CN1634414A - 一种郁金冻干粉针剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种郁金冻干粉针剂及其制备方法，其特征在于从中药郁金中提取挥发油和总姜黄素，将挥发油、总姜黄素用HP－β－CD包合，提高了挥发油和姜黄素成分的稳定性、溶解度，包合物与药用辅料混合，制备成冻干粉针剂。药理实验结果表明，本发明的郁金冻干粉针剂具有较好的药理作用。

Description

一种郁金冻干粉针剂及其制备方法

所属技术领域

本发明属于中药制药技术领域，具体涉及一种郁金冻干粉针剂及其制备方法。

技术背景

郁金来源于姜科植物郁金，药用部位为其干燥块根，具活血止痛，清心解郁，凉血止血，利胆退黄功效，主治胸腹胁肋诸痛，妇女痛经、经闭，癥瘕结块，热病神昏，癫狂，惊痫，血热妄行之吐血、衄血，血淋，砂淋，黄疸等症。现代研究证明郁金在保肝利胆、抗肿瘤、降血脂方面具有有突出作用，还有保护消化系统、抑制中枢系统、抗辐射损伤、抗自由机损伤等作用。文献报道由郁金单味药组成的制剂有郁金注射液、温郁金1号注射液、温郁金2号注射液，以上制剂都是由郁金提取挥发油制成的制剂，主要用于急性黄疸型肝炎。研究表明郁金的主要有效成分包括挥发油和姜黄素两类成分，其中姜黄素在治疗肝炎和抗肿瘤方面具有重要的作用，而且具有抗氧化、抗感染、抗诱变、抗HIV等作用，而以上制剂的制剂工艺都没有保留另一重要活性成分姜黄素类成分。

专利(申请号02117218)“温郁金提取物注射剂及其制备方法和用途”公开了一种郁金提取物注射液的制备方法，本发明涉及的温郁金提取物的新剂型为纳米脂质体剂型，前体脂质体剂型，长循环脂质体剂型，长循环纳米脂质体剂型，纳米微乳剂型，静脉乳剂型，脂质纳米球剂型和脂肪乳剂型。

专利检索未发现任何有关郁金冻干粉针剂的专利。

发明内容

本发明的目的是公开一种富含有效成分、稳定性好、疗效确切的郁金冻干粉针制剂。

本发明的另一个目的是提供上述冻干粉针制剂的制备方法。

本发明通过以下技术方案实现的。

一.工艺制法：

(1)原料药：郁金；

(2)取郁金，用超临界二氧化碳萃取法提取，萃取温度45℃，压力30MPa，解析温度55℃，压力20MPa，平均流量40kg/h，萃取1-2h，得郁金挥发油，备用；

(3)郁金药渣加4-8倍量pH5-6的85％乙醇渗漉提取，合并渗漉液，减压回收乙醇并浓缩至1g生药/ml，高速离心，上清液上已处理好的大孔吸附树脂柱吸附，用4倍柱体积的水洗脱后，再用3-5倍柱体积80％-90％乙醇溶液洗脱，取乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，得到总姜黄素；

(4)取郁金挥发油、总姜黄素，采用饱和水溶液法用HP-β-CD进行包合，总姜黄素用乙醇溶解，得总姜黄素溶液，HP-β-CD以30ml/g的比例加水加热溶解，冷至室温，按照郁金挥发油和总姜黄素：HP-β-CD＝1∶15-20的比例(v/g)加入郁金挥发油、总姜黄素溶液，搅拌180分钟，取出冷藏24小时，抽滤，滤渣常温下干燥36小时，得到包合物；

(5)本发明的制剂的处方为：

包合物4-10重量份，药用辅料10-16重量份；

(6)取上述包合物和药用辅料混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，过滤，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。

