CN1562139A - 一种治疗和预防脂肪肝的中药及其制备工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种治疗和预防脂肪肝的中药及其制备方法。该中药由甲壳、制何首乌、丹参、茵陈、牛膝等五味中药组成，通过将甲壳用乙醇浸泡后进行干燥粉碎，与其余四味药经乙醇回流提取、浓缩后的提取物混和，加入辅料制备而成。本发明提供的中药组方精当，标本兼治，效果确切，毒副作用小，用药安全，且选用药物的主药为新资源的开发利用，成本低，具有良好的疗效和生物利用前景，制备方法中甲壳进行前处理加工，并根据药材中降血脂的有效成分的理化性质进行提取分离，有效去除杂质，提高主要成分的含量，增强了疗效。

Description

一种治疗和预防脂肪肝的中药及其制备工艺
技术领域
本发明属中药制药领域，特别是涉及一种治疗和预防脂肪肝的中药，本发明还涉及该药物的制备工艺。
背景技术
脂肪肝是我国常见病、多发病，据流行病学调查统计表明，中国人群脂肪肝发病率超过10％，特殊人群(肥胖、嗜酒、糖尿病等)发病率高达50-60％，成为肝脏疾患中仅次于肝炎、肝硬化的一种弥漫性肝病。脂肪肝主要是由于肝脏脂肪代谢失衡引起脂肪在肝中积聚所致，饮食结构不合理、超重、高脂血症、酒精中毒、病毒性肝炎、糖尿病等多种因素均可诱发，如不及早发现、治疗，部分病例可最终发展成脂肪性肝炎、肝硬化、肝癌，甚至肝衰竭的严重结局。
目前市场上用于治疗脂肪肝的药物很少，临床治疗只能用祛脂药，但效果不佳，有的收效甚微，且对肝脏有一定程度的损害，价格也很贵。相关药物多数以治疗高血脂、病毒性肝炎、心脑血管疾病等病症兼有少许治疗脂肪肝与肝硬化的功效，以治疗脂肪肝为主要功效的药物很少，限制了临床对脂肪肝的有效治疗。
发明内容
本发明的目的是提供一种副作用少、疗效好、成本低的治疗和预防脂肪肝的中药。
本发明的另一目的是提供该药的制备工艺。
本发明的技术方案是利用中医学在本病中具有的明显优势。中药复方通过多种药物的有机配伍，标本兼治，比单纯的化合物和生物制剂具有更多的优势，且中药原料为天然产物，毒副作用小，用药安全，更能为患者所接受。
本发明由甲壳、制何首乌、丹参、茵陈、牛膝等五味中药组成，其中君药甲壳性寒，入肝肾经，功为育阴潜阳，消积行瘀，软坚散结，可降低胆固醇，抗肿瘤，增强免疫功能、减肥等，完全符合脂肪肝痰瘀交阻的病机，是祛除肝脏沉积脂肪，软化肝脏的良药。臣药制何首乌味甘微温，能养血益肝、固精补肾，健筋骨，乌髭发，且有通便作用，能促进痰浊血瘀排出，该药与甲壳配伍，一补一泻，扶正祛邪，切合脂肪肝“肝肾不足，脂肪堆积”的机理。丹参味苦，微寒，入心肝二经，有活血祛瘀，凉血消痈，安神除烦之效。另因肝脏充积过量脂肪，必然导致气血瘀阻，“肝藏血，主疏泄”，本方兼以丹参为臣药，以活血化瘀、疏通经络，协助甲壳清除肝脏沉积的脂肪。脂肪肝乃迁延日久之疾，湿热流连缠绵是不可忽略的因素，而茵陈味淡利水，可利胆、保肝、祛脂、抑茵，故佐以适量茵陈，取其苦寒清热利湿之效。牛膝味苦而酸，性平，活血化瘀及补益肝肾，两功兼长，既能助甲壳行瘀祛痰，又能助首乌强肝补肾，该药更长于引药下行，可引导全方直入下焦肝肾，其利尿通淋作用还能驱痰瘀下行。实验证明其对肝脏细胞有促进再生作用，可促进蛋白质合成。
综上所述，本方以甲壳行血化瘀、软坚散结为君药；制何首乌补益肝肾、通便祛脂，丹参活血化瘀，共化臣药；茵陈清利肝胆湿热，牛膝既补肝肾又行瘀血，同为佐使。药味咸、苦、酸、甘相合，补肾、益肝、祛痰、通络、活血并收；药性有温有寒，但无温燥耗阴、苦寒败胃之弊，阴阳互补，标本兼治。
本发明的目的可以通过下列措施实现的：
一种治疗和预防脂肪肝的中药，它是主要由下列重量份的原料药制成：
甲壳1～3份，制何首乌1～2.8份，茵陈1～2.8份，丹参0.7～2份，牛膝0.7～2份。
所述的治疗和预防脂肪肝的中药，其特征在于各重量份的原料药优选：
