Arg Arg Ala Ala Phe

305                 310                 315                 320

cag gtg atg ggc cac tgc gtg tgc gtg gcc aag ggc gcc gcc gag gtg   1008

Gln Val Met Gly His Cys Val Cys Val Ala Lys Gly Ala Ala Glu Val

                325                 330                 335

ctc aag ctc aac atg gcg ctc atc ctc ctc ccc gtg tgc cgg aac acg   1056

Leu Lys Leu Asn Met Ala Leu Ile Leu Leu Pro Val Cys Arg Asn Thr

            340                 345                 350

ctc acc acg ctc agg tcc acg gcg ctc agc cac gtc atc ccc ttc gac   1104

Leu Thr Thr Leu Arg Ser Thr Ala Leu Ser His Val Ile Pro Phe Asp

        355                 360                 365

gac aac atc aac ttc cac aag gtg atc gcg gcg acc atc gcc gcc gcc   1152

Asp Asn Ile Asn Phe His Lys Val Ile Ala Ala Thr Ile Ala Ala Ala

    370                 375                 380

acc gcc gtc cac acg ctg gcg cac gtc acc tgc gac ttc ccg agg ctg   1200

Thr Ala Val His Thr Leu Ala His Val Thr Cys Asp Phe Pro Arg Leu

385                 390                 395                 400

atc aac tgc ccc agc gac aag ttc atg gcg acg ctg ggg ccg aac ttc   1248

Ile Asn Cys Pro Ser Asp Lys Phe Met Ala Thr Leu Gly Pro Asn Phe

                405                 410                 415

ggg tac agg cag ccg acg tac gcc gac ctg ctg gag agc gcc ccc ggc   1296

Gly Tyr Arg Gln Pro Thr Tyr Ala Asp Leu Leu Glu Ser Ala Pro Gly

            420                 425                 430

gtc acc ggc atc ctc atg atc atc atc atg tcc ttc tcc ttc acg ctg   1344

Val Thr Gly Ile Leu Met Ile Ile Ile Met Ser Phe Ser Phe Thr Leu

        435                 440                 445

gcc acg cac tcc ttc cgc cgg agc gtc gtc aag ctg ccg tcg ccg ctg   1392

Ala Thr His Ser Phe Arg Arg Ser Val Val Lys Leu Pro Ser Pro Leu

    450                 455                 460

cac cac ctc gcc ggc ttc aac gcc ttc tgg tac gcg cac cac ctc ctg   1440

His His Leu Ala Gly Phe Asn Ala Phe Trp Tyr Ala His His Leu Leu

465                 470                 475                 480

gtg ctc gcc tac gtc ctc ctc gtc gtg cac tcc tac ttc ata ttc ctc   1488

Val Leu Ala Tyr Val Leu Leu Val Val His Ser Tyr Phe Ile Phe Leu

                485                 490                 495

acc agg gag tgg tac aag aaa acg aca tgg atg tac ctg ata gtc cca   1536

Thr Arg Glu Trp Tyr Lys Lys Thr Thr Trp Met Tyr Leu Ile Val Pro

            500                 505                 510

gtg ctc ttc tat gca tgc gag aga acg atc aga aaa gtt cga gag aac   1584

Val Leu Phe Tyr Ala Cys Glu Arg Thr Ile Arg Lys Val Arg Glu Asn

        515                 520                 525

aac tac cgc gtg agc atc gtc aag gca gcg att tac cca gga aat gtg   1632

Asn Tyr Arg Val Ser Ile Val Lys Ala Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Val

