CN1319020A - 抗炎症性疾病的野甘菊提取物 - Google Patents
抗炎症性疾病的野甘菊提取物Info
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Abstract
本发明涉及用野甘菊提取物治疗或预防炎症性疾病及相关病症的方法。具体地说,本发明包括给患者施用含有效量野甘菊提取物的局部用组合物来治疗或预防炎症性疾病及相关病症的方法和给患者施用含有效量野甘菊提取物的局部用组合物来治疗或预防皮肤炎症性疾病及相关病症的方法。而且,本发明包括给患者施用含有效量野甘菊提取物的局部用组合物来治疗或预防炎症性疾病及相关病症的方法,其中所述提取物基本上不含α-不饱和γ-内酯。
Description
发明的领域
本发明涉及用野甘菊(Tanacetum parthenium)局部治疗和预防炎症性疾病及有关病症。
发明的背景
Tanacetum parthenium,通常称作野甘菊(Feverfew),因口服具有明显的医药性质,自中世纪以来即被认可用作退热药,故有此俗名。很多人分离了此植物的提取物,那些提取物被用于口服治疗偏头痛、关节炎和支气管疾患(见Johnson等,美国专利4,758,433,讨论了此提取物口服、吸入、注射或栓剂给药,见WO9406800,讨论了含银胶菊交酯(parthenolide)的野甘菊提取物)。
野甘菊提取物包含很多成分。尽管不是所有成分均被分离和鉴定,但野甘菊提取物的已知成分包含了相当量的生物活性成分。至今,全野甘菊提取物的化学成分如下:5,7,4’-三羟基黄酮-7-葡糖苷、5,7,4’-三羟基黄酮-7-葡糖苷酸、1-β-羟基arbusculin、6-羟基莰非醇-3,7,4’-三甲基醚(Tanetin)、6-羟基莰非醇-3,7-二甲基醚、8-β-reynosin、10-epicanin、抗坏血酸、β-胡萝卜素、钙、铬、chrysanthemolide、chrysanthemomin、chrysarten-A、chrsyarten-C、金圣草黄素-7-葡糖苷酸、钴、波斯菊素(cosmosiin)、epoxyartemorin、藤黄菌素-7-葡糖苷、藤黄菌素-7-葡糖苷酸、mangnoliolide、银胶菊交酯(parthenolide)、六羟黄酮-3,7,3’-三甲基醚、六羟黄酮-3,7-二甲基醚、reynosin、tanaparthin、tanaparthin-1α,4α-环氧化物、tanaparthin-1β,4β-环氧化物、β-广木香内酯(闭鞘姜酯)、3-β-羟基-银胶菊交酯和3,7,3’-三甲氧基六羟黄酮。这些成分化合物在野甘菊的生物活性中所起的具体作用迄今未明。但是,有些信息已知是关于对提取物的变态反应的。据信,这些变态反应中很多是由α-不饱和γ-内酯如银胶菊交酯引起的(见Arch.Dermatol.Forsch 1975,251(3):235-44;Arch.Dermatol.Forsch 1976,255(2):111-121;Contact Dermatitis,1988,38(4):207-8;Am.J.Contact Dermatol.1998-9(1):49-50;Br.J.Dermatol,1995,132(4):543-47)。
尽管有口服使用野甘菊提取物的方法,但对局部使用这些提取物治疗或预防炎症性疾病和有关病症并无明确的方法。而且,也无人描述使用不含引起变态反应的α-不饱和γ-内酯的野甘菊提取物。这些是本发明提出的两个方面。
发明的概要
