CN1491678A - 一种中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗腰椎间盘突出的中药组合物及其制备方法，本发明还公开了一种中药组合物胶囊的质量控制方法。本发明中药组合物是由下列原料制成的：三 七100－400重量份；川 芎200－500重量份；延胡索200－500重量份；白 芍200－500重量份；牛 膝200－500重量份；狗 脊100－400重量份；熟大黄100－400重量份；独 活100－400重量份。本发明药物制剂治疗腰椎间盘突出有显著疗效。

Description

一种中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种中药组合物及其制备方法，特别是涉及一种治疗腰椎间盘突出的中药组合物及其制备方法。

背景技术

腰椎间盘突出症是中医骨伤科临床最为常见的疾病，属中医学“腰痛候”范畴。该病多由血瘀气滞、脉络闭阻等因素引起，治宜活血化瘀，通络止痛。

发明内容

本发明目的在于提供一种治疗腰椎间盘突出的中药组合物及其制备方法；本发明目的还在于提供一种中药组合物的质量控制方法。

本发明目的是通过如下技术方案实现的：

三  七100-400重量份    川  芎200-500重量份

延胡索200-500重量份    白  芍200-500重量份

牛  膝200-500重量份    狗  脊100-400重量份

熟大黄100-400重量份    独  活100-400重量份

以上八味，取一半三七粉碎成细粉，另器保存，另一半三七粉碎成粗粉；取延胡索、川芎、独活粉碎成粗粉，与三七粗粉合并，用4-8倍量65-85％乙醇渗漉，制成流浸膏；白芍、牛膝、狗脊及熟大黄加水浸透后煎煮1-2次，每次30-90分钟，提取液浓缩至相对密度为50℃1.15～1.20，加入乙醇使含醇量达60-90％，冷藏24小时以上，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.15～1.20，加入乙醇使含醇量达60-90％，冷藏24小时以上，滤过，滤液回收乙醇并浓缩，加入上述流浸膏，回收乙醇并浓缩至稠膏状，干燥，加入三七细粉混匀，加常规辅料制成临床可接受的剂型，如口服液、胶囊、颗粒剂、片剂等。

鉴别：取胶囊内容物2g，研细，加甲醇20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，加浓氨试液调至碱性，加乙醇20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每ml含1mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各3μl，分别点于同一以1％氢氧化钠制备的硅胶G薄层板上，以8-12∶3-5∶0.6-1.2正己烷一氯仿一甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在空气中挥尽板上吸附的碘后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材细粉0.5g，加乙醚10ml，振摇3-6分钟，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8-10∶0.5-1.5正己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加甲醇10ml，振摇提取3-6分钟，取上清液作为供试品溶液；另取白芍对照药材0.5g，加乙醇10ml振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；再取芍药甙对照品，加乙醇制成每ml含1mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30-45∶4-6∶7-11∶0.1-0.3氯仿-醋酸乙酯一甲醇一甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛浓硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；；取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液；再取大黄素、大黄酚对照品，加甲醇制成每ml含1mg的对照品混合溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以12-16∶4-6∶0.5-1石油醚一甲酸乙酯一甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干；置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点；置氨气中熏后，日光下检视，斑点变为红色；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；另取独活对照药材1g，加乙醚10ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿2ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液及供试品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以1-3∶o.5-1.5∶o.5-1.5正己烷-苯一醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

含量测定∶精密称取胶囊内容物0.5g，置索氏提取器中，加乙醚适量，回流提取1-3小时，弃去乙醚液，滤纸筒取出，晾干，再置索氏提取器中，加甲醇适量，回流提取至无色，提取液回收甲醇至干，残渣以20ml水溶解；置分液漏斗中，以水饱和的10-20ml正丁醇提取4-6次，合并提取液，以正丁醇饱和的20-40ml水洗涤2-4次；弃去水液，正丁醇提取液减压回收至干；残渣用甲醇溶解，转移至10ml的量瓶中，加甲醇并稀释至刻度，作为供试品溶液；另取人参皂甙Rg₁对照品，精密称定，加甲醇制成每ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2μl，对照品溶液1μl、2μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以13-16∶35-45∶18-24∶8-12氯仿-醋酸乙酯一甲醇一水10℃以下放置12-24小时后的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％的硫酸乙醇溶液，在100～105℃烘4～5分钟，至斑点显色清晰，取出，覆盖同样大小的玻璃板，以胶条将边缘密封，照薄层色谱法进行扫描，波长λ_S＝535nm，λ_R＝650nm，测量供试品与对照品的吸收度积分值，以外标两点法计算，即得；每粒胶囊内容物含人参皂甙Rg₁应不少于7.2mg。

本发明药物制剂(腰痹通胶囊)由三七、川芎、延胡索等八味中药组成，具有活血化瘀，祛风除湿、行气止痛之功能。临床用于治疗腰椎间盘突出症观察患者200例取得较好疗效。发明人还根据其功能、主治，从腰神经根炎、镇痛、抗炎、活血等方面对其主要药效学进行了研究。

