CN1479578A - 抗胆固醇血症的食用油 - Google Patents

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Abstract

提供了一种食用油,该食用油降低了患者对胆固醇的合成、吸收和血液水平,增加了胆固醇从患者排泄,降低了过氧化物在患者的血液中累积,还增加了所述患者中血液水平的维生素E。

Description

抗胆固醇血症的食用油
本申请以1998年10月14日申请的序列号60/104,227的美国临时专利申请为基础,将其内容全文加入本文作为参考。
                       发明领域
本发明涉及一种可用于改善患者的血脂水平的食用油,并涉及这种油的制备和使用方法。
                       发明背景
美国每年有超过750,000人死于冠心病和中风。每年约1,250,000人有心脏病发作,并且其中一半在没有预兆的情况下发生。冠心病是美国男性和妇女最常见的杀手。尽管开发了一个世纪的药物,但是仍有数十倍于世纪初的美国人死于心脏病发作。
按照美国心脏病协会(the American Heart Association)的标准,胆固醇水平是心血管疾病的主要预测物。胆固醇,在血流的脂质中发现的一种软的蜡质物质,由于其用于形成细胞膜、一些激素和其它所需的组织,因此它是健康体的一个重要部分。然而,血液中高水平的胆固醇(血胆固醇过多)是冠心病的主要危险因子,它导致心脏病发作。
胆固醇不溶于血液,并且必需通过称作脂蛋白的脂质和蛋白质的特定载体运输到细胞和从细胞运输。有几种脂蛋白,其中最重要的是低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)。
低密度脂蛋白是血液中的主要胆固醇载体。过量的LDL胆固醇在血液中循环能够缓慢地积累在供应心脑的动脉壁内。它与其它物质一起能够形成斑块,一种能够堵塞这些动脉的稠密且硬的沉积物。这种症状称之为动脉粥样硬化。在该斑块区域形成凝块(或血栓)可能阻滞血液流到心肌部分并引起心脏病发作。如果凝块阻滞血液流到大脑部分,结果将是中风。高水平的LDL胆固醇反映了心脏病的危险增加。因此,LDL胆固醇经常被称作“坏胆固醇”。
高密度脂蛋白(“HDL”)载有约1/3-1/4的血液胆固醇。据信HDL将胆固醇从动脉载运离开并回到肝脏,由此最终从身体通过。一些专家相信HDL从动脉粥样硬化斑块中除去过量的胆固醇并因此减缓其生长。由于高水平的HDL似乎防止心脏病发作因此将HDL称作“好胆固醇”。反之也是事实:低HDL水平暗示危险较大。
胆固醇来自两个途径。它在体内产生,大多数在肝脏内(一天约1,000毫克),它还在来自动物的食物,例如肉、禽、鱼、海产品和乳制品中找到。来自植物(水果、蔬菜、谷物、坚果和籽)的食物不含胆固醇。
饱和脂肪酸是产生血胆固醇的罪魁祸首,它使得心脏病危险增加。但是膳食胆固醇也起了一定作用。美国男性平均一天要消耗约360毫克的胆固醇;美国女性平均一天消耗220-260毫克胆固醇。
一亿成年人的血液胆固醇水平为200毫克/分升(mg/dl)或更高,并且几乎四千万的美国人具有240mg/dl或更高的水平。估计53,000,000美国人的LDL水平需要治疗,但是所需的这些中不到1/3正接受必需的治疗。而且,所治疗的大多数患者不能达到治疗目标。每年的治疗费用估计超过一千亿美元,然而冠心病仍然是美国人的头号杀手。
因此,患心脏病发作或中风的危险有力地通过血液中的低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)和甘油三酸酯预测。
胆固醇和甘油三酸酯水平可以通过药物介入和/或改善饮食,例如减少胆固醇和饱和脂肪的饮食摄取而降低。然而,一些饮食改进带来新的问题。例如,近年来提倡用人造奶油替代黄油。黄油富含胆固醇和饱和脂肪。另一方面,条状人造奶油具有以其氢化油含量为基础的半固体稠度。然而,该氢化过程形成反式脂肪(trans fats)。临床研究证实,反式脂肪致使动脉粥样硬化,导致心血管危险是赋予黄油稳定性的天然饱和脂肪的两到三倍。由于人造奶油,特别是条状人造奶油可能含有20%-30%的反式脂肪,因此现在人造奶油相对的黄油的保健益处受到怀疑。美国心脏病协会现在推荐软人造奶油。最近已引入这种人造奶油,如此称之为无反式人造奶油,它是由完全氢化的棕榈油或棕榈油部分配制的。这种人造奶油,既没有反式脂肪,并且含有增加量的饱和脂肪,其为人造奶油的第二危险的组分。
已报道其它化合物降低人的胆固醇水平。例如,植物甾醇,特别是β-谷甾醇,已报道具有抗胆固醇血效果,并且据信能抑制胆固醇在小肠内的吸收。植物甾醇被认为置换胆汁盐微胶粒的胆固醇。约一半消化的膳食胆固醇被吸收,然而不到5%的β-谷甾醇被吸收。当植物甾醇置换胆汁盐微胶粒的胆固醇时,胆固醇被以粪便排泄掉。
植物甾醇天然以饱和和不饱和形式存在,如自由醇和酯。不饱和形式为主。已知天然谷甾醇通过氢化可以转化成谷甾烷醇,并且已报道甾烷醇每单位重量比甾醇在阻滞胆固醇吸收方面更有效并且甾烷醇不被吸收。而且,β-谷甾醇的吸收量显示相对恒定,即使给药剂量以数量级改变时。甾醇和甾烷醇由于其不易吸收性,因此它们都已用作胆固醇吸收的相对标记。然而,似乎清楚地尽管谷甾烷醇完全不被吸收,但是一些谷甾醇被吸收。
而且,向膳食中加入谷甾烷醇不仅降低胆固醇吸收,而且降低谷甾醇和维生素吸收。一些将此特征化作为优点,但是事实是谷甾烷醇阻滞微量营养素正常吸收可能存在问题。
Lancet 1995;345:1529-1532报道了使用β-谷甾醇(20毫克/天)治疗良性前列腺增生(BPH)。该症状在前列腺内将纤维肌性和上皮结构慢慢扩大,最终导致阻塞性尿道症状,大多数超过50岁的男性一定程度上经受该症状。仅使用谷甾烷醇作为抗胆固醇血因此可能增加BPH的危险。
与包括动脉粥样硬化和高胆固醇水平的疾病的治疗和预防有关已研究的其它化合物包括生育三烯酚类,它是在小麦胚芽、米糠、燕麦和棕榈中找到的天然形式的维生素E。
在体外,生育三烯酚对胆固醇的浓度依赖性效果可以证实包括3-羟基-3-甲基-戊二酰基辅酶A还原酶(HMGCoA还原酶)活性的转录后下调。这是抑制素靶的酶,抑制素是一种抗胆固醇血药,每年仅在美国就有八十亿美元的销量。抑制素直接作用,阻滞HMGCoA还原酶。然而,抑制素有时还造成肝机能障碍。
遗憾的是,许多服用抑制素或生育三烯酚的患者反应胆固醇合成的速度降低,但代偿性地从食物吸收膳食胆固醇的速度增加。最近研究报道,作为单一疗法服用抑制素的80%患者不能达到治疗目标。至于抑制素,剂量增加至克服胆固醇吸收的补偿性增加经常所需的量,如上所述使得肝并发症的发生率增加11倍。由于肝并发症的危险,抑制素必需在医生的监督下服用。类似地,尽管生育三烯酚在体外显示有前途,但是临床试验结果模棱两可。Qureshi,Am.J Clin.Nutr.53:Suppl.4:1021S-1026S,(1991年4月)报道在短期研究中在“响应物”中的脂质参数显著提高,但是接下来补充有相同物质的自由活患者的3个研究(得自棕榈的富含生育三烯酚的部分,即得自棕榈的TRF)不能证实其结果。参见Antila等,HelsinkiAntioxidant Symposium,1991 Wahlquist,M.等,NutritionResearch 12:Suppl.1:S181-S201(1992);Tomeo,A.等,Lipids 30:1179-1183,1995]。相应地,Qureshi建议(Qureshi,A.等,Lipids 30(12):1171-1177,(1995)),d-生育酚抑制生育三烯酚的抗胆固醇血效果。用本发明油的临床试验结果不支持该结论,但是真正显示需要与其它不能皂化的组分的协同以影响血脂调节。
最近在芬兰引入的一种人造奶油,Benecol,含有从纸浆和废纸中萃取的氢化植物甾醇,已发现在用Benecol人造奶油代替膳食中的标准人造奶油的患者中胆固醇水平降低10-15%。这种降低与心血管危险降低20-30%一致。然而,Benecol具有的缺陷是该植物甾醇萃取物需要美国及其它国家法规核准其作为一种新的食品添加剂。
有毒形式的氧与许多慢性衰竭疾病有关。这些疾病尤其包括心血管的、肿瘤的、关节炎的、与年龄有关的黄斑变性早老。随着组织水平的这些有毒形式的氧上升,组织水平的保护性抗氧化剂,例如维生素E族的抗氧化剂下降。这些危险因子在心血管疾病的情况下已由Gey得到证实,他显示随着血液维生素E值在人群中降低,局部缺血性心脏病的发生率将上升。为了评价过氧化物的血液水平,许多研究者测定了硫代巴比土酸的加合物(又名TBARS,硫代巴比土酸反应物,还称作丙醛改性物质)、或过氧化物。Holvoet、Collen和vande Werf最近证明丙醛改性的LDL作为急性冠状综合症的标记的关系。这些科学家显示,血液中丙醛(TBARS)型污染显示内皮损伤和斑块不稳定性,比其它常用的指标,例如肌钙蛋白I更精确地显示急性冠状综合症。在患有至少一种中风且每天补充Redeem的患者的介入研究中,其血清水平的TBARS物质从研究前值显著降低。参见:Tomeo,A.C.等,Antioxidant effects of tocotrienols inpatients with hyperlipidemia and carotid stenosis.Lipids30:1179-1183,1995;Watkins,T.R.