本发明涉及用野甘菊提取物治疗或预防炎症性疾病及相关病症的方法。更具体地说,本发明包括给患者施用含有效量野甘菊提取物的局部用组合物来治疗或预防炎症性疾病及相关病症的方法。本发明的方法包括给患者施用含有效量野甘菊提取物的局部用组合物来治疗或预防皮肤炎症性疾病及相关病症。本发明的方法还进一步包括给患者施用含有效量野甘菊提取物的局部用组合物来治疗或预防炎症性疾病及相关病症,其中所述提取物基本上不含α-不饱和γ-内酯。而且,本发明的方法包括给患者施用含有效量野甘菊提取物的局部用组合物来治疗或预防皮肤炎症性疾病及相关病症的方法,其中所述提取物基本上不含α-不饱和γ-内酯。
发明的详细描述
本发明包括给患者施用含有效量野甘菊提取物的局部用组合物来治疗或预防炎症性疾病及相关病症的方法。
可局部施用本发明的组合物来治疗或预防的炎症性疾病及相关病症包括(但不限于)如下疾病和病疹:关节炎、支气管炎、接触性皮炎、特应性皮炎、牛皮癣、脂溢性皮炎、湿疹、变应性皮炎、多形性日光疹、炎症性皮肤病、毛囊炎、脱发、毒葛、虫咬、痤疮发炎、外来因素(包括但不限于化学品、外伤、污染剂如吸烟、日晒)引起的刺激,炎症引起的继发症状,包括(但不限于)干燥、角化过度、搔痒、炎症后色素过度沉着、瘢痕形成等。可用本发明的方法治疗或预防的炎症性疾病及相关病症较宜为关节炎、炎症性皮肤病、接触性皮炎、变应性皮炎、特应性皮炎、多形性日光疹、刺激(包括外来因素引起的红斑)、痤疮发炎、牛皮癣、脂溢性皮炎、湿疹、毒葛、虫咬、毛囊炎、脱发,及继发性症状等。
“野甘菊”是属于菊科(Asteraceae/Composite)的一种植物,技术上称作Tanacetum parthenium,Altamisa,Crisanthemum,Leucanthemum,或Pyrethrum parthenium。
术语“有效量”指治疗患者炎症性疾病或相关病症所需要的局部用组合物中野甘菊提取物的重量百分率。有效量较佳约为组合物重量的0.0005-20%。更佳为,浓度应低于局部用组合物重量的约10%。甚至更佳约为0.001%-10%,最佳约为0.01%-2%。
术语“患者”指接受对炎症性病症和/或具有可见症状的炎症性疾病的预防性治疗的哺乳动物。患者较佳为人。
本发明包括给患者施用含有效量野甘菊提取物的局部用组合物来治疗或预防皮肤炎症性疾病及相关病症的方法。
术语炎症性疾病及相关病症、野甘菊、有效量和患者意义同上。术语“皮肤”包括患者的所有表面,如暴露的皮肤或被头发覆盖的表面。
本发明还包括治疗或预防炎症性疾病及相关病症的方法,包括给患者施用含有效量野甘菊提取物的局部用组合物,其中所述提取物除去了α-不饱和γ-内酯。
术语炎症性疾病及相关病症、野甘菊、有效量和患者意义同上。术语“基本上不含α-不饱和γ-内酯”指一种野甘菊提取物,其中在天然野甘菊提取物中所发现的α-不饱和γ-内酯的含量低于约0. 2重量%。这些α-不饱和γ-内酯包括(但不限于)银胶菊交酯(〔1αR-(1aR*,4E,7aS*,10aS*,10bR*)〕2,3,4,7,7a,8,10a,10b-八氢-1a,5-二甲基-8-4,5α-环氧-6β-羟基-吉马-1(10),11(13)-二烯-12-酸γ-内酯)、3-β-羟基银胶菊交酯、广木香内酯(闭鞘姜酯)、3-β-constunolide、artemorin、8-α-羟基-estafiartin、chysanthemolide、magnoliolide、tanaparthin-1α,4α-环氧化物、tanaparthin-1β,4β-环氧化物、chrysanthemonin及其他倍半萜。较佳为野甘菊提取物的α-不饱和γ-内酯含量低于约0.2。α-不饱和γ-内酯以银胶菊交酯为宜。意大利专利申请(MI99A001244,1999年6月3日提交)描述了此去银胶菊交酯提取物,该文献在此引为参考。由于α-不饱和γ-内酯引起对野甘菊提取物的某些变态反应,由除去α-不饱和γ-内酯的提取物制得的局部用组合物预期是非刺激性的。
本发明还包括给患者施用含有效量野甘菊提取物的局部用组合物来治疗皮肤炎症性疾病及相关病症的方法,其中所述提取物基本上不含α-不饱和γ-内酯。