受试药物：腰痹通胶囊，由吉林通榆制药厂生产，批号980201，含7.4g生药/g颗粒；腰痛宁，河北省承德中药厂生产，批号980108。

腰痹通胶囊小鼠剂量为12.8、6.4、3.2g生药/kg；大鼠剂量为6.4、3.2、1.6g生药/kg三个剂量组，临床用量为30Z，试验用剂量按动物与人(人按70公斤计算，用药量为0.429g生药/kg)体表系数折算，中剂量约相当于临床等效剂量，高剂量为中剂量的一倍；小剂量为中剂量的1/2。阳性对照药腰痛宁小鼠用量为0.4g颗粒/kg，大鼠用量为0.2g颗粒/kg，相当于临床等效剂量。对照组给予相同体积的蒸馏水。

动物：小白鼠，瑞士种，雄性，体重20±1g；大白鼠，Wistar系，雄性，体重120±10g均由中国医学科学院动物研究所提供，动物合格证号分别为＜医动字＞01-3008、01-3001。

实验例1：腰痹通胶囊对大鼠腰神经根炎的影响

受试药物、动物均同前。

试剂：P物质放射免疫测定药盒，由中国医学科学院基础医学研究所生理室提供；PGE₂(前列腺素)、6-Keto-PGF_1a和TXB₂放射免疫测定药盒均由中国医学科学院基础医学研究所药理室提供。

仪器：SEM-4101型刺激器、VC-10示波器、隔离器、DAT-1100叠加器均I：(一)日本光电电子义器公司出产；FJ-2100液闪仪由西安262厂生产。

模型制作：将大鼠用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(30mg/kg体重)，常规备皮、消毒、铺小，以骶骨上方第二棘突为中心，沿棘突纵行切开皮肤及皮下组织，切口约为1.5cm，用尖刀锐性分离棘突两侧的肌肉，暴露棘突及两侧椎板，用咬骨钳咬开两侧横突以上椎板，并向上翻起，暴露出椎管内的脊髓，用神经剥离子将脊髓椎向右侧，显露出左侧腰5神经根，将浸有福尔马林的定量(2.1mg)滤纸片放在左侧腰5神经根的腋下，使上翻的椎板复原。仔细上血，逐层缝合，无菌包扎。

模型大鼠按体重随机分为五组，腰痹通胶囊6.4g、3.2g、1.6g生药/kg三组，腰痛宁0.2g颗粒/kg一组，模型对照组给予凉开水。连续灌胃给药，一日两次。

从表1结果可以发现，所有给药组均能显著降低腰神经根炎大鼠淋细胞数，高、中剂量组的腰痹通胶囊明显优于腰痛宁组。

表1腰痹通胶囊对大鼠颈神经根炎的病理学观察I(x±s)

组别        剂量(g/kg)       鼠数(只)      淋巴细胞数量(个)           降低率(％)

模型组         --              10            432.05±56.09

               6.4             10            168.17±36.47***^￥￥￥    61.08

腰痹通胶囊     3.2             10            237.65±27.89***^￥￥￥    45.00

               1.6             10            367.42±33.65**           12.88

腰痛宁         0.2             10            358.04±33.87**           17.19

与模型组相比*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001(以下同)

腰痹通胶囊各组与腰痛宁组相比^￥P＜0.05，^￥￥＜0.01，^￥￥￥P＜0.001(以下同)

表2结果可以发现，所有给药组造模42天胶原纤维的面积明显低于模型对照组。高、中剂量组的腰痹通胶囊明显优于腰痛宁组。

表2腰痹通胶囊对大鼠腰神经根炎的病理学观察II( x±s)

组别       剂量(g/kg)          数量(只)      胶原纤维面积(像素)     降低率(％)

模型组         --                 10          82286.53±9856.75

               6.4                10          33361.09±4616.90***    59.46

                                             ^￥￥￥

腰痹通胶囊     3.2                10          42135.70±6053.68***    48.79

                                             ^￥￥￥

               1.6                10          71542.06±5674.85**     13.06

腰痛宁         0.2                10          68956.87±6842.64**     16.20

实验例2、腰痹通胶囊对大鼠腰神经根炎的电生理研究

从表3结果可以看出，治疗前各组大鼠N₁-P₁波幅相比，差异无显著性意义(P＞0.05)。治疗后所有给药组与模型组自身N1-P₁波幅差值明显降低，

更进一步地说明腰痹通胶囊可以很好地消除感觉传导障碍，促进神经根传导功能的恢复。

表3腰痹通胶囊治疗前后各组自身体感诱发电位比较( X±s)

                                        N₁-P₁波幅(uw)

组别             剂量(g/kg)       鼠数(只)

                                                治疗前        治疗后(差值)

模型组              --               10       0.571±0.216    0.457±0.198

腰痹通胶囊          6.4              10       0.568±0.219    1.362±0.256***

                                                             ^￥￥

                    3.2              10       0.569±0.221    1.271±0.287***

                                                             ^￥￥

                    1.6              10       0.571±0.218    0.852±0.244**

腰痛宁              0.2              10       0.570±0.220    0.986±0.301**

从表4可以看出，治疗前各组大鼠N₁波幅无显著性差异，治疗后所有给药组与模型组自身N₁波幅差值明显升高，说明腰痹通胶囊可以很好地消除感觉传导障碍，促进神经根传导功能的恢复。

