CN1435693A - 一种β－兴奋剂金标层析快速检测方法及装置 - Google Patents
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Abstract
一种β－兴奋剂金标层析快速检测方法包括以下步骤：取液体样本先与金标克伦特罗抗体反应结合成抗原－抗体结合物，并使抗体结合位点饱和或未饱和；与克伦特罗－BSA偶联物竞争结合抗体；最后抗原－抗体结合物或金标抗体与抗体反应结合。本产品用于检测克伦特罗方便快捷，非常适用于现场快速检测。
Description
技术领域
本发明涉及一种β-兴奋剂金标层析快速检测方法及装置
背景技术
普通的β-兴奋剂如摄入过量，会对人体造成极大的危害，比如致癌、中毒等。国家明令禁止在有关饲料中使用。
目前对食品中β-兴奋剂含量的检测方法比较复杂，通常采用HPLC或GC/MS等。
发明内容
一种β-兴奋剂金标层析快速检测方法包括以下步骤：
(1)取液体样本先与金标克伦特罗抗体反应结合成抗原-抗体结合物；
(2)再与克伦特罗-BSA偶联物结合；
(3)最后抗原-抗体结合物与抗抗体反应结合。
上述的金标克伦特罗抗体为20～90nm直径范围胶体金颗粒和50～200ug/ml浓度范围的克伦特罗PBS溶液。
上述的β-兴奋剂金标快速检测方法，所述的克伦特罗抗体为单克隆抗体。
上述的β-兴奋剂金标快速检测方法，所述的克伦特罗抗体为多克隆抗体。
上述的β-兴奋剂金标快速检测方法，所述的抗抗体由普通动物免疫另一种动物来获得。
一种β-兴奋剂金标快速检测装置，包括滤纸；其特征在于玻璃纤维、聚脂纤维、硝酸纤维素膜依次固定于基板上；其中聚脂纤维上包被有金标克伦特罗抗体，在硝酸纤维素膜上间隔一定距离依次包被有偶联物和抗抗体。
附图说明
图1为本发明检测装置的结构示意图。
具体实施方式：
实施例1：
用70nm胶体金颗粒(紫红色)和100ug/ml克伦特罗抗体溶液制成金标抗体；并把其以2ul/cm的量包被在聚脂膜的一端；本实施例中采用的克伦特罗抗体为多克隆抗体。
把克伦特罗-BSA偶联物2000ug/ml(PBS溶液)以1ul/cm的量包被在硝酸纤维素膜上，位于的金标抗体上端，形成T线区域；
用抗抗体4000ug/ml(PBS溶液)以1ul/cm的量包被在硝酸纤维素膜偶联物区域的上端形成C线区域。
包被以后需要进行干燥处理。
把聚脂膜固定在基板上，可以采用普通的粘贴方法。
同时在聚脂膜金标抗体一端连接固定玻璃纤维，在聚脂膜另一端，即C线区域上端连接滤纸。玻璃纤维能吸收样品溶液，而滤纸能增强吸力，使整个产品形成从玻璃纤维一端到滤纸的一个吸力方向，使溶液能从一个反应区进入另一个反应区，先后进行反应，以完成检测过程。
产品检测β-兴奋剂时，将玻璃纤维一端插入样品溶液内，样品溶液先经金标抗体区域，与金标克伦特罗抗体反应结合生成抗原-抗体结合物，使抗体结合位点饱和，当随同液体到达T线处时，抗体无法再与包被在这里的偶联物结合(竞争结合原理)，因此在T线处不显色；到达C线处后，抗原-抗体结合物与包被在这里的抗抗体反应结合，因此在此处显色。此为阳性结果。
如果样本中不含克伦特罗(或含量没有达到一定量)，则金标抗体未达到饱和状态，随同液体爬升到T线处时，会与这里的偶联物反应结合从而显色；在C线处，剩余的金标抗体仍然要与抗抗体结合反应而显色。此为阴性结果。
因此，定性结果的判断是：C、T线均显色为阴性(二条紫红色线)；只有C线显色为阳性(一条紫红色线)。
C线为产品本身的质控线。当检测时，发生C线不显色时，说明检测产品本身出现质量问题，可能是抗原、抗体失去活性，或产品质保期已，产品失效。
抗原、抗体作为生物活性物质，一般在4℃条件下贮存并保持较长时间的生物活性，当它们包被在固相载体(如硝酸纤维素膜等)上并干燥以后，则能在常温(2～30℃)下长期保持生物活性。
实施例2：
与实施例1不同的是本实施例采用的是单克隆抗体，在检测瘦肉精即克伦特罗时，非常简便。
产品可以作为猪、牛、羊等牲畜初筛检测是否有β-兴奋剂使用的一种现场快速出结果的手段，尿液、奶汁、血液、肌肉或内脏提取液都可以作为样本。
Claims (6)
1、一种β-兴奋剂金标层析快速检测方法包括以下步骤：
(1)取液体样本先与金标克伦特罗抗体反应结合成抗原-抗体结合物；
(2)再与克伦特罗-BSA偶联物结合；
(3)最后抗原-抗体结合物与抗抗体反应结合。
2、如权利要求1所述的金标克伦特罗抗体为20～90nm直径范围的胶体金颗粒和50～200ug/ml浓度范围的克伦特罗PBS溶液。
3、如权利要求1β-兴奋剂金标快速检测方法，其特征在于所述的克伦特罗抗体为单克隆抗体。
4、如权利要求1β-兴奋剂金标快速检测方法，其特征在于所述的克伦特罗抗体为多克隆抗体。
5、如权利要求1β-兴奋剂克标快速检测方法，其特征在于所述的抗抗体由普通动物免疫另一种动物来获得。
6、一种β-兴奋剂金标快速检测装置，包括滤纸；其特征在于玻璃纤维、聚脂纤维、硝酸纤维素膜依次固定于基板上；其中聚脂纤维上包被有金标克伦特罗抗体，在硝酸纤维素膜上间隔一定距离依次包被有偶联物和抗抗体。
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 02111518 CN1435693A (zh) | 2002-04-24 | 2002-04-24 | 一种β－兴奋剂金标层析快速检测方法及装置 |
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| CN 02111518 CN1435693A (zh) | 2002-04-24 | 2002-04-24 | 一种β－兴奋剂金标层析快速检测方法及装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
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| CN1435693A true CN1435693A (zh) | 2003-08-13 |
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| CN 02111518 Pending CN1435693A (zh) | 2002-04-24 | 2002-04-24 | 一种β－兴奋剂金标层析快速检测方法及装置 |
Country Status (1)
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|---|---|
| CN (1) | CN1435693A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN100370256C (zh) * | 2004-06-11 | 2008-02-20 | 中国兽医药品监察所 | 一种检测克仑特罗的酶联免疫试剂盒 |
| CN106093322A (zh) * | 2016-07-28 | 2016-11-09 | 广州万联生物科技有限公司 | 一种β‑兴奋剂多残留的量子点免疫层析试纸条快速检测方法 |
-
2002
- 2002-04-24 CN CN 02111518 patent/CN1435693A/zh active Pending
Cited By (2)
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| CN100370256C (zh) * | 2004-06-11 | 2008-02-20 | 中国兽医药品监察所 | 一种检测克仑特罗的酶联免疫试剂盒 |
| CN106093322A (zh) * | 2016-07-28 | 2016-11-09 | 广州万联生物科技有限公司 | 一种β‑兴奋剂多残留的量子点免疫层析试纸条快速检测方法 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |