CN1640447A - 治疗病毒性心肌炎药物的制备方法及用途 - Google Patents
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Abstract
一种治疗病毒性心肌炎药物的制备方法及用途,属于医药技术领域。虎杖经乙醇溶液、氯仿、碱溶液提取分离,水洗、干燥;再将干粉制成各种制剂。本发明与以往的中药相比,有效部位具有成分较纯,用量小,加工制剂时投料较精确,质量指标客观可控,药物的有效成分和疗效稳定,量效关系明确,药物体积小,服用与携带方便。本品为纯中药制剂,无毒副作用。
Description
技术领域:
本发明属于医药技术领域,特别是涉及一种虎杖总蒽醌的提取方法及其在治疗病毒性心肌炎药物中的应用。
背景技术:
虎杖为蓼科植物虎杖的干燥根和根茎。性味微苦寒。功能利湿退黄,清热解毒。以往以治疗肝炎和烧烫伤为主,后开发为降血脂药。
病毒性心肌炎(VMC)是由嗜心肌病毒引起的以心肌病变和心肌间质炎细胞浸润为主的一种疾病。该病日渐成为一种内科临床的常见病。目前西医对该病尚没有特异性的治疗,化药如病毒唑和免疫调节性抗病毒治疗剂如干扰素疗效不如人意。而中医药治疗显示出一定的优势。中医普遍认为外邪是本病病因的直接因素。柯萨奇病毒是临床上病毒性心肌炎的常见病原体。药理实验证明虎杖抑制柯萨奇病毒的作用很明显。
技术内容:
本发明提供一种虎杖总蒽醌的新提取方法,及其在治疗病毒性心肌炎药物中的应用。
本发明的方法是将虎杖饮片或药材粉碎,用乙醇溶液提取,合并提取液,减压回收乙醇;加入氯仿提取,合并氯仿提取液;用碱溶液萃取,合并碱液;用酸调pH值;离心,反复水洗至pH值为中性;真空干燥,粉碎即得。
所述的碱溶液是NaHCO3溶液、Na2CO3溶液、NaOH(或KOH)溶液中的一种,或者是其中的两种,或者是三种。
采用上述方法所得到的粉末与片剂常用辅料如崩解剂、润滑剂、粘合剂等混合、制粒、干燥,制成一种抗病毒的片剂。
采用上述方法所得到的粉末与颗粒剂常用辅料如淀粉等混合、制粒、干燥,制成一种抗病毒的颗粒剂。
采用上述方法所得到的粉末与硬胶囊剂常用辅料如润滑助流剂等混匀,分装于硬胶囊中,制成一种抗病毒的硬胶囊剂。
采用上述方法所得到的粉末与口服液常用辅料如甜菊甙等混合,制成一种抗病毒口服液。
采用上述方法所得到的粉末与滴丸剂常用辅料如聚乙二醇等混合,滴入不相混溶的冷凝液中,制成一种抗病毒的滴丸。
采用上述方法所得到的粉末与软胶囊常用辅料如植物油、助悬剂等混合,密封于明胶等制成的软质囊材中,制成一种抗病毒的软胶囊。
采用上述方法所得到的粉末在抗病毒性心肌炎药物中的应用。
本发明提取虎杖有效部位,提取后的粉末总蒽醌含量在50%以上。可生产出科技含量高,质量可控的较高类别的中药。与以往的中药相比,有效部位具有成分较纯,用量较小,加工制剂时投料较精确,质量指标客观可控,疗效稳定,量效关系明确等优点。按药剂学方法,可将虎杖总蒽醌提取物加入辅料制备成多种药物制剂,包括片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸、口服液、注射剂、栓剂、气雾剂中的任一种药物制剂。
具体实施方式:
本发明的方法是将虎杖饮片或药材粉碎,用70~90%乙醇溶液提取1~3次,每次加5~12倍乙醇溶液,回流提取0.5~2.5小时,合并提取液,减压回收乙醇;加入氯仿提取1~5次,每次氯仿加入量为浓缩液的0.3~2倍,合并氯仿提取液;用碱溶液萃取1~5次,合并碱液;用酸调至pH1~3;离心,反复水洗至pH中性;60~90℃真空干燥,粉碎即得。该粉末总蒽醌含量在50%以上。
所述的碱溶液是NaHCO3溶液、Na2CO3溶液、NaOH(或KOH)溶液中的一种,或者是其中的两种,或者是三种。
采用上述方法所得到的粉末与片剂常用辅料如崩解剂、润滑剂、粘合剂等混合、制粒、干燥,制成一种抗病毒的片剂。