甲壳1.5份，制何首乌1.4份，茵陈1.4份，丹参1份，牛膝1份。
所述的治疗和预防脂肪肝的中药，其药剂是任何一种药剂学上所说的剂型。
所述的治疗和预防脂肪肝的中药，其药剂可以是丸剂、片剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、滴丸剂、糖浆剂、酒剂、口服液剂、注射剂。
一种治疗和预防脂肪肝的中药的制备工艺，包含下列步骤：
a.按配方取甲壳用60-90％乙醇浸泡12-36小时，取出，40-80℃干燥1-4小时，粉碎成细粉，备用；
b.按配方取制何首乌、丹参、茵陈、牛膝加60-90％乙醇回流提取2-3次，每次4-10倍量，提取1-4小时，滤过，滤液合并，回收乙醇；
c.将步骤b所得的滤液浓缩至30～60℃时相对密度为1.0至1.3，得浸膏；
d.加步骤a所得的甲壳粉混匀，加入适量辅料，制成所需剂型。
所述的制备工艺，其步骤a中甲壳干燥可以是真空干燥或间歇烘干，粉碎可以是-2～-10℃冷冻12～24小时后粉碎或常温粉碎。
所述的制备工艺，其步骤b为按配方取制何首乌、丹参、茵陈、牛膝加60-90％乙醇回流提取2-3次，每次4-10倍量，提取1-4小时，合并回流液，放冷后，0～4℃静置冷藏12～24小时，过滤，回收乙醇。
所述的制备工艺，其步骤c为将所得滤液浓缩至30～60℃时相对密度为1.1至1.2，再加乙醇至含醇浓度为60～90％，静置12～24小时，过滤回收乙醇，浓缩液喷雾干燥成细粉。
上述的甲壳药材按江苏省甲壳药材标准[苏卫药(1997)18号]规定的虾、蟹原料，经加工去脂肪、蛋白质、色素、钙质等后的内膜。甲壳原料具体要求有：
海虾壳：为对虾科动物对虾或龙虾科动物锦绣龙虾等的甲壳；
蟹壳：为方蟹科动物中华绒螯蟹的甲壳；
蝤蛑：为蝤蛑科动物日本蟳或其他缘动物的壳。
本发明的优点：
本发明提供的中药组方精当，标本兼治，效果确切，毒副作用小，用药安全，更能为患者所接受，且选用药物的主药为新资源的开发利用，成本低，具有良好的疗效和生物利用前景，制备方法中甲壳进行前处理加工，并根据药材中降血脂的有效成分的理化性质进行提取分离，有效去除杂质，提高主要成份的含量，增强了疗效。
以下通过本发明的动物试验情况进一步说明本发明的有益效果。试验中本发明药物均按实施例1制备。
本发明的药效学试验：
一、本发明对乙醇、四氯化碳(CCl4)引致大鼠脂肪肝的影响
实验方法：选SD种系大鼠48只，体重210±30g，雌雄各半，随机分为6组，即模型组和空白对照组各一组(灌胃给予与给药组等量的1％CMC(羧甲基纤维素))、阳性对照组(东宝肝泰片按1g药粉/kg灌胃给药)、本发明低、中、高剂量组(分别按1.26g生药/kg、2.52g生药/kg、5.04g生药/kg灌胃给药)。从试验第1天起，每天给药一次(模型组和空白对照组除外)，连续给药15天，此外，除空白对照组外，其余5组分别按1ml/100g体重灌服30％乙醇溶液，每天一次，连续灌服15天，并于试验第1天(按0.5ml/100g体重)，第5、10、15天(分别按0.3ml/100g体重)分别于大鼠后肢内侧皮下注射40％CCl4大豆油溶液(空白对照组注射等量生理盐水)，最后一次注射后6小时，将动物称重，然后处死动物，取血测定血液生化指标(血清总胆固醇、甘油三酯、高密度酯蛋白胆固醇)；取肝脏称重，测定生化指标(总胆固醇、甘油三酯)，进行组织形态学观察，并取脾脏和胸腺称重。
实验结果：
1、本发明对大鼠体重的影响：试验期间空白对照组动物体重持续增加，其它5组动物体重在给药后5-10天，与对照组相比有显著差异，试验结束时，模型组和本发明低剂量组动物体重与空白对照组动物相比仍有显著差异，结果见表1。
表1本发明对大鼠体重的影响(g，n＝8， x±sd)
组别 给药量(g/kg)                                  天数
    0     5     10     15