表：4腰痹通胶囊治疗前后各组自身体感诱发电位比较( x±s)

               剂量          鼠数          N₁潜伏期(ms)

组别

              (g/kg)         (只)      治疗前          治疗后(差值)

模型组          --            10     5.587±1.791      -0.783±0.326

                6.4           10     5.596±1.724      -2.015±0.482***

                                                       ^￥￥￥

腰痹通胶囊      3.2           10     5.602±1.826      -1.894±0.469***^￥￥

                1.6           10     5.595±1.819      -1.093±0.427*

腰痛宁          0.2           10     5.597±1.820      -1.162±0.394*

实验例3：腰痹通胶囊对腰神经根炎大鼠神经根内P物质含量的测定(放射免疫测定法)

从表5结果可以看出，腰痹通胶囊三个剂量组在造模第7天、14天、28天的P物质含量非常明显的低于模型组，腰痹通胶囊高、中组明显好于腰痛宁组(P物质的含量升高，痛阈下降，疼痛敏感：反之，疼痛减轻)。

表5腰痹通胶囊对腰神经根炎大鼠神经根内P物质含量的影响( x±s)

             剂量       鼠数         P物质含量(fmol/mg)

组别

            (g/kg)      (只)       7天                14天             28天

模型组        --         10     747.50±85.08    668.43±72.82     530.12±88.32

              6.4        10     441.19±63.54*** 418.54±51.44***  358.56±41.57***

                               ^{￥￥￥           ￥￥             ￥￥}

腰痹通胶囊    3.2        10     518.43±60.81*** 460.18±47.36***  394.28±45.83***^￥

                               ^{￥              ￥}

              1.6        10     580.21±73.46*** 513.52±66.81***  456.17±60.44*

腰痛宁        0.2        10     599.66±75.56*** 507.23±51.08***  449.56±56.13*

实验例4、腰痹通胶囊对腰神经根炎大鼠血浆中前列脉素E₂(PGE₂)的影响

从表6结果可以看出，腰痹通胶囊高、中、低三个剂量组对腰神经根炎大鼠血浆中PGE₂的含量在不同时间均有不同程度的抑制作用(腰痹通胶囊高、中组明显好于腰痛宁组)。说明腰痹通胶囊是通过降低血浆中PGE₂的含量，减轻了炎症反应机制，控制炎症的进一步发展。同时，使炎性疼痛的超敏情况亦有所控制。

表6腰痹通胶囊对腰神经根炎大鼠血浆中PGE₂的影响( x±s)

              剂量                 鼠数PGE₂(pg/ml)

组别

             (g/kg)     (只)        7天                       14天                  28天

模型组         --        10      604.55±34.53           528.75±49.95         431.84±39.73

               6.4       10      502.76±31.60***^￥￥￥  409.26±41.18***^￥￥  334.97±34.65***^￥￥

腰痹通胶囊     3.2       10      531.58±30.27***^￥     424.65±42.76***^￥   360.50±32.44***^￥

               1.6       10      572.46±31.56*          456.41±39.74**       418.24±36.87

腰痛宁         0.2       10      560.72±30.04**         466.14±45.53**       395.77±31.76*

实验例5：腰痹通胶囊对腰神经根炎大鼠血浆中6一酮一前列腺素F_1a(6-Keto-PGF_1a)和血栓素B₂(TXB₂)的影响

从表7可以看出，造模28天后，腰痹通胶囊三个剂量组对腰神经根炎大鼠血浆内6-Keto-PGF_1a均有非常显著的提升作用；对TXB₂有非常显著的降低作用：从而影响了血管和血流的改变，使毛细血管通透性下降，控制了水肿发生的程度，血液凝集状态减轻，瘀血碱少，血流通畅。证实了腰痹通胶囊对气滞血瘀而致血内结的模拟腰神经根炎，有明显的活血化瘀作用。解释了腰痹通胶囊具有活血化瘀的作用。(且高、中剂量的腰痹通胶囊的效果明显优于腰痛宁组)。

表7腰痹通胶囊对腰神经根大鼠6-Keto-PGF_1a和TXB₂的影响( x±s)

组别         剂量       鼠数            6-Keto-PGF_1a                 TXB₂

            (g/kg)      (只)                             Pg/ml

模型组       --          20               48.62±4.16               204.58±29.16

             6.4         20               162.27±26.45***^￥￥￥    95.78 ±23.04***^￥￥￥

腰痹通胶囊   3.2         20               143.94±25.53***^￥￥￥    145.56±24.93***^￥￥￥

             1.6         20               105.36±25.64***          181.18±26.70*

腰痛宁       0.2         20               112.04±27.24***          179.46±25.93*

实验例6、腰痹通胶囊对腰神经根炎大鼠血液流变学的研究

从表8可以看出，造模28天后，腰痹通胶囊三个剂量组对腰神经根炎大鼠血液流变学的各项指标均有非常显著的疗效。证实了腰痹通胶囊对气滞血瘀而致瘀血内结的模拟腰神经根炎，有明显的活血化瘀作用。从而更好地解释了腰痹通胶囊具有活血化瘀的作用。(且高、中剂量的腰痹通胶囊的效果明显优于腰痛宁组)。

 表8、腰痹通胶囊对腰神经根炎大鼠血液流变学的观察( x±s)