等,Hypocholesterolemicand antioxidant effects of rice bran oil non-saponifiablesin hypercholesterolemic subjects.Environ.Nutr.Interactions,3:(2)1-8,1999]。而且,其血清维生素E水平接近研究前值的两倍。约旦心脏研究基金会的相同研究者们先前已证实在实验室大鼠模型中的相同关系。参见:Watkins,T.R.等,γ-tocotrienol as a hypocholesterolemic and antioxidant agentin rats fed atherogenic diets.Lipids,28:1113-1118,1993]。
因此,需要一种无反式脂肪、饱和脂肪低并且适用于人造奶油加工的食用油。优选,所述食用油不需要必需经化学加工(例如,氢化)的添加剂。
还需要一种食用油产品,它安全、有效地代替已知油产品并且能够不需处方可以出售获得(OTC)或者加入到常用食品中。
而且,需要一种抗心血管疾病的新的介入策略,它意识到患者改变长期坏的饮食习惯的困难性,并且与心血管药不同,它安全,在没有医生的直接监督下足够服用。
                  优选实施方式的概述
根据本发明的一个方面,提供了一种食用油,它降低了患者合成和吸收胆固醇并且促进胆固醇从患者排泄。
优选,所述食用油基本上没有反式脂肪酸。
在优选实施方式中,本发明的油是植物油或植物油的混合物。更优选,本发明的油是精炼米糠油或米糠和棕榈油的混合物。
根据本发明的其它方面,提供了一种包括任意前述油的食品。
根据本发明的其它方面,提供了在患者中减少总胆固醇和LDL并增加HDL的方法,包括向所述患者给药有效量的任意前述油的步骤。
根据本发明的另一方面,提供了一种抗胆固醇血食用油的制备方法。该方法包括步骤:提供一食用油,并调整所述食用油中生育酚、生育三烯酚、自由甾醇、甾醇酯和环阿屯醇的含量,以便所述油,当以预选剂量和预选剂量形式食用时,以天为基础提供约25-750mg的生育酚、生育三烯酚或其组合,约5-约500mg的甾醇酯和约5-约500mg的环阿屯醇。
在一优选实施方式中,将粗植物油(“油A”),特别是粗米糠油,脱蜡和脱胶,并在真空、高温下保持。然后在适当pH下用碱性含水硅酸钠和少量氢氧化钾将自由脂肪酸从油A中除去,以便在甾醇的酯和环阿屯醇转化成皂脚的损失最小化的条件下将自由脂肪酸转变成皂(皂化的)。接下来,将富含生育三烯酚的馏出液,优选米糠或棕榈油除臭馏出液,优选在异丙醇中基本上皂化,并且不能皂化的部分优选用己烷和水萃取获得一萃取液(“油B”)。最后,将适宜部分的油A和油B混合生产具有所需浓度的生育酚、生育三烯酚、自由甾醇、甾醇酯和环阿屯醇的产品。
从以下详细描述,本发明的其它目的、特征和优点对本领域技术人员来说将是显而易见的。然而,应理解的是,这些详细描述和具体实施例,尽管描述了本发明的优选实施方式,但是它们是通过描述性而非限制性给出的。可以在不背离本发明精神的情况下,在本发明范围内进行许多改变和改进,并且本发明包括所有这些改进。
                  优选实施方式的详述
人体内的胆固醇水平是通过三个并行机制,即合成、吸收和排泄进行调节的。许多已知的抗胆固醇血化合物和组合物目标仅在于这些机理中一种,因此为了起作用它们必需对目标机理有相对大的影响。
本发明的食用油减少了胆固醇的合成和吸收,同时增加了胆固醇的排泄。所有3个机理都同时受到影响,使得LDL、HDL和甘油三酸酯水平适度且平衡改善。
患者中胆固醇合成、吸收和排泄的减少和增加是通过给予本发明食用油之前和之后患者中测定的相同量相比确定的。
与药物或营养品(nutraceutical)相反,本发明的食用油可以“功能食品”表征。功能食品已由欧盟定义为“以这种方式加工或改性的普通食品,它们具有科学论证的保健促进效果并且能够以保健品销售”。在日本,“功能食品”定义为仅得自天然存在的组分并且以部分膳食部分而不是补充形式食用的普通食品(即,不是片剂或胶囊)。
优选,本发明的食用油包括至少一种降低患者中胆固醇合成的化合物,例如至少一种生育三烯酚。这些化合物的具体实例包括α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚和δ-生育三烯酚。
所述食用油也优选包括至少一种降低患者中胆固醇吸收的化合物,例如至少一种自由甾醇或甾醇酯。根据本发明可以使用的特定化合物包括菜籽甾醇的阿魏酸和脂肪酸酯、β-谷甾醇和其它甾醇和甾烷醇。
