CN1568819A - 一种保健食品及其制备方法 - Google Patents

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苏豹
刘云
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Abstract

本发明是一种保健食品及其制备方法。其特在于是由以下重量配比的原料制成的保健食品:三七10~40%,灵芝10~30%,维生素E 0.5~10%,粟米油30~75%。将三七和灵芝破碎后,乙醇回流提取三次,经过滤、收集滤液、真空减压浓缩、过滤、检验、喷雾干燥、灭菌、得三七和灵芝浸膏粉,与天然维生素E和粟米油按比例用真空均质机进行混合乳化,获得均一的固—液混合物保健品。本发明既是功能性的保建食品,又是绿色食品。本发明的产品采用先进的高科技工艺提取三七和灵芝的有效成分,并将其与天然维生素E和粟米油绿色原料混合,形成均一的固液混合物,产品中有效成分单位含量高,具有较强的增强免疫和延缓衰老的作用,是现有的同类产品不能比拟的。

Description

一种保健食品及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种能增强人体免疫力、延缓衰老的保健食品及其制备方法。
背景技术
现有的增强免疫力、抗衰老的保健食品品种繁多,大致分为灵芝类、维生素矿物质类、茸参类、蜂产品类、虫草类以及核心酸蛋白类等品种。其中以灵芝类、茸参类的品种为主。从现有的增强免疫、延缓衰老的保健食品来看,大多是用五味至十几味的中药材混合制成,配方繁琐,生产工艺复杂,有些产品中还存混有不可食用的中药材。同时现有产品在制剂方面基本沿用传统的口服液、胶囊、片剂等制剂方式。从功能和效果上来说,现有产品因多以中药复方为产品的配方,用多味中药材混合制成,没有有效成分提取等精致过程,致使产品中有效成分含量较低。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能增强人体免疫力、延缓衰老,有效成分含量高的保健食品。
本发明的另一目的在于提供上述保健食品的精制制备方法。
本发明的保健食品是由以下重量配比的原料制成的保健食品:
三七10~40%,灵芝10~30%,维生素E0.5~10%,粟米油30~75%
本发明的保健食品各原料的优选重量配比是:
三七20~25%,灵芝15~20%,维生素E2.5~5.0%,粟米油50~62%
本发明提供的上述保健食品的制备方法是按以下步骤进行的:
(1)将三七破碎后,加6~8倍量30~70%乙醇,回流提取2~3小时,提取三次,过滤,收集滤液,真空减压浓缩,过滤,检验,喷雾干燥、灭菌,得三七浸膏粉;
(2)将灵芝破碎后,加5~6倍量30~60%乙醇,回流提取2~3小时,再加7~8倍量的水煮提3~4小时,煮提二次,过滤三次溶液,加5%澄清剂,充分搅拌,煮沸10分钟,静置12小时,精滤(400目),收集滤液,真空减压浓缩,过滤,检验,喷雾干燥,灭菌,得灵芝浸膏粉;
(3)将上述(1)和(2)所得浸膏粉与天然维生素E和粟米油按比例用真空均质机进行混合乳化,获得均一的固—液混合物:
(4)将上述混合物注入胶囊内。
本发明的保健食品与现有技术比较具有以下积极效果:
本发明既是功能性的保建食品,又是绿色食品。本发明的产品采用先进的高科技工艺提取三七和灵芝的有效成分,并将其与天然维生素E和粟米油绿色原料混合,形成均一的固液混合物,产品中有效成分单位含量高,具有较强的增强免疫和延缓衰老的作用,是现有的同类产品不能比拟的。
一、以下用动物实验数据进一步证明本发明的免疫调节作用。
1、材料和方法
用本发明的保健食品成人服用剂量1.60g/60Kg.bw;
雄性小鼠,体重18-22克,按随机分组原则分0.13g/Kg.bw组、0.27g/Kg.bw组和0.53g/Kg.bw组(分别相当于成人日服用剂量的5倍、10倍和20倍)及对照组。实验组以相应剂量灌胃,水对照组以蒸馏水灌胃,灌胃量为20ml/Kg.bw,油对照组以油灌胃,灌胃量为20ml/Kg.bw,每天一次,连灌胃5天。
主要试剂:绵羊红细胞(SRBC):采自健康绵羊颈静脉;鸡红细胞(CRBC):采自健康公鸡心脏;氧化型辅酶I:Sigma公司产品。
脏器/体重比值测定:连续灌胃25天后,称取动物体重,颈椎脱臼处死动物,取出脾脏、胸腺,分别称出脾脏、胸腺重量,计算脏器/体重比值(以mg/10g表示)。
迟发型变态反应(足跖增厚法):在连续灌胃的第20天,每只小鼠腹腔注射2%SRBC0.2ml免疫,继续灌胃4天后,测量左后跖厚度,然后在测量部位皮下注射20%(V/V)SRBC,每只20μl注射后24小时、48小时分别测量左后足跖厚度,测量3次取平均值。
