CN1251745C - 一种治疗肝胆疾病的药物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种治疗肝胆疾病的药物，所述药物由小花清风藤、栀子、石斛、三七制成。该药物具有清利湿热、和胃化瘀的功效，主治肝胆湿热兼有瘀滞之黄疸，可用于现代医学中的病毒性肝炎如甲型肝炎、乙型肝炎等的治疗。
Description
发明领域
本发明涉及一种治疗肝胆疾病的药物及其制备方法，更具体而言，它涉及一种治疗肝胆湿热兼有瘀滞之黄疸，即现代医学中的病毒性肝炎如甲型肝炎、乙型肝炎等疾病的药物及其制备方法。
背景技术
现代医学认为：病毒性肝炎是由多种肝炎病毒引起的一种发病率较高的传染病，并分为甲、乙、丙、丁、戌五型，均以食欲减退、乏力恶心、肝肿大及肝功能损害为其特征，即HAN(甲型肝炎病毒)、HBV(乙型肝炎病毒)等经肠道或血液侵入体内，形成病毒血症，在肝细胞内复制，易致肝细胞损害。急性重症型肝炎，则黄疸迅速加深，肝脏迅速缩小，有出血倾向，腹水、肝臭和急性肾功能衰竭，并伴有神经症状。乙型肝炎是病毒在肝细胞内通过一系列免疫反应，使肝脏受累，发病大都缓慢，但治疗比较困难。目前西医治疗病毒性肝炎的方法是：(1)隔离；(2)卧床休息；(3)用保肝药物治疗，例如使用VB、Vc、VK4、肌苷、肝泰乐、肝细胞生长因子等；(4)应用抗病毒药物如干扰素、聚肌胞治疗；(5)用免疫调节药物治疗，例如胸腺素、转移因子、猪苓多糖等。西医西药方法不仅疗程长且麻烦、治疗费用昂贵，而且治愈率不高，易复发，不能根治病毒性肝炎。
运用中草药等天然药物治疗病毒性肝炎，多年来一直在进行研究和探索。中医认为，病毒性肝炎，特别是乙型病毒性肝炎的病因主要是“湿”，湿邪内停，一方面可以郁积而易于化热，另一方面又每每阻压脉道，致使血液运行障碍，形成瘀血，所以其病机多为湿热内阻，兼有瘀血，病变部位涉及肝胆脾胃。其治疗以祛湿为要，李东垣谓：“治湿不利小便，非其治也”，故治疗病毒性肝炎应以清热利湿为主，兼以活血化瘀。又，脾主运化水湿，脾胃运化功能正常，有助湿邪化散，所以病毒性肝炎之治疗需辅以健健脾益胃之品。据此，本发明药物以清热利湿、和中化瘀为组方法度，使湿去热清、瘀化脾健、肝胆气机和利，从而发挥良好的治疗病毒性肝炎之作用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗肝胆疾病的药物，所述药物由以下原料药制成：
小花清风藤 30-50重量份 栀子6-10重量份
石斛 6-10重量份 三七3-5重量份。
在本发明的一个实施方案中，本发明治疗肝胆疾病的药物由以下重量配比的原料药制成：
小花清风藤 30重量份 栀子6重量份
石斛 6重量份 三七3重量份。
在本发明的另一个实施方案中，本发明治疗肝胆疾病的药物的剂型为丸剂、片剂、颗粒剂或胶囊剂。
在本发明的进一步的另一个实施方案中，本发明治疗肝胆疾病的药物的剂型为胶囊剂。
本发明的另一目的在于提供一种制备上述治疗肝胆疾病的药物的方法，所述方法包括以下步骤：
A.将小花清风藤水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩，至相对密度约为1.05-1.10(70-80℃)，待冷至室温，搅拌下缓缓加入乙醇，使含醇量达70％，充分搅拌使沉淀，静置12小时，滤过，回收乙醇至无醇味，并浓缩成相对密度1.32-1.35(60-65℃)的稠膏；
B.石斛、栀子分别加三倍量70％的乙醇加热回流提取3小时，收集提取液，再加二倍量的70％的乙醇加热回流2小时，收集提取液，合并提取液，滤过，回收乙醇，浓缩成稠浸膏；
C.将三七粉碎成细粉；
D.将以上成分混合制成各种常规制剂。
在本发明的一个优选的实施方案中，所述方法包括以下步骤：
A.将小花清风藤水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩，至相对密度约为1.05-1.10(70-80℃)，待冷至室温，搅拌下缓缓加入乙醇，使含醇量达70％，充分搅拌使沉淀，静置12小时，滤过，回收乙醇至无醇味，并浓缩成相对密度1.32-1.35(60-65℃)的稠膏；
B.石斛、栀子分别加三倍量70％的乙醇加热回流提取3小时，收集提取液，再加二倍量的70％的乙醇加热回流2小时，收集提取液，合并提取液，滤过，回收乙醇，浓缩成稠浸膏；
C.将三七粉碎成细粉；
D.将以上成分混合制成丸剂、片剂、颗粒剂或胶囊剂。