优选本发明的油包括至少一种促进患者中胆固醇排泄的化合物。这些化合物包括阿魏酸(C10H10O4)的环阿屯醇酯,另外称之为3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-丙酸、4-羟基-3-甲氧基-肉桂酸或3-甲氧基-4-羟基-肉桂酸。这些化合物的特定实例包括24-亚甲基-环阿屯醇和环阿屯醇的阿魏酸酯。
所述食用油,根据本发明,优选减少过氧化脂质和其它物质,例如蛋白质、碳水化合物和称作核酸的过氧化物、以及称作分析TBARS(硫代巴比土酸反应物)和丙醛样化合物(即TBA)、已知的心血管危险因子在血液中累积及其血液水平。
更优选,所述食用油提供至少一种限制TBARS、以及类似过氧化加合物在患者中形成和累积的化合物。
根据本发明,所述食用油还提供维生素-E样活性,无论它得自生育三烯酚还是生育酚家族,都赋予组织,例如血液抗氧化剂活性,可以生育三烯酚或生育酚测定。
并且,更优选,所述油中至少一种化合物得自生育三烯酚或生育酚家族(如本文详细所述的),使得在心血管疾病的危险患者的血液中血清生育酚或生育三烯酚水平升高。
本发明所用的生育酚、生育三烯酚、甾醇、甾醇酯和环阿屯醇优选得自天然源,但是如果需要的话也可以是经合成生产的。具体地说,这些组分中一种或多种可以是合成的或者可以得自除植物油基料之外的源。
更优选,本发明的油基本上没有反式脂肪酸。本文所用的“基本上没有”意思是小于约2%(重量/重量)。最佳地,本发明的油不包括反式脂肪酸。
临床试验证明,(i)生育三烯酚和/或生育酚与(ii)自由甾醇和/或甾醇酯与(iii)环阿屯醇的最佳比例是约1∶0.5∶0.05-1∶5∶0.5,更优选是约1∶1∶0.05。因此,在一个优选实施方式中,前述组分在本发明的油中的比例落入该优选范围内,最佳是约1∶1∶0.05。
给予患者的生育酚和生育三烯酚的量优选是约50-500mg/天,或者是约10-200mg/剂量单位。甾醇和甾醇酯的量同样优选是约50-500mg/天。环阿屯醇的量优选是约2.5-25mg/天。在一个优选实施方式中,给予患者约400毫克的生育酚和生育三烯酚、400毫克的甾醇和甾醇酯和20毫克的环阿屯醇。这与约1∶1∶0.05的组分的优选比例一致。不同组分在本发明的油中的百分比可以在很大范围内变化,只要这些组分的比例在所述范围内,并且患者每天食用每一组分的总量在所述范围内。
在一个优选实施方式中,本发明的食用油是植物油,特别是精炼米糠油和精炼米糠油与棕榈油的混合物。
更优选,所述食用油是精炼米糠油。粗米糠油含有任何市售植物油中最高百分比的不能皂化物。总不能皂化物经常超过4%(重量),约为目前用于人造奶油加工的油的4倍。
根据本发明,粗米糠油优选精炼使用。当带油的米糠与米分离时,特定活性的脂肪酶被激活,使得自由脂肪酸迅速地增加。即使米在粉碎之后不久经热或化学物质稳定,5-10%的自由脂肪酸(FFA)含量是常见的;工业米糠油可能具有高至30%的FFA水平。而且,FFA水平随季节变化。蜡水平也高并且通常与米糠用溶剂萃取的温度有关。因此米糠油是精炼最富挑战性的油。工业上,米糠油是通过化学精炼加工的。
棕榈油,另一种有用的生育三烯酚源,由于捣碎时棕榈果释放脂肪酶,因此它也具有高的FFA水平。棕榈油的FFA水平在2%-5%。大多数工业生产的棕榈油使用物理精炼法。然而,这些精炼方法生产低生育酚/生育三烯酚浓度,典型地3,000-5,000ppm的低级馏出液。从化学精炼厂获得的除臭馏出液的浓度较高,典型地是1-3%生育酚/生育三烯酚。然而,在该化学精炼过程中,甾醇和环阿屯醇的阿魏酸和脂肪酸酯离子化并损失到皂脚中。自由甾醇和三萜烯醇(环阿屯醇)可以不同程度地溶于极性和非极性溶剂中,而就其脂肪酸和阿魏酸的酯而言选择非极性溶剂。这些分子的结构与胆固醇相似。以酯形式它们更易于在消化道中从微胶粒中置换胆固醇,但是它们本身不被吸收,或者如果被吸收的话,很快被排泄掉。
因此,尽管可以从化学精炼米除臭馏出液回收富含生育三烯酚的部分,但是这些有用的酯基本上被耗尽。
已知由除臭馏出液生产富含生育酚和生育三烯酚的部分的方法包括如下方法:离子交换、由硬皂皂化和萃取、甲基酯化、自由脂肪酸的酯化和分子蒸馏、以及脱甾醇化。在每一种这些方法中,分离富含生育三烯酚的浓缩物的方法有意或顺便地除去了阿魏酸酯和环阿屯醇的天然甾醇酯类。
随着粗米糠油熟化,已发现自由甾醇用自由脂肪酸酯化。已公开该过程可以通过高温、真空下熟化所述油而加速,在适宜条件下以便自由甾醇和自由环阿屯醇酯化并且生育酚不酯化。Rogers等,J.Am.Oil Chem.Assoc.,70:No.3,1993,分析了来自不同厂商的5个可商购获得的米糠油。环阿屯醇和植物甾醇的阿魏酸酯含量(以谷维素定量)为115ppm-787ppm,平均为400ppm。在相同油中,生育三烯酚含量为72ppm-1157ppm,平均为500ppm。超过95%的谷维素和60%的生育三烯酚在传统精炼过程中都损失掉了。为了获得有效量的抗胆固醇血活性原则,患者可能每天必需食用超过1千克的油。