血清溶血素测定(血凝法):在连续灌胃的第20天,每只小鼠腹腔注射2%SRBC0.2ml免疫,继续灌胃5天后,摘除眼球取血于离心管内,放置1小时,剥离,2000rpm离心分离10分钟,收集血清,用生理盐水将血清作倍比稀释,每份稀释12孔,将不同稀释度的血清置于血凝板中,每孔100μl,再加入0.5%SRBC悬液100μl,混匀,置湿盒37℃3小时后观察结果,记录每孔的凝集程度.计算抗体积数。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬红细胞实验(半体内法):连续灌胃25天后,每只小鼠腹腔注射20%鸡红细胞悬液1ml,30分钟后,颈椎脱臼处死,将其固定在鼠板上,正中剪开腹壁皮肤,经腹腔注入生理盐水2ml,转动鼠板1分钟,吸出腹腔洗液化1ml,平均滴于2张载玻片上,置湿盒37℃30分钟,取出在生理盐水中漂洗、晾干、固定,4%GiemsaPBS染色3分钟,蒸馏水漂洗晾干,镜检。计算吞噬百分率及吞噬指数。
NK细胞活性测定(乳酸脱氢测定法):连续灌胃25天后,颈椎脱臼处死动物,取出脾脏,撕碎,过200目筛网后,用Hank’s液洗3次,用完全1640培养液配成5×106个/ml细胞悬液。将各只小鼠的细胞悬液取300μl分置于96孔培养板中,每孔100μl每孔加靶细胞(YAC-1细胞,1×105个/ml)100μl,同时做靶细胞自然释放孔(靶细胞100μl+培养液100μl)及最大释放孔(靶细胞100μl+1%NP-40100μl)各8孔,37℃5%CO2培养4小时,取出1500rpm离心满意足分钟。将各孔上清液100μl置于另一培养板中,每孔再加入100μl基质液,10分钟后加1mol/L HCL30μl终止反应,在490mm处测定O.D.值,计算NK细胞活性率。
2、实验数据统计采用方差分析对数据进行处理。其结果如下表:
1)、各剂量组小鼠的初始体重、中期体重及结束体重分别与水对照组及油对照组小鼠相应时期体重相比,均无显著性差异(P>0.05)
表1为本发明的保健食品对小鼠体重的影响(血清溶血素与迟发型变态反应测定)
                 动物数  初始体重(g)      中期体重(g)      结束体重(g)      增重(g)
组别                                                                                        P值*       P值△
                 (只)    ( X±S)         ( X±S)         ( X±S)         ( X±S)
油对照组         11      19.47±0.85      22.45±1.16      24.74±1.09      5.26±0.51      -           >005
水对照组         10      19.48±0.83      22.55±1.18      24.74±1.11      5.26±0.50      >0 05      -
0.13g/Kg.bw组    10      19.26±0.85      22.38±1.16      24.46±1.06      5.20±0.59      >0.05      >0.05
0.27g/Kg.bw组    11      19.75±0.83      22.72±1.20      24.98±1.05      5.24±0.54      >0.05      >0.05
0.53g/Kg.bw组    11      19.55±0.82      22.53±1.15      24.73±0.97      5.18±0.55      >0.05      >0.05
*表示各剂量组与油对照组的增重比较,    △表示各剂量组与水对照组的增重比较
表2为本发明的保健食品对小鼠体重的影响(吞噬鸡红细胞测定组)
                 动物数  初始体重(g)      中期体重(g)      结束体重(g)      增重(g)
组别                                                                                        P值*        P值△
                 (只)    ( X±S)         ( X±S)         ( X±S)         ( X±S)
油对照组         11      19.86±0.87      23.06±1.05      24.90±0.97      5.04±0.39      -           >0.05
水对照组         11      19.82±0.86      23.12±1.06      24.87±1.01      5.05±0.40      >0.05      -
0.13g/Kg.bw组    11      19.89±0.90      22.97±1.10      24.95±0.97      5.06±0.45      >0.05      >0.05
0.27g/Kg.bw组    10      19.79±0.84      22.97±1.11      24.92±0.95      5.13±0.41      >0.05      >0.05