在本发明的另一个优选的实施方案中，所述方法包括以下步骤：
A.将小花清风藤水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩，至相对密度约为1.05-1.10(70-80℃)，待冷至室温，搅拌下缓缓加入乙醇，使含醇量达70％，充分搅拌使沉淀，静置12小时，滤过，回收乙醇至无醇味，并浓缩成相对密度1.32-1.35(60-65℃)的稠膏；
B.石斛、栀子分别加三倍量70％的乙醇加热回流提取3小时，收集提取液，再加二倍量的70％的乙醇加热回流2小时，收集提取液，合并提取液，滤过，回收乙醇，浓缩成稠浸膏；
C.将三七粉碎成细粉；
D.将上述稠膏和三七细粉混合，加入适量糊精及适量乙醇，混匀制成颗粒，干燥，装入胶囊。
本发明药物是发明者在苗族民间通过大量的临床研究观察而得到的，该药治疗乙型肝炎疗效显著。在本发明的一个实施方案中，本发明者采用现代科技，提取原料中药的有效成分，并制成胶囊，便于服用，质量稳定、可控。体内外药理实验初步证明，本发明药物在体外可使HBsAg转阴率达到76.9％，HBeAg转阴率达到60.9％，在体内可使乙型肝炎病毒转阴率达到12-23％(给药10天)，并可保护肝功能，疗效显著，急性毒性实验未件毒副反应，且显著优于组成该复方的主要单味药，又略优于同类品种“花栀清肝颗粒”，是治疗乙型肝炎的安全、高效新药。
[药理、毒理学研究]
一、主要药效学研究
1.本发明药物的体外抗乙肝病毒活性研究
实验方法：实验用HBV-DNA转染人类肝癌细胞株HepG-2所建立的2.2.15细胞株，接种于24孔培养板，37、48小时后，换用含不同药物浓度的培养液，此后每3天换一次，共2次。8天后收集上清液，-20℃保存，待检测HbsAg和HbeAg，同时测定药物的细胞毒性。
药效用治疗指数TI评价受试药物的HBV活性，TI＝CD50/ID50，当TI＝＜1时，受试药物为低效有毒，当1＜TI＜2时，受试药物有效有毒，当TI＞2.1时，受试药物高效低毒，TI越大，表明药物对HBV的抑制作用越强，细胞毒性越小。试验以花栀清肝颗粒(贵州心意药业有限公司出品)为阳性对照组。
实验结果：结果看到，本发明药物浓度为40μg/ml时，对HBsAg的抑制强度为76.9％，TI值为2.8023对HBeAg的抑制强度为60.9％，TI值为1.6569，并明显优于本发明药物的主要单味药小花清风藤等药，又略优于花栀清肝颗粒，表明本发明药物在体外有显著的抗乙肝病毒作用(详见表1、表2)。
表1.本发明药物体外对HBsAg的抑制率(％)
| 组别 | 给药浓度 | |||
| 40μg/ml | 10μg/ml | 2.5μg/ml | TI值 | |
| 本发明药物花栀清肝颗粒小花清风藤栀子石斛 | 76.969.553.147.848.2 | 58.053.335.637.335.2 | 12.810.218.915.312.4 | 2.80732.42151.850150.98000.9834 |
表2、本发明药物体外对HBeAg的抑制率(％)
| 组别 | 给药浓度 | |||
| 40μg/ml | 10μg/ml | 2.5μg/ml | TI值 | |
| 本发明药物花栀清肝颗粒小花清风藤栀子石斛 | 60.952.257.062.559.8 | 45.237.727.241.724.7 | 1.01.22.613.212.4 | 1.65691.48540.86731.79001.0723 |
2.本发明药物的体内抗乙肝病毒活性研究
实验材料：(1)药物：本发明药物，由贵州省黔西南州吉仁堂药液提供，临用时以生理盐水稀释成需要浓度。阳性对照药为拉米夫定，由葛兰素威康制药公司生产。(2)病毒：鸭乙肝病毒DNA(DHBV-DNA)强阳性血清，采自上海麻鸭。(3)动物：1日龄北京鸭，购自北京前进种鸭动物饲养场。(4)主要试剂：Sephex ML-50，Ficoll PVP，购自瑞典Pharmacia公司。
实验方法：DHBV以静脉注射方式感染鸭7天后，随机分6组，即病毒对照组、阳性药对照组(花栀清肝颗粒、拉米夫定)以及本发明药物的3个剂量组。每组6只，当日开始给药，本发明药物0.5-2g/kg，一日2次，连续10日。给药前(T0)、给药后第5天(T5)、第10天(T10)和停药后第3天(P3)分别从鸭腿静脉取血，分离血清，在酶标仪测定OD值(滤光片为490nm)，计算血清DHBV-DNA密度，并计算出对DHNA-DNA的抑制率％。