因此本发明满足一种新方法的需要,其中在产品中保留了生育三烯酚、甾醇酯和环阿屯醇的最佳比例,并且存在的甾醇基本上为甾醇酯的形式,其在脂质中增加的溶解度低于化合物在降低膳食胆固醇的吸收方面的功效。
一般说来,本发明的方法用粗米糠油(“油A”)开始,它经脱蜡和脱胶,并且自由甾醇和三萜烯醇用自由脂肪酸酯化。然后在保存甾醇和环阿屯醇的酯化状态的条件下,通过蒸馏或者在适宜pH下使用碱性含水硅酸钠和少量的氢氧化钾除去剩余的自由脂肪酸,以便在甾醇和环阿屯醇的酯转变成皂脚的损失最小化的条件下将自由脂肪酸转变成皂(皂化)。接下来,富含生育三烯酚的除臭馏出液,优选米糠或棕榈油的,在异丙醇中基本上皂化并且将不能皂化的部分用己烷和水萃取以生产和萃取(“油B”)。最后,将适宜部分的油A和油B混合形成具有所需浓度的生育酚、生育三烯酚、自由甾醇、甾醇酯和环阿屯醇的产品。
与包括需要法规核准的合成组分的产品如Benecol相反,本发明这些食用油的优选实施方式,例如精炼米糠油,由于它们天然地含有适宜的甾醇酯和甾烷醇酯,因此它们不需要法规授权,与Benecol不同,它们不需要冒着反式脂肪酸形成的危险进行氢化和化学加工。
本发明的食用油可以加入到各种食品中,包括,但不限于,黄油、人造奶油、冰淇淋和蛋黄酱-巧克力产品;液体如豆奶和米乳-和水-基饮料如白酒和矿泉水。本发明的油也适用于包封在明胶壳中形成软凝胶。无论本发明油制备的具体形式如何,给予患者的各种组分的每日剂量应落入前面所述的范围内。根据给定形式的本发明油的浓度,每一份食品、或者包封油等的总量也将改变。高度浓缩的形式,例如软胶囊,将以比稀释形式,例如饮料低的总量给予。
本发明还通过以下非限制性实施例加以描述。实施例1公开了本发明油的一个实施方式的制备方法。实施例2、3、4和5比较了人研究的结果,其中患者接受本发明的油或者单独或成比例地包含本发明油的成分的其它制品,其与本发明的差异相当大。实施例2将给予得自棕榈的生育三烯酚与本发明的油进行比较。实施例3将通过另一方法加工的米生育三烯酚与本发明油进行比较。实施例4将传统加工的米油与本发明油进行比较。实施例5将本发明油与加入高水平甾醇和甾醇酯的两个工业人造奶油的性能进行比较。
在每一情况下证实,仅当活性组分的比例与本发明一致时才获得所需的血脂值变化。显示本发明的油显著好地降低LDL水平并且独特好地提高HDL和降低甘油三酸酯值。
实施例1
将100g米糠油(“油A”)分析、脱蜡和脱胶,并通过AOAC法测定油的酸值。该油含有5%的如下甾醇、甾烷醇和环阿屯醇:菜籽甾醇                    15%谷甾醇                      10菜籽甾烷醇                  1.4豆甾醇                      1.5谷甾烷醇                    1.5环阿屯醇                    3024-亚甲基-环阿屯醇          40
并且,还含有1120ppm的生育酚和生育三烯酚、58%的γ-生育三烯酚。将油A在适宜真空、125℃下静置过夜,这样将酯化期间产生的水除去并将反应向右进行,加速甾醇和环阿屯醇的脂肪酸酯形成的天然熟化过程。然后将油A冷却至50℃。
将氢氧化钾和碱性含水硅酸钠(BritesorbNC,可从PQCorporation,Valley Forge,Pa商购获得)以1份氢氧化钾、4份Britesorb、6份水的比例混合成浆液制得一适中的苛性试剂。将预先测量的与5%化学计量过量的酸值相等的量的浆液加入到上面的冷油A中,并将该混合物于60℃下搅拌1小时,之后将温度升高至80℃并将混合物过滤。
将该精炼油洗涤和干燥,留下富含阿魏酸的甾醇酯和环阿屯酯的中性油,但是基本上没有自由脂肪酸和自由甾醇。
接下来,获得来自米糠油的化学精炼的除臭馏出液并进行分析。发现馏出液含有以下组分:
2.0%生育酚和生育三烯酚,包括:α-生育酚                    0.5%γ-生育酚                    0.4%α-生育三烯酚                0.1%γ-生育三烯酚                1.0%
8.0%甾醇,合计
2.0%甾醇酯
75.2%甘油酯,合计,包括:自由脂肪酸                   43.5%甘油单酸酯                            6.7%甘油二酸酯                            8.6%甘油三酸酯                            16.4%