术语炎症性疾病及相关病症、野甘菊、有效量、患者、皮肤和不含α-不饱和γ-内酯意义同上。
除了野甘菊提取物外,本发明的局部用组合物中可包括其他物质,如生物活性剂、药物赋形剂和美容剂。
生物活性剂可包括(但不限于)类黄烷/黄酮化合物,包括(但不限于)tanetin、3,7,3’-三甲氧基六羟黄酮、5,7,4’-三羟黄酮及其衍生物。存在类黄烷/黄酮化合物时,以局部用组合物的重量为基准,它们的浓度约为0.001%~0.5%,最好为0.005%-0.2%。
外加的生物活性剂包括(但不限于)防晒剂、抗皱/抗衰老剂、抗真菌剂、抗生素、治痤疮药和治牛皮癣药,除色素剂,这些药物只要与局部用组合物的其他组分物理上和化学上相容即可被使用。
本发明的组合物可包含另外的皮肤活性剂。活性剂可以是(但不限于)维生素类化合物;皮肤增亮剂(曲酸、抗坏血酸及其衍生物,如棕榈酸抗坏血酸酯等);抗氧化剂,如生育酚及酯;金属螯合剂,类视黄素及衍生物;保湿剂。羟基酸,如水杨酸;防晒剂,如甲氧基肉桂酸辛酯、羟苯甲酮(oxybenzone)、阿伏苯宗(avobenzone)等;遮光剂,如二氧化钛和氧化锌,及皮肤保护剂。可使用上述皮肤活性剂的混合物。
本发明的组合物中可使用的防晒剂可包括(但不限于)有机或无机防晒剂,如甲氧基肉桂酸辛酯和其他肉桂酸酯化合物,二氧化钛和氧化锌等。
抗皱/抗衰老剂可包括(但不限于)类视黄素(例如,视黄酸、视黄醇、视黄醛、乙酸视黄酯和棕榈酸视黄酯),α-羟基酸,半乳糖类(如蜜二糖和乳糖),抗氧化剂,包括但不限于水溶性抗氧化剂,如巯基化合物及其衍生物(例如,偏亚硫酸氢钠和N-乙酰基半胱氨酸、乙酰基半胱氨酸),硫辛酸和二氢硫辛酸、白藜芦醇、乳铁蛋白、抗坏血酸和抗坏血酸衍生物(例如,棕榈酸抗坏血酸酯和抗坏血酸基多肽)。适用于本发明的组合物的油溶性抗氧化剂包括但不限于生育酚类(例如,乙酸生育酚酯、α-生育酚),生育三烯醇和泛醌。适用于本发明的组合物的含抗氧化剂的天然提取物包括(但不限于)含类黄酮、酚类、黄酮、黄烷酮、异类黄酮、单、二和三萜类、固醇类及其衍生物的提取物。这样的天然提取物的例子包括葡萄籽、绿茶、松树皮和蜂胶提取物及豆荚提取物等。
抗真菌剂包括(但不限于)咪康唑、益康唑、酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、联苯苄唑、特康唑、布康唑、噻康唑、奥昔康唑、硫康唑、沙康唑(saperconazole)、克霉唑、十一烯酸、卤普罗近、布替萘芬、托萘酯、制霉菌素、环吡司胺、特比萘芬、阿莫罗芬、萘替芬、elubiol、灰黄霉素,及其药学上可接受的盐。
抗生素(或抗菌剂)包括(但不限于)莫匹罗星、硫酸新霉素、杆菌肽、多粘菌素B、l-氧氟沙星、四环素类(盐酸金霉素、盐酸土霉素和盐酸四环素)、磷酸克林霉素、硫酸庆大霉素、苯扎氯铵、苄索氯铵、己雷琐辛、甲苄索氯铵、苯酚、季铵类化合物、三氯卡班、三氯生、茶树油、过氧苯甲酰,及其药学上可接受的盐。
治疗痤疮成分包括(但不限于)使上皮分化正常化的药物(如视黄素类)、角质层分离剂(如水杨酸和α-羟基酸类)、过氧苯甲酰、抗生素和调节皮脂的植物提取物。
治牛皮癣药物包括(但不限于)皮质类固醇类(如二丙酸倍他米松、戊酸倍他米松、丙酸氯倍他索、二酯酸二氟拉松、丙酸卤倍他松(halobetasolpropionate)、安西奈德、去羟米松、醋酸氟轻松、氟轻松、哈西奈德、醋酸曲安西龙、氢化可的松、戊酸氢化可的松、丁酸氢化可的松、aclometasonedipropionate、氟氢缩松、糠酸莫米松、醋酸甲泼尼松)、维生素D及其类似物(如calcipotriene)、视黄素类(如他扎罗汀(Tazarotene))和地蒽酚。
