CN1403485A - 一种果胶寡聚糖、其制备工艺及防治植物病害的应用 - Google Patents

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杜昱光
白雪芳
曲天明
赵小明
李曙光
陆海峰
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Abstract

一种果胶寡聚糖、其制备工艺及防治植物病害的应用,该果胶寡聚糖主要成分是聚合度为2-20的寡聚半乳糖醛酸,总糖浓度为1-10%;制备工艺包括:将果胶溶解在pH=4-8的醋酸钠缓冲液中,加入0.1-0.5%(重量百分比)的降解酶,升温反应,控制降解时间;采用中空纤维、平板膜超滤器与酶降解反应器相连接,其中空纤维膜切割分子量为10,000,平板膜超滤器切割分子量为6000,将不同聚合度的寡聚糖进行分离,超滤液再经卷式平板纳滤膜分离,纳滤膜的切割分子量为300,得到聚合度为2-20的果胶寡糖;果胶寡聚糖以喷洒或浸根方式用于防治蔬菜、果瓜等植物病害病的应用。

Description

一种果胶寡聚糖、其制备工艺及防治植物病害的应用
技术领域
本发明属于一种生物制剂的制备技术,具体地说涉及一种果胶寡聚糖、该果胶寡糖制备工艺以及使用该果胶寡聚糖防治植物病害的应用。
背景技术
活性寡聚糖是一类由2-20个单糖组成,具有一定结构和生物活性的聚合体,活性寡聚糖具有调控植物生长发育、繁殖、防病和抗病等方面的功能;刺激植物将的免疫系统反应;每种活性寡聚糖可发出调节特定功能的信息,激活防御反应和调控植物生长,产生具有抗病的活性物质,抑制病害的形成。
目前,有文献(2000年第一期江苏化工)报导用植物废弃物—苹果及其它果品加工下脚料,将微生物所含的果胶质分解酶固定在树脂上,制成生物反应器,将反应器与果渣接触后就可以把残存在果渣里的果胶转化为低聚糖。酶提法提取效果比较好,但收率和纯度比较低,提取液中不仅有寡聚糖,还含有大量的多糖及单糖,无法分开。此外,公知的热提法的方法也比较简单,成本较低,但除了具备酶提法的缺点外,还因为此法提取寡聚糖没有选择性,产物非常混杂。又有文献(1996年.24(增刊II)137-139,华中理工大学学报)报导,柑橘果胶经用果胶酶水解,获得的果胶寡聚糖具有促进领春木、穗花杉和水稻愈伤组织生长的作用等。有关果胶寡聚糖防治植物病害的报导至今国内外未见有报导。
对植物病毒病的防治,目前尚无有效地防治药剂,以辣椒病毒病为例,该病是辣椒生产上的主要病害,常年造成减产3-5成,生产上迫切需要有效的无害药剂。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有诱导植物产生抗病活性片断的寡聚糖;
本发明的另一目的在于提供一种果胶寡聚糖的制备方法,该制备方法成本较低,且适于工业化规模生产;
本发明的又一目的在于提供上述果胶寡聚糖防治植物病害的应用。
为实现上述目的,本发明技术方案包括:
下述方法制备的果胶寡聚糖,其主要成分是聚合度为2-20的寡聚半乳糖醛酸,总糖浓度为1-10%,所述制备方法包括以下步骤:
将果胶溶解在PH=4-8的醋酸钠缓冲液中,加入0.1-0.5%(重量百分比)的降解酶(对底物),降解酶为果胶酶、纤维素酶、脂肪酶、蛋白酶中任选一种或几种,反应温度20-60℃,降解时间1-6小时;采用中空纤维、平板膜超滤器与酶降解反应器相连接,其中空纤维膜切割分子量为10,000,膜表面积为134.8cm2,平板膜超滤器切割分子量为6000,将不同聚合度的寡聚糖进行分离,小于截留分子量的部分透过膜,得到超滤液,大于截留分子量的分子返回反应釜继续降解。补料可采用连续补料和间歇补料两利方式。若采用连续补料,则以与超滤透过液相等的速率补料。而间歇补料则在搜集一定量的透过液后,一次补齐,始终保持釜内存留一定量的料液。超滤液再经卷式平板纳滤膜分离,纳滤膜的切割分子量为300,除掉低活性的单糖、二糖和大量水,得到聚合度为2-20的果胶寡糖。
本发明技术方案还包括所述的果胶寡聚糖作为防治植物病害的应用。
本发明提供的制备方法优点在于其产收率高(见下表所示),有利于实现工业化生产,并在国内外首次应用于防治辣椒病毒病等植物病毒,防效达到77.6%,在一定程度上能解决病毒病等尚无有效农药防治的农作物病害。
         制备果胶寡聚糖产收率结果批次    投料量(Kg)     反应分离量(L)    产品收率(%)
1      6               300               59.52
2      10              500               53.34
3      8               400               51.73
附图说明
图1为本发明工艺流程图。
具体实施方式
下面给出本发明的具体实施例和试验例,并结合上述附图,详细描述本发明的技术特征和应用于防治植物病害所具有的积极效果。