    530                 535                 540

ctc tct ctt cac atg aag aag ccg ccg ggt ttc aag tac aag agc ggg   1680

Leu Ser Leu His Met Lys Lys Pro Pro Gly Phe Lys Tyr Lys Ser Gly

545                 550                 555                 560

atg tac ctg ttt gtg aag tgc cct gat gtc tct cct ttc gaa tgg cat   1728

Met Tyr Leu Phe Val Lys Cys Pro Asp Val Ser Pro Phe Glu Trp His

                565                 570                 575

ccc ttc tcc atc act tct gca cct gga gat gac tac ctg agt gtg cat   1776

Pro Phe Ser Ile Thr Ser Ala Pro Gly Asp Asp Tyr Leu Ser Val His

            580                 585                 590

atc cgt aca cta ggt gac tgg acg act gaa ctc aga aac ctg ttt ggg   1824

Ile Arg Thr Leu Gly Asp Trp Thr Thr Glu Leu Arg Asn Leu Phe Gly

        595                 600                 605

aag gct tgc gag gca cag gtt act tct aag aag gct acc ctt tca aga   1872

Lys Ala Cys Glu Ala Gln Val Thr Ser Lys Lys Ala Thr Leu Ser Arg

    610                 615                 620

ctt gaa act aca gtt gtg gcg gac gct cag aca gag gat act agg ttt   1920

Leu Glu Thr Thr Val Val Ala Asp Ala Gln Thr Glu Asp Thr Arg Phe

625                 630                 635                 640

cct aag gtc ctt att gat ggg ccc tat ggt gca ccg gcg caa aac tac   1968

Pro Lys Val Leu Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gln Asn Tyr

                645                 650                 655

aag aag tat gac att ctt ttg ctt att ggt ctt gga att ggt gct act   2016

Lys Lys Tyr Asp Ile Leu Leu Leu Ile Gly Leu Gly Ile Gly Ala Thr

            660                 665                 670

cct ttc atc agc att ctg aag gat ctg ttg aac aac att aaa tcc aac   2064

Pro Phe Ile Ser Ile Leu Lys Asp Leu Leu Asn Asn Ile Lys Ser Asn

        675                 680                 685

gaa gag gtg gaa agc ata cat ggt tct gag ata ggc agc ttc aag aac   2112

Glu Glu Val Glu Ser Ile His Gly Ser Glu Ile Gly Ser Phe Lys Asn

    690                 695                 700

aat ggg cca gga aga gct tac ttc tac tgg gtg acc aga gag caa ggg   2160

Asn Gly Pro Gly Arg Ala Tyr Phe Tyr Trp Val Thr Arg Glu Gln Gly

705                 710                 715                 720

tcc ttc gag tgg ttt aaa gga gtc atg aac gat gtc gct gaa agt gat   2208

Ser Phe Glu Trp Phe Lys Gly Val Met Asn Asp Val Ala Glu Ser Asp

                725                 730                 735

cac aat aat att ata gag atg cac aat tac ctg acc agc gtg tat gaa   2256

His Asn Asn Ile Ile Glu Met His Asn Tyr Leu Thr Ser Val Tyr Glu

            740                 745                 750

gaa ggc gac gca agg tca gct ttg att gcc atg gtt cag tca ctt caa   2304

Glu Gly Asp Ala Arg Ser Ala Leu Ile Ala Met Val Gln Ser Leu Gln

        755                 760                 765

cat gcc aaa aat ggt gtg gat atc gtc tcc ggc agc agg att cgc aca   2352

His Ala Lys Asn Gly Val Asp Ile Val Ser Gly Ser Arg Ile Arg Thr

    770                 775                 780

cat ttt gcg agg cct aac tgg aga aag gtg ttc tct gac ttg gcg aat   2400

His Phe Ala Arg Pro Asn Trp Arg Lys Val Phe Ser Asp Leu Ala Asn

785                 790                 795                 800

gcc cac aaa aac tca cgc ata ggt gtt ttc tat tgt gga tcc cct aca   2448

Ala His Lys Asn Ser Arg Ile Gly Val Phe Tyr Cys Gly Ser Pro Thr

                805                 810                 815

ctc acg aaa caa ctc aag gat ctt tca aaa gaa ttc agc cag aca acc   2496

Leu Thr Lys Gln Leu Lys Asp Leu Ser Lys Glu Phe Ser Gln Thr Thr

            820                 825                 830

aca act aga ttc cac ttc cac aag gaa aac ttt taa                  2532

Thr Thr Arg Phe His Phe His Lys Glu Asn Phe

        835                 840

<210>18

<211>843

<212>PRT

<213>水稻

<400>18

Met Ala Ser Pro Tyr Asp His Gln Ser Pro His Ala Gln His Pro Ser

  1               5                  10                  15

Gly Leu Pro Arg Pro Pro Gly Ala Gly Ala Gly Ala Ala Ala Gly Gly

             20                  25                  30

Phe Ala Arg Gly Leu Met Lys Gln Pro Ser Arg Leu Ala Ser Gly Val

         35                  40                  45

Arg Gln Phe Ala Ser Arg Val Ser Met Lys Val Pro Glu Gly Val Gly

     50                  55                  60

Gly Met Arg Pro Gly Gly Gly Arg Met Thr Arg Met Gln Ser Ser Ala

 65                  70                  75                  80

Gln Val Gly Leu Arg Gly Leu Arg Phe Leu Asp Lys Thr Ser Gly Gly

                 85                  90                  95

Lys Glu Gly Trp Lys Ser Val Glu Arg Arg Phe Asp Glu Met Asn Arg

            100                 105                 110

Asn Gly Arg Leu Pro Lys Glu Ser Phe Gly Lys Cys Ile Gly Met Gly

        115                 120                 125

Asp Ser Lys Glu Phe Ala Gly Glu Leu Phe Val Ala Leu Ala Arg Arg

    130                 135                 140

Arg Asn Leu Glu Pro Glu Asp Gly Ile Thr Lys Glu Gln Leu Lys Glu

145                 150                 155                 160

Phe Trp Glu Glu Met Thr Asp Gln Asn Phe Asp Ser Arg Leu Arg Ile

                165                 170                 175

Phe Phe Asp Met Cys Asp Lys Asn Gly Asp Gly Met Leu Thr Glu Asp

            180                 185                 190

Glu Val Lys Glu Val Ile Ile Leu Ser Ala Ser Ala Asn Lys Leu Ala

        195                 200                 205

Lys Leu Lys Gly His Ala Ala Thr Tyr Ala Ser Leu Ile Met Glu Glu

    210                 215                 220

Leu Asp Pro Asp Asp Arg Gly Tyr Ile Glu Ile Trp Gln Leu Glu Thr

225                 230                 235                 240

Leu Leu Arg Gly Met Val Ser Ala Gln Ala Ala Pro Glu Lys Met Lys

                245                 250                 255

Arg Thr Thr Ser Ser Leu Ala Arg Thr Met Ile Pro Ser Arg Tyr Arg

            260                 265                 270

Ser Pro Leu Lys Arg His Val Ser Arg Thr Val Asp Phe Val His Glu

        275                 280                 285

Asn Trp Lys Arg Ile Trp Leu Val Ala Leu Trp Leu Ala Val Asn Val

    290                 295                 300

Gly Leu Phe Ala Tyr Lys Phe Glu Gln Tyr Glu Arg Arg Ala Ala Phe

305                 310                 315                 320

Gln Val Met Gly His Cys Val Cys Val Ala Lys Gly Ala Ala Glu Val

                325                 330                 335

Leu Lys Leu Asn Met Ala Leu Ile Leu Leu Pro Val Cys Arg Asn Thr

            340                 345                 350

Leu Thr Thr Leu Arg Ser Thr Ala Leu Ser His Val Ile Pro Phe Asp

        355                 360                 365

Asp Asn Ile Asn Phe His Lys Val Ile Ala Ala Thr Ile Ala Ala Ala

    370                 375                 380

Thr Ala Val His Thr Leu Ala His Val Thr Cys Asp Phe Pro Arg Leu

385                 390                 395                 400

Ile Asn Cys Pro Ser Asp Lys Phe Met Ala Thr Leu Gly Pro Asn Phe

                405                 410                 415

Gly Tyr Arg Gln Pro Thr Tyr Ala Asp Leu Leu Glu Ser Ala Pro Gly

            420                 425                 430

Val Thr Gly Ile Leu Met Ile Ile Ile Met Ser Phe Ser Phe Thr Leu

        435                 440                 445

Ala Thr His Ser Phe Arg Arg Ser Val Val Lys Leu Pro Ser Pro Leu

    450                 455                 460

His His Leu Ala Gly Phe Asn Ala Phe Trp Tyr Ala His His Leu Leu

465                 470                 475                 480

Val Leu Ala Tyr Val Leu Leu Val Val His Ser Tyr Phe Ile Phe Leu

                 485                490                 495

Thr Arg Glu Trp Tyr Lys Lys Thr Thr Trp Met Tyr Leu Ile Val Pro

            500                 505                 510

Val Leu Phe Tyr Ala Cys Glu Arg Thr Ile Arg Lys Val Arg Glu Asn

        515                 520                 525

Asn Tyr Arg Val Ser Ile Val Lys Ala Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Val

    530                 535                 540

Leu Ser Leu His Met Lys Lys Pro Pro Gly Phe Lys Tyr Lys Ser Gly

545                 550                 555                 560

Met Tyr Leu Phe Val Lys Cys Pro Asp Val Ser Pro Phe Glu Trp His

                565                 570                 575

Pro Phe Ser Ile Thr Ser Ala Pro Gly Asp Asp Tyr Leu Ser Val His

            580                 585                 590

Ile Arg Thr Leu Gly Asp Trp Thr Thr Glu Leu Arg Asn Leu Phe Gly

        595                 600                 605

Lys Ala Cys Glu Ala Gln Val Thr Ser Lys Lys Ala Thr Leu Ser Arg

    610                 615                 620

Leu Glu Thr Thr Val Val Ala Asp Ala Gln Thr Glu Asp Thr Arg Phe

625                 630                 635                 640

Pro Lys Val Leu Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gln Asn Tyr

                645                 650                 655

Lys Lys Tyr Asp Ile Leu Leu Leu Ile Gly Leu Gly Ile Gly Ala Thr

            660                 665                 670

Pro Phe Ile Ser Ile Leu Lys Asp Leu Leu Asn Asn Ile Lys Ser Asn

       675                  680                 685

Glu Glu Val Glu Ser Ile His Gly Ser Glu Ile Gly Ser Phe Lys Asn

    690                 695                 700

Asn Gly Pro Gly Arg Ala Tyr Phe Tyr Trp Val Thr Arg Glu Gln Gly

705                 710                 715                 720

Ser Phe Glu Trp Phe Lys Gly Val Met Asn Asp Val Ala Glu Ser Asp

                725                 730                 735

His Asn Asn Ile Ile Glu Met His Asn Tyr Leu Thr Ser Val Tyr Glu

            740                 745                 750

Glu Gly Asp Ala Arg Ser Ala Leu Ile Ala Met Val Gln Ser Leu Gln

        755                 760                 765

His Ala Lys Asn Gly Val Asp Ile Val Ser Gly Ser Arg Ile Arg Thr

    770                 775                 780

His Phe Ala Arg Pro Asn Trp Arg Lys Val Phe Ser Asp Leu Ala Asn

785                 790                 795                800

Ala His Lys Asn Ser Arg Ile Gly Val Phe Tyr Cys Gly Ser Pro Thr

                805                 810                 815

Leu Thr Lys Gln Leu Lys Asp Leu Ser Lys Glu Phe Ser Gln Thr Thr

            820                 825                 830

Thr Thr Arg Phe His Phe His Lys Glu Asn Phe

        835                 840

<210>19

<21l>2604

<212>DNA

<213>拟南芥菜

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(2601)