实验例7、腰痹通胶囊的镇痛作用

由表9结果可见，腰痹通胶囊药后0.5小时就出现明显的镇痛作用，其作用可持续3小时以上，似优于腰痛宁组。

表9腰痹通胶囊对小鼠的镇痛作用(热板法)(n＝10)

            剂量                 药后痛阈变化值( x±s)秒

组别

            (g/kg)       0.5h              1.0h            2.0h           3.0h

对照组       --         13.6±2.0       14.1±2.3       15.1±2.4       16.2±3.2

            12.8        17.5±2.3***^￥ 19.1±2.7***^￥ 20.3±3.1***^￥ 21.4±3.4**

腰痹通胶囊  6.4         16.9±2.1**     18.6±2.0***^￥ 19.7±2.9***    20.8±2.8**

            3.2         15.2±2.1       16.0±2.6       17.5±2.7*      18.5±2.7

腰痛宁      0.4         14.9±1.9       17.2±2.5*      18.2±2.7*      19.6±2.8

由表10结果可见，腰痹通胶囊12.8、6.4、3.2g/kg三个剂量组均能明显降低小鼠因醋酸刺激引起扭体的发生频率，高剂量组的抑制率高达77.86％，提示腰痹通胶囊有较强的镇痛效果。

表10腰痹通胶囊对小鼠的镇痛作用(小鼠扭体法)

           剂量       鼠数       扭体次数            减少率

组别

          (g/kg)      (只)        ( x±s)             (％)

对照组      --         10        27.1±4.4

            12.8       10        6.2±3.3***^￥￥￥    77.86

腰痹通胶囊  6.4        10        12.3±3.2***^￥      54.61

            3.2        10        15.1±4.2***         44.28

腰痛宁      0.2        10        14.1±3.3***         47.97

各组与模型组相比*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001(以下同)

腰痹通胶囊各组与腰痛宁组相比^￥P＜0.05，^￥￥P＜0.01，^￥￥￥P＜0.001(以下同)

表11结果可以看出，注射致炎剂甲醛后，小鼠即出现疼痛反应。致炎后半小时，所有给药组均出现明显的镇痛作用。腰痹通胶囊高、中剂量组作用最长，可持续2小时以上。

表11腰痹通胶囊对小鼠的镇痛作用(甲醛致痛法)

           剂量        鼠数        致炎后不同时间痛反应分数( x±s)

组别

           (g/kg)      (只)       0.5h         1.0h        2.0h        3.0h

对照组       --         10       1.8±0.4    1.8±0.4    1.7±0.5    1.5±0.5

             12.8       10       0.8±0.5*** 0.9±0.5*** 1.1±0.4**  1.1±0.5*

腰痹通胶囊   6.4        10       0.9±0.6*** 1.0±0.6**  1.1±0.5*   1.1±0.5*

             3.2        10       1.0±0.7**  1.1±0.6**  1.3±0.5    1.3±0.5

腰痛宁       0.4        10       0.9±0.6*** 1.1±0.5**  1.2±0.4*   1.3±0.4

实验例8、腰痹通胶囊的抗炎作用

表12结果可见，腰痹通胶囊三个剂量组对巴豆油引起的小鼠耳肿胀均有明显的抑制作用。

表12腰痹通胶囊对巴豆油诱发小鼠耳水肿的抑制作用

           剂量        鼠数         耳肿肿胀值        抑制率

组别

           (g/kg)     (只)           ( x±s)mg         (％)

对照组       --        10            20.0±2.7

             12.8      10            12.4±2.6***^￥   38.0

腰痹通胶囊   6.4       10            13.9±2.9***      30.5

             3.2       10            15.8±3.0***      21.0

腰痛宁       0.4       10            14.2±2.5***      29.0

由表13结果表明，腰痹通胶囊三个剂量组对二甲苯引起小鼠皮肤毛细血管通透性增高有明显的拮抗作用。

表13腰痹通胶囊对小鼠皮肤毛细血管通透性的影响

             剂量           鼠数           光密度值          抑制率

组别

             (g/kg)         (只)            ( x±s)           (％)

对照组         --            10           0.363±0.17

               12.8          10           0.136±0.04***^￥   62.53

腰痹通胶囊     6.4           10           0.123±0.08***^￥   66.00

               3.2           10           0.170±0.14**       53.16

腰痛宁         0.4           10           0.170±0.06***      53.27

表14为在6小时的观察期间，腰痹通胶囊三个剂量组对角叉菜胶性小鼠踝关节肿胀均有不同程度的抑制效果，其作用持续时间为6小时以上。

表14腰痹通胶囊对小鼠角叉菜胶性踝关节肿胀的影响(n＝10)

             剂量                 致炎后肿胀值( x±s)mm

组别

           (g/kg)         给药后1h        给药后2h        给药后4h         给药后6h

对照组       --           1.08±0.16      1.32±0.15      1.39±0.09       1.24±0.13

             12.8         0.90±0.14*     1.10±0.14**    1.09±0.11***^￥ 0.95±0.17***

腰痹通胶囊   6.4          0.90±0.16*     1.04±0.16***^￥1.10±0.19***^￥ 0.92±0.14***

             3.2          1.01±0.17      1.05±0.11**    1.13±0.11*      0.96±0.12***

腰痛宁       0.4          1.04±0.15      1.14±0.16*     1.16±0.16*      1.03±014**

表15结果可见，所有给药组均能十分显著的抑制羧甲基纤维素诱发的炎症反应，使腹腔炎症性渗出液量和白细胞数均明显减少。

表15腰痹通胶囊对大鼠白细胞游走的影响( X±S)

