CN1409606A - 增强犬和猫的繁殖性能的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种增强伴侣动物如狗和繁殖性能的方法，包括给所述动物饲喂包含ω－6和ω－3脂肪酸的食物，其中所述ω－6脂肪酸与ω－3脂肪酸的比例为约3.5∶1至约12.5∶1。当给所述动物饲喂本发明的食物时，维持了所述动物的必需脂肪酸状况，并在随后的产仔中维持了一窝产仔数。

Description

增强犬和猫的繁殖性能的方法
本发明涉及增强犬和猫的繁殖性能的方法，更特别是，涉及给伴侣动物如狗或猫在繁殖龄期饲喂的食物，其包括有益数量的所需比例的必需脂肪酸以保持适当的必需脂肪酸状况和增强繁殖性能。
雌性狗的繁殖性能(即一窝成活产仔数)通常在第三次产仔后下降。在母狗的繁殖性能中营养一直被认为是起作用的因素。但对营养的提及一般只局限于含糊不清的建议，即高质量的富含能量的食物对繁殖是足够的。几乎没人对“质量”进行过定义或对充足的食物与有关繁殖的更广义的食物进行过区别。
猫也在产仔后的繁殖性能方面表现出下降的趋势。针对包括狗和猫的伴侣动物的一些研究表明，在食物中存在微量元素如锰、锌、和铜可改进繁殖性能。但这种效应的机理还不清楚。
对应的，本领域中需求一种方法，在伴侣动物的繁殖龄期提供适当的营养来维持繁殖性能。
本发明通过提供用于如狗和猫的伴侣动物的食物满足了该需求，在所述食物中含有效量的必需脂肪酸来维持必需脂肪酸的状况以及增强和维持繁殖性能。
“必需脂肪酸状况”是指在动物中存在的ω-6和ω-3脂肪酸与ω-7和ω-9脂肪酸的关系。更具体的说，必需脂肪酸状况，或EFA指数，表示ω-6和ω-3脂肪酸之和除以ω-7和ω-9脂肪酸之和。已发现，狗在初产后的各次产仔中，由于所选择的ω-3和ω-6脂肪酸的不足，母狗的必需脂肪酸状况下降。还发现，猫在初产后的各次产仔中也表现出必需脂肪酸状况下降的趋势。
“增强的繁殖性能”是指与饲喂其它食物的伴侣动物所观察到的繁殖性能相对比，改进了总体繁殖性能，包括增加活产数和降低死产数。
按照本发明的一个方面，提供了一种增强伴侣动物繁殖性能的方法，包括给所述动物饲喂包含ω-6和ω-3脂肪酸的食物，其中所述ω-6与ω-3脂肪酸的比例为约3.5∶1至约12.5∶1。ω-6与ω-3脂肪酸的比例更优选为约5∶1至约10∶1，最优选约5∶1至约8∶1。
优选在所述食物中总脂肪酸的至少15％为ω-6脂肪酸。还优选在食物组合物中总脂肪酸的至少2％为ω-3脂肪酸。优选，以干重计，所述食物包含约2.5至7.5wt％的ω-6脂肪酸和约0.3至1.5wt％的ω-3脂肪酸。
当所述动物是狗时，所述食物优选包含约22至44wt％的蛋白质和约10至30wt％的脂肪。更优选，所述食物包含约25至35wt％的蛋白质和约15至25wt％的脂肪。
当所述动物是猫时，所述食物优选包含约30至45wt％的蛋白质和约10至30wt％的脂肪。更优选，所述食物包含约32至42wt％的蛋白质和约15至28wt％的脂肪。
当给所述动物饲喂本发明的食物时，已发现，在初产后的随后产仔中繁殖性能的下降得以缓解。还发现，饲喂本发明食物的动物保持了较好的必需脂肪酸状况。此外，表现出较好必需脂肪酸状况的动物还证实了改进的繁殖性能，包括增加了活产数并增加了断奶时的新生仔数。
对应的，本发明的一个特征是提供了用于伴侣动物如狗和猫的食物，其通过在动物食物中提供有效数量的呈适当比例的必需脂肪酸而维持了必需脂肪酸状况并缓解了繁殖性能的下降。本发明的这一及其它特征和优点从如下的详细说明、附图、和所附的权利要求书中可清楚地看出。
图1图示了生仔数的出现频率；
图2图示了在各次产仔中一窝产仔数下降或增加的母狗的百分比；
图3图示了饲喂食物I、II和III的母畜产仔数的总频率；
图4图示了饲喂食物I的母畜产仔数的频率；
图5图示了饲喂食物II的母畜产仔数的频率；
图6图示了饲喂食物III的母畜产仔数的频率；
图7图示了相对于饲喂食物I、II和III的母畜的随后产仔，一窝产仔数的群体(colony)百分比下降；
图8图示了对于食物I、II和III而言的食物对首次发情年龄的影响；
图9图示了经产次数对针对产仔数而言的猫一窝产仔数的的影响；
图10图示了经产次数对针对断奶数而言的猫一窝产仔数的的影响；
图11图示了经产次数对猫产仔断奶重量的影响；
图12图示了经产次数对猫母体EFA状况的影响；
图13图示了经产次数对猫母体RBC膜中二十二碳六烯酸(docosahexaneoic acid)含量的影响；
图14图示了经产次数对猫母体RBC膜中花生四烯酸含量的影响；
图15图示了经产次数对猫母体CADI的影响；
图16图示了经产次数对猫母体RBC膜中n-7和n-9总含量的影响；
图17图示了经产次数对猫母体RBC膜中蜜酒(Meads’acid)含量的影响；
图18图示了食物对猫母体中EFA指数的影响；和
图19图示了食物对断奶小猫数的影响。
本发明提供了增强繁殖性能的食物，其通过在动物食物中提供有效数量的呈适当比例的必需脂肪酸来实现。已发现，雌性狗和猫在繁殖过程中出现必需脂肪酸状况的下降。还发现，对于各随后的繁殖循环(经产次数)必需脂肪酸的下降表现的更明显。
本发明的食物通过提供有效数量的呈适当比例的必需脂肪酸校正了这种必需脂肪酸的缺乏。与其它市售食物相对比，发现用本发明食物饲养的狗增加了一窝产仔数，并减少了不良怀孕(misconceptions)数。
所述食物可呈任何适宜的宠物食品组合物的形式来提供，其还给动物提供适当的营养。例如，用于本发明的典型犬食物可含有约10至30％的脂肪、和约22至44wt％的蛋白质。典型的猫食物可含有约10至30wt％的脂肪、和约30至45wt％的蛋白质。但不需要这些或其它营养物的特定比例或百分比。
为更容易地理解本发明，参照如下实施例进行说明，所述实施例用来对本发明进行说明，而不是限制其范围。
实施例1
为更清楚地理解犬的繁殖，由商业猎兔犬繁育者得到了追溯检查的历史数据(1418次产仔)，并对其进行统计分析。主要食物是小群畜舍食物(the colony house diet)，其由市售实验狗食构成，基物含约26％的蛋白质和16％的脂肪。统计模型说明年代、季节、产仔次数、年龄和其相互作用对出生时的一窝产仔数的主要影响。由于管理措施上的原因，年龄和产仔次数的影响不能充分地分离，因而从模型中除去了年龄。应指出的是，一些母畜在各次产仔中进行了多次观测，因而产仔数的影响有些混乱。为有助于解决这一问题，根据观测次数对母畜进行分组并针对未检测到差别的产仔进行分析。尽管这些设计存在缺陷，但结果表明，母畜产仔次数影响了猎免犬的繁殖性能。
结果
结果列于以下表1中。上标表明有显著差异(P＜.05)。
表1经产次数    出生数 1      活产数 1       死产数 1   ％ 总体出生平均数总体      6.13±.05      6.09±.05       0.04±.011        6.00±.07a    5.95±.08a    0.05±.02ab       97.82        6.24±.10b    6.22±.09b    0.03±.03a        101.83        6.39±.12b    6.36±.12b    0.10±.03ab       104.24        6.19±.17ab   6.10±.17ab    0.13±.05b        100.95        5.66±.28a    5.61±.28a    0.05±.07ab        92.31LSMean±SE
群体特征
为定义这一群体的“典型的一窝产仔数”，根据出现频率将数据绘制成图。定义“典型的”用来包括群体的总幼畜数平均±1SD，“非典型的”为其余的观测。这些标准使得群体具有宽范围但仍考虑了位置(situation)的生理结果。结果示于图1中。这一群体的“典型的一窝产仔数”发现其范围为4至8只仔，并占所有观测的多于80％。超过8只仔的产仔称为“大”(占所有观测的≈8％)，3或少于3只仔称为“小”(占所有观测的≈7％)。另外，观察到，一窝产仔数大的雌性畜中的~75％在随后的产仔中出生的一窝产仔数小或低于平均数((≈4.5只/次产仔)。相反，出生的一窝产仔数小的雌性畜其中的≈70％发现在其随后的产仔中具有大或高于平均值的一窝产仔数(＞7.5只仔/次产仔)。这些结果可解释为总体母体状况的表征(内分泌、营养储备等)，是雌性满足繁殖需要的能力的的指征。通过检查该群体如何响应随后的产仔可获得其它的指征。在图2中图示了随产仔次数发生一窝产仔数下降或增加的群体百分比的图表。这些数据表示了就一窝产仔数和产仔次数而言的群体稳定性。其中一些动物的一窝产仔数增加而另一些动物的一窝产仔数下降，含有这两种动物的群体的存在表明其为对应于增加或减少的一窝产仔数伴有改进或下降的母体状况的波动类型。
在孕前包括必需脂肪酸的母体营养贮备是关系到与其前次产仔相对比雌畜一窝产仔数是大还是小的影响因素。例如，可预计在怀孕时营养贮备较好的雌性畜的一窝产仔数要大于母体状况下降的雌性畜。因而，增加和减少一窝产仔数的波动类型反映了雌性畜前次产仔的营养消耗程度。
实施例2
为确定母体营养对犬繁殖的影响，从第二个商业猎免犬繁育机构得到了历史数据(16032次产仔)。机构管理表明，在基因选择或饲养管理方面没有变化，只是在所检测的1987至1998年度食物发生了改变。饲喂的食物说明和年代详细列于表2中。应指出的是，食物说明仅是近似值，因为在进行饲喂时未进行实验室分析。对所有群体和对三种食物的每一种均检测性能参数、妊娠期长度(GL)、产仔间隔(WI)、第一次产仔年龄、产仔数(NB)、产仔成活数(NBA)、产仔死胎数(NBD)、产仔次数、季节、不良妊娠(misconception)率、对随后产仔的影响、和一窝产仔数频率。由于不能得到临时食物组，不可能进行食物间年度影响的分析。但对数据分析其年度(食物)作用。排除所有不是用单一食物产生的产仔(繁殖至产仔)，因而所有在一种食物分类内的产仔从怀孕起均接受该食物。如同实施例1，有的母畜在各次产仔中接受了多次观测，因而产仔次数的影响有些混乱。另外，一些母畜在其繁殖进程中的某些时间点饲喂了多种食物。对在其全部繁殖期接受单一食物的母畜进行独立的分析以解决这种混乱。
表2.近似的食物组成及其饲喂时间。
                食物I2       食物II2      食III2
                 58月          24月           58月
项目
蛋白质％1        28            31            31
脂肪％1          21            20            20
NFE％1           39            32            34
灰分％1          7             7.5           6.5
水分  ％1        3.5           7.8           6.3
Ca％1            1.7           1.1           1.3
P％1             1.0           1.0           0.9
能量(kcal/kg)1   5100          4900          5050
DM  消化率％1    78            81            85
w6∶3 比值         20∶1*      20∶1*       5.0∶1
*基于以组计的平均组分含量值的估计值。