实验结果：实验表明，本发明药物对肝炎鸭血清DHBV-DNA水平的抑制效果显著，P＜0.05-0.01(见表3)。
表3本发明药物对鸭乙型肝炎的DHNA-DNA血清的抑制率(％)
| 组别 | 剂量g/kg | 鸭数只 | 抑制率(％) | ||
| T5 | T10 | P3 | |||
| 对照本发明药物本发明药物本发明药物花栀清肝颗粒拉米夫定 | 0.51.02.01.00.05 | 666666 | -10.54-13.064.5723.47**13.25*39.39** | -0.94-12.5416.82**14.11*13.21*42.05** | 6.52-12.4318.79**12.16*15.02*15.59* |
注：与对照组比，*P＜0.05，**P＜0.01。
3.本发明药物的保肝作用研究
实验材料：(1)药物：本发明药物，由贵州省黔西南州吉仁堂药业公司提供；阳性对照药：联苯双酯，浙江医药股份有限公司新昌制药厂生产。(2)动物：健康ICR小鼠，雄性，体重20-24g，由北京维康利华实验动物中心提供，合格证号：SCXK(京)2002-0003号。(3)试剂：谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)试剂盒，由北京中生公司提供；D-氨基半乳糖、内毒素，均为Sigma公司产品；四氯化碳，为天津南开化工厂产品。
实验方法与结果：(1)本发明药物抗四氯化碳性肝损伤。取ICR小鼠52只，随机分为5组，分组见表4。小鼠连续给药7天，末次给药后1小时，模型组和给药组按10ml/kg灌胃给予0.1％四氯化碳(精制花生油为溶剂)，正常组灌胃等体积精致花生油。24小时后眼眶静脉取血，分离血清，全自动生化仪测定ALT、AST活力。结果表明，本发明药物对四氯化碳性急性肝损伤有显著保护作用，详见表4。
表4本发明药物对四氯化碳性肝损伤的保护作用(x±s)
| 组别 | 剂量g/kg | 动物数只 | 肝功能(IU/ml) | |
| ALT | AST | |||
| 正常模型本发明药物本发明药物联苯双酯 | --11224粒/kg | 1012101010 | 40.6±23.9414.8±143.0347.7±53.6*497.1±127.6230.8±62.7* | 118.9±22.8338.5±142.1280.4±98.4*429.5±124.8122.6±33.4* |
注：与模型组比，*＜0.05。
(2)本发明药物对D-半乳糖与内毒素联合致肝损伤的保护作用。实验用ICR小鼠50只，随机分为5组，分组见表5。小鼠连续给药7天，末次给药后1小时，模型组和给药组按500mg/kg灌胃给予D-半乳糖及内毒素80ug/只，10小时后眼眶静脉取血，分离血清，全自动生化仪测定ALT、AST活力。结果表明，本发明药物对四氯化碳性急性肝损伤有显著保护作用，详见表5。
表5本发明药物对D-A半乳糖及内毒素联合致肝损伤的保护作用
(x±s)
| 组别 | 剂量g/kg | 动物数只 | 肝功能(IU/ml) | |
| ALT | AST | |||
| 正常模型本发明药物本发明药物联苯双酯 | --11225粒/kg | 1010101010 | 21.2±1.69506±83143793±43154891±77201615±1507** | 94.4±15.55930±50242161±2496*2741±44321302±1169** |
注：与模型组比，*＜0.05，**＜0.01。
(3)本发明药物对醋酸氨性肝损伤的保护作用。取ICR小鼠54只，随机分为5组，分组见表6。小鼠连续给药7天，末次给药后1小时，模型组和给药组按350mg/kg给予醋酸氨腹腔注射，24小时后眼眶静脉取血，分离血清，全自动生化仪测定ALT、AST活力。结果表明，本发明药物对醋酸氨性急性肝损伤有显著保护作用，详见表6。
表6本发明药物对醋酸氨性肝损伤的保护作用(x±s)
| 组别 | 剂量g/kg | 动物数只 | 肝功能(IU/ml) | |
| ALT | AST | |||
| 正常模型本发明药物本发明药物联苯双酯 | --11224粒/kg | 99999 | 29.6±5.9743.1±244.7451.6±188.1*554.6±344.0200.4±65.4** | 119.2±29.2552.1±120.1363.3±169.7*410.9±177.6337.4±121.9** |