超临界二氧化碳萃取技术是一项新型萃取、分离和提纯技术，与传统水蒸气蒸馏法比较具有提取效率高、提取温度低、操作方便、节约溶剂等特点，本发明采用超临界二氧化碳萃取技术提取郁金挥发油成分，提取条件温和、效率高且可以有效避免挥发油类成分受热分解和氧化。本发明采取乙醇渗漉提取、离心、大孔树脂分离纯化工艺得到总姜黄素，使得采用本发明制备的总姜黄素以姜黄素计含量达到90％-95％，且用大孔树脂纯化的方法显著提高了有效成分的转移率。姜黄素成分性质不稳定，不耐热、不耐光照、不溶于水。因此本发明将挥发油、总姜黄素用HP-β-CD进行了包合，HP-β-CD为水溶性的包合物，用其包合的挥发油、总姜黄素制成粉针剂在溶液中溶解性好，注射时吸收好，生物利用度高，患者痛感小，易于被患者愉快的接受；而且用HP-β-CD对挥发油、总姜黄素进行包合，使其在制备、贮藏、运输的过程中不易被空气氧化或因分解而变质，增加了挥发油、总姜黄素的稳定性，提高了疗效。本发明制得的冻干粉有效成分含量高且具有较好的溶解性、稳定性。药理实验表明本发明的郁金冻干粉针剂具有更好的药理作用。

二.制剂的检测分析

1.仪器与试药：Waters高效液相色谱仪器(600泵，2487检测器)，Millinium32色

              谱处理软件；本发明郁金冻干粉针剂(广东天之骄药物开发有限公

              司实验室提供)；姜黄素对照品(中国药品生物制品检定所)。

2.色谱条件：Diamonsil C18(4.6×250mm，5μm)色谱柱；流动相：甲醇∶异丙醇∶

            0.5％醋酸溶液(19∶25∶56)；流速：0.6ml/min；检测波长：420nm；

            柱温35℃。

3.实验方法：取姜黄素对照品用甲醇制成0.10mg/ml的对照品溶液，将本发明冻

            干粉针剂用注射用水溶解成与郁金注射液含生药量相同的溶液(1g

            生药/ml)，取样品溶液1ml至5ml容量瓶中，加甲醇稀释定容至刻

            度，过滤得供试品溶液，分别取对照品溶液和供试品溶液10μl，注

            入液相色谱仪，按照外标法计算，结果见表2。

                 表1  本发明制剂的姜黄素含量

       本发明冻干粉针剂别             姜黄素(mg/支)

               1                           0.50

               2                           0.48

               3                           0.47

结论：郁金注射液工艺只采用了水蒸气蒸馏法提取有效成分，基本不含姜黄素成分，因此本发明郁金冻干粉针剂的有效成分更加全面，制法更加科学合理。三.总姜黄素的检测分析

1.实验药物：总姜黄素(按本发明制备工艺制备，广东天之骄药物开发有限公司

            实验室提供)

2.实验方法：取姜黄素对照品2.5mg置50ml棕色容量瓶中，加甲醇稀释定容至刻

            度，摇匀即得。称取总姜黄素10mg，置10ml棕色容量瓶中，加甲

            醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml置100ml棕色容量瓶中，

            摇匀，用甲醇稀释至刻度，摇匀即得。取对照品溶液和样品溶液，

            照分光光度法在420nm处测定吸收度并计算，结果见表3。

            表3    总姜黄素的含量测定(以姜黄素计)

      组别                        1         2         3

      总姜黄素百分含量(％)        93.1      93.6      94.5

结论：通过上述检测分析实验我们可以得知本发明总姜黄素的含量(以姜黄素计)可以达到90％-95％，说明本发明工艺能除去大部分杂质。具有较好的纯化效果，且适合工艺化生产。

四.制剂稳定性比较

将本发明冻干粉针剂进行了长期稳定性试验，按制剂中姜黄素的含量测定方法分别测定0月、6月、12月、18月、24月制剂中的姜黄素含量，结果见表4。

                  表4  长期稳定性实验姜黄素含量

组别                        0月     6月     12月    18月    24月

本发明冻干粉针剂1(mg/支)    0.50    0.51    0.49    0.48    0.49

由以上实验结果可知，采用本发明制备的冻干粉由于将姜黄素类成分进行了包合，稳定性明显提高，长期稳定性实验24个月姜黄素含量基本无变化，而有文献报道(潭俊等.姜黄素制剂稳定性实验研究，中药材，25(8)，2002)含姜黄素成分的制剂姜黄素注射液在常温下半衰期为1.35年，有效期为0.2年。充分说明本发明工艺更加科学合理。