模型组 - 202.5±17.7  194.4±21.9*  221.3±17.5** 220.6±21.3**
空白对照组 - 202.5±17.3  217.5±16.5  238.1±16.7 253.1±21.0
本发明低剂量组 1.26 201.9±17.5  198.1±13.9*  210.0±19.1** 226.9±22.2*
本发明中剂量组 2.52 204.4±17.8  200.6±14.7*  220.0±17.1* 230.6±24.8
本发明高剂量组 5.04 205.0±15.8  198.1±16.7*  216.9±21.7* 235.6±19.9
阳性对照组 1.00 210.0±16.3  198.1±17.9*  215.0±20.2* 232.5±24.3
注：与空白对照组比较*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001
2、本发明对大鼠脏器的影响：模型组动物肝脏和脾脏重量显著增高，而胸腺重量则明显降低，与空白对照组和用药组比较均有显著性差异，结果见表2。
表2本发明对大鼠脏器的影响(g， x±sd)
组别 给药量(g/kg) 动物数(只) 肝脏 脾脏 胸腺
模型组 - 8  11.75±1.80  1.70±0.33 0.22±0.09
空白对照组 - 8  10.19±0.62*  1.20±0.18** 0.59±0.13***
本发明低剂量组 1.26 8  9.94±1.23*  1.25±0.32* 0.38±0.15*
本发明中剂量组 2.52 8  9.98±1.34*  1.16±0.30** 0.46±0.21**
本发明高剂量组 5.04 8  9.79±1.49*  1.08±0.36** 0.43±0.09***
阳性对照组 1.00 8  9.98±1.35*  1.21±0.27** 0.49±0.24**
注：与模型组比较*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001
3、本发明对生化指标的影响：血液生化及肝脏生化检测结果表明，本发明中、高剂量组能明显升高高密度酯蛋白胆固醇含量，并能有效降低总胆固醇和甘油三酯含量，结果见表3～4。
表3本发明对大鼠血液生化指标的影响( x±sd)
组别 给药量(g/kg) 动物数(只)  T-ch(mmol/L)  TG(mmol/L) HDL-c(mmol/L)
模型组 - 8  1.23±0.17  0.85±0.19 0.74±0.13
空白对照组 - 8  0.99±0.12**  0.65±0.16* 1.06±0.11***
本发明低剂量组 1.26 8  1.28±0.19  0.63±0.21* 0.92±0.23
本发明中剂量组 2.52 8  1.01±0.23*  0.56±0.19** 0.89±0.13*
本发明高剂量组 5.04 8  0.89±0.25**  0.37±0.12*** 1.03±0.23**
阳性对照组 1.00 8  0.90±0.31*  0.46±0.14*** 0.97±0.19*
注：与模型组比较*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001
表4本发明对大鼠肝脏生化指标的影响( x±sd)
组别 给药量(g/kg)  动物数(只)  T-ch(mmol/L) TG(mmol/L)
模型组 -  8  0.50±0.18 1.04±0.24
空白对照组 -  8  0.22±0.11** 0.49±0.19***
本发明低剂量组 1.26  8  0.28±0.18* 0.98±0.26
本发明中剂量组 2.52  8  0.27±0.14* 0.72±0.19*
本发明高剂量组 5.04  8  0.26±0.11** 0.66±0.17**
阳性对照组 1.00  8  0.24±0.08** 0.84±0.20***
注：与模型组比较*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001
4、肝脏组织切片镜检结果表明，本发明低、中、高剂量组动物肝脏脂肪变性程度都比模型组动物明显减轻。
二、本发明对乙硫氨酸引致大鼠脂肪肝的影响
实验方法：取大鼠60只，雌雄各半，体重220±40g，分为6组，即模型组和空白对照组各1组(灌胃给予与给药组等量的1％CMC)、阳性对照组(东宝肝泰片按1g药粉/kg灌胃给药)、本发明低、中、高剂量组(分别按1.26g生药/kg、2.52g生药/kg、5.04g生药/kg灌胃给药)。从试验第1天起，每天给药一次(模型组和空白对照组除外)，给药体积为1ml/100g，连续给药3天。实验第4天起，除空白对照组外，其余5组分别按300mg/kg体重灌胃给予乙硫氨酸一次，随后，按前法每12小时给药一次，共4次。给予乙硫氨酸后48小时，取血测定血液生化指标(血清总胆固醇、甘油三酯、高密度酯蛋白胆固醇)，并处死动物，取肝脏称重，测定生化指标(总胆固醇、甘油三酯)，进行组织形态学观察，并取脾脏和胸腺称重。
实验结果：
1、本发明对脂肪肝大鼠试验前后体重变化的影响：试验期间各组动物体重无明显差异，结果见表5。
表5  本发明对脂肪肝大鼠试验前后体重变化的影响    (g， x±sd)
组别   给药量(g/kg) 动物数(只) 试验前 试验后
模型组 -  10  230.5±23.3  227.5±21.8
空白对照组 -  10  228.0±25.3  238.0±24.9
本发明低剂量组 1.26  10  228.0±23.5  225.0±18.0
本发明中剂量组 2.52  10  231.0±22.8  228.5±22.2
本发明高剂量组 5.04  10  229.0±24.1  237.0±17.0
阳性对照组 1.00  10  228.5±24.7  220.5±11.9
2、本发明对脂肪肝大鼠脏器重量变化的影响：模型组动物肝脏和脾脏重量比其他组有显著增高，而胸腺重量则有所减轻，结果见表6。
表6  本发明对脂肪肝大鼠脏器重量变化的影响    (g， x±sd)
组别   给药量(g/kg) 动物数(只) 肝脏 脾脏 胸腺
模型组  -  10  8.76±1.06 1.24±0.37  0.40±0.12
空白对照组  -  10  6.64±1.65** 0.92±0.18*  0.55±0.10**
本发明低剂量组 1.26  10  7.68±0.62* 0.98±0.20  0.43±0.08
本发明中剂量组 2.52  10  7.47±0.54** 0.96±0.18*  0.45±0.13
本发明高剂量组 5.04  10  7.32±0.83** 0.86±0.41**  0.52±0.09*
阳性对照组 1.00  10  7.28±0.98** 0.88±0.29*  0.53±0.12*
注：与模型组比较*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001
3、本发明对脂肪肝大鼠生化指标的影响：本发明能明显降低总胆固醇和甘油三酯含量，高剂量组能有效升高血清中高密度酯蛋白胆固醇含量，结果见表7～8。
表7  本发明对脂肪肝大鼠血液生化指标的影响    ( x±sd)
组别 给药量(g/kg)  动物数(只)  T-ch(mmol/L) TG(mmol/L)  HDL-c(mmol/L)
模型组 -  10  0.90±0.17 0.84±0.23  0.54±0.12
空白对照组 -  10  0.68±0.16** 0.65±0.17*  0.75±0.17**