<223>编码NADPH氧化酶

<400>19

atg tct aga gtg agt ttt gaa gtg tca gga ggc tat cac tct gat gca   48

Met Ser Arg Val Ser Phe Glu Val Ser Gly Gly Tyr His Ser Asp Ala

  1               5                  10                  15

gaa gcc gga aac agc gga cca atg agc ggt ggt caa tta cca ccg atc   96

Glu Ala Gly Asn Ser Gly Pro Met Ser Gly Gly Gln Leu Pro Pro Ile

             20                  25                  30

tat aaa aaa ccg ggg aac tcc aga ttc act gct gag aac agt cag aga   144

Tyr Lys Lys Pro Gly Asn Ser Arg Phe Thr Ala Glu Asn Ser Gln Arg

         35                  40                  45

aca cgt acg gca cca tac gtg gac ctc acg gta gat gta caa gac gat   192

Thr Arg Thr Ala Pro Tyr Val Asp Leu Thr Val Asp Val Gln Asp Asp

     50                  55                  60

aca gtc tct gta cat agc ttg aaa atg gaa ggt gga tct agc gtt gaa   240

Thr Val Ser Val His Ser Leu Lys Met Glu Gly Gly Ser Ser Val Glu

 65                  70                  75                  80

gag agt ccg gag ctt act ttg ctg aaa cga aac cgt ctt gag aag aaa   288

Glu Ser Pro Glu Leu Thr Leu Leu Lys Arg Asn Arg Leu Glu Lys Lys

                 85                  90                  95

aca acg gtg gtg aaa cgt ttg gcg tct gtt tct cac gag ctt aag cgt   336

Thr Thr Val Val Lys Arg Leu Ala Ser Val Ser His Glu Leu Lys Arg

            100                 105                 110

ttg aca tct gtt tct ggt ggt att ggt gga aga aag ccg cct cga ccg   384

Leu Thr Ser Val Ser Gly Gly Ile Gly Gly Arg Lys Pro Pro Arg Pro

        115                 120                 125

gct aag tta gac cgg act aaa tcc gcc gcg agt caa gcg ttg aag gga   432

Ala Lys Leu Asp Arg Thr Lys Ser Ala Ala Ser Gln Ala Leu Lys Gly

    130                 135                 140

ctt aag ttc att agt aaa acc gac ggt ggc gcc ggt tgg tct gcc gtg   480

Leu Lys Phe Ile Ser Lys Thr Asp Gly Gly Ala Gly Trp Ser Ala Val

145                 150                 155                 160

gag aag cgg ttt aat cag att acc gcg act acc ggt gga cta ctt ctt   528

Glu Lys Arg Phe Asn Gln Ile Thr Ala Thr Thr Gly Gly Leu Leu Leu

                165                 170                 175

cgg aca aag ttc ggt gaa tgc ata gga atg act tca aag gat ttt gct   576

Arg Thr Lys Phe Gly Glu Cys Ile Gly Met Thr Ser Lys Asp Phe Ala

            180                 185                 190

ttg gaa ctg ttt gat gca ttg gct aga aga agg aat ata aca ggg gaa   624

Leu Glu Leu Phe Asp Ala Leu Ala Arg Arg Arg Asn Ile Thr Gly Glu

        195                 200                 205

gtg att gat gga gat caa cta aag gag ttt tgg gaa caa att aat gat   672

Val Ile Asp Gly Asp Gln Leu Lys Glu Phe Trp Glu Gln Ile Asn Asp

    210                 215                 220

caa agt ttt gat tct cgg ctt aag aca ttc ttt gac atg gtg gat aaa   720

Gln Ser Phe Asp Ser Arg Leu Lys Thr Phe Phe Asp Met Val Asp Lys

225                 230                 235                 240

gat gct gat ggt aga ctt aca gaa gac gaa gtt aga gag ttg gag agt   768

Asp Ala Asp Gly Arg Leu Thr Glu Asp Glu Val Arg Glu Leu Glu Ser

                245                 250                 255

ctt gag act ctg ctt ttg caa gcg gca aca cag tct gtg ata aca agt   816

Leu Glu Thr Leu Leu Leu Gln Ala Ala Thr Gln Ser Val Ile Thr Ser

            260                 265                 270

act ggg gag aga aag aat ctg agt cat atg atg agt cag agg ctt aag   864

Thr Gly Glu Arg Lys Asn Leu Ser His Met Met Ser Gln Arg Leu Lys

        275                 280                 285

cct acg ttt aac cgc aac ccg ttg aag cga tgg tac cgt ggt ctt aga   912

Pro Thr Phe Asn Arg Asn Pro Leu Lys Arg Trp Tyr Arg Gly Leu Arg

    290                 295                 300

ttc ttc ttg tta gac aac tgg caa aga tgt tgg gtt ata gtg cta tgg   960

Phe Phe Leu Leu Asp Asn Trp Gln Arg Cys Trp Val Ile Val Leu Trp

305                 310                 315                 320

ttc ata gtt atg gct ata ctc ttc acc tac aaa tat atc caa tac agg   1008

Phe Ile Val Met Ala Ile Leu Phe Thr Tyr Lys Tyr Ile Gln Tyr Arg

                325                 330                 335

cgt agc cct gtg tat cca gtg atg ggt gat tgt gtg tgc atg gct aaa   1056

Arg Ser Pro Val Tyr Pro Val Met Gly Asp Cys Val Cys Met Ala Lys

            340                 345                 350

ggt gct gca gaa aca gtg aag ctg aac atg gct ttg att ctc tta cct   1104

Gly Ala Ala Glu Thr Val Lys Leu Asn Met Ala Leu Ile Leu Leu Pro

        355                 360                 365

gtt tgt aga aac acc atc aca tgg ctt aga aat aag acc agg ttg ggt   1152

Val Cys Arg Asn Thr Ile Thr Trp Leu Arg Asn Lys Thr Arg Leu Gly

    370                 375                 380

cgt gtt gtc cca ttt gat gac aat ctc aac ttc cac aag gtt ata gcg   1200

Arg Val Val Pro Phe Asp Asp Asn Leu Asn Phe His Lys Val Ile Ala

385                 390                 395                 400

gtg ggg att ata gtt gga gta acg atg cac gcc ggg gca cat tta gcg   1248

Val Gly Ile Ile Val Gly Val Thr Met His Ala Gly Ala His Leu Ala

                405                 410                 415

tgt gat ttc ccg cgg tta cta cat gca act cca gag gca tat agg cct   1296

Cys Asp Phe Pro Arg Leu Leu His Ala Thr Pro Glu Ala Tyr Arg Pro

            420                 425                 430

tta aga cag ttt ttt ggg gat gag caa cca aag agc tac tgg cat ttt   1344

Leu Arg Gln Phe Phe Gly Asp Glu Gln Pro Lys Ser Tyr Trp His Phe

        435                 440                 445

gta aac tcg gta gaa ggt ata acc gga ctt gtg atg gtt ttg tta atg   1392

Val Asn Ser Val Glu Gly Ile Thr Gly Leu Val Met Val Leu Leu Met

    450                 455                 460

gcg att gca ttc aca cta gcc acg cct tgg ttc aga aga ggg aag cta   1440

Ala Ile Ala Phe Thr Leu Ala Thr Pro Trp Phe Arg Arg Gly Lys Leu

465                 470                 475                 480

aac tat ctt cca gga cca tta aag aaa cta gct agc ttc aat gcc ttc   1488

Asn Tyr Leu Pro Gly Pro Leu Lys Lys Leu Ala Ser Phe Asn Ala Phe

                485                 490                 495

tgg tac act cat cat ttg ttt gtc ata gtc tac att ctt ctt gtt gct   1536

Trp Tyr Thr His His Leu Phe Val Ile Val Tyr Ile Leu Leu Val Ala

            500                 505                 510

cat gga tac tac ttg tat ctc acc aga gac tgg cac aat aaa acg act   1584

His Gly Tyr Tyr Leu Tyr Leu Thr Arg Asp Trp His Asn Lys Thr Thr

        515                 520                 525

tgg atg tat ttg gtg gta cca gtg gtt cta tac gcg tgt gaa agg ttg   1632

Trp Met Tyr Leu Val Val Pro Val Val Leu Tyr Ala Cys Glu Arg Leu

    530                 535                 540

ata aga gca ttc agg tcg agc atc aag gcg gtg act att agg aaa gta   1680

Ile Arg Ala Phe Arg Ser Ser Ile Lys Ala Val Thr Ile Arg Lys Val

545                 550                 555                 560

gca gtt tat cca gga aac gtg ctg gca att cac ttg tca agg cct caa   1728

Ala Val Tyr Pro Gly Asn Val Leu Ala Ile His Leu Ser Arg Pro Gln

                565                 570                 575

aac ttc aaa tac aag agt ggt caa tac atg ttt gtt aac tgt gct gct   1776

Asn Phe Lys Tyr Lys Ser Gly Gln Tyr Met Phe Val Asn Cys Ala Ala

            580                 585                 590

gtt tct cca ttt gaa tgg cat cca ttt tca atc aca tct gca cca caa   1824

Val Ser Pro Phe Glu Trp His Pro Phe Ser Ile Thr Ser Ala Pro Gln

        595                 600                 605

gat gat tac cta agt gtt cac att aga gtt ctt ggg gat tgg aca cga   1872

Asp Asp Tyr Leu Ser Val His Ile Arg Val Leu Gly Asp Trp Thr Arg

    610                 615                 620

gct ctc aaa gga gtc ttc tct gag gtg tgt aag cca cca ccg gca gga   1920

Ala Leu Lys Gly Val Phe Ser Glu Val Cys Lys Pro Pro Pro Ala Gly

625                 630                 635                 640

gtt agt ggt ctg ctt aga gcc gac atg ttg cat ggt gca aat aat ccc   1968

Val Ser Gly Leu Leu Arg Ala Asp Met Leu His Gly Ala Asn Asn Pro

                645                 650                 655

gac ttc ccg aaa gtc ttg att gat ggt cca tat ggt gca cca gca caa   2016

Asp Phe Pro Lys Val Leu Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gln

            660                 665                 670

gac tac aag aag tac gag gtg gtt cta cta gtt ggt ctc ggg att gga   2064

Asp Tyr Lys Lys Tyr Glu Val Val Leu Leu Val Gly Leu Gly Ile Gly

        675                 680                 685

gcc aca cca atg atc agt atc gtc aaa gac att gtt aat aac atc aag   2112

Ala Thr Pro Met Ile Ser Ile Val Lys Asp Ile Val Asn Asn Ile Lys

    690                 695                 700

gcc aag gaa caa gcc caa cta aac cga atg gag aat gga aca agc gaa   2160

Ala Lys Glu Gln Ala Gln Leu Asn Arg Met Glu Asn Gly Thr Ser Glu

705                 710                 715                 720

cca caa cga agt aag aaa gag agt ttc agg acc cgt aga gct tac ttc   2208

Pro Gln Arg Ser Lys Lys Glu Ser Phe Arg Thr Arg Arg Ala Tyr Phe

                725                 730                 735

tat tgg gtt acg cgt gag caa ggc tct ttc gat tgg ttc aag aac ata   2256

Tyr Trp Val Thr Arg Glu Gln Gly Ser Phe Asp Trp Phe Lys Asn Ile

            740                 745                 750

atg aac gaa gtc gcg gaa cga gat gcc aac cgc gtc atc gaa atg cat   2304

Met Asn Glu Val Ala Glu Arg Asp Ala Asn Arg Val Ile Glu Met His

        755                 760                 765

aac tat tgt aca agt gtc tat gaa gaa ggt gac gct cgt tcc gca ctt   2352

Asn Tyr Cys Thr Ser Val Tyr Glu Glu Gly Asp Ala Arg Ser Ala Leu

    770                 775                 780

ata cat atg ctt caa tca cta aac cat gca aag aac ggc gtc gac att   2400

Ile His Met Leu Gln Ser Leu Asn His Ala Lys Asn Gly Val Asp Ile

785                 790                 795                 800

gtc tct gga aca aga gtt atg tcc cat ttc gct aaa cct aat tgg aga   2448

Val Ser Gly Thr Arg Val Met Ser His Phe Ala Lys Pro Asn Trp Arg

                805                 810                 815

aat gtt tac aag cgt ata gct atg gat cat cct aac acc aaa gtt gga   2496

Asn Val Tyr Lys Arg Ile Ala Met Asp His Pro Asn Thr Lys Val Gly

            820                 825                 830

gtg ttt tac tgt gga gca cca gca ttg aca aag gag cra agg cat cta   2544

Val Phe Tyr Cys Gly Ala Pro Ala Leu Thr Lys Glu Leu Arg His Leu

        835                 840                 845

gct tta gat ttc acc cac aaa aca agc acc aga ttc tcc ttc cac aaa   2592

Ala Leu Asp Phe Thr His Lys Thr Ser Thr Arg Phe Ser Phe His Lys

    850                 855                 860

gag aat ttc taa                                                   2604

Glu Asn Phe

865

<210>20

<211>867

<212>PRT

<213>拟南芥菜

<400>20

Met Ser Arg Val Ser Phe Glu Val Ser Gly Gly Tyr His Ser Asp Ala

  1               5                  10                  15

Glu Ala Gly Asn Ser Gly Pro Met Ser Gly Gly Gln Leu Pro Pro Ile

             20                  25                  30

Tyr Lys Lys Pro Gly Asn Ser Arg Phe Thr Ala Glu Asn Ser Gln Arg

         35                  40                  45

Thr Arg Thr Ala Pro Tyr Val Asp Leu Thr Val Asp Val Gln Asp Asp

     50                  55                  60

Thr Val Ser Val His Ser Leu Lys Met Glu Gly Gly Ser Ser Val Glu

 65                  70                  75                  80

Glu Ser Pro Glu Leu Thr Leu Leu Lys Arg Asn Arg Leu Glu Lys Lys

                 85                  90                  95

Thr Thr Val Val Lys Arg Leu Ala Ser Val Ser His Glu Leu Lys Arg

            100                 105                 110

Leu Thr Ser Val Ser Gly Gly Ile Gly Gly Arg Lys Pro Pro Arg Pro

        115                 120                 125

Ala Lys Leu Asp Arg Thr Lys Ser Ala Ala Ser Gln Ala Leu Lys Gly

    130                 135                 140

Leu Lys Phe Ile Ser Lys Thr Asp Gly Gly Ala Gly Trp Ser Ala Val

145                150                  155                 160

Glu Lys Arg Phe Asn Gln Ile Thr Ala Thr Thr Gly Gly Leu Leu Leu

                165                 170                 175

Arg Thr Lys Phe Gly Glu Cys Ile Gly Met Thr Ser Lys Asp Phe Ala

            180                 185                 190

Leu Glu Leu Phe Asp Ala Leu Ala Arg Arg Arg Asn Ile Thr Gly Glu

        195                 200                  205

Val Ile Asp Gly Asp Gln Leu Lys Glu Phe Trp Glu Gln Ile Asn Asp

    210                 215                 220

Gln Ser Phe Asp Ser Arg Leu Lys Thr Phe Phe Asp Met Val Asp Lys

225                 230                 235                 240

Asp Ala Asp Gly Arg Leu Thr Glu Asp Glu Val Arg Glu Leu Glu Ser

                245                 250                 255

Leu Glu Thr Leu Leu Leu Gln Ala Ala Thr Gln Ser Val Ile Thr Ser

            260                 265                 270

Thr Gly Glu Arg Lys Asn Leu Ser His Met Met Ser Gln Arg Leu Lys

        275                 280                 285

Pro Thr Phe Asn Arg Asn Pro Leu Lys Arg Trp Tyr Arg Gly Leu Arg

    290                 295                 300

Phe Phe Leu Leu Asp Asn Trp Gln Arg Cys Trp Val Ile Val Leu Trp

305                 310                 315                 320

Phe Ile Val Met Ala Ile Leu Phe Thr Tyr Lys Tyr Ile Gln Tyr Arg

                325                 330                 335

Arg Ser Pro Val Tyr Pro Val Met Gly Asp Cys Val Cys Met Ala Lys

            340                 345                 350

Gly Ala Ala Glu Thr Val Lys Leu Asn Met Ala Leu Ile Leu Leu Pro

        355                 360                 365

Val Cys Arg Asn Thr Ile Thr Trp Leu Arg Asn Lys Thr Arg Leu Gly

    370                 375                 380

Arg Val Val Pro Phe Asp Asp Asn Leu Asn Phe His Lys Val Ile Ala

385                 390                 395                 400

Val Gly Ile Ile Val Gly Val Thr Met His Ala Gly Ala His Leu Ala

                405                 410                 415

Cys Asp Phe Pro Arg Leu Leu His Ala Thr Pro Glu Ala Tyr Arg Pro

            420                 425                 430

Leu Arg Gln Phe Phe Gly Asp Glu Gln Pro Lys Ser Tyr Trp His Phe

        435                 440                 445

Val Asn Ser Val Glu Gly Ile Thr Gly Leu Val Met Val Leu Leu Met

   450                  455                 460

Ala Ile Ala Phe Thr Leu Ala Thr Pro Trp Phe Arg Arg Gly Lys Leu

465                 470                 475                 480

Asn Tyr Leu Pro Gly Pro Leu Lys Lys Leu Ala Ser Phe Asn Ala Phe

                485                 490                 495

Trp Tyr Thr His His Leu Phe Val Ile Val Tyr Ile Leu Leu Val Ala

            500                 505                 510

His Gly Tyr Tyr Leu Tyr Leu Thr Arg Asp Trp His Asn Lys Thr Thr

        515                 520                 525

Trp Met Tyr Leu Val Val Pro Val Val Leu Tyr Ala Cys Glu Arg Leu

    530                 535                 540

Ile Arg Ala Phe Arg Ser Ser Ile Lys Ala Val Thr Ile Arg Lys Val

545                 550                 555                 560

Ala Val Tyr Pro Gly Asn Val Leu Ala Ile His Leu Ser Arg Pro Gln

                565                 570                 575

Asn Phe Lys Tyr Lys Ser Gly Gln Tyr Met Phe Val Asn Cys Ala Ala

            580                 585                 590

Val Ser Pro Phe Glu Trp His Pro Phe Ser Ile Thr Ser Ala Pro Gln

        595                 600                 605

Asp Asp Tyr Leu Ser Val His Ile Arg Val Leu Gly Asp Trp Thr Arg

    610                 615                 620

Ala Leu Lys Gly Val Phe Ser Glu Val Cys Lys Pro Pro Pro Ala Gly

625                 630                 635                 640

Val Ser Gly Leu Leu Arg Ala Asp Met Leu His Gly Ala Asn Asn Pro

                645                 650                 655

Asp Phe Pro Lys Val Leu Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gln

            660                 665                 670

Asp Tyr Lys Lys Tyr Glu Val Val Leu Leu Val Gly Leu Gly Ile Gly

        675                 680                 685

Ala Thr Pro Met Ile Ser Ile Val Lys Asp Ile Val Asn Asn Ile Lys

    690                 695                 700

Ala Lys Glu Gln Ala Gln Leu Asn Arg Met Glu Asn Gly Thr Ser Glu

705                 710                 715                 720

Pro Gln Arg Ser Lys Lys Glu Ser Phe Arg Thr Arg Arg Ala Tyr Phe

                725                 730                 735

Tyr Trp Val Thr Arg Glu Gln Gly Ser Phe Asp Trp Phe Lys Asn Ile

            740                 745                 750

Met Asn Glu Val Ala Glu Arg Asp Ala Asn Arg Val Ile Glu Met His

        755                 760                 765

Asn Tyr Cys Thr Ser Val Tyr Glu Glu Gly Asp Ala Arg Ser Ala Leu

    770                 775                 780

Ile His Met Leu Gln Ser Leu Asn His Ala Lys Asn Gly Val Asp Ile

785                 790                 795                 800

Val Ser Gly Thr Arg Val Met Ser His Phe Ala Lys Pro Asn Trp Arg

                805                 810                 815

Asn Val Tyr Lys Arg Ile Ala Met Asp His Pro Asn Thr Lys Val Gly

            820                 825                 830

Val Phe Tyr Cys Gly Ala Pro Ala Leu Thr Lys Glu Leu Arg His Leu

        835                 840                 845

Ala Leu Asp Phe Thr His Lys Thr Ser Thr Arg Phe Ser Phe His Lys

    850                 855                 860

Glu Asn Phe

865

<210>21

<211>2709

<212>DNA

<213>拟南芥菜

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(2706)

<223>编码NADPH氧化酶

<400>21

atg atg aat cga agt gaa atg caa aag tta ggt ttc gaa cac gtg aga   48

Met Met Asn Arg Ser Glu Met Gln Lys Leu Gly Phe Glu His Val Arg

  1               5                  10                  15

tac tac aca gag tcg ccg tac aac aga gga gag tcc tcg gcg aac gtg   96

Tyr Tyr Thr Glu Ser Pro Tyr Asn Arg Gly Glu Ser Ser Ala Asn Val

             20                  25                  30

gcg acg aca agc aac tat tac ggt gaa gat gaa cca tac gtg gag atc   144

Ala Thr Thr Ser Asn Tyr Tyr Gly Glu Asp Glu Pro Tyr Val Glu Ile

         35                  40                  45

acg cta gat atc cac gac gat tcc gtc tcc gtg tac ggc ttg aag tca   192

Thr Leu Asp Ile His Asp Asp Ser Val Ser Val Tyr Gly Leu Lys Ser

     50                  55                  60

ccg aac cat cga ggg gcc ggg tct aat tat gag gat caa tcg ctt ctc   240

Pro Asn His Arg Gly Ala Gly Ser Asn Tyr Glu Asp Gln Ser Leu Leu

 65                  70                  75                  80

aga caa ggt cgt tca ggg agg agt aac tcg gta ttg aaa cgc ttg gct   288

Arg Gln Gly Arg Ser Gly Arg Ser Asn Ser Val Leu Lys Arg Leu Ala

                 85                  90                  95

tct tct gtt tcc acc gga ata aca cga gtt gct tct tct gtt tct tcg   336

Ser Ser Val Ser Thr Gly Ile Thr Arg Val Ala Ser Ser Val Ser Ser

            100                 105                 110

tct tcc gcg aga aaa cca ccg cgg ccg cag ctg gct aag ctg cgc cgt   384

Ser Ser Ala Arg Lys Pro Pro Arg Pro Gln Leu Ala Lys Leu Arg Arg

        115                 120                 125

tcg aaa tct aga gca gag cta gct ctc aaa ggt ctt aaa ttc atc acc   432

Ser Lys Ser Arg Ala Glu Leu Ala Leu Lys Gly Leu Lys Phe Ile Thr

    130                 135                 140

aag act gat ggt gtc act ggt tgg cct gaa gtt gag aaa cgg ttt tat   480

Lys Thr Asp Gly Val Thr Gly Trp Pro Glu Val Glu Lys Arg Phe Tyr

145                 150                 155                 160

gtg atg aca atg act aat aac gga tta tta cac cga tcc aga ttc ggt   528

Val Met Thr Met Thr Asn Asn Gly Leu Leu His Arg Ser Arg Phe Gly

                165                 170                 175

gaa tgt ata ggg atg aaa tcg acg gag ttt gcg ttg gca ttg ttc gat   576

Glu Cys Ile Gly Met Lys Ser Thr Glu Phe Ala Leu Ala Leu Phe Asp

            180                 185                 190

gct tta gcg agg agg gaa aac gta agc gga gat tca ata aac atg aat   624

Ala Leu Ala Arg Arg Glu Asn Val Ser Gly Asp Ser Ile Asn Met Asn

        195                 200                 205

gag ctt aaa gag ttc tgg aag cag atc act gat caa gat ttt gat tca   672

Glu Leu Lys Glu Phe Trp Lys Gln Ile Thr Asp Gln Asp Phe Asp Ser

    210                 215                 220

agg cta cga act ttc ttc gcc atg gtc gat aag gat tcg gat ggg cgg   720

Arg Leu Arg Thr Phe Phe Ala Met Val Asp Lys Asp Ser Asp Gly Arg

225                 230                 235                 240

ttg aat gaa gcc gaa gta aga gag att ata act tta agt gct tct gca   768

Leu Asn Glu Ala Glu Val Arg Glu Ile Ile Thr Leu Ser Ala Ser Ala

                245                 250                 255

aac gag ttg gat aac att cgg aga caa gct gat gaa tat gct gct ttg   816

Asn Glu Leu Asp Asn Ile Arg Arg Gln Ala Asp Glu Tyr Ala Ala Leu

            260                 265                 270

att atg gaa gaa ctc gat cct tat cat tat gga tac atc atg ata gag   864

Ile Met Glu Glu Leu Asp Pro Tyr His Tyr Gly Tyr Ile Met Ile Glu

        275                 280                 285

aat ctc gag ata ctt cta ttg caa gcg ccg atg cag gat gtg aga gat   912

Asn Leu Glu Ile Leu Leu Leu Gln Ala Pro Met Gln Asp Val Arg Asp

    290                 295                 300

gga gag agt aag aag cta agc aag atg cta agt cag aat ctc atg gtt   960

Gly Glu Ser Lys Lys Leu Ser Lys Met Leu Ser Gln Asn Leu Met Val

305                 310                 315                 320

ccg cag agt agg aat ctc ggg gca cgt ttt tgc aga ggg atg aag tat   1008

Pro Gln Ser Arg Asn Leu Gly Ala Arg Phe Cys Arg Gly Met Lys Tyr

                325                 330                 335

ttt ttg ttt gat aat tgg aag aga gtg tgg gtg atg gct cta tgg ata   1056

Phe Leu Phe Asp Asn Trp Lys Arg Val Trp Val Met Ala Leu Trp Ile

            340                 345                 350

ggt gct atg gcg ggt ttg ttc acg tgg aag ttt atg gag tat cga aaa   1104

Gly Ala Met Ala Gly Leu Phe Thr Trp Lys Phe Met Glu Tyr Arg Lys

        355                 360                 365

aga tcc gct tac gaa gtc atg gga gtt tgt gtt tgt ata gct aaa gga   1152

Arg Ser Ala Tyr Glu Val Met Gly Val Cys Val Cys Ile Ala Lys Gly

    370                 375                 380

gct gca gag acg ctt aaa cta aac atg gct atg att ttg tta cca gtt   1200

Ala Ala Glu Thr Leu Lys Leu Asn Met Ala Met Ile Leu Leu Pro Val

385                 390                 395                 400

tgt agg aac acc atc act tgg ctg cgg acc aaa acc aag tta agt gct   1248

Cys Arg Asn Thr Ile Thr Trp Leu Arg Thr Lys Thr Lys Leu Ser Ala

                405                 410                 415

att gtt cct ttc gat gac agc ctc aat ttt cac aag gtc ata gct ata   1296

Ile Val Pro Phe Asp Asp Ser Leu Asn Phe His Lys Val Ile Ala Ile

            420                 425                 430

gga att tca gtt gga gtt gga atc cat gct aca tct cac tta gca tgt   1344

Gly Ile Ser Val Gly Val Gly Ile His Ala Thr Ser His Leu Ala Cys

        435                 440                 445

gat ttc ccc cga ctg ata gct gca gac gaa gat cag tat gag cca atg   1392

Asp Phe Pro Arg Leu Ile Ala Ala Asp Glu Asp Gln Tyr Glu Pro Met

    450                 455                 460

gag aag tat ttt ggg cca cag aca aag aga tat ttg gac ttt gtt caa   1440

Glu Lys Tyr Phe Gly Pro Gln Thr Lys Arg Tyr Leu Asp Phe Val Gln

465                 470                 475                 480

tcg gta gaa gga gtt acc ggg att gga atg gtt gta cta atg acc ata   1488

Ser Val Glu Gly Val Thr Gly Ile Gly Met Val Val Leu Met Thr Ile

                485                 490                 495

gcc ttt aca ttg gct aca aca tgg ttc aga cgt aat aag ctc aac ctt   1536

Ala Phe Thr Leu Ala Thr Thr Trp Phe Arg Arg Asn Lys Leu Asn Leu

            500                 505                 510

cct gga cca ctg aag aaa ata aca ggc ttc aat gcc ttc tgg tac tct   1584

Pro Gly Pro Leu Lys Lys Ile Thr Gly Phe Asn Ala Phe Trp Tyr Ser

        515                 520                 525

cac cac tta ttt gtt atc gtc tac tcg ctt ctt gtc gtt cat gga ttc   1632

His His Leu Phe Val Ile Val Tyr Ser Leu Leu Val Val His Gly Phe

    530                 535                 540

tac gta tac ctc atc atc gag cca tgg tac aag aaa acg aca tgg atg   1680

Tyr Val Tyr Leu Ile Ile Glu Pro Trp Tyr Lys Lys Thr Thr Trp Met

545                 550                 555                 560

tat ttg atg gta ccg gtg gtt ctt tac ttg tgt gaa agg ctg att cgt   1728

Tyr Leu Met Val Pro Val Val Leu Tyr Leu Cys Glu Arg Leu Ile Arg

                565                 570                 575

gca ttc agg tca agc gtc gag gct gtt tca gtg cta aag gtt gct gtg   1776

Ala Phe Arg Ser Ser Val Glu Ala Val Ser Val Leu Lys Val Ala Val

            580                 585                 590

tta cca ggg aat gtc ttg tcg ctt cac ttg tca aga cca agc aac ttc   1824

Leu Pro Gly Asn Val Leu Ser Leu His Leu Ser Arg Pro Ser Asn Phe

        595                 600                 605

aga tac aag agt gga caa tac atg tat ctc aac tgt tct gca gtt tct   1872

Arg Tyr Lys Ser Gly Gln Tyr Met Tyr Leu Asn Cys Ser Ala Val Ser

    610                 615                 620

aca tta gaa tgg cat cca ttc tca att acc tca gct cca gga gat gac   1920

Thr Leu Glu Trp His Pro Phe Ser Ile Thr Ser Ala Pro Gly Asp Asp

625                 630                 635                 640

tac ctc agt gtc cac atc agg gtt tta gga gac tgg act aag caa tta   1968

Tyr Leu Ser Val His Ile Arg Val Leu Gly Asp Trp Thr Lys Gln Leu

                645                 650                 655

aga tca tta ttc tct gag gtg tgc aag cca cgc cct cct gat gaa cac   2016

Arg Ser Leu Phe Ser Glu Val Cys Lys Pro Arg Pro Pro Asp Glu His

            660                 665                 670

aga ctg aac aga gcc gac tcg aag cac tgg gat tac atc cct gac ttt   2064