采用上述方法所得到的粉末与颗粒剂常用辅料如淀粉等混合、制粒、干燥,制成一种抗病毒的颗粒剂。
采用上述方法所得到的粉末与硬胶囊剂常用辅料如润滑助流剂等混匀,分装于硬胶囊中,制成一种抗病毒的硬胶囊剂。
采用上述方法所得到的粉末与口服液常用辅料如甜菊甙等混合,制成一种抗病毒口服液。
采用上述方法所得到的粉末与滴丸剂常用辅料如聚乙二醇等混合,滴入不相混溶的冷凝液中,制成一种抗病毒的滴丸。
采用上述方法所得到的粉末与软胶囊常用辅料如植物油、助悬剂等混合,密封于明胶等制成的软质囊材中,制成一种抗病毒的软胶囊。
采用上述方法所得到的粉末在抗病毒性心肌炎药物中的应用。
实施例1
本发明的方法是将虎杖饮片或药材粉碎,用70~90%乙醇溶液提取1~3次,每次加5~12倍乙醇溶液,回流提取0.5~2.5小时,合并提取液,减压回收乙醇;加入氯仿提取1~5次,每次氯仿加入量为浓缩液的0.3~2倍,合并氯仿提取液;先后用2~6%NaHCO3溶液、2~6%Na2CO3溶液、0.5~5%NaOH溶液萃取1~5次,合并碱液;用酸调至pH1~3;离心,反复水洗至pH中性;60~90℃真空干燥,粉碎即得。该粉末总蒽醌含量在50%以上。
一、虎杖提取物体内抗病毒作用
1材料与方法
1.1材料
病毒:含柯萨奇病毒B3 TCID50为10-5的MEM Eagle氏液,由吉林大学预防医学院细胞生物室提供。
动物:昆明种小鼠,雄性,共90只,体重14-16g,购自长春高新医学动物实验研究中心,动物合格证号:SCXK-(吉)2003-0004。
1.2方法
1.2.1动物模型建立:动物适应饲养后,随机分组,分空白组,模型组,受试药物组,阳性药对照组。空白组ip不含病毒的MEM Eagle氏液,其余动物腹腔注射接种病毒,0.2ml/只连续3日。
1.2.2给药方法:动物接种病毒后,ig给药,受试药物组分别ig200mg/kg、100mg/kg、50mg/kg虎杖提取物,空白组和模型组ig同体积生理盐水,阳性药组ig 0.04g/kg病毒唑。连续给药9天,于第10日眶静脉取血,分离血清,测心肌酶。摘取心脏,作组织病理检查。
2结果
2.1对心肌酶的影响
动物感染病毒后,血清中LDH、AST、CK含量明显升高,各受试药给药组对血清中LDH、AST、CK的升高有显著抑制作用,优于病毒唑。结果见表1。
表1虎杖提取物对心肌酶的影响(X±S)
组别 N AST(U/L) CK(U/L) LDH(U/L)
空白组 15 205.0±48.1 842.4±270.8 889.3±433.2
模型组 6 344.3±194.9 2486.4±1390.2 1177.2±369.3
阳性药组 10 205.8±37.5* 764.6±266.6* 1002.9±256.4
受试药组200mg/kg 11 187.9±26.6* 611.7±219.2* 721.5±257.9**
受试药组100mg/kg 10 183.5±22.9* 667.1±152.2*△ 758.8±260.2*
受试药组50mg/kg 11 212.9±60.1* 607.1±135.7* 749.3±243.5**
*P<0.05(与模型组比),**P<0.01(与模型组比),△P<0.05(与阳性药组比)。
2.2对体重增长的影响
动物感染病毒后,体重增长明显减慢,在第3天,感染病毒小鼠体重明显低于正常组,于给药第6天,小鼠体重增长高于模型组,但没有显著差异,于给药第9天,小鼠体重增长高于模型组,且有显著差异。见表2。
表2虎杖提取物对小鼠体重增长的影响(X±S)
组别 N 3d 6d 9d
空白组 15 22.1±1.6 25.8±2.8 26.0±3.8
模型组 6 18.5±2.4 20.2±4.9 17.5±5.5
阳性药组 10 17.1±2.1 16.5±3.9 16.5±3.7
受试药组200mg/kg 11 19.5±2.1 22.8±5.4 23.0±3.4*
受试药组100mg/kg 10 18.5±2.5 21.5±4.9 19.1±5.8*
受试药组50mg/kg 11 19.2±1.8 22.6±3.5 21.9±3.8*
*P<0.05(与模型组比)
2.3对死亡率的影响 结果见表3。
表3对死亡率的影响
组别 存活鼠数 死亡率(%)
空白组 15
模型组 6 60
阳性药组 10 33.3*
受试药组200mg/kg 11 26.7*
受试药组100mg/kg 10 33.3*
受试药组50mg/kg 11 26.7*
*P<0.05(与模型组比)
2.4病理检查结果
空白组:心肌纤维结构清楚,未见炎性细胞浸润,无明显病变。
模型组:心肌出现不同程度变性坏死,炎性细胞呈灶性或散在分布,并可见组织细胞增生。
给受试药组:低、中、高剂量组心肌组织形态较模型组有所改善,心肌变性坏死程度减轻,炎性细胞浸润减轻,水肿现象减轻。
二、虎杖提取物体外抗病毒作用
1材料与方法
1.1材料
细胞:Hella细胞,由吉林大学基础医学院病原生物室培养。
病毒:CVB3 Nancy株为吉林大学基础医学院病原生物室保存,病毒滴度为5×10-2。
1.2方法
1.2.1药物细胞毒性测定:于24孔板上加Hella细胞1ml/孔,培养24h,弃上清,加虎杖提取物,浓度分别为10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml、400μg/ml、500μg/ml、600μg/ml、700μg/ml、800μg/ml,37℃,5%CO2孵箱中培养33h,MTT法检测细胞毒活性,同时设正常细胞对照。
1.2.2药物体外抗病毒实验:于24孔板上,加100TCID50的CVB30.1ml/孔,37℃,5%CO2孵箱中吸附90min,弃上清,加药物,药物浓度分别为10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml,37℃,5%CO2孵箱中培养33h,MTT法检测细胞活性,同时设正常对照和病毒对照。
2结果
2.1药物对Hella细胞的毒性:药物对细胞毒性表现为细胞形态改变,本实验测得TD50为400μg/ml。
2.2药物对CVB3的抑制作用:本实验测得细胞病变效应(CPE)结果如下表。
药物对细胞CPE的影响
观察指标 | 药物浓度(μg/ml) | 细胞对照 | 病毒对照 |
10 50 100 200 400 | |||
CPE | +++- ±± ±± +--- +--- | - | ++++ |
Claims (9)
1、一种治疗病毒性心肌炎药物的制备方法,其特征在于:将虎杖饮片或药材粉碎,用乙醇溶液提取,合并提取液,减压回收乙醇;加入氯仿提取,合并氯仿提取液;用碱溶液萃取,合并碱液;用酸调pH值;离心,反复水洗至pH值为中性;真空干燥,粉碎即得。
2、根据权利要求1所述的治疗病毒性心肌炎药物的制备方法,其特征在于:所述的碱溶液是NaHCO3溶液、Na2CO3溶液、NaOH(或KOH)溶液中的一种,或者是其中的两种,或者是三种。
3、权利要求1所得到的粉末与片剂常用辅料如崩解剂、润滑剂、粘合剂等混合、制粒、干燥,制成一种抗病毒的片剂。
4、权利要求1所得到的粉末与颗粒剂常用辅料如淀粉等混合、制粒、干燥,制成一种抗病毒的颗粒剂。
5、权利要求1所得到的粉末与硬胶囊剂常用辅料如润滑助流剂等混匀,分装于硬胶囊中,制成一种抗病毒的硬胶囊剂。
6、权利要求1所得到的粉末与口服液常用辅料如甜菊甙等混合,制成一种抗病毒口服液。
7、权利要求1所得到的粉末与滴丸剂常用辅料如聚乙二醇等混合,滴入不相混溶的冷凝液中,制成一种抗病毒的滴丸。
8、权利要求1所得到的粉末与软胶囊常用辅料如植物油、助悬剂等混合,密封于明胶等制成的软质囊材中,制成一种抗病毒的软胶囊。
9、权利要求1所得到的粉末在抗病毒性心肌炎药物中的应用。
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