脂肪酸的分布如下:C12:0                                0.1%(重量)C14:0                                1.0C16:0                                27.5C16:1                                0.3C18:0                                2.0C18:1                                39.0C18:2                                27.0C18.3                                 0.8C20:0                                0.8C20:1                                0.6C22:0                                0.2C24:0                                0.4
接下来,将50g该馏出液与5体积的异丙醇混合并使用AOAC法由上面的分析计算皂化。然后将80%氢氧化钾以皂化所有甘油酯组分所需计算化学计量重量的150%的量,慢慢加入到反应混合物中。反应混合物在水浴中于60℃下静置30分钟并使之冷却,然后中和并用10体积的己烷和20体积的水萃取过夜。分离己烷相,洗涤并干燥,并将半固体的最终相(“油B”)与上面获得的中性油混合。所得精炼油富含生育酚和生育三烯酚、以及环阿屯醇和甾醇的酯,但是耗尽自由脂肪酸、甘油单酸酯、甘油二酸酯和甘油三酸酯以及自由甾醇。
任选,上面所得的半固体相可以通过在4℃下从甲醇中沉淀自由甾醇而脱甾醇化,并通过蒸馏进一步浓缩,之后混合。
生育酚和生育三烯酚的产率是45%-75%,这取决于反应混合物的皂化度。生育三烯酚和生育酚与环阿屯醇和阿魏酸和甾醇酯的比例也可以通过皂化度调整。
油A和油B的混合比可以改变以生产生育酚和生育三烯酚的浓度为约0.5%-25%(重量/重量,以油的总重量为基础)的再比例化油。在较高浓度下,所述油适用于包封在软凝胶中作为营养品或治疗品。在较低浓度下,所述油可以直接加入到食品如人造奶油和蛋黄酱中。在每一情况下,所需浓度足够向食用该产品的患者提供50-500mg/天(或者约20-200mg/份)的生育三烯酚/生育酚。
实施例2
一试验组给予得自棕榈油的富含生育三烯酚的部分(TRF),它是以耗尽甾醇、甾醇酯和环阿屯醇的方式加工的,给予量为160-240mg,每天三次,持续1年。Tomeo,A.等,Lipids 30:1179-1183,1995。在接下来的2年中,将剂量增加至240mg的生育三烯酚,每天3次。Kooyenga,D.等,Asia Pacific J Clin.Nutr.6:72-75,1996。持续2年观察总胆固醇、LDL或HDL胆固醇、或者甘油三酸酯水平没有变化。然后向该试验组每天给予2.4g的含有200mg生育三烯酚的本发明油,每天3次,持续1年。观察到血脂改善:LDL胆固醇降低20%,HDL胆固醇增加20%,甘油三酸酯降低23%。参见表1。
表1:补充得自棕榈的生育三烯酚或本发明的具有不能皂化物的米糠生育三烯酚的血脂变化。数据以mg/dl计。N=50受试者。
    脂质 基线(开始)     第1年     第3年   第4年
                     ------棕榈生育三烯酚期间------   本发明
    胆固醇,合计     239     239     239   206*
    LDL胆固醇     165     165     165   132*
    HDL胆固醇     40     40     40   48*
    甘油三酸酯     211     211     211   162*
*3年和4年的数据差异显著,p<0.01。
实施例3
实施例2的10个研究成员转换至NuTriene,一种由EastmanChemical Company以耗尽甾醇酯和环阿屯醇的油的方式生产的米油的富含生育三烯酚的浓缩物。在实施例2中观察到的LDL胆固醇降低仍然保持,但是没有了HDL胆固醇水平增加25%和甘油三酸酯降低50%。参见表2。
表2:补充本发明的米糠生育三烯酚和不能皂化物,或NuTriene,在4至5年之间受试者的血脂变化。数据以mg/dl计。N=10。
    脂质     第4年(尾)     第5年(尾)
    胆固醇,合计     206     205
    LDL胆固醇     132     127
    HDL胆固醇     48     46
    甘油三酸酯     162     187
实施例4
患者给予由物理精炼米油制得且富含甾醇、甾醇酯和环阿屯醇(每天总共1.5g)但是生育三烯酚差(每天2.5mg)的人造奶油。观察到血脂值没有变化。Weststrate,J.A.等,European J.Clin.Nutr.52:334-343,1998。参见表3。
表3:与用本发明油获得的相比,给予来自物理精炼的米糠油的甾醇和甾烷醇酯和生育三烯酚的患者中血脂组分的百分比变化。
    脂质     米糠油*     本发明**
    胆固醇,合计     -1.1     -14
    LDL胆固醇     -1.5     -20
    HDL胆固醇     -1.3     +20
    LDL/HDL胆固醇     -0.3     +28
*1.5g/d的30g油提供2.5mg/d生育三烯酚。
**如上所述。
实施例5
将实施例4的患者转换至含有甾烷醇酯(Benecol)或甾醇酯的人造奶油制品。两个组每天接受含有约3g所述酯的人造奶油。观察到LDL胆固醇浓度降低8%-13%,但是发现HDL胆固醇或甘油三酸酯的变化不显著。该研究证实谷甾烷醇酯的其它研究的发现,但是报道血浆抗氧化剂显著耗尽。Miettinen,T.A.等New Engl.J Med 333:1308-1312,1995;Weststrate,J.A.等,Eur.J Clin.Nuir.52:334-343,1998。参见表4。
表4:与本发明油获得的相比,给予甾醇和甾烷醇酯的患者的血脂的百分比变化。
    脂质   甾醇酯* 甾烷醇酯** 本发明油***
    胆固醇,合计     -8.3     -7.3     -14
    LDL胆固醇     -13     -13     -20
    HDL胆固醇     n.s.     n.s.     +20
    甘油三酸酯     n.s.     n.s.     -23
    LDL/HDL胆固醇     -14     -12     -28
*甾醇酯:30g油的3g/d;0mg/d生育三烯酚。**甾烷醇酯:30g油的3g/d;0mg/d生育三烯酚。***如上所述。
                      结论
前面的数据证实,根据本发明控制生育三烯酚/生育酚、甾醇酯、自由甾醇和环阿屯醇的量以最佳治疗方式调整血脂值。实施例2的结果显示,仅给予生育三烯酚对血脂值没有影响。实施例2还证实了给予本发明的食用油降低了总胆固醇、LDL胆固醇和甘油三酸酯,同时增加了HDL胆固醇。实施例3证实了得自大米且耗尽甾醇酯和环阿屯醇的生育三烯酚浓缩物不能有效地增加HDL水平或者降低甘油三酸酯。实施例4显示了生育三烯酚差的物理精炼米油无效,并且实施例5显示了在没有生育三烯酚的情况下给予甾醇和甾醇酯不能使HDL或甘油三酸酯值改变。
通过给予本发明油的患者获得的血清总胆固醇和LDL胆固醇的降低可以与通过药物治疗获得的最好结果相比。HDL胆固醇水平增加20%和甘油三酸酯降低23%特别显著。Watkins,T.等,Environmental Nutr.Interactions 3:8-18,1999。已发现与仅总胆固醇或仅LDL胆固醇水平相比,总胆固醇(TC)/HDL胆固醇之比是测定冠心病的危险的优异手段。在Framingham研究中,8年中冠心病的可能比例,在具有最低TC/HDL比的男性中与具有最高比的男性中相比增加10倍。Kinosian,B.等L J Invest Med 43.-443-450,1995。平均地,给予本发明油的患者的TC/HDL比从5.97到4.29下降28%。本发明油对改善公众健康的潜在影响本身是明显的。在给予本发明油的临床试验中报道获得TC/HDL比降低28%的50岁男性活到75岁以上的可能性多2倍。
前面的实施例仅仅是描述目的,无论如何不限制申请人的本发明范围,本发明范围是通过下面附加的权利要求书定义的。

Claims (51)

1、一种食用油,它减少患者对胆固醇的合成、吸收以及血液水平并增加胆固醇从所述患者的排泄。
2、权利要求1的食用油,包含至少一种减少所述患者吸收胆固醇的化合物。
3、权利要求1的食用油,包含至少一种减少所述患者合成胆固醇的化合物。
4、权利要求1的食用油,包含至少一种增加胆固醇从所述患者排泄的化合物。
5、权利要求1的食用油,基本上没有反式脂肪酸。
6、权利要求1的食用油,它减少血液的过氧化物水平。
7、权利要求1的食用油,它在油中提供至少一种限制TBARS在高胆固醇血症患者内形成和累积的化合物。
8、权利要求1的食用油,它向患者的血液和其它组织赋予增加量的生育酚或生育三烯酚抗氧化剂活性。