Arg Leu Asn Arg Ala Asp Ser Lys His Trp Asp Tyr Ile Pro Asp Phe

        675                 680                 685

cca aga atc cta att gat ggt cca tat gga gca cca gca caa gac tac   2112

Pro Arg Ile Leu Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gln Asp Tyr

    690                 695                 700

aag aag ttt gaa gtt gtt ctg cta gtg ggt cta gga atc ggt gcc act   2160

Lys Lys Phe Glu Val Val Leu Leu Val Gly Leu Gly Ile Gly Ala Thr

705                 710                 715                 720

ccg atg atc agc ata gtg agt gac ata atc aat aac ttg aaa ggc gtg   2208

Pro Met Ile Ser Ile Val Ser Asp Ile Ile Asn Asn Leu Lys Gly Val

                725                 730                 735

gaa gaa ggc agt aac cga aga cag tca ccg atc cat aat atg gtc aca   2256

Glu Glu Gly Ser Asn Arg Arg Gln Ser Pro Ile His Asn Met Val Thr

            740                 745                 750

cct cct gtt tct cca tca aga aaa agt gag acg ttc aga acc aag aga   2304

Pro Pro Val Ser Pro Ser Arg Lys Ser Glu Thr Phe Arg Thr Lys Arg

        755                 760                 765

gct tac ttc tac tgg gtc aca aga gag cag ggg tcg ttt gac tgg ttc   2352

Ala Tyr Phe Tyr Trp Val Thr Arg Glu Gln Gly Ser Phe Asp Trp Phe

    770                 775                 780

aag aac gtg atg gac gaa gtg act gaa aca gac cgc aaa aac gta att   2400

Lys Asn Val Met Asp Glu Val Thr Glu Thr Asp Arg Lys Asn Val Ile

785                 790                 795                 800

gag ctg cat aat tac tgc acc agc gtt tac gag gaa ggg gac gcg agg   2448

Glu Leu His Asn Tyr Cys Thr Ser Val Tyr Glu Glu Gly Asp Ala Arg

                805                 810                 815

tct gca ctt atc acg atg ctc cag tct cta aac cat gct aag cat gga   2496

Ser Ala Leu Ile Thr Met Leu Gln Ser Leu Asn His Ala Lys His Gly

            820                 825                 830

gtg gac gtt gtg tca gga aca cgt gtc atg tcc cat ttc gct agg cca   2544

Val Asp Val Val Ser Gly Thr Arg Val Met Ser His Phe Ala Arg Pro

        835                 840                 845

aac tgg aga agc gtt ttc aaa agg atc gct gtg aat cat cct aag act   2592

Asn Trp Arg Ser Val Phe Lys Arg Ile Ala Val Asn His Pro Lys Thr

    850                 855                 860

aga gtc gga gtg ttt tat tgt gga gca gct ggg tta gtg aaa gag tta   2640

Arg Val Gly Val Phe Tyr Cys Gly Ala Ala Gly Leu Val Lys Glu Leu

865                 870                 875                 880

cga cac tta tca ctg gat ttc tct cat aag acc tcc acc aag ttc atc   2688

Arg His Leu Ser Leu Asp Phe Ser His Lys Thr Ser Thr Lys Phe Ile

                885                 890                 895

ttc cat aaa gag aat ttc taa                                       2709

Phe His Lys Glu Asn Phe

            900

<210>22

<211>902

<212>PRT

<213>拟南芥菜

<400>22

Met Met Asn Arg Ser Glu Met Gln Lys Leu Gly Phe Glu His Val Arg

  1               5                  10                  15

Tyr Tyr Thr Glu Ser Pro Tyr Asn Arg Gly Glu Ser Ser Ala Asn Val

             20                  25                  30

Ala Thr Thr Ser Asn Tyr Tyr Gly Glu Asp Glu Pro Tyr Val Glu Ile

         35                  40                  45

Thr Leu Asp Ile His Asp Asp Ser Val Ser Val Tyr Gly Leu Lys Ser

     50                  55                  60

Pro Asn His Arg Gly Ala Gly Ser Asn Tyr Glu Asp Gln Ser Leu Leu

 65                  70                  75                  80

Arg Gln Gly Arg Ser Gly Arg Ser Asn Ser Val Leu Lys Arg Leu Ala

                 85                  90                  95

Ser Ser Val Ser Thr Gly Ile Thr Arg Val Ala Ser Ser Val Ser Ser

            100                 105                 110

Ser Ser Ala Arg Lys Pro Pro Arg Pro Gln Leu Ala Lys Leu Arg Arg

        115                 120                 125

Ser Lys Ser Arg Ala Glu Leu Ala Leu Lys Gly Leu Lys Phe Ile Thr

    130                 135                 140

Lys Thr Asp Gly Val Thr Gly Trp Pro Glu Val Glu Lys Arg Phe Tyr

145                 150                 155                 160

Val Met Thr Met Thr Asn Asn Gly Leu Leu His Arg Ser Arg Phe Gly

                165                 170                 175

Glu Cys Ile Gly Met Lys Ser Thr Glu Phe Ala Leu Ala Leu Phe Asp

            180                 185                 190

Ala Leu Ala Arg Arg Glu Asn Val Ser Gly Asp Ser Ile Asn Met Asn

        195                 200                 205

Glu Leu Lys Glu Phe Trp Lys Gln Ile Thr Asp Gln Asp Phe Asp Ser

    210                 215                 220

Arg Leu Arg Thr Phe Phe Ala Met Val Asp Lys Asp Ser Asp Gly Arg

225                 230                 235                 240

Leu Asn Glu Ala Glu Val Arg Glu Ile Ile Thr Leu Ser Ala Ser Ala

                245                 250                 255

Asn Glu Leu Asp Asn Ile Arg Arg Gln Ala Asp Glu Tyr Ala Ala Leu

            260                 265                 270

Ile Met Glu Glu Leu Asp Pro Tyr His Tyr Gly Tyr Ile Met Ile Glu

        275                 280                 285

Asn Leu Glu Ile Leu Leu Leu Gln Ala Pro Met Gln Asp Val Arg Asp

    290                 295                 300

Gly Glu Ser Lys Lys Leu Ser Lys Met Leu Ser Gln Asn Leu Met Val

305                 310                 315                 320

Pro Gln Ser Arg Asn Leu Gly Ala Arg Phe Cys Arg Gly Met Lys Tyr

                325                 330                 335

Phe Leu Phe Asp Asn Trp Lys Arg Val Trp Val Met Ala Leu Trp Ile

            340                 345                 350

Gly Ala Met Ala Gly Leu Phe Thr Trp Lys Phe Met Glu Tyr Arg Lys

        355                 360                 365

Arg Ser Ala Tyr Glu Val Met Gly Val Cys Val Cys Ile Ala Lys Gly

    370                 375                 380

Ala Ala Glu Thr Leu Lys Leu Asn Met Ala Met Ile Leu Leu Pro Val

385                 390                 395                 400

Cys Arg Asn Thr Ile Thr Trp Leu Arg Thr Lys Thr Lys Leu Ser Ala

                405                 410                 415

Ile Val Pro Phe Asp Asp Ser Leu Asn Phe His Lys Val Ile Ala Ile

            420                 425                 430

Gly Ile Ser Val Gly Val Gly Ile His Ala Thr Ser His Leu Ala Cys

        435                 440                 445

Asp Phe Pro Arg Leu Ile Ala Ala Asp Glu Asp Gln Tyr Glu Pro Met

    450                 455                 460

Glu Lys Tyr Phe Gly Pro Gln Thr Lys Arg Tyr Leu Asp Phe Val Gln

465                 470                 475                 480

Ser Val Glu Gly Val Thr Gly Ile Gly Met Val Val Leu Met Thr Ile

                485                 490                 495

Ala Phe Thr Leu Ala Thr Thr Trp Phe Arg Arg Asn Lys Leu Asn Leu

            500                 505                 510

Pro Gly Pro Leu Lys Lys Ile Thr Gly Phe Asn Ala Phe Trp Tyr Ser

        515                 520                 525

His His Leu Phe Val Ile Val Tyr Ser Leu Leu Val Val His Gly Phe

    530                 535                 540

Tyr Val Tyr Leu Ile Ile Glu Pro Trp Tyr Lys Lys Thr Thr Trp Met

545                 550                 555                 560

Tyr Leu Met Val Pro Val Val Leu Tyr Leu Cys Glu Arg Leu Ile Arg

                565                 570                 575

Ala Phe Arg Ser Ser Val Glu Ala Val Ser Val Leu Lys Val Ala Val

            580                 585                 590

Leu Pro Gly Asn Val Leu Ser Leu His Leu Ser Arg Pro Ser Asn Phe

        595                 600                 605

Arg Tyr Lys Ser Gly Gln Tyr Met Tyr Leu Asn Cys Ser Ala Val Ser

    610                 615                 620

Thr Leu Glu Trp His Pro Phe Ser Ile Thr Ser Ala Pro Gly Asp Asp

625                 630                 635                 640

Tyr Leu Ser Val His Ile Arg Val Leu Gly Asp Trp Thr Lys Gln Leu

                645                 650                 655

Arg Ser Leu Phe Ser Glu Val Cys Lys Pro Arg Pro Pro Asp Glu His

            660                 665                 670

Arg Leu Asn Arg Ala Asp Ser Lys His Trp Asp Tyr Ile Pro Asp Phe

        675                 680                 685

Pro Arg Ile Leu Ile Asp Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gln Asp Tyr