可用于本发明组合物中的美容剂包括(但不限于)防止潜在皮肤刺激的物质,如润肤剂、维生素类和抗氧化剂(如维生素E)和中草药提取物(如芦荟)。美容剂还可包括湿润剂、抗氧化剂/防腐剂、植物提取物、调味剂、香料、表面活性剂等。湿润剂包括例如甘油、山梨醇、丙二醇、乙二醇、1,3-丁二醇、聚丙二醇、木糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、燕麦蛋白、尿囊素、乙酰胺(acetamine)MEA、透明质酸等。它们可单独或联合使用。
美容剂还可包括掩蔽炎症性疾病和相关疾病症状的物质。这些物质包括(但不限于)例如色素、染料和其他添加剂(如硅石、滑石、氧化锌、二氧化钛、粘土粉)。药物赋形剂包括(但不限于)pH调节剂,有机溶剂(如丙二醇、甘油等)、鲸蜡醇、高岭土、滑石粉、氧化锌、二氧化钛、玉米淀粉、葡萄糖酸钠、油类(如矿物油)、ceteareth-20、ceteth-2、表面活性剂和乳化剂、增稠剂(或粘合剂)、香料、抗氧化剂、防腐剂和水。
粘合剂或增稠剂可用于本发明的组合物中,给组合物提供直接染色性和物理稳定性。适用于本发明组合物的粘合剂或增稠剂包括纤维素衍生物,如羧甲基纤维素的碱金属盐、甲基纤维素、羟乙基纤维素和羧甲基羟乙基纤维素钠,碱金属藻酸盐如藻酸钠,藻酸丙二醇酯,树胶类如角叉菜胶、黄原胶、黄蓍胶、卡拉雅胶(carayagum)和阿拉伯胶,合成粘合剂,如聚乙烯醇、聚丙烯酸钠和聚乙烯吡咯烷酮。增稠剂如天然树胶和合成聚合物,以及着色剂和香料通常也包括在这些组合物中。
可用于本发明组合物中的防腐剂包括(但不限于)例如水杨酸、盐酸氯己定、苯氧乙醇、苯甲酸钠、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯等。
可用于本发明组合物的调味剂和香料包括例如薄荷醇、茴香脑、香芹酮、丁子香酚、柠檬烯、罗勒烯、正癸醇、香茅醇、α-松油醇、水杨酸甲酯、乙酸甲酯、乙酸香茅醇酯、桉油精、里哪醇、乙基里哪醇、香兰醛、麝香草酚、薄荷油、柠檬油、橙油、鼠尾草油、迷迭香油、肉桂油、多香果油、肉桂叶油、紫苏子油、冬青油、丁子香油、桉叶油等。
本发明的组合物可以多种局部施用于患者的剂型加以制备。例如,组合物可以凝胶、乳膏、软膏、洗发剂、头皮调理剂(scalp conditioners)、液剂、喷雾液、涂刷制剂、气溶胶、粉剂或粘合绷带。此外,组合物可浸渍在绷带、水胶体敷料、治疗膏药或布擦拭制品(如婴儿尿片或面巾纸)上。
本发明的组合物可以是乳化剂(如乳膏、洗剂等)形式。这样的组合物可有一个以上相,可包括使多相乳剂能被制成的表面活性剂。
可用于本发明组合物的表面活性剂包括例如烷基硫酸钠(如十二烷基硫酸钠和十四烷基硫酸钠),N-酰基肌氨酸钠盐类(如N-月桂酰基肌氨酸钠和N-肉豆蔻酰基肌氨酸钠),十二烷基苯磺酸钠,氢化椰子脂肪酸单甘油酯硫酸钠、十二烷基磺基醋酸钠和N-酰基谷氨酸盐,如N-棕榈酰谷氨酸盐,N-甲基酰基牛磺酸钠盐,N-甲基酰基丙氨酸钠盐,α-烯烃磺酸钠和磺基琥珀酸二辛酯钠;N-烷基氨基甘油,如N-十二烷基二氨基乙基甘油和N-十四烷基二氨基乙基甘油,N-烷基-N-羧基甲基铵内盐和2-烷基-1-羟基乙基咪唑啉钠内盐;聚氧乙烯烷基醚,聚氧乙烯烷基芳基醚,聚氧乙烯羊毛脂醇,聚氧乙烯甘油单脂肪酸酯,聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯,聚氧乙烯脂肪酸酯,高级脂肪酸甘油酯,脱水山梨醇脂肪酸酯,Pluronic型表面活性剂,及聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯,如聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯和聚氧乙烯脱水山梨醇单月桂酸酯。在本发明的组合物中应当使用本领域技术人员已知的乳化剂型表面活性剂。
