CN1481789A - 一种抗心血管疾病和眼科等疾病的药物 - Google Patents

一种抗心血管疾病和眼科等疾病的药物 Download PDF

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Abstract

本发明是一种抗心血管疾病和眼科等疾病的药物，其特征是从药用植物鸡肝散中提取总黄酮提取物，按总黄酮提取物∶辅料＝60～99∶40～1的比例制成药剂。本发明的药物用于抗心血管疾病，如心肌缺血、心律失常、降血脂；抗眼科疾病，如糖尿病、高血压引起的眼底出血、角膜炎、结膜炎、虹膜炎、夜盲等；具有类雌激素及孕激素样作用，用于更年期综合征、骨质疏松症、神经退行性疾病；并具有止咳祛痰、抗毛细血管脆性和异常透过性、抑制肿瘤细胞、解痉、卵泡激素样作用、清除自由基等功效。

Description

一种抗心血管疾病和眼科等疾病的药物
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体地说是一种抗心血管疾病和眼科等疾病的药物。
背景技术
鸡肝散为云南省哈尼族民间植物Elsholtzia blanda Benth.，据《中药大辞典》载，具有清热、消炎、止痛作用。民间用煎汤服用，用于治疗肾盂肾炎、肾炎、感冒、肝炎、痢疾、肠炎、牙痛、结膜炎、创伤出血，但迄今为止未见有关该药物研究开发的信息。
发明内容
本发明的目的是提供一种对于抗心血管疾病，如心肌缺血、心律失常、降血脂等以及抗眼科疾病，如糖尿病、高血压引起的眼底出血、角膜炎、结膜炎、虹膜炎、夜盲等具有较好作用的药物，同时为具有类雌激素及孕激素样作用，用于更年期综合征、骨质疏松症、神经退行性疾病以及具有止咳祛痰、抗毛细血管脆性和异常透过性、抑制肿瘤细胞、解痉、卵泡激素样作用、清除自由基等功效的药物。
本发明的药物是从药用植物鸡肝散中提取总黄酮提取物，按总黄酮提取物∶辅料＝60～99∶40～1的比例制成药剂。
以上所述的药剂为药剂学上所包含的剂型，具体为胶囊剂、颗粒剂、片剂和注射剂等。
本发明的药物是对鸡肝散植物进一步的研究开发，提取出了鸡肝散中的有效部位——总黄酮，并发现了其对抗心血管疾病和眼科疾病以及具有类雌激素及孕激素样作用，用于更年期综合征、骨质疏松症、神经退行性疾病并具有止咳祛痰、抗毛细血管脆性和异常透过性、抑制肿瘤细胞、解痉、卵泡激素样作用、清除自由基等功效。
以下用本发明的药效学实验来说明本发明的药物疗效。本发明的药效学实验方法与结果
一.以本发明抗垂体后叶素诱发大鼠急性心肌缺血试验为例
SD雄性大鼠81只，随机分为5组，JGS低、中、高剂量组分别igJGS提取物25、50、100μg/kg(以总黄酮含量计)，另设溶剂对照组ig4ml/kg0.5％CMC溶液，阳性对照组ig地奥心血康150mg/kg(以甾体总皂甙计)。上述各组大鼠均连续灌胃给药5天，第5天灌胃后40分钟，腹腔注射2g/kg25％乌拉坦麻醉，由Medlab5.5生物信号采集系统连续描记一段II导心电图，灌胃后60分钟尾静脉注射垂体后叶素0.75U/kg，恒速10秒内推完，连续记录心电图10分钟。分别测定注射前和注射后15秒、30秒、1、2、3、5、7、10分钟时心电图变化，心电图测量以PR段为基线，每个时点测5个心动周期，取其平均值，比较组间T波振幅和心率的变化，并作统计学分析。
实验结束后大鼠断头取血、取心脏，采用Olympus Au-2700全自动生化分析仪测定血清CK、Ca2+，采用硝酸还原酶法NO试剂盒(浙江温州伊利康生物技术有限公司p020513)测定NO。心脏用4℃生理盐水冲洗干净残留血液，分离左心室称重，加9倍重量4℃生理盐水制成10％心肌匀浆，以TBA法测定匀浆MDA含量，考马斯亮兰法测定蛋白含量，取匀浆上清液测定Ca2+和NO，方法同血清。
综合心电图以及生化指标评价药物的作用。
表1JGS对pit诱发大鼠心律失常的影响(x±S)
                   剂量               动物数
组别
                                                    心律失常发生率％
                 (μg/kg)               (只)
0.5％CMC            -                    17            82.4(14)
JGS                 25                   16            75(12)
JGS                 50                   16            68.8(11)
JGS                 100                  15            33.3(5)△△
地奥心血康          150                  16            68.8(11)
与正常组比较：△△P＜0.01，x2检验
                    表2 JGs对Pit诱发大鼠心肌缺血心电图T波的影响(X±s)
                             造模前                   造模后T波(mV)
         剂量    动物数
纽别