           剂量          鼠数           渗出液      白细胞数X

组别

          (g/kg)         (只)            (ml)          10⁹/L

对照组      --            10           1.31±0.35    16.90±3.28

            12.8          10           0.83±0.46*   10.62±4.14***

腰痹通胶囊  6.4           10           0.84±0.45*   9.60±2.48***

            3.2           10           0.90±0.46*   10.03±2.50***

腰痛宁      0.4           10           0.94±0.39*   9.91±2.78***

由表16可见，腰痹通胶囊高、中、低三个剂量组对棉球肉芽组织增生有非常显著的抑制作用；相同剂量的腰痹通胶囊组明显优于腰痛宁组。

表16腰痹通胶囊对大鼠棉球肉芽肿增生的影响

            剂量          鼠数            肉芽肿干重           抑制率

组别

           (g/kg)          (只)           ( X±S)mg             (％)

对照组       --             10             95.0±5.0

             12.8           10             71.7±5.7***^￥￥     24.5

腰痹通胶囊   6.4            10             69.0±2.4***^￥￥￥    27.4

             3.2            10             73.4±4.1***          22.7

腰痛宁       0.4            10             77.5±5.8***          18.4

实验例9、活血作用研究

受试药物、动物均同前。

试剂：葡聚糖，瑞典Pharmacia公司

仪器：Olympus生物显微镜。

对小鼠微循环的影响

方法：将小鼠按体重随机分成5组，灌胃给药1小时后，腹腔注射1％戊巴比妥钠(50mg/kg)进行麻醉。剪去小鼠耳毛，将其置于显微镜载物台上，选择鼠耳：同一部位管经相同、流速相同的微静脉进行观察，并纪录造模前血流速度、管经大小。鼠尾静脉按1mg/kg注射5％葡聚糖造成循环障碍模型，立即观察并纪录血流速度、管经的变化情况。血流恢复正常的时间(小于0.5分钟按0.5分钟计，大于30分钟按30分计)。用t检验进行统训-学处理。

流速判断标准：

线流：流速快，光滑条索状，毫无颗粒感，判为“++++”；粒流：流速快，呈条索状，有颗粒感，判为“+++”；缓流：血流慢，有明显颗粒感，如泥沙样判为“++”；摆流：明显泥沙团块，进进停停，前后摆动，判为“+”；停滞：血流完全停止，判为“-”。为便于统计，血流速度用数值表示：“++++”定为4；“+++”定为3；“++”定为2；“+”定为1；“-”定为0。

表17腰痹通胶囊对小鼠微循环的影响( X±S)

               剂量        鼠数      静脉注射5％葡聚糖后变化值           恢复时间

组别

             (g/kg)       (只)         血流速度          管经(格)         (分)

对照组        --           10          -3.1±0.61        -0.4±0.70    17.85±8.87

              12.8         10          -1.3±0.67**      0.1±0.32*    1.23±0.36**

腰痹通胶囊    6.4          10          -1.8±0.94**      0.1±0.39     1.32±0.34**

              3.2          10          -1.8±0.87**      0.1±0.36     1.37±0.66**

腰痛宁        0.4          10          -2.0±1.27*       0.1±0.48     1.95±1.28**

注：1格相当于11.0um。

表17结果可以看出，腰痹通胶囊对5％葡聚糖所致小鼠微循环障碍有显著的保护作用。5％葡聚糖可使小鼠耳廓微静脉血流速度明显减慢，流速从“+++”减到“+”，出现明显泥沙团块，血流进进停停，前后摆动。而腰痹通胶囊高、中、低三个剂量组对葡聚糖所造成的微循环障碍均有十分明显的保护作用，使血流速度稍有减慢，与对照组相比有非常显著性差异；大剂量组有明显的扩张微静脉管经的作用；从血流恢复正常的时间结果看，腰痹通胶囊各剂量组均能显著缩短血流恢复正常的时间。

上述实验例证明本发明药物具有：对大鼠腰神经根炎的治疗作用；对物理性和化学性刺激引起的疼痛均有良好的镇痛效果；对急性和慢性炎症均有明显的抑制作用；对微循环障碍有显著的保护作用。

实施例：

三  七335g    川  芎445g    延胡索445g    白  芍445g

牛  膝445g    狗  脊335g    熟大黄3359    独  活335g

以上八味，取一半三七粉碎成细粉，另器保存；另一半三七粉碎成粗粉。取延胡索、川芎、独活粉碎成粗粉，与三七粗粉合并，用6倍量75％乙醇渗漉，制成流浸膏；白芍、牛膝、狗脊及熟大黄加水浸透后煎煮60分钟，提取液浓缩至50℃相对密度为1.15～1.20，加入乙醇使含醇量达60％，冷藏24小时以上，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃相对密度为1.15～1.20，加入乙醇使含醇量达80％，冷藏24小时以上，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至适宜体积，加入上述流浸膏，回收乙醇并浓缩至稠膏状，干燥，加入三七细粉混匀、粉碎后，加入适量淀粉，以10％的聚丙烯酸4号树脂制粒，装胶囊，制成1000粒即得。