1基于相似基础食物的历史数据(未出版)。
2食物I＝Bil Jac，来自Bil-Jac Foods，食物II＝EukanubaOriginal，来自The Iams Company，食物III＝EukanubaPremiumPerformance with Omerga CoatTM，来自The Iams Company
结果
如下结果是基于由17116次交配的16032次产仔的65873858次观测和分别对食物I、II和III的5587次产仔。分析未发现季节或年度(食物)对检测的任何繁殖参数有影响。未检测到食物对GL或WI有显著影响，尽管对于食物III的WI趋向于略短。这种轻微的下降可能与同食物I和II相对比(分别为7.58 & 8.69％)食物III的不良妊娠率(misconception)(5.19％)的小辐下降有关。对所有食物的群体的平均GL为63.6±2.75(范围＝59至67)天(繁殖后)，在小的一窝产仔数(≤4只仔)中GL略长(64.1±3.2)而在大的一窝产仔数(≥9只仔)中GL略短(62.3±2.7)。
未发现食物对GL有影响，但对首次产仔的年龄检测到显著影响(P＜.03)，对于食物I、II和III其初次产仔分别在1.05，1.04和0.99岁龄。虽然食物对首次产仔的不良妊娠(misconception)率未发现有显著影响，但担心首次繁殖不良妊娠可不同地受食物影响。因而针对首次繁殖不良妊娠进行了第二项分析。结果与初始发现相似，与饲喂食物I和II的母畜相对比，饲喂食物III的母畜首次产仔年龄显著低(-17天)。对NB、NBA和NBD的经产次数结果示出以下表3中。不同上标表明有显著差异(P＜0.05)。表3.经产次数对犬繁殖性能的影响。
经产次数   食物     出生数1      活产数1      死产数1
  总体      I      6.73±.03a    6.46±.03a    0.27±.01a
  总体      II     6.78±.04a    6.53±.04a    0.25±.01a
  总体      III    6.95±.03b    6.77±.03b    0.17±.01b
   1        I      6.33±.05a    6.03±.05a    0.29±.015a
   1        II     6.78±.09c    6.56±.09b    0.22±.030b
   1        III    6.58±.07b    6.43±.07b    0.15±.022c
   2        I      6.79±.06      6.58±.06a    0.21±.015a
   2        II     6.87±.09      6.71±.09ab   0.15±.024b
   2        III    6.90±.07      6.77±.03b    0.13±.020b
   3        I      7.14±.06      6.94±.06       0.21±.015a
   3        II     7.32±.09      7.13±.09       0.19±.022a
   3        III    7.22±.07      7.11±.07       0.11±.017b
   4        I      7.02±.07a    6.79±.07a    0.23±.018a
   4        II     7.08±.09a    6.88±.09a    0.21±.024a
   4        III    7.31±.07b    7.16±.07b    0.15±.017b
   5        I      6.78±.08a    6.42±.08a    0.36±.030a
   5        II     6.75±.10a    6.41±.11a    0.35±.037a
   5        III    6.92±.07a    6.70±.07b    0.21±.025b
   6        I      6.39±.11a    6.05±.11a    0.33±.031a
   6        II     6.25±.13a    5.93±.13a    0.33±.037a
   6        III    6.75±.10b    6.52±.10b    0.23±.028b
   7        I      6.03±.15a    5.78±.16a    0.46±.058a
   7        II     5.85±.14a    5.41±.14a    0.44±.053a
   7        III    6.35±.13b    6.12±.13b    0.22±.048b
   8        I      5.58±.25      5.16±.25       0.41±.018a
   8        II     5.61±.14      5.36±.14       0.25±.024b
   8        III    5.87±.18      5.58±.18       0.29±.017b
   9        I      4.24±.49a    3.88±.48a    0.36±.018
   9        II     5.38±.17a    5.13±.17b    0.25±.024
   9        III    5.54±.25b    5.23±.25b    0.30±.017
1LSMean±SE.