0.53g/Kg.bw组    11      19.87±0.88      23.10±1.20      24.84±0.97      4.96±0.38      >0.05      >0.05
*表示各剂量组与油对照组的增重比较,△表示各剂量组与水对照组的增重比较
表3为本发明的保健食品对小鼠体重的影响(NK细胞活性测定组)
                 动物数  初始体重(g)    中期体重(g)    结束体重(g)    增重(g)
组别                                                                                P值*      P值△
                 (只)    ( X±S)       ( X±S)       ( X±S)       ( X±S)
油对照组         11      19.77±0.85    22.95±0.95    24.73±0.95    4.95±0.46    -         >0.05
水对照组         11      19.64±0.87    22.76±0.77    24.66±0.87    5.03±0.41    >0.05    -
0.13g/Kg.bw组    11      19.77±0.84    22.94±0.96    24.80±0.86    5.03±0.53    >0.05    >0.05
0.27g/Kg.bw组    11      19.77±0.88    22.85±1.02    24.68±0.98    4.91±0.49    >0.05    >0.05
0.53g/Kg.bw组    11      19.78±0.88    23.00±1.04    24.64±1.00    4.85±0.50    >0.05    >0.05
*表示各剂量组与油对照组的增重比较,△表示各剂量组与水对照组的增重比较
2)、各剂量组与水对照组及油对照组小鼠相比,其脏器/体重比值均无显著性差异(P>0.05)
表4为本发明的保健食品对小鼠脏器/体重比值的影响
                   动物数  脾脏/体重比值                            胸腺/体重比
组别                                        P1*     P1值△                      P2*     P2值△
                   (只)    (mg/10g)( X±S)                         (mg/10g)( X±S)
油对照组           11      38.99±3.99      -           >0.05      20.01±2.07      -           >0.05
水对照组           10      39.25±4.20      >0.05      -           20.68±2.03      >0.05      -
0.13g/Kg.bw组      10      39.27±4.18      >0.05      >0.05      20.85±1.92      >0.05      >0.05
0.27g/Kg.bw组      11      39.24±4.13      >0.05      >0.05      20.46±1.88      >0.05      >0.05
0.53g/Kg.bw组      11      39.76±3.63      >0.05      >0.05      20.15±1.96      >0.05      >0.05
*P1为各剂量组与油对照组脾脏/体重比值比较,*P2为各剂量组与油对照组胸腺/体重比值比较
△P1为各剂量组与水对照组脾脏/体重比值比较,△P2为各剂量组与水对照组胸腺/体重比值比较
3)、本发明的保健食品对小鼠迟发型变态反应(DTII)的影响:抗原攻击后24小时、48小时后,各剂量组与水对照组及油对照组小鼠相比,其足跖肿胀度均无显著性差异(P>0.05)。
表5为对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响
                 动物数足跖肿胀度(mm)( X±S)
组别                                               P1*   P2*   P1值△   P2值△
                 (只)  24h           48h
油对照组         11    0.38±0.11    0.22±0.03    -         >0.05    -         >0.05
水对照组         10    0.41±0.12    0.21±0.04    >0.05    -         >0.05    -