                              T波               增减百         增减百            增减百           增减百
       (ug/kg)    (只)                 30秒             1分              3分             7分
                             (mv)               分率            分率              分率             分率
                             0.188±      0.224±     45.1±      0.185±     -3.7±     0.16l±      -14.4±   0.145±      -22.3±
O.5％CMC   -      17
                             0.042    O.090    32.1    0.078    29.5   0.060     24.6   0.054     22.6
                             0.204±      0.217±     43.2±      0.190±     -5.4±     0.188±      -7.1±     0.163±      -18.8±
JGS        25     16
                             0.037    0.082    30.5    0.067    31.5   0.051     2l.3   0.036     17.6
                             0.202±      0.216±     34.8±      0.176±     -10.9±   0.158±      -22.0±    0.l48±     -27.0±
JGS        50     16
                             0.048    0.078    27.8    0.065    30.6   0.074     30.1    0.065    28.4
                             0.235±      0.248±      27.3±      0.193±     -18.l±   0.158±      -30.1±    0.l48±    -35.5±
JGS        l00    15
                             0.040    0.069    20.4△  0.099    40.6   0.097     39.2    0.080    32.2
地奥                         0.206±      0.214士  45.7±     0.218±      4.8±      0.202±        -0.2±     0.177±    -12.l±
           150    16
心血康                       0.034    0.108    22.7    0.059    18.4   0.035     18.7    0.032    16.9
与正常组比较：△P<0.05，秩和检验
                            表3J08对pit诱发大鼠心肌缺血心率的影响(XES)
                         造模前                 遣模后心率(次，分)
        剂量       动物数
组别
                         心率           增减百         增减百          增减百          增减百
       (ug/kg)      (只)         30秒            1分             3分             7分
                       (次，分)          分率           分率            分率            分率
                         375±     283±        -23.6±     277±      -22.2±      256±      -30.0±      258±      -29.8±
0.5％CMC  -          17
                         62.8   48.5    10.6     58.7   12.8     36.4   15.2     29.0   12.9
                         406±     292±        -27.3±     306±      -23.7±      277±      -29.7±      270土  -30.9±
JGS       25         16