本发明的另一重要成分是皮肤病学上可接受的载体。这种载体适用于局部使用。它不仅与本文描述的活性成分相容,而且不会引起任何毒性和安全问题。有效和安全的载体含量约为本发明组合物重量的50%至99%,较佳约为组合物重量的75%至99%,最佳约为组合物重量的85%至95%。
所用药物赋形剂或生物活性剂或美容剂的选择通常由受治疗的炎症性疾病的类型控制或受其影响。例如,如果本发明的组合物用于治疗脚癣、股癣或尿布疹伴有的皮肤炎症,滑石粉是较佳的药物赋形剂,抗真菌剂是较佳的生物活性剂;如果本发明的组合物用于治疗头皮湿疹,则乳化剂和油类是较佳的药物赋形剂。
接触性皮炎可施用含野甘菊提取物的局部用组合物进行治疗,其中所述提取物含1%基本上无银胶菊交酯的野甘菊,即所述提取物的银胶菊交酯浓度<0.1%。由于这种野甘菊提取物中银胶菊交酯的浓度极低,因此从该提取物制得的局部用组合物无刺激性。
下面的实施例是阐述性的,而不限制此处所述发明的范围。它们仅仅意味着对实施本发明的一种方法提出建议。在治疗和预防炎症性疾病和有关病症方面的有识之士和其他专家可发现实施本发明的其他方法。但是,这些方法应视为落在本发明的范围内。
实施例1:基本不含银胶菊交酯的野甘菊的制备
用20升70%甲醇水溶液于50-60℃提取2公斤野甘菊(Tanacetumparthemium)。提取液真空浓缩至约1升,用等体积甲醇稀释。所得溶液用2升正己烷提取三次。己烷提取液于真空下蒸发至干,得到约30g残渣(提取物H)。然后将水-甲醇溶液用0.5升二氯甲烷提取2次。有机相真空蒸发至干,得到约70g残渣(提取物DCM)。将水-甲醇相(提取物HM)放置一边。将DCM提取物溶于0.6升90%甲醇,用0.6升强碱性树脂(Relite2A)搅拌处理3~4小时。将悬浮液真空过滤,树脂用约2升90%甲醇洗涤。除去含银胶菊交酯及其类似物的甲醇溶液。然后将碱性树脂用含65ml浓盐酸的0.6升甲醇搅拌处理1小时。将树脂真空过滤,再用2.5升甲醇洗涤。合并滤液和洗液,真空浓缩至约200ml,用200ml乙酸乙酯提取3次。将所得的含黄酮成分tanetin及其类似物的提取物(E.A.)真空蒸发至干,得到约4g残渣。将提取物H和E.A.的残渣与提取物HM合并。所得溶液真空蒸发至干,固体残渣50℃真空干燥至恒重。得到约490g的已除去银胶菊交酯的野甘菊提取物,HPLC分析(柱ZorbaxSB C18;洗脱剂H2O+0.01%TFA;B:MeCN+0.01%TFA;梯度A∶B:90%-10%∶10%-90%;流速为1ml/分钟)显示银胶菊交酯的含量低于0.07%。
实施例2.外周血白细胞的免疫调节作用
用下面的试验中减少淋巴细胞功能产生的能力来证明野甘菊和除去银胶菊交酯的野甘菊影响炎症反应的能力。本实验中所用的野甘菊(“FFW”)购自Indena S.p.A.。无银胶菊交酯的野甘菊(“PFFW”)系用实施例1的方法得到。
经白细胞电泳(leukophoresis)从健康成年男性收集人白细胞,用无血清的淋巴细胞生长培养基(LGM-2,Clonetics有限公司,加州圣地亚哥市)将其调节为1ml含1×106个细胞的密度。在有或无试验样品的情况下,用10μg/mlPHA刺激PBL。于5%CO2、37℃培养48小时后,取出上清液,用市售ELISA比色药盒测定细胞因子含量。96小时后用alamarBlueTM(Alamar Biosciences,Sacramento,CA)测定增殖情况。
IL和细胞因子释放抑制试验(IC50μg/ml)
IL-1α | IL-1β | IL-2 | IL-4 | IL-5 | IL-6 | IL-10 | IL-12 | INFγ | TNFα | GMCSF | Pro-lif | |
FFW | 50 | 40 | 30 | 10 | 10 | 30 | <10 | 30 | 30 | 30 | 30 | 25 |
PFFW | >100 | 38 | 16 | >100 | NT | >100 | >100 | >100 | >100 | <1.0 | NT | >100 |