0.13g/Kg.bw组    10    0.42±0.13    0.24±0.03    >0.05    >0.05    >0.05    >0.05
0.27g/Kg.bw组    11    0.38±0.12    0.22±0.03    >0.05    >0.05    >0.05    >0.05
0.53g/Kg.bw组    11    0.41±0.14    0.21±0.04    >0.05    >0.05    >0.05    >0.05
*P1为各剂量组与油对照组24h足跖肿胀度比较,*P2为各剂量组与水对照组24h足跖肿胀度比较
△P1为各剂量组与油对照组48h足跖肿胀度比较,△P2为各剂量组与水对照组48h足跖肿胀度比较
4)、本发明的保健食品对小鼠血清溶血素产生的影响:0.13g/Kg.bw剂量组与油对照组及水对照组小鼠相比,其抗积数有显著性增高(P<0.05),0.27g/Kg.bw、0.53g/Kg.bw剂量组与油对照组及水对照组小鼠相比,其抗体积数均有显著性增高(P<0.01)。
表6为本发明的保健食品对小鼠血清溶血素抗体积数的影响
                 动物数  抗体积数
组别                                      P值*     P值△
                 (只)    ( X±S)
油对照组         11      142.91±10.71    -         >0.05
水对照组         10      144.50±12.34    >0.05    -
0.13g/Kg.bw组    10      163.10±11.91    <0.01    <0.01
0.27g/Kg.bw组    11      158.27±12.17    <0.05    <0.05
0.53g/Kg.bw      11      156.45±12.06    <0.05    <0.05
*P表示各剂量组与油对照组抗体积数比较△P表示各剂量组与水对照组抗体积数比较
5)、本发明的保健食品对小鼠腹腔巨噬细胞鸡红细胞能力的影响:0.13g/Kg.bw、0.27g/Kg.bw剂量组与油对照组及水对照组小鼠相比,其腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率有显著性增高(P<0.01),0.53g/Kg.bw剂量组与油对照组及水对照组小鼠相比,其腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率无显著性差异(P<0.05);0.13g/Kg.bw剂量组与油对照组及水对照组小鼠相比,其腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬指数无显著性差异(P<0.05),0.27g/Kg.bw剂量组与油对照组及水对照组小鼠相比,其腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率有显著性增高(P<0.05);0.53g/Kg.bw剂量组与油对照组及水对照组小鼠相比,其腹腔巨噬细胞对鸡红细胞有吞噬指数有显著性差异(P<0.01)。
表7为本发明的保健食品对小鼠腹腔巨噬细胞天噬鸡红细胞能力的影响
                 动物数  吞噬百分率(%)                吞噬指数
组别                                   P1* P1值△               P2*  P2值△△
                 (只)    ( X±S)                      ( X±S)
油对照组         11      30.47±3.00   -       >0.05  1.10±0.24    -         >0.05
水对照组         11      29.93±3.36   >0.05  -       1.07±0.18    >0.05    -
0.13g/Kg.bw组    11      35.23±2.69   <0.01  <0.01  1.04±0.23    >0.05    >0.05
0.27g/Kg.bw组    10      35.00±1.83   <0.01  <0.01  1.37±0.24    <0.05    <0.05
0.53g/Kg.bw组    11      32.18±2.82   >0.05  >0.05  1.39±0.25    <0.01    <0.01
*P1为各剂量组与油对照组吞噬百分率比较,*P2为各剂量组与油对照组吞噬指数比较
△P1为各剂量组与水对照组吞噬百分率比较,△P2为各剂量组与水对照组吞噬指数比较
6)、本发明的保健食品对小鼠NK细胞活性的影响:各剂量组与水对照组及油对照组小鼠相比,其NK细胞活性率均无显著性差异(P>0.05)。