鉴别：取胶囊内容物2g，研细，加甲醇20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，加浓氨试液调至碱性，加乙醇20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每ml含1mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各3μl，分别点于同一以1％氢氧化钠制备的硅胶G薄层板上，以10∶4∶1正己烷一氯仿一甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在空气中挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材细粉0.5g，加乙醚10ml，振摇5分钟，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9∶1正己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加甲醇10ml，振摇提取5分钟，取上清液作为供试品溶液；另取白芍对照药材0.5g，加乙醇10ml振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；再取芍药甙对照品，加乙醇制成每ml含1mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以40∶5∶10∶0.2氯仿-醋酸乙酯一甲醇一甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛浓硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液；再取大黄素、大黄酚对照品，加甲醇制成每ml含1mg的对照品混合溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶5∶1石油醚一甲酸乙酯一甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干；置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点；置氨气中熏后，日光下检视，斑点变为红色；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；另取独活对照药材1g，加乙醚10ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿2ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液及供试品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2∶1∶1正己烷-苯一醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑；。

含量测定∶精密称取胶囊内容物0.5g，置索氏提取器中，加乙醚适量，回流提取2小时，弃去乙醚液，滤纸筒取出，晾干，再置索氏提取器中，加甲醇适量，回流提取至无色；提取液回收甲醇至干，残渣以20ml水溶解；置分液漏斗中，以水饱和的20ml，20ml，15ml，15ml，10ml正丁醇提取5次，合并提取液，以正丁醇饱和的水30ml，30ml，30ml洗涤3次，弃去水液，正丁醇提取液减压回收至干；残渣用甲醇溶解，转移至10ml的量瓶中，加甲醇并稀释至刻度，作为供试品溶液；另取人参皂甙Rg₁对照品，精密称定，加甲醇制成每ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2μl，对照品溶液1μl、2μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以15∶40∶22∶10氯仿-醋酸乙酯一甲醇一水10℃以下放置12小时后的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％的硫酸乙醇溶液，在100～105℃烘4～5分钟，至斑点显色清晰，取出，覆盖同样大小的玻璃板，以胶条将边缘密封，照薄层色谱法进行扫描，波长λ_S＝535nm，λ_R＝650nm，测量供试品与对照品的吸收度积分值，以外标两点法计算，即得，每粒胶囊内容物含人参皂甙Rg₁应不少于7.2mg。

Claims (10)

1、一种中药组合物，其特征在于该中药组合物是由下列原料制成的：

三  七100-400重量份    川  芎200-500重量份

延胡索200-500重量份    白  芍200-500重量份

牛  膝200-500重量份    狗  脊100-400重量份

熟大黄100-400重量份    独  活100-400重量份

2、如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物是由下列原料制成的：

三  七335重量份    川  芎445重量份

延胡索445重量份    白  芍445重量份

牛  膝445重量份    狗  脊335重量份

熟大黄335重量份    独  活335重量份

3、一种中药组合物的制备方法，其特征在于该方法为：

三  七100-400重量份    川  芎200-500重量份

延胡索200-500重量份    白  芍200-500重量份

牛  膝200-500重量份    狗  脊100-400重量份

熟大黄100-400重量份    独  活100-400重量份

以上八味，取一半三七粉碎成细粉，另器保存，另一半三七粉碎成粗粉；取延胡索、川芎、独活粉碎成粗粉，与三七粗粉合并，用4-8倍量65-85％乙醇渗漉，制成流浸膏；白芍、牛膝、狗脊及熟大黄加水浸透后煎煮1-2次，每次30-90分钟，提取液浓缩至相对密度为50℃1.15～1.20，加入乙醇使含醇量达60-90％，冷藏24小时以上，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.15～1.20，加入乙醇使含醇量达60-90％，冷藏24小时以上，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至适宜体积，加入上述流浸膏，回收乙醇并浓缩至稠膏状，干燥，加入三七细粉混匀，加常规辅料制成临床可接受的剂型。

4、如权利要求3所述的中药组合物的制备方法，其特征在于该方法为：

三  七335重量份    川  芎445重量份

延胡索445重量份    白  芍445重量份

牛  膝445重量份    狗  脊335重量份

熟大黄335重量份    独  活335重量份

以上八味，取一半三七粉碎成细粉，另器保存；另一半三七粉碎成粗粉。取延胡索、川芎、独活粉碎成粗粉，与三七粗粉合并，用6倍量75％乙醇渗漉，制成流浸膏；白芍、牛膝、狗脊及熟大黄加水浸透后煎煮60分钟，提取液浓缩至50℃相对密度为1.15～1.20，加入乙醇使含醇量达60％，冷藏24小时以上，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃相对密度为1.15～1.20，加入乙醇使含醇量达80％，冷藏24小时以上，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至适宜体积，加入上述流浸膏，回收乙醇并浓缩至稠膏状，干燥，加入三七细粉混匀、粉碎后，加入适量淀粉，以10％的聚丙烯酸4号树脂制粒，装胶囊。