(其中NE=无效;NT=未试验;FFW=野甘菊;PFFW=基本不含银胶菊交酯的野甘菊;IL=白介素(细胞因子);IFN=干扰素;TNF=组织坏死因子;GM-CSF=粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)。
根据上述实验可以看到,基本不含银胶菊交酯的野甘菊能调节淋巴细胞激活作用。
实施例3.用RAW264巨噬细胞细胞系的评估
在有或无受试产物的情况下,用1μg/mlLPS和10U/mlIFNγ将Raw264鼠巨噬细胞刺激24小时。用Griess反应测定氧化氮的稳定终产物亚硝酸盐,用ELISA测定PGE2水平。结果表示为与受刺激的对照培养物相比的炎症介质产生的抑制百分率。用MTT还原试验检测细胞生存力。
用LPS和IFNγ刺激RAW264鼠巨噬细胞(抑制百分率)
FFW=野甘菊,PGE2=前列腺素E2,NO=氧化氮
PGE2 | NO产生 | |
0.001%-FFW | 33.0 | 16.1 |
0.01%-FFW | 78.0 | 58.4 |
0.1%-FFW | 98.0 | 99.9 |
用LPS和IFMγ刺激RAW264鼠巨噬细胞(IC50μg/ml)
试验材料 | 氧化氮 | PGE2 | LD50 |
FFW | 69 | 40 | 680 |
FLAV | 89.0 | 4.0 | 250 |
PFFW | 370 | 71 | 740 |
FFW=含有0.7%银胶菊交酯的野甘菊,PFFW=含少于0.1%银胶菊交酯的去除银胶菊交酯的野甘菊,FLAV=含3%银胶菊交酯和26%flavoids的野甘菊(其中各flavenoids为分别占7%和22%flavenoid组成的tanetin和3,7,3’-三甲氧基栎草膏),PGE2=前列腺素E2,NO=氧化氮。
根据上述实验可以看到,PFFW能下调免疫反应。
实施例4.对重建表皮的评估
评估了基本不含银胶菊交酯的野甘菊对人表皮等同物释放PGE2的效应。表皮等同物(EPI200HCF)购自Mat Tek有限公司。收到后即将表皮等同物在无氢化考的松的维持培养基中37℃培养24小时。用50μl受试产物将表皮等同物预处理2小时,洗涤,培养基中加入PMA(1μg/ml)。将该等同物用维持培养基37℃培养24小时,收集培养上清液,用ELISA测定PGE2。用MTT试验评估生存力。
可以看到,野甘菊提取物和PFFW均下调PGE2的产生。
实施例5.对噁唑酮接触过敏的抑制作用
进行如下实验以测试野甘菊和基本不含银胶菊交酯的野甘菊在接触过敏试验中的效应。此试验中,评估了本发明的组合物相对氢化可的松(一种已知抑制接触过敏的类固醇)的作用。雄性CD-1小白鼠(7-9周龄)在剃光毛的腹部用3%噁唑酮丙酮玉米油溶液50μl作诱导(第0天)。第5天,在小鼠左耳背部施以2%噁唑酮丙酮溶液20μl。在噁唑酮攻击后1小时,将受试化合物以70%乙醇/30%丙二醇为赋形剂施于左耳(20μl)。右耳不作处理。噁唑酮攻击24小时后用CO2吸入处死小鼠,取下左、右耳,从每个耳朵上取下7mm组织活检并称重。计算右耳和左耳的活检组织的重量差。从抑制耳重的增加证明了化合物的抗炎效应。
噁唑酮接触过敏研究(抑制百分率)
试验材料 | 研究1 | 研究2 | 研究3 |
氢化可的松0.1% | 96.9 | 87.6 | 91.0 |
FFW0.03% | 75.4 | NT | NT |
FFW0.1% | 89.9 | 64.5 | NT |
FFW0.3% | 91.9 | NT | NT |
FFW1.0% | 94.6 | NT | NT |
PFFW0.1% | NT | 54.7 | NT |
银胶菊交酯1.0% | NT | NT | 11 |
NT=未测试
可以看到,FFW和PFFW抑制对噁唑酮的反应有效。