表8为本发明的保健食品对小鼠NK细胞活性的影响
                 动物数  NK细胞活性率(%)
组别                                      P值*     P值△
                 (只)    ( X±S)
油对照组         11      17.29±2.38      -         >0.05
水对照组         11      16.90±2.97      >0.05    -
0.13g/Kg.bw组    11      19.89±2.94      >0.05    >0.05
0.27g/Kg.bw组    11      17.93±2.32      >0.05    >0.05
0.53g/Kg.bw组    11      17.86±2.51      >0.05    >0.05
*P表示各剂量组与油对照组
NK细胞活性率比较△P表示各剂量组与水对照组NK细胞活性率比较
上述实验结果表明:本发明的保健食品具有免疫调节作用。
二、以下用动物实验数据进一步证明本发明的延缓衰老作用。
1、材料与方法
样品:本发明的保健食品,人体推荐剂量为1.6g/人/日,果蝇生存实验中将样品按比例直接掺入热的果蝇饲料。动物抗氧化实验时将样品用于%淀粉液制成混悬液给小鼠灌胃。
动物:昆明种雌性小鼠共50只,其中12月龄以上小鼠40只,体重范围46~55克,8周少龄小鼠10只,平均体重20.4±1.3克。
剂量选择:根据人体推荐量,按公式计算出果蝇饮料中受试物的中间剂量,再按3倍组距上下各设1或2个剂量组,共4个剂量组。即:0.016%、0.05%、0.15%和0.45%,另设基础饲料对照组。
动物试验剂量分组:本发明的保健食品人体推荐量的5倍、10倍和蔼0倍设三个剂量组,即0.13、0.27和0.53g/Kg·bw,另设老龄对照鼠和少龄鼠对照组。
实验方法:
1)、果蝇生存试验方法:收集8小时内羽化成蝇,乙醚麻醉,按雌、雄50只/管,分装于3.0×13cm培养指管内并称重,每剂量组雌雄各5管,于25℃±1℃生化培养箱内饲养,每4天更换饲料一次,果蝇孵出两周后开始加入受试物,每天定时记录果蝇死亡数,直到果蝇全部死亡。
2)、抗氧化实验方法:对各剂量组小鼠。每日按1%(即100克体重灌1ml)给动物灌胃给予受试物,老龄对照和年轻组对照给予4%淀粉液,连续40天,试验结束时进行动物肝匀浆MDA含量和红细胞SOD活力的测定。
2、实验结果统计
1)、本发明的保健食品对果蝇寿命的影响(表1)
                                                  表1
  组别   性别     剂量(%)   样本数    平均体重(μg)    半数死亡时间d   平均寿命d   最高平均寿命d
  对照组   雄     0   234    768±22    48   47.38±11.41   70.25±4.61
244 902±31 54 53.11±13.89 78.05±4.50
  低   雄     0.016   221    769±28    50   49.14±12.67   70.25±4.66
231 908±21 55 55.47±13.08 79.90±3.73
  中   雄     0.05   224    774±19    49   49.38±11.19   72.05±4.84
225 897±34 55 54.49±11.08 76.60±4.51
  次高   雄     0.15   221    770±25    51   51.39±13.05*   78.85±5.86*
223 901±22 57 56.78±12.45* 80.45±4.44
  高   雄     0.45   230    779±30    48   48.43±13.01   76.90±4.96*
222 909±29 55 54.72±12.72 80.70±4.37
*与对照组比较有显著性差异(P<0.05)
表1结果显示雄性果蝇0.15%剂量组的平均寿命和最高平均寿命显著高于对照组(P<0.05),且0.45%剂量组的最高平均寿命显著高于对照组(P<0.05)。雌性果蝇0.15%剂量组的平均寿命显著高于对照组(P<0.05),其余各剂量组与对照组比较均无显著差异(P>0.05)。果蝇生存试验结果阳性。
2)、本发明的保健食品对小鼠体重的影响
表2为本发明的保健食品对小鼠各实验阶段体重的影响
剂量                  初期体重                    中期体重                  结束体重
(g/kg·bw)    动物数(只)    体重(g)      动物数(只)    体重(g)      动物数(只)    体重(g)
老龄鼠对照    10            50.7±3.2    10            49.5±2.6    10            49.7±3.0
0.13          10            51.4±3.3    10            50.1±3.5    10            50.3±3.5
0.27          10            51.4±3.3    10            49.5±3.7    10            49.8±3.5
0.54          10            52.0±3.6    10            50.5±3.2    10            50.2±2.8
3)本发明的保健食品对小鼠肝脏MDA含量的影响(表3)
剂量(g/kg·bw)         动物数(只)     MDA含量(nmol/g)
少龄鼠对照组           10             136.52±18.91
老龄鼠对照             10             163.74±9.05*
0.13                   10             150.35±12.20
0.27                   10             151.56±15.24
0.54                   10             141.13±10.45#
*与少龄鼠对照组比较有显著差异(P<0.05)。#与老龄鼠组比较有显著差异(P<0.05)
表3显示,老龄鼠对照组肝脏MDK含量显著高于少龄鼠对照组(P<0.05),受试物高剂量组(0.54g/Kg·bw)与老龄鼠对照组比较,MDA含量显著降低(P<0.05)。
4)本发明的保健食品对小鼠红细胞超氧化物歧化酶的影响(表4)
剂量(g/kg·bw)      动物数(只)    SOD活力(Nu/ml)
少龄鼠对照组        10            4060±461
老龄鼠对照组        10            3495±477*
0.13                10            3627±364
0.27                10            3762±304
0.54                10            4023±390#
*与少龄鼠对照组比较有显著差异(P<0.05)。#与老龄鼠组比较有显著差异(P<0.05)
表4可见,老龄鼠对照组SOD活力显著低于少龄鼠对照组(P<0.05),受试物高剂量组(0.54g/Kg·bw)与老龄鼠对照组比较,SOD活力显著增高(P<0.05)。
上述实验表明:果蝇生存实验结果阳性;抗氧化试验MDA、SOD结果阳性。按评价标准,本发明的保健食品具有延缓衰老的作用。
具体实施方式
实施例1:
按以下重量配比称取原料:
三七40%,灵芝29.5%,维生素E 0.5%,粟米油30%。
制备方法按以下步骤进行:
(1)将三七破碎后,加6~8倍量30~70%乙醇,回流提取2~3小时,提取三次,过滤,收集滤液,真空减压浓缩至d=1.15~1.20时,过滤(120目),检验,喷雾干燥、收集,装桶,灭菌,得三七浸膏粉;
(2)将灵芝破碎后,加5~6倍量30~60%乙醇,回流提取2~3小时,再加7~8倍量的水煮提3~4小时,煮提二次,合并溶液,过滤,加5%澄清剂壳聚糖充分搅拌,煮沸10分钟,静置12小时,精滤(400目),收集滤液,检验,装桶,真空减压浓缩,当至d=1.15时,过滤(120目),喷雾干燥,收集,灭菌,得灵芝浸膏粉;
(3)将上述(1)和(2)所得浸膏粉与天然维生素E和粟米油按比例用真空均质机进行混合乳化,获得均一的固—液混合物;
(4)将上述混合物注入胶囊内。
实施例2:
按以下重量配比称取原料:
三七10%,灵芝10%,维生素E 5%,粟米油75%。
制备方法与实施例1相同。
实施例3:
按以下重量配比称取原料:
三七25%,灵芝20%,维生素E 5%,粟米油50%。
制备方法与实施例1相同。

Claims (3)

1、一种保健食品,其特在于是由以下重量配比的原料制成的保健食品
三七10~40%,灵芝10~30%,维生素E0.5~10%,粟米油30~75%
2、根据权利要求1所述的保健食品,其中各原料的重量配比是
三七20~25%,灵芝15~20%,维生素E2.5~5.0%,粟米油50~62%
3、权利要求1、2所述的保健食品的制备方法,其特征在于按以下步骤进行:
(1)将三七破碎后,加6~8倍量30~70%乙醇,回流提取2~3小时,提取三次,过滤,收集滤液,真空减压浓缩,过滤,检验,喷雾干燥、灭菌,得三七浸膏粉;
(2)将灵芝破碎后,加5~6倍量30~60%乙醇,回流提取2~3小时,再加7~8倍量的水煮提3~4小时,煮提二次,合并溶液,过滤,加5%澄清剂,充分搅拌,煮沸10分钟,静置12小时,精滤,收集滤液,真空减压浓缩,过滤,检验,喷雾干燥,灭菌,得灵芝浸膏粉;
(3)将上述(1)和(2)所得浸膏粉与天然维生素E和粟米油按比例用真空均质机进行混合乳化,获得均一的固—液混合物;
(4)将上述混合物注入胶囊内。
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