9、权利要求1的食用油,它显著降低血液胆固醇超过5.6μmol/L的高胆固醇血症患者的血液水平的总胆固醇、LDL胆固醇和甘油三酸酯/HDL胆固醇。
10、权利要求1的食用油,它显著增加高胆固醇血患者的血液的HDL胆固醇水平,以血液HDL胆固醇/总胆固醇表示。
11、权利要求1的食用油,它降低高胆固醇血患者的血液的过氧化物水平,它是以TBARS测定的。
12、权利要求1的食用油,它显著升高高胆固醇血患者中的血液的维生素E活性水平。
13、一种食品,包含权利要求1的油。
14、权利要求13的食品,它选自黄油、人造奶油、冰淇淋和蛋黄酱。
15、权利要求13的食品,它是巧克力产品。
16、权利要求13的食品,它是液体。
17、权利要求13的食品,它选自牛奶、豆奶和米乳。
18、权利要求13的食品,它是水基饮料。
19、权利要求13的食品,它选自白酒和矿泉水。
20、权利要求1的食用油,它是植物油或植物油的混合物。
21、权利要求1的食用油,它是精炼米糠油。
22、权利要求1的食用油,它是米糠油和棕榈油的混合物。
23、一种软凝胶,包括含权利要求1的食用油的填料。
24、一种食用油,包含:i)约10-30%的生育酚、生育三烯酚或其组合,ii)约2-20%的自由甾醇;iii)约2-20%的甾醇酯;iv)约0.1-1.0%的环阿屯醇;和v)约7-19%的饱和脂肪,其中所有百分比都是重量/重量。
25、权利要求24的食用油,包含约70-80%的总脂肪。
26、权利要求24的食用油,包含小于2%反式脂肪酸。
27、权利要求24的食用油,包含约20-60%的不能皂化的组分。
28、权利要求24的食用油,它是植物油或植物油的混合物。
29、权利要求24的食用油,它是精炼米糠油。
30、权利要求24的食用油,它是米糠油和棕榈油的混合物。
31、一种食品,包含权利要求24的油。
32、一种食用油,包含约20-60%的不能皂化的组分,所述不能皂化的组分包含(i)至少一种生育三烯酚或生育酚,(ii)至少一种自由甾醇或甾醇酯,和iii)至少一种环阿屯醇,其中所述组分i)∶(ii)∶(iii)的量的比例是约1∶0.5∶0.05-约1∶5∶0.05。
33、权利要求33的油,其中所述比例是约1∶1∶0.05。
34、一种在患者中降低总血清胆固醇和血清LDL胆固醇并升高血清HDL胆固醇的方法,包括步骤:给予所述患者有效量的权利要求1的食用油。
35、权利要求34的方法,还降低患者中的血液甘油三酸酯水平。
36、权利要求34的方法,其中所述油以食品的形式给予。
37、权利要求34的方法,其中所述油以约1-10mg/kg体重/天给予所述患者。
38、权利要求34的方法,其中总血清胆固醇降低约5-25%。
39、权利要求34的方法,其中血清LDL胆固醇降低约5-25%。
40、权利要求34的方法,其中血清HDL胆固醇升高约10-30%。
41、权利要求34的方法,其中所述患者中HDL与总胆固醇之比升高约10-30%。
42、权利要求34的方法,其中血清过氧化物水平,以TBARS测定,降低约10%-60%。
43、权利要求34的方法,其中血清生育酚或生育三烯酚水平升高20%-110%。
44、一种降低患者中总血液胆固醇的方法,通过给予所述患者有效量的降低所述患者胆固醇的合成、吸收和血液水平并增加从所述患者排泄胆固醇的食用油。
45、权利要求44的方法,其中所述油包含至少一种在所述患者中降低胆固醇合成的化合物。
46、权利要求44的方法,其中所述油包含至少一种增加从所述患者排泄胆固醇的化合物。
47、权利要求44的方法,其中所述油包含如下的混合物:(i)至少一种生育三烯酚或生育酚;(ii)至少一种自由甾醇或甾醇酯;(iii)至少一种环阿屯醇。
48、权利要求47的方法,其中所述混合物中组分(i)-(iii)的比例有效地降低经患者的胆固醇的吸收、合成和血液水平,还增加从所述患者排泄胆固醇。
49、一种抗胆固醇血症的食用油的制备方法,包括步骤:a)提供一种食用油,和b)调整所述食用油中生育酚、生育三烯酚、自由甾醇、甾醇酯和环阿屯醇的含量,使得所述油包含约(i)10-30%的生育酚、生育三烯酚或其组合,(ii)约2-20%的自由甾醇;(iii)约2-20%的甾醇酯;(iv)约0.1-1.0%的环阿屯醇,其中所有百分比都是重量/重量。
50、权利要求49的方法,其中在步骤a)中所述食用油包括至少一种饱和脂肪,并且在步骤b)中所述食用油中饱和脂肪的含量经过调整以便所述食用油包含约7-19%的饱和脂肪。
51、权利要求49的方法,其中在步骤a)之后所述食用油基本上没有反式脂肪酸。
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