实施例6小鼠耳部水肿抑制模型
进行下面的实验测试野甘菊和基本不含银胶菊交酯的野甘菊在佛波醇酯(TPA)引起的水肿试验中的效应。在此试验中,评估了本发明的组合物相对氢化可的松和地塞米松(已知在此模型上显效的类固醇)的作用。使用CD-1雄性小白鼠,7-9周龄。在丙酮中制成0.005%(w/v)TPA溶液。将此TPA溶液20μl施于小鼠左耳背部。在TPA之后,立即将以70%乙醇/丙二醇赋形剂配制的受试化合物施于左耳(20μl)。右耳不作处理。让小鼠吸入CO2处死(TPA后5.5小时),剪下左右耳,从每个耳朵上取7mm活组织检样,称重。计算左右耳检样重量差。化合物的抗炎效应由抑制耳朵重量的增加来证实。
试验材料 | 研究1 | 研究2 |
氢化可的松0.1% | 96.9 | - |
地塞米松0.1% | - | 97.2 |
FFW0.1% | - | 14.7 |
FFW1% | 75.1 | - |
PFFW0.1% | - | 58.6 |
实施例7对花生四烯酸引起的耳水肿的抑制
在本体内试验模型中,将野甘菊减轻花生四烯酸所致水肿的能力与已知的环氧合酶/脂氧合酶抑制剂替泊沙林(tepoxalin)进行比较。试验用CD-1雄性小白鼠,7-9周龄。用丙酮配制20%(w/v)花生四烯酸(AA)溶液。将20μlAA施于小鼠左耳背部。在AA之后,立即将以70%乙醇/30%丙二醇赋形剂配制的受试化合物(20μl)施于左耳。右耳不作处理。在AA处理后1小时使小鼠吸入CO2处死,剪下左右耳,从每个耳朵上取7mm活组织检样,称重。计算左右耳检样重量差。化合物的抗炎效应由抑制耳朵重量的增加来证实。
对花生四烯酸引起的耳水肿的抑制
试验材料 | 抑制百分率 |
0.1%Tepoxalin | 10.84 |
1.0%Tepoxalin | 42.38 |
2.0%Tepoxalin | 61.06 |
0.1%FFW | NE |
0.3%FFW | 23.86 |
1.0%FFW | 38.73 |
实施例8人受试者局部施用去银胶菊交酯的野甘菊后对损伤引起的炎症的预防
在涉及10名志愿者的对照的人体研究中评估基本不含银胶菊交酯的野甘菊(PFFW)防止皮肤炎症的能力。此研究中,基本不含银胶菊交酯的野甘菊以0.1%和1%进行试验,并与其赋形剂和氢化可的松0.1%和1%进行比较。将受试产物施于前臂腹侧,每天两次,连续两天。用10个连续的角质层撕条引起红斑。在撕条前和撕条后0.5、1、1.5和2小时进行比色测定。计算每个时间点的比色红斑指数(CEI),共2小时,并与赋形剂比较,得到如下红斑降低值。
试验材料 | 红斑的减轻(%) |
0.1%氢化可的松 | 10 |
1%氢化可的松 | 19 |
0.1%PFFW | 22 |
1%PFFW | 35 |
这些结果表明,基本不含银胶菊交酯的野甘菊在人体上有效地防止损伤引起的炎症,并具有与等浓度氢化可的松可比的活性。
实施例9人受试者局部施用去银胶菊交酯的野甘菊后对UVB引起的炎症的预防
在涉及10名志愿者的对照的人体研究中评估去除银胶菊交酯的野甘菊(PFFW)预防皮肤炎症的能力。此研究中,将PFFW以0.1%和1%进行试验,并与其赋形剂和氢化可的松0.1%和1%进行比较。将受试产物施于前臂腹侧5个不同的部位,每天两次,连续两天(2mg/cm2)。将这些部位暴露于2MED UVB。在辐照前和辐照后18、24、42和48小时进行比色测定。计算每个时间点的比色红斑指数(CEI),得到如下红斑降低值。
试验材料 | 红斑的减轻(%) |
0.1%氢化可的松 | 2.5 |
1%氢化可的松 | 5.7 |
0.1%PFFW | -3.5 |
1%PFFW | 24.9 |
这些结果表明,不含银胶菊交酯的野甘菊在人体上有效地防止UV引起的炎症。
实施例10人受试者局部施用基本上不含银胶菊交酯的野甘菊后对损伤引起的炎症的治疗