本发明低剂量组 1.26  10  0.65±0.15** 0.77±0.12  0.57±0.09
本发明中剂量组 2.52  10  0.63±0.15** 0.65±0.16*  0.64±0.13
本发明高剂量组 5.04  10  0.56±0.19*** 0.61±0.16*  0.70±0.14*
阳性对照组 1.00  10  0.59±0.10*** 0.61±0.12*  0.69±0.17*
注：与模型组比较*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001
表8  本发明对脂肪肝大鼠肝脏生化指标的影响( x±sd)
组别 给药量(g/kg)  动物数(只)  T-ch(mmol/L) TG(mmol/L)
模型组 -  10  0.66±0.10 0.65±0.14
空白对照组 -  10  0.52±0.11** 0.40±0.08***
本发明低剂量组 1.26  10  0.53±0.15* 0.50±0.16*
本发明中剂量组 2.52  10  0.49±0.13** 0.46±0.20*
本发明高剂量组 5.04  10  0.43±0.17** 0.45±0.13**
阳性对照组 1.00  10  0.49±0.11** 0.50±0.18*
注：与模型组比较*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001
4、肝脏组织切片镜检结果表明，本发明低、中、高剂量组动物肝脏脂肪变性程度都比模型组动物明显减轻。
本发明的毒理学试验：
一、急性毒性试验
由于本发明毒性较低，无法测出口服LD50值，且该药中含有生药粉不宜腹腔注射，故本实验仅以最大浓度和最大给药体积进行小鼠和大鼠口服最大耐受量试验。分别取小鼠、大鼠各20只，雌雄各半，先禁食16小时，然后用200mg/ml(最大浓度)浓度的本发明混悬液，小鼠按0.4ml/10g体重、大鼠按2ml/100g体重灌胃给药，每隔4小时给药一次，连续给药3次，给药后观察7天内动物的外观行为、摄食、粪便和死亡情况及毒性反应，未死亡动物于7天后处死进行尸检。结果为动物无一死亡，外观行为无异常，活动自如，无兴奋及抑制现象，摄食量分别为小鼠6.5±1.3g/天、大鼠30.6±4.3g/天，粪便呈颗粒状，无拉稀现象，毛色柔顺有光泽，尸检示主要脏器肉眼观察均无异常改变。结果表明小鼠最大耐受量为60.48g/kg，相当于临床成人用量的382.78倍，大鼠最大耐受量为30.24g/kg，相当于临床成人用量的191.39倍(临床成人用量为9.45生药/60kg)。
二、长期毒性试验
SD大鼠160只，体重80-100g，随机分为四组，每组40只，雌雄各半，即空白对照组(给予等体积生理盐水)及本发明高、中、低剂量组(分别按10.08、5.04、2.52g生药/kg给药)，每周连续灌服给药6天，停药一天，连续6个月，给药结束后观察2周。结果示给药三个月、给药结束、观察期结束后三个给药剂量组动物均未见明显毒性反应，采食、饮水、排粪、增重均正常，血常规、血液生化指标及病理学检查与对照组相比无明显差异。高剂量相当于人用剂量的80倍，提示本发明用于临床比较安全。
具体实施方式
下面通过实施例进一步对本发明加以说明，所列实施例中每份的量均以100克计。
实施例1
配方：甲壳1.5份，制何首乌1.4份，茵陈1.4份，丹参1份，牛膝1份。
制备工艺：按配方取甲壳用80％乙醇浸泡24小时，取出，60℃干燥2小时，粉碎成细粉，备用；按配方取制何首乌、丹参、茵陈、牛膝加80％乙醇回流提取3次，每次8倍量，提取2小时，滤过，滤液合并，回收乙醇；滤液浓缩至60℃时相对密度为1.1，得浸膏；加入甲壳粉混匀，加入适量辅料，按常规方法制成胶囊。
实施例2