                         83.9   63.7    10.9     59.4    l0.4    30.8   13.0     39.6   16.9
                         401±     312±        -20.0±     313±      -20.0±      278±      -27.9±      254±      -34.4±
JoS       50         16
                         77.8   35.5    15.4     34.3    13.4    30.9    18.4    37.7
                         344±     274±        -16.7±      284±     -13.7±      274±      -14.1±      264±      -19.2±
JoS       100        15
                         95.8   57.2    17.7     46.6    16.0    44.3△ 19.6    36.1    16.2△
地奥                     386±     270±        -27.4±      295±     -21.4±      27l±      -26.8±      260±      -29.6±
          150        16
心血康                   86.2   53.4    16.7     53.5    14.7    49.4    17.8    48.9    16.9与正常组比较：△P<0.05，秩和检验
        表4JGS对pit诱发大鼠心肌缺血血清CK、CA2+的影响(x±S)
组别         剂量(μg/kg)        N          CK(U/L)         CS2+(mmol/L)
0.5％CMC          -              16         3299±750.7     2.28±0.049
JGS              25              16         2492±1078.5△  2.33±0.093△
JGS              50              15         2491±1093.6△  2.34±0.11△
JGS              100             15         2646±719.8△    2.37±0.13△△
地奥心血康       150             16         2849±580.9△    2.34±0.07△△与正常组比较：△P＜0.05，△△P＜0.01，t检验
              表5JGS对pit诱发大鼠心肌缺血血清NO和心肌匀浆NO、MDA、Ca2+的影响(n＝10，x±S)
                     血清                       心肌匀浆
           剂量
组别                  NO            NO            MDA             Ca2+
         (μg/kg)
                  (umol/L)     (umol/g蛋白)    (umol/g蛋白)     (umol/g蛋白)
0.5％CMC    -    73.45±6.31    7.19±1.16      0.1790.023      16.64±2.35
JGS         25   76.29±6.59    8.49±1.80△     0.155±0.031△   14.60±2.27△
JGS         50   1.65±11.64△  8.53±1.83△     0.153±0.022△   13.91±3.48△
JGS         100  2.58±11.62△  9.03±1.52△△   0.156±0.022△   12.95±3.64△△
地奥心血康  150  77.95±11.36   8.95±2.27△     0.163±0.03      13.83±2.64△与正常组比较：△P＜0.05，△△P＜0.01，t检验结果表明：
与溶剂对照组(ig0.5％CMC溶液4ml/kg)比较，JGS100μg/kg可显著降低注射垂体后叶素失常的发生率、对抗注射垂体后叶素后T波抬高和心率减慢(P＜0.05-0.01)，JGS25、50μg/kg和阳性对照地奥心血康也有对抗心电图T波抬高和心率减慢的趋势，但无统计学意义；JGS25、50和100μg/kg均可降低血清CK水平(P＜0.05-0.01)，显著增加血清和心肌匀浆的NO水平(P＜0.05-0.01)，增加血清钙离子浓度并降低心肌匀浆钙离子(P＜0.05-0.01)浓度，有效地减轻了注射垂体后叶素引起的心肌细胞内钙超载。JGS25、50和100μg/kg还可以降低心肌匀浆脂质过氧化产物-丙二醛的含量(P＜0.05)，从而降低了自由基对心肌的损伤作用。阳性对照地奥心血康组也有上述变化，但其无抗自由其作用。见上表1-5。