5、一种中药组合物胶囊的鉴别方法，其特征在于该方法为：

取胶囊内容物2g，研细，加甲醇20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，加浓氨试液调至碱性，加乙醇20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每ml含1mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各3μl，分别点于同一以1％氢氧化钠制备的硅胶G薄层板上，以8-12∶3-5∶0.6-1.2正己烷一氯仿一甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在空气中挥尽板上吸附的碘后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材细粉0.5g，加乙醚10ml，振摇3-6分钟，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8-10∶0.5-1.5正己烷一醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加甲醇10ml，振摇提取3-6分钟，取上清液作为供试品溶液；另取白芍对照药材0.5g，加乙醇10ml振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；再取芍药甙对照品，加乙醇制成每ml含1mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30-45∶4-6∶7-11∶0.1-0.3氯仿一醋酸乙酯一甲醇一甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛浓硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；；取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液；再取大黄素、大黄酚对照品，加甲醇制成每ml含1mg的对照品混合溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以12-16∶4-6∶0.5-1石油醚一甲酸乙酯一甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干；置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点；置氨气中熏后，日光下检视，斑点变为红色；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；另取独活对照药材1g，加乙醚10ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿2ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液及供试品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以1-3∶0.5-1.5∶0.5-1.5正己烷一苯一醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检的荧光斑点。视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色

6、如权利要求5的鉴别方法，其特征在于该方法为：

取胶囊内容物2g，研细，加甲醇20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，加浓氨试液调至碱性，加乙醇20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每ml含1mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各3μl，分别点于同一以1％氢氧化钠制备的硅胶G薄层板上，以10∶4∶1正己烷一氯仿一甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在空气中挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材细粉0.5g，加乙醚10ml，振摇5分钟，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9∶1正己烷一醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加甲醇10ml，振摇提取5分钟，取一亡清液作为供试品溶液；另取白芍对照药材0.5g，加乙醇10ml振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；再取芍药甙对照品，加乙醇制成每ml含lmg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以40∶5∶10∶0.2氯仿-醋酸乙酯一甲醇一甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛浓硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液；再取大黄素、大黄酚对照品，加甲醇制成每ml含lmg的对照品混合溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶5∶1石油醚一甲酸乙酯一甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干；置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点；置氨气中熏后，日光下检视，斑点变为红色；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；另取独活对照药材1g，加乙醚10ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿2ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液及供试品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2∶1∶1正己烷-苯一醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑；。

7、一种中药组合物胶囊的含量测定方法，其特征在于该方法为∶

精密称取胶囊内容物0.5g，置索氏提取器中，加乙醚适量，回流提取1-3小时，弃去乙醚液，滤纸筒取出，晾干，再置索氏提取器中，加甲醇适量，回流提取至无色，提取液回收甲醇至干，残渣以20ml水溶解；置分液漏斗中，以水饱和的10-20ml正丁醇提取4-6次，合并提取液，以正丁醇饱和的20-40ml水洗涤2-4次；弃去水液，正丁醇提取液减压回收至干；残渣用甲醇溶解，转移至10ml的量瓶中，加甲醇并稀释至刻度，作为供试品溶液；另取人参皂甙Rg₁对照品，精密称定，加甲醇制成每ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2μl，对照品溶液1μl、2μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以13-16∶35-45∶18-24∶8-12氯仿-醋酸乙酯一甲醇一水10℃以下放置12-24小时后的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％的硫酸乙醇溶液，在100～105℃烘4～5分钟，至斑点显色清晰，取出，覆盖同样大小的玻璃板，以胶条将边缘密封，照薄层色谱法进行扫描，波长λ_S＝535nm，λ_R＝650nm，测量供试品与对照品的吸收度积分值，以外标两点法计算，即得；每粒胶囊内容物含人参皂甙Rg₁应不少于7.2mg。

8、如权利要求7所述的含量测定方法，其特征在于该方法为：

精密称取胶囊内容物0.5g，置索氏提取器中，加乙醚适量，回流提取2小时，弃去乙醚液，滤纸筒取出，晾干，再置索氏提取器中，加甲醇适量，回流提取至无色；提取液回收甲醇至干，残渣以20ml水溶解；置分液漏斗中，以水饱和的20ml，20ml，15ml，15ml，10ml正丁醇提取5次，合并提取液，以正丁醇饱和的水30ml，30ml，30ml洗涤3次，弃去水液，正丁醇提取液减压回收至干；残渣用甲醇溶解，转移至10ml的量瓶中，加甲醇并稀释至刻度，作为供试品溶液；另取人参皂甙Rg₁对照品，精密称定，加甲醇制成每ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2μl，对照品溶液1μl、2μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以15∶40∶22∶10氯仿-醋酸乙酯一甲醇一水10℃以下放置12小时后的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％的硫酸乙醇溶液，在100～105℃烘4～5分钟，至斑点显色清晰，取出，覆盖同样大小的玻璃板，以胶条将边缘密封，照薄层色谱法进行扫描，波长λ_S＝535nm，λ_R＝650nm，测量供试品与对照品的吸收度积分值，以外标两点法计算，即得，每粒胶囊内容物含人参皂甙Rg₁应不少于7.2mg。

9、一种中药组合物胶囊的质量检测方法，其特征在于该方法为：鉴别：取胶囊内容物2g，研细，加甲醇20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，加浓氨试液调至碱性，加乙醇20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每ml含1mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各3μl，分别点于同一以1％氢氧化钠制备的硅胶G薄层板上，以8-12∶3-5∶0.6-1.2正己烷一氯仿一甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在空气中挥尽板上吸附的碘后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材细粉0.5g，加乙醚10ml，振摇3-6分钟，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8-10∶0.5-1.5正己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加甲醇10ml，振摇提取3-6分钟，取上清液作为供试品溶液；另取白芍对照药材0.5g，加乙醇10ml振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；再取芍药甙对照品，加乙醇制成每ml含lmg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30-45∶4-6∶7-11∶0.1-0.3氯仿-醋酸乙酯一甲醇一甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛浓硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；；取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液；再取大黄素、大黄酚对照品，加甲醇制成每ml含lmg的对照品混合溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以12-16∶4-6∶0.5-1石油醚一甲酸乙酯一甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干；置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点；置氨气中熏后，日光下检视，斑点变为红色；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；另取独活对照药材1g，加乙醚10ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿2ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液及供试品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以1-3∶o.5-1.5∶o.5-1.5正己烷-苯一醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

含量测定：精密称取胶囊内容物0.5g，置索氏提取器中，加乙醚适量，回流提取1-3小时，弃去乙醚液，滤纸筒取出，晾干，再置索氏提取器中，加甲醇适量，回流提取至无色，提取液回收甲醇至干，残渣以20ml水溶解；置分液漏斗中，以水饱和的10-20ml正丁醇提取4-6次，合并提取液，以正丁醇饱和的20-40ml水洗涤2-4次；弃去水液，正丁醇提取液减压回收至干；残渣用甲醇溶解，转移至10ml的量瓶中，加甲醇并稀释至刻度，作为供试品溶液；另取人参皂甙Rg₁对照品，精密称定，加甲醇制成每ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2μl，对照品溶液1μl、2μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以13-16∶35-45∶18-24∶8-12氯仿-醋酸乙酯一甲醇一水10℃以下放置12-24小时后的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％的硫酸乙醇溶液，在100～105℃烘4～5分钟，至斑点显色清晰，取出，覆盖同样大小的玻璃板，以胶条将边缘密封，照薄层色谱法进行扫描，波长λ_S＝535nm，λ_R＝650nm，测量供试品与对照品的吸收度积分值，以外标两点法计算，即得；每粒胶囊内容物含人参皂甙Rg₁应不少于7.2mg。

10、如权利要求9所述的中药组合物胶囊的质量检测方法其特征在于该方法为：

鉴别：取胶囊内容物2g，研细，加甲醇20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，加浓氨试液调至碱性，加乙醇20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每ml含1mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各3μl，分别点于同一以1％氢氧化钠制备的硅胶G薄层板上，以10∶4∶1正己烷一氯仿一甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在空气中挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材细粉0.5g，加乙醚10ml，振摇5分钟，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9∶1正己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加甲醇10ml，振摇提取5分钟，取上清液作为供试品溶液；另取白芍对照药材0.5g，加乙醇10ml振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；再取芍药甙对照品，加乙醇制成每ml含1mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以40∶5∶10∶0.2氯仿-醋酸乙酯一甲醇一甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛浓硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液；再取大黄素、大黄酚对照品，加甲醇制成每ml含1mg的对照品混合溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶5∶1石油醚一甲酸乙酯一甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干；置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点；置氨气中熏后，日光下检视，斑点变为红色；

取胶囊内容物2g，研细，加乙醚20ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；另取独活对照药材1g，加乙醚10ml，振摇提取5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿2ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液及供试品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2∶1∶1正己烷-苯一醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑；。

含量测定：精密称取胶囊内容物0.5g，置索氏提取器中，加乙醚适量，回流提取2小时，弃去乙醚液，滤纸筒取出，晾干，再置索氏提取器中，加甲醇适量，回流提取至无色；提取液回收甲醇至干，残渣以20ml水溶解；置分液漏斗中，以水饱和的20ml，20ml，15ml，15ml，10ml正丁醇提取5次，合并提取液，以正丁醇饱和的水30ml，30ml，30ml洗涤3次，弃去水液，正丁醇提取液减压回收至干；残渣用甲醇溶解，转移至10ml的量瓶中，加甲醇并稀释至刻度，作为供试品溶液；另取人参皂甙Rg₁对照品，精密称定，加甲醇制成每ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2μl，对照品溶液1μl、2μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以15∶40∶22∶10氯仿-醋酸乙酯一甲醇一水10℃以下放置12小时后的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％的硫酸乙醇溶液，在100～105℃烘4～5分钟，至斑点显色清晰，取出，覆盖同样大小的玻璃板，以胶条将边缘密封，照薄层色谱法进行扫描，波长λ_S＝535nm，λ_R＝650nm，测量供试品与对照品的吸收度积分值，以外标两点法计算，即得，每粒胶囊内容物含人参皂甙Rg₁应不少于7.2mg。