配方：甲壳3份，制何首乌2份，茵陈2份，丹参1.5份，牛膝1.5份。
制备工艺：按配方取甲壳用60％乙醇浸泡36小时，取出，40℃真空干燥4小时，粉碎成细粉，备用；按配方取制何首乌、丹参、茵陈、牛膝加60％乙醇回流提取3次，每次10倍量，提取2小时，合并回流液，放冷后，0～4℃静置冷藏12小时，过滤，回收乙醇；滤液浓缩至60℃时相对密度为1.2，得浸膏；加入甲壳粉混匀，加入适量辅料，按常规方法制成片剂。
实施例3
配方：甲壳2份，制何首乌2.8份，茵陈2.8份，丹参2份，牛膝2份。
制备工艺：按配方取甲壳用90％乙醇浸泡12小时，取出，80℃间歇烘干2次，每次3小时，-10℃冷冻24小时后粉碎成细粉，备用；按配方取制何首乌、丹参、茵陈、牛膝加90％乙醇回流提取2次，每次6倍量，提取2小时，滤过，滤液合并，回收乙醇；将所得滤液浓缩至60℃时相对密度为1.2，再加乙醇至含醇浓度为80％，静置12小时，过滤回收乙醇，浓缩液喷雾干燥成细粉。加入甲壳粉混匀，加入适量辅料，按常规方法制成颗粒剂。
实施例4
配方：甲壳1份，制何首乌1份，茵陈1份，丹参0.7份，牛膝0.7份。
制备工艺：按配方取甲壳用80％乙醇浸泡12小时，取出，80℃真空干燥1小时，粉碎成细粉，备用；按配方取制何首乌、丹参、茵陈、牛膝加75％乙醇回流提取2次，每次4倍量，提取2小时，滤过，滤液合并，回收乙醇；将所得滤液浓缩至50℃时相对密度为1.1，再加乙醇至含醇浓度为70％，静置18小时，过滤回收乙醇，浓缩液喷雾干燥成细粉。加入甲壳粉混匀，加入适量辅料，按常规方法制成胶囊。

Claims (10)

1、一种治疗和预防脂肪肝的中药，其特征在于它是主要由下列重量份的原料药制成：
甲壳1～3份，制何首乌1～2.8份，茵陈1～2.8份，丹参0.7～2份，牛膝0.7～2份。
2、根据权利要求1所述的治疗和预防脂肪肝的中药，其特征在于各重量份的原料药优选：
甲壳1.5份，制何首乌1.4份，茵陈1.4份，丹参1份，牛膝1份。
3、根据权利要求1或2所述治疗和预防脂肪肝的中药，其特征在于所说的药剂是任何一种药剂学上所说的剂型。
4、根据权利要求3所述治疗和预防脂肪肝的中药，其特征在于所说的药剂可以是丸剂、片剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、滴丸剂、糖浆剂、酒剂、口服液剂、注射剂。
5、根据权利要求1或2所述的治疗和预防脂肪肝的中药，其特征在于所用甲壳原料为海虾壳、蟹壳、蝤蛑壳。
6、一种治疗和预防脂肪肝的中药的制备工艺，其特征是包含下列步骤：
a.按配方取甲壳用60-90％乙醇浸泡12-36小时，取出，40-80℃干燥1-4小时，粉碎成细粉，备用；
b.按配方取制何首乌、丹参、茵陈、牛膝加60-90％乙醇回流提取2-3次，每次4-10倍量，提取1-4小时，滤过，滤液合并，回收乙醇；
c.将步骤b所得的滤液浓缩至30～60℃时相对密度为1.0至1.3，得浸膏；
d.加步骤a所得的甲壳粉混匀，加入适量辅料，制成所需剂型。
7、根据权利要求6所述的制备工艺，其特征是步骤a中甲壳干燥可以是真空干燥或间歇烘干，粉碎可以是-2～-10℃冷冻12～24小时后粉碎或常温粉碎。
8、根据权利要求6所述的制备工艺，其特征是步骤b为按配方取制何首乌、丹参、茵陈、牛膝加60-90％乙醇回流提取2-3次，每次4-10倍量，提取1-4小时，合并回流液，放冷后，0～4℃静置冷藏12～24小时，过滤，回收乙醇。
9、根据权利要求6所述的制备工艺，其特征是步骤c为将所得滤液浓缩至30～60℃时相对密度为1.1至1.2，再加乙醇至含醇浓度为60～90％，静置12～24小时，过滤回收乙醇，浓缩液喷雾干燥成细粉。
10、根据权利要求6或7所述的制备工艺，其特征在于所用甲壳原料为海虾壳、蟹壳、蝤蛑壳。
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