无论食物如何，经产次数影响到母畜性能，随着经产次数的增多，使得NB和NBA初始增加随后稳步下降。食物I和II的这些发现在类型上与实施例1所示数据证实的结果是相似的，在第三次产仔后繁殖性能下降。相反，饲喂食物III的母畜直到第四次产仔后NB和NBA才开始下降。对于第2次和第3次产仔的NB来说，发现所有食物都是相似的，当与食物I相对比时，食物III在第2次产仔中增加了活产数。当与饲喂食物I的母畜相对比时，除第9次产仔以外，当与饲喂食物II的母畜相对比时，除1、8和9次产仔以外，饲喂食物III的母畜所有其它次产仔均显著减少了死产数。如先前所提到的，一些母畜在其繁殖期中食用了两种或三种这些食物。如在所述分析中仅涉及食用单一食物的动物，当与食物I相对比时，对于饲喂食物III的母畜，总体(1-6次产仔)性能值还另外有NB增加0.62，NBA增加0.84，及NBD下降0.12。由于除第3次产仔外只饲喂食物II的动物的数量有限，所以在这项分析中没有包括的II。
群体特性
图3-6中图示了对于所述食物的以群体出生率百分比计的出现频率(图3图示了对于所有食物而言母畜生仔的总体频率图，而图4-6图示了饲喂各种食物I、II和III的母畜生仔频率图)。虽然实施例2中的群体显然优于实施例I中的群体，但在实施例2中也有由于群体食物所致的图线向右的小位移。对于所有食物，这种群体(实施例2)频率图表明，实施例2的“典型”一窝产仔数范围是4至9只仔，一窝产仔数≥10称为“大”，而≤3称为“小”。但，当对比地进行检测时，饲喂食物III的母畜的图型有明显的向右位移，其所有产次中一窝产仔数≥8只仔的大于40％，相对比的是，食物I和II的对应数值约为35％。当检测NBA时观察到相似的结果，饲喂食物III的母畜中产仔数为8或更多只仔的≈40％，相对比的是，食物I和II食物的母畜分别为31和33％。
所述群体的产仔间隔发现为平均221±35天，食物没有影响。由于群体管理措施方面的原因，产仔间隔与不良怀孕发生率高度相关。但根据分析，数据表明食物对母畜的不良怀孕率有影响，其中食物I和II的母畜每13次和每12次交配经历1次不良怀孕，而食物III每20次交配出现1次。为确定产仔间隔对一窝产仔数的影响，检测自出现不良怀孕后第二次产仔以后的一窝产仔数。这一标准得到的结果是，93％以上的观测其产仔间隔≥280天。数据以对单一母畜的总体产次平均值百分比计。发现，饲喂食物I和II的母畜在不良怀孕后的一窝产仔数约为其平均值的127和124％，相对比的是饲喂食物III的母畜的对应值为111％。虽然必须考虑到一些基因差别，但这些结果意味着，与其它食物基物相对比，由食物III基物所致的母体状况得到改善或维持在较高的水平。当考虑到随着产仔次数而出现的一窝产仔数的群体下降百分比时(图7)，进一步支持了以上结论。有关这一数据的感兴趣的一点是，对食物III相对比，饲喂食物I的母畜中经历一窝产仔数下降的群体百分比增加(+12％)。应指出的是，食物II的第4次产仔数据是基于少于200只动物得出的，并由于数量不充足而排除了食物II的第5次产仔数据。这些观测是基于在其全部繁殖期饲喂单一食物的动物。
总体来说，产次对一窝产仔数(NB、NBA和NBD)有明显的影响，其性能初始增加，对食物I和II在第3次产仔后稳步下降，对食物III在第四次产仔后稳步下降。另外，虽然不能排除有其它起作用的因素的可能性，所述数据证明了食物对一窝产仔数(NB、NBA和NBD)的影响，当与食物I和II相对比时，饲喂食物III的母畜的频率图向右位移(改进)。数据还表明，食物可引起不良怀孕率的略微下降。这些观测结果当与食物引起的首次产仔年龄下降的结论相结合时就证实了食物基物可影响母狗的繁殖进程，其中食物III是优异的。
在实施例1所述的研究中，提供了证实产次和随后的产次对母狗繁殖力的影响的数据，但对营养组分未进行评价。就饲养、基因选择、和饲养密度而言，这种群体在与实施例2中所述研究相似的条件下进行管理。这一群体的主要食物是由25％蛋白质(动物和植物蛋白质)和16％脂肪组成实验犬基物，其总体食物的干物质(DM)消化率约为75％。如在表2中所述，在实施例2研究过程中饲喂的食物由如下组分组成：食物I-28％蛋白质(主要为肉质)和21％脂肪；食物II和III-31％蛋白质(主要为肉质)和20％脂肪。其它的食物差别包括，与其它食物(ω-6∶3比值≈20∶1)相对比，食物III增加了ω-3脂肪酸含量，使得ω-6∶3比值≈5∶1。这使得可对食物能量(脂肪％)与ω-3脂肪酸对犬繁殖的影响进行对比。为清楚起见，从现在起将母畜称为A组(实施例1)、B组(食物I；实施例2)、C组(食物II；实施例2)和D组(食物III；实施例2)。
发现所有组均受产次影响，其中A、B和C组证实在第3次产仔后繁殖性能下降，而D组在第4次产仔后下降。就一窝产仔数(NB和NBA)而言，发现A组具有最小的繁殖力，接着是B组和C组，D组产生最大的一窝产仔数(对应于各组为6.13 vs 6.73 vs 6.77 vs 6.95)。一窝产仔数频率图的对比也支持这些发现，对A组其“典型”一窝产仔数限定为4-8只仔，B和C组为4-9只仔，而D组跃进到“典型”一窝产仔数为5-10只仔。这些对比表明，食物蛋白质和/或脂肪浓度的微量增加可增加一窝产仔数。C组与B组相对比一窝产仔数增加的趋势也支持这一结论。虽然这些食物在能量含量上很相似，但B组饲喂的食物估计其DM消化率略高(81 vs 78％)。发现D组具有增加的繁殖性能，其表现为改进了NB、NBA、随后的一窝产仔数波动、减少了NBD、减少了不良怀孕(非显著)和减少了首次产仔年龄。这些区别部分可能是由于其食物的改进的DM消化率所致(D、B和C组分别为85％vs78％和81％)。但从D组与其它组差别的数量级来看，明显可见食物ω-3脂肪酸是母狗繁殖效果的主要影响因素。当然，食物质量可起到重要的作用，低质量的食物不能有效地满足母狗的需要，但某种程度上这可通过增加摄取量来补偿。但是，如不对食物的脂肪酸比例进行校正，必需脂肪酸状况不能通过调节摄取量来进行补偿。饲喂增加了ω-3脂肪酸的母畜中观察到NB的增加和NBD的下降，这表明了母体和新生仔必需脂肪酸状况对犬繁殖的影响。