二、以本发明抗大鼠冠脉结扎诱导心肌梗死实验为例
SD雄性大鼠90只，随机分为6组，JGS低、中、高剂量组分别igJGS提取物25、50、100μg/kg(以总黄酮含量计)，另设溶剂对照组ig4ml/kg0.5％CMC溶液，阳性对照组ig地奥心血康150mg/kg(以甾体总皂甙计)，以及假手术组ig4ml/kg0.5％CMC溶液(只穿线，不结扎)。上述各组大鼠均连续灌胃给药5天，于第5天灌胃后20分钟，腹腔注射50mg/kg戊巴比妥钠麻醉，采用Medlab5.5生物信号采集系统连续描记一段II导心电图，分离气管后气管插管，连接动物人工呼吸机进行人工呼吸，呼吸时比1∶2，呼吸频率60次/分，潮气量3ml/100g。于左胸第二、三肋间开胸，暴露心脏，分别于结扎后60分钟、120分钟、180分钟再记录一次心电图。180分钟后大鼠断头取血，测血清CK-MB、Ca2+、NO含量；取心脏，分离左心室称重，0℃冷冻后将左心室平均分成0.1cm厚的薄片，置于37℃0.5％NBT液染色15分钟，10％福尔马林固定，区分心肌梗塞区与非梗塞区，分别称重，计算梗塞区占左室重量的百分比。
以心电图、血清CK-MB、Ca2+、NO含量等生化指标以及心肌梗塞百分比等综合评价JGS的抗大鼠心肌梗死作用，结果表明：
与溶剂对照组(ig0.5％CMC溶液4ml/kg)比较，JGS25、50和100μg/kg均可显著减少大鼠冠脉结扎后左室梗死区的心肌重量(P＜0.05-0.01)，增加大鼠左室非梗死区的心肌重量(P＜0.05)，左室梗死区的比例明显减少(P＜0.05-0.01)，阳性对照组地奥心血康组也有上述变化；与假手术组比较，溶剂对照组、阳性对照组及JGS各剂量组大鼠的左室梗死区及左室梗死区百分比均有显著增加，见下表1。
            表1JGS对大鼠冠脉结扎引起的心肌梗死区重量的影响(x±S)
              剂量       动物数      左室梗死区        左室非梗死区       左室梗死心肌重
组别
            (μgkg   )    (只)       心肌重量(g)       心肌重量(g)        量比(％)
0.5％CMC    4ml/kg         14        0.215±0.045△△  0.437±0.096△△    33.79.3△△
JGS           25           10        0.150±0.041**△△0.491±0.047*△△  23.4±64**△△
JGS           50           10        0.15 1±0.072*△△0.501±0.083*△△  23.3±11.0*△△
JGS           100          10        0.133±0.071**△△0.514±0.056*△△  20.1±10.0**△△
地奥心血康    150          14        0.136±0.072**△△0.505±0.082△△    21.2±11.5**△△
假手术      4ml/kg         14        0.032±0.052**   0.616±0.102**   5.3±8.8**与0.5％CMC溶液组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与假手术组比较，△p＜0.05，△△p＜0.01，均为t检验
           表2JGS对大鼠冠脉结扎后3小时血清NO、CKMB、Ca2+的影响(x±S，n＝10)
               剂量           NO             CKMB           Ca2+
组别
             (μg/kg)       (umol/L)         (U/L)        (mmol/L)
0.5％CMC      4ml/kg         26.1±7.0△△   2217±2393    2.33±0.11
JGS            25            10.8±8.8**   3018±2985    2.33±0.062
JGS            50            17.7±8.2*   1911±1615     2.25±0.074
JGS            100           21.4±18.5     2836±3142    2.32±0.088
地奥心血康     150           51.9±54.0△    2207±1887△  2.32±0.13
假手术        4ml/kg         12.5±4.2      1791±1677    2.33±0.090
与0.5％CMC溶液组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与假手术组比较，△p＜0.05，△△p＜0.01，均为t检验
三.以本发明抗家兔角、结膜炎试验为例