    690                 695                 700

Lys Lys Phe Glu Val Val Leu Leu Val Gly Leu Gly Ile Gly Ala Thr

705                 710                 715                 720

Pro Met Ile Ser Ile Val Ser Asp Ile Ile Asn Asn Leu Lys Gly Val

                725                 730                 735

Glu Glu Gly Ser Asn Arg Arg Gln Ser Pro Ile His Asn Met Val Thr

            740                 745                 750

Pro Pro Val Ser Pro Ser Arg Lys Ser Glu Thr Phe Arg Thr Lys Arg

        755                 760                 765

Ala Tyr Phe Tyr Trp Val Thr Arg Glu Gln Gly Ser Phe Asp Trp Phe

    770                 775                 780

Lys Asn Val Met Asp Glu Val Thr Glu Thr Asp Arg Lys Asn Val Ile

785                 790                 795                 800

Glu Leu His Asn Tyr Cys Thr Ser Val Tyr Glu Glu Gly Asp Ala Arg

                805                 810                 815

Ser Ala Leu Ile Thr Met Leu Gln Ser Leu Asn His Ala Lys His Gly

            820                 825                 830

Val Asp Val Val Ser Gly Thr Arg Val Met Ser His Phe Ala Arg Pro

        835                 840                 845

Asn Trp Arg Ser Val Phe Lys Arg Ile Ala Val Asn His Pro Lys Thr

    850                 855                 860

Arg Val Gly Val Phe Tyr Cys Gly Ala Ala Gly Leu Val Lys Glu Leu

865                 870                 875                 880

Arg His Leu Ser Leu Asp Phe Ser His Lys Thr Ser Thr Lys Phe Ile

                885                 890                 895

Phe His Lys Glu Asn Phe

            900

<210>23

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>人工序列的描述：寡核苷酸引物

<400>23

garcaaggct cttttgattg                                                  20

<210>24

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>人工序列的描述：寡核苷酸引物

<400>24

gaaatgctcc ttatggaatt c                                                21

Claims (20)

1.在植物中用于产生或增强对至少一种病原体的抗性的方法，所述方法包括实施以下步骤：

a)降低植物或其组织、器官、部分或细胞中NADPH氧化酶的蛋白质量、活性或功能，及

b)与起始植物相反或相比较，选择其中对至少一种病原体存在抗性或抗性增强的植物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中NADPH氧化酶由以下序列编码：

a)包含如在SEQ ID NO：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20或22中所示序列的多肽序列，或

b)包含如在SEQ ID NO：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20或22中所示序列的多肽功能等同物的多肽序列。

3.根据权利要求2所述的方法，其中功能等同物与如在SEQ ID NO：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20或22中所示多肽之一具有至少50％的同源性。

4.根据权利要求1至3中任意一项所述的方法，其中NADPH氧化酶蛋白质量、活性或功能的降低通过应用选自以下的方法进行确保：

a)导入双链NADPH氧化酶RNA核酸序列或确保其表达的表达盒，

b)导入NADPH氧化酶反义核酸序列或确保其表达的表达盒，

c)导入NADPH氧化酶反义核酸序列与核酶的组合或确保其表达的表达盒，

d)导入用于诱导共抑制的NADPH氧化酶有义核酸序列或确保它们表达的表达盒，

e)导入针对NADPH氧化酶基因、RNAs或蛋白质的DNA结合因子或蛋白质结合因子或确保它们表达的表达盒，

f)导入引起NADPH氧化酶RNA降解的病毒核酸序列和表达构建体，或导入确保它们表达的表达盒，

g)导入用于在内源性NADPH氧化酶基因处诱导同源重组的构建体，及

h)导入突变至内源性NADPH氧化酶基因。

5.根据权利要求1至4中任意一项所述的方法，所述方法包括

(i)用重组表达盒稳定转化植物细胞，所述重组表达盒包含与植物中有活性的启动子功能性连接的编码以下的核酸序列：

a)双链NADPH氧化酶RNA核糖核酸序列或

b)NADPH氧化酶反义核酸序列或

c)与核酶组合的NADPH氧化酶反义核酸序列或

d)用于诱导共抑制的NADPH氧化酶有义核酸序列或

e)针对NADPH氧化酶基因、RNA或蛋白质的DNA结合因子或蛋白质结合因子

f)引起NADPH氧化酶RNA降解的病毒核酸序列，

(ii)自所述植物细胞再生植物，及

(iii)表达所述核酸序列，其表达量及表达时间足以在所述植物中产生或增强病原体抗性。

6.根据权利要求1至5中任意一项所述的方法，其中病原体选自细菌、真菌、昆虫、病毒及线虫。

7.根据权利要求1至6中任意一项所述的方法，其中病原体选自根肿菌门(Plasmodiophoramycota)、卵菌门(Oomycota)、子囊菌门(Ascomycota)、壶菌纲(Chytridiomycetes)、接合菌纲(Zygomycetes)、担子菌门(Basidiomycota)及半知菌纲(Deuteromyceten)的真菌。

8.根据权利要求1至7中任意一项所述的方法，其中植物选自单子叶及双子叶植物。

9.根据权利要求1至8中任意一项所述的方法，其中植物选自小麦、燕麦、谷子、大麦、黑麦、玉米、水稻、荞麦、高粱、黑小麦、斯佩尔特小麦、亚麻子或甘蔗的单子叶植物。

10.用于降低NADPH氧化酶蛋白表达的双链RNA分子，所述双链RNA分子包含

a)含有至少一个核苷酸序列的有义RNA链，其与编码NADPH氧化酶的核酸序列的至少部分有义RNA转录物基本相同，及

b)与a)的RNA有义链基本互补的反义RNA链。

11.根据权利要求10所述的双链RNA分子，其中双链RNA的两条RNA链相互共价结合。

12.根据权利要求10或11所述的双链RNA分子，其中两条RNA链之一由至少部分这样的核酸序列编码，所述核酸序列为如SEQ ID NO：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19或21所示的编码NADPH氧化酶序列的核酸序列或其功能等同物。

13.转基因表达盒，其包含与在植物生物体中有功能的启动子功能性连接的编码根据权利要求10至12之一的双链RNA分子的核酸序列。

14.转基因表达盒，其包含至少部分编码NADPH氧化酶的如SEQ IDNO：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19或21所示的核酸序列或其功能等同物，其中所述核酸序列以反义方向与植物生物体中有功能的启动子功能性连接。

15.根据权利要求13或14所述的转基因表达盒，其中在植物中有功能的启动子为病原体诱导型启动子。

16.转基因载体，其包含根据权利要求13至15中任意一项的表达盒。

17.转基因生物体，其包含根据权利要求10至12中任意一项所述的双链RNA分子、根据权利要求13至15中任意一项所述的表达盒或根据权利要求16所述的载体。

18.根据权利要求17所述的转基因生物体，其选自细菌、酵母、动物及植物。

19.根据权利要求17或18所述的转基因生物体，其选自小麦、燕麦、谷子、大麦、黑麦、玉米、水稻、荞麦、高粱、黑小麦、斯佩尔特小麦、亚麻子、甘蔗、油菜籽、芸苔、水芹、拟南芥、卷心菜、大豆、苜蓿、豌豆、豆类、花生、马铃薯、烟草、番茄、茄子、辣椒、向日葵、万寿菊、莴苣、金盏草、瓜、南瓜/西葫芦及胡瓜的植物。

20.来自根据权利要求18或19所述转基因生物体的组织、器官、部分、细胞、细胞培养物或繁殖材料。