在实施例2中的研究表明了在犬繁殖中食物ω-3脂肪酸的作用。数据证实，与相似基物食物的ω-6∶3≈20∶1的比值相对比，在D组中的母畜(实施例2)的ω-6∶3≈5∶1的比值产生了大的一窝产仔数(增加了出生数和活产数并减少了死产数)。另外，与接受未进行过ω-6∶3调整的食物的母畜相对比，接受调整过ω-6∶3比值的食物的母畜趋向于具有较少的的不良怀孕，一窝产仔数频率右移(改进)，且不易受到前次产仔的影响。
图8图示了食物对首次发情年龄的影响。如可看出的那样，接受食物III的母畜首次发情年龄更小。
实施例3
为更好地了解ω-3脂肪酸在犬繁殖中的生理作用，设计了一项研究来确定经产次数对各产次乳哺母狗的细胞膜脂类分布的影响。从商业猎免犬机构随机选择母畜(n＝96)，并产次分类为1至5(产次为1-4的n＝20；产次为5的n＝16)。所有母畜均饲喂相同的食物并在其整个繁殖期中在相似的条件下管理。评价母畜的出生数(NB)、活产数(NBA)、死产数(NBD)、产仔出生重量和血浆及红血球(RBC)膜的脂肪酸分布。另外，评价母畜的历史繁殖性能以确定任何分组(group)(产次)差异。
结果
在任何给定的产次中各组间未检测到差异。总体来说，随机选择的雌性畜看起来在各产次中就繁殖性能(见以下表4)而言代表了群体预测(由实施例2中的前次分析而得到)。再有，与先前的群体分析相似，发现母狗受随后的产仔影响。这表明了群体的稳定的基因基础，因而减少了对各产次对比的任何担心。
表4所选择的母畜与群体相对比的繁殖性能。
              出生数1       活产数1       死产数1      断奶数1
(实施例2)
总体         6.99±.03      6.84±.03       0.15±.01        ND*
经产次数1    6.58±.07a    6.43±.07a    0.15±.02a      ND*
经产次数2    6.90±.03b    6.77±.03b    0.13±.01a      ND*
经产次数3    7.22±.07c    7.11±.07c    0.11±.01b      ND*
经产次数4    7.31±.07c    7.16±.07c    0.15±.02a      ND*
经产次数5    6.92±.07b    6.70±.07b    0.21±.03c      ND*
(实施例3)
总体         7.00±.11      6.85±.11      0.15±.02      6.44±.11
经产次数1    6.69±.20a    6.44±.19a    0.24±.04a   6.00±.19a
经产次数2    6.63±.22a    6.52±.21a    0.11±.05b   6.18±.21a
经产次数3    7.39±.25b    7.31±.24b    0.07±.05b   6.90±.24b
经产次数4    7.55±.30b    7.45±.29b    0.11±.06b   7.00±.29b
经产次数5    7.52±.40b    7.41±.38b    0.11±.08b   6.88±.38b
1LSMean±SE
*未确定
不同上标表明有显著差异(P＜.05)
使用甲基-酯衍生作用随后通过用火焰碘化检测的气相色谱来确定RBC膜和血浆中的脂肪酸分布。所利用的步骤是Outen等人(1976)的改进法。简要来说，将含有内标物的200mg试样冷冻干燥(HetovacVR-1，ATR，Laurel，MD)。在冷冻干燥后，用3ml的10％的在甲醇中的三氟化硼对试样进行酯交换。试样在105℃下反应50分钟。用1ml己烷与乙醚的50∶50混合物萃取脂肪酸甲基酯(FAMES)。将萃取出的FAMES转移到自动取样器中并注入到装有DB-23柱的Varian 3500气相色谱仪中(J & W Scientific，Folsom，CA)用于分离。统计分析结果示出下表5(LSMeans±SE)和6(产次和一窝产仔数校正)中。表5.由产次分别的RBC膜和血浆中的脂肪酸分布(mg/g)
    脂肪酸符号/名称   组织2类型     经产次数1*     经产次数2*     经产次数3*     经产次数4*     经产次数5*
    16∶0棕榈酸     M     287.32±3.11a     287.39±3.12a     270.25±3.11b     274.50±3.24b     275.55±3.50b
    P     478.5±8.00a     476.12±7.94a     452.21±7.92b     458.13±7.93b     453.40±8.96b
    17∶0十七酸     M     5.43±0.09a     5.25±0.09a     4.94±0.09b     4.80±0.10b     4.97±0.10b
    P     9.75±0.18a     9.45±0.18a     9.25±0.18ab     9.14±0.18b     9.30±0.20ab
    18∶0硬脂酸     M     329.83±4.18a     326.39±4.20a     321.24±4.19ab     313.73±4.35b     313.88±4.71b
    P     425.56±6.61ab     418.74±6.56ab     432.67±6.54a     410.60±6.54b     421.43±7.40ab
    18∶1n-9油酸     M     151.38±2.27a     152.16±2.29a     142.97±2.28b     150.78±2.37a     150.70±2.57a