五.药理实施例

1.对小鼠CCl4肝损伤的保肝作用

1.1试药与动物：本发明郁金冻干粉针剂(广东天之骄药物开发有限公司实验室提

               供)；郁金注射液(按《吉林医科大学学报》，1977；3：77-78，

               方法制备)；CCl₄，上海试剂四厂；谷丙转氨酶(ALT)试剂盒，

               谷草转氨酸(AST)试剂盒，北京中生生物工程高技术公司出品

               昆明种小白鼠，体重20±2g。

1.2实验方法：取小鼠40只，随机分为4组，每组10只，分设正常组、CCl₄模型

             组、郁金注射液组和本发明冻干粉组，本发明冻干粉针剂稀释成与

             郁金注射液浓度含生药量相同的药液，给药组每日腹腔注射药液相

             当于1g生药/kg，连续4天，正常组、CCl₄模型组给予等剂量生理

             盐水，最后一次给药后1h，给小鼠(正常组除外)1％CCl₄腹腔注

             射1％CCl₄油溶液0.2ml/20g，20h后由眼眶静脉丛取血，取血前

             禁食12h，分离血清，测血清ALT、AST，结果见表3。

                 表5  对CCl₄所致肝损伤小鼠的影响

组别                    ALT/u.L^-1                ALT/u.L^-1

正常组                30.88±21.92              63.80±24.82

CCl4模型组            294.03±119.87^△                  354.49±137.37^△

郁金注射液            202.15±105.23^*          256.88±124.31^*

本发明冻干粉          178.91±74.13^**          209.14±108.45^**

与正常组比较，^△p＜0.01，与模型组比较，^**p＜0.01^*p＜0.05

结论：上述药理实验表明本发明的郁金冻干粉针剂能显著抑制CCl₄所致小鼠血清ALT、AST的升高，具有较好的保护CCl₄所致肝损伤的作用，且比郁金注射液的作用更强。

2.利胆作用

2.1试药与动物：本发明郁金冻干粉针剂(广东天之骄药物开发有限公司实验室提

               供)；郁金注射液(按《吉林医科大学学报》，1977；3：77-78，

               方法制备)；去氢胆酸，上海九福药业公司；Wistar大鼠，体重

               200±20g，雌雄兼有。

2.2实验方法：取Wistar大鼠40只，随机分为4组，每组10只，分别为生理盐水

             组，去氢胆酸组、郁金注射液组和本发明冻干粉组，本发明冻干粉

             针剂稀释成与郁金注射液浓度含生药量相同的药液，给药组静脉注

             射药液相当于0.7g生药/kg，各组大鼠用3％戊巴比妥钠1.5ml/kg，ip

             麻醉后剖腹，将塑料管插入胆总管引流胆汁，稳定0.5h后，收集给

             药前1h，给药后1、2、3、4、5h的胆汁量，并根据胆汁分泌增加

             率计算分析，结果见表6。

             胆汁分泌增加率(％)＝(D-C)/C×100％

             D＝给药组给药后胆汁分泌量/给药组给药前胆汁分泌量

             C＝对照组给药后胆汁分泌量/对照组给药前胆汁分泌量

                             表6  对大鼠胆汁分泌量的影响

                     给药前1h                             给药后(h)

组  别

                                    1             2            3           4           5

生理盐水组          2.66±0.83  2.64±0.82    2.40±0.57   2.38±0.73  2.33±0.81  2.25±0.67

去氢胆酸组          2.73±0.75  3.69±0.91^** 2.75±0.68   2.50±0.74  2.45±0.55  2.44±0.60

郁金注射液组        2.83±0.87  3.09±0.91^*  2.78±0.71   2.68±0.59  2.51±0.48  2.47±0.54

本发明冻干粉针剂组  2.69±0.79  3.38±0.87^** 3.10±0.85^* 2.70±0.73  2.43±0.64  2.39±0.45

与生理盐水组比，^**p＜0.01，^*p＜0.05

结论：以上药理实验结果表明本发明冻干粉针剂具有良好的促进胆汁分泌作用，与去氢胆酸比虽强度稍弱，但持续时间更长，与郁金注射液比，作用更强且持续时间比郁金注射液更长。

六、制备实施例

实施例1

(1)原料药：郁金1000g；

(2)取郁金，用超临界二氧化碳萃取法提取，萃取温度45℃，压力30MPa，解析温度55℃，压力20MPa，平均流量40kg/h，萃取1.5h，得郁金挥发油，备用；