在涉及10名志愿者的对照的人体研究中评估基本不含银胶菊交酯的野甘菊(PFFW)防止皮肤炎症的能力。此研究中,PFFW以0.1%和1%进行试验,并与其赋形剂和氢化可的松0.1%和1%进行比较。用10个连续的角质层撕条引起红斑。撕条后立即将受试产物施于前臂腹侧2小时。在撕条前和撕条后0.5、1、1.5和2小时进行比色测定。计算每个时间点的比色红斑指数(CEI),共2小时,并与赋形剂比较,得到如下红斑降低值。
试验材料 | 红斑的减轻(%) |
0.1%氢化可的松 | -3 |
1%氢化可的松 | 14 |
0.1%PFFW | -35 |
1%PFFW | 13 |
这些结果表明,基本不含银胶菊交酯的野甘菊较高剂量在人体能中等度防止损伤引起的炎症,并具有与等浓度氢化可的松可比的活性。
实施例11人受试者局部施用去银胶菊交酯的野甘菊后对UVB引起的炎症的治疗
在涉及10名志愿者的对照的人体研究中评估基本不含银胶菊交酯的野甘菊(PFFW)治疗皮肤炎症的能力。此研究中,PFFW以0.1%和1%进行试验,并与其赋形剂和氢化可的松0.1%和1%进行比较。10名健康志愿者在前臂掌侧5个不同点用2MED UV光辐照。辐照后立即及5小时和8小时后,将受试产物施于辐照部位(2mg/cm2)。辐照前和辐照后1、4、7和24小时测量红斑计分,得到如下红斑降低值。
试验材料 | 红斑的减轻(%) |
0.1%氢化可的松 | 3.2 |
1%氢化可的松 | 17.7 |
0.1%PFFW | 8.6 |
1%PFFW | 18.7 |
这些结果表明,去除银胶菊交酯的野甘菊在人体能有效地治疗UV引起的炎症。
实施例12举例说明本发明的皮肤护理组合物。该组合物可用常规方法加工。它们适合于美容用途。特别是,该组合物适合于预防和治疗炎症性疾病和有关病症的应用,例如(但不限于)接触性皮炎、水肿、损伤引起的炎症和UVB引起的炎症,以及适用于健康皮肤以预防或延缓其炎症。实施例12本实施例举例说明本发明的水包油组合物。
成分 | %WT/WT |
甘油,u.s.p.99.5% | 2.00 |
尿囊素 | 0.55 |
聚二甲基硅氧烷 | 1.25 |
丙二醇 | 4.00 |
去除银胶菊交酯的野甘菊 | 1.00 |
己二醇 | 2.00 |
Distearyldimonium chloride | 5.00 |
鲸蜡醇 | 2.50 |
矿脂,u.s.p. | 4.00 |
棕榈酸异丙酯 | 3.00 |
戊二醇 | 4.00 |
苄醇 | 0.60 |
纯水,u.s.p. | 70.1 |
Claims (10)
1.治疗和预防炎症性疾病和有关病症的方法,其特征在于:将包含有效量野甘菊提取物的局部用组合物施用于患者。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述炎症性疾病或有关的病症是皮肤疾病或有关的病症。
3.如权利要求1所述的方法,其中所述提取物基本上不含α-不饱和γ-内酯。
4.如权利要求1所述的方法,其中所述提取物基本上不含α-不饱和γ-内酯,所述炎症性疾病或有关的病症是皮肤疾病或有关的病症。
5.如权利要求3所述的方法,其中所述α-不饱和γ-内酯是银胶菊交酯。
6.如权利要求3所述的方法,其中所述提取物的所述有效量是约0.005%至10%。
7.如权利要求6所述的方法,其中所述提取物中银胶菊交酯的浓度约为0-0.2%。
8.如权利要求4所述的方法,其中所述提取物还包含类黄烷化合物。
9.用于治疗和预防炎症性疾病和有关病症的局部用组合物,包含有效量野甘菊提取物和药学上可接受的赋形剂。
10.如权利要求8所述的组合物,其中所述提取物基本上不含α-不饱和γ-内酯。
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