    P     416.23±10.21     414.92±10.12     393.54±10.10     393.91±10.10     393.96±11.42
    18∶2n-6亚油酸     M3     170.66±3.63a     168.74±3.65ab     157.36±3.64c     157.27±3.78c     160.07±4.10b
    P     758.29±9.98a     747.22±9.90ab     729.83±9.87b     741.60±9.88ab     728.25±11.17b
    18∶3n-6γ-亚麻酸     M     0.45±0.14a     0.28±0.14a     0.55±0.14ab     0.87±0.14b     0.38±0.16a
    P     11.38±0.36     11.36±0.36     10.59±0.36     11.06±0.36     10.89±0.40
    18∶3n-3α-亚麻酸     M3     2.13±0.18a     1.87±0.18ab     1.78±0.18ab     1.71±0.19ab     1.51±0.21b
    P3     11.72±0.44a     11.01±0.44a     9.65±0.44b     9.70±0.44b     9.27±0.50b
    20∶3n-9Mead’s     M3     2.75±0.18a     3.11±0.19ab     2.99±0.18ab     3.36±0.19b     3.36±0.21b
    P     18.18±1.67a     16.85±1.65a     16.59±1.65ab     15.66±1.65ab     11.73±1.86b
    20∶3n-6Dihomo-γ亚麻酸     M3     29.00±0.95     29.88±0.95     28.13±0.95     31.33±0.99     31.37±1.07
    P     34.78±2.04     31.89±2.02     36.87±2.02     35.88±2.02     36.28±2.28
    20∶4n-6花生四烯酸     M3     362.07±4.91a     347.76±4.94b     343.39±4.92bc     333.07±5.12cd     328.41±5.54d
    P     308.95±10.98     304.47±10.88     319.54±10.86     299.37±10.86     311.03±12.28
    20∶5n-3二十碳五烯酸     M     21.96±0.70a     21.73±0.71a     19.78±0.71b     20.85±0.73a     20.33±0.80a
    P     68.00±2.20     67.21±2.18     64.62±2.17     68.45±2.17     65.66±2.46
    22∶5n-3二十二碳五烯酸     M3     15.15±.33a     14.80±0.33ab     13.97±0.33bc     13.63±0.34c     13.52±0.37c
    P     49.98±2.58     51.46±2.56     51.77±2.55     46.42±2.56     49.65±2.89
    22∶6n-3二十二碳六烯酸     M3     19.38±0.53a     18.09±0.53ab     18.34±0.53a     17.41±0.55b     16.73±0.60b
    P     55.87±2.49     52.94±2.47     58.50±2.46     52.57±2.46     56.72±2.78
1以脂肪酸mg/g脂类计；2M＝RBC膜；P＝血浆；*LSMeans±SE，不同上标表示统计差异；表5(续).由产次分别的RBC膜和血浆中的脂肪酸分布(mg/g) 1以脂肪酸mg/g脂类计；2M＝RBC膜；P＝血浆；*LSMeans±SE，不同上标表示统计差异；显著线性效应。表6.膜脂肪酸与增加产次和一窝产仔数(NB)的相关性a。
脂肪酸符号/名称   与产次关系     概率 与一窝产仔数关系     概率
  18∶1n-9油酸 0.021 0.84 0.165 0.11
  18∶2n-6亚油酸 -0.126 0.22 -.028 0.79
  18∶3n-6γ-亚麻酸 0.123 0.23 0.027 0.79
  18∶3n-3α-亚麻酸 -0.206 0.05 0.022 0.83
  20∶3n-9Mead′s 0.225 0.03 0.209 0.04
  20∶3n-6Dihomo-a 亚麻酸 0.170 0.10 0.250 0.02
  20∶4n-6花生四烯酸 -0.191 0.06 -0.103 0.32
  20∶5n-3二十碳五烯酸 -0.097 0.35 0.106 0.30
  22∶5n-3二十二碳五烯酸 -0.226 0.03 -0.263 0.01
  22∶6n-3二十二碳六烯酸 -0.201 0.05 -0.256 0.02
  饱和     -0.076     0.46     -0.020     0.85
  单不饱和     0.101     0.33     0.175     0.09
  多不饱和     -0.152     0.14     -0.054     0.60
  ω    3     -0.260     0.02     -0.188     .06