(3)郁金药渣加8倍量pH5的85％乙醇渗漉提取，合并渗漉液，减压回收乙醇并浓缩至1g生药/ml，高速离心，上清液上已处理好的XAD-4型大孔吸附树脂柱吸附，用4倍柱体积的水洗脱后，再用4倍柱体积85％乙醇溶液洗脱，取乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，得到总姜黄素；

(4)取郁金挥发油、总姜黄素，采用饱和水溶液法用HP-β-CD进行包合，总姜黄素用乙醇溶解，得总姜黄素溶液，HP-β-CD以30ml/g的比例加水加热溶解，冷至室温，按照郁金挥发油和总姜黄素：HP-β-CD＝1∶15的比例(v/g)加入郁金挥发油、总姜黄素溶液，搅拌180分钟，取出冷藏24小时，抽滤，滤渣常温下干燥36小时，得到包合物64g；

(5)本发明的制剂的处方为：

包合物64g，甘露醇136g；

(6)取上述包合物和甘露醇混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，过滤，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。

实施例2

(1)原料药：郁金1500g；

(2)取郁金，用超临界二氧化碳萃取法提取，萃取温度45℃，压力30MPa，解析温度55℃，压力20MPa，平均流量40kg/h，萃取1h，得郁金挥发油，备用；

(3)郁金药渣加4倍量pH6的85％乙醇渗漉提取，合并渗漉液，减压回收乙醇并浓缩至1g生药/ml，高速离心，超滤，超滤液上已处理好的HPD-300型大孔吸附树脂柱吸附，用4倍柱体积的水洗脱后，再用3倍柱体积80％乙醇溶液洗脱，取乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，得到总姜黄素；

(4)取郁金挥发油、总姜黄素，采用饱和水溶液法用HP-β-CD进行包合，总姜黄素用乙醇溶解，得总姜黄素溶液，HP-β-CD以30ml/g的比例加水加热溶解，冷至室温，按照郁金挥发油和总姜黄素：HP-β-CD＝1∶20的比例(v/g)加入郁金挥发油、总姜黄素溶液，搅拌180分钟，取出冷藏24小时，抽滤，滤渣常温下干燥36小时，得到包合物97g；

(5)本发明的制剂的处方为：

包合物97g，乳糖103g；

(6)取上述包合物和乳糖混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，过滤，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。

实施例3

(1)原料药：郁金800g；

(2)取郁金，用超临界二氧化碳萃取法提取，萃取温度45℃，压力30MPa，解析温度55℃，压力20MPa，平均流量40kg/h，萃取2h，得郁金挥发油，备用；

(3)郁金药渣加8倍量pH5的85％乙醇渗漉提取，合并渗漉液，减压回收乙醇并浓缩至1g生药/ml，高速离心，上清液上已处理好的XAD-4型大孔吸附树脂柱吸附，用4倍柱体积的水洗脱后，再用5倍柱体积90％乙醇溶液洗脱，取乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，得到总姜黄素；

(4)取郁金挥发油、总姜黄素，采用饱和水溶液法用HP-β-CD进行包合，总姜黄素用乙醇溶解，得总姜黄素溶液，HP-β-CD以30ml/g的比例加水加热溶解，冷至室温，按照郁金挥发油和总姜黄素：HP-β-CD＝1∶15的比例(v/g)加入郁金挥发油、总姜黄素溶液，搅拌180分钟，取出冷藏24小时，抽滤，滤渣常温下干燥36小时，得到包合物40g；

(5)本发明的制剂的处方为：

包合物40g，葡聚糖160g；

(6)取上述包合物和葡聚糖混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，过滤，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。

实施例4

(1)原料药：郁金1200g；

(2)取郁金，用超临界二氧化碳萃取法提取，萃取温度45℃，压力30MPa，解析温度55℃，压力20MPa，平均流量40kg/h，萃取2h，得郁金挥发油，备用；

(3)郁金药渣加6倍量pH6的85％乙醇渗漉提取，合并渗漉液，减压回收乙醇并浓缩至1g生药/ml，高速离心，上清液上已处理好的HPD-300型大孔吸附树脂柱吸附，用4倍柱体积的水洗脱后，再用3倍柱体积85％乙醇溶液洗脱，取乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，得到总姜黄素；