选用中国白兔30只，随机均分成五组，分别为空白对照组、模型组、川芎嗪组、康明小剂量组、康明大剂量组。川芎嗪组以10mg/Kgiv，康明小剂量组、大剂量组分别以50和100μg/kgig，空白组和模型组以等容量的0.8％CMC-Naig，一天1次，连续给药19天。其中第2天给药后，将后四组家兔右眼下睑拉成杯状，用微量取样器滴入无水乙醇于眼结膜囊内，以此造成角、结膜炎模型，左眼作对照。逐日记录眼结膜、角膜病变，实验第20天，处死动物，取眼结膜、角膜组织作病理学观察。
试验家兔一般状态观察，造模前后无明显差异。家兔右眼滴入无水乙醇造模后，结膜充血、水肿、闭目畏光、分泌物增加、角膜混浊，与空白对照组比较有极显著差异(经等级序值法检验，p＜0.001)。经治疗后，模型对照组与空白对照组比较有显著性差异(p＜0.01)；康明大剂量组家兔眼结膜充血和眼睑水肿与模型组比较有显著性差异(p＜0.05).结果见下表1。
            表1.康明浸膏对家兔角、结膜炎模型的影响(n＝6)
       动物数       剂量    结膜充血       眼睑水肿      分泌物        角膜混浊     角膜血管翳
组别
        (只)      (μg/kg)  - + ++ +++     - + ++ +++    - + ++ +++    - + ++ +++   - + ++ +++
空白组    8                 8 0  0 0       8 0  0 0      8 0  0 0      8 0  0 0     8 0  0 0
模型组    7                 1 4  2 0△△      2 3  2 0△△  2 3  2 0△△    1 3  1 2△△ 2 1  1 3△△
阳性组    8         0.01    2 6  0 0       2 5  1 0      2 2  4 0      2 3  3 0     2 3  0 3
小剂量组  6         50      1 5  0 0       1 5  0 0      1 3  2 0      1 1  4 0     1 1  1 3
大剂量组  6         100     4 2  0 0*     4 2  0 0*   3 3  0 0      3 1  2 0     4 1  0 1注：等级序值检验，与空白组比较，△△p＜0.01；与模型组比较，*P＜0.05。
结膜充血：-：无充血；+：轻度充血；++：明显充血，呈深红色；+++：弥漫性充血，呈紫红色。眼睑充血：-：无水肿；+：轻度水肿；++：明显水肿，部分眼睑外翻；+++：
明显水肿，眼睑半闭。分泌物：-：无异常分泌物；+：少量分泌物；++：分泌物使眼睑和睫毛潮
湿或粘着；+++：分泌物使整个眼区潮湿或粘着。角膜混浊：-：无混浊；+：散在或弥漫性混浊，虹膜可见；++：出现灰白半
透明区，虹膜模糊不清；+++：混浊明显，虹膜无法辩认。角膜血管翳：-：无；+：长入1/4角膜；++：长入1/2角膜；+++：长入3/4以上角膜。
结论
康明浸膏100μg/kg对无水乙醇造成的角、结膜炎模型家兔的眼局部炎症有较好的改善作用。
附图说明
图1为本发明从鸡肝散植物中提取总黄酮提取物的工艺流程图。
图2为本发明的胶囊剂制备工艺流程图。
具体实施方式实施例1：取植物鸡肝散500千克，洗净后，按图1所示的工艺流程提取总黄
酮，该提取方法运用了药剂学上常用的技术。实施例2：用实施1所得的总黄酮提取物与辅料羟丙基纤维素，按总黄酮提取
物∶辅料＝99∶1的比例，按图2所示的工艺流程制得本发明药物的
胶囊剂，该制备工艺采用了药剂学上常用的技术。实施例3：用实施1所得的总黄酮提取物与辅料羟丙基纤维素，按总黄酮提取
物∶辅料＝65∶35的比例，按图2所示的工艺流程制得本发明药物的
胶囊剂，该制备工艺采用了药剂学上常用的技术。
工艺流程说明
图1所示的工艺流程中为以下几种提取方式：方案一：
取鸡肝散净药材，加水适量，蒸馏，收集挥发油备用。方案二：
取鸡肝散净药材，用适量工业乙醇或甲醇润湿后，装渗漉筒，加入溶媒进行渗漉，收集渗漉液，回收浓缩，减压干燥得干膏，粉碎后与辅料混合，制粒，装胶囊，泡罩包装，外包装即得。方案三：
取鸡肝散净药材，加水适量，煎煮，滤过，浓缩后用醇沉淀，取上清液，回收浓缩，减压干燥得干膏，粉碎后与辅料混合，制粒，装胶囊，泡罩包装，外包装即得。方案四：
取鸡肝散净药材，加工业乙醇或甲醇适量，回流提取，回收浓缩后用水沉淀，取上清液，回收浓缩，减压干燥得干膏，粉碎后与辅料混合，制粒，装胶囊，泡罩包装，外包装即得。
上述四种方案可以同时进行，也可单独进行。

Claims (3)

1、一种抗心血管疾病和眼科等疾病的药物，其特征是从药用植物鸡肝散中提取总黄酮提取物，按总黄酮提取物∶辅料＝60～99∶40～1的比例制成药剂。
2、根据权利要求1所述的药物，其特征在于所述的药剂为药剂学上所包含的剂型。
3、根据权利要求1所述的药物，其特征在于所述的药物用于抗心血管疾病，如心肌缺血、心律失常、降血脂；抗眼科疾病，如糖尿病、高血压引起的眼底出血、角膜炎、结膜炎、虹膜炎、夜盲等；具有类雌激素及孕激素样作用，用于更年期综合征、骨质疏松症、神经退行性疾病；并具有止咳祛痰、抗毛细血管脆性和异常透过性、抑制肿瘤细胞、解痉、卵泡激素样作用、清除自由基等功效。
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