注：与模型组比，*＜0.05，**＜0.01。
5.2急性毒性研究
实验动物：ICR小鼠，SPF级，雌雄各半，体重18-22g。
临床拟用剂量：本发明药物成人1日用量为45g，按人平均体重60kg计算，成人日用量0.75g/kg。
实验方法：预实验看到，本发明药物测不出小鼠的半数致死量，故测试小鼠对本品的最大耐受量。20只小鼠实验前禁食12小时，每只小鼠按0.4ml/10g体重给药1次，剂量相当于成人用量的198倍，给药后观察动物的活动、摄食、饮水、排便等情况，每日1次，连续7日，至第7日处死动物，解剖检查脏器，结果均未见异常。实验证明，小鼠对该药的最大耐受量为临床用药量的198倍，未见急性毒性反应。
具体实施方式
实施例1
投料：小花清风藤667g、栀子133g、石斛133g、三七67g，共计1000g。
制备：
(1)将小花清风藤水加10倍量水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩，至相对密度约为1.05-1.10(70-80℃)，待冷至室温，搅拌下缓缓加入乙醇，使含醇量达70％，充分搅拌使沉淀，静置12小时，滤过，回收乙醇至无醇味，并浓缩成相对密度1.32-1.35(60-65℃)的稠膏；
(2)石斛、栀子分别加三倍量70％的乙醇加热回流提取3小时，收集提取液，再加二倍量的70％的乙醇加热回流2小时，收集提取液，合并提取液，滤过，回收乙醇，浓缩成稠浸膏；
(3)将三七粉碎成细粉；
(4)将上述稠膏和三七细粉混合，加入适量糊精及适量乙醇，混匀制成颗粒，干燥，装入胶囊(每粒0.25g)。
每次服用3粒，每日3次，温开水送服，30日一个疗程。
实施例2
投料：小花清风藤30g、栀子6g、石斛6g、三七3g。
制备步骤同实施例1。
实施例3
投料：小花清风藤30g、栀子10g、石斛10g、三七5g。
制备步骤同实施例1。
实施例4
投料：小花清风藤50g、栀子10g、石斛10g、三七5g。
制备步骤同实施例1。
实施例5
投料：小花清风藤30g、栀子6g、石斛10g、三七5g。
制备步骤同实施例1。
实施例6
投料：小花清风藤30g、栀子6g、石斛6g、三七5g。
制备步骤同实施例1。
实施例7
投料：小花清风藤50g、栀子6g、石斛10g、三七3g。
制备步骤同实施例1。
实施例8
投料：小花清风藤50g、栀子6g、石斛6g、三七5g。
制备步骤同实施例1。
实施例9
投料：小花清风藤50g、栀子6g、石斛10g、三七5g。
制备步骤同实施例1。
实施例10
投料：小花清风藤50g、栀子10g、石斛10g、三七5g。
制备步骤同实施例1。
Claims (7)
1.一种治疗乙肝的药物，其特征在于它由以下重量配比的原料药制成：
小花清风藤 30-50重量份 栀子6-10重量份
石斛 6-10重量份 三七3-5重量份。
2.如权利要求1所述的治疗乙肝的药物，其特征在于它由以下重量配比的原料药制成：
小花清风藤 30重量份 栀子6重量份
石斛 6重量份 三七3重量份。
3.如权利要求1或2所述的治疗乙肝的药物，其特征在于所述药物的剂型为丸剂、片剂、颗粒剂或胶囊剂。
4.如权利要求1或2所述的治疗乙肝的药物，其特征在于所述药物的剂型为胶囊剂。
5.如权利要求1或2所述的治疗乙肝的药物的制备方法，其特征在于它包括以下步骤：
A.将小花清风藤水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩，至70-80℃下的相对密度约为1.05-1.10，待冷至室温，搅拌下缓缓加入乙醇，使含醇量达70％，充分搅拌使沉淀，静置12小时，滤过，回收乙醇至无醇味，并浓缩成60-65℃下的相对密度1.32-1.35的稠膏；
B.石斛、栀子分别加三倍量70％的乙醇加热回流提取3小时，收集提取液，再加二倍量的70％的乙醇加热回流2小时，收集提取液，合并提取液，滤过，回收乙醇，浓缩成稠浸膏；
C.将三七粉碎成细粉；
D.将以上成分混合制成各种常规制剂。
6.如权利要求5所述的治疗乙肝的药物的制备方法，其特征在于在步骤D中将各成分混合制成丸剂、片剂、颗粒剂或胶囊剂。
7.如权利要求5所述的治疗乙肝的药物的制备方法，其特征在于在步骤D中将稠膏和三七细粉混合，加入适量糊精及适量乙醇，混匀制成颗粒，干燥，装入胶囊。
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