  ω    6     -0.197     .05     -0.078     0.45
  ω    7     0.071     0.49     0.100     0.33
  ω    9     0.115     0.27     0.201     .05
  6与3比值     0.185     0.07     0.276     .01
  EFA指数(Ow6&3/Ow7&9) -0.517 .01 -0.503 .01
a粗体字表示显著相关。
讨论
虽然在以上表5或6中未提供正常数值的数据，而确定了由10只未经产、未妊娠的母狗的脂类分布(膜和血浆)，并将其分类为正常犬值。与其它任何产次组相对比，发现未经产母狗具有明显更佳的EFA指数(2.37)，更高(P＜.05)的必需脂肪酸(ω-6和3)和较少(P＜.05)的非必需脂肪酸(ω-7和9)。这一研究的结果证实，在繁殖过程中母狗的EFA状况下降。还证实，增加的需求另外减少了母体EFA状况，这由一窝产仔数与EFA状况的负相关(γ2-0.503；P＜.01)得以确证。另外，由这一研究的发现确证，母狗中重复的繁殖回次使得随产次的递增EFA的下降更显著(γ2-0.517；P＜.01)。当与未经产母狗相对比时，观察到对应于1至5产次，EFA指数下降了6.75，10.55，10.55，15.61和16.46％。这种下降源于ω-6脂肪酸和ω-3脂肪酸两者的显著线性(P＜.05)下降，所述ω-6脂肪酸和ω-3脂肪酸例如为亚油酸、á-亚麻酸、AA、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸(docosahexaneoicacid)(DHA)。其它EFA应力指征是ω-7和ω-9脂肪酸的数值增加，包括Mead’s Acid(20∶3n-9)的线性增加(P＜.05)。如先前所提到的，证实了EFA状况与一窝产仔数的明显负相关。由于缺少物理数字，不可能完全解释产次一窝产仔数相互作用。然而，如一窝产仔数分类为小(＜4只仔)，小平均数(4-5只仔)、平均数(6-7只仔)、大平均数(8-9只仔)和大(＞9只仔)，当以一窝产仔数相区别时，观察到3、4和5次产仔内惊人的差异，特别是第4次和第5次产仔。虽然未进行统计分析，大平均数和大的一窝产仔数的平均下降辐度比第4次产仔大14和19％，比第5次产仔大17和24％。确信这是第一数据，其证实了不仅母狗的繁殖活动使EFA状况下降，而且重复的繁殖活动增加了下降程度。其中这些集合发现，可得出结论，在繁殖过程中和繁殖前(身体贮备)，母体食物提供的EFA影响了繁殖产率。
MMP数据
从随着经产次数的增加RBC的膜平均熔点(MMP)增加中可注意到在母狗中母体EFA状况下降的另外的指征。MMP值是由相对数量和在膜中存在的各种FA的熔点温度来得出的。与EFA指数相似，发现MMP明显受经产次数和一窝产仔数的影响。在乳哺母狗中，发现MMP值随经产次数而呈线性方式增加(P＜.01)。似乎一窝产仔数的影响更为辅助性的，MMP增加的程度与母畜的经产次数高度相关，最大的增加出现在≥第3次产仔的母狗，并具有高于平均值的一窝产仔数。MMP值的增加表明膜流动性的下降，表明总体细胞功能性下降。
实施例4
为了解繁殖对猫母体EFA状况的影响，设计了一项研究来检测由经产次数和一窝产仔数影响的母猫EFA状况。从商业繁育机构随机选择母猫(n＝132)并按经产次数分为0至6组(对应于增加的经产次数n＝20，20，19，22，22，21和8)。给所有母猫提供标准食物(未平衡其脂肪酸)并在相似的条件下进行管理。评价母猫的出生一窝产仔数(NB)、断奶一窝产仔数(NW)、和小猫单独的重量。为确定母体EFA状况，对在分娩后24和30天得到的全血试样检测其血浆和RBC膜的FAP。将全血试样收集在Vacutainer5ml Hematology管(EDTA)中并运到湿冰上过夜。在离心后(2700RPM下7分钟)，将血浆转移到低温管中并在-70℃下贮存。然后从压缩的RBC的上部除去缓冲层并弃掉。压缩的RBC受超声盐水作用以引发细胞破裂。将试样离心(14500×g，20分钟)，弃掉上清液并将膜球转移到低温管中并在-70℃下贮存。使用实施例3所述的步骤来确定试样的脂肪酸分布。
结果
总体繁殖：发现在母猫中的一窝产仔数就NB而言是二次的(quadratic)(P＜.01)。与第一产仔母猫相对比，第二次产仔的母猫发现具有显著(P＜.01)大的一窝产仔数，分别为5.77 vs 5.11(参见图9)。发现大于2次的产仔的母猫出生数线性下降(对3、4、5和6次产仔分别为5.19，5.03，4.64和4.43)。断奶数观察到相似的结果(参见图10)。发现小猫断奶重量随经产次数线性下降(P＜.03)(参见图11)。
必需脂肪酸状况：观察到总体母体EFA状况呈二次方式下降(P＜.01)。未经产(产仔次数0)母猫发现具有数值为2.23的最高的EFA指数(参见图12)，而所有有繁殖活性的母猫无论经产次数均具有低于未经产母猫的EFA指数。相对于未经产母猫，观察到有繁殖活性的母猫下降7至16％(参见图12)。母猫EFA指数看起来受经产次数和一窝产仔数影响，在各经产次数中观察到具有大的一窝产仔数的母猫下降更大。
母体总的n-3脂肪酸状况，虽不显著，但证实了与母体EFA状况相似的数量下降。然而，虽然总的n-3脂肪酸数值没有明显影响，但当与未经产雌畜相对比时，在哺乳母猫中母体二十二碳六烯酸(docosahexaneoic acid)(DHA)数值显著下降(P＜.01)(参见图13)。对于母体总的n-6脂肪酸和花生四烯酸(AA)数值观察到有相似的结果，有繁殖活性的母猫具有未经产雌畜的数值的88％和82％(分别)(参见图14)。根据母体cervonic acid充足指数(CASI)和cervonic acid缺乏指数(CADI)下降确认了母体EFA状况下降的其它指征。CASI是cervonic acid(DHA：22∶6n-3)与osbond acid(22∶5n-6)的相对比值。CADI是osbond acid(22∶5n-6)与其前体肾上腺酸(22∶4n-6)之间的比值。与未经产雌畜相对比，所有经产次数的母猫均具有下降的(＞20％)CASI(P＜.01)。随着经产次数增加发现CADI呈线性方式增加(P＜.01)(参见图1 5)，而第6次产仔的母猫其CADI几乎高于未经产雌畜50％。CASI的下降和CADI的增加进一步支持了在繁殖过程中对n-3脂肪酸的需求，特别是DHA。