(4)取郁金挥发油、总姜黄素，采用饱和水溶液法用HP-β-CD进行包合，总姜黄素用乙醇溶解，得总姜黄素溶液，HP-β-CD以30ml/g的比例加水加热溶解，冷至室温，按照郁金挥发油和总姜黄素：HP-β-CD＝1∶20的比例(v/g)加入郁金挥发油、总姜黄素溶液，搅拌180分钟，取出冷藏24小时，抽滤，滤渣常温下干燥36小时，得到包合物78g；

(5)本发明的制剂的处方为：

包合物78g，甘露醇122g；

(6)取上述包合物和甘露醇混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，过滤，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。

实施例5

(1)原料药：郁金2000g；

(2)取郁金，用超临界二氧化碳萃取法提取，萃取温度45℃，压力30MPa，解析温度55℃，压力20MPa，平均流量40kg/h，萃取1h，得郁金挥发油，备用；

(3)郁金药渣加6倍量pH5的85％乙醇渗漉提取，合并渗漉液，减压回收乙醇并浓缩至1g生药/ml，高速离心，超滤，超滤液上已处理好的XAD-4型大孔吸附树脂柱吸附，用4倍柱体积的水洗脱后，再用3倍柱体积85％乙醇溶液洗脱，取乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，得到总姜黄素；

(4)取郁金挥发油、总姜黄素，采用饱和水溶液法用HP-β-CD进行包合，总姜黄素用乙醇溶解，得总姜黄素溶液，HP-β-CD以30ml/g的比例加水加热溶解，冷至室温，按照郁金挥发油和总姜黄素：HP-β-CD＝1∶15的比例(v/g)加入郁金挥发油、总姜黄素溶液，搅拌180分钟，取出冷藏24小时，抽滤，滤渣常温下干燥36小时，得到包合物100g；

(5)本发明的制剂的处方为：

包合物100g，乳糖100g；

(6)取上述包合物和乳糖混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，过滤，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。

Claims (7)

1.一种郁金冻干粉针剂，其特征在于它是由从郁金提取的挥发油和总姜黄素的HP-β-CD包合物4-10重量份和药用辅料10-16重量份制备而成，其中总姜黄素以姜黄素计含量为90％-95％。

2.根据权利要求1所述的一种郁金冻干粉针剂，其制备方法包括以下步骤：

(1)原料药组成：郁金；

(2)取郁金，用超临界二氧化碳萃取法提取，萃取温度45℃，压力30MPa，解析温度55℃，压力20MPa，平均流量40kg/h，萃取1-2h，得郁金挥发油，备用；

(3)郁金药渣加4-8倍量pH5-6的85％乙醇渗漉提取，合并渗漉液，减压回收乙醇并浓缩至1g生药/ml，高速离心，上清液上已处理好的大孔吸附树脂柱吸附，用4倍柱体积的水洗脱后，再用3-5倍柱体积80％-90％乙醇溶液洗脱，取乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，得到总姜黄素；

(4)取郁金挥发油、总姜黄素，采用饱和水溶液法用HP-β-环糊精进行包合，总姜黄素用乙醇溶解，得总姜黄素溶液，HP-β-CD以30ml/g的比例加水加热溶解，冷至室温，按照郁金挥发油和总姜黄素∶HP-β-CD＝1∶15-20的比例(v/g)加入郁金挥发油、总姜黄素溶液，搅拌180分钟，取出冷藏24小时，抽滤，滤渣常温下干燥36小时，得到包合物；

(5)取上述包合物和药用辅料混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，过滤，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。

3.根据权利要求1或2所述的郁金冻干粉针剂，药用辅料为甘露醇或乳糖或葡聚糖中的一种。

4.根据权利要求2所述的郁金冻干粉针剂，超临界二氧化碳萃取法提取的萃取温度为45℃，压力为30MPa，解析温度为55℃，压力为20MPa，平均流量为40kg/h，萃取时间为1-2h。

5.根据权利要求2所述的郁金冻干粉针剂，其中大孔吸附树脂为非极性大孔吸附树脂。

6.根据权利要求2所述的郁金冻干粉针剂，其中大孔吸附树脂型号为XAD-4型或HPD-300型。

7.根据权利要求2所述的郁金冻干粉针剂，其中大孔吸附树脂洗脱的乙醇浓度为84％-86％。