实施例1:将果胶溶解在PH=6的醋酸钠缓冲液中,过滤除渣,加入0.5%(重量百分比,以下实施例均同)的果胶酶为降解酶,反应温度60℃,搅拌4小时,达到降解果胶的目的,本发明采用中空纤维膜、平板膜超滤器与酶降解反应器相连接,将不同聚合度的寡聚糖进行分离,中空纤维超滤膜表面积为134.8cm2,切割分子量为10,000,小于截留分子量的部分透过膜,得到超滤液,大于截留分子量的分子返回反应釜继续降解。本例采用连续补料方式。该超滤液再经平板膜超滤器分离,平板膜超滤器切割分子量为6000,超滤液再经纳米滤膜分离,纳米滤膜的切割分子量为300,除掉低活性的单糖、二糖和大量水,得到高浓度的聚合度为2-20的果胶寡聚糖,总糖浓度为5%。
实施例2:醋酸钠缓冲液pH=8,降解酶为蛋白酶,加入量0.1%,反应温度40℃,降解时间6小时,采用间歇补料,其余同实施例1。
实施例3:醋酸钠缓冲液pH=4,降解酶为纤维素酶,加入量0.3%,反应温度20℃,降解时间1小时,其余同实施例1。
实施例4:降解酶为脂肪酶,其余同实施例1。
实施例5:降解酶为果胶酶0.2%,蛋白酶0.1%,其余同实施例1。
以下是应用果胶寡聚糖防治植物病毒病的实施例,果胶寡聚糖使用方法和一般农药的使用方法一样,即,可根据植物的发病部位进行喷洒或浸根:
实施例6、果胶寡聚糖防治辣椒病毒病处理        浓度       发病率(%)  病情指数(%)  防效(%)果胶寡聚糖  250ug/ml    11.5          6.5          60.3
        500ug/ml    9.3           5.1          68.6
        750ug/ml    7.5           3.7          77.65%菌毒清   167ug/ml    10.8          6.5          60.5清水对照    0           29.3          16.4         /实施例7、果胶寡聚糖防治西瓜病毒病处理          中科6号800倍     菌克毒克260倍    清水对照调查总株数         24              18              18(第二次药后7天)病株数             7               10              18病株数(%)         29.17           55.56防效(%)           70.83           44.44            -(第二次药后20天)病株数             5               12               18病株数(%)         20.83           66.67            100防效(%)           79.17           33.33            -实施例8、果胶寡聚糖对水稻生长的影响处理            果胶寡聚糖      果胶寡聚糖       清水对照浓度(ppm)          40              60               0发芽率(%)         98.5            99.0             98.5芽长(mm)           11.1            10.8             7.9根长(mm)           15.6            14.8             12.37天后苗高(mm)      85.2            76.3             62.8

Claims (5)

1.一种果胶寡聚糖,其主要成分是聚合度为2-20的寡聚半乳糖醛酸,其特征在于,总糖浓度为1-10%。
2.一种果胶寡聚糖的制备工艺,包括以下步骤:
将果胶溶解在PH=4-8的醋酸钠缓冲液中,加入0.1-0.5%(重量百分比)的降解酶,升温反应,控制降解时间;采用中空纤维、平板膜超滤器与酶降解反应器相连接,其中空纤维膜切割分子量为10,000,平板膜超滤器切割分子量为6000,将不同聚合度的寡聚糖进行分离,大于截留分子量的分子返回反应釜继续降解,超滤液再经卷式平板纳滤膜分离,纳滤膜的切割分子量为300,得到聚合度为2-20的果胶寡糖。
3.如权利要求2所述的果胶寡聚糖的制备工艺,其特征在于,所述降解酶为果胶酶、纤维素酶、脂肪酶、蛋白酶中任选一种或几种。
4.如权利要求2所述的果胶寡聚糖的制备工艺,其特征在于,反应温度为20-60℃,降解时间1-6小时。
5.果胶寡聚糖以喷洒或浸根方式用于防治蔬菜、果瓜等植物病害病的应用。
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