发现母体RBC膜n-7和n-9脂肪酸呈二次方式(P＜.02)随经产次数增咖(参见图16)。发现Mead’s acid(20∶3n-9)具有相似的类型，而第6次产仔的母猫相对于未经产雌畜增加约44％(参见图17)。这些增加是极相关的，因为这些脂肪酸族的增加与EFA缺乏相关。
这些数据的集合表明，母猫的繁殖性能增加对EFA的需求，这种需求超出了在通常猫食物中所提供的数量。这是特别相关的，因为一些市售制剂将重点置于食物的n-6脂肪酸，这可能通过竞争性地减少n-3EFA的位伸和稀释通道而进一步增加了n-3脂肪酸如DHA下降的程度。基于由母狗所得到的信息(参见实施例3)，可合理地推论，给有繁殖活性的母猫饲喂进行了平衡的食物基物来提供比值范围为5∶1至10∶1的n-6和n-3，对繁殖过程是有益的，特别是当一部分这些n-3和n-6 EDFA是DHA和AA时。
实施例5
为进一步研究食物对猫母体必需脂肪酸(EFA)状况和繁殖的影响，进行研究来对比食物A和B。试验食物在总体组成上是相似的，各含有36％的蛋白质和23％的脂肪；但它们的脂肪酸分布有显著差异。配制的食物A用来提供平衡摄入ω-6(n6)和ω-3(n3)脂肪酸，含有4.2％n6和0.6％n3脂肪酸(以重量计)，n6∶n3比值为7.3∶1。配制的食物B含有相似数量的n6脂肪酸(4.3wt％)，但未平衡n3脂肪酸(0.26wt％n3脂肪酸)，其n6∶n3比值为16.3∶1。将饲喂同种成年畜维持食物的母猫分为两组(5/食物；匹配经产次数)，采集全血试样，并转换为其对应的试验食物。在接触雄性畜之前使母猫食用其试验食物至少45天。在交配后，在交配后的21天(G21)通过触诊和超声来确认怀孕。一旦确认怀孕，就从母猫中采集血试样以进行EFA状况检测。在G49、分娩+2天(P2)、P14、P28、P56和P84，收集附加的血试样来进行EFA状况检测。所有血试样均按在前面实施例3中所述进行加工和分析。发现处置组在食物转换之前的EFA状况没有差别，所有的母猫具有的EFA指数级约为2.0。但在G21，饲喂食物A的母猫发现具有显著高的(即改进)EFA指数级(2.88 vs 2.60；图18)。在全部繁殖过程中观察到处置组之间相似的差别，例外的是P56(断奶)，当与饲喂食物B的母猫相对比时，食物A的母猫具有更高的EFA指数级(图18)。考虑到当与饲喂食物B的母猫相对比时饲喂食物A的母猫还证实有优异的繁殖性能，通过食物A改进的母体EFA状况的保持就更显著了。另外，饲喂食物A的母猫从繁殖的营养需求中恢复，这从饲喂食物A的母猫在P84天的增加的EFA指数级(2.69)与P56(2.47)的对比得以确证。相反，饲喂食物B的母猫发现其在P84天的EFA指数级(2.45)与在P56时观察到的(2.45)对应指数级相近，表明营养还未饱和。这些数据明确支持了在伴侣动物繁殖中提供含有适当数量和平衡的食物脂肪酸的食物基物的重要性。
以上为对本发明进行说明而给出了一些代表性实施方案和细节，本领域普通技术人员显而易见，在不超出所附权利要求书范围的条件下，这里公开的方法和装置可进行各种改变。

Claims (19)

1.一种增强伴侣动物繁殖性能的方法，包括给所述动物饲喂包含ω-6和ω-3脂肪酸的食物，其中所述ω-6脂肪酸与ω-3脂肪酸的比例为约3.5∶1至约12.5∶1。
2.如权利要求1的方法，其中在所述食物中总脂肪酸的至少15％为ω-6脂肪酸。
3.如权利要求1的方法，其中在所述食物中总脂肪酸的至少2％为ω-3脂肪酸。
4.如权利要求1的方法，其中以干物质计，所述食物包含约2.5至7.5wt％的ω-6脂肪酸和约0.3至1.5wt％的ω-3脂肪酸。
5.如权利要求1的方法，其中所述ω-6脂肪酸与所述ω-3脂肪酸的比例为约5∶1至约1 0∶1。
6.如权利要求1的方法，其中所述ω-6脂肪酸与所述ω-3脂肪酸的比例为约5∶1至约8∶1。
7.如权利要求1的方法，其中所述动物是狗。
8.如权利要求7的方法，其中以干物质计，所述食物包含约22至44wt％的蛋白质和约10至30wt％的脂肪。
9.如权利要求7的方法，其中以干物质计，所述食物包含约25至35wt％的蛋白质和约15至25wt％的脂肪。
10.如权利要求1的方法，其中所述动物是猫。
11.如权利要求10的方法，其中以干物质计，所述食物包含约30至45wt％的蛋白质和约10至30wt％的脂肪。
12.如权利要求10的方法，其中以干物质计，所述食物包含约32至42wt％的蛋白质和约15至28wt％的脂肪。
13.如权利要求1的方法，其中所述动物在全部繁殖过程中饲喂所述食物。
14.一种维持伴侣动物母体必需脂肪酸的方法，包括给所述动物饲喂包含ω-6和ω-3脂肪酸的食物，其中所述ω-6脂肪酸与ω-3脂肪酸的比例为约3.5∶1至约12.5∶1。
15.如权利要求14的方法，其中所述动物是狗。
16.如权利要求14的方法，其中所述动物是猫。
17.一种维持伴侣动物随后的产仔中一窝产仔数的方法，包括给所述动物饲喂包含ω-6和ω-3脂肪酸的食物，其中所述ω-6脂肪酸与ω-3脂肪酸的比例为约3.5∶1至约12.5∶1。
18.一种增加伴侣动物随后的产仔中活产数的方法，包括给所述动物饲喂包含ω-6和ω-3脂肪酸的食物，其中所述ω-6脂肪酸与ω-3脂肪酸的比例为约3.5∶1至约12.5∶1。
19.一种降低伴侣动物随后的产仔中死产数的方法，包括给所述动物饲喂包含ω-6和ω-3脂肪酸的食物，其中所述ω-6脂肪酸与ω-3脂肪酸的比例为约3.5∶